Resumen: El experimento se realizó en el Laboratorio de Biotecnología de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional de Asunción, con el objetivo de evaluar dos tratamientos de desinfección de explantes para la micropropagación del banano (Musa spp.) variedad Nanicao. Se utilizaron 80 hijuelos de 30 - 40 cm de los cuales se extrajeron los ápices meristemáticos que fueron sembrados en medios MS (Murashige y Skoog 1962) con el agregado de 1 g.l-1 de carbón activado como antioxidante. Los tratamientos consistieron en dos concentraciones de NaClO (5 y 10 %) durante cinco minutos. El diseño experimental utilizado fue completamente al azar. Las variables evaluadas fueron: porcentaje de supervivencia, grado de oxidación y porcentaje de contaminación de plántulas. Los datos obtenidos fueron sometidos al análisis de varianza al 5 % de probabilidad de error. No se registraron diferencias significativas entre los tratamientos de desinfección aplicados relacionados a la sobrevivencia de explantes de banano cultivados in vitro, aunque existieron diferencias significativas con respecto al grado de oxidación y contaminación microbiana. Se logró una regeneración de 12,5% de los segmentos nodales de banano sembrados. En conclusión, al incrementar la concentración de hipoclorito de sodio, el porcentaje de explantes contaminados con hongos y bacterias fue menor, sin embargo, esto se tradujo en un incremento del grado de oxidación de explantes de Musa spp variedad Nanicao.

Abstract: The experiment was carried out in the Biotechnology Laboratory of the Facultad de Ciencias Agrarias of the Universidad Nacional de Asunción, with the objective of evaluating two explant disinfection treatments for the micropropagation of banana (Musa spp.) variety Nanicao. Eighty shoots of 30 - 40 cm were used, from which the meristematic apices were extracted and planted in MS media (Murashige and Skoog 1962) with the addition of 1 g.l-1 of activated carbon as an antioxidant. The treatments consisted of two concentrations of NaClO (5 and 10%) for five minutes. The experimental design used was completely randomized. The variables evaluated were: percentage of survival, degree of oxidation and percentage of contamination of seedlings. The data obtained were subjected to variance analysis at 5% probability of error. No significant differences were recorded between the applied disinfection treatments related to the survival of banana explants cultivated in vitro, although there were significant differences with respect to the degree of oxidation and microbial contamination. A regeneration of 12.5% of the planted banana nodal segments was achieved. In conclusion, by increasing the concentration of sodium hypochlorite, the percentage of explants contaminated with fungi and bacteria was lower, however, this translated into an increase in the degree of oxidation of Musa spp variety Nanicao.

Resumen Beaucarnea hookeri, es una especie endémica de México y está catalogada como amenazada en la NOM-059-SEMARNAT-2010. Con la finalidad de micropropagar esta especie, se estableció un experimento en el Campus Montecillo, Colegio de Posgraduados en 2022, donde se evaluó la respuesta de los brotes durante la multiplicación in vitro con diferentes concentraciones de bencilaminopurina (BAP) y su capacidad de enraizamiento ex vitro durante su aclimatización. Se estableció un experimento con tres subcultivos subsecuentes (SC3, SC4, SC4-1), en SC3 se utilizaron brotes generados con 0.5 mg L-1 de BAP (SC2), en SC4 brotes sanos generados del SC3 y SC4-1 con brotes del SC3, pero, con hiperhidratación inicial (HHI). En el SC3 se evaluaron 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5 mg L-1 de BAP. En el SC4 0 y 0.5 mg L-1 BAP y en SC4-1 concentraciones de 0, 0.5 y 1 mg L-1 de BAP. Durante la aclimatización se evaluaron cuatro tratamientos de Radix® 10 000 (0, 1 000, 2 000 y 4 000 mg kg-1) y se utilizaron brotes del SC2. Durante la multiplicación se registró el número de brotes (NB) y el SC3 generó 6.35 brotes con la concentración 1.5 mg L-1 BAP, con presencia de HHI. En el SC4 se obtuvo 9.7 brotes en promedio y en SC4.1, 5.3 brotes, ambos subcultivos con 0.5 mg L-1 de BAP. Además, en el SC4-1 hubo recuperación de HHI. En el enraizamiento no existieron diferencias significativas entre los tratamientos y el testigo a 80 días del trasplante generó 73.3% de brotes con raíz (SBR). Únicamente los brotes del tratamiento testigo en multiplicación presentaron raíces lo que permite obtener plantas completas en 30 días.

Abstract Beaucarnea hookeri is a species endemic to Mexico and is listed as threatened in NOM-059-SEMARNAT-2010. In order to micropropagate this species, an experiment was established at the Montecillo Campus, College of Postgraduates in 2022, where the response of the shoots during in vitro multiplication with different concentrations of benzylaminopurine (BAP) and their capacity for ex-vitro rooting during acclimatization were evaluated. An experiment was established with three subsequent subcultures (SC3, SC4, SC4-1); in SC3, shoots generated with 0.5 mg L-1 BAP (SC2) were used; in SC4, healthy shoots generated from SC3; and SC4-1 with shoots from SC3 but with initial hyperhydration (IHH). In SC3, 0.5, 1, 1.5, 2, and 2.5 mg L-1 BAP were evaluated. In SC4, 0 and 0.5 mg L-1 BAP and in SC4-1, concentrations of 0, 0.5, and 1 mg L-1 BAP. During acclimatization, four treatments of Radix® 10 000 (0, 1 000, 2 000, and 4 000 mg kg-1) were evaluated, and shoots from SC2 were used. During multiplication, the number of shoots (NS) was recorded, and SC3 generated 6.35 shoots with the concentration of 1.5 mg L-1 BAP, with the presence of IHH. On average, 9.7 shoots were obtained in SC4, and 5.3 shoots in SC4-1, both subcultures with 0.5 mg L-1 BAP. In addition, there was a recovery of IHH in SC4-1. In rooting, there were no significant differences between treatments, and the control generated 73.3% of shoots with roots (SSR) 80 days after transplantation. Only the shoots of the control treatment in multiplication presented roots, which allowed complete plants to be obtained in 30 days.

Resumen La producción de piña (Ananas comosus L.) por métodos convencionales está limitada principalmente por la falta de disponibilidad de retoños de alto rendimiento. Sin embargo, se ha demostrado que por medio de metodologías de propagación in vitro como la embriogénesis somática y organogénesis, es posible obtener plantas de alto rendimiento de una manera más eficiente y controlable. El objetivo de este estudio consistió en generar un protocolo eficiente de micropropagación de piña criolla (Ananas comosus L.) para la multiplicación y conservación in vitro de esta especie, el estudio se llevó a cabo en 2021. Se evaluó la respuesta morfogénica de la piña criolla a partir de diferentes explantes (meristemo apical y hoja), cultivados en medio de cultivo Murashige y Skoog (MS) suplementado con diversos reguladores de crecimiento: ácido naftalenacético (ANA) (0.5, 1 y 1.5 mg L-1), 6-bencilaminopurina (BAP) (1, 2 y 3 mg L-1) y ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) (1, 2 y 4.5 mg L-1), así como un tratamiento control libre de reguladores. Los resultados mostraron que de los explantes evaluados la mejor respuesta se observó en el meristemo apical, en el cuales se obtuvo la formación de brotes adventicios a los 60 días del tratamiento de inducción, cuando el medio de cultivo fue suplementado con BAP a una concentración de 2 mg L-1 obteniéndose ocho brotes/explante. El protocolo desarrollado es un estudio clave para la propagación masiva de piña criolla.

Abstract The production of pineapple (Ananas comosus L.) by conventional methods is limited mainly by the lack of availability of high-yielding suckers. Nevertheless, it has been shown that, through in vitro propagation methodologies such as somatic embryogenesis and organogenesis, it is possible to obtain high-yielding plants in a more efficient and controllable way. The objective of this study was to generate an efficient protocol of micropropagation of landrace pineapple (Ananas comosus L.) for the in vitro multiplication and conservation of this species, the study was carried out in 2021. The morphogenic response of the landrace pineapple was evaluated based on different explants (apical meristem and leaf), grown in Murashige and Skoog (MS) culture medium supplemented with various growth regulators: naphthaleneacetic acid (NAA) (0.5, 1 and 1.5 mg L-1), 6-benzylaminopurine (BAP) (1, 2 and 3 mg L-1) and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) (1, 2 and 4.5 mg L-1), as well as a regulator-free control treatment. The results showed that, of the explants evaluated, the best response was observed in the apical meristem, in which the formation of adventitious shoots was obtained 60 days after induction treatment, when the culture medium was supplemented with BAP at a concentration of 2 mg L-1, obtaining eight shoots/explant. The protocol developed is a key study for the mass propagation of landrace pineapple.

Abstract Improving the efficiency in vitro culture conditions in established yellow pitahaya micropropagation protocols, allows evaluating the dependence of sucrose in the culture medium under photoautotrophic conditions to obtain high quality seedlings in less time, which favors their acclimatization in the mass production of this species. The objective of this research was to evaluate the levels of light intensity and the use or not of sucrose in the culture medium on the in vitro morphological and physiological response of yellow pitahaya (S. megalanthus) seedlings. Vegetative sections of yellow pitahaya were placed in growth and development culture media to obtain cuttings approximately six centimeters long to obtain the explants. The containers were placed at different light intensities: 50, 100 and 150 μmol/m-2s-1, using compact fluorescent lamps, whose intensities were adjusted using a luxometer. A completely randomized design with factorial arrangement (Factor A: three light intensities and Factor B: presence and absence of sucrose in the growth and development culture medium) and seven repetitions per treatment was used. The evaluations of the morphological and physiological response were made after 45 days of in vitro culture. The traits related to water content, dry weight and shoot length allow us to explain the photoautotrophic response of yellow pitahaya seedlings grown in vitro using light intensities of 50 and 100 μmol/m-2s-1 and in the absence of sucrose.

Resumen Mejorar la eficiencia en las condiciones de cultivo in vitro en protocolos de la micropropagación de pitahaya amarilla establecidos, permite evaluar la dependencia de la sacarosa en el medio de cultivo bajo condiciones fotoautotróficas con la finalidad de obtener plántulas de alta calidad en menor tiempo, que favorezca su aclimatación en la producción masiva de esta especie. La presente investigación tuvo como objetivo evaluar los niveles de intensidad de la luz y el empleo o no de la sacarosa en el medio de cultivo sobre la respuesta morfológica y fisiológica in vitro de plántulas de pitahaya amarilla (S. megalanthus). Secciones vegetativas de pitahaya amarilla fueron colocadas en medios de cultivo de crecimiento y desarrollo para la obtención de esquejes de aproximadamente seis centímetros de largo para la obtención de los explantes. Los recipientes fueron colocados a diferentes intensidades de la luz: 50, 100 y 150 μmol/m-2s-1, utilizando lámparas fluorescentes compactas, cuyas intensidades fueron ajustadas empleando un luxómetro. Se empleó un diseño completamente al azar con arreglo factorial (Factor A: tres intensidades de luz y Factor B: presencia y ausencia de sacarosa en el medio de cultivo de crecimiento y desarrollo) y siete repeticiones por tratamiento. Las evaluaciones de la respuesta morfológica y fisiológica fueron realizadas a los 45 días de cultivo in vitro. Los rasgos relacionados con el contenido hídrico, peso seco y longitud de brote permiten explicar la respuesta fotoautotrófica de las plántulas de pitahaya amarilla cultivada in vitro empleando intensidades de luz de 50 y 100 μmol/m-2s-1 y en ausencia de sacarosa.

Resumen Ficus americana y F. obtusifolia, se encuentran entre las especies arbóreas más importantes de los Bosques Tropicales Estacionalmente Secos (BTES) por su condición de siempre verdes y sus altos niveles de biomasa. Sin embargo, el BTES de Lambayeque y el norte de Perú está disminuyendo enormemente debido al avance de la agricultura migratoria, la minería ilegal y la deforestación. El objetivo de este trabajo fue estudiar los aspectos taxonómicos de ambas especies, así como la germinación de semillas, la micropropagación y la conservación de germoplasma in vitro. La germinación de semillas fue de 100 % en ambas especies hasta tres meses después de la recolección. Respecto a la micropropagación, el enraizamiento y la conservación de germoplasma, el medio de cultivo de Piper resultó efectivo, el cual está conformado por sales minerales MS con IAA 0.02 mg.L-1 y GA3 0.02 mg.L-1. La conservación in vitro de germoplasma duró más de 24 meses en ambas especies. La aclimatación en condiciones de invernadero alcanzó 50 % de supervivencia en ambas especies.

Abstract Ficus americana and F. obtusifolia are among the most important tree species in Seasonally Dry Tropical Forests (SDTF) due to their evergreen condition and high levels of biomass. However, the SDTF of Lambayeque and northern Peru is greatly diminishing due to the advance of migratory agriculture, illegal mining, and deforestation. The objective of this work was to study the taxonomic aspects of both species, as well as seed germination, micropropagation, and in vitro germplasm conservation. Seed germination was 100% for both species up to three months after collection. As for micropropagation, rooting, and germplasm conservation, the Piper culture medium was effective, as it was constituted by MS mineral salts with 0.02 mg.L-1 IAA and 0.02 mg.L-1 GA3. In vitro germplasm conservation lasted more than 24 months for both species. Acclimatization under greenhouse conditions reached 50% survival for both species.

Resumen La micropropagación o propagación in vitro es la propagación asexual de plantas utilizando técnicas de cultivo de tejidos vegetales (CTV). A pesar de las ventajas de estas técnicas, la contaminación de explantes, la asepsia del medio de cultivo y la acumulación de etileno en algunas especies han sido un problema que afecta la micropropagación. La reciente aplicación de las nanopartículas de plata (NPsAg) en la micropropagación se ha convertido en una alternativa eficiente para la solución a estos inconvenientes. Además, en estudios de laboratorio se ha demostrado que las NPsAg, a bajas concentraciones, tiene un efecto dosis-respuesta sobre el desarrollo vegetal, conocido como hormesis. En este artículo revisamos los efectos de las NPsAg sobre la reducción de la contaminación, inhibir los efectos de etileno y promover el desarrollo durante la micropropagación. Además, son una alternativa para otras aplicaciones en el CTV y en la agricultura moderna.

Abstract Micropropagation or in vitro propagation is the asexual propagation of plants using plant tissue culture (PTC) techniques. Despite the advantages of these techniques, the explants contamination, the asepsis in culture medium and the in vitro accumulation of ethylene in some species, have been a problem that affects the micropropagation. The recent application of silver nanoparticles (NPsAg) in micropropagation has become an effective tool for solving these issues. In addition, in laboratory studies it has been showed that NPsAg, at low concentrations, have a dose-respond effect on plant development, define as hormesis. In this article we reviewed the NPsAg effects on contamination reduction, inhibition of ethylene effects and development stimulation during micropropagation. Besides, they are an alternative to others applications in PTC and modern agriculture.

SUMMARY Indiscriminate deforestation is one of the anthropic activities that most impacts global biodiversity. Its immediate effects mainly reach vulnerable species with high commercial value, such as Cedrela odorata, so the development of biotechnological studies is a crucial element for the genetic conservation of its populations. In this context, this work aimed to analyze the seed germination, micropropagation, and germplasm conservation of C. odorata in one of the most arid regions in northern Peru. Seed germination reached 76.6 % development, with germination time between 9 and 12 days. Likewise, micropropagation produced seedlings with stem tips up to 5.4 cm in height, 12 nodes, and 83 % rooting. Finally, the conservation of germplasm resulted in individuals that reached up to 12 cm in height, 19 nodes, and presented an optimal root system. The positive results regarding seed germination, micropropagation, and germplasm conservation of C. odorata in northern Peru could offer new approaches to the development and genetic conservation of its populations, and provide a more efficient alternative for the management and local conservation of the species.

RESUMEN La deforestación indiscriminada es una de las actividades antrópicas que más impactan la biodiversidad global. Sus efectos inmediatos alcanzan principalmente especies vulnerables y con alto valor comercial, como Cedrela odorata, por lo que el desarrollo de estudios biotecnológicos es un elemento crucial para la conservación genética de sus poblaciones. En ese contexto, el objetivo de este trabajo fue analizar la germinación de semillas, micropropagación y conservación de germoplasma de C. odorata, en una de las regiones más áridas del norte del Perú. La germinación de semillas alcanzó una eficiencia de 76,6 %, con velocidades de germinación de entre 9 y 12 días. Asimismo, en ensayos de micropropagación se obtuvieron plántulas con ápices caulinares de hasta 5,4 cm de altura, 12 nudos y 83 % de eficiencia de enraizamiento. Por último, la conservación de germoplasma resultó en individuos que, a los 30 meses de cultivo, alcanzaron hasta 12 cm de altura, 19 nudos y presentaron un óptimo sistema radicular. Este estudio sugiere que los efectos positivos sobre la germinación de semillas, micropropagación y conservación de germoplasma de C. odorata en el norte del Perú, podrían ofrecer nuevos enfoques sobre el desarrollo y conservación genética de sus poblaciones, funcionando incluso como una alternativa más eficiente para el manejo y conservación local de la especie.

Abstract Until now, there is no protocol for the micropropagation of pecan trees (Carya illinoinensis) from explants of adult trees. Persistent microbial contamination and browning of tissues have impeded the success of previously proposed methods. Specifically, the adult tree leaf explant constitutes an unexplored starting point for the regeneration of C. illinoinensis. Therefore, the objective of this study was to determine a disinfection method and in vitro culture conditions that induce greater callus production in adult pecan tree leaf explants. Five disinfection methods were tested: (1) 70% ethanol for 50 s, 1.8-2.7% sodium hypochlorite with 2 drops/L of Tween 80 for 50 s, (2) 70% ethanol for 2 min, 1.8-2.7% sodium hypochlorite with 2 drops/L of Tween 80 for 2 min, (3) 70% ethanol for 2 min, 1.8-2.7% sodium hypochlorite with 2 drops/L of Tween 80 for 2 min, 1 g/L of carbendazim with 2 drops/L of Tween 80 for 20 min, (4) 70% ethanol for 2 min, 1.8-2.7% sodium hypochlorite with 2 drops/L of Tween 80 for 2 min, 8.8 g/L of carbendazim with 2 drops /L of Tween 80 for 20 min, and (5) 70% ethanol for 2 min, 1.8-2.7% sodium hypochlorite with 2 drops/L of Tween 80 for 2 min, 1 g/L of prochloraz with 2 drops/L of Tween 80 for 20 min. In addition, 6 different culture media were tested where the carbon source (sucrose, glucose and maltose), the inclusion of an antioxidant (AgNO3 and activated carbon), and the concentration of MS salts (maximum or one third of the maximum concentration) were varied. The explants were incubated for 50 days; a portion of the explants was incubated in the dark and the other under a photoperiod of 16 h. Likewise, some explants were inoculated in abaxial orientation, and others in abaxial orientation. The level of browning, the percentage of explants with callus, the fresh and dry weight of the calluses, and the percentage of explants contaminated by microorganisms were evaluated. The lowest percentage of contaminated explants was observed in the disinfection treatment that included immersion in prochloraz, and prochloraz was the only fungicide that allowed callogenesis in 100% of the treated explants. The darkening in the explants did not increase when the concentration of MS salts tripled. Glucose significantly reduced browning, but also significantly decreased the percentage of explants with callus, compared to that observed when using sucrose or maltose. The adaxial orientation promoted a higher percentage of explants with callus, with a fresh and dry weight, as well as a higher moisture percentage. The photoperiod prevented callus production, while incubation in the dark allowed more than 80% of the explants to produce callus in each treatment. The medium without antioxidant and the medium with 5 mg/L of silver nitrate gave similar browning results, while 1 g/L of activated carbon left the explants unviable. The present work proposes a method for the aseptic establishment and in vitro culture conditions for callus initiation in leaflets of adult pecan tree, with reproducible results.

Resumen Hasta ahora, no existe un protocolo para la micropropagación de nogal pecanero (Carya illinoinensis) a partir de explantes de árbol adulto. La contaminación microbiana persistente y el oscurecimiento oxidativo de los tejidos han impedido el éxito de métodos previamente propuestos. Específicamente, el explante de hoja de árbol adulto constituye un punto de partida inexplorado para la regeneración de C. illinoinensis. Por ello, el objetivo de este estudio fue determinar un método de desinfección y las condiciones de cultivo in vitro que inducen una mayor producción de callo en explantes de hoja de árbol adulto de nogal pecanero. Se probaron 5 métodos de desinfección: (1) etanol 70% por 50 s, 1.8-2.7% hipoclorito de sodio con 2 gotas/L de Tween 80 por 50 s, (2) etanol 70% por 2 min, 1.8-2.7% hipoclorito de sodio con 2 gotas/L de Tween 80 por 2 min, (3) etanol 70% por 2 min, 1.8-2.7% hipoclorito de sodio con 2 gotas/L de Tween 80 por 2 min, 1 g/L de carbendazim con 2 gotas/L de Tween 80 por 20 min, (4) etanol 70% por 2 min, 1.8-2.7% hipoclorito de sodio con 2 gotas/L de Tween 80 por 2 min, 8.8 g/L de carbendazim con 2 gotas/L de Tween 80 por 20 min, y (5) etanol 70% por 2 min, 1.8-2.7% hipoclorito de sodio con 2 gotas/L de Tween 80 por 2 min, 1 g/L de procloraz con 2 gotas/L de Tween 80 por 20 min. Además, se probaron 6 diferentes medios de cultivo donde se varió la fuente de carbono (sacarosa, glucosa y maltosa), la inclusión de un antioxidante (AgNO3 y carbón activado), y la concentración de sales MS (máxima o un tercio de la concentración máxima). Los explantes fueron incubados durante 50 días; una porción de los explantes fue incubada en la oscuridad y la otra ante un fotoperiodo de 16 h. Asimismo, unos explantes fueron inoculados en orientación abaxial, y otros en orientación abaxial. Se evaluó el oscurecimiento oxidativo de los explantes, el porcentaje de explantes con callo, el peso fresco y seco de los callos, y el porcentaje de explantes contaminados por microorganismos. El menor porcentaje de explantes contaminados se observó en el tratamiento de desinfección que incluyó inmersión en procloraz, además procloraz fue el único fungicida que permitió la callogénesis en el 100% de los explantes tratados. El oscurecimiento en los explantes no aumentó al triplicar la concentración de sales MS. La glucosa redujo significativamente el oscurecimiento de los explantes, pero también disminuyó de manera significativa el porcentaje de explantes con callo, en comparación con lo observado al utilizar sacarosa o maltosa. La orientación adaxial, promovió un mayor porcentaje de explantes con callo, con un peso fresco y seco, así como un porcentaje de humedad superiores. El fotoperiodo impidió la producción de callo, mientras que la incubación en la oscuridad permitió que más del 80% de los explantes produjeran callo. El medio sin antioxidante y el medio con 5 mg/L de nitrato de plata dieron resultados semejantes de oscurecimiento, mientras que 1 g/L de carbón activado dejó los explantes inviables. El presente trabajo propone un método para el establecimiento aséptico y condiciones de cultivo in vitro para la iniciación de callos en hojas de nogal pecanero adulto, con resultados reproducibles.

Abstract Sequoia sempervirens is the tallest tree in the world, it has a low germination percentage, due to it the in vitro tissue culture has been used for its propagation. Even so, the multiplication technique development is still not efficient. This work aimed to the development of an efficient protocol for in vitro multiplication of S. sempervirens, using apical and basal stem explants, and four concentrations of kinetin and a culture medium with a low concentration of mineral salts to replace the use of the MS medium. Twenty axillary buds from an 18-years-old tree were established in vitro, after three subcultures, three experiments were established every six weeks. Kinetin (6- furfuryl- aminopurin) concentrations (0, 0.92, 1.85 y 3.71 µM) and two types of explants: apical and basal, were evaluated. The parameters evaluated were: height increase, over time growth, and number of axillary shoots emitted by explant type. The height increase for the three experiments was in apical explants (2.35, 4.26, and 4.78 cm) with 0 µM kinetin. The greatest increases in height of apical explants (2.35, 4.26 and 4.78 cm) were obtained with 0 μM of kinetin, in the three experiments. The greatest increases in height were in all evaluated treatments in the second and the fourth week. The greatest number of axillary shoots (2.11) were obtained in basal explants. The in vitro propagation protocol for S. sempervirens using apical and basal explants is efficient, the growth of the explants was successful with 12.38 mm of total nitrogen in culture medium.

Resumen Sequoia sempervirens (D. Don). Endl. es considerado el árbol de mayor altura en el mundo, con bajo porcentaje de germinación, por lo cual, se ha recurrido al cultivo in vitro para su propagación, pero los protocolos desarrollados para obtener brotes son poco eficaces. El objetivo del presente trabajo fue desarrollar un esquema eficiente de multiplicación in vitro de S. sempervirens utilizando explantes de tallo apicales y basales, cuatro concentraciones de kinetina, además de un medio de cultivo con baja concentración de sales para sustituir el uso del medio MS. Se establecieron in vitro 20 yemas axilares de una planta de 18 años, después de tres subcultivos fueron colocados tres experimentos consecutivos cada seis semanas. Se evaluaron cuatro concentraciones de kinetina (6-furfuril-aminopurina) (0, 0.92, 1.85 y 3.71 μM) y dos tipos de explantes: apicales y basales. Las variables evaluadas fueron: incremento de altura, crecimiento a través del tiempo, número de brotes axilares emitidos por tipo de explante. Los mayores incrementos en altura de explantes apicales (2.35, 4.26 y 4.78 cm) se obtuvieron con 0 μM de kinetina, en los tres experimentos. En las semanas dos y cuatro, se presentaron los mayores incrementos en altura en todos los tratamientos evaluados. La mayor cantidad de brotes se obtuvieron en explantes basales (2.11). El esquema de propagación in vitro de S. sempervirens fue eficiente con explantes apicales y basales, y el crecimiento de los explantes fue satisfactorio con 12.38 mM de nitrógeno total en el medio de cultivo.

Resumen La multiplicación de orquídeas suele ser un impedimento para el éxito comercial de especies importantes. Con el fin de evaluar el crecimiento inicial de Epidendrum schomburgkii Lindl., bajo diferentes concentraciones de nutrientes, se inocularon in vitro plántulas provenientes de semilla sexual, de 20 mm de altura, en dos medios basales: Murashige & Skoog (ms) y Knudson (kn) a concentraciones de 25%, 50%, 75% y 100%. Se aplicó un diseño estadístico completamente al azar en arreglo factorial 2 × 3, y para el análisis se utilizaron los paquetes estadísticos spss, Infostat y Biostat. Después de 118 días de cultivo se obtuvo un promedio de 5,88 brotes vivos con una altura promedio de 92,80 mm y una longitud promedio de raíces de 80,74 mm. Se encontraron diferencias significativas para el número de brotes vivos entre concentraciones, mayor altura del tallo y mayor longitud de raíz, así como en la interacción media por concentración. En general, los valores promedios para el medio ms fueron más altos en comparación con el medio kn. En cuanto a la longitud del tallo de mayor extensión, no encontramos una diferencia estadísticamente significativa entre concentraciones, pero sí una clara diferencia en las tendencias (negativas para ms y positivas para kn). El crecimiento de raíces y tallos fue visiblemente mayor con el medio MS, con una concentración óptima del 25%; por lo tanto, al evaluar las fórmulas y dosis aplicadas, se concluye que el medio ms a una concentración del 25% presenta una mejor respuesta para el desarrollo de los propágulos de Epidendrum schomburgkii Lindl.

Abstract Orchid multiplication is often an impediment to the commercial success of important species. In order to have a sowing technique to evaluate the initial growth of Epidendrum schomburgkii Lindl., seedlings from sexual seed 20 mm high were inoculated in vitro in two basal media: Murashige & Skoog (ms) and Knudson (kn) at concentrations of 25 %, 50 %, 75 % and 100 %. After 118 days of cultivation, an average of 5.88 live shoots with an average height of 92.80 mm and an average root length of 80.74 mm were obtained. Significant differences were found for the number of live shoots between concentrations, greater stem height and greater root length, as well as in the mean x concentration interaction. A completely randomized statistical design was applied in a 2 x 3 factorial arrangement, and the spss, infostat and biostat tests were used for the analysis. In general, the values for ms medium were higher compared to kn medium. Regarding the length of the longest stem, we did not find a statistically significant difference between concentrations, but a clear difference in trends (negative for ms and positive for kn). The growth of roots and stems was visibly higher with the ms medium, with an optimal concentration of 25 %. Therefore, when evaluating the formulas and applied doses, it is concluded that the ms medium at a concentration of 25 % offers the best response in the development of propagules.

Abstract The municipality of Nuevo Ideal is one of the most important regions for apple production in the state of Durango, Mexico. There are scattered Malus domestica trees from extinct orchards that were part of a production system and that today are abandoned without agronomic management, but that have shown an efficient adaptability to the conditions and continue to produce good quality fruit. The objective of this study was to develop an in vitro propagation protocol of M. domestica using seeds of feral trees from this region. Germination and production of adventitious shoots were evaluated using Murashige & Skoog (MS) medium and woody plant medium (WPM) supplemented with phytohormones 6-Benzylaminopurine (BAP) and indole butyric acid (IBA) at different doses. For rooting, indole acetic acid (IAA), naphthaleneacetic acid (NAA) and kinetin (KIN) were also used in combination with the previous ones. Germination and shoot formation obtained better results with the concentration of 0.5 mg L-1 of BAP in MS medium at 60 days. In the leaf development, the treatment with 1.5 mg L-1 of BAP in MS medium stood out, with 21.07 leaves on average. The plants of all the treatments had roots, however, the best development was shown by the treatment with 1.5 mg L-1 of NAA and 0.15 mg L-1 of BAP in WPM medium. Through the protocol generated in this research, it is possible to massively propagate the M. domestica species for purposes of germplasm conservation and subsequent exploitation of the crop.

Resumen El municipio de Nuevo Ideal es una de las regiones más importantes para la producción de manzana en el estado de Durango, México. Existen árboles dispersos de Malus domestica de huertos extintos que fueron parte de un sistema de producción y que hoy están abandonados sin manejo agronómico, pero que han mostrado una adaptabilidad eficiente a las condiciones y continúan produciendo fruto de buena calidad. El objetivo del presente estudio fue desarrollar un protocolo de propagación in vitro de M. domestica utilizando semillas de árboles asilvestrados de esta región. Se evaluó la germinación y producción de brotes adventicios usando medios de cultivo murashige & skoog (MS) y woody plant medium (WPM) complementados con fitohormonas 6-Bencilaminopurina (BAP) y ácido indol butírico (IBA) en diferentes dosis. Para el enraizamiento se utilizó también ácido indol acético (AIA), ácido naftalenacético (ANA) y kinetina (KIN) en combinación con las anteriores. La germinación y formación de brotes obtuvo mejor resultado con la concentración de 0.5 mg L-1 de BAP en el medio MS a los 60 días. En el desarrollo foliar destacó el tratamiento con 1.5 mg L-1 BAP en medio MS con 21.07 hojas en promedio. Las plantas de todos los tratamientos presentaron raíz, sin embargo, el mejor desarrollo lo presentó el tratamiento con 1.5 mg L-1 de ANA y 0.15 mg L-1 de BAP en medio WPM. Mediante el protocolo generado en esta investigación, es posible propagar masivamente la especie M. domestica con propósitos de conservación de germoplasma y posterior explotación del cultivo.

Resumen Introducción. La vainilla (Vanilla planifolia Andrews) es una orquídea que se cultiva comercialmente para la producción de vainillina, una sustancia saborizante que se emplea principalmente en la industria alimenticia y como cosmético. Aunque la demanda ha motivado su cultivo, hay poca disponibilidad de semilla vigorosa y libre de enfermedades lo cual ha sido una limitante. Se ha demostrado que los sistemas de inmersión temporal son eficientes. Para la micropropagación masiva de la vainilla, aún no se han establecido estudios de tiempo, frecuencia de inmersión y volumen óptimo en la proliferación de brotes en Biorreactores de Inmersión Temporal (BIT) y además se desconoce una ruta morfogénica que garantice la estabilidad genética y la optimización durante el proceso de micropropagación. Objetivo. Caracterización morfogénica de la vainilla (Vanilla planifolia Andrews) en un BIT. Materiales y métodos. Se realizaron 3 experimentos, cada uno con 3 tratamientos. Para el primer experimento, se consideraron tiempos de 5, 10 y 15 min para los tratamientos, en el segundo se evaluaron 3 frecuencias en tiempos de 6, 12 y 18 horas y en el tercero se consideraron 20, 30 y 40 ml/explante como volumen de medio de cultivo. Para los diferentes tratamientos se utilizaron 5 repeticiones, con una unidad experimental de 10 explantes y segmentos de tallo con 3 yemas axilares. El medio de cultivo consistió en las sales de Murashige Skoog (MS) suplementado con 1 mg.L-1 de BA y 1 g.L-1 de caseína. El fotoperiodo se ajustó a 16 horas luz, con una temperatura de 27°C±3 y una humedad relativa de 80% Resultados. Se obtuvieron diferencias estadísticas (p<0,05) respecto a los tiempos evaluados, frecuencia de inmersión y el volumen por explante. Se determinó como mejor tiempo de inmersión un periodo de 15 minutos, 6 horas como frecuencia de inmersión y 40 ml como volumen de medio por explante. Al comparar la respuesta de desarrollo, el sistema BIT superó al medio semisólido 1,8 veces en el número de brotes y 4 veces en el incremento de peso fresco. También con BIT se obtuvieron 36 brotes por explante mientras que en el sistema de cultivo en medio semisólido, se obtuvieron 20 brotes por explante. Conclusiones. Mediante el empleo del sistema BIT, se optimizó el mecanismo de micropropagación de V. planifolia comparado con el medio de cultivo semisólido en la ruta organogénica directa, lo cual fue demostrado con la formación de brotes preformados y brotes adventicios.

Abstract Introduction. Vanilla (Vanilla planifolia Andrews) is an orchid that is commercially grown for the production van, a flavoring substance that is used mainly in the food industry and as a cosmetic. Although the demand has motivated its cultivation, there is little availability of vigorous seed and free which has been a limited. Temporary immersion systems have been shown to be efficient. For their massive micropropagation but studies of time, immersion, frequency and optimal volume have not yet been established in the proliferation of shoots in Temporary Immersion Bioreactors (BIT), furthermore, a morphogenic pathway that guarantees genetic stability and optimization during the micropropagation process is unknown. Objective. Morphogenic characterization of vanilla (Vanilla planifolia Andrews) in a BIT. Materials and methods. Three experiments were carried out, each with 3 treatments. For the first experiment, the immersion time considered the treatments of 5, 10 and 15 min, in the second experiment 3 frequencies were evaluated at times of 6, 12 and 18 hours and in the third experiment were considered 20, 30 and 40 ml/explant as volume of culture medium. For the differents treatments used 5 repetitions, with an experimental unit of 10 explants and stem segments with 3 axillary buds. The culture medium consisted of Murashige Skoog (MS) salts supplemented with 1 mg.L-1 of BA and 1 g.L-1 of casein. The photoperiod was adjusted to 16 light hours, with a temperature of 27°C±3 and a relative humidity of 80%. Results. Statistical differences (p<0,05) were obtained with respect to the evaluated times, frequency of immersion and the volume per explant. A period of 15 minutes it was determined as the best immersion time, 6 hours as the immersion frequency and 40 ml as the volume of medium per explant. When comparing the development response, the BIT system exceeded the semisolid medium 1.8 times in the number of shoots and 4 times in the increase in fresh weight. In addition, 36 shoots were obtained per explant in BIT, while in the culture system in semi-solid medium, a multiplication rate of 20 shoots per explant. Conclusions. By using the BIT system, the micropropagation mechanism of V. planifolia was optimized compared to the semi-solid culture medium in the direct organogenic route, which was proved with the formation of preformed shoots and adventitious shoots.

RESUMEN Este estudio describe la germinación in vitro y micropropagación de Plukenetia volubilis, un cultivo oleaginoso rico en omega-3 benéfico para la salud y con múltiples aplicaciones industriales. Se evaluó en la germinación diferentes medios de cultivo (MS y 1/2 MS), presencia-ausencia de testa y temperatura de cultivo (18 ° C y 28 ° C). La micropropagación se realizó vía yemas axilares (ABD) de plántulas in vitro. Se evaluó el efecto de KIN, BAP y 2-ip sobre ABD, seguidamente, para mejorar el proceso se evaluó el efecto de MS modificado en 453 mg L-1 CaCl2 y 351.62 mg L-1 MgSO4 sobre ABD y supervivencia del brote. Finalmente, se evaluaron seis tratamientos para optimizar ABD y la formación de hojas. Se logró una germinación 91,6 % en MS a 28 °C cuando se retiró la testa. Se obtuvo 45 % y 40 % de ABD con 0,4 mg L-1 KIN y 0,6 mg L-1 2-ip respectivamente, ambos con la menor CAL. Posteriormente, la modificación de CaCl2 permitió 76 % ABD y 82 % de supervivencia. Se optimizó ABD al 95 % con 2,45 hojas por brote con el medio: MS + modificación de CaCl2 + 10 % de agua de coco + 0.4 mg L-1 KIN, los mismos resultados se obtuvieron cambiando este último con 0,6 mg L-1 2-ip, se logró enraizamiento en MS sin PGR, y la aclimatización fue exitosa. Los resultados indican que la producción de plantas vía germinación y propagación vegetativa es efectiva con fines comerciales.

ABSTRACT This study describes the in vitro seed germination and micropropagation of Plukenetia volubilis (sacha inchi), an oilseed crop rich in omega-3 fatty acids, with health benefits and several industrial applications. Seed germination was evaluated in different culture media (MS and 1/2 MS), seed coat presence/absence and culture temperature (18 °C and 28 °C). Micropropagation was performed using axillary bud development (ABD) on nodal segments from in vitro seedlings. KIN, BAP and 2-ip were evaluated for ABD, and the effect of modified MS in 453 mg L-1 CaCl2 and 351.62 mg L-1 MgSO4 on ABD and shoot survival was assessed to improve the process. Finally, six treatments were evaluated to optimize ABD and shoot leaf formation. Seed germination of 91.6 % was achieved in MS at 28 °C when the seed coat was removed. ABD was obtained in 45 % and 40 % with 0.4 mg L-1 KIN and 0.6 mg L-1 2-ip, respectively, with the least CAL. The modification in 453 mg L-1 CaCl2 then allowed 76 % ABD and 82 % explant survival. ABD response was optimized to 95 % and 2.45 leaves with MS medium + CaCl2 modification + 10 % coconut water + 0.4 mg L-1 KIN. The same results were obtained by replacing the latter with 0.6 mg L-1 2-ip. Rooting was achieved in MS without PGR, and acclimatization was successful. The results indicate that plant production via germination and vegetative propagation is effective for commercial purposes.

Resumen Introducción. Las propiedades nutricionales, capacidad antioxidante y valor comercial de la pitahaya amarilla son un atractivo para su siembra, por ello, es necesario estudiar mejoras tecnológicas para su propagación. Objetivo. Evaluar la viabilidad del establecimiento y multiplicación in vitro de pitahaya amarilla, con el uso como explantes de plántulas provenientes de la germinación in vitro y distintas fuentes hormonales. Materiales y métodos. El experimento se desarrolló en el Laboratorio de Fisiología y Biotecnología Vegetal de la Universidad Nacional Toribio Rodríguez de Mendoza, Perú, entre febrero y junio de 2020. Se evaluaron cuatro tratamientos para la germinación [control: agua estéril (3 mL), E1: MS (50 %), sacarosa (30 g L-1), agar (6 g L-1), E2: AG3 (250 mg L-1), E3: MS (100 %), sacarosa (30 g L-1), agar (6 g L-1), AG3 (250 mg L-1)] y multiplicación [control: MS (100 %), sacarosa (30 g L-1), agar (7 g L-1), M1: MS (100 %), sacarosa (30 g L-1), agar (7 g L-1), agua de coco (10 ml L-1), M2: MS (100 %), sacarosa (30 g L-1), agar (7 g L-1), agua de coco (20 ml L-1), carbón activado (2 g L-1), M3: MS (100 %), sacarosa (30 g L-1), agar (7 g L-1), BAP (0,10 mg L-1), ANA (3 mg L-1)]. Las variables evaluadas fueron: germinación (%), número y longitud de brotes y raíces, formación de callos (%), enraizamiento (%) y número de aréolas. Resultados. La mejor germinación (100 %) se obtuvo en el medio E1, con más de tres raíces y dos brotes por plántula. El medio M2 generó la mejor multiplicación, con 82,5 % de enraizamiento, brotes de 1,66 cm y 1,86 aréolas, y menor presencia de tejido calloso (60 %). Conclusión. Se logró la micropropagación de pitahaya amarilla al emplear como fuente de explante plántulas obtenidas in vitro.

Abstract Introduction. The nutritional properties, antioxidant capacity, and commercial value of the yellow dragon fruit are attractive for its sowing; therefore, it is necessary to study technological improvements for its propagation. Objective. To evaluate the feasibility of in vitro establishment and multiplication of yellow dragon fruit, with the use as explants of seedlings from the in vitro germination and various hormonal sources. Materials and methods. The experiment was developed in the Plant Physiology and Biotechnology Laboratory of the Universidad Nacional Toribio Rodriguez de Mendoza, Peru, between February and June 2020. Four treatments were evaluated for germination [control: sterile water (3 ml), E1: MS (50 %), sucrose (30 g L-1), agar (6 g L-1), E2: AG3 (250 mg L-1), E3: MS (100 %), sucrose (30 g L-1), agar (6 g L-1), AG3 (250 mg L-1)] and multiplication [control: MS (100 %), sucrose (30 g L-1), agar (7 g L-1), M1: MS (100 %), sucrose (30 g L-1), agar (7 g L-1), coconut water (10 ml L-1), M2: MS (100 %), sucrose (30 g L-1), agar (7 g L-1), coconut water (20 ml L-1), activated carbon (2 g L-1), M3: MS (100 %), sucrose (30 g L-1), agar (7 g L-1), BAP (0.10 mg L-1), ANA (3 mg L-1)]. The evaluated variables were: germination (%), number and length of shoots and roots, callus formation (%), rooting (%), and the number of areoles. Results. The best germination (100 %) was obtained in the E1 medium, with more than three roots and two shoots per seedling (2,64 cm). The M2 medium generated the best multiplication, with 82.5 % rooting, 1.66 cm shoots and 1.86 areoles, and less presence of callus tissue (60 %). Conclusion. The micropropagation of yellow dragon fruit was achieved by using seedlings obtained in vitro as an explant source.

Resumen En la actualidad el durazno (Prunus persica L.) es de gran importancia económica para el Perú debido al incremento anual de sus exportaciones, siendo la variedad Huayco rojo el de mayor producción y exportación por presentar un agradable sabor y gran aceptación en el mercado exterior. En la búsqueda de expandir las áreas de este cultivo se han realizado estudios de multiplicación empleando métodos biotecnológicos como la micropropagación in vitro, pero se han presentado problemas con esta especie por ser de comportamiento recalcitrante. El objetivo de esta investigación fue desarrollar una metodología eficiente de inducción de callos in vitro en durazno variedad Huayco rojo a partir de hojas como alternativa para obtener mayor número de clones de mejor calidad y productividad. Inicialmente se determinó la concentración de hipoclorito de sodio (NaCIO) que permita mayor desinfección y menor daño a los explantes de hojas de durazno. Posteriormente los explantes fueron cultivados en medio Murashige y Skoog (MS) adicionado con tratamientos de 2,4-D (ácido 2,4-diclorofenoxiacético) y agua de coco en diferentes concentraciones. Se indujeron callos in vitro de durazno variedad Huayco rojo a partir de hojas, obteniendo 100 % de inducción de callos empleando a partir de 1 mg/L de 2,4-D más 50 mL/L de agua de coco. Finalmente, los resultados de esta investigación permiten recomendar el uso de 2,4-D y agua de coco en la inducción del proceso de callogénsis en durazno variedad Huayco rojo.

Abstract Peach (Prunus persica L.) currently has great economic importance for Peru, increasing its export every year, where the red Huayco variety have the highest production and export due to its pleasant taste and great acceptance in the foreign market. In the search to expand the areas of this crop, multiplication studies have been carried out using biotechnological methods such as in vitro micropropagation, but there have been problems with this species because they are recalcitrant. Therefore, within the alternatives to obtain a greater number of clones of great quality and productivity, this research work aimed to develop an efficient methodology for induction of in vitro calluses in red Huayco peach variety from leaves. First determining the concentration of sodium hypochlorite that allows to obtain greater disinfection and less damage to the peach leaf explants, Later the explants were introduced in MS culture media added with 2,4-D (2,4- dichlorophenoxyacetic acid) treatments and coconut water in different concentrations. Inducing in vitro calluses in red Huayco peach variety from leaves, obtaining 100% callus induction using from 1 mg/L of 2,4- D plus 50 mL/L of coconut water. Finally, the results of this research allow us to recommend the use of 2,4- D and coconut water in the induction of the callogenesis process in P. persica variety Huayco rojo.