PURPOSE: To investigate the effect of vardenafil in kidney of rats submitted to acute ischemia and reperfusion.METHODS:Twenty-eight rats were randomly distributed into two groups. Right nephrectomy was performed and the vardenafil group received vardenafil solution (at a concentration of 1 mg/ml in 10 mg/kg) while the control group received 0.9% saline solution (SS) one hour prior to the ligature of the left renal pedicle. After one hour of ischemia, animals were submitted to twenty-four hours of reperfusion, followed by left nephrectomy. The kidney's histological parameters evaluated on the study included vacuolar degeneration and tubular necrosis. Apoptosis was assessed by immunohistochemistry for cleaved caspase-3 using the point-counting and digital methods (Cytophotometry). Also, a biochemical analysis for creatinine was conducted.RESULTS: There were statistically significant differences between groups only with regards to the vacuolar degeneration parameter and to the cleaved caspase-3 digital method.CONCLUSION: Vardenafil showed a protective effect on the kidney of rats subjected to acute ischemia and reperfusion in this model

OBJETIVO: A granulomatose de Wegener (GW) pode causar dano nas células endoteliais e fenômenos tromboembólicos. Entretanto, poucos estudos analisaram a microcirculação pulmonar - artérias pulmonares de pequeno/médio calibre (APPMC) - em pacientes com GW. O objetivo deste estudo foi quantificar trombos de fibrina em amostras de APPMC de pacientes com GW. MÉTODOS: Analisamos 24 APPMC de seis pacientes com GW e 16 APPMC de quatro pacientes controles sem WG. Utilizamos CD34 para a marcação do endotélio em todas as amostras e microscopia confocal a laser para detectar trombos de fibrina intravasculares. Calculamos a área total do vaso, a área livre do lúmen e a área trombótica. RESULTADOS: A média da área total do vaso foi similar no grupo GW e no grupo controle (32.604 µm² vs. 32.970 µm², p = 0,8793). Trombos foram identificados em 22 das 24 APPMC (91,67%) no grupo GW, e em nenhuma do grupo controle (p < 0,0001; OR = 297 (IC95%: 13,34-6.612). A média da área trombótica foi maior no grupo GW do que no grupo controle (10.068 µm² vs. 0.000 µm², p < 0,0001). Em contraste, a média da área livre do lúmen foi menor no grupo GW que no grupo controle (6.116 µm² vs. 24.707 µm², p < 0,0001). CONCLUSÕES: A microscopia confocal a laser mostrou uma associação significante entre trombose microvascular pulmonar e GW. Isso sugere um possível papel da trombose microvascular na fisiopatologia da GW pulmonar, evocando o potencial benefício da anticoagulação na GW pulmonar. Entretanto, novos estudos são necessários para confirmar nossos achados, assim como um ensaio clínico randomizado a fim de testar o papel da anticoagulação no tratamento de pacientes com GW pulmonar.

OBJECTIVE: Wegener's granulomatosis (WG) can cause endothelial cell damage and thromboembolic events. Nevertheless, there have been few studies on the pulmonary microcirculation-small and medium-sized pulmonary arteries (SMSPA)-in patients with WG. The objective of this study was to quantify fibrin thrombi in the SMSPA of patients with WG. METHODS: We analyzed 24 SMSPA samples collected from six patients with WG and 16 SMSPA samples collected from four patients without WG. In all samples, we used the endothelial cell marker CD34 and confocal laser scanning microscopy in order to detect intravascular fibrin thrombi. We calculated the total vessel area, the free lumen area, and the thrombotic area. RESULTS: The mean total vessel area was similar in the WG and control groups (32,604 µm² vs. 32,970 µm², p = 0.8793). Thrombi were present in 22 (91.67%) of the 24 WG group samples and in none of the control group samples (p < 0.0001; OR = 297; 95% CI: 13.34-6,612). The mean thrombotic area was greater in the WG group samples than in the control group samples (10,068 µm² vs. 0.000 µm²; p < 0.0001). In contrast, the mean free lumen area was smaller in the WG group samples than in the control group samples (6,116 µm² vs. 24,707 µm²; p < 0.0001). CONCLUSIONS: Confocal laser scanning microscopy revealed a significant association between pulmonary microvascular thrombosis and WG. This suggests a possible role of microvascular thrombosis in the pathophysiology of pulmonary WG, evoking the potential benefits of anticoagulation therapy in pulmonary WG. However, further studies are needed in order to confirm our findings, and randomized clinical trials should be conducted in order to test the role of anticoagulation therapy in the treatment of patients with pulmonary WG.

CONTEXTO: O adenocarcinoma da junção esôfago-gástrica tem um comportamento agressivo e o estádio TNM não é sempre suficiente para categorizar o paciente de acordo com a evolução do mesmo. OBJETIVO: Avaliar a imunoexpressão do p53, ciclina D1 e Bcl-2 em pacientes com adenocarcinoma da junção esôfago-gástrica sem esôfago de Barrett e comparar com as características clínicas e sobrevida. MÉTODOS: Cortes histológicos de 75 adenocarcinomas da esôfago-gástrica ressecados de 1991 a 2003 foram analisados por imunoistoquímica para o p53, ciclina D1 e Bcl-2, usando-se o método da estreptavidina-biotina-peroxidase. O tempo médio de seguimento foi de 60 meses, DP=61,5 (variando de 4 a 273 meses). RESULTADOS: Cinquenta (66,7%) dos tumores eram do tipo intestinal e 25 (33,3%) eram difusos. Verificou-se infiltração vascular, linfonodal e perineural em 16%, 80% e 68% dos pacientes, respectivamente. O estádio TNM foi IA em 4 (5,3%), II em 15 (20%), IIIA em 15 (20%), IIIB em 15 (20%) e IV em 16 (21,3%). A análise imunoistoquímica foi positiva para p53, ciclina D1 e Bcl-2 em 68%, 18,7% e 100, respectivamente. Não houve associação entre a imunoexpressão e invasão vascular ou perineural, características clinicopatológicas e sobrevida geral. CONCLUSÃO: Nesta população selecionada, não houve associação entre os imunomarcadores, p53, ciclina D1 e Bcl-2 e os dados clinicopatológicos e a sobrevida geral dos pacientes.

CONTEXT: Esophagogastric junction adenocarcinoma has an aggressive behavior, and TNM (UICC) staging is not always accurate enough to categorize patient's outcome. OBJECTIVES: To evaluated p53, cyclin D1 and Bcl-2 immunoexpressions in esophagogastric junction adenocarcinoma patients, without Barrett's esophagus, and to compared to clinicopathological characteristics and survival rate. METHODS: Tissue sections from 75 esophagogastric junction adenocarcinomas resected from 1991 to 2003 were analyzed by immunohistochemistry for p53, cyclin D1 and Bcl-2 using streptavidin-biotin-peroxidase method. The mean follow-up time was 60 months SD = 61.5 (varying from 4 to 273 months). RESULTS: Fifty (66.7%) of the tumors were intestinal type and 25 (33.3%) were diffuse. Vascular, lymph node and perineural infiltration were verified in 16%, 80% and 68% of the patients, respectively. The patients were distributed according to the TNM staging in IA in 4 (5.3%), IB in 10 (13.3%), II in 15 (20%), IIA in 15 (20%), IIIB in 15 (20%) and IV in 16 (21.3%). Immunohistochemical analysis was positive for p53, cyclin D1 and bcl-2 in 68%, 18.7% and 100%, respectively. There was no association between immunoexpression and vascular and/or perineural invasions, clinicopathological characteristics and patients' survival rate. CONCLUSION: In this selected population, there was no association between the immunomarkers, p53, cyclin D1 and bcl-2 and clinicopathological data and/or overall survival.

OBJETIVO: Determinar a utilidade, na prática rotineira, da análise da clonalidade dos linfócitos T e B nos tecidos pulmonares por reação em cadeia da polimerase no diagnóstico das doenças linfoproliferativas pulmonares. MÉTODOS: Avaliaram-se, mediante análise imunohistoquímica e rearranjo molecular dos genes, 8 casos de pneumonia intersticial linfocítica (PIL) e 7 casos de doenças linfoproliferativas pulmonares. RESULTADOS: Todos os 8 casos de PIL expressaram imunocoloração moderada a forte para CD3, em contraste com apenas 2 casos de linfoma e 1 caso de pseudolinfoma. Rearranjo gênico foi detectado em 4 de 8 casos de PIL, o que mudou o diagnóstico de PIL para linfoma, indicando, assim, a importância da detecção de rearranjo gênico em casos de PIL. Nesta situação, rearranjo gênico usando-se os pares de primers VH/JH e Vgama11/Jgama12 foi detectado em 3 e 1 casos de PIL, respectivamente, e não foram detectadas anormalidades gênicas usando-se as pares Dbeta1/Jbeta2 e Vgama101/Jgama12. Uma associação positiva foi detectada entre a intensidade de imunoexpressão CD20 e CD68 e rearranjo gênico usando-se o par de primers VH/JH. Antes do rearranjo gênico, 4 pacientes com PIL morreram rapidamente, enquanto que, após o rearranjo gênico, apenas 1 paciente com PIL morreu. CONCLUSÕES: A detecção de células B e T monoclonais por imunofenotipagem e reação em cadeia da polimerase mostrou impacto no diagnóstico de linfomas pulmonares em pacientes previamente diagnosticados com PIL. Portanto, imunofenotipagem e reação em cadeia da polimerase devem ser incluídas como métodos de 'padrão ouro' na rotina diagnóstica.

OBJECTIVE: To determine the usefulness, in routine practice, of using polymerase chain reaction to analyze B and T lymphocyte clonality in pulmonary tissue as a tool for the diagnosis of pulmonary lymphoproliferative disorders. METHODS: Immunohistochemistry and molecular gene rearrangement analysis were performed in order to assess 8 cases of lymphoid interstitial pneumonia (LIP) and 7 cases of pulmonary lymphoproliferative disorders. RESULTS: All 8 cases of LIP presented moderate to strong immunostaining for CD3, compared with only 2 cases of lymphoma and 1 case of pseudolymphoma (p = 0.02). Gene rearrangement was detected in 4 of the 8 cases, which changed the diagnosis from LIP to lymphoma, showing the importance of gene rearrangement detection in cases of LIP. In this situation, gene rearrangement using the VH/JH and Vgamma11/Jgamma12 primer pairs was detected in 3 cases and 1 case, respectively, and no gene abnormalities were found using the Dbeta1/Jbeta2 and Vgamma101/Jgamma12 primer pairs in any of the cases. A significant positive association was found between the intensity of CD20 and CD68 expression and gene rearrangement using the VH/JH primer pair. Prior to the gene rearrangement, 4 patients with LIP died quickly, whereas only one patient with LIP died after the gene rearrangement. CONCLUSIONS: Detection of monoclonal B and T cells by immunophenotyping and polymerase chain reaction had an impact on the diagnosis of pulmonary lymphomas in patients previously diagnosed with LIP. Therefore, immunophenotyping and polymerase chain reaction should be used as 'gold standard' techniques in routine practice.

INTRODUÇÃO: O ácido ascórbico tem se mostrado como um agente promissor na atenuação da lesão causada pela isquemia/reperfusão (IR). O objetivo deste estudo foi determinar os efeitos protetores do ácido ascórbico na morfologia intestinal durante a IR em ratos. MATERIAL E MÉTODOS: Examinamos alterações morfológicas no intestino delgado de ratos do tipo Wistar. Após 40 minutos de isquemia (I), isquemia seguida de reperfusão (IR), isquemia com tratamento com ácido ascórbico (IA), isquemia seguida por 30 minutos de reperfusão e tratamento com ácido ascórbico (IRA) e do grupo sham (S). Utilizamos a morfometria para avaliar quantitativamente a arquitetura dos vilos da mucosa intestinal, criptas intestinais, necrose, hemorragia, células inflamatórias nas bordas mesentéricas e antimesentéricas do intestino delgado. RESULTADOS: O ácido ascórbico causou uma redução significativa (p<0,05) no infarto hemorrágico dos vilos intestinais da borda antimesentérica do intestino delgado após isquemia seguida por reperfusão, bem como redução da necrose dos vilos em ambas as bordas após a isquemia (p<0.05). As lesões presentes no intestino delgado foram mais proeminentes na borda antimesentérica. CONCLUSÕES: O pré-tratamento com ácido ascórbico atenuou ou reduziu significativamente as alterações morfológicas no intestino delgado induzidas pela isquemia-reperfusão.

BACKGROUND: Ascorbic acid has shown promise in attenuation of intestinal ischemia-reperfusion (I/R) injury. The aim of this study was to determine the protective effects of ascorbic acid on intestinal morphology during IR injury in rats. MATERIALS AND METHODS: We examined morphological changes in the small intestine of Wistar rats after (i) 40 minutes of ischemia (I), (ii) ischemia followed by 30 min of reperfusion (IR), (iii) ischemia with ascorbic acid (IA), (iv) ischemia followed by reperfusion and ascorbic acid (IRA) and (v) in a sham group (S). We used morphometry to evaluate the amount of villous architecture, crypts, necrosis, hemorrhagic infarcts and inflammatory cells at the mesenteric and antimesenteric borders of the small intestine. RESULTS: Ascorbic acid caused a significant reduction of antimesenteric villous hemorrhagic infarction (p<0.05) of the small intestine after ischemia followed by reperfusion as well as villous necrosis reduction at both borders after ischemia (p<0.05). The lesions found in the small intestine were more prominent along the antimesenteric margin. CONCLUSIONS: Ascorbic acid pretreatment has a protective effect against the intestinal morphological lesions induced by ischemia-reperfusion injury in rats.

A apresentação anatomopatológica das vasculites pulmonares inclui um processo inflamatório da parede dos vasos pulmonares que pode vir acompanhado de granulomas, células gigantes, eosinófilos, necrose e hemorragia pulmonar. O conhecimento dessas manifestações, em associação com o tipo de vaso acometido e reações de imunofluorescência auxiliam no diagnóstico diferencial das vasculites.

The pathological manifestations of pulmonary vasculitis include an inflammatory process in the pulmonary vessel walls, which is often accompanied by granulomas, giant cells, eosinophils, necrosis or pulmonary hemorrhage. Knowledge of these presentations, as well as of the type of vessels affected and of immunofluorescence reactions, can aid in making the differential diagnosis among the various forms of vasculitis.

As síndromes hemorrágicas pulmonares caracterizam-se por infiltrado pulmonar bilateral, queda dos níveis de hemoglobina e hipoxemia. Dentre as causas de sangramento estão as infecções, vasculites, coagulopatias e doenças do colágeno. A terapêutica consiste do tratamento da doença causal e suporte ventilatório, podendo ser associada a plasmaferese.

Pulmonary hemorrhage syndromes are characterized by bilateral pulmonary infiltrates, decreased serum levels of hemoglobin, and hypoxemia. The causes of pulmonary hemorrhage include: infections, vasculitis, coagulopathies and collagen diseases. The therapy consists of treating the underlying disease and providing ventilatory support. In some cases, performing plasmapheresis can be beneficial.

O desenvolvimento dos tumores depende da formação de neovasos, a angiogênese. Em algumas neoplasias, a alta densidade de microvasos tumorais correlaciona-se com a presença de metástase. OBJETIVO: Determinar se a medida da angiogênese pode indicar o potencial de metástase e o prognóstico do carcinoma papilífero tireóideo. MÉTODO: Foi feita análise retrospectiva de 30 tireoidectomizados, divididos em dois grupos de 15 indivíduos cada, respectivamente com e sem metástase. A partir dos blocos de parafina, foi calculada a densidade de microvasos no tecido tumoral por meio da quantificação da expressão do anticorpo CD34 pela imunohistoquímica. A associação da densidade de microvasos com a presença de metástase, ocorrência de recidiva e os grupos de risco do índice prognóstico AMES foi determinada por análise estatística. RESULTADOS: A mediana da densidade de microvasos no grupo de doentes sem metástase (200,0 microvasos/mm²) foi inferior àquela dos portadores de metástase (254,4 microvasos/mm²) (p = .2), sem atingir significância estatística. Ao considerar apenas os subtipos histológicos clássico e de células altas, essa diferença tornou-se significante (p = .02), uma vez que a variante folicular exibiu maior DMV que os demais subtipos, independente da presença de metástase. Houve tendência não significativa à maior densidade de microvasos entre aqueles que apresentaram recidiva (294,4 microvasos/mm² contra 249,6 microvasos/mm², p = .11). Nos grupos de baixo e alto risco, a mediana da densidade de microvasos foi de 304,0 microvasos/mm² e 229,6 microvasos/mm² respectivamente (p = .27). CONCLUSÃO: A angiogênese foi mais intensa nos tumores com metástase nos subtipos clássico e de células altas, sugerindo que a contagem de microvasos pode ser um indicador do potencial de metástase nestes subtipos histológicos do carcinoma papilífero tireóideo. Doentes que evoluíram com recidiva tenderam a exibir maior angiogênese, porém não houve associação da densidade de microvasos e o índice prognóstico.

Angiogenesis is new blood vessel formation, a process that can lead to tumor development. Microvessel count has been correlated to metastasis in some neoplasias. PURPOSE: To determine if measurement of microvessel density is useful in predicting metastasis to the cervical lymph node and prognosis in patients with papillary thyroid carcinoma. METHODS: A retrospective analysis was performed in 30 patients that had undergone total thyroidectomy. They were divided in 2 groups of 15 patients - with and without metastatic disease. Immunohistochemistry was used to detect expression of CD34 in archival paraffin-embedded papillary thyroid tumors, and microvessel density was calculated based on it. Association between microvessel density and the presence of metastasis, according to histological subtype, disease recurrence, and AMES prognostic index groups was determined through statistical analysis. RESULTS: The median microvessel density for the patient group without metastasis (200.0 microvessels/mm²) was apparently, but not significantly, less than that observed among metastatic disease patients (254.4 microvessels/mm²) (P = .20). When papillary carcinoma subtypes were analyzed, this difference became significant (P =.02). The follicular variant exhibited a greater microvessel density than the other subtypes, independent of metastasis presence. There was an apparent, but not significant, tendency for a larger median microvessel density in the group of patients that presented recurrence (294.4 microvessels/mm² vs 249.6 microvessels/mm², P = .11). There was no relationship between risk level and microvessel density: in the low- and high-risk groups, the median MVD was 304.0 microvessels/mm² and 229.6 microvessels/mm², respectively (P = .27). CONCLUSIONS: The results suggest that angiogenesis is more intense among metastatic tumors in the classic and the tall cell variants, indicating that microvessel count can be an indicator of the potential for metastasis in these subtypes of papillary thyroid carcinoma. Patients that developed recurrent disease had a tendency to exhibit higher angiogenesis; however, there was no association between microvessel density and the AMES prognostic index.

O pulmão é uma fonte de grande número de espécimens citológicos e histológicos. Destes espécimens o patologista deverá emitir um diagnóstico, tendo, dessa forma, importante papel no estabelecimento do estadiamento clínico e patológico. A prioridade do patologista na avaliação de um tumor pulmonar, para fazer um diagnóstico histológico específico, reside na avaliação do espécimen histológico; contudo, pode ser acompanhada de preparados citológicos. Aqui pode fazer-se necessária a suplementação por técnicas histoquímicas e imunoistoquímicas. Se houver adequadas condições de fixação do tecido, técnicas especiais como microscopia eletrônica, imunoistoquímica em material congelado, citogenética e estudos moleculares poderão ser realizados. Exceção será feita se o material for muito pequeno, quando então deverá ser totalmente submetido à técnica de rotina; neste caso, se o diagnóstico não puder ser elaborado, biópsias subseqüentes poderão ser prospectivamente obtidas e direcionadas para a técnica especial de estudo. Este é o caso freqüentemente encontrado nos linfomas malignos, nos quais os espécimens de biópsia poderão ser muito pequenos e insuficientes para o diagnóstico definitivo sem imunofenotipagem. O estadiamento patológico de tumor primário de pulmão será alcançado quando houver adequado estudo macro e microscópico. Os procedimentos descritos a seguir poderão ser aplicados para ressecções por segmentectomia, lobectomia, pneumectomia, ressecções em bloco, traquéia ou brônquios.

The lung is source to a large number of cytological and histologic specimens. Pathologists should diagnose these specimens and then participate in the clinical and pathologic staging of the tumor. The first priority of pathologists when evaluating a lung tumor with specific histologic diagnosis can usually be accomplished with routine cytological or histologic preparations. These may be supplemented as necessary with ancillary histochemical or immunohistochemical studies. If adequate diagnostic tissue is available, special studies such as electron microscopy, frozen section immunostaining, cytogenetics, and molecular studies can be performed. In the case of small specimens, all tissue should be routinely processed; if a diagnosis cannot be rendered, subsequent biopsies can be prospectively triaged for the necessary and appropriate special studies. This is typical in cases of malignant lymphoma, in which biopsy specimens may be too small for definitive diagnosis without the aid of immunophenotype studies. The pathologic staging of a primary lung tumor is contingent on appropriate gross and microscopic examination of resection specimens. Standardized and unified staging schemes are necessary for comparative and collaborative studies of lung tumors. The following approach can be applied to segmentectomy, lobectomy, pneumectomy, en bloc resections, and tracheal or bronchial sleeve resections.