Resumen La tripanosomiasis Americana es una de las enfermedades tropicales desatendidas a nivel mundial, y es causada por el protozoario hemoflagelado Trypanosoma cruzi (Tc). Actualmente, los fármacos anti-Tc son limitados y no hay vacuna disponible. El objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto de las nanopartículas de plata (AgNPs) contra los tripomastigotes de las cepas Sylvio X10/4 (TcI) y Esmeraldo (TcII). Las AgNPs se obtuvieron por el método de reducción y se les realizó una caracterización estructural. La actividad citotóxica de las AgNPs (actividad anti-Tc) se determinó mediante el cálculo de los valores de la mitad de la concentración inhibitoria máxima (IC50) en las células HaCaT y en los parásitos. Las AgNPs no mostraron citotoxicidad contra las células HaCaT en los valores de IC50 probadas en los parásitos, y la IC50 calculada en los tripomastigotes fue de 4.05 µg/ml y de 6.16 µg/ml en las cepas TcI y TcII respectivamente. Las AgNPs fueron más activas contra las dos cepas de Trypanosoma cruzi, que el nifurtimox (400 µg/ml) in vitro. Estos resultados sientan las bases para la evaluación mayor de las AgNPs, por investigar su potencial quimioterapéutico para combatir la infección por T. cruzi en modelos animales.

Abstract American trypanosomiasis is one the globally neglected tropical disease, and is cause by the protozoan haemoflagellate Trypanosoma cruzi (Tc). Currently, the anti-Tc drugs are limited and no vaccine is available. The objective of the study was to determine the effects of silver nanoparticles (AgNPs) against trypomastigotes of the Sylvio X10/4 (TcI) and Esmeraldo (TcII) strains. The AgNPs were obtained by the reduction method and a structural characterization was carried out. The cytotoxic activity of the AgNPs (antiTc activity) was determined by calculating the values of half the maximum inhibitory concentration (IC50) in HaCaT cells and parasites. AgNPs showed no-cytotoxicity against HaCaT cells at the IC50 values assayed in parasites, and the calculated IC50 trypomastigotes was 4.05 µg/ml and 6.16 µg/ml for TcI and TcII strains, respectively. AgNPs were more active against both Trypanosoma cruzi strains than nifurtimox (400 µg/ml) in vitro assays. These results lay the groundwork for further evaluation of AgNPs, to investigate its chemotherapeutic value to figh T. cruzi infection in animal models.

Resumen Introducción. Cryptosporidium spp. es un parásito protozoario del grupo de los coccidios, causante de diarreas, trastornos gastroentéricos y respiratorios (baja frecuencia) en diferentes especies de vertebrados a nivel mundial, principalmente en individuos jóvenes. Objetivo. Documentar las características más importantes de virulencia y patogenia del Cryptosporidium spp. así como, la descripción de sus variantes genéticas y su potencial zoonótico. Desarrollo. Existen más de diecinueve especies de Criptosporidium spp., donde se destacan C. parvum (humanos), C. bovis (bovinos), C. suis (porcinos) y C. ubiquitum (aves), debido a su alta capacidad infectiva dada por la diversidad de sus factores de virulencia. El parásito posee afinidad por los enterocitos y genera anomalías en la absorción y funciones secretoras del intestino. La criptosporidiosis varía en función del estado del huésped (edad, nutrición e inmunología), la fuente de contaminación (agua o ingesta), transmisión e higiene. Existen técnicas de diagnóstico, desde pruebas coproscópicas convencionales hasta pruebas de biología molecular. Conclusión. Factores como la variabilidad y los factores de virulencia del Cryptosporidium spp, se consideran mecanismos que favorecen la infección y dispersión del parasito a nivel individual y grupal en humanos y animales domésticos, al igual que la complejidad del ciclo de vida, la resistencia a condiciones ambientales, la capacidad infectiva y la interacción con el huésped consolidan al Cryptosporidium spp. como un agente zoonótico con efectos económicos importantes.

Abstract Introduction. Cryptosporidium spp. is a protozoan parasite belonging to the group of coccidia, causing diarrhea, gastroenteric, and respiratory disorders (less frequently) in different vertebrate species worldwide, primarily in young individuals. Objective. To document the most important virulence and pathogenic characteristics of Cryptosporidium spp., as well as the description of its genetic variants and its zoonotic potential. Development. There are more of 19 species of Cryptosporidium spp., with C. parvum (humans), C. bovis (cattle), C. suis (swine), and C. ubiquitum (birds) being noteworthy due to their high infectivity capacity, given by the diversity of their virulence factors. The parasite has an affinity for enterocytes and causes abnormalities in the intestinal absorption and secretory functions. Cryptosporidiosis varies depending on the host's status (age, nutrition, and immunity), the source of contamination (water or ingestion), transmission, and hygiene. Diagnostic techniques range from conventional coproscopic tests to molecular biology tests. Conclusion. Factors such as the variability and virulence factors of Cryptosporidium spp. are considered mechanisms that favor the infection and spread of the parasite at an individual and group level in humans and domestic animals, as well as the complexity of its life cycle, resistance to environmental conditions, the infective capacity, and host interaction consolidate Cryptosporidium spp. as a zoonotic agent with significant economic effects.

ABSTRACT This study evaluated by molecular methods the presence of major canine tick-borne agents in ticks infesting domestic dogs of a hospital population in a neglected area of the southern zone of the São Paulo Metropolitan region, which is characterized by an extensive urban area surrounded and interspersed by forest remnants of the original Atlantic rainforest. During 2017, 106 tick specimens - 71 adults and 33 nymphs of Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s.l.), and two adults of Amblyomma aureolatum - were collected from 41 dogs that were attended in a Veterinary Teaching Hospital in São Paulo City, Brazil. By molecular analyses, 4.2% (3/71) of the R. sanguineus s.l. adult ticks contained the bacterium Rickettsia rickettsii, 2.8% (2/71) contained the bacterium Ehrlichia canis, and 4.2% (3/71) contained the protozoan Rangelia vitalii. These results indicate that domestic dogs of the southern zone of the São Paulo metropolitan region might be exposed to three of the major tick-borne agents affecting dogs in Brazil, R. rickettsii, E. canis and R. vitalii. In addition, the findings reinforce the circulation of the human pathogen R. rickettsii in the study area in a likely enzootic cycle involving dogs and R. sanguineus ticks.

RESUMO Este estudo avaliou, por métodos moleculares, a presença dos principais agentes etiológicos de doenças caninas transmitidas por carrapatos que infestam cães domésticos de uma população hospitalar, em uma área negligenciada da zona sul da região metropolitana de São Paulo, caracterizada por uma extensa área urbana circundada e intercalada por remanescentes florestais de Mata Atlântica. Durante o ano de 2017, 106 espécimes de carrapatos - 71 adultos e 33 ninfas de Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s.l.), e dois adultos de Amblyomma aureolatum - foram coletados de 41 cães atendidos em um Hospital Veterinário Universitário da cidade de São Paulo, Brasil. Por análises moleculares, 4,2% (3/71) de R. sanguineus s.l. adultos continham a bactéria Rickettsia rickettsii, 2,8% (2/71) continham a bactéria Ehrlichia canis e 4,2% (3/71) continham o protozoário Rangelia vitalii. Esses resultados indicam que cães domésticos da zona sul da região metropolitana de São Paulo podem estar expostos a três dos principais agentes carrapatos que afetam cães no Brasil, R. rickettsii, E. canis e R. vitalii. Além disso, os achados reforçam a circulação do patógeno humano R. rickettsii na área de estudo, em um provável ciclo enzoótico envolvendo cães e carrapatos R. sanguineus.

ABSTRACT Introduction. Giardiasis is caused by an intestinal protozoan, Giardia lamblia. Despite its high prevalence and geographical transmission variability, there is no risk stratification tool available to prioritize interventions. Objective. To estimate the prevalence of G. lamblia in Peruvian preschoolers and schoolchildren by ecoregion from 1990 to 2018. Methods. Based on a previous meta-analysis, we conducted a G. lamblia prevalence sub-analysis by ecoregions from data of 26 studies in Peruvian preschoolers and school-aged children between 1990 and 2018. The data was extracted by district, a classification by ecoregions was made through Google Earth. Heterogeneity was analyzed using Cochrane Q test and publication bias applying the Egger method with StatsDirect version 3.2.7. The absolute risk method was performed to stratify the prevalence at district level, and 4 strata were defined based on percentiles or arbitrarily. Results. Forty-three district-level prevalence data was estimated, including 7,606 participants. The highest pooled prevalences by the random effects method of G. lamblia were 47.0% (95% CI: 40.0-54.0) in the Pacific desert, 27.9% (95% CI: 22.8-33.2) in the lowland forest and 26.9% (95% CI 22.5-31.5) in the Puna. Conclusions. Of every 100 preschoolers and school-aged children living in the Pacific desert, lowland forest, and in the Puna ecoregions, 47, 28, and 27 minors are infected with G. lamblia, respectively. Likewise, 4 risk strata are proposed based on prevalence: sporadic (0 to <1%), hypoendemic (1 to <25%), mesoendemic (≥25 to <50%) and hyperendemic (≥50%).

RESUMEN Introducción. La giardiasis es ocasionada por el protozoario intestinal Giardia lamblia, su transmisión tiene variabilidad geográfica y a pesar de ser muy frecuente, no existe una herramienta de estratificación de riesgo para priorizar las intervenciones. Objetivo. Estimar la prevalencia de G. lamblia en preescolares y escolares peruanos por ecorregiones entre 1990 a 2018. Métodos. A partir de un metaanálisis previo, se realizó un subanálisis por ecorregiones de la prevalencia de G. lamblia en 26 estudios en preescolares y escolares peruanos entre 1990 a 2018. Se extrajeron los datos por distrito y utilizando Google Earth fueron clasificados en ecorregiones. La heterogeneidad fue analizada mediante la prueba de Q de Cochrane y el sesgo de publicación mediante el método de Egger con StatsDirect versión 3.2.7. Se utilizó el método de riesgo absoluto para estratificar la prevalencia a nivel de distrito y se definió 4 estratos en base a los percentiles o arbitrariamente. Resultados. Se identificaron 43 datos de prevalencia a nivel de distrito que incluyeron 7606 participantes. Las prevalencias combinadas más altas por el método de efectos aleatorios de G. lamblia fueron de 47,0% intervalo de confianza (IC) 95%: 40,0 -54,0) en el desierto del Pacífico; 27,9% (IC95%: 22,8 - 33,2) en selva baja y 26,9% (IC95%: 22,5 -31,5) en la Puna. Conclusiones. De cada 100 preescolares y escolares que viven en las ecorregiones del desierto del Pacífico, selva baja y Puna, 47, 28 y 27 menores de edad, respectivamente, están infectados con G. lamblia. Asimismo, se propone 4 estratos de riesgo en función de la prevalencia: esporádico (0 a <1%), hipoendémico (1 a <25%), mesoendémico (≥ 25 a <50%) e hiperendémico (≥50%).

ABSTRACT Neospora caninum is an important worldwide parasite responsible for causing abortion in animals. Due to limited information on the occurrence of infection by this parasite in the state of Rondônia, Brazil, this study aimed to determine the seroprevalence and identify the risk factors associated with the infection in slaughtered cattle, from 19 municipalities distributed in seven microregions of the state. A total of 494 samples were obtained and subjected to anti-N. caninum antibodies, using the Indirect Immunofluorescence Reaction technique. Antibodies were detected in 5.06% (25/494) of the samples, in 30.30% (10/33) of farms, in nine municipalities located in four microregions of Rondônia. Of all the animals analyzed, 4.81% of the females (20/416) and 6.41% of the males (05/78) were seropositive for the parasite, with “abortion in the last 12 months” being considered an important risk factor for the occurrence of infection (OR = 9.54; p = 0.01). The present study points out the prevalence of anti-N. caninum antibodies in 5.06% of slaughtered animals and abortion as the main risk factor associated with infection by N. caninum, thus contributing to the elucidation of the epidemiology of this protozoan in Rondônia, Brazil.

RESUMO Neospora caninum é um importante parasito, responsável por causar aborto em animais e distribuído mundialmente. Devido às informações limitadas sobre a ocorrência da infecção por esse parasito no estado de Rondônia, Brasil, este estudo teve como objetivo determinar a soroprevalência e identificar os fatores de risco associados à infecção em bovinos abatidos, oriundos de 19 municípios, distribuídos em sete microrregiões do estado. Um total de 494 amostras foi obtido e submetido à pesquisa de anticorpos anti-N. caninum, por meio da técnica de reação de imunofluorescência indireta. Os anticorpos foram detectados em 5,06% (25/494) das amostras, em 30,30% (10/33) das propriedades rurais, de nove municípios, localizados em quatro microrregiões de Rondônia. De todos os animais analisados, 4,81% das fêmeas (20/416) e 6,41% dos machos (05/78) foram soropositivos para o parasito, sendo o “aborto nos últimos 12 meses” considerado um importante fator de risco para a ocorrência da infecção (OR = 9,54; P = 0,01). O presente estudo aponta a prevalência de anticorpos anti-N. caninum em 5,06% dos animais abatidos e o aborto como o principal fator de risco associado à infecção por N. caninum, contribuindo assim para a elucidação da epidemiologia desse protozoário em Rondônia, Brasil.

Resumo A tripanossomíase é uma infecção por protozoário que afeta humanos e animais em quase todas as partes do mundo. Pode afetar grande variedade de hospedeiros domésticos e selvagens, incluindo camelídeos, equinos, gado, búfalos, ovelhas, cabras, porcos, cães e outros carnívoros, veados, gazelas e elefantes. Este artigo de revisão foi elaborado para abordar o efeito dessa doença economicamente importante em países do mar Vermelho, especialmente Egito, Sudão, Somália e Arábia Saudita, durante o período de 2010 a 2020. A prevalência de tripanossomíase é diferente entre esses países devido a tipos distintos de métodos diagnósticos (esfregaços de sangue corados com Giemsa, centrifugação de hematócrito, teste sorológico e PCR de análise molecular) usados e distribuição diferencial de moscas vetoras (tsé-tsé). Na revisão atual, foram realizados estudos retrospectivos da literatura publicada sobre distribuição e prevalência da infecção por Trypanosoma evansi nos países do mar Vermelho [Google Scholar e PubMed foram usados para recuperar a literatura publicada de 2000 a 2020. Um total de 77 artigos publicados preencheu os critérios de elegibilidade e foi revisado. E há também 16 relatos sobre a prevalência e distribuição da infecção por Trypnosoma evansi nos países do mar Vermelho, de 2010 a 2020]. De acordo com a literatura publicada, podemos afirmar que a tripanossomíase em camelos é mais prevalente no Sudão do que em outros países, seguida por 17% e 51,78% em casos clínicos e não clínicos. Assim, os testes diagnósticos confiáveis devem ser utilizados para o tratamento rápido ou controle da doença, pois, se eles não forem tratados de forma adequada na fase inicial, isso pode levar à morte dos camelos.

Abstract Trypanosomiasis is a protozoan infection affecting both human and animals in almost all parts of the world. It can affect a very large range of domestic and wild hosts including camelids, equines, cattle, buffaloes, sheep, goats, pigs, dogs and other carnivores, deer, gazelles and elephants. This review paper was designed to address the effect of this economically important disease in countries on the Red Sea, especially in Egypt, Sudan, Somalia, and Saudi Arabia during the period 2010 to 2020. The prevalence of trypanosomiasis is different between these countries due to different types of diagnostic methods (Giemsa-stained blood smears, Hematocrit centrifugation, Serological test, and molecular analysis PCR) used and differential distribution of vector (Tse tse) flies. In current review, retrospective studies of published literature on distribution and prevalence of Trypanosoma evansi infection in the Red Sea Countries was conducted [Google Scholar and PubMed were used to retrieve the published literature from 2000-2020. A total of 77 published articles met the eligibility criteria and were reviewed. A total of 16 reports have been reported on the prevalence and distribution of Trypnosoma evansi infection in the Red Sea Countries have been from 2010-2020]. According to the published literature, we can say that trypanosomiasis in camels are more prevalent in Sudan than in other countries, followed by 17% and 51.78% in both clinical and non-clinical cases. Hence, the reliable diagnostic tests should be used for rapid treatment or control of the disease as if not treated appropriately in early-stage, can lead to death of the camels.

RESUMO: Objetivou-se com o estudo detectar Cryptosporidium sp. em ostras de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão e determinar o(s) tecido(s) eletivo(s) para pesquisa desse protozoário. Para a realização do estudo foram adquiridas 200 ostras de cultivo do município de Raposa e 100 de Paço do Lumiar, além de 100 ostras extraídas de estoque natural do município de Primeira Cruz, totalizando 400 ostras. Estas foram agrupadas em 80 pools constituídos por cinco animais. De cada pool, as brânquias e a massa visceral foram removidas totalizando 160 pools, sendo 80 para o grupo das brânquias e 80 para o grupo de massa visceral. Na sequência, procedeu-se à extração de DNA de cada pool com a utilização de kit comercial com modificações. Posteriormente, realizou-se a detecção do DNA do protozoário por meio da técnica de Nested-PCR. Com a técnica utilizada, foi detectado o DNA do protozoário pesquisado em 2,5% (n=2/80) pools apenas de brânquias, sendo 1,25% pools (n=1/80) oriundos de cultivo e os outros 1,25% (n=1/80) de estoque natural. Com os resultados obtidos nesse estudo, conclui-se que as ostras analisadas do gênero Crassostrea sp., oriundas de cultivo e estoque natural no estado do Maranhão, estavam contaminadas por Cryptosporidium sp. e podem se reverter em fontes potenciais para seres humanos e outros animais. Para a pesquisa de Cryptosporidium sp. em ostras, as brânquias são o tecido eletivo.

ABSTRACT: This study detected Cryptosporidium spp. in cultivated oysters and the natural oyster stock of the state of Maranhão and determine the elective tissue(s) to examine this protozoan. For this purpose, 200 cultivated oysters were purchased from the municipality of Raposa and another 100 from Paço do Lumiar. Additionally, 100 oysters were extracted from the natural stock of the municipality of Primeira Cruz, thus making up a total of 400 oysters. They were grouped into 80 pools consisting of 5 oysters each. From each pool, the gills and visceral mass were removed to obtain 160 pools, 80 pools for the gill group and another 80 for the visceral mass group. Then, DNA was extracted from each pool using a commercial kit with modifications. Subsequently, the protozoan DNA was detected using nested polymerase chain reaction. With this technique, the DNA of the protozoan under investigation was detected in 2.5% (n = 2/80) of the pools containing gills, with 1.25% of the pools (n = 1/80) belonging to the cultivation group of oysters and the other 1.25% (n = 1/80) to the natural stock. With the results obtained in this study, it was concluded that the analyzed oysters of the genus Crassostrea, from cultivation and natural stock groups, found in the state of Maranhão, were contaminated by Cryptosporidium spp. and may become potential sources of infection in humans and other animals. In addition, the gills are the elective tissue for the study of Cryptosporidium spp. in oysters.

RESUMO: A leishmaniose é um grande problema de saúde pública que afeta tanto humanos quanto animais. A doença é causada pelo protozoário Leishmania spp., que possui um ciclo complexo envolvendo um vetor flebotomíneo. O teste ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), juntamente com um imunoensaio cromatográfico, foi definido pelo Ministério da Saúde do Brasil como protocolo de triagem confirmatória em 2011. A cidade de Uruguaiana fica a 630 km de Porto Alegre, o que dificulta o envio de amostras e o diagnóstico da leishmaniose, além da demora para obter os resultados. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar um método de ELISA indireto in-house comparado ao ensaio de imunofluorescência indireta (IFA) e imunoensaio cromatográfico de plataforma de dupla via (DPP-BioManguinhos®) para a detecção de uma resposta imune contra Leishmania spp. na espécie canina. A avaliação sorológica incluiu 48 caninos da fronteira oeste do Brasil (cidade de Uruguaiana e Barra do Quaraí). Das 48 amostras caninas testadas, 18 foram positivas na técnica de ELISA, 19 foram positivas com IFA e 17 foram positivas com o teste rápido DPP®. A técnica de ELISA apresentou sensibilidade/especificidade de 83,3%/86,7% quando comparada ao IFA e 100%/96,8% em relação ao DPP®. O presente estudo apresentou prevalência de 37,5%, demonstrando que a infecção circula na população estudada. Pode-se concluir que a técnica de ELISA foi valiosa para uso em condições de campo na realização de testes de triagem em áreas endêmicas.

ABSTRACT: Leishmaniosis is a great public health problem affecting both humans and animals. The disease is caused by the protozoan Leishmania spp., which has a complex cycle involving a phlebotomine vector. The ELISA test (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) along with a chromatographic immunoassay was defined by the Brazil Health Ministry as the confirmatory screening protocol in 2011. Uruguaiana city is 630 km away from Porto Alegre, which makes it difficult to send samples and diagnose leishmaniasis, as well as receive quick results. In view of this, the present study evaluated an in-house indirect ELISA method compared to indirect immunofluorescence assay (IFA) and dual-path platform chromatographic immunoassay (DPP-BioManguinhos®) for the detection of an immune response to Leishmania spp. in canine species. The serological evaluation included 48 canines from the western border of Brazil (Uruguaiana and Barra do Quaraí city). Among the 48 canine samples tested, 18 were positive when using the ELISA technique, 19 were positive with IFA, and 17 were positive with rapid test DPP®. The ELISA technique showed a sensitivity/specificity of 83.3%/86.7% when compared to IFA and 100%/96.8% compared to DPP®. The present study showed a prevalence of 37.5%, demonstrating that the infection circulates in the studied population. It can be concluded that the ELISA technique was valuable for use in field conditions when performing screening tests in endemic areas.

Abstract This study aims to report the occurrence of two important parasites in farmed tambaqui Colossoma macropomum in the state of Tocantins, the acanthocephalan Neoechinorhynchus buttnerae and the dinoflagellate protozoan Piscinoodinium pillulare, also suggesting the main treatments to control them. The fish sampled for the study were infected by N. buttnerae, and P. pillulare, with prevalence from 100% and mean intensity from 51.4 to 354,264, respectively. This was the first report on the occurrence of such parasites in C. macropomum in the state of Tocantins. We emphasize the need to adopt good farm management and biosecurity practices to prevent pathogenic agents to enter or leave a property. Reported treatments with synthetic and natural products with positive results are also suggested to treat against those parasites in farmed C. macropomum.

Resumo Este estudo teve como objetivo relatar a ocorrência de dois importantes parasitos em tambaqui Colossoma macropomum cultivado no estado de Tocantins, o acantocéfalo Neoechinorhynchus buttnerae e o protozoário dinoflagelado Piscinoodinium pillulare e também destacar os principais tratamentos para controlá-los. Os peixes examinados estavam infectados por N. buttnerae e P. pillulare, com prevalência de 100% e intensidade média de 51,4 a 354.264,4, respectivamente. Este foi o primeiro relato da ocorrência desses parasitos para C. macropomum no estado de Tocantins. Destaca-se a necessidade da adoção de boas práticas de manejo na produção e de manejo sanitário, para evitar a contaminação da propriedade e a transmissão para pisciculturas vizinhas. Em relação ao controle dessas parasitoses são apresentados os tratamentos com resultados positivos para C. macropomum, com o uso de produtos sintéticos e naturais.

RESUMO A tripanossomíase bovina é causada pelo protozoário Trypanosoma vivax. A transmissão biológica ocorre apenas no continente africano pela mosca Tsé-tsé, de forma mecânica por dípteros hematófagos em todos os continentes, ou pelo compartilhamento de agulhas e por práticas associadas. O estudo teve como objetivo relatar o primeiro diagnóstico parasitológico, sorológico e molecular de T. vivax em bovinos leiteiros provenientes de cinco propriedades do município de Unaí, Minas Gerais, Brasil. Cento e quinze animais selecionados por conveniência apresentavam sinais clínicos ou pertenciam a lotes de animais suspeitos. Foram detectados positivos pelos testes parasitológico (técnica de Woo), sorológico (ELISA) e molecular (LAMP). A maior prevalência global para T. vivax foi de 11,11% na propriedade A. O único sinal clínico dos animais positivos estudados foi baixa taxa de concepção. O primeiro diagnóstico de tripanossomíase no noroeste mineiro é extremamente importante, haja vista o tamanho do rebanho leiteiro da região e as possíveis perdas econômicas provocadas pela enfermidade. Ademais, faz-se necessário maior controle sanitário na região, uma vez que a transmissão no Brasil é intimamente ligada às práticas de compartilhamento de agulhas no manejo dos animais e ao parasitismo de moscas hematófagas.

Abstract Toxoplasma gondii is an intracellular zoonotic protozoan parasite usually infects human and animal worldwide. This study aimed to analyze the sero-prevalence of T. gondii in blood of lactating animals and human living in close proximity and also to detect Toxoplasma DNA in unpasteurized milk of the studied animals. A total of 233 blood and milk samples were collected from lactating animals, and 735 blood samples were taken from humans in District Upper Dir, Khyber Pakhtunkhwa, Pakistan. The blood samples were analyzed through ELISA while the milk samples were analyzed by PCR for the presence of T. gondii DNA. A standard questionnaire was introduced to collect the data from the participants. In animals, the reported sero-prevalence was 32.18% for IgM, 17.16% for IgG, and 6.4% for both IgM and IgG. The reported positivity for T. gondii DNA in milk was 14.44%, 34.8%, 20%, and 26% in sheep, goats, cows, and buffaloes, respectively. In the human blood samples, 9.8% were found positive for IgM and 11.2% for IgG while none of the samples was found positive for both IgM and IgG. Overall sero-prevalence reported in females was significantly higher than the male (p<0.05) poor hygiene condition (p < 0.0001) were the significant risk factors associated with T. gondii infections in animals. In conclusion, T. gondii infection is prevalent in lactating animals and humans using their raw milk in the study area. It is suggested that raw milk should be considered as a vehicle for the transmission of T. gondii to humans. Proper pasteurization of milk is very useful in limiting the transmission of infection. Awareness and control programs should be implemented to prevent the infection.

Resumo Toxoplasma gondii é um protozoário parasita intracelular zoonótico que geralmente infecta humanos e animais em todo o mundo. Este estudo teve como objetivo analisar a soroprevalência de T. gondii no sangue de animais lactantes e humanos que vivem em proximidade, além de detectar o DNA de Toxoplasma no leite não pasteurizado dos indivíduos estudados. Um total de 233 amostras de sangue e leite foram coletadas de animais lactantes e 735 amostras de sangue foram coletadas de humanos no Distrito Upper Dir Khyber Pakhtunkhwa, no Paquistão. As amostras de sangue foram analisadas pelo método ELISA enquanto as amostras de leite foram analisadas por PCR para a presença de DNA de T. gondii. Um questionário padrão foi introduzido para coletar os dados dos participantes. Em animais, a soroprevalência relatada foi de 32,18% para IgM, 17,16% para IgG e 6,4% para IgM e IgG. A positividade relatada para DNA de T. gondii encontrada no leite foi de 14,44%, 34,8%, 20% e 26% em ovelhas, cabras, vacas e búfalas, respectivamente. Nas amostras de sangue humano, 9,8% foram consideradas positivas para IgM e 11,2% para IgG, enquanto nenhuma das amostras foi considerada positiva para IgM e IgG. A soroprevalência geral relatada em mulheres foi significativamente maior do que em homens (p < 0,05). Neste estudo, contato com gatos (p < 0,0001), hábitos alimentares (p < 0,0001), fonte de água para beber (p < 0,0001) e más condições de higiene (p < 0,0001) foram os fatores de risco significativos associados a infecções por T. gondii em animais. Em conclusão, a infecção por T. gondii é prevalecente em animais lactantes e humanos que utilizam leite cru, isto é, não-pasteurizado, na área de estudo. Sugere-se que o leite não-pasteurizado seja considerado um veículo de transmissão do T. gondii para humanos. A pasteurização adequada do leite é muito útil para limitar a transmissão de infecções. Programas de conscientização e controle devem ser implementados para prevenir a infecção.

Abstract Rhodnius neglectus is a wild triatomine, vector of the protozoan Trypanosoma cruzi, which causes Chagas’ disease, and feeds on the blood of small mammals, being essential for its growth and reproduction. Accessory glands of the female reproductive tract are important in insect reproduction, but their anatomy and histology in R. neglectus are poorly studied. The aim of this work was to describe the histology and histochemistry of the accessory gland of the female reproductive tract of R. neglectus. The reproductive tract of five females of R. neglectus was dissected and the accessory glands transferred to Zamboni's fixative solution, dehydrated in a crescent series of ethanol, embedded in historesin, sectioned at 2 µm thick, stained with toluidine blue for histological analysis or mercury bromophenol blue for detection of total proteins. The accessory gland R. neglectus is tubular, without branches, opening in the dorsal region of the vagina and differing along its length in proximal and distal regions. In the proximal region, the gland is lined by the cuticle with a layer of columnar cells associated with muscle fibers. In the distal region of the gland, the epithelium has spherical secretory cells with terminal apparatus and conducting canaliculi opening in the lumen through pores in the cuticle. Proteins were identified in the gland lumen, terminal apparatus, nucleus and cytoplasm of secretory cells. The histology of the R. neglectus gland is similar to that found in other species of this genus, but with variations in the shape and size of its distal region.

Resumo Rhodnius neglectus é um triatomíneo silvestre, vetor do protozoário Trypanosoma cruzi, causador da doença de Chagas. Este inseto se alimenta do sangue de pequenos mamíferos, que é essencial para o seu crescimento e reprodução. As glândulas acessórias do sistema reprodutor feminino são importantes na reprodução de insetos, mas sua anatomia e histologia em R. neglectus são pouco conhecidas. O objetivo deste trabalho foi descrever a histologia e histoquímica da glândula acessória do aparelho reprodutor feminino de R. neglectus. O sistema reprodutor de cinco fêmeas de R. neglectus foi dissecado e as glândulas acessórias transferidas para solução fixadora de Zamboni, desidratadas em série crescente de etanol, embebidas em historesina, seccionadas com 2 µm de espessura, coradas com azul de toluidina para análise histológica ou submetidas ao teste de mercúrio-bromofenol para detecção de proteínas totais. O sistema reprodutor de R. neglectus tem uma glândula acessória tubular, sem ramificações, abrindo-se na região dorsal da vagina, sendo diferenciada em regiões proximal e distal. Na região proximal, a glândula é revestida internamente pela cutícula com uma camada de células colunares associadas a fibras musculares. Na região distal ocorrem células secretoras esféricas com aparato terminal e canalículos condutores que se abrem no lúmen da glândula através de poros na cutícula. O teste histoquímico revelou a presença de proteínas no lúmen da glândula e no aparato terminal, núcleo e citoplasma das células secretoras. A histologia da glândula de R. neglectus é semelhante à das espécies desse gênero, mas com variações na forma e no tamanho de sua região distal.

Abstract Canine visceral leishmaniasis is a disease caused by the protozoon Leishmania infantum, an important agent of zoonotic concern. In this study we determined the seroprevalence, risk factors and spatial distribution of infection by L. infantum among dogs in the Pajeú microregion of the Sertão region of Pernambuco, Brazil. Canine serum samples (n = 247) were tested using the Dual Path Platform (DPP®) rapid screening test and ELISA/S7® confirmatory test; and risk factors were assessed through univariate analysis and logistical regression. The spatial distribution of reactive dogs was analyzed by drawing a map using QGIS. Seroprevalence of 13.7% (34/247) was detected, with cases predominating in the municipality of Tabira (26.4%; 9/34). Age above 10 years was considered to be a risk factor associated with the presence of anti-L. infantum antibodies. The high overall prevalence and spatial distribution of positive cases showed wide dispersion of reagents dogs in the study area. Therefore, preventive measures are needed in order to reduce the risk of infection for animals and humans.

Resumo Leishmaniose Visceral Canina é uma doença causada pelo protozoário Leishmania infantum, importante agente zoonótico. O objetivo deste estudo foi determinar a soroprevalência, avaliar os fatores de risco e a distribuição espacial da infecção por L. infantum em cães da microrregião do Pajeú, Sertão de Pernambuco, Brasil. Amostras de soro canino (n=247) foram testadas (“Dual Path Platform Rapid Test” - TR DPP® (triagem); ELISA/S7 (confirmatório)), e os fatores de risco avaliados por meio de análise univariada e regressão logística. A distribuição espacial dos cães reagentes foi analisada por meio de mapas confeccionados no programa QGIS. Detectou-se soroprevalência de 13,7% (34/247), com predominância dos casos no município de Tabira (26,4%; 9/34). A idade acima de 10 anos foi considerada fator de risco associado à presença de anticorpos anti-L. infantum. A alta prevalência e distribuição espacial dos casos positivos revelou ampla dispersão de cães reagentes na área de estudo. Portanto, medidas preventivas são necessárias a fim de reduzir o risco de infecção para os animais e humanos.

ABSTRACT: A variety of laboratory techniques are used in parasitological diagnosis. However, studies that analyze their laboratory efficiency are very scarce, especially with regard to biological samples from wild animals that are little known, with little popular attachment, such as artiodactyls. These can be infected by different parasites, including protozoa of the phylum Ciliophora, which includes the parasites Balantioides coli and Buxtonella sulcata. In this light, the aim of this study was to compare the efficiency of five coproparasitological techniques for diagnosing protozoan cysts of the phylum Ciliophora in the feces of free-living artiodactyls. To this end, 101 fecal samples were collected from trails in Pedra Selada State Park, Rio de Janeiro state, from 2020 to 2021. All the samples were analyzed using the qualitative techniques of modified Sheather floatation, modified Ritchie sedimentation and Lutz, as well as the quantitative techniques of Mini-FLOTAC and McMaster. Cyst recovery was best achieved using the modified Ritchie technique, in which 62.5% positivity was detected, followed by Lutz (47.5%), modified Sheather (37.5%) and the quantitative techniques of Mini-FLOTAC (30%) and McMaster (17.5%). In most of the comparisons between the techniques, reasonable agreement regarding the diagnosis was observed (Kappa 0.21 to 0.40), which was statistically significant (p≤0.05). McMaster showed higher mean and standard deviation values for counts of cysts per gram of feces than Mini-FLOTAC. However, there was no significant difference in the estimates for cyst counts (Wilcoxon p>0.05). Sedimentation qualitative techniques were more indicated for diagnosing cysts of protozoa of the phylum Ciliophora in the feces of free-living wild artiodactyls. These techniques can therefore be used as laboratory tools for environmental parasite monitoring. In addition, between the two quantitative techniques, Mini-FLOTAC presented better performance, thus showing its potential as a tool for estimating the abundance of cystic forms of the phylum Ciliophora in environmental samples.

RESUMO: Diversas são as técnicas laboratoriais utilizadas no diagnóstico parasitológico. No entanto, estudos que analisam a eficiência laboratorial das mesmas são muito escassos, principalmente quando se trata de amostras biológicas de animais silvestres, que possuem pouca divulgação e apego popular, como os artiodáctilos. Estes podem se infectar por diferentes parasitos, incluindo os protozoários do Filo Ciliophora, no qual se inclui Balantioides coli, bem como Buxtonella sulcata. Mediante o exposto, este estudo objetivou comparar a eficiência entre cinco técnicas coproparasitológicas para o diagnóstico de cistos de protozoário do Filo Ciliophora em fezes de artiodáctilos em vida livre. Entre 2020 e 2021 foram coletadas 101 amostras fecais em trilhas do Parque Estadual da Pedra Selada localizado no estado do Rio de Janeiro. Todas as amostras foram analisadas pelas técnicas qualitativas de flutuação de Sheather modificada, sedimentação de Ritchie modificada e Lutz, bem como por meio das técnicas quantitativas de Mini-FLOTAC e McMaster. Pode-se verificar uma superioridade na recuperação dos cistos por meio da técnica de Ritchie modificada, no qual foi detectado 62,5% de positividade, seguida pelo Lutz (47,5%), Sheather modificada (37,5%) e pelas técnicas quantitativas de Mini-FLOTAC (30%) e McMaster (17,5%). Na maioria das comparações entre as técnicas foi possível verificar uma concordância razoável (Kappa 0,21 a 0,40) em relação ao diagnóstico entre as mesmas, sendo este estatisticamente significativo (p≤0,05). McMaster em comparação com o Mini-FLOTAC foi a que apresentou os maiores valores médio e de desvio padrão na contagem dos cistos por grama de fezes. No entanto, não foi evidenciado diferença significativa na estimativa de contagem dos cistos (Wilcoxon=p>0,05). Pode-se verificar que as técnicas qualitativas de sedimentação foram consideradas as mais indicadas para o diagnóstico de cistos do protozoário do Filo Ciliophora em fezes de artiodáctilos silvestres em vida livre, podendo ser utilizadas como ferramentas laboratoriais de monitoramento parasitário ambiental. Além disso, dentre as técnicas quantitativas, o Mini-FLOTAC foi a que apresentou a melhor performance, denotando o seu potencial como uma ferramenta para se estimar a abundância de formas císticas do Filo Ciliophora em amostra ambiental.

Abstract The objectives of this work were to investigate the occurrence of parasites in feces of cats, compare different coproparasitological techniques for their diagnosis and determine associations with parasitism. The samples were processed using three different coproparasitological techniques: centrifugal flotation in sucrose, centrifugal flotation in ZnSO4 and simple sedimentation. The parasitic association between parasitism and variables such as age, sex and fecal consistency was performed using the chi-square test or the G test with a significance level of 5%. A total of 237 samples were analyzed, of which 93 (39.2%) were positive, being Ancylostoma spp. (17.3%), Giardia intestinalis (12.2%), Platynosomum illiciens (8.0%), Cystoisospora spp. (6.3%), Toxoplasma gondii/ Hammondia hammondi (3.4%), Diphyllobothriidae (2.1%), Toxocara spp. (1.7%), Dipylidium caninum (1.3%) and Mesocestoides spp. (0.8%). In the parasitism association analysis, it was possible to verify a statistical difference in the age category for Cystoisospora spp. (p=0.001) observing a strong relationship between parasitism and young animals, the association with sex proved to be important for P. illiciens (p<0.001) with a higher frequency of parasitized females and fecal consistency revealed to be related to the parasites G. intestinalis (p=0.007) and P. illiciens (p=0.033) showing a higher number of positive animals for these parasites with normal fecal consistency. In conclusion, we observed a higher occurrence of Ancylostoma spp. and G. intestinalis in fecal samples from domestic cats received in routine diagnoses and the presence of other parasites with zoonotic potential, as well as the relationship of these diagnosed parasites with the categories sex, age and fecal consistency.

Resumo Os objetivos deste trabalho foram investigar a ocorrência de parasitos em fezes de gatos, comparar diferentes técnicas coproparasitológicas para o seu diagnóstico e determinar as associações com o parasitismo. As amostras foram processadas usando três diferentes técnicas coproparasitológicas: centrífugo-flutuação em sacarose, centrífugo-flutuação em ZnSO4 e sedimentação simples. A associação parasitária entre o parasitismo e variáveis, como idade, sexo e consistência fecal, foi realizada pelo teste de qui-quadrado ou teste de G com nível de significância de 5%. No total, foram analisadas 237 amostras, das quais 93 (39,2%) foram positivas, sendo diagnosticados os parasitos Ancylostoma spp. (17,3%), Giardia intestinalis (12,2%), Platynosomum illiciens (8,0%), Cystoisospora spp. (6,3%), Toxoplasma gondii/ Hammondia hammondi (3,4%), Diphyllobothriidae (2,1%), Toxocara spp. (1,7%), Dipylidium caninum (1,3%) e Mesocestoides spp. (0,8%). Na análise de associação entre o parasitismo e as outras variáveis, foi possível verificar diferença estatística na categoria idade para Cystoisospora spp. (p=0,001), observando forte relação entre o parasitismo e animais jovens. A associação com o sexo demonstrou ser importante para P. illiciens (p<0,001), com maior frequência de fêmeas parasitadas. E a consistência fecal revelou ter relação com os parasitos G. intestinalis (p=0,007) e P. illiciens (p=0,033), com maior frequência de fezes com consistência normal nos animais positivos para esses parasitos. Em conclusão, foi observada uma maior ocorrência de Ancylostoma spp. e G. intestinalis em amostras fecais de gatos domésticos, recebidas em diagnósticos de rotina e a presença de outros parasitos com potencial zoonótico, como também, a relação desses parasitos diagnosticados com as categorias sexo, idade e consistência fecal.