The aim of this study was to assess the effect of eugenol on the in vitro production of ovine embryos. Oocytes were aspirated and taken for in vitro maturation (IVM), where they were divided into 4 groups: the CON (control), in which the oocytes were immersed in medium without an antioxidant; in the EU10, EU20, EU40 groups, the same medium as in the COM group was used, supplemented with 10, 20, and 40 µM of eugenol, respectively. The degree of expansion of cumulus cells was evaluated. Subsequently, the oocytes underwent in vitro fertilization and in vitro culture, and at the end of this process, the rate of cleaved structures was assessed. Regarding the expansion rate of cumulus cells, the CON group exhibited higher rates compared to the groups supplemented with eugenol. Evaluating oocytes with fully expanded cumulus cells, only the EU40 group showed a lower rate when compared to the rest of the treatment groups. Whereas observing oocytes with partially expanded cumulus cells, the EU40 group showed higher expansion percentages compared to the other treatments. Concerning the presence of the first polar body in the oocytes, it was observed that there was no statistical difference between the treatment groups. Lastly, concerning the cleaved structures, the CON and EU10 groups showed the highest rates compared to the EU20 and EU40 groups. Thus, it was possible to conclude that the use of 10 µM of eugenol in the IVM of ovine oocytes proved to be the optimal concentration of this substance.

El objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto del eugenol en la producción in vitro de embriones ovinos. Los ovocitos fueron aspirados y llevados para la maduración in vitro (MIV), donde se dividieron en 4 grupos: el CON (control), en el cual los ovocitos fueron sumergidos en medio sin antioxidantes; en los grupos EU10, EU20, EU40 se utilizó el mismo medio que en el grupo CON, pero con la adición de 10, 20 y 40 µM de eugenol, respectivamente. Se evaluó el grado de expansión de las células del cúmulo. Después de esto, los ovocitos fueron sometidos a la fecundación in vitro y al cultivo in vitro, y al final de este proceso se evaluó la tasa de estructuras clivadas. En cuanto a la tasa de expansión de las células del cúmulo, el grupo CON mostró tasas más altas en comparación con los grupos suplementados con eugenol. Al evaluar los ovocitos con células del cúmulo totalmente expandidas, solo el grupo EU40 mostró una tasa más baja en comparación con el resto de los grupos de tratamiento. Mientras que al observar los ovocitos con células del cúmulo parcialmente expandidas, el grupo EU40 mostró porcentajes de expansión más altos en comparación con los otros tratamientos. Respecto a la presencia del primer corpúsculo polar en los ovocitos, se observó que no hubo diferencia estadística entre los grupos de tratamiento. Por último, en relación con las estructuras clivadas, los grupos CON y EU10 mostraron las tasas más altas en comparación con los grupos EU20 y EU40. Por lo tanto, se pudo concluir que el uso de 10 µM de eugenol en la MIV de ovocitos ovinos resultó ser la concentración óptima de esta sustância.

Objetivando avaliar o efeito do eugenol na produção in vitro de embriões ovinos. Os oócitos, foram aspirados e levados para a maturação in vitro (MIV), onde foram divididos em 4 grupos: o CON (controle), no qual os oócitos foram imersos em meio, sem antioxidante, já nos grupos EU10, EU20, EU40 foi utilizado o mesmo meio do grupo CON, acrescido de 10, 20 e 40 µM de eugenol, respectivamente. Foi avaliado o grau de expansão das células do cumulus. Após isso, os oócitos seguiram para a fecundação in vitro e cultivo in vitro, sendo, ao final desse processo, avaliada a taxa de estruturas clivadas. Em relação à taxa de expansão das células do cumulus, o grupo CON apresentou maiores taxas, quando comparado aos grupos adicionados de eugenol. Avaliando os oócitos com células do cumulus totalmente expandidas, somente o grupo EU40, apresentou-se menor, quando comparado ao restante dos grupos de tratamento. Já observando os oócitos com células do cumulus parcialmente expandidas, o grupo EU40, apresentou maiores percentuais de expansão, quando comparado aos demais tratamentos. Sobre a presença do primeiro corpúsculo polar nos oócitos, observou-se que não houve diferença estatística entre os grupos de tratamentos. E, por último, em relação às estruturas clivadas, os grupos CON e EU10 apresentaram as maiores taxas, quando comparado aos grupos EU20 e EU40. Dessa maneira, foi possível concluir que a utilização de 10 µM de eugenol na MIV de oócitos ovinos apresentou ser a melhor concentração dessa substância.

The aim of this study was to evaluate the effect of quercetin on the in vitro maturation (IVM) of oocytes and the subsequent in vitro fertilization (IVF) of ovine embryos. For this purpose, oocytes were collected and divided into the following treatment groups: control group, containing CON medium (control); and groups Q2, Q4, and Q8, with control medium supplemented with 2, 4, and 8 µM of quercetin, respectively. After IVM, the degree of cumulus cells expansion, presence of the first polar body (PB), and the other part of the oocytes proceeded to in vitro fertilization (IVF), where oocytes were incubated with spermatozoa for a period of 20 hours. Subsequently, the presumptive zygotes underwent in vitro culture (IVC) for 48 hours, and at the end of the process, the rate of cleaved structures was evaluated. The results were expressed in percentage and compared using the Chi-square test, with a significant difference considered when P<0.05. Evaluating the expansion of cumulus cells, the CON and Q2 groups showed the best expansion rates compared to the Q4 and Q8 groups. Regarding the presence of the 1st PB, it was observed that only the Q8 group exhibited lower rates compared to the control group. When evaluating the rate of cleaved structures, it was observed that the Q2 group showed a higher number compared to the Q8 group. Quercetin does not influence the maturation of ovine oocytes.

El objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto de la quercetina en la maduración in vitro (MIV) de ovocitos y la posterior fertilización in vitro (FIV) de embriones ovinos. Para ello, se recolectaron y seleccionaron ovocitos divididos en los siguientes grupos de tratamiento: grupo control, que contenía medio CON (control); y los grupos Q2, Q4 y Q8, con medio control al que se le añadieron 2, 4 y 8 µM de quercetina, respectivamente. Tras la MIV se evaluó el grado de expansión de las células del cúmulo, la presencia del primer corpúsculo polar (CP) y la otra parte de los ovocitos se utilizó para la fecundación in vitro (FIV), donde los ovocitos fueron incubados con espermatozoides durante un período de 20 horas. Posteriormente, los presuntos cigotos pasaron a cultivo in vitro (CIV) durante 48 horas y, al final del proceso, se evaluó la tasa de estructuras clivadas. Los resultados se expresaron en porcentaje y se compararon utilizando la prueba de Chi-cuadrado, considerando una diferencia significativa cuando P<0,05. Al evaluar la expansión de las células del cúmulo, los grupos CON y Q2 mostraron las mejores tasas de expansión en comparación con los grupos Q4 y Q8. En cuanto a la presencia del 1er CP, se observó que solo el grupo Q8 mostró tasas más bajas en comparación con el grupo control. Al evaluar la tasa de estructuras clivadas, se observó que el grupo Q2 mostró un número mayor en comparación con el grupo Q8. La quercetina no influye en la maduración de ovocitos ovinos.

O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da quercetina na MIV de oócitos e na subsequente PIV de embriões ovinos. Para isso, foram colhidos e selecionados oócitos divididos nos seguintes grupos de tratamento: grupo controle, contendo meio CON (controle); e grupos Q2, Q4 e Q8, com meio controle, acrescido de 2, 4 e 8 µM de quercetina, respectivamente. Após a MIV foi avaliado o grau de expansão das células do cumulus, presença do primeiro corpúsculo polar (CP) e a outra parte dos oócitos seguiu para a fecundação in vitro (FIV), onde os oócitos foram incubados com os espermatozoides, por um período de 20 h. Em seguida, os presumíveis zigotos seguiram para o cultivo in vitro (CIV), por um período de 48 h e, ao final do processo, foi avaliada a taxa de estruturas clivadas. Os resultados foram expressos em porcentagem e comparados, usando o Teste do Qui-quadrado e foi considerada diferença significativa quando P<0,05. Avaliando a expansão das células do cumulus, os grupos CON e Q2 apresentaram as melhores taxas de expansão, quando comparadas aos grupos Q4 e Q8. Quanto à presença do 1º CP, foi possível observar que somente o grupo Q8 apresentou taxas menores, quando comparado ao grupo controle. Já avaliando a taxa de estruturas clivadas, foi possível observar que o grupo Q2 apresentou maior número quando comparado ao grupo Q8. A quercetina não influencia na maturação de oócitos ovinos.

Abstract. The reproductive and larval performance of Pteria sterna associated with anomalous environmental factors was evaluated, testing the hypothesis that the transition from La Niña to El Niño in 2008-2009 affected the “normal” periods in which ripe broodstock are collected and larvae are reared in a hatchery. Seasonal sampling included 2 reproductive periods (February and April 2009), 1 pre-reproductive period (November 2008), and 1 post-reproductive period (June 2009). Of the 40 oysters collected in each period, 20 were used for induced spawning and larval culture, while 20 were used to evaluate indices of reproductive performance. Water temperature, salinity, and seston content were monitored in each period. Sea surface temperature (SST) data associated with anomalous environmental conditions were obtained from the Aqua-MODIS satellite. Variations in SST affected reproductive performance more than larval performance in Pteria sterna. Spawning induction failed in November 2008 and succeeded in February, April, and June 2009, although only the larvae from April completed metamorphosis and settled, given the riper broodstock, larger oocytes, and favorable environmental conditions (21.80 °C; 31 mg·L-1 total seston; +0.50 °C SST). Positive SST anomalies (+0.50 to +1.10 °C) from August to December 2008 resulted in longer summer conditions that affected spawning in February 2009. In June 2009 (22.50 °C; 29.50 mg·L-1 total seston; +0.40 °C SST), when the percentages of ripe gonads and mature oocytes were small, the larvae were not viable, and few spat settled. In addition to collecting ripe broodstock in winter-spring for optimal larval and spat viability, we recommend including a brief conditioning period at the hatchery following the spawning peak and a second conditioning period in late autumn to promote nutrient recycling and natural gamete recovery.

Resumen. Se estudió el desempeño reproductivo y larvario de Pteria sterna en relación a factores ambientales anómalos, hipotetizando que la transición entre los eventos de La Niña y El Niño 2008-2009 afectó los periodos “normales” para recolectar reproductores maduros y cultivar larvas en laboratorio. Se realizaron muestreos estacionales en 2 periodos reproductivos (febrero y abril 2009), 1 periodo pre-reproductivo (noviembre 2008) y 1 periodo post-reproductivo (junio 2009). De las 40 ostras recolectadas en cada periodo, 20 se utilizaron para evaluar el desove y cultivo larvario y 20 para determinar indicadores de condición reproductiva. La temperatura, salinidad y contenido de seston se monitorearon en cada periodo. Los datos de temperatura superficial del mar (TSM) asociados a condiciones ambientales anómalas se obtuvieron del satélite Aqua-MODIS. Las variaciones en la TSM afectaron más el desempeño reproductivo que el desempeño larvario de Pteria sterna. La inducción al desove falló en noviembre 2008 y fue exitosa en febrero, abril y junio 2009, aunque solo en abril las larvas completaron la metamorfosis y se fijaron, a partir de reproductores más maduros, ovocitos más grandes y condiciones ambientales favorables (21.80 °C; ~31 mg·L-1 seston total; +0.50 °C TSM). Las anomalías positivas de TSM (+0.50 a +1.10 °C) de agosto a diciembre 2008 favorecieron un verano más largo que afectó el desove de febrero 2009. En junio 2009 (22.50 °C, 29.50 mg·L-1 seston total, +0.40 °C TSM), cuando los porcentajes de gónadas y ovocitos maduros eran bajos, las larvas no fueron viables y pocas semillas se fijaron. Además de recolectar reproductores maduros en invierno-primavera para una viabilidad óptima de las larvas y semillas, recomendamos incluir un breve periodo de acondicionamiento en el laboratorio después del pico de desove y un segundo a finales del otoño para promover el reciclaje de nutrientes y la recuperación natural de gametos.

Abstract. Technological development for Gymnotus sp. farming is relevant because this species has a socio- economic impact in South American regions where sport fishing is an important activity. Although Gymnotus sp. breeds in captivity, fry survival in ponds can be unacceptable for culture systems. The objective of this work was to test the response to hormonal induction of Gymnotus sp. with carp pituitary extract (CPE) and gonadotrophin-releasing hormone (GnRH) in relation to different male and female reproductive parameters. CPE treatment specimens were stripped 12 and 20 hours after the triggering dosage, and GnRH treatment specimens were stripped 10 and 12 hours after hormonal application. We could obtain positive results using CPE with a short capture-induction interval (C-II) with broodstock in mature stages of gonadal development. Percentage of oocytes with peripheral germinal vesicle (%OPGV) and oocyte diameter showed significant differences between groups treated with CPE. Oocytes could be successfully extracted from two females treated with CPE and stripped 12 hours after the last dosage. Semen was only extracted from males treated with CPE. GnRH stimulation did not give positive results because gametes could not be extracted with different doses and C-II used. This work is the first description of semen quality parameters in Gymnotus sp. Future works should focus on combining hormonal induction strategies with CPE and the management of environmental variables.

Resumen El desarrollo tecnológico para el cultivo de Gymnotus sp. es relevante porque este género tiene un impacto socioeconómico en regiones sudamericanas donde la pesca deportiva es una actividad importante. Aunque Gymnotus sp. se reproduce en cautiverio, la supervivencia de los alevines en los estanques puede ser insuficiente para un sistema de cultivo. El objetivo de este trabajo fue evaluar la respuesta de diferentes parámetros reproductivos a la inducción hormonal en Gymnotus sp. con extracto bruto de hipófisis de carpa (EBH) y hormona liberadora de gonadotrofinas (GnRH). Las muestras de gametos del tratamiento con EBH se extrajeron 12 y 20 horas después de la dosis desencadenante, las muestras del tratamiento con GnRH se extrajeron 10 y 12 horas después de la aplicación hormonal. El porcentaje de ovocitos con vesícula germinal periférica (%OVGP) y el diámetro de los ovocitos mostraron diferencias significativas entre grupos tratados con EBH con un intervalo captura-inducción (IC-I) de corta duración, con reproductores en etapas avanzadas de desarrollo gonadal. Se pudieron extraer ovocitos con éxito a dos hembras inducidas con EBH, 12 horas después de la dosis desencadenante y, además, se extrajo semen sólo de los machos inducidos con EBH. La estimulación con GnRH no dio resultados positivos en las diferentes dosis e IC-I utilizados, dado que no se pudieron extraer gametos. Este trabajo es la primera descripción de los parámetros de calidad del semen en Gymnotus sp. Futuras líneas de trabajo deberán centrarse en el manejo de variables ambientales para establecer una estrategia de reproducción que se pueda utilizar a nivel productivo.

The objective of this study was to evaluate the effect of α-lipoic acid on in vitro maturation and of l-arginine on in vitro fertilization of oocytes for in vitro production of sheep embryos. Thus, the ovaries were collected at a local slaughterhouse and the oocytes collected by the method of follicular aspiration with a vacuum pump were divided equally into five maturation groups: CON, without addition of antioxidant; CIS group, with cysteamine as an antioxidant source; and the groups ALA5, ALA10 and ALA20, containing concentrations of 5.0, 10.0 and 20.0 µM of ALA. After 24h of maturation, the oocytes were evaluated concerning occurrence and degrees of expansion of the cumulus cells. The oocytes of the best IVM group were destinated for in vitro fertilization (IVF). The selected and capacitated sperm were included in five groups: CON, without addition of capacitator agent; HEP group, with heparin as a capacitator source; and ARG5, ARG10 and ARG20 groups, where IVF occurred in the same HEP medium, replacing heparin with 5 mM, 10 mM and 20 mM L-arginine, respectively. The results were expressed as a percentage and the variables of cumulus cell expansion and number of cleaved structures were compared using the chi-square test in Epi Info software (Epi Info 7.2.5, Atlanta, GA, USA, 2021). Results were considered significant when P < 0.05. Regarding the expansion of cumulus cells all groups showed 100% expansion, on the total expansion category of COCs it was observed that ALA5 and ALA20 groups did not present the same proportion of COCs with total expansion as CIS group. After in vitro fertilization (IVF), there were no statistical differences in relation to the cleaved structures between CON, HEP, ARG5 and ARG10 groups. However, it was also observed that the use of 20.0 mM of L-arginine reduced the percentage of cleaved structures when compared to the ARG10 group (P<0.05).

El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del ácido α-lipoico en la maduración in vitro y la l-arginina en la fecundación in vitro de ovocitos para la producción in vitro de embriones ovinos. Así, se recolectaron ovocitos de ovarios obtenidos de mataderos mediante el método de aspiración folicular con bomba de vacío, los cuales se dividieron en cinco grupos de maduración: CON, sin adición de antioxidante, grupo CIS, con cisteamina como fuente antioxidante y los grupos ALA5, ALA10 y ALA20, que contienen concentraciones de 5, 10 y 20 µM de ácido α-lipoico. Después de 24 h de maduración, se evaluó la aparición y el grado de expansión de las células del cúmulo en los ovocitos. Los ovocitos del mejor grupo MIV fueron destinados a fecundación in vitro (FIV), siendo por tanto incluidos en gotas con medio de fecundación in vitro, junto con los espermatozoides seleccionados y capacitados, resultando en los siguientes grupos: CON, sin adición de agente capacitador; grupo HEP, con heparina como fuente de condensadores; y los grupos ARG5, ARG10 y ARG20, donde se produjo la FIV en el mismo medio HEP, reemplazando la heparina por L-arginina 5, 10 y 20 mM, respectivamente. Los resultados se expresaron en porcentajes y las variables expansión celular del cúmulo y número de estructuras escindidas se compararon mediante la prueba chicuadrado del software Epi Info (Epi Info 7.2.5, Atlanta, GA, USA, 2021). Los resultados se consideraron significativos cuando P lt; 0,05. En cuanto a la expansión de las células del cúmulo, todos los grupos mostraron 100% de expansión. Evaluando los grados de expansión de las células del cúmulo, en la categoría de expansión total, se observó que los grupos ALA5 y ALA20 presentaron la misma proporción de CCO con expansión total que el grupo CIS (Plt;0.05), sin embargo se observa que hay una tendencia a la baja de las estructuras con plena expansión cuando se utilizan antioxidantes. En cuanto a las estructuras escindidas, fue posible identificar que no hubo diferencias estadísticas en relación a las estructuras escindidas, entre los grupos CON, HEP, ARG5 y ARG10. Sin embargo, también se observó que el uso de Larginina 20 mM redujo el porcentaje de estructuras escindidas en comparación con el grupo ARG10 (Plt;0.05).

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do ácido α-lipóico na maturação in vitro e da l-arginina na fertilização in vitro de oócitos para produção in vitro de embriões ovinos. Desta forma, foram realizadas colheitas de oócitos oriundos de ovários obtidos em abatedouro através do método de aspiração folicular com bomba de vácuo, que foram divididos em cinco grupos de maturação: CON, sem adição de antioxidante, grupo CIS, com cisteamina como fonte antioxidante e os grupos ALA5, ALA10 e ALA20, contendo as concentrações de 5, 10, e 20 µM de ácido α-lipóico. Após 24h de maturação, os oócitos foram avaliados quanto à ocorrência e grau de expansão das células do cumulus. Os oócitos do melhor grupo MIV foram destinados à fertilização in vitro (FIV), sendo, portanto, incluídos em gotas com meio de fertilização in vitro, juntamente com os espermatozoides selecionados e capacitados, resultando nos seguintes grupos: CON, sem adição de capacitador agente; grupo HEP, com heparina como fonte de capacitor; e grupos ARG5, ARG10 e ARG20, onde a FIV ocorreu no mesmo meio HEP, substituindo a heparina por L-arginina 5, 10 e 20 mM, respectivamente. Os resultados foram expressos em porcentagem e as variáveis de expansão das células do cumulus e número de estruturas clivadas foram comparadas por meio do teste qui-quadrado do software Epi Info (Epi Info 7.2.5, Atlanta, GA, EUA, 2021). Os resultados foram considerados significativos quando P lt; 0,05. Em relação à expansão das células do cumulus, todos os grupos apresentaram 100% de expansão. Avaliando os graus de expansão das células do cumulus, na categoria de expansão total observou-se que os grupos ALA5 e ALA20 apresentaram a mesma proporção de CCO com expansão total que o grupo CIS (Plt;0,05), porém se observa que há uma tendência de queda de estruturas com expansão total quando os antioxidantes foram utilizados. Em relação às estruturas clivadas, foi possível identificar que não houve diferenças estatísticas em relação às estruturas clivadas, entre os grupos CON, HEP, ARG5 e ARG10. Contudo, também foi observado que o uso de 20 mM de L-arginina reduziu o percentual de estruturas clivadas quando comparado ao grupo ARG10 (Plt;0,05).

The objective of this study was to evaluate the effect of including cilostazol in the in vitro maturation medium of oocytes on the in vitro production of sheep embryos. Oocytes were collected from ovaries obtained from a slaughterhouse by follicular aspiration with a vacuum pump. The oocytes were divided into four maturation groups: the CON group, where the cumulus-oocyte complexes were immersed in TCM-199 supplemented with 500 IU of penicillin, 0.5 mg of streptomycin, 1.25 µg of amphotericin, 0.2 mM of sodium pyruvate, 10% (v/v) fetal bovine serum (FBS), 10 ng/mL of epidermal growth factor (EGF), 10 µg/mL of FSH, 10 µg/mL of LH, 10 µg/mL of estradiol, and 100 µM of cysteamine; and in the CILO0.3, CILO1, and CILO10 groups, the oocytes were matured in the CON group medium without the addition of cysteamine and supplemented with concentrations of 0.3, 1, and 10 µM of cilostazol, respectively. After 24 hours, the oocytes were evaluated for the presence or absence of cumulus cells and the degree of expansion and then subjected to in vitro fertilization (IVF) with sperm in FIV medium. After IVF, the presumptive zygotes were cultured in vitro. Cleavage was evaluated on day 2, with day 0 being the start of IVF. Results were expressed as a percentage, and variables such as cumulus cell expansion and the number of cleaved structures were compared using the chi-square test in the Epi Info software (Epi Info 7.2.5, Atlanta, GA, USA, 2021). Results were considered significant when P lt; 0.05. All groups showed 100% cumulus cell expansion, and there were no significant differences in cumulus cell expansion degree between the cilostazol- and cysteamine-supplemented groups (P gt; 0.05), as well as no significant differences in cleavage rates between the cilostazol- and cysteamine-supplemented groups (P gt; 0.05).

El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la inclusión de cilostazol en el medio de maduración in vitro de ovocitos sobre la producción in vitro de embriones ovinos. Para ello, se realizaron recolecciones de ovocitos provenientes de ovarios obtenidos en un matadero mediante el método de aspiración folicular con bomba de vacío. Los ovocitos se dividieron en cuatro grupos de maduración: grupo CON, donde los complejos cúmulus ovocitos se sumergieron en TCM-199, suplementado con 500 UI de penicilina, 0,5 mg de estreptomicina, 1,25 µg de anfotericina, 0,2 mM de piruvato de sodio, 10% (v/v) de suero fetal bovino (SFB), 10 ng/mL de factor de crecimiento epidérmico (EGF), 10 µg/m de FSH, 10 µg/mL de LH, 10 µg/mL de estradiol y 100 µM de cisteamina; y en los grupos CILO0,3; CILO1 y CILO10, los ovocitos se maduraron en el medio del grupo CON, pero sin la adición de cisteamina y suplementado con las concentraciones de 0,3; 1 y 10 µM, respectivamente. Después de 24 horas, los ovocitos se evaluaron en cuanto a la presencia o no de células del cúmulus y en cuanto al grado de expansión y se destinaron a la fecundación in vitro, en medio FIV, junto con espermatozoides. Después de la FIV, los presuntos cigotos siguieron para el cultivo in vitro. Se evaluaron las clivajes en el día 2, siendo el día 0 el día del inicio del CIV. Los resultados se expresaron en porcentaje y las variables de expansión de las células del cúmulus y número de estructuras clivadas se compararon mediante la prueba del chi-cuadrado del software Epi Info (Epi Info 7.2.5, Atlanta, GA, EE. UU., 2021). Los resultados se consideraron significativos cuando P lt; 0,05. En relación a la expansión de las células del cúmulus, todos los grupos presentaron el 100% de expansión. No hubo diferencias significativas en cuanto al grado de expansión de las células del cúmulus entre los grupos suplementados con cilostazol y cisteamina (P gt; 0,05), así como no hubo diferencias significativas entre las tasas de clivaje entre los grupos suplementados con cilostazol y cisteamina (P gt; 0,05).

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da inclusão de cilostazol no meio de maturação in vitro de oócitos sobre produção in vitro de embriões ovinos. Para isso, foram realizadas colheitas de oócitos oriundos de ovários obtidos em abatedouro por meio do método de aspiração folicular com bomba de vácuo. Os oócitos foram divididos em quatro grupos de maturação: grupo CON, onde os complexos cumulus oócitos foram imersos em TCM-199, suplementado com 500 UI de penicilina, 0,5 mg de estreptomicina, 1,25 µg de anfotericina, 0,2 mM de piruvato de sódio, 10% (v/v) de soro fetal bovino (SFB), 10 ng/mL de fator de crescimento epidérmico (EGF), 10 µg/m de FSH, 10 µg/mL de LH, 10 µg/mL de estradiol e 100 µM de cisteamina; e nos grupos CILO0,3; CILO1 e CILO10, os oócitos foram maturados no meio do grupo CON, mas sem a adição de cisteamina e suplementado com as concentrações de de 0,3; 1 e 10 µM , respectivamente. Após 24h, os oócitos foram avaliados quanto a presença ou não de células do cumulus e quanto ao grau de expansão e destinados à fecundação in vitro, em meio FIV, juntamente com espermatozoides. Após a FIV, os presumíveis zigotos seguiram para o cultivo in vitro. Foram avaliadas clivagens no dia 2, sendo dia 0 o dia do início do CIV. Os resultados foram expressos em porcentagem e as variáveis de expansão das células do cumulus e número de estruturas clivadas foram comparadas por meio do teste qui-quadrado do software Epi Info (Epi Info 7.2.5, Atlanta, GA, EUA, 2021). Os resultados foram considerados significativos quando P lt; 0,05. Em relação à expansão das células do cumulus, todos os grupos apresentaram 100% de expansão. Não houve diferenças significativas quanto ao grau de expansão das células do cumulus entre os grupos suplementados com cilostazol e cisteamina (P gt; 0,05), assim como não houve diferenças significativas entre as taxas de clivagem entre os grupos suplementados com cilostazol e cisteamina (P gt; 0,05).

RESUMEN: Objetivo: Analizar la relación entre el índice de Masa Corporal en mujeres y los resultados obtenidos en las técnicas de reproducción asistida. Método: Se llevó a cabo un diseño no experimental, transversal, descriptivo y correlacional, mediante un análisis de datos secundarios en varias clínicas de reproducción asistida en España. Se analizaron 3.273 historias clínicas de mujeres sometidas a fecundación in vitro entre 2015-2018. Se recogieron datos de filiación e inicio del tratamiento, datos antropométricos, antecedentes personales, enfermedades actuales, esterilidad primaria, esterilidad secundaria, así como los parámetros referentes a los resultados tras tratamiento de reproducción asistida. El análisis estadístico se realizó mediante el software SPSS-V19.0. Resultados: 798 mujeres (24,42%) tenían un IMC ≥25. Las mujeres con sobrepeso consiguieron un menor número de ovocitos recuperados y fecundados, así como menor número de embriones obtenidos. Las mujeres con peso normal consiguieron un menor número de óvulos maduros y las mujeres con bajo peso presentaron una menor tasa de fecundación. Conclusiones: Se ha encontrado que los resultados obtenidos en las técnicas de reproducción asistida tienen relación con el índice de Masa Corporal de las mujeres.

ABSTRACT: Objective. To analyze the relationship between the Body Mass Index in women and the results obtained in assisted reproductive techniques. Methods. A non-experimental, cross-sectional, descriptive and correlational design was carried out through an analysis of secondary data in several assisted reproduction clinics from Spain. 3,273 medical records of women undergoing In Vitro Fertilization between 2015 and 2018 were analyzed. Data on affiliation and treatment initiation, anthropometric data, personal history, current diseases, primary and secondary infertility, as well as the reference parameters to the results after the assisted reproduction treatment were collected. The statistical analysis was performed using SPSS v19.0 software. Results. A total of 798 women (24.42%) had a BMI values ≥ 25. The overweight women achieved a lower number of oocytes retrieved and fertilized, as well as fewer embryos obtained. The women with normal weight achieved a lower number of mature oocytes and those with low weight had a lower fertilization rate. Conclusions. It has been found that the results obtained in assisted reproductive techniques are related to women's Body Mass Index.

ABSTRACT: Treatment with prostaglandin F2α (PGF) induces ovulation and increases conception rates in cows, while improving embryo production in buffalos. However, its effect on superovulated cows is unknown. This study verified whether single PGF administration concurrent with artificial insemination (AI) improves fertilization and embryo production rates in superovulated cows. In each replicate, embryo donor cows were equally allocated to two groups: the untreated control and PGF groups. The latter of which received 482 µg of cloprostenol concurrent with the first AI. Each cow (n = 35) was subjected to two superovulations (SOV) in a crossover design (total = 70 embryo collections). In the control and PGF groups, respectively, the observed responses were [median (95% CI)]: 12 (10-18) and 15 (12-18) total structures, 9 (7-11) and 7 (6-10) viable embryos, 1 (0-1) and 1 (1-3) degenerated embryos, and 1 (0-3) and 2 (0-5) oocytes (P > 0.05). In conclusion, single PGF treatment concurrent with the first AI did not affect embryo production in superovulated cows.

RESUMO: A prostaglandina F2α (PGF) pode induzir a ovulação e melhorar tanto a concepção em vacas, como a produção de embriões em búfalas, mas o efeito em vacas superovuladas é desconhecido. Esse estudo teve como objetivo verificar se a administração de uma dose de PGF na inseminação artificial (IA) após a superovulação (SOV) melhora as taxas de fecundação e produção embrionária em vacas. Em cada replicação, vacas doadoras de embriões foram equilibradamente alocadas em dois grupos: controle, não tratado, ou PGF, que recebeu 482 µg de cloprostenol no momento da primeira IA. Cada doadora (n = 35) foi submetida a duas SOV em um delineamento crossover (total = 70 coletas de embriões). Nos grupos controle e PGF, respectivamente, foram observados [medianas (IC 95%)]: 12 (10-18) e 15 (12-18) estruturas totais; 9 (7-11) e 7 (6-10) embriões viáveis; 1 (0-1) e 1 (1-3) embriões degenerados; e 1 (0-3) e 2 (0-5) ovócitos (P > 0,05). Conclui-se que uma única administração de PGF no momento da primeira IA não afeta a produção embrionária de vacas superovuladas.

Abstract Specimens of Cnemidocarpa amphora were collected monthly from the Arabian Gulf from September 2017 to August 2018. Parts of their gonads were prepared for histological testing. The gonads’ diameters varied by month. Each gonad contained many ovarian follicles with different morphologies and was surrounded by several testicular follicles. The ovarian and testicular follicles were separate, although the latter were always present near the former. Repeated measures ANOVA tests were conducted to investigate monthly changes in oocyte stages. In squirts measuring 12–13 cm in length, the gonads measured 30–50 mm from July to August; 20–25 mm from September to October; 15–20 mm from November to February; and 25–40 mm from March to June. Oogonia budded from the germinal epithelium with diameters of 20–30 µm. Previtellogenic oocytes measuring 70–120 µm were characterized by the deposition of small granules of protein around the nucleus, a continuous layer of follicular cuboidal epithelium, and scattered vacuoles in the ooplasm. The measurement of gonads and oocyte diameters were performed by image analysis (Image scope 2.3, Image Line, Inc.) and stage micrometer. The vitellogenic oocytes measured 130–220 µm and the follicular epithelium consisted of flattened and cuboidal layers. Beneath the vitelline membrane, scattered test cells appeared in the ooplasm and different granules of protein and MPS were deposited in the ooplasm. In the later phase, lipid droplets began to appear in the ooplasm. Yolk bodies formed after the impregnation of various granules together and the oocyte was ready to be shed. Before spawning, a yolk membrane appeared above the ooplasm. Post-vitellogenic oocytes, in which the homogeneity of ooplasm was restored, underwent gradual lysis and entered the atretic phase. Different stages of sperm development were present year-round in different follicles of the same squirt; hence, the testes were always mature.

Resumo Amostras de Cnemidocarpa amphora foram coletadas mensalmente no Golfo Pérsico de setembro de 2017 a agosto de 2018. Partes de suas gônadas foram preparadas para testes histológicos. Os diâmetros das gônadas variaram de mês para mês. Cada gônada continha muitos ácinos ovarianos com diferentes morfologias e era circundada por vários folículos testiculares. Os folículos ovarianos e testiculares estavam separados, embora os últimos estivessem sempre presentes próximos aos primeiros. Testes ANOVA de medidas repetidas foram conduzidos para investigar mudanças mensais nos estágios oocitários. Em esguichos medindo de 12 a 13 cm de comprimento, as gônadas mediam de 30 a 50 mm de julho a agosto; 20 a 25 mm de setembro a outubro; 15 a 20 mm de novembro a fevereiro; e 25 a 40 mm de março a junho. Oogônias brotaram do epitélio germinativo com diâmetros de 20 a 30 µm. Oócitos pré-vitelogênicos medindo 70 a 120 µm foram caracterizados pela deposição de pequenos grânulos de proteína ao redor do núcleo, uma camada contínua de epitélio folicular cúbico e vacúolos dispersos no ooplasma. A mensuração dos diâmetros das gônadas e dos ovócitos foi realizada através de análise de imagem (Imagescope 2.3, Image Line, Inc.) e micrômetro de palco. Os oócitos vitelogênicos mediam 130 a 220 µm e o epitélio folicular consistia em camadas achatadas e cúbicas. Abaixo da membrana vitelina, células teste espalhadas apareceram no ooplasma e diferentes grânulos de proteína e MPS foram depositados no ooplasma. Na fase posterior, gotículas lipídicas começaram a aparecer no ooplasma. Corpos de gema formados após a impregnação de vários grânulos juntos e o oócito estava pronto para ser derramado. Antes da desova, uma membrana de vitelo apareceu acima do ooplasma. Oócitos pós-vitelogênicos, nos quais a homogeneidade do ooplasma foi restaurada, sofreram lise gradual e entraram na fase atrésica. Diferentes estágios de desenvolvimento do esperma estiveram presentes o ano todo em diferentes folículos do mesmo esguicho; portanto, os testículos estavam sempre maduros.

Abstract In the last years, the improvement of the assisted reproduction techniques and different laws between countries has propitiated an important flow and exchange of patients and reproductive biological material between nationals and internationals clinics. Spain has one of the better assisted reproduction techniques laws regarding the obtaining, handling, storing and distributing cells and tissues for reproduction, although these laws are submitted to the European laws. These laws and the recommendations of scientific societies regulate the transport of human embryos, oocytes and semen. So, they establish technical conditions and everybody’s documents (patients, home clinic, destination clinic and carrier) of these kinds of transports. Thus, it guarantee the sample’s viability and, very important, its traceability.

Resumen En los últimos años, la mejora de las técnicas de criopreservación y la diferencia de legislación entre distintos países en materia de reproducción asistida, ha propiciado que se produzca un importante flujo e intercambio de pacientes y de material biológico reproductivo entre clínicas nacionales e internacionales. España es uno de los países mejor legislados en materia de obtención, manejo, almacenaje y distribución de células y tejidos con carácter reproductivo, aunque estén bajo el paraguas de las normativas marcadas por la Unión Europea, de rango superior a las nacionales. Estas leyes, junto con las recomendaciones de las distintas sociedades científicas regulan el traslado de prembriones humanos, ovocitos o semen. Se establecen así, las condiciones técnicas para estos traslados y la documentación que cada parte del proceso (pacientes, clínica de origen, clínica de destino y empresa de transporte) está obligada a aportar con el fin de garantizar la correcta viabilidad de las muestras y, muy importante, la trazabilidad de estas desde su obtención hasta el laboratorio de destino.

Abstract Fertility preservation provides a resource to accomplish a parental project in cancer patients or patients facing other conditions affecting future fertility. Therefore, it is crucial for these patients to access fertility counseling. Nevertheless, few studies analyzed the population's knowledge and attitudes regarding fertility preservation. The current study aimed to examine the Portuguese population's perception of knowledge regarding fertility preservation for medical and non-medical reasons. An online survey, with a sample of 300 participants, was used to address the perception of knowledge and attitudes toward fertility preservation. The results revealed that the majority of the participants were aware that cancer treatments could negatively impact the patient’s fertility. Oocyte cryopreservation and semen cryopreservation were the fertility preservation techniques participants knew better. The study also revealed a high degree of agreement with the provision of fertility counseling, and participants were interested in having more information on this topic. Overall, the study provides relevant findings suggesting the need for enhancing health literacy on this topic.

Resumo A preservação da fertilidade representa uma possível resposta para a concretização do projeto de parentalidade em pacientes com cancro ou outras patologias que possam afetar a fertilidade futura. Como tal, revela-se fundamental que estes pacientes tenham acesso a aconselhamento de fertilidade. Ainda assim, existem poucos estudos que analisem a perceção de conhecimento e concordância da população geral acerca da preservação da fertilidade. O presente estudo teve como objetivo examinar a perceção do conhecimento da população portuguesa acerca da preservação da fertilidade por razões médicas, mas também não médicas. Para tal foi utilizado um questionário online, numa amostra de 300 participantes, sendo que foram abordados os conhecimentos e atitudes da população relativamente à preservação da fertilidade. Os resultados revelaram que a maioria da população tem conhecimento que os tratamentos oncológicos podem ter um impacto negativo na fertilidade dos pacientes, sendo as técnicas de preservação de fertilidade mais conhecidas pela população portuguesa a criopreservação de ovócitos e a criopreservação de sémen. O estudo também revelou um grau elevado de concordância com a importância de disponibilizar aconselhamento de fertilidade, assim como o interesse da maioria da população em obter mais conhecimento sobre este tema. Na generalidade, o estudo fornece dados relevantes que sugerem a necessidade do aumento da literacia acerca de preservação da fertilidade.

Resumen. Muchas especies de la familia Serranidae son hermafroditas y tienen importancia comercial. Paranthias colonus pertenece a esta familia, y no se conocen las características de su reproducción. La presente investigación se llevó a cabo con ejemplares provenientes de la pesca comercial en la costa sur de Jalisco, México. En total, fueron procesados 1,541 ejemplares, los cuales presentaron una longitud media de 30.30 ± 0.10 cm y un intervalo de longitud de 19.80 a 38.00 cm. Las gónadas de los ejemplares fueron analizadas macro y microscópicamente. La proporción de sexos fue de 1.00:0.97 (H:M). De acuerdo con los valores mensuales máximos del índice gonadosomático, los estadios de madurez gonadal y el diámetro de los ovocitos, P. colonus presenta 2 periodos reproductivos amplios, de marzo a junio y de noviembre a diciembre. Se encontró correlación significativa entre los valores medios mensuales del índice gonadosomático y el factor de condición relativo. Las gónadas en estadio maduro presentaron ovocitos en 6 fases de desarrollo diferentes y con diámetros de 14.30 a 417.40 µm, lo que supone que el desarrollo de los ovocitos es asincrónico. En el testículo, el desarrollo de la línea germinal es del tipo lobular no restringido. Este órgano no presentó un arreglo típico de un pez teleósteo, ya que los lóbulos parecen estar delimitados por lamelas. La información generada en este estudio indica que P. colonus es una especie gonocórica. La longitud media de madurez fue de 26.80 cm en hembras y 26.90 cm en machos. Las longitudes medias de captura indicaron que el 79.70% de las hembras y el 83.30% de los machos ya se habían reproducido por lo menos una vez antes de ser capturados.

Abstract. Many species in the family Serranidae are hermaphrodites and of commercial importance. Paranthias colonus belongs to this family, and its reproductive traits are unknown. The present research was carried out with specimens taken from the commercial fishery on the southern coast of Jalisco, Mexico. A total of 1,541 specimens were processed, with an average length of 30.30 ± 0.10 cm and a length interval of 19.80 to 38.00 cm. Specimen gonads were analyzed macro- and microscopically. The sex ratio was 1.00:0.97 (F:M). According to the maximum monthly values of the gonadosomatic index, gonad maturity stages, and oocyte diameters, P. colonus has 2 broad reproductive periods, from March to June and from November to December. A significant correlation was found between the monthly mean values of the gonadosomatic index and the relative condition factor. Gonads in the mature stage had oocytes in 6 different development phases, with diameters that ranged from 14.30 to 417.40 µm, which means that oocyte development is asynchronous. In the testicle, the development of the germ line is of the unrestricted lobular type. This organ did not present the typical arrangement found in teleost fish, since lobes seem to be delimited by lamellae. The information developed in this study indicates that P. colonus is a gonochoric species. Average length at sexual maturity was 26.80 cm for females and 26.90 cm for males. Average catch lengths indicated that 79.70% of females and 83.30% of males had already reproduced at least once before being caught.

Resumo Objetivo O presente estudo tem como objetivo descrever as principais características dos casais femininos que recorrem a uma clínica de fertilidade, perceber se estas pacientes têm planos prévios claros sobre a procriação, como acabam por completar o seu planejamento familiar e descrever sucintamente os principais resultados do método fertilização in vitro compartilhada lésbica (ROPA, na sigla em espanhol). Métodos Trata-se de um estudo retrospectivo descritivo da trajetória e dos resultados de casais femininos em uma clínica de fertilidade durante um período de 2 anos. Resultados Um total de 129 casais foram tratados. Apenas um terço dos casais não apresentava nenhuma condição que afetasse potencialmente a fertilidade ou idade avançada. A maioria dos casais optou pela inseminação artificial ou fertilização in vitro e a maioria manteve seus planos, ao contrário dos 38% dos casais que decidiram se submeter ao método ROPA que mudaram de planos. As taxas de nascidos vivos por tratamento (incluindo transferências de embriões congelados) – 22% para inseminação artificial, 58% para fertilização in vitro, 80% para tratamentos com oócitos ou embriões doados e 79% para ROPA. Quatro em cada cinco casais conseguiram nascidos vivos. Conclusão O presente estudo destaca a importância de um acompanhamento médico em casais femininos que recorrem à reprodução assistida. Apesar das taxas mais altas do que o esperado de distúrbios de fertilidade, os resultados foram bons. A maioria dos casais acaba em um método monoparental. Além disso, os resultados do método ROPA são tranquilizadores.

Abstract Objective The present study aims to describe the main characteristics of female couples resorting to a fertility clinic, to understand whether these patients have clear previous plans concerning procreation and how they end up completing their family planning, and to briefly describe the main outcomes of the recepción de ovocitos de pareja (ROPA, in the Spanish acronym: in English, reception of partner's oocytes) method. Methods This is a descriptive retrospective study of the pathway and outcomes of female couples in a fertility clinic during a 2-year period. Results A total of 129 couples were treated. Only one third of the couples had no condition potentially affecting fertility or advanced age. Most couples were decided to undergo artificial insemination or in vitro fertilization and the majority kept their plans, as opposed to 38% of the couples who decided to the ROPA method (lesbian shared in vitro fertilization) who changed plans. Live birth rates per treatment (including frozen embryo transfers) for artificial insemination, 58% for in vitro fertilization, 80% for treatments with donated oocytes or embryos, and 79% for ROPA. Four in five couples achieved live births. Conclusion The present study highlights the importance of a thorough medical workup in same-sex couples resorting to assisted reproduction. Despite the higher-than-expected rates of fertility disorders, the outcomes were good. Most couples end up in a single parented method. Furthermore, the results of the ROPA method are reassuring.

Resumen Plagioscion magdalenaees el recurso íctico más importante del embalse El Guájaro, en el norte de Colombia, y para sus pobladores ribereños, fundamental para las pesquerías de subsistencia de la región, lo que ha llevado a su sobreexplotación. En este artículo se describen los aspectos reproductivos deP. magdalenae,en este embalse. Se realizaron diez muestreos de recolección mensuales, entre abril de 2018 y enero de 2019, con el fin de abarcar cada momento del pulso de inundación. Se calcularon la proporción sexual, relación gonadosomática (RGS), fecundidad, diámetro de ovocitos y talla media de madurez sexual (L50). Se analizaron 207 ejemplares, y se establecieron siete intervalos de tallas; 126 individuos fueron machos y 81 hembras, con una proporción sexual de 1:1.6 (hembra-macho). La RGS indicó que este pez tiene varios picos reproductivos, los principales en julio y septiembre. La fecundidad absoluta fue 1909 ovocitos para aguas bajando, 1590 para aguas bajas, 2435 para aguas subiendo y 2132 para aguas altas, con un diámetro promedio de ovocito de 0.29 mm. Los machos maduraron primero que las hembras y la L50estuvo por debajo de la talla media de captura (30 cm), lo cual refleja que la normativa legal está bien determinada, pero no hay regulación para su pesca.

Abstract Plagioscion magdalenaeis the most important fish resource of the El Guájaro reservoir, Colombia, and its riparian inhabitants, fundamental for subsistence fisheries in the region, which has led to its overexploitation. This paper describes and evaluates the reproductive aspects ofP. magdalenaein this reservoir. Ten monthly collection samplings were made between April 2018 and January 2019, in order to cover each moment of the flood pulse. We calculated sex ratio, gonadosomatic ratio (RGS), fecundity, oocyte diameter and minimum and mean size at sexual maturity (L50). We analyzed 207 specimens and established seven size intervals; 126 individuals were males and 81 were females, with an overall sex ratio 1:1.6 (female-male). The RGS indicated that this fish has several reproductive peaks, the main ones being in July and September. Absolute fecundity was 1909 oocytes for falling water, 1590 for low water, 2435 for rising water and 2132 for high water; with an average oocyte diameter of 0.29 mm. Males matured earlier than females and their mean size at sexual maturity was below the mean catch size (30 cm), reflecting that legal regulations are well stipulated, but there is no strict control for fishing.

Resumen 18. El objetivo del presente trabajo fue el estudio de la morfología ovárica y la foliculogénesis de Gymnotus carapo, a fin de aportar información sobre su biología reproductiva, y que ésta sea de utilidad en el manejo de dicha especie como recurso pesquero. Se recolectaron 40 ejemplares hembras durante el periodo de febrero a diciembre del 2019 en ambientes naturales próximos a la Ciudad de Corrientes. Posteriormente a la captura fueron anestesiados con solución de lidocaína al 2% y sacrificados por sección medular. Los ovarios fueron aislados y fijados en formol al 10%; posteriormente fueron procesados para la técnica histológica convencional y coloreados con hematoxilina-eosina (H-E), tricrómica de Gomori y reacción histoquímica de PAS. Los preparados histológicos fueron analizados a través del microscopio óptico. Se pudo observar que la foliculogénesis en G. carapo es similar a la descrita para otros peces. El ovario y los ovocitos de G. carapo experimentan diferentes etapas de desarrollo: crecimiento primario, secundario, vitelogénesis y maduración durante el ciclo reproductivo, información que sienta base para estudios futuros sobre biología reproductiva. La información brindada en el presente trabajo es importante dado que aporta un estudio histológico detallado que describe la morfología ovárica y foliculogénesis en G. carapo y contribuye a la gestión y planificación de conservación de especies de importancia para el recurso pesquero.

Abstract 22. The objective of this work is to study the ovarian morphology and folliculogenesis of Gymnotus carapo, in order to provide information on its reproductive biology, and that this is useful in the management of this species as a fishing resource. 40 female specimens were collected during the period from February to December 2019 from natural environments near the City of Corrientes. After capture, they were anesthetized with 2% lidocaine solution and sacrificed by spinal section. The ovaries were isolated and fixed in 10% formalin; Later they were processed for the conventional histological technique and stained with hematoxylin-eosin (H-E), Gómori trichrome and PAS histochemical reaction. The histological preparations were analyzed through the light microscope. It was observed that the folliculogenesis in G. carapo is similar to that described for other fish. The ovary and oocytes of G. carapo undergo different stages of development: primary and secondary growth, vitellogenesis and maturation during the reproductive cycle, information that provides the basis for future studies on reproductive biology. The information provided in this work is important since it provides a detailed histological study that describes the ovarian morphology and folliculogenesis in G. carapo and contributes to the management and conservation planning of species that are of importance to the fishing resource.