Estudos sobre os fatores envolvidos na adaptação das plantas micropropagadas ao ambiente ex vitro são imprescindíveis para definir quais os procedimentos devem ser utilizados durante a fase de aclimatização. O objetivo deste trabalho foi avaliar a contribuição da densidade estomática e da presença de cera epicuticular no controle da perda de água, em folhas de bananeiras micropropagadas. Para tanto, brotações axilares oriundas da etapa de multiplicação in vitro foram enraizadas por 24 dias, em meio MS, contendo 1mg L-1 de ácido naftalenoacético (ANA) e 6g L-1 de ágar e, posteriormente, foram aclimatizadas por 120 dias. Os tratamentos consistiram de folhas formadas in vitro e em diferentes estádios de aclimatização, tais como: T1 - folhas de plantas ao final da fase de enraizamento in vitro; T2 - folhas persistentes de plantas aos 30 dias de aclimatização; T3 - novas folhas de plantas aos 30 dias de aclimatização (folhas de transição); T4 - folhas de transição de plantas aclimatizadas por 60 dias; T5 e T6 - novas folhas de plantas aclimatizadas por 60 dias e 120 dias, respectivamente. Foram avaliados os seguintes parâmetros: a densidade estomática, o conteúdo relativo de água e a presença de cera epicuticular. Foi verificado que folhas de plantas provenientes da fase de enraizamento in vitro, em ambiente mixotrófico, apresentam reduzido controle sobre a perda de água e alta densidade estomática. A reduzida transpiração das folhas formadas na fase de aclimatização pode ser atribuída ao menor número de estômatos por unidade de área foliar, à maior capacidade destes em restringir a perda de água e à presença de cera epicuticular.

Studies concerning factors involved in the adaptation of micropropagated plants to ex vitro conditions are indispensable to define which procedures should be used during the acclimatization phase. The objective of this research was to evaluate the presence of stomata and epicuticular wax on water loss control in micropropagated banana plants. For 24 days axillary buds were rooted in MS medium supplemented with NAA (1mg L-1) and agar (6g L-1), and afterwards the plantlets were acclimatized for 120 days. The treatments consisted of the evaluation of in vitro leaves and at different acclimatization stages, as follows: T1 - leaves of plants at the end of the in vitro rooting phase T2 - persistent leaves of plants after 30 days of acclimatization; T3 - new leaves from plants after 30 days of acclimatization (transition leaves); T4 - transition leaves from plants after 60 days of acclimatization; T5 and T6 - new leaves from plants after 60 and 120 days of acclimatization, respectively. Data regarding stomatal density, relative water content and presence of epicuticular wax were also evaluated. It was verified that new leaves from plants rooted in vitro under mixotrophic condition presented hight stomatal density and hence a reduced control of water loss. The reduced transpiration of leaves formed during the acclimatization phase can be attributed to the small number of stomata per unit of leaf area associated to the largest capacity of these in restricting water loss, and the presence of epicuticular wax.

Pesquisas acerca do uso da luz natural associado a alterações nos níveis de sacarose têm apresentado potencial para promover a rustificação in vitro de espécies de clima tropical bem como reduzir os custos de produção. Todavia, pouco se conhece sobre as modificações fisiológicas e estruturais ocasionadas. Avaliaram-se o comportamento fisiológico, anatômico e a sobrevivência ex vitro de bananeiras micropropagadas em resposta às condições de cultivo, na fase de enraizamento in vitro. Para isso, brotações axilares da cultivar Caipira foram cultivadas em meio MS, adicionado de ANA (1 mg L-1) e agar (6 g L-1), onde foram aplicados os seguintes tratamentos: duas concentrações de sacarose (15 g L-1e 30 g L-1) e dois ambientes de cultivo (Luz natural - casa de vegetação e Luz artificial - sala de crescimento). Ao final de 45 dias, foram avaliados os teores de clorofila a, b e total, conteúdo relativo de água nos tecidos, características anatômicas e a sobrevivência ex vitro. Houve efeito do ambiente de cultivo e concentrações de sacarose sobre a anatomia, fisiologia e sobrevivência de plantas de bananeira 'Caipira' micropropagada. O enraizamento in vitro das brotações sob luz natural e meio contendo 15 g L-1 ou 30 g L-1 de sacarose promove como principais alterações o aumento na espessura dos parênquimas paliçádico e esponjoso, bem como reduz a perda de água foliar e morte de plantas. Os resultados alcançados no presente estudo confirmam o potencial da luz natural em substituir a iluminação artificial para a micropropagação de espécies tropicais.

Research about the use of natural light associated to changes in sucrose levels demonstrated potential in promoting in vitro hardiness of tropical climate species, as well as reducing production costs. However, little is known about physiological and structural changes that happen in the process. This study evaluated the physiological and anatomic performance, and ex vitro survival of micropropagated banana plants in response to cultivation conditions, in the stage of in vitro rooting. Shoots of the 'Caipira' cultivar were cultivated in MS medium, supplemented with 1 mg L-1 NAA and 6 g L-1 agar, in which the following treatments were applied: two sucrose concentrations (15 g L-1 or 30 g L-1) and two cultivation conditions (Natural light - greenhouse and Artificial light - growth chamber). At the end of 45 days, the contents of chlorophyll a, b and total, the relative water content in the tissues, anatomic characteristics and the ex vitro survival were evaluated. Effects of growth environment and sucrose concentration were observed on micropropagated 'Caipira' banana anatomy, physiology and survival. In vitro rooting of the shoots under natural light in the medium containing 15 g L-1 or 30 g L-1 sucrose promoted major alteration in the increase of palisade and spongy parenchyma, as well as reducing leaf water loss and plant death. The results obtained in the present study confirm the potential of the use of natural light as a substitute for artificial light for micropropagation of tropical species.

Pesquisas acerca das modificações estruturais e fisiológicas inerentes ao processo de micropropagação são fundamentais para compreender os efeitos desta técnica, desenvolver protocolos mais eficientes e, sobretudo, reduzir perdas ex vitro. O objetivo neste trabalho foi avaliar e quantificar as modificações na anatomia foliar de bananeiras provenientes de micropropagação, durante a fase de aclimatização em casa de vegetação. Para tanto, brotações axilares de bananeira cv. Japira, provenientes da multiplicação in vitro, foram enraizadas em meio MS, acrescido de ANA (1mg L-1) e ágar (6g L-1), e mantidas à temperatura de 25°C±2°C e 16 horas de irradiância a 35µmol m-2 s-1, por 35 dias. Posteriormente, as plantas foram submetidas a diferentes períodos de aclimatização (zero, 21, 42, 63, 84 e 120 dias) e avaliadas quanto à anatomia, por meio de seções transversais e paradérmicas foliares. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado. Verificou-se que as maiores alterações anatômicas ocorrem após 42 dias do transplantio ex vitro, com acentuado espessamento dos parênquimas clorofilianos e limbo foliar, bem como diferenciação da maioria dos tecidos. Quanto aos estômatos, estes estão distribuídos em ambas às faces da epiderme, com maior número na face abaxial e em folhas oriundas de primórdios foliares formados in vitro.

Researches about structural and physiological modifications in different stages of the micropropagation are fundamental to understand the effects of this technology to improve protocols and to reduce losses in the acclimatization. The objective of this study was to assess and to quantify the variations in the foliar anatomy of micropropagated banana plants during the ex vitro acclimatization in greenhouse. Thus, axillary buds from in vitro multiplication of Japira cultivar, were rooted in MS medium, added of NAA (1mg L-1) and agar (6g L-1), and kept at room temperature (25°C ±2°C) under 16 hours photoperiod and irradiation of 35µmol m-2 s-1, for 35 days. Subsequently, the plants were submitted to different acclimatization periods (zero, 21, 42, 63, 84 e 120 days) being the leaf anatomy of the plants evaluated by transversal and paradermal sections. A completely randomized design was used. The largest anatomical alterations it were verified after 42 days of the transplantation to ex vitro conditions, with pronounced thickness of chlorophyllian parenchyma and leaf blade, as well, as the differentiation of the majority of foliar tissues. The stomata were distributed on both sides of the leaves, with higher number on the undersurface and on leaves formed from in vitro foliar primordia.

A realização de pesquisas que possibilitem redução dos custos de produção e ou melhoria na qualidade das mudas micropropagadas tem sido imprescindível para possibilitar a utilização e difusão deste tipo de material propagativo. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência de alterações no ambiente de cultivo sobre o crescimento e anatomia de bananeiras na fase de alongamento/enraizamento in vitro. Para tanto, brotações axilares das cultivares Caipira e Pacovan foram cultivadas em meio MS contendo ANA (1 mg L-1) e agar (6 g L-1), onde foram aplicados os tratamentos. Os tratamentos consistiram de concentrações de sacarose (15 g L-1 e 30 g L-1) e ambientes de cultivo (Natural - casa de vegetação e Artificial - sala de crescimento). No fim de 45 dias, foram determinadas características de crescimento e de anatomia foliar. Houve influência significativa das alterações no ambiente de cultivo in vitro sobre as características avaliadas. Verificou-se que o uso da luz natural associada a 15 g L-1 de sacarose para a cultivar Caipira e 30 g L-1 para a Pacovan pode ser utilizada satisfatoriamente na fase de alongamento/enraizamento in vitro. Maior espessamento dos parênquimas clorofilianos e incremento na densidade estomática são induzidos em ambiente natural. A luz natural como alternativa às lâmapadas fluorescentes, no alongamento/enraizamento in vitro, representa potencial para reduzir os custos de produção e promover melhorias na anatomia foliar das mudas micropropagadas.

Initiatives aiming at to reduce production costs and to improve the quality of plantlets are necessary in order to turn micropropagation commercially more feasible. The objective of this work was to evaluate the influence of the environment on the growth and leaf anatomy of banana plantlets during in vitro elongating/rooting phase. Shoots of Caipira and Pacovan cultivars were cultivated in MS medium, supplemented with NAA (1 mg L-1) and agar (6 g L-1), submitted to sucrose concentrations of 15 g L-1 or 30 g L-1 under natural light of greenhouse or artificial light of growth chamber. Investigations on growth and leaf anatomy were carried out after 45 days. It was observed that natural light and 15 g L-1 sucrose for 'Caipira' or 30 g L-1 for Pacovan cultivars promote thicker of chlorophyllian parenchyma and increased stomatal density. Natural light as an alternative to fluorescent bulbs during the in vitro elongating/rooting phase reduces the production costs and improve anatomical charachteristics of leaves of micropropagated banana plants.

Para laboratórios que produzem milhares de plantas micropropagadas regularmente, a otimização da fase de aclimatização é de fundamental importância para evitar perdas excessivas de plantas, bem como favorecer seu crescimento. O trabalho teve por objetivo avaliar o crescimento de mudas micropropagadas de bananeira na aclimatização, sob a influência de diferentes substratos e recipientes, nas condições da Amazônia Sul-Ocidental. Após o sexto subcultivo, brotações de bananeira, cv. Grand Naine (AAA), foram enraizadas em meio MS básico sendo, posteriormente, transferidas para viveiro onde foram plantadas em tubetes de 115 cm³ e 180 cm³ preenchidos com seis diferentes substratos, formulados a partir da combinação de terra de encosta, esterco bovino e casca de arroz carbonizada. Avaliações sobre sobrevivência, altura da parte aérea e diâmetro do pseudocaule foram realizadas quinzenalmente, sendo que, ao final de 75 dias, também foi determinada a massa fresca e seca das plantas. Observou-se que a sobrevivência das plantas não foi influenciada pelo uso de tubetes de 115 cm³ ou 180 cm³, no entanto, plantas aclimatizadas em tubetes de 180 cm³ apresentam maior crescimento em altura e diâmetro do pseudocaule e, conseqüentemente, maior acúmulo de massa fresca e seca das partes aérea e raízes, durante a aclimatização, quando comparados aos tubetes com 115 cm³ de capacidade. Entre os substratos, verificou-se que aqueles que continham esterco bovino na sua composição, proporcionaram resultados superiores quando comparados aos demais substratos testados para todas as variáveis analisadas, sendo este, portanto, um importante componente no desenvolvimento das plantas durante a fase de aclimatização.

For laboratories that produce thousands of micropropagated plants regularly, the optimization of the acclimatization phase is of fundamental importance to avoid excessive losses and to promote the development of the plants. The aim of this work was to evaluate the growth of micropropagated banana plantlets during the acclimatization under the influence of different substrates and recipients on conditions of South West Amazon. Shoots of banana, cv. Grand Naine, were rooted in MS medium, being the rooting plants transferred to a nursery, in two types of plastic dibble tubes (115 cm³ and 180 cm³) and six different substrates formulated from different portions of soil, carbonized rice hulls and bovine manure. Evaluations of plant survival, height of the aerial part and pseudostem diameter were carried out each fifteen days, and at the end of 75 days, fresh and dry mass for the roots and aerial parts of the plants were also determined. It was verified that the plant survival was not influenced by the use of the 115 cm³ or 180 cm³ plastic dibble tubes. However, acclimatization accomplished in the 180 cm³ plastic dibble tubes provided larger growth in height and pseudostem diameter of the plants and, consequently, larger accumulation of fresh and dry mass of roots and aerial parts, when compared to the 115 cm³ plastic dibble tubes. Among the substrates, it was observed that bovine manure was fundamental as substrate component to obtain the best results.

O trabalho objetivou avaliar a influência do tempo de permanência em meio de enraizamento sobre o crescimento in vitro e ex vitro de plantas de bananeira. Como explantes, foram utilizadas brotações axilares provenientes do estabelecimento e multiplicação in vitro de ápices caulinares das cultivares Caipira (AAA), Preciosa (AAAB) e Japira (AAAB). Para o enraizamento, empregou-se o meio MS reduzido a 50% da concentração de sais, adicionado de 30 g.L-1 de sacarose, 1 mg.L-1 de AIB e 6 g.L-1 de ágar. Os tratamentos foram dispostos em esquema fatorial 3x4, com três cultivares (Caipira, Preciosa e Japira) e quatro períodos de enraizamento in vitro (7; 14; 21 e 28 dias), num total de 12 tratamentos. Ao final de cada período, a altura da parte aérea, o número e o comprimento de raízes foram avaliados, e as plantas, submetidas ao processo de aclimatização por 90 dias. Após esse período, as plantas foram avaliadas quanto à sobrevivência, número e comprimento de raízes, diâmetro do pseudocaule e massa seca de raízes, parte aérea e total. De modo geral, observou-se que a fase de indução de raízes nas brotações de bananeira in vitro ocorreu até os 14 dias de cultivo em meio de enraizamento, havendo apenas crescimento em tamanho das raízes após esse período. Entre as cultivares, verificou-se que, com exceção do diâmetro de pseudocaule, a cultivar Caipira apresentou crescimento vegetativo in vitro e durante a aclimatização (altura de plantas, número e comprimento de raízes e massa seca da parte aérea, raízes e total) superior às cultivares Preciosa e Japira. Após 21 dias de permanência em meio de enraizamento, a taxa de sobrevivência das plantas, observada em casa de vegetação, alcançou 100%, independentemente da cultivar testada.

The objective of the present study was to assess the influence of the exposition time to rooting medium on the in vitro and ex vitro growth of banana plants. As explants, new axillaries buds obtained from the in vitro establishment and multiplication of stem apices of Caipira (AAA), Preciosa (AAAB) and Japira (AAAB) cultivars were used. The MS medium with reduction to 50% of the salt concentration adding 30 g.L-1 of sucrose, 1 mg.L-1 of IBA, and 6 g.L-1 of agar was used to induce rooting. The treatments were analyzed in a 3x4 factorial design, with three cultivars (Caipira, Preciosa and Japira) and four in vitro rooting periods (7, 14, 21 and 28 days), given a total of 12 treatments. At the end of each period, the height of the aerial portion, and number and length of roots were assessed, and the plants were submitted to 90 days of acclimatization. After that, the survival, number and length of roots, pseudostem diameter, and dry weight of the roots, aerial and total portions of the plants were assessed. Generally, the root induction step in the in vitro banana budding occurred up to 14 days of cultivation in rooting medium, and after that, the roots grew only in length. Among the cultivars, it was verified that, with the exception of the pseudostem diameter, the Caipira cultivar showed superior in vitro vegetative growth, and during the acclimatization, the height of the plant, number and length of the roots, and dry mass of the aerial, roots, and total parts, were also superior to the observed in Preciosa and Japira cultivars. After 21 days on rooting medium, the survival rate of the plants in greenhouse reach 100%, in despite of the tested cultivar.

A pimenta-longa (Piper hispidinervum C. DC.) é um arbusto da família Piperaceae, nativa da região amazônica, que vem despertando o interesse das indústrias de cosméticos e bioinseticidas pelo alto teor de safrol, óleo essencial extraído das folhas e talos. O objetivo do trabalho foi avaliar a influência de características físicas e nutricionais da matriz de encapsulamento durante a produção de sementes sintéticas de pimenta-longa. Sementes germinadas de pimenta-longa foram utilizadas como material de encapsulamento. Em ambos os experimentos, a influência da constituição (água ou meio Murashige e Skoog) e consistência da cápsula (alginato de sódio 1% ou 2%) e do tempo de complexação (10, 20 e 30 min) em CaCl2, na abertura das cápsulas, foi avaliada. Depois de encapsulados, os materiais foram transferidos para frascos com meio de MS e mantidos em sala de crescimento, onde, quinzenalmente, foi avaliada a taxa de emergência e crescimento das plântulas encapsuladas. Verificou-se que o emprego de um endosperma artificial composto por 1% de alginato de sódio em meio de MS foi o tratamento que promoveu os melhores resultados para a emergência e posterior crescimento de plântulas oriundas de sementes sintéticas aos 30 dias da semeadura em meio MS sólido, independentemente do tempo de complexação utilizado.

Long pepper (Piper hispidinervum C. DC.) is a shrub of the Piperaceae family, native of the Amazonian region, with special interest of cosmetics and bio-insecticide industries due to its high concentration of safrol, an essential oil extracted from the leaves and stems. This work aimed to evaluate the physical and nutritional characteristics of the encapsulation matrix during the production of synthetic seeds of long pepper. Germinated long pepper seeds were used as vegetative material for encapsulation. For both experiments, the influence of capsule composition (water or MS) and consistency (sodium alginate at 1% or 2%), complexation time in CaCl2 (10, 20 and 30 minutes) and opening of the capsules were evaluated. After encapsulation, the materials were transferred to flasks with MS medium and maintained in a growth room, where the germination and growth rates of the encapsulated plantlets were evaluated every two weeks. We verified that the use of an artificial endosperm composed by 1% of sodium alginate in MS medium promoted the best results for the conversion and further growth of plants originated from synthetic seeds after 30 days of culture in solid MS medium, independently of the complexation time used.

Com este trabalho, objetivou-se avaliar a ação do ágar e sua substituição parcial e total pelo amido de mandioca na composição de meios de cultura de bananeira e abacaxizeiro. Gemas axilares de abacaxizeiro, cvs. Rio Branco e Quinari foram estabelecidas e avaliadas por quatro subcultivos quanto à multiplicação em meio de MS, suplementado com 2 mg.L-1 de BAP e 0,25 mg.L-1 de ANA, e os seguintes tratamentos: M1: ágar (5 g.L-1), M2: ágar (2,5 g.L-1) + fécula de mandioca (60 g.L-1), M3: fécula de mandioca (60 g.L-1), e M4: ágar (2,5 g.L-1) + fécula de mandioca (30 g.L-1). Num segundo experimento, por três subcultivos sucessivos brotações de bananeira da cv. Grand Naine foram avaliadas quanto à multiplicação em meio de cultura composto por: MM1: ágar (6 g.L-1) ; MM2: ágar (3 g.L-1) + fécula de mandioca (30 g.L-1); MM3: fécula de mandioca (60 g.L-1) e; MM4: meio de consistência líquida estacionário.Estes meios foram suplementados com 0, 2, 4 e 6 mg.L-1 de BAP. Para o abacaxizeiro, verificou-se quea substituição total do ágar pela fécula proporcionou resultados similares aos obtidos com o tratamento com ágar. Na combinação ágar + fécula os resultados foram inferiores aos obtidos com os solidificantes usados isoladamente. Para a bananeira, o uso isolado ou combinado da fécula com ágar não proporcionou melhora nas taxas de multiplicação. Os melhores resultados foram obtidos em meio com ágar e 2 mg.L-1 de BAP. O cultivo em meio líquido apresentou o menor índice de multiplicação.

The objective of this work was to test the agar action and its partial and total substitution for cassava starch as gelling agents in the culture media of banana and pineapple. Axillary buds of 'Rio Branco' and 'Quinari' cultivars were established and the multiplication rate evaluated by four subcultives in media with 2 mg.L-1 BAP and 0,25 mg.L-1 NAA, with the following combination of gelling agents: M1: agar (5 g.L-1), M2: agar (2,5 g.L-1) + cassava starch (60 g.L-1), M3: cassava starch (60 g.L-1), and M4: agar (2,5 g.L-1) + cassava starch (30 g.L-1). In a second experiment, for three successive subcultivation shoots of banana, 'Grand Naine' cultivar were evaluated in media composed with the following gelling treatments: MM1: agar (6 g.L-1); MM2: agar (3 g.L-1) + cassava starch (30 g.L-1); MM3: cassava starch (60 g.L-1) and; MM4: stationary liquid medium. To these media were added 0, 2, 4 and 6 mg.L-1 BA. To pineapple it was verified similar results when agar was completely substituted for cassava starch as gelling agent, but the combination agar + cassava starch provided the worse results when compared with gelling agents used separately. For banana shoots multiplication, the isolated or combined use of cassava starch did not improve the multiplication rates. The best results were obtained in medium with 2 mg.L-1 BA and agar as gelling agent. The shoot cultivation in liquid medium presented the lowest multiplication index.

O carvão ativado possui a propriedade de adsorver os compostos fenólicos liberados pela oxidação dos tecidos lesionados durante o cultivo in vitro. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da interação entre o carvão ativado e diferentes concentrações de N6-benzilaminopurina (BAP) na multiplicação in vitro da bananeira, cv. Grande Naine (AAA). O meio de cultura utilizado foi o MS, solidificado com 5 g.L-1 de ágar. O cultivo foi mantido em sala de crescimento a 25±2ºC, fotoperíodo de 16 horas e intensidade luminosa de 30 mmol.m-2s-1. Foram avaliadas a presença e a ausência de carvão ativado (0 e 3 g.L-1) e quatro concentrações de BAP (0; 2; 4 e 6 mg.L-1) no meio de cultura. O delineamento foi inteiramente casualizado, com cinco repetições, em um sistema fatorial 2x4. Os explantes foram avaliados a cada 30 dias, por um período de quatro subcultivos. Após cada subcultivo, o comprimento de brotações, a taxa de multiplicação, o vigor, o nível de oxidação das brotações emitidas e o número de raízes formadas foram avaliados. Independentemente das concentrações de BAP, o carvão ativado influenciou significativamente em todas as variáveis analisadas. De maneira geral, a adição de carvão ativado afetou negativamente a taxa de multiplicação, embora tenha melhorado o vigor e o número de raízes e diminuído a oxidação dos explantes. Na ausência de carvão ativado, o BAP proporcionou as maiores taxas de multiplicação das brotações.

Active charcoal has the capacity to fix phenolic compounds released by the oxidation of manipulated tissues during in vitro cultivation. The present work objective was to evaluate the interaction effects between active charcoal, combined to different BAP concentrations in the in vitro banana propagation, cv. Grand Nain (AAA). The culture medium used was the MS, solidified with 5 g.L-1 agar. Cultures were kept in a growth room at 25 ± 2ºC with a photoperiod of 16 h at 30 mmol.m-2s-1. It was evaluated the presence and the absence of active charcoal (0 and 3 g.L-1) and different concentrations of BAP (0, 2, 4 and 6 mg.L-1) in the culture medium of four subcultures at four-week intervals. The experimental design was completely randomized in a 2x4 factorial scheme, and five replicas. After each subculture shoot height, multiplication rate, vigor, oxidation level and number of roots per shoot were evaluated. Independently of BAP concentrations, active charcoal had influenced significantly on the results. In general, the addition of active charcoal affected negatively the multiplication rate, while it improved the vigor, root number and decreased the oxidation level of the shoots. In the absence of activated charcoal, BAP provided larger multiplication rates of shoots.

Com o presente trabalho objetivou-se avaliar a influência de concentrações de sacarose e a idade fisiológica da semente na germinação in vitro de embriões zigóticos de murmuru. Frutos em dois estágios de desenvolvimento coletados de plantas do campo tiveram os embriões excisados, desinfestados e inoculados em meio de cultura de MS com 75% das concentrações de sais, suplementado com 2,5 g.L-1 de ácido giberélico e diferentes concentrações de sacarose: 15, 30 e 45 g.L-1. Em sala de crescimento, o material foi mantido por 30 dias no escuro, sendo transferido em seguida para condições luminosas de 30 me.m-2.s-1, temperatura de 25±2ºC e fotoperíodo de 16 horas para completo desenvolvimento. O delineamento estatístico utilizado foi inteiramente casualizado em arranjo fatorial 2 x 3, com seis repetições e cinco embriões por parcela. Após 30 dias foi avaliada a porcentagem de germinação e altura das plântulas. Verificou-se que embriões provenientes de frutos imaturos apresentaram maior porcentagem de germinação, sendo a concentração de 30 g.L-1 de sacarosea que proporcionou os melhores resultados dentre as demais testadas. Embriões provenientes de frutos maduros apresentaram altura de plântulas significativamente maior aos imaturos e também para essa variável, a concentração de 30 g.L-1 de sacarose foi a que proporcionou os melhores resultados.

The work aimed to evaluate the influence of sucrose concentrations and seed physiologic age on the in vitro germination of murmuru zygotic embryos. Fruits collected from field plants in two development stages had the embryos excised, desinfected and inoculated onto MS medium with 75% salts, 2.5 g.L-1 of giberelic acid and different sucrose concentrations: 15, 30 and 45 g.L-1. All cultures were kept for 30 days in the dark at 25±2ºC, being transferred afterwards to a growth chamber with 30 mmol.m-2s-1 of radiation and 16 hours photoperiod for complete development. The statistical design was a 2x3 factorial, with six repetitions and five embryos by experimental unit. After 30 days it was evaluated the germination percentage and plantlets height. It was verified that embryos from immature fruits presented higher germination percentage and the sucrose concentration of 30 g.L-1 was the one that provided the best results among the others tested. Embryos from mature fruits gave rise to plantlets with average height significantly greater than that of plantlets from immature fruits and 30 g.L-1 of sucrose was the concentration that provided the best results.

Estudou-se a influência da consistência do meio de cultura sobre a organogênese de ápices meristemáticos de batata nas etapas de isolamento e multiplicação in vitro, das cultivares Baronesa, Eliza e Pérola. Para o cultivo utilizaram-se tubos de ensaio (20 x 150 mm) contendo 5 ml de meio de cultura de isolamento (sais de MS, 30g.L-1 sacarose, 1,0 mg.L-1 BAP, 0,01mg.L-1 ANA, 0,1 mg.L-1 AG3) de consistência semi-sólida (6g.L-1 de ágar) ou líquida. Ao meio de cultura semi-sólido acrescentou-se ainda 300 mg.L-1 de carvão ativado. Como suporte dos meristemas em meio líquido, foram introduzidas fitas de papel filtro em forma de "U" invertido. Após 30 dias em meio de isolamento, os meristemas diferenciados foram transferidos para meio de multiplicação (sais de MS, 1,0 mg.L-1 de tiamina, 5,0 mg.L-1 de ácido pantotênico, 0,25 mg.L-1 de AG3 e 20 g.L-1 de sacarose) semi-sólido e líquido, onde permaneceram por mais 21 dias. O desenvolvimento dos meristemas em meio de multiplicação de consistência líquida proporcionou brotações com altura, pelo menos, quatro vezes superior àquelas desenvolvidas em meio semi-sólido. A taxa de multiplicação obtida em meio líquido foi 1,6 e 3,6 vezes superior ao meio semi-sólido quando os meristemas diferenciaram-se em meio de isolamento líquido e semi-sólido, respectivamente. Houve formação indesejável de calo na base dos meristemas desenvolvidos em meio de isolamento líquido, o que proporcionou maior número de brotações regeneradas nestes meristemas. A diferenciação de meristemas de batata em meio de isolamento semi-sólido por 30 dias, seguida do cultivo em meio líquido sob agitação por mais 21 dias, promove melhoria nas taxas de crescimento e multiplicação dos meristemas.

The effect of the culture media consistency on the organogenesis of potato meristem tips was evaluated on the in vitro isolation and multiplication stages from cultivars Baronesa, Eliza and Perola. The meristems were inoculated in liquid and semi-solid consistency isolation culture media. Meristems were cultivated in test tubes (20 x 150 mm) containing 5 ml semi-solid (6g L-1 agar) and liquid culture media (MS salts, 30g L-1 sucrose, 1.0 mg L-1 BA, 0.01mg L-1 NAA, 0.1 mg L-1 GA3). To the semi-solid media we added 300 mg L-1 of activated charcoal. As support for the meristems in liquid medium inverted "U" ribbon papers were used. After 30 days in the isolation medium, the differentiated meristems were transferred to liquid and semi-solid multiplication medium (MS salts, thiamine 1.0 mg L-1, panthotenic acid 5.0 mg L-1, GA3 0.25 mg L-1 and sucrose 20 g L-1) where they remained for a further 21 days. Meristem inoculation in the liquid multiplication medium presented at least four times higher shoots than those formed in semi-solid medium. The multiplication rate obtained in liquid culture medium was 1.6 and 3.6 times higher than in semi-solid medium when the meristems were differentiated in liquid and semi-solid media, respectively. Undesirable callus formation was observed on the basis of meristems developed in liquid medium, providing larger number of regenerated shoots from these meristems. The differentiation of potato meristems in semi-solid culture medium for 30 days followed by the cultivation in liquid media under agitation for 21 days, improved the growth and multiplication rates of potato meristems.

O uso de estacas de batata a partir de plantas multiplicadas in vitro pode transformar-se em técnica bastante eficiente para melhorar a taxa de multiplicação de material com alta qualidade fitossanitária. O trabalho objetivou estabelecer um protocolo para a produção de mudas pré-básicas por estaquia a partir de microestacas obtidas de plantas de batata recém aclimatizadas e oriundas da micropropagação. Em dois experimentos, foram estudados os efeitos do tipo de material propagativo (basal, mediano e apical), do tempo de exposição das microestacas (zero e um minuto) a seis diferentes concentrações de AIB (0; 250; 500; 750 e 1000 mg L-1), do período de aclimatização das plantas (15 e 30 dias) e do tipo de substrato (areia e vermiculita) na produção de mudas pré-básicas de batata. Verificou-se que microestacas das três posições apresentaram taxas de enraizamento superiores a 90% quando a coleta foi realizada em plantas de batata com 15 dias de aclimatização, seguido do tratamento de imersão rápida em solução de AIB na concentração de 500 mg L-1 e utilizando-se areia ou vermiculita como substrato.

The use of cuttings from micropropagated potato plants can become an efficient technique to improve the multiplication rate of potato genotypes of high genetic quality and sanitary level. A protocol for the production of pre-basic potato material by microcuttings, obtained from plants with a short period of acclimatization, was established. The influence of cutting position (basal, medium and apical), the collection period (15 and 30 days), the immersion time (zero and one minute) in different IBA concentrations (0; 250; 500; 750 and 1000 mg L-1), and substrate types (sand and vermiculite) were analyzed in two experiments. Basal, medium and apical microcutting position presented rooting rates up to 90% when collected from 15 days acclimatization potato plants followed by treatment through fast immersion in IBA solution at 500 mg L-1 and in sand or vermiculite as substrate.

O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos fitotóxicos de antibióticos no crescimento e na taxa de multiplicação in vitro da batata. Brotações da cultivar Baronesa foram cultivadas em meio de multiplicação de consistência semi-sólida e líquida. O meio de multiplicação foi formado pelos sais e vitaminas de MS ao qual adicionou-se um dos seguintes antibióticos: ampicilina, cloranfenicol, estreptomicina e tetraciclina, previamente selecionados em razão da ação bactericida sobre contaminantes da cultura, nas concentrações de 0, 32, 64, 128, 256, 512 e 1.024 mg L-1. Por 21 dias os materiais foram mantidos em sala de crescimento a 25±2°C, 16 horas de luz e fluxo de radiação de 35 µmol m-2 s-1. Nos tratamentos em que se utilizou meio de cultura líquido, os frascos foram mantidos sob constante agitação em mesa agitadora do tipo orbital. A ampicilina foi o único antibiótico que não afetou a sobrevivência e o desenvolvimento dos explantes de batata em meio de multiplicação, podendo ser indicada para trabalhos de descontaminação in vitro dessa espécie. O aumento das concentrações de cloranfenicol, estreptomicina e tetraciclina no meio de cultura apresentou efeitos fitotóxicos severos sobre o crescimento e taxa de multiplicação do material vegetal.

The objective of this work was to evaluate the effects of antibiotics on the in vitro growth and multiplication rate of potato. Potato explants, cv. Baronesa, were cultivated in semi-solid and liquid multiplication culture medium. The medium was formed by MS salts, vitamins and one of the following antibiotics: ampicillin, chloramphenicol, streptomycin or tetracycline, previously selected by the bactericidal action on some culture contaminants, at 0, 32, 64, 128, 256, 512 and 1,024 mg L-1. Each treatment had three replicates of ten explants. The materials were incubated for 21 days in a growth room at 25±2°C temperature, 16-hour-light and 35 µmol m-2 s-1 radiation. The flasks with liquid culture medium were kept under continuous agitation in an orbital shaker. Only ampicillin has not affected the survival and the normal development of potato explants in the culture medium, thereby being indicated for decontamination works in vitro of this specie. The increase of the concentrations of chloramphenicol, tetracycline and streptomycin presented severe phytotoxic effects on the growth and multiplication rate of potato explants.

Os meios semi-sólidos são os mais utilizados em trabalhos de micropropagação, mas há indícios de que o estado físico dos meios de cultura influencia a multiplicação dos cultivos. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um protocolo para a multiplicação de material propagativo de batata em meio de cultura líquido. Explantes de batata da cultivar Eliza, com uma gema axilar, foram cultivados em seis diferentes meios de cultura, com (semi-sólido) ou sem (líquido) a adição do solidificante ágar. Após 21 dias de cultivo, o meio de cultura que proporcionou os melhores resultados para crescimento e taxa de multiplicação teve sua composição modificada com o objetivo de melhorar a eficiência de multiplicação de cinco cultivares em meio líquido. Foi também avaliada a necessidade de agitação dos cultivos em meio líquido. Houve ganho na eficiência de multiplicação in vitro da batata, quando se utiliza meio de cultura líquido. Os melhores resultados são obtidos quando o material é cultivado em meio constituído pelos sais de MS na concentração plena, acrescido de ácido pantotênico (5,0 mg L-1), tiamina (1,0 mg L-1), ácido giberélico (0,25 mg L-1) e sacarose (20 g L-1), sob agitação constante.

Semi-solid media are more commonly used in studies of micropropagation, but the physical state of the culture media seems to influence the growth and multiplication rate of the cultivation. The objective of this work was to establish a protocol for in vitro multiplication of potato in liquid culture media. Potato explants, cultivar Eliza, with an axillary bud, were cultivated in six different culture media, with (semi-solid) or without (liquid) the addition of agar. After 21 days, the culture medium that provided the best results for growth and multiplication rate had the composition modified with the objective of improving the efficiency of in vitro multiplication of five cultivars in liquid medium. The need of agitation was also evaluated in liquid culture medium. There was high efficiency of the in vitro potato multiplication when it was cultivated in liquid medium. The MS salt medium in the full concentration, added by gibberellic acid (0.25 mg L-1), panthotenic acid (5.0 mg L-1), thiamine (1.0 mg L-1) and sucrose (20 g L-1), and under constant agitation, showed to be suitable for this purpose.

Este trabalho teve por objetivos isolar, caracterizar e identificar bactérias endofíticas contaminantes encontradas em tecidos de batata durante a micropropagação e selecionar antibióticos para o controle in vitro desses microrganismos por meio da determinação da concentração bactericida mínima inibitória. Brotações de batata apresentando contaminação bacteriana durante a etapa de multiplicação in vitro, foram superficialmente esterilizadas e os internódios transferidos para placas de Petri com ágar nutriente, onde permaneceram incubadas a 28°C por até cinco dias. Após purificação, as bactérias foram caracterizadas e identificadas por testes taxonômicos. Um total de oito estirpes bacterianas foram isoladas e identificadas como pertencentes às famílias Acetobacteriaceae (1) e Enterobacteriaceae (2) e aos gêneros Corynebacterium (3), Pseudomonas (1) e Xanthomonas (1). Os melhores resultados para a inibição do crescimento bacteriano foram obtidos com os antibióticos ampicilina, cloranfenicol, estreptomicina e tetraciclina em concentrações que variaram de 32 a 256 mg L-1.

This work aimed to isolate, characterize and identify contaminant endophytic bacteria found in potato tissues during the micropropagation and to select antibiotics for in vitro control of these microorganisms by determining the inhibitory minimal bactericidal concentration. Potato shoots presenting bacterial contamination during the in vitro multiplication were superficially sterilized and the internodes transferred to Petri dishes with nutrient agar medium for up to five days at 28°C. After subcultures the grown bacteria were purified and identified through taxonomic tests. A total of eight bacterial endophytic strains were isolated and identified as belonging to Acetobacteriaceae (1) and Enterobacteriaceae (2) families and Corynebacterium (3), Pseudomonas (1) and Xanthomonas (1) genera. The best results for bacterial growth inhibition were obtained with ampicilin, chloramphenicol, streptomycin and tetracycline antibiotics in concentrations ranging from 32 to 256 mg L-1.