Resumen La tripanosomiasis Americana es una de las enfermedades tropicales desatendidas a nivel mundial, y es causada por el protozoario hemoflagelado Trypanosoma cruzi (Tc). Actualmente, los fármacos anti-Tc son limitados y no hay vacuna disponible. El objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto de las nanopartículas de plata (AgNPs) contra los tripomastigotes de las cepas Sylvio X10/4 (TcI) y Esmeraldo (TcII). Las AgNPs se obtuvieron por el método de reducción y se les realizó una caracterización estructural. La actividad citotóxica de las AgNPs (actividad anti-Tc) se determinó mediante el cálculo de los valores de la mitad de la concentración inhibitoria máxima (IC50) en las células HaCaT y en los parásitos. Las AgNPs no mostraron citotoxicidad contra las células HaCaT en los valores de IC50 probadas en los parásitos, y la IC50 calculada en los tripomastigotes fue de 4.05 µg/ml y de 6.16 µg/ml en las cepas TcI y TcII respectivamente. Las AgNPs fueron más activas contra las dos cepas de Trypanosoma cruzi, que el nifurtimox (400 µg/ml) in vitro. Estos resultados sientan las bases para la evaluación mayor de las AgNPs, por investigar su potencial quimioterapéutico para combatir la infección por T. cruzi en modelos animales.

Abstract American trypanosomiasis is one the globally neglected tropical disease, and is cause by the protozoan haemoflagellate Trypanosoma cruzi (Tc). Currently, the anti-Tc drugs are limited and no vaccine is available. The objective of the study was to determine the effects of silver nanoparticles (AgNPs) against trypomastigotes of the Sylvio X10/4 (TcI) and Esmeraldo (TcII) strains. The AgNPs were obtained by the reduction method and a structural characterization was carried out. The cytotoxic activity of the AgNPs (antiTc activity) was determined by calculating the values of half the maximum inhibitory concentration (IC50) in HaCaT cells and parasites. AgNPs showed no-cytotoxicity against HaCaT cells at the IC50 values assayed in parasites, and the calculated IC50 trypomastigotes was 4.05 µg/ml and 6.16 µg/ml for TcI and TcII strains, respectively. AgNPs were more active against both Trypanosoma cruzi strains than nifurtimox (400 µg/ml) in vitro assays. These results lay the groundwork for further evaluation of AgNPs, to investigate its chemotherapeutic value to figh T. cruzi infection in animal models.

ABSTRACT Introduction. Giardiasis is caused by an intestinal protozoan, Giardia lamblia. Despite its high prevalence and geographical transmission variability, there is no risk stratification tool available to prioritize interventions. Objective. To estimate the prevalence of G. lamblia in Peruvian preschoolers and schoolchildren by ecoregion from 1990 to 2018. Methods. Based on a previous meta-analysis, we conducted a G. lamblia prevalence sub-analysis by ecoregions from data of 26 studies in Peruvian preschoolers and school-aged children between 1990 and 2018. The data was extracted by district, a classification by ecoregions was made through Google Earth. Heterogeneity was analyzed using Cochrane Q test and publication bias applying the Egger method with StatsDirect version 3.2.7. The absolute risk method was performed to stratify the prevalence at district level, and 4 strata were defined based on percentiles or arbitrarily. Results. Forty-three district-level prevalence data was estimated, including 7,606 participants. The highest pooled prevalences by the random effects method of G. lamblia were 47.0% (95% CI: 40.0-54.0) in the Pacific desert, 27.9% (95% CI: 22.8-33.2) in the lowland forest and 26.9% (95% CI 22.5-31.5) in the Puna. Conclusions. Of every 100 preschoolers and school-aged children living in the Pacific desert, lowland forest, and in the Puna ecoregions, 47, 28, and 27 minors are infected with G. lamblia, respectively. Likewise, 4 risk strata are proposed based on prevalence: sporadic (0 to <1%), hypoendemic (1 to <25%), mesoendemic (≥25 to <50%) and hyperendemic (≥50%).

RESUMEN Introducción. La giardiasis es ocasionada por el protozoario intestinal Giardia lamblia, su transmisión tiene variabilidad geográfica y a pesar de ser muy frecuente, no existe una herramienta de estratificación de riesgo para priorizar las intervenciones. Objetivo. Estimar la prevalencia de G. lamblia en preescolares y escolares peruanos por ecorregiones entre 1990 a 2018. Métodos. A partir de un metaanálisis previo, se realizó un subanálisis por ecorregiones de la prevalencia de G. lamblia en 26 estudios en preescolares y escolares peruanos entre 1990 a 2018. Se extrajeron los datos por distrito y utilizando Google Earth fueron clasificados en ecorregiones. La heterogeneidad fue analizada mediante la prueba de Q de Cochrane y el sesgo de publicación mediante el método de Egger con StatsDirect versión 3.2.7. Se utilizó el método de riesgo absoluto para estratificar la prevalencia a nivel de distrito y se definió 4 estratos en base a los percentiles o arbitrariamente. Resultados. Se identificaron 43 datos de prevalencia a nivel de distrito que incluyeron 7606 participantes. Las prevalencias combinadas más altas por el método de efectos aleatorios de G. lamblia fueron de 47,0% intervalo de confianza (IC) 95%: 40,0 -54,0) en el desierto del Pacífico; 27,9% (IC95%: 22,8 - 33,2) en selva baja y 26,9% (IC95%: 22,5 -31,5) en la Puna. Conclusiones. De cada 100 preescolares y escolares que viven en las ecorregiones del desierto del Pacífico, selva baja y Puna, 47, 28 y 27 menores de edad, respectivamente, están infectados con G. lamblia. Asimismo, se propone 4 estratos de riesgo en función de la prevalencia: esporádico (0 a <1%), hipoendémico (1 a <25%), mesoendémico (≥ 25 a <50%) e hiperendémico (≥50%).

RESUMO Neospora caninum é um importante parasito, responsável por causar aborto em animais e distribuído mundialmente. Devido às informações limitadas sobre a ocorrência da infecção por esse parasito no estado de Rondônia, Brasil, este estudo teve como objetivo determinar a soroprevalência e identificar os fatores de risco associados à infecção em bovinos abatidos, oriundos de 19 municípios, distribuídos em sete microrregiões do estado. Um total de 494 amostras foi obtido e submetido à pesquisa de anticorpos anti-N. caninum, por meio da técnica de reação de imunofluorescência indireta. Os anticorpos foram detectados em 5,06% (25/494) das amostras, em 30,30% (10/33) das propriedades rurais, de nove municípios, localizados em quatro microrregiões de Rondônia. De todos os animais analisados, 4,81% das fêmeas (20/416) e 6,41% dos machos (05/78) foram soropositivos para o parasito, sendo o “aborto nos últimos 12 meses” considerado um importante fator de risco para a ocorrência da infecção (OR = 9,54; P = 0,01). O presente estudo aponta a prevalência de anticorpos anti-N. caninum em 5,06% dos animais abatidos e o aborto como o principal fator de risco associado à infecção por N. caninum, contribuindo assim para a elucidação da epidemiologia desse protozoário em Rondônia, Brasil.

ABSTRACT Neospora caninum is an important worldwide parasite responsible for causing abortion in animals. Due to limited information on the occurrence of infection by this parasite in the state of Rondônia, Brazil, this study aimed to determine the seroprevalence and identify the risk factors associated with the infection in slaughtered cattle, from 19 municipalities distributed in seven microregions of the state. A total of 494 samples were obtained and subjected to anti-N. caninum antibodies, using the Indirect Immunofluorescence Reaction technique. Antibodies were detected in 5.06% (25/494) of the samples, in 30.30% (10/33) of farms, in nine municipalities located in four microregions of Rondônia. Of all the animals analyzed, 4.81% of the females (20/416) and 6.41% of the males (05/78) were seropositive for the parasite, with “abortion in the last 12 months” being considered an important risk factor for the occurrence of infection (OR = 9.54; p = 0.01). The present study points out the prevalence of anti-N. caninum antibodies in 5.06% of slaughtered animals and abortion as the main risk factor associated with infection by N. caninum, thus contributing to the elucidation of the epidemiology of this protozoan in Rondônia, Brazil.

Resumo Rhodnius neglectus é um triatomíneo silvestre, vetor do protozoário Trypanosoma cruzi, causador da doença de Chagas. Este inseto se alimenta do sangue de pequenos mamíferos, que é essencial para o seu crescimento e reprodução. As glândulas acessórias do sistema reprodutor feminino são importantes na reprodução de insetos, mas sua anatomia e histologia em R. neglectus são pouco conhecidas. O objetivo deste trabalho foi descrever a histologia e histoquímica da glândula acessória do aparelho reprodutor feminino de R. neglectus. O sistema reprodutor de cinco fêmeas de R. neglectus foi dissecado e as glândulas acessórias transferidas para solução fixadora de Zamboni, desidratadas em série crescente de etanol, embebidas em historesina, seccionadas com 2 µm de espessura, coradas com azul de toluidina para análise histológica ou submetidas ao teste de mercúrio-bromofenol para detecção de proteínas totais. O sistema reprodutor de R. neglectus tem uma glândula acessória tubular, sem ramificações, abrindo-se na região dorsal da vagina, sendo diferenciada em regiões proximal e distal. Na região proximal, a glândula é revestida internamente pela cutícula com uma camada de células colunares associadas a fibras musculares. Na região distal ocorrem células secretoras esféricas com aparato terminal e canalículos condutores que se abrem no lúmen da glândula através de poros na cutícula. O teste histoquímico revelou a presença de proteínas no lúmen da glândula e no aparato terminal, núcleo e citoplasma das células secretoras. A histologia da glândula de R. neglectus é semelhante à das espécies desse gênero, mas com variações na forma e no tamanho de sua região distal.

Abstract Rhodnius neglectus is a wild triatomine, vector of the protozoan Trypanosoma cruzi, which causes Chagas’ disease, and feeds on the blood of small mammals, being essential for its growth and reproduction. Accessory glands of the female reproductive tract are important in insect reproduction, but their anatomy and histology in R. neglectus are poorly studied. The aim of this work was to describe the histology and histochemistry of the accessory gland of the female reproductive tract of R. neglectus. The reproductive tract of five females of R. neglectus was dissected and the accessory glands transferred to Zamboni's fixative solution, dehydrated in a crescent series of ethanol, embedded in historesin, sectioned at 2 µm thick, stained with toluidine blue for histological analysis or mercury bromophenol blue for detection of total proteins. The accessory gland R. neglectus is tubular, without branches, opening in the dorsal region of the vagina and differing along its length in proximal and distal regions. In the proximal region, the gland is lined by the cuticle with a layer of columnar cells associated with muscle fibers. In the distal region of the gland, the epithelium has spherical secretory cells with terminal apparatus and conducting canaliculi opening in the lumen through pores in the cuticle. Proteins were identified in the gland lumen, terminal apparatus, nucleus and cytoplasm of secretory cells. The histology of the R. neglectus gland is similar to that found in other species of this genus, but with variations in the shape and size of its distal region.

Resumo Leishmaniose Visceral Canina é uma doença causada pelo protozoário Leishmania infantum, importante agente zoonótico. O objetivo deste estudo foi determinar a soroprevalência, avaliar os fatores de risco e a distribuição espacial da infecção por L. infantum em cães da microrregião do Pajeú, Sertão de Pernambuco, Brasil. Amostras de soro canino (n=247) foram testadas (“Dual Path Platform Rapid Test” - TR DPP® (triagem); ELISA/S7 (confirmatório)), e os fatores de risco avaliados por meio de análise univariada e regressão logística. A distribuição espacial dos cães reagentes foi analisada por meio de mapas confeccionados no programa QGIS. Detectou-se soroprevalência de 13,7% (34/247), com predominância dos casos no município de Tabira (26,4%; 9/34). A idade acima de 10 anos foi considerada fator de risco associado à presença de anticorpos anti-L. infantum. A alta prevalência e distribuição espacial dos casos positivos revelou ampla dispersão de cães reagentes na área de estudo. Portanto, medidas preventivas são necessárias a fim de reduzir o risco de infecção para os animais e humanos.

Abstract Canine visceral leishmaniasis is a disease caused by the protozoon Leishmania infantum, an important agent of zoonotic concern. In this study we determined the seroprevalence, risk factors and spatial distribution of infection by L. infantum among dogs in the Pajeú microregion of the Sertão region of Pernambuco, Brazil. Canine serum samples (n = 247) were tested using the Dual Path Platform (DPP®) rapid screening test and ELISA/S7® confirmatory test; and risk factors were assessed through univariate analysis and logistical regression. The spatial distribution of reactive dogs was analyzed by drawing a map using QGIS. Seroprevalence of 13.7% (34/247) was detected, with cases predominating in the municipality of Tabira (26.4%; 9/34). Age above 10 years was considered to be a risk factor associated with the presence of anti-L. infantum antibodies. The high overall prevalence and spatial distribution of positive cases showed wide dispersion of reagents dogs in the study area. Therefore, preventive measures are needed in order to reduce the risk of infection for animals and humans.

Resumo A tripanossomíase é uma infecção por protozoário que afeta humanos e animais em quase todas as partes do mundo. Pode afetar grande variedade de hospedeiros domésticos e selvagens, incluindo camelídeos, equinos, gado, búfalos, ovelhas, cabras, porcos, cães e outros carnívoros, veados, gazelas e elefantes. Este artigo de revisão foi elaborado para abordar o efeito dessa doença economicamente importante em países do mar Vermelho, especialmente Egito, Sudão, Somália e Arábia Saudita, durante o período de 2010 a 2020. A prevalência de tripanossomíase é diferente entre esses países devido a tipos distintos de métodos diagnósticos (esfregaços de sangue corados com Giemsa, centrifugação de hematócrito, teste sorológico e PCR de análise molecular) usados e distribuição diferencial de moscas vetoras (tsé-tsé). Na revisão atual, foram realizados estudos retrospectivos da literatura publicada sobre distribuição e prevalência da infecção por Trypanosoma evansi nos países do mar Vermelho [Google Scholar e PubMed foram usados para recuperar a literatura publicada de 2000 a 2020. Um total de 77 artigos publicados preencheu os critérios de elegibilidade e foi revisado. E há também 16 relatos sobre a prevalência e distribuição da infecção por Trypnosoma evansi nos países do mar Vermelho, de 2010 a 2020]. De acordo com a literatura publicada, podemos afirmar que a tripanossomíase em camelos é mais prevalente no Sudão do que em outros países, seguida por 17% e 51,78% em casos clínicos e não clínicos. Assim, os testes diagnósticos confiáveis devem ser utilizados para o tratamento rápido ou controle da doença, pois, se eles não forem tratados de forma adequada na fase inicial, isso pode levar à morte dos camelos.

Abstract Trypanosomiasis is a protozoan infection affecting both human and animals in almost all parts of the world. It can affect a very large range of domestic and wild hosts including camelids, equines, cattle, buffaloes, sheep, goats, pigs, dogs and other carnivores, deer, gazelles and elephants. This review paper was designed to address the effect of this economically important disease in countries on the Red Sea, especially in Egypt, Sudan, Somalia, and Saudi Arabia during the period 2010 to 2020. The prevalence of trypanosomiasis is different between these countries due to different types of diagnostic methods (Giemsa-stained blood smears, Hematocrit centrifugation, Serological test, and molecular analysis PCR) used and differential distribution of vector (Tse tse) flies. In current review, retrospective studies of published literature on distribution and prevalence of Trypanosoma evansi infection in the Red Sea Countries was conducted [Google Scholar and PubMed were used to retrieve the published literature from 2000-2020. A total of 77 published articles met the eligibility criteria and were reviewed. A total of 16 reports have been reported on the prevalence and distribution of Trypnosoma evansi infection in the Red Sea Countries have been from 2010-2020]. According to the published literature, we can say that trypanosomiasis in camels are more prevalent in Sudan than in other countries, followed by 17% and 51.78% in both clinical and non-clinical cases. Hence, the reliable diagnostic tests should be used for rapid treatment or control of the disease as if not treated appropriately in early-stage, can lead to death of the camels.

RESUMO: Objetivou-se com o estudo detectar Cryptosporidium sp. em ostras de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão e determinar o(s) tecido(s) eletivo(s) para pesquisa desse protozoário. Para a realização do estudo foram adquiridas 200 ostras de cultivo do município de Raposa e 100 de Paço do Lumiar, além de 100 ostras extraídas de estoque natural do município de Primeira Cruz, totalizando 400 ostras. Estas foram agrupadas em 80 pools constituídos por cinco animais. De cada pool, as brânquias e a massa visceral foram removidas totalizando 160 pools, sendo 80 para o grupo das brânquias e 80 para o grupo de massa visceral. Na sequência, procedeu-se à extração de DNA de cada pool com a utilização de kit comercial com modificações. Posteriormente, realizou-se a detecção do DNA do protozoário por meio da técnica de Nested-PCR. Com a técnica utilizada, foi detectado o DNA do protozoário pesquisado em 2,5% (n=2/80) pools apenas de brânquias, sendo 1,25% pools (n=1/80) oriundos de cultivo e os outros 1,25% (n=1/80) de estoque natural. Com os resultados obtidos nesse estudo, conclui-se que as ostras analisadas do gênero Crassostrea sp., oriundas de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão, estavam contaminadas por Cryptosporidium sp. e podem se reverter em fontes potenciais para seres humanos e outros animais. Para a pesquisa de Cryptosporidium sp. em ostras, as brânquias são o tecido eletivo.

ABSTRACT: This study detected Cryptosporidium spp. in cultivated oysters and the natural oyster stock of the state of Maranhão and determine the elective tissue(s) to examine this protozoan. For this purpose, 200 cultivated oysters were purchased from the municipality of Raposa and another 100 from Paço do Lumiar. Additionally, 100 oysters were extracted from the natural stock of the municipality of Primeira Cruz, thus making up a total of 400 oysters. They were grouped into 80 pools consisting of 5 oysters each. From each pool, the gills and visceral mass were removed to obtain 160 pools, 80 pools for the gill group and another 80 for the visceral mass group. Then, DNA was extracted from each pool using a commercial kit with modifications. Subsequently, the protozoan DNA was detected using nested polymerase chain reaction. With this technique, the DNA of the protozoan under investigation was detected in 2.5% (n = 2/80) of the pools containing gills, with 1.25% of the pools (n = 1/80) belonging to the cultivation group of oysters and the other 1.25% (n = 1/80) to the natural stock. With the results obtained in this study, it was concluded that the analyzed oysters of the genus Crassostrea, from cultivation and natural stock groups, found in the state of Maranhão, were contaminated by Cryptosporidium spp. and may become potential sources of infection in humans and other animals. In addition, the gills are the elective tissue for the study of Cryptosporidium spp. in oysters.

RESUMO: A leishmaniose é um grande problema de saúde pública que afeta tanto humanos quanto animais. A doença é causada pelo protozoário Leishmania spp., que possui um ciclo complexo envolvendo um vetor flebotomíneo. O teste ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), juntamente com um imunoensaio cromatográfico, foi definido pelo Ministério da Saúde do Brasil como protocolo de triagem confirmatória em 2011. A cidade de Uruguaiana fica a 630 km de Porto Alegre, o que dificulta o envio de amostras e o diagnóstico da leishmaniose, além da demora para obter os resultados. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar um método de ELISA indireto in-house comparado ao ensaio de imunofluorescência indireta (IFA) e imunoensaio cromatográfico de plataforma de dupla via (DPP-BioManguinhos®) para a detecção de uma resposta imune contra Leishmania spp. na espécie canina. A avaliação sorológica incluiu 48 caninos da fronteira oeste do Brasil (cidade de Uruguaiana e Barra do Quaraí). Das 48 amostras caninas testadas, 18 foram positivas na técnica de ELISA, 19 foram positivas com IFA e 17 foram positivas com o teste rápido DPP®. A técnica de ELISA apresentou sensibilidade/especificidade de 83,3%/86,7% quando comparada ao IFA e 100%/96,8% em relação ao DPP®. O presente estudo apresentou prevalência de 37,5%, demonstrando que a infecção circula na população estudada. Pode-se concluir que a técnica de ELISA foi valiosa para uso em condições de campo na realização de testes de triagem em áreas endêmicas.

ABSTRACT: Leishmaniosis is a great public health problem affecting both humans and animals. The disease is caused by the protozoan Leishmania spp., which has a complex cycle involving a phlebotomine vector. The ELISA test (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) along with a chromatographic immunoassay was defined by the Brazil Health Ministry as the confirmatory screening protocol in 2011. Uruguaiana city is 630 km away from Porto Alegre, which makes it difficult to send samples and diagnose leishmaniasis, as well as receive quick results. In view of this, the present study evaluated an in-house indirect ELISA method compared to indirect immunofluorescence assay (IFA) and dual-path platform chromatographic immunoassay (DPP-BioManguinhos®) for the detection of an immune response to Leishmania spp. in canine species. The serological evaluation included 48 canines from the western border of Brazil (Uruguaiana and Barra do Quaraí city). Among the 48 canine samples tested, 18 were positive when using the ELISA technique, 19 were positive with IFA, and 17 were positive with rapid test DPP®. The ELISA technique showed a sensitivity/specificity of 83.3%/86.7% when compared to IFA and 100%/96.8% compared to DPP®. The present study showed a prevalence of 37.5%, demonstrating that the infection circulates in the studied population. It can be concluded that the ELISA technique was valuable for use in field conditions when performing screening tests in endemic areas.

RESUMO A tripanossomíase bovina é causada pelo protozoário Trypanosoma vivax. A transmissão biológica ocorre apenas no continente africano pela mosca Tsé-tsé, de forma mecânica por dípteros hematófagos em todos os continentes, ou pelo compartilhamento de agulhas e por práticas associadas. O estudo teve como objetivo relatar o primeiro diagnóstico parasitológico, sorológico e molecular de T. vivax em bovinos leiteiros provenientes de cinco propriedades do município de Unaí, Minas Gerais, Brasil. Cento e quinze animais selecionados por conveniência apresentavam sinais clínicos ou pertenciam a lotes de animais suspeitos. Foram detectados positivos pelos testes parasitológico (técnica de Woo), sorológico (ELISA) e molecular (LAMP). A maior prevalência global para T. vivax foi de 11,11% na propriedade A. O único sinal clínico dos animais positivos estudados foi baixa taxa de concepção. O primeiro diagnóstico de tripanossomíase no noroeste mineiro é extremamente importante, haja vista o tamanho do rebanho leiteiro da região e as possíveis perdas econômicas provocadas pela enfermidade. Ademais, faz-se necessário maior controle sanitário na região, uma vez que a transmissão no Brasil é intimamente ligada às práticas de compartilhamento de agulhas no manejo dos animais e ao parasitismo de moscas hematófagas.

Resumo Toxoplasma gondii é um protozoário parasita intracelular zoonótico que geralmente infecta humanos e animais em todo o mundo. Este estudo teve como objetivo analisar a soroprevalência de T. gondii no sangue de animais lactantes e humanos que vivem em proximidade, além de detectar o DNA de Toxoplasma no leite não pasteurizado dos indivíduos estudados. Um total de 233 amostras de sangue e leite foram coletadas de animais lactantes e 735 amostras de sangue foram coletadas de humanos no Distrito Upper Dir Khyber Pakhtunkhwa, no Paquistão. As amostras de sangue foram analisadas pelo método ELISA enquanto as amostras de leite foram analisadas por PCR para a presença de DNA de T. gondii. Um questionário padrão foi introduzido para coletar os dados dos participantes. Em animais, a soroprevalência relatada foi de 32,18% para IgM, 17,16% para IgG e 6,4% para IgM e IgG. A positividade relatada para DNA de T. gondii encontrada no leite foi de 14,44%, 34,8%, 20% e 26% em ovelhas, cabras, vacas e búfalas, respectivamente. Nas amostras de sangue humano, 9,8% foram consideradas positivas para IgM e 11,2% para IgG, enquanto nenhuma das amostras foi considerada positiva para IgM e IgG. A soroprevalência geral relatada em mulheres foi significativamente maior do que em homens (p < 0,05). Neste estudo, contato com gatos (p < 0,0001), hábitos alimentares (p < 0,0001), fonte de água para beber (p < 0,0001) e más condições de higiene (p < 0,0001) foram os fatores de risco significativos associados a infecções por T. gondii em animais. Em conclusão, a infecção por T. gondii é prevalecente em animais lactantes e humanos que utilizam leite cru, isto é, não-pasteurizado, na área de estudo. Sugere-se que o leite não-pasteurizado seja considerado um veículo de transmissão do T. gondii para humanos. A pasteurização adequada do leite é muito útil para limitar a transmissão de infecções. Programas de conscientização e controle devem ser implementados para prevenir a infecção.

Abstract Toxoplasma gondii is an intracellular zoonotic protozoan parasite usually infects human and animal worldwide. This study aimed to analyze the sero-prevalence of T. gondii in blood of lactating animals and human living in close proximity and also to detect Toxoplasma DNA in unpasteurized milk of the studied animals. A total of 233 blood and milk samples were collected from lactating animals, and 735 blood samples were taken from humans in District Upper Dir, Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan. The blood samples were analyzed through ELISA while the milk samples were analyzed by PCR for the presence of T. gondii DNA. A standard questionnaire was introduced to collect the data from the participants. In animals, the reported sero-prevalence was 32.18% for IgM, 17.16% for IgG, and 6.4% for both IgM and IgG. The reported positivity for T. gondii DNA in milk was 14.44%, 34.8%, 20%, and 26% in sheep, goats, cows, and buffaloes, respectively. In the human blood samples, 9.8% were found positive for IgM and 11.2% for IgG while none of the samples was found positive for both IgM and IgG. Overall sero-prevalence reported in females was significantly higher than the male (p<0.05) poor hygiene condition (p < 0.0001) were the significant risk factors associated with T. gondii infections in animals. In conclusion, T. gondii infection is prevalent in lactating animals and humans using their raw milk in the study area. It is suggested that raw milk should be considered as a vehicle for the transmission of T. gondii to humans. Proper pasteurization of milk is very useful in limiting the transmission of infection. Awareness and control programs should be implemented to prevent the infection.

Resumo Este estudo teve como objetivo relatar a ocorrência de dois importantes parasitos em tambaqui Colossoma macropomum cultivado no estado de Tocantins, o acantocéfalo Neoechinorhynchus buttnerae e o protozoário dinoflagelado Piscinoodinium pillulare e também destacar os principais tratamentos para controlá-los. Os peixes examinados estavam infectados por N. buttnerae e P. pillulare, com prevalência de 100% e intensidade média de 51,4 a 354.264,4, respectivamente. Este foi o primeiro relato da ocorrência desses parasitos para C. macropomum no estado de Tocantins. Destaca-se a necessidade da adoção de boas práticas de manejo na produção e de manejo sanitário, para evitar a contaminação da propriedade e a transmissão para pisciculturas vizinhas. Em relação ao controle dessas parasitoses são apresentados os tratamentos com resultados positivos para C. macropomum, com o uso de produtos sintéticos e naturais.

Abstract This study aims to report the occurrence of two important parasites in farmed tambaqui Colossoma macropomum in the state of Tocantins, the acanthocephalan Neoechinorhynchus buttnerae and the dinoflagellate protozoan Piscinoodinium pillulare, also suggesting the main treatments to control them. The fish sampled for the study were infected by N. buttnerae, and P. pillulare, with prevalence from 100% and mean intensity from 51.4 to 354,264, respectively. This was the first report on the occurrence of such parasites in C. macropomum in the state of Tocantins. We emphasize the need to adopt good farm management and biosecurity practices to prevent pathogenic agents to enter or leave a property. Reported treatments with synthetic and natural products with positive results are also suggested to treat against those parasites in farmed C. macropomum.

RESUMO O objetivo deste artigo é identificar e avaliar a estabilidade genômica em células da medula óssea de cães com leishmaniose visceral naturalmente infectados. Um total de 32 cães participaram do estudo, sendo 24 animais assintomáticos, infectados naturalmente, e oito não infectados, utilizados como grupo controle. Os testes de ensaio de cometa e micronúcleo foram realizados em células da medula óssea obtidas por meio de punção aspirativa. Para análise dos dados, o teste de Shapiro- Wilk foi empregado para verificar a normalidade dos dados, e, em seguida, o teste de Mann-Whitney e o teste t para a comparação entre os grupos infectado e controle. A análise das amostras dos animais naturalmente infectados e dos animais saudáveis demonstrou que a infecção causada pelo protozoário responsável pela leishmaniose não foi capaz de induzir danos ao DNA das células dos animais infectados. Já nos resultados obtidos por meio do teste do micronúcleo, foi observado um aumento no número de micronúcleo em eritrócitos policromatofílicos no tecido medular do grupo infectado, quando comparado ao grupo controle, confirmando, assim, o potencial mutagênico da leishmaniose visceral em cães infectados naturalmente.

ABSTRACT The aim of this article is to identify and evaluate the genomic stability of visceral leishmaniasis in naturally infected dogs. A total of 32 dogs participated in the study, 24 of which were asymptomatic animals, naturally infected, and 8 uninfected, used as a control group. The comet and micronucleus assay tests were performed on bone marrow cells obtained by means of aspiration puncture. For data analysis, the Shapiro-Wilk test was used to verify the normality of the data, and then the Mann-Whitney and T-tests for the comparison between the infected and control groups. The analysis of samples from naturally infected animals and healthy animals showed that the infection caused by the protozoan responsible for leishmaniasis was not able to induce DNA damage in the cells of the infected animals. In the results obtained through the micronucleus test, an increase in the number of micronuclei were observed in polychromatophilic erythrocytes in the medullary tissue of the infected group, when compared to the control group. As a main contribution, the results expressed in this study, consider that the comet and micronucleus assays are suitable for the biomonitoring of genomic stability in bone marrow cells of naturally infected dogs with visceral leishmaniasis.

RESUMEN Algunos cultivos microbianos principalmente el uso de probióticos se han utilizado en la nutrición de rumiantes, generando un efecto positivo al solucionar los desbalances debido a cambios dietéticos en el rumen. El objetivo fue identificar y evaluar por conteo en cámara de Neubauer y PCR punto final bacterias y protozoarios ruminales presentes en ovinos suplementados con biopreparado de microorganismos (PNC) vs probiótico comercial REVET® (PCRE) a diferentes concentraciones. Se utilizaron 21 ovinos cruza Katahdin y Dorper de 3 meses de 18-25 Kg, se suplementaron con PNC y PCRE, a diferentes concentraciones: PNC 100%, 66%, 33%, testigo, PCRE 100%, 66%, 33%. El líquido ruminal se obtuvo a través de sonda, los microorganismos ruminales se contaron en cámara de Neubauer cada seis horas. La extracción de ADN genómico utilizando el kit Ultra Clean Microbial DNA, la cuantificación de ADN se realizó en un espectrofotómetro y las reacciones de PCR se realizaron con oligonucleótidos sintetizados por Invitrogen®. El análisis estadístico fue mediante el procedimiento GENMODE para el conteo de bacterias y protozoarios. La mayor cantidad de protozoarios fue a las 24 horas en PNC al 100%, seguido del PNC 33% a las 18 horas, para probiótico comercial PCRE al 66% a 12 horas. En cuanto a bacterias mostraron valores estadísticamente iguales. La cuantificación de ADN genómico fue mayor a 25 ng/µL. Se demostró el efecto inhibitorio del probiótico sobre Fibrobacter succinogenes en una concentración de 100%. Las bacterias totales no se vieron afectadas con la suplementación del probiótico. Por lo que se concluye que el probiótico no comercial puede ser una alternativa para complementar la dieta de los ovinos en crecimiento observándose un incremento de bacterias y protozoarios. Así mismo, los probióticos son un aditivo que puede ser utilizado con éxito ya que no modificó la población de bacterias totales en el rumen.

ABSTRACT Some microbial cultures, mainly the use of probiotics, have been used in ruminant nutrition, generating a positive effect by solving imbalances due to dietary changes in the rumen. The objective was to identify and evaluate bacteria and ruminal protozoa present in sheep supplemented with biopreparation of microorganisms (PNC) vs commercial probiotic REVET® (PCRE) at different concentrations by Neubauer chamber count and PCR endpoint. Twenty-one Katahdin and Dorper cross sheep of 3 months of 18-25 kg were used, they were supplemented with PNC and PCRE, at different concentrations: PNC 100%, 66%, 33%, control, PCRE 100%, 66%, 33%. The ruminal liquid was obtained through a probe, the ruminal microorganisms were counted in a Neubauer chamber every six hours. Genomic DNA extraction using the Ultra Clean Microbial DNA kit, DNA quantification was performed in a spectrophotometer, and PCR reactions were performed with oligonucleotides synthesized by Invitrogen®. Statistical analysis was through the GENMODE procedure for counting bacteria and protozoa. The highest amount of protozoa was at 24 hours in PNC at 100%, followed by PNC 33% at 18 hours, for commercial probiotic PCRE at 66% at 12 hours. Regarding bacteria, they showed statistically equal values. Genomic DNA quantification was greater than 25 ng/µL. The inhibitory effect of the probiotic on Fibrobacter succinogenes at a concentration of 100% was demonstrated. Total bacteria were not affected by probiotic supplementation. Therefore, it is concluded that the non-commercial probiotic can be an alternative to supplement the diet of growing sheep, observing an increase in bacteria and protozoa. Likewise, probiotics are an additive that can be used successfully since they did not modify the population of total bacteria in the rumen.

ABSTRACT Dientamoeba fragilis is a protozoan that parasitizes the large intestine of humans and domestic animals. To date, some aspects regarding D. fragilis life cycle, including hosts, reservoirs, infection mechanism, among others, are not yet clear. Swine are considered natural hosts for this protozoan, therefore their close contact with humans promotes its zoonotic transmission. In Colombia there are no studies on the presence of D. fragilis in animal hosts, including pigs, and data about other intestinal protozoa are scarce. The objective was to determine the prevalence of intestinal protozoan, including D. fragilis, in pigs raised in a farm from a rural area of Medellin (Andean region of Colombia). Fecal samples from 70 pigs in prefattening stage were collected. Direct fecal smear examination, trichrome and modified Ziehl-Neelsen stain were used in the study. Univariate analysis (frequency distribution and central tendency measures) and bivariate analysis were used to explore risk factors. Dientamoeba fragilis was found in 13% of the evaluated fecal samples. Other parasites detected included: Entamoeba spp. (66%), Blastocystis spp. (64%), Balantioides coli (36%), Cryptosporidium spp. (36%), Iodamoeba butschlii (17%), coccidias (4%), and Giardia spp. (1,4%). This is the first report of D. fragilis in swine in Colombia, and the high prevalence of other pathogen protozoa was also observed, which corroborates the role of pigs as important reservoirs for human infections. Studies focused on the evaluation of both swine and swine-exposed farm workers should be done in order to know the dynamics of transmission of this parasite.

RESUMEN Dientamoeba fragilis es un protozoário que parasita el intestino grueso del hombre y animales domésticos. Hasta el momento, aún no son claros aspectos de su ciclo de vida, como el rango de hospedadores, reservorios, mecanismo de infección, entre otros. Se postula que el cerdo es un hospedador natural para este protozoario y que, debido a su cercanía con el humano, podría facilitar una transmisión zoonótica. En Colombia no existen a la fecha estudios sobre la presencia de D. fragilis en hospedadores animales, incluidos los cerdos, y los datos sobre la prevalencia de otros protozoarios intestinales en estos animales son escasos. El objetivo fue determinar la frecuencia de protozoarios intestinales, incluyendo D. fragilis, en cerdos de una granja tecnificada de una zona rural de Medellín (región Andina de Colombia). Se recolectaron muestras de materia fecal de 70 cerdos en etapa de preceba, que fueron evaluadas mediante examen directo, tinción tricrómica y Ziehl-Neelsen modificado. Se realizaron análisis univariados con medidas de frecuencia relativa y tendencia central y análisis bivariados para la exploración de factores de riesgo. Se detectó la presencia de D. fragilis en un 13% de las muestras y de otros parásitos como Entamoeba spp. (66%), Blastocystis spp. (64%), Balantioides coli (36%), Cryptosporidium spp. (36%), Iodamoeba butschlii (17%), coccidias (4%) y Giardia spp. (1,4%). En este primer reporte de D. fragilis en cerdos en Colombia se observó la alta prevalencia de otros protozoarios patógenos, lo que corrobora el papel de los cerdos como importantes reservorios de infecciones humanas. Estudios sobre la presencia de este protozoario tanto en cerdos como en el personal encargado de su manejo contribuirían al conocimiento sobre su dinámica de transmisión.

RESUMO Toxoplasmose é uma zoonose determinada pelo protozoário Toxoplasma gondii de ampla distribuição geográfica, que acomete animais homeotérmicos, sendo os felídeos os seus hospedeiros definitivos, e outros mamíferos e aves os seus hospedeiros intermediários. Em relação à espécie de ave latino-americana Cairina moschata, há poucos relatos no Brasil da exposição desses animais a esse protozoário. Mediante o exposto, este estudo teve como objetivo relatar pela primeira vez a exposição de C. moschata à infecção por esse parasito no Rio de Janeiro, Brasil, determinando a frequência sorológica de anticorpos anti-T. gondii em aves dessa espécie. Foram capturados, nos arredores do Zoológico do Rio de Janeiro, 67 espécimes de C. moschata, sendo esses animais, no momento da captura, triados pelo gênero e pelo tipo de pena. Amostras de sangue desses animais foram obtidas por venopunção para obtenção do soro. As amostras de soro foram submetidas à RIFI para pesquisa de anticorpos IgG anti-T. gondii. De forma geral, a frequência de positividade evidenciada foi de 58,21% (n=39), sendo observada associação estatística significativa (P<0,05) entre animais com plumagem de adultos e soropositividade. A exposição dos patos a T. gondii nos arredores do zoológico pode indicar a contaminação dessa área com oocistos do protozoário.

ABSTRACT Toxoplasmosis is a zoonosis determined by the protozoan Toxoplasma gondii with wide geographic distribution, which affects homeothermic animals, with felids being their definitive hosts and other mammals and birds being their intermediate hosts. Regarding the Latin American bird species Cairina moschata, there are few reports in Brazil of the exposure of these animals to this protozoan. Based on the above, this study aimed to report for the first time the exposure of C. moschata to infection by this parasite in Rio de Janeiro, Brazil, determining the serological frequency of anti-T. gondii antibodies in birds of this species. Sixty-seven specimens of C. moschata were captured in the vicinity of the Rio de Janeiro Zoo, and these animals at the time of capture were sorted by gender and type of feather. Blood samples from these animals were obtained by venipuncture to obtain the serum. The serum samples were subjected to IFAT for anti-T. gondii IgG. In general, the frequency of positive results was 58.21% (n=39), with a statistically significant association (p<0.05) between the animals with adult plumage and seropositivity. The exposure of ducks to T. gondii in the vicinity of the Zoo may indicate contamination of this area with protozoan oocysts.