SUMMARY Introduction: Biofilm-forming pathogens increase the risk of biological food contamination in food industries, thus it is necessary to quantify and qualify the dangers present in them. Objective: To demonstrate the presence of bacterial biofilms on the work surfaces of military food facilities using different rapid hygienic control techniques. Materials and methods: An amount of 550 samples were analyzed among 10 military food facilities: Each one had 5 sampling points (n = 50) and in each of them 11 samples were obtainded on a surface of 100 cm2 to assess the presence of biofilms and to establish the correlation between different analytical techniques: determination of adenosin triphosphate (ATP) using 3M Clean-Trace ™ NG3 luminometer, protein residue titration with Clean-Trace ™ Surface Protein Plus swabs, mesophilic aerobic microorganism (AC) counts using TEMPO® and Petrifilm ™ system, and visualization of biofilms using enzymatic reaction with Biofinder®. Results: A statistically significant correlation (p <0.05) was found between ATP determinations and the presence of biofilms and protein residues. Linearity with statistical significance (R2 0.422, p <0.05) was also found between ATP and AC count by TEMPO®. Correlation and concordance between AC counts were observed using the TEMPO® system and through Petrifilm ™ (intraclass correlation coefficient 0.463, 95% CI: 0.179-0.673, p <0.05). At no sampling point (SP) were pathogenic bacteria detected. Conclusion: Combining quick techniques should be considered in surveillance procedures of Hazard Analysis and Critical Control Points (HACCP).

RESUMEN Introducción: Los patógenos formadores de biofilms incrementan el riesgo de contaminación biológica de los alimentos en las industrias alimentarias, por lo que es necesario cuantificar y cualificar los peligros presentes en los mismos. Objetivo: Se pretende demostrar la presencia de biofilms bacterianos en las superficies de trabajo de instalaciones alimentarias militares (IAM) mediante distintas técnicas rápidas de control higiénico. Material y métodos: Se analizaron un total de 550 muestras entre las 10 IAM: Cada IAM contó con 5 puntos de muestreo (n = 50) y en cada uno de ellos se obtuvieron 11 muestras sobre una superficie de 100 cm2, para poner de manifiesto la presencia de biofilms y establecer la correlación entre las siguientes técnicas analíticas: determinación de adenosín trifosfato (ATP) mediante luminómetro 3M Clean-Trace™ NG3, valoración de residuos proteicos con hisopos Clean-Trace™ Surface Protein Plus, recuentos de microorganismos aerobios mesófilos (AC) mediante sistema TEMPO® y Petrifilm™, y visualización de biofilms mediante reacción enzimática con Biofinder®. Resultados: Se encontró correlación estadísticamente significativa (p < 0,05) entre las determinaciones de ATP y la presencia de biofilms y de residuos proteicos. También se halló linealidad con significación estadística (R2 0,422, p < 0,05) entre el ATP y el recuento de AC por TEMPO®. Se observó correlación y concordancia entre los recuentos de AC mediante el sistema TEMPO® y a través de Petrifilm™ (coeficiente de correlación intraclase 0,463, IC 95%: 0,179-0,673, p < 0,05). En ningún punto de muestreo (PM) se detectaron bacterias patógenas. Conclusión: Se detectaron biofilms en una tercera parte de los PM inspeccionados. Su monitorización combinando técnicas rápidas debe tenerse en consideración en los procedimientos de vigilancia del sistema de Análisis de Peligros y Puntos de Control Crítico (APPCC).

Abstract Background: Homemade cheese is part of the nutritional culture of the Ecuadoran population; however, few studies have been done in relation to the microbiological quality of cheese made rustically by farmers in the north of province Manabi. Aim. To evaluate the quality of milk and homemade cheese produced rustically by farmers in the north of province Manabi. Materials and Methods : A microbiological analysis was performed to 156 samples of milk and cheese, using the petrifilm method, for quantification of total aerobial, mesophilic, and coliform microorganisms, in addition to Enterobacteria, fungi, yeasts, and Staphylococcus aureus. They were compared to the Ecuadoran standards. The values were log10 UFC/mL (milk) and UFC/g (cheese). Results: Statistically significant values (p˂0.001) were obtained between rustic raw milk and homemade cheese, which made them unsuitable for consumption in relation to the following indicators: mesophiles (6.24 and 8.41); total coliforms (5.40 and 7.26); Enterobacteria (4.40; 6.44); fungi and yeasts (3.52 and 5.16), and S. aureus (4.33 and 5.99). The correlation coefficient found between milk and cheese for all the microorganisms was above 0.65 in all the cantons. Conclusions: The milk and fresh homemade cheese produced rustically in the four cantons studied failed to meet the sanitary and hygienic standards, going beyond the microbiological limits set by the national standards, which were especially significant in canton EL Carmen, and moderately among these dairies for each indicator microorganism.

Resumen Antecedentes: El queso artesanal constituye parte de la cultura alimentaria de la población ecuatoriana, sin embargo, en la zona norte de la provincia de Manabí existen pocos estudios relacionados con la calidad microbiológica del queso elaborado por productores. Objetivo. Evaluar la calidad sanitaria de la leche y el queso de elaboración artesanal en productores de la zona norte de la provincia de Manabí. Materiales y métodos: Se realizó análisis microbiológico a 156 muestras de leche y queso por el método petrifilm para el recuento de microorganismos aerobios mesófilos, coliformes totales, Enterobacterias, hongos y levaduras y Staphylococcus aureus. Se compararon con los requisitos establecidos en la norma ecuatoriana. Los valores se expresan en log10 UFC/mL (leche) y UFC/g (queso). Resultados: Se obtuvo valores de microorganismos con diferencias significativas (p˂0,001) entre la leche cruda y el queso artesanal resultando no aptos para el consumo en los indicadores: aerobios mesófilos (6,24 y 8,41); coliformes totales (5,40 y 7,26); Enterobacterias (4,40; 6,44); hongos y levaduras (3,52 y 5,16) y S. aureus (4,33 y 5,99). Se encontró un coeficiente de correlación superior a 0,65 entre la contaminación de la leche y el queso para todos los microorganismos en los cantones. Conclusiones: La leche y el queso fresco artesanal proveniente de los cuatro cantones estudiados no cumplen con los requisitos de calidad higiénico sanitaria, superan los límites microbiológicos establecidos en la normativa nacional, con elevada significación en el cantón El Carmen y una relación moderada entre estos productos para cada microorganismo indicador.

El objetivo de este estudio fue determinar la condición higiénica sanitaria de los centros de expendio de carne de pollo (CP) crudo de los mercados principales de la ciudad de Huánuco-Perú. Se muestrearon 50 establecimientos que expenden CP cruda. En cada uno de los locales se tomaron muestras de 200 g de carne, las cuales fueron procesadas en el LM-FMVZ UNHV. Para la detección de Escherichia coli, se empleó placas Petrifilm EC de acuerdo al método oficial y para Salmonella spp., el ensayo Salmonella Express System (SALX) en placas 3M Petrifilm. Paralelamente, para evaluar las condiciones higiénicas sanitarias de los establecimientos y de los responsables del expendio de carne, se aplicó un cuestionario de buenas prácticas de manipulación. Se observó que todas las muestras se encontraban contaminadas, con UFC/g PF de E. coli, en promedio 1988 UFC/g PF±3.74 de E. coli. Y en cuanto a Salmonella spp., todos los casos fueron positivos a la misma. Además, se demuestran condiciones higiénicas sanitarias deficientes y regulares de infraestructura. Por tanto, el expendio de CP cruda no cumple con las buenas prácticas de manipulación de alimentos. En los mercados de Huánuco, la CP expendida está considerada por la NTP no es apta para el consumo humano.

O objetivo deste estudo foi determinar as condições higiênicas sanitárias dos centros de vendas de carne crua de frango (CF) nos principais mercados da cidade de Huánuco-Peru. Foram amostrados 50 estabelecimentos que vendem CF bruto. Foram coletadas 200 g de amostras de carne em cada uma das instalações, processadas no LM-FMVZ UNHV. Para a detecção de Escherichia coli, as placas Petrifilm EC foram usadas de acordo com o método oficial e para Salmonella spp., O ensaio Salmonella Express System (SALX) em placas 3M Petrifilm. Ao mesmo tempo, para avaliar as condições sanitárias e higiênicas dos estabelecimentos e dos responsáveis pela venda de carne, foi aplicado um questionário sobre boas práticas de manuseio. Observou-se que todas as amostras estavam contaminadas, com UFC / g PF de E. coli, em média 1988 UFC / g PF±3.74 de E. coli. E quanto a Salmonella spp., Todos os casos foram positivos. Além disso, são demonstradas más e regulares condições de higiene sanitária da infraestrutura. Portanto, a venda de matéria-prima bruta não cumpre as boas práticas de manuseio de alimentos. Nos mercados de Huánuco, o CF emitido é considerado pelo NTP inadequado para consumo humano.

The objective of this study was to determine the sanitary hygienic condition of the raw chicken meat (CM) sales centers in the main markets of the city of Huánuco-Peru. 50 establishments that sell raw CM were sampled. Samples of 200 g of meat were taken in each of the premises, which were processed in the LM-FMVZ UNHV. For the detection of Escherichia coli, Petrifilm EC plates were used according to the official method and for Salmonella spp., The Salmonella Express System (SALX) assay on 3M Petrifilm plates. At the same time, to assess the sanitary and hygienic conditions of the establishments and those responsible for selling meat, a questionnaire on good handling practices was applied. It was observed that all the samples were contaminated, with CFU / g PF of E. coli, on average 1988 CFU / g PF±3.74 of E. coli, and as for Salmonella spp., all the cases were positive to it. In addition, poor and regular sanitary hygiene conditions of infrastructure are demonstrated. Therefore, the sale of raw CM does not comply with good food handling practices. In the Huánuco markets, the issued CM is considered by the NTP to be unfit for human consumption.

RESUMEN La fotocatálisis heterogénea y la pasteurización para la desinfección del agua se presentan como una alternativa de potencial implementación y operación, porque buscan el aprovechamiento de la radiación y la temperatura, y la hacen apta para emplearla en múltiples locaciones, principalmente donde existan fuentes de abastecimiento que presenten bajos niveles de turbiedad. Para verificar la efectividad de estas técnicas, se evaluó una unidad compuesta por un sistema de captación de aguas lluvias, un filtro lento de arena y un sistema de desinfección solar compuesto por fotocatálisis heterogénea, que emplea como catalizador dióxido de titanio (TiO2) en forma de anatasa 99 % en un lecho fijo, y pasteurización con un proceso de recirculación, en una comunidad ubicada en la zona sur de Bogotá. La caracterización del afluente mostró valores de turbiedad iguales a 3,29 UNT, pH de 6,4, alcalinidad de 2,5 mg CaCO3 L-1 dureza de 0,65 mg CaCO3 L-1 y presencia de coliformes identificados en placas de petrifilm. La eliminación de microorganismos se hizo efectiva en días con índices de radiación por encima de 4UV (longitudes de onda de 315400 nm), estados del tiempo soleados o parcialmente nublados y valores de turbiedad de 4 UNT para cargas hidráulicas por debajo de 60 m3 m-2-d-1. El efluente presentó efectividad próxima al 60 % en la remoción de turbiedad y 100 % en coliformes. Los resultados obtenidos permiten el uso del agua tratada en actividades complementarias, excluyendo el consumo humano.

ABSTRACT Heterogeneous photocatalysis and pasteurization for water disinfection, are presented as an alternative to potential implementation and operation, because they seek the use of radiation and temperature making it suitable for use in multiple locations, principally where there are sources of supply that low levels of turbidity. To verify the effectiveness of these techniques, we evaluated a composite unit of a rainwater harvesting system, a slow sand filter and a solar disinfection system composed of heterogeneous photocatalysis, which uses as a catalyst of titanium dioxide (TiO2) in the form of anatase 99% in a fixed bed, and pasteurization with a recirculation process, in a community located in the South zone of Bogota. The characterization of the tributary showed turbidity values equal to 3.29 NTU, pH 6.4, alkalinity (CaCO3) 2.5 mg L-1 hardness of 0.65 mg CaCO3 L-1 and presence of coliforms identified in petrifilm plates. Elimination of microorganisms became valid on days with indices of radiation above 4UV (wavelengths of 315 400 nm), sunny or partially cloudy weather and values of Turbidity 4 NTU to hydraulic loads below 60 m3 m-2d-1. The effluent presented to the 60% effectiveness in the removal of turbidity and coliform 100%. The results obtained allow the use of the treated water in complementary activities excluding the human consumption.

Resumen Staphylococcus aureus puede contaminar una gran gama de alimentos, siendo los quesos frescos un medio diferencial y selectivo para el desarrollo de este microorganismo, llegando a la producción de enterotoxina termoestable ocasionando una intoxicación estafilocóccica trasmitida por alimentos. El empleo del método 3M Petrifilm Staph Express (STX) supone considerables ventajas frente al método convencional o de referencia, facilitando y favoreciendo muchos aspectos técnicos y económicos, dentro de ellos tenemos la optimización de tiempo en cuanto se refiere a la preparación de medios de cultivo, necesidad de equipamiento, requerimiento de infraestructura, menor requerimiento de personal y la disminuye los costos del uso de consumo eléctrico, disminuye la generación de residuos sólidos, entre otros. La comparación entre el método alternativo frente al método convencional fue hecha por medio de la contaminación artificial de una matriz libre de S. aureus y un recuento bajo de microbiota acompañante, donde se establecieron diferentes niveles de contaminación, evaluándose los indicadores de desempeño (exactitud relativa, precisión relativa, linealidad, curva de calibración y límite de cuantificación). En indicador de exactitud relativa se obtuvo un 95,6% de recuperación para el nivel más bajo (aproximadamente 8 UFC/g) y 98,7% de recuperación para el nivel de contaminación más alto (aproximadamente 5300 UFC/g), teniendo un rango de 70 a 120% de aceptación. Para la precisión relativa se calcularon la RSD de todos los niveles ensayados, obteniéndose datos que aceptan la precisión relativa del método de placa seca rehidratable porque los valores fueron menores al RSD teórico calculado. El límite de detección fue ensayado con <10UFC/g obteniéndose un CV de 1,16%. Por los resultados obtenidos podemos concluir que el método 3M Petrifilm Staph Express (STX) cumple con los indicadores de desempeño frente a la norma ISO 6888-1:2003.

Abstract Staphylococcus aureus can contamínate a wide range of foods, being fresh cheeses a differential and selective medium for the development of this microorganism, reach-ing the production of thermostable entero-toxin causing a staphylococcal intoxication transmitted by food. The use of the 3M Petrifilm Staph Express (STX) method has considerable ad-vantages over the conventional or reference method, facilitating and favoring many tech-nical and economic aspects, within them we have the optimization of time as regards the preparation of culture media, need for equipment, infrastructure requirements, lower personnel requirements and decreas-es the costs of the use of electricity con-sumption, decreases the generation of solid waste, among others. The comparison between the alterna-tive method and the conventional method was made by means of the artificial contam-ination of a free matrix of S. aureus and a low accompanying microbiota count, where different levéis of contamination were es-tablished, evaluating the performance indi-cators (relative accuracy, relative precisión, linearity, calibration curve and limit of quan-tification). In the relative accuracy indicator, 95.6% recovery was obtained for the lowest level (approximately 8 CFU / g) and 98.7% recovery for the highest level of contamination (approximately 5300 CFU / g), with a range of 70 to 120% acceptance. For the relative precision, the RSD of all the tested levels was calculated, obtaining data that accept the relative accuracy of the dry rehydratable plate method because the values were low-er than the calculated theoretical RSD. The limit of detection was tested with <10 CFU / g, obtaining a CV of 1.16%. Based on the results obtained, we can conclude that the 3M Petrifilm Staph Express (STX) method complies with the performance indicators againstthe ISO 6888-1: 2003 standard

Abstract . The thermal waters are not sterile they possess a microbiota reflecting their physicochemical extreme characteristics. There is evidence that this microbiota may be the reservoir of antibiotic resistance genes, termed environmental resistomas. Therefore, the objective of the present work was to study the water bacterial microbiota of the Termas la Merced Spa, located near the City of Quito, Ecuador, to isolate the bacteria and determine the resistance patterns to antibiotics. Thermal water samples were collected from both the emergency area and the swimming pools used by bathers for a period of 6 months between July and December 2015. The isolate of the mesophilic aerobic bacteria using the Petrifilm ™ plates. Identification of bacterial colonies was performed according to the tests suggested by MacFaddin (2003) and Barrow and Feltham (1993), supplemented with MicrogenTM bacterial identification tests. Antibiotic susceptibility profiles were performed using the Kirby Bauer method. A total of 13 bacterial clones corresponding to Brevundimonas diminuta, Aeromonas schubertii, Budvicia aquatica, Acinetobacter haemolyticus, Bacillus spp, Citrobacter amalonaticus, Pseudomonas stutzeri and Xenorhabdus beddingii were identified. All isolates showed resistance to at least one antibiotic. The highest number of resistance (4 antibiotics) was exhibited by Brevundimonas diminuta strains. All isolates showed resistance to Cephalothin. It is demonstrated that these waters possess a characteristic microbiota and the presence of environmental resistomas.

Resumen Las aguas termales no son estériles, poseen una microbiota reflejo de sus características fisicoquímicas extremas. Existen evidencias que esta microbiota puede ser el reservorio de genes de resistencia a los antibióticos, denominados resistomas ambientales. Por ello, el objetivo del presente trabajo fue estudiar la microbiota bacteriana del agua del Balneario Termas la Merced, ubicado cerca de la Ciudad de Quito, Ecuador, con el fin de aislar e identificar las bacterias presentes y determinar sus patrones de resistencia a los antibióticos. Se recolectaron muestras de agua termal, tanto de la zona de emergencia, como de las piscinas utilizadas por los bañistas durante los meses de julio a diciembre del 2015. Se realizó el aislamiento bacteriano, utilizando las placas de PetrifilmTM, para bacterias aerobias mesófilas La identificación de las colonias bacterianas se realizó de acuerdo a las pruebas sugeridas por MacFaddin (2003) y Barrow y Feltham (1993), suplementadas con las pruebas de identificación bacteriano MicrogenTM. Los perfiles de susceptibilidad a antibióticos se realizaron utilizando el método de Kirby Bauer. Se identificaron 13 clones bacterianos, correspondientes a las especies Brevundimonas diminuta, Aeromonas schubertii, Budvicia aquatica, Acinetobacter haemolyticus, Bacillus spp, Citrobacter amalonaticus, Pseudomonas stutzeri y Xenorhabdus beddingii. Todos los aislados mostraron resistencia al menos a un antibiótico. El mayor número de resistencias (4 antibióticos) lo exhibieron cepas de la especie Brevundimonas diminuta. Todos los aislados mostraron resistencia a la Cefalotina. Se demuestra que estas aguas poseen una microbiota bacteriana característica y la presencia de resistomas ambientales.

Um teste rápido, que apresente o resultado em curto período de tempo, que seja simples, sensível para detectar baixos níveis de micro-organismos, preciso e que não seja caro, seria o mais adequado para a rotina laboratorial da indústria de alimentos ou mesmo para os laboratórios de Saúde Pública. Um dos métodos alternativos prontos para o uso, comercialmente disponíveis no mercado, são as placas PetrifilmTM. O objetivo deste estudo foi avaliar se há diferença estatística significativa entre o método convencional - empregando o ágar vermelho violeta bile glicose - e o método alternativo, PetrifilmTM EB (3M Company), para a enumeração de Enterobacteriaceae em carcaças de frango. Também foi avaliado se o método alternativo apresentou capacidade de produzir resultados que fossem diretamente proporcionais à concentração do alvo (contendo aproximadamente 270 unidades formadoras de colônia.mL-1). O total de 120 amostras de carcaças de frango analisadas revelou que houve diferença significativa (p < 0,05) nas populações obtidas entre os dois métodos, sendo que o método convencional apresentou pouca proporcionalidade entre as diluições realizadas. Por outro lado, o sistema de quantificação PetrifilmTM EB mostrou capacidade em produzir resultados proporcionais à concentração do analito nas amostras, em uma faixa de concentração de 1 a 256 unidades formadoras de colônia.mL-1.

A test that is rapid, simple, accurate, not expensive, gives rapid results, and is sensitive enough to detect low levels of microorganisms would be the most suitable for food industry routine laboratories, or even for a public health laboratories. A ready-to-use alternative, commercially available method is the PetrifilmTM EB method. The aim of this study was to evaluate whether there is a statistically significant difference between the conventional methods based on Violet Red Bile Glucose Agar and the alternative 3M TM Petrifilm (EB) method for the enumeration of Enterobacteriaceae in poultry carcasses. This study also assessed whether the alternative method showed ability to produce results that were directly proportional to the concentration of the target (approximately 270 colony-forming unit.mL-1). A total of 120 poultry carcasses samples showed a significant difference (p < 0.05) between the populations obtained by the two methods, and the conventional method showed low proportionality between the dilutions. On the other hand, the PetrifilmTM EB quantification system showed the capacity to produce results that are proportional to the concentration of the analyte in samples in the concentration range from 1 to 256 colony-forming unit.mL-1.

Herbal products are used by human immunodeficiency virus (HlV)-infected individuals regardless of safety or efficacy concerns. In this study, we examined the microbiological quality of herbal preparations marketed to HIV-infected individuals. A convenience sample (N = 24) of herbal products was obtained from retailers in Nairobi, Kenya in 2007. Petrifilm plate count methods were used to estimate total aerobic bacteria (APC), coliform, Escherichia coli, Staphylococcus aureus and yeast and mould counts. APC counts ranged from an estimated 1.5 x 10¹ colony forming units (CFU)/g to 7.1 x 10(8) CFU/g. Total and faecal coliform counts ranged from an estimated <10 CFU/g to 3 x 10(6) CFU/g. E. coli load ranged from <10 CFU/g to 5 x 10¹ CFU/g and S. aureus counts ranged from an estimated <10 CFU/g to 2.5 vx 10³ CFU/g. Yeast and mould counts ranged from an estimated <10 CFU/ g to 9 x 10(4) CFU/g. An evaluation using the World Health Organization limits for medicinal herbs found a percentage of samples to contain microorganisms above allowable limits: 33% (APC), 50% (coliforms) and 33% (yeast and moulds). A total of 67% of samples contained S. aureus loads above the United States Pharmacopeia standard. We suggest that the introduction of quality-control measures and safe handling practices for the selling of medicinal herbs and botanicals in Kenya would be beneficial in reducing the potential health risks for immunocompromised consumers of these products.

Resumen: El queso telita, es un queso blanco de pasta cocida que se vende sumergido en suero y es elaborado por pequeños productores en queseras artesanales, ubicadas en varios estados del país. Las deficientes condiciones sanitarias de producción, almacenamiento, transporte y comercialización para este producto, son causas importantes de contaminación con microorganismos entre los que pueden encontrarse Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella spp y Listeria spp. El objetivo de este trabajo fue evaluar la microflora patógena contaminante en muestras de queso telita de queseras ubicadas en cuatro estados venezolanos, Aragua, Bolívar, Guárico y Miranda. Se efectuaron recuentos de S. aureus, coliformes totales y E. coli mediante la siembra en películas secas rehidratables Petrifilm 3M. La detección de Salmonella spp y L. monocytogenes se determinó según metodología propuesta por el FDA. Recuentos de S. aureus por el orden de 107-108 UFC/g se obtuvo en el 44% y 64% de las muestras de los estados Bolívar y Guárico, respectivamente. Igualmente, los recuentos de S. aureus y coliformes totales, así como la incidencia de E. coli, fueron significativamente mayores en los quesos telita elaborados en los estados Bolívar y Guárico, en comparación con los quesos de Aragua y Miranda. De las 160 cepas de E .coli aisladas, sólo en dos muestras provenientes del estado Bolívar se identificó a la E. coli O157:H7. No se detectó la presencia de Salmonella spp ni de L. monocytogenes en estas muestras. Las muestras de queso telita presentan una deficiente calidad sanitaria. An Venez Nutr 2007;20 (1): 17-21

Abstract: The telita cheese is a white cheese of boiled paste, it is sold immersed in whey, it is made by small producers in cheesemonger, localized in different states of the country, with a technological process completely artisanal. The actual deficient sanitary condition for production, storage, transportation and trading in Venezuela for this product, are important causes of contamination with various microorganisms for example Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Salmonella spp and Listeria spp. The objective of this work was to evaluate the presence of the pathogenic microflora in samples of telita cheese made in cheesemonger in four venezuelan states: Aragua, Bolívar, Guárico and Miranda. It was achieved by a plate counting of S. aureus, total coliforms and E. coli by using a rehydratable dry film plating method 3M Petrifilm. The detection of Salmonella spp and L. monocytogenes, was measured following a FDA method. The S. aureus counts ranged from 107 to 108 CFU/g were found, and 44,0% and 64,0% coresponding to the cheesemonger from Bolívar and Guárico states, respectively. The S. aureus and total coliforms counts and the incidence of E. coli of the telita cheese made in from Bolívar and Guárico states, were significantly greater than those counts founds in the telita cheese made in Aragua and Miranda states. From the 160 strains isolated of E. coli, only in two samples of telita cheese from Bolívar state could be identified E. coli O157:H7. Salmonella spp and L. monocytogenes were not detected in the telita cheese samples analyzed. It is concluded that in general process of making telita cheese there is a deficient sanitary quality. An Venez Nutr 2007;20 (1): 17-21

The methodology proposed for the validation of an aseptic filling in a lyophilization process was presented. To this end, 3 tests were made in which 3 batches of 15 000 vials each one were filled with casoy broth. They were incubated at 22.5 ± 2.5 ºC y 32.5 ± 2.5 ºC for 14 days, respectively, in order to detect the possibility of microbial contamination on carrying out the process. During the first three proceses, the microbiological monitoring of environments, surfaces and operators took place. Petrifilm was used in the sampling to detect aerobic mesophiles and yeasts, a procedure accomplished under rest and operation conditions. Likewise, the counting of particulars was made in the area and sterility tests were done for the packing materials (caps and vials). Finally, the validation methodology was designed for the sterilization of the lyophilizer, and Bacillus stearothermophilus was used as an indicator microorganism. The design of the test was made taking into account the recommendations of the Food and Drug Administration (FDA) and the World Health Organization (WHO) for products of parenteral administration.These are the reference organizations for the production and quality control used by the enterprise of veterinary products , where the test was performed. The filled vials were read by turbidity (presence of contamination), and the acceptance criteria were established by the 2 above mentioned entities. To conclude, it was indicated a plan of microbiological monitoring for the evaluated area, in which points of strategical sampling were included, as well as the accomplishment of specific standard operative procedures for this area.

Se presentó la metodología propuesta para la validación de un llenado aséptico en un proceso de liofilización. Para esto se realizaron 3 pruebas en las cuales se envasaron 3 lotes de 15 000 viales cada uno, con caldo casoy que se incubaron a 22,5 ± 2,5 ºC y 32,5 ± 2,5 ºC por 14 días respectivamente, con el fin de detectar la posibilidad de contaminación microbiana en la realización del proceso. Durante las 3 pruebas se realizó el monitoreo microbiológico de ambientes, superficies y operarios; en el muestreo se utilizó Petrifilm para detección de mesófilos aerobios y levaduras, procedimiento ejecutado en condiciones de reposo y operación. Así mismo, se efectuó el conteo de partículas en el área y pruebas de esterilidad para los materiales de envase (tapones y viales); finalmente, se diseñó la metodología de validación para la esterilización del liofilizador y se empleó como microorganismo indicador a Bacillus stearothermophilus. El diseño de la prueba se realizó teniendo en cuenta las recomendaciones de la Food Drug Administration (FDA) y la Organización Mundial de la Salud (OMS) para productos de administración parenteral. Estas son las organizaciones de referencia para la producción y control de calidad que utiliza la empresa de productos veterinarios en las que se hizo la prueba. Los viales envasados se leyeron por turbidez (presencia de contaminación) y los criterios de aceptación se establecieron por las 2 entidades nombradas anteriormente. Finalmente, se indicó un plan de monitoreo microbiológico para el área evaluada en el cual se incluyeron puntos de muestreo estratégicos; así como la realización de procedimientos operativos estándar específicos para esta área.

Resumen Se evaluó el efecto inhibitorio de dos concentraciones de nisina (10,0 y 16,7 mg/kg) sobre la población de Staphylococcus aureus, coliformes totales, Escherichia coli, Salmonella spp y Listeria monocytogenes en queso blanco tipo "telita" elaborado en una quesera de Upata, Estado Bolívar. El número de S. aureus, coliformes totales y Escherichia coli se determinó mediante la siembra en películas secas rehidratables Petrifilm 3M; siendo los recuentos de S. aureus significativamente menores (p < 0,05) en las muestras de queso "telita" con las dos concentraciones de nisina ensayadas con respecto a las muestras control. No se detectó Salmonella spp ni Listeria monocytogenes en ninguna de las muestras analizadas Se encontró que las dos concentraciones de nisina adicionadas al queso "telita" ejercieron un efecto inhibitorio sobre la población de S. aureus presente como microflora contaminante en las mismas

Abstract The inhibitory effect of two nisin concentrations (10.0 and 16.7 mg/kg) over the Staphylococcus aureus, total coliforms, Escherichia coli, Salmonella spp and Listeria monocytogenes population was evaluated in "telita" type white cheese produced at a cheese factory in Upata, Bolivar State. The number of S. aureus, total coliforms and Escherichia coli was determined by inoculation in Petrifilm 3M dry rehydratable films. The S. aureus counts were significantly smaller (p<0.05) in the "telita" cheese samples with the two nisin concentrations tested as compared with the control samples. No Salmonella spp or Listeria monocytogenes were detected in any of the samples analyzed. It was determined that the two nisin concentrations added to the "telita" cheese exerted an inhibitory effect over the S. aureus present in them as contaminant microflora

Coliformes fecais são definidos como coliformes capazes de fermentar a lactose com produção de gás em 48 h a 45ºC. Escherichia coli, juntamente com algumas cepas de Enterobacter e Klebsiella, podem apresentar essas características. Entretanto, apenas a presença de Escherichia coli em alimentos indica contaminação fecal por ser encontrada em grande quantidade no trato gastrointestinal do homem e animais de sangue quente, não sendo isolada normalmente em outros nichos. A denominação clássica de coliformes fecais foi alterada para coliformes a 45ºC, na Resolução nº 12 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária. O objetivo deste trabalho foi avaliar a presença de E. coli entre os coliformes a 45ºC e comparar a eficiência das técnicas dos tubos múltiplos e Petrifilm EC na detecção de coliformes totais e E. coli em queijo Minas, lingüiça frescal, hortaliças e fubá. Petrifilm EC mostrou-se mais sensível na detecção de E. coli em relação ao método de tubos múltiplos, o qual apresentou resultados falso-negativos ou contagens subestimadas de E. coli, principalmente para amostras de alimentos de origem animal. Petrifilm EC foi o mais eficiente e prático, sendo um método alternativo adequado para a enumeração de coliformes totais e E. coli em alimentos.

Fecal coliforms are defined as coliforms that ferment lactose with gas production within 48 hours at 45ºC. Escherichia coli and some strains of Enterobacter and Klebsiella show these same characteristics. However, only the presence of E. coli can indicate fecal contamination of foods, because it is abundantly found in the intestinal tract of all warm-blooded animals, including the humans, and it is not usually found in others niches. The classic denomination of fecal coliforms was changed to coliforms at 45ºC in the Resolution nº 12/2001 of the National Surveillance Agency of Brazil. The objectives of this study were to analyse the presence of E. coli among the coliforms at 45ºC and to compare the methods of Most Probable Number Method (MPN) and Petrifilm EC in their efficiency to detect E. coli in Minas cheese, sausage, fresh vegetables and corn flower samples. Petrifilm EC was more accurate method than MNP method, which presented false negative results or underestimation of E. coli. In conclusion, Petrifilm EC was an efficient and practical method to detect E. coli. Therefore, it may be alternatively used for enumeration of total coliforms and E. coli in foods.

Several alternative analytical methods are currently available for the rapid microbiological testing of food. Due to their many advantages, particularly their convenience of use, the popularity of ready-to-use systems for the enumeration of hygiene indicator microorganisms is increasing. However, the ability of these systems to enumerate stressed microorganisms, such as those that may be found growing in acidic foods, is unknown. Therefore, the aim of this study was to evaluate the performance of Petrifilm™ and SimPlate™ plates for the enumeration of total aerobes and fungi (yeasts and molds) in acidic fruit juices, using non-pasteurized orange juice as an experimental model. The samples were analyzed before and after neutralization of pH, and the results were compared with those obtained using conventional procedures, i.e. pour-plates containing Standard Methods Agar, acidified potato dextrose agar, or dichloran-glycerol agar. The results obtained with Petrifilm and SimPlate for counts of mesophilic aerobes as well as for yeast and mold correlated well with those obtained using conventional procedures. Although no statistically significant differences were observed between counts of non-neutralized and neutralized samples (α ≤0.05), better correlation indexes were observed in the neutralized samples. Both Petrifilm and SimPlate proved to be good alternative methods for testing the microbiological quality of acidic fruit juices.

Atualmente, existem vários métodos alternativos para análise microbiológica rápida de alimentos. Devido à suas muitas vantagens, especialmente a suaconveniência de uso, a utilização de sistemas prontos-para-uso para enumeração de microrganismos indicadores de higiene vem aumentando. Entretanto, o desempenho desses sistemas para contagem de microrganismos injuriados não é bem conhecido. Esse estudo objetivou avaliar o desempenho de placas Petrifilm™ e SimPlate™ para contagem de aeróbios totais e fungos (bolores e leveduras) em sucos de frutas ácidas, empregando suco de laranja não pasteurizado como modelo experimental. As análises foram efetuadas antes e após a neutralização do pH das amostras, e os resultados foram comparados a aqueles obtidos através do método convencional de semeadura em placas de ágar padrão para contagem, ágar batata dextrose acidificado e ágar dicloran-glicerol. Os resultados obtidos com Petrifilm e SimPlate para contagem de aeróbios e para bolores e leveduras correlacionaram-se bem com aqueles obtidos através dos métodos convencionais. Embora não houvesse diferença estatisticamente significativa entre as contagens obtidas para as amostras neutralizadas e não neutralizadas (α ≤0.05), os índices de correlação para as amostras neutralizadas foram mais elevados. Ambos sistemas prontos-para-uso (Petrifilm e SimPlate) foram considerados boas alternativas para a determinação da qualidade microbiológica de sucos de frutas ácidas.

Actualmente se dispone de varios métodos analíticos alternativos para el análisis microbiológico rápido de alimentos. Debido a sus muchas ventajas, especialmente su facilidad de uso, cada vez es mayor la popularidad de los sistemas listos para usar en la enumeración de los microorganismos indicadores de las condiciones higiénicas. Sin embargo, no se sabe cómo actúan estos sistemas en la enumeración de microorganismos sometidos a situaciones de estrés. El objetivo de este estudio era evaluar el funcionamiento de las placas Petrifilm™ and SimPlate™ en la enumeración total de aerobios y hongos (levaduras y mohos) en zumos de frutas ácidas, usando zumo de naranja no pasteurizado como modelo experimental. Las muestras se analizaron antes y después de la neutralización del pH y los resultados se compararon con los obtenidos usando métodos convencionales, como el de vertido en placa agar nutritivo estándar, y el cultivo en placas con agar glucosado de patata acidificado y con agar diclorán-glicerol. Los resultados obtenidos con Petrifilm y con SimPlate en el recuento de aerobios mesófilos y en el de levaduras y mohos se correlacionaban bien con los resultados obtenidos usando métodos convencionales. Aunque no se apreciaron diferencias estadísticamente significativas entre los recuentos de las muestras neutralizadas y las que no lo estaban (α ≤0.05), en las muestras neutralizadas se observaron mejores índices de correlación. Ambos sistemas (Petrifilm and SimPlate) demuestran ser buenos métodos alternativos para analizar la calidad microbiológica de los zumos de frutas ácidas.

Se estudió el efecto de cultivos probióticos sobre poblaciones conocidas de Staphylococcus aureus inoculadas en yogurt, a lo largo de su vida útil normal (28 días); también se evaluó el efecto de éstos sobre la producción y estabilidad de su termonucleasa. En tres ocasiones distintas dos marcas comerciales de yogurt, una con probióticos adicionados (Lactobacillus casei y L. acidophilus), fueron inoculadas con una población conocida de S. aureus en alta y baja concentración (10(9) UFC/g y 10(7) UFC/g, respectivamente) y almacenadas a 5ºC por 28 días. Cada cuatro días se realizó un recuento de bacterias lácticas, de S. aureus y se midió el pH de acuerdo a la metodología descrita en el Compendium of Methods for Microbiological Examination of Foods, Vanderzant & Splittstoesser; además se determinó la presencia de termonucleasa usando petrifilm S. aureus de la casa 3M ®. El número de bacterias lácticas y el pH se mantuvo constante durante el período de evaluación en ambos tipos de yogurt. La población de S. aureus (en alta y baja concentración) se redujo a niveles indetectables en 8 días de almacenamiento en el yogurt con probióticos; mientras que a partir del yogurt sin probióticos se pudo aislar esta bacteria aún después de 24 días de almacenamiento. Se pudo detectar la termonucleasa a lo largo de todo el estudio, aún en el yogurt con probióticos. La presencia de termonucleasa se relaciona, con una alta probabilidad, con la producción de enterotoxina de S. aureus. Este trabajo confirma de nuevo los efectos beneficiosos de los cultivos probióticos en yogurt sobre bacterias, así como la necesidad de mantener las normas de higiene para evitar que S. aureus contamine alimentos y pueda producir enterotoxina, ya que ésta no es afectada por los probióticos.

Evaluation of the effect of probiotic cultures on two different yogurt brands over a known population of Staphylococcus aureus and the production of thermonuclease. The effect of probiotic cultures over known populations of Staphylococcus aureus inoculated in yogurt was studied; also the production and stability of its thermonuclease during yogurt storage was evaluated. In three different occasions, two different yogurt brands, one with additional probiotic cultures (Lactobacillus casei and L. acidophilus), were inoculated with known populations of S. aureus in high and low concentration (10(9) CFU/g and 10(7) CFU/g), respectively. These samples were stored for 28 days at 5ºC. Every four days the count of lactic bacteria, S. aureus and pH were evaluated, according to the methodology described in the Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, Vanderzant & Splittstoesser. The presence of thermonuclease was determined using petrifilm for S. aureus from 3M company ®. The pH and lactic bacteria population were constant during the testing period. Yogurt with additional probiotic cultures (high and low concentration) lowered the population of S. aureus to non detectable levels in 8 days; but, S. aureus could be cultured from yogurt without probiotics even after 24 days of incubation. Same time, the presence of thermonuclease was positive in all tests; it was not affected by probiotics. The presence of thermonuclease is related to the production of S. aureus enterotoxin. This work emphasizes again the beneficial effects of probiotic cultures in yogurt over bacteria and the importance of keeping hygienic practices in order to avoid the contamination of food with S. aureus and the eventual production of its enterotoxin, since it is not affected by probiotics.

El consumo de agua potable envasada contaminada con microorganismos patógenos puede ocasionar enfermedades de origen entérico. El objetivo de este trabajo fue determinar y comparar, mediante dos métodos de análisis, la presencia de microorganismos indicadores de calidad sanitaria, tales como coliformes totales, coliformes fecales y aerobios mesófilos, en dos marcas comerciales de agua potable, distribuidas en San Diego, estado Carabobo, Venezuela. Para ello se recolectaron 30 muestras de agua potable en presentación de bidones de 20 litros de capacidad, divididas en 15 muestras marca A y 15 marca B. Para la identificación microbiológica se emplearon el método rápido Petrifilm y el método tradicional de siembra en profundidad según las especificaciones del Método Estándar para el Análisis de Aguas Potables y las normas nacionales COVENIN. Los resultados obtenidos no mostraron diferencias significativas para el recuento microbiológico de coliformes totales y de aerobios mesófilos, por el método tradicional de siembra en profundidad y el método rápido de siembra en placas Petrifilm (r = 0,9), para las marcas de agua A y B (p = 0,5). Tres muestras (13%) presentaron recuentos menores de 10 µfc/ml para coliformes totales para la marca de agua A, y siete (47%) para la marca B. Ninguna muestra presentó coliformes fecales. En conclusión, ambos métodos siguen siendo de elección para el análisis de agua potable envasada, y aunque el método de Petrifilm presente ciertas ventajas con respecto al método tradicional de siembra en profundidad, este último sigue siendo el más utilizado en la mayoría de los laboratorios de análisis microbiológicos. Ambas marcas de agua potable presentaron recuentos microbiológicos fuera de especificaciones, según las recomendaciones de las normas respectivas, por lo que su consumo puede representar un riesgo para la salud del consumidor.

The consumption of polluted drinking water bottles with pathogen microorganisms, can cause enteric origin illnesses. The aim of this work was to determine and to compare, by two analysis methods, the presence of sanitary quality index microorganisms, such as total coliforms, fecal coliforms and aerobic mesophiles, in two registered trade-marks of drinking water, distributed in San Diego, Carabobo State, Venezuela. Thirty samples of drinking water were gathered in 20 liters capacity drums presentation, divided in 15 samples brand A and 15 samples brand B respectively. For the microbiological identification, we used the Petrifilm quick test and the traditional method of depth seeding, according to the Standard Methods for the Analysis of Waters specifications and the COVENIN national norms. For the microbiological recount of total coliforms and aerobic mesophiles, the results did not show significant differences for the traditional method of depth seeding and the Petrifilm plates quick test seeding (r = 0,9), for the water brands A and B (p= 0,5). Three samples (13%) presented smaller recounts than 10 UFC/ml for total coliforms for water brand A, and seven (47%) for brand B. No sample presented fecal coliforms. In conclusion, both methods keep on being election for the analysis of bottle drinking water bottle, and although Petrifilm test presents certain advantages regarding the traditional method of depth seeding, this last one continues being the more used method of analysis in most of microbiological laboratories. Both registered trade-marks of drinking water presented microorganisms recounts outside of specifications, according to the recommendations of the respective norms, therefore, their consumption can represent a risk for the consumer’s health.