Resumen La entomotoxicología forense, que analiza insectos necrófagos para detectar sustancias tóxicas, es crucial en la determinación de causas de muerte y la estimación del intervalo post-mortem. Este estudio se centró en Peckia intermutans (Walker) (Diptera: Sarcophagidae) como marcador para la detección de metanol, un alcohol potencialmente letal presente como adulterante en bebidas alcohólicas debido a su bajo costo y parecido con el etanol. Se desarrolló un método de cromatografía de gases-espectrometría de masas (HS-GC-MS) para detectar metanol y se estudió su efecto sobre el tiempo de desarrollo, supervivencia y morfología de las moscas de la carne. Las larvas se criaron en sustratos de hígado enriquecidos con metanol (300, 500 y 1000 mg/kg). Los resultados mostraron: el método desarrollado detectó metanol en todos los estadios; el metanol afectó el tiempo de desarrollo de las moscas; la supervivencia aumentó con una mayor concentración de metanol; y los cambios morfológicos fueron evidentes en el peso. Este estudio ofrece valiosa información sobre la investigación entomotoxicológica del Ecuador, por lo que se debe considerar los cambios morfológicos de P. intermutans para evitar estimaciones inexactas de los intervalos post-mortem.

Abstract Forensic entomotoxicology, which analyzes necrophagous insects to detect toxic substances, is crucial in determining causes of death and estimating the post-mortem interval. This study focused on Peckia intermutans (Walker) (Diptera: Sarcophagidae) as a marker for detecting methanol, a potentially lethal alcohol often added as an adulterant in alcoholic beverages due to its low cost and similarity to ethanol. A gas chromatography-mass spectrometry (HS-GC-MS) method was developed to detect methanol, and its effects on the development time, survival, and morphology of flesh flies were investigated. Larvae were reared on liver substrates enriched with methanol (300, 500, and 1000 mg/kg). Results showed: the developed method detected methanol in all instars; methanol affected the developmental time of the flies; survival increased with higher methanol concentration; and morphological changes were evident in weight. This study provides valuable information on entomotoxicological research in Ecuador, emphasizing the need to consider morphological changes in P. intermutans to avoid inaccurate estimations of post-mortem intervals.

ABSTRACT Sarcophagidae flies have great forensic importance, since different instars of their larval development are used in the determination of the postmortem interval (PMI) of corpses. However, for many species, intrapuparial developmental data are scarce. Here we analyzed the intrapuparial development of the sarcophagid Peckia pexata and describe the chronological and morphological changes that occur during metamorphosis. We reared approximately 330 specimens originating from the Colombian Amazon in the laboratory. Prepupae were identified by size reduction and coloration change. During the first five days of the study, four individuals were sampled every three hours, then every six hours until adult emergence. Specimens were fixed in 96% alcohol, then immersed in Carnoy solution for 24 hours and in formic acid (5%) for 48 hours for dissection and analysis of morphological changes. Four morphological phases of intrapuparial development of P. pexata were observed: 1) larva pupa apolysis, which lasted, in average, 9 h; 2) cryptocephalic pupa, 6 h; 3) phanerocephalic pupa, 6.5 h; and 4) pharate adult (transparent eyes, 48 h; yellow eyes, 216 h; pink eyes, 35 h; and red eyes, 52 h). The pharate adult was fully formed at 340 h and adult emergence occurred at 372.5 h or 15.5 days. We also described the formation of the prepupa, the pupariation and the final metamorphosis for the imago and compared it with the known events for Peckia intermutans, Peckia lambens (Sarcophagidae) and Lucilia eximia (Calliphoridae).

RESUMEN Las moscas Sarcophagidae tienen gran importancia forense, ya que diferentes etapas de su desarrollo larvario son utilizadas en la determinación del intervalo post mortem (IPM) de cadáveres. Sin embargo, para muchas especies los datos sobre el desarrollo intrapupal son escasos. Aquí analizamos el desarrollo intrapupal del sarcofagido Peckia pexata y describimos los cambios cronológicos y morfológicos que ocurren durante la metamorfosis. Criamos aproximadamente 330 especímenes originarios de la Amazonía colombiana en laboratorio. Prepupas se identificaron por la reducción de tamaño y cambio de color. Durante los primeros cinco días se tomaron muestras de cuatro individuos cada tres horas, y posteriormente cada seis horas hasta la emergencia de los adultos. Los especímenes se fijaron en alcohol al 96%, posteriormente se sumergieron en solución Carnoy durante 24 horas y en ácido fórmico (5%) durante 48 horas, para disección y el análisis de los cambios morfológicos. Observamos cuatro etapas del desarrollo intrapupal de P. pexata: 1) larva pupa apolisis, que duró, en promedio, 9 h; 2) pupa criptocefálica, 6 h; 3) pupa fanerocefálica, 6.5 h; y 4) adulto farado (ojos transparentes, 48 h; ojos amarillos, 216 h; ojos rosados, 35 h; y ojos rojos, 52 h). El adulto farado se formó completamente a las 340 h y la emergencia del adulto se produjo a las 372.5 h o 15,5 días. También describimos la formación de la prepupa, la pupariación y la metamorfosis final para el imago y lo comparamos con los eventos conocidos para Peckia intermutans, Peckia lambens (Sarcophagidae) y Lucilia eximia (Calliphoridae).

Abstract Chrysomya albiceps (Calliphoridae) is among the earliest successional fauna on human and animal cadavers. Some immature Calliphoridae can be useful for determination of post-mortem interval. Toxins, particularly pesticides, can affect the rate of insect growth. Aluminum phosphide (AlP) is an affordable insecticide that has not been adequately entomotoxicologically evaluated. So, the impact of AlP on the developmental rate of different stages of C. albiceps was investigated. Larvae of C. albiceps were reared on the rabbit carcasses containing AlP as a treated group, and distilled water as a control group. The substances were administered by a gastric tube. The duration needed for development of C. albiceps stages was documented. Body length, width and weight of larvae were measured after 24, 48, 72 and 96 h from egg hatching. The duration of development increased significantly in the treated group compared to the control group. Larvae body measurements were significantly smaller in the treated group than in the control group. Therefore, it was demonstrated that AlP significantly influences the size of C. albiceps larvae and extends their development. During forensic application, interpretation of C. albiceps data should be used with caution when aluminum phosphide may be the cause of death.

Resumo Chrysomya albiceps (Calliphoridae) está entre as primeiras espécies a colonizar cadáveres humanos e animais. Alguns Calliphoridae imaturos podem ser úteis para a determinação do intervalo “post-mortem”. Toxinas, particularmente pesticidas, podem afetar a taxa de crescimento de insetos. O fosfeto de alumínio (AlP) é um inseticida acessível que não foi adequadamente avaliado entomotoxicologicamente. Assim, o impacto do AlP na taxa de desenvolvimento de diferentes estágios de C. albiceps foi investigado. Larvas de C. albiceps foram criadas em carcaças de coelho, contendo AlP como grupo tratado e água destilada como grupo controle. As substâncias foram administradas por sonda gástrica. A duração necessária para o desenvolvimento dos estágios de C. albiceps foi documentada. O comprimento, largura e peso do corpo das larvas foram medidos após 24, 48, 72 e 96 horas da eclosão dos ovos. A duração do desenvolvimento foi significativamente aumentada no grupo tratado, em comparação com o grupo controle. As medidas corporais das larvas foram significativamente menores no grupo tratado do que no grupo controle. Portanto, foi demonstrado que o AlP influencia significativamente o tamanho das larvas de C. albiceps e prolonga seu desenvolvimento. Durante a aplicação forense, a interpretação dos dados de C. albiceps deve ser usada com cautela, quando o fosfeto de alumínio puder ser a causa da morte.

ABSTRACT Insects attracted to cadavers can be used to estimate postmortem interval (PMI). In this study, inmature stages and adults of Dermestes maculatus and Chrysomya albiceps were collected in association with a human cadaver in a closed aquatic environment in Caquetá, Colombia, and analyzed to determine the PMI. We also conducted an experiment with a pig carcass to estimate the emersion time, which began three days after carcass submersion. The minimum PMI was 481.5 hours. Time of death, time of emersion and period of insect activity matched the actions of the murder suspects, who confessed to murdering the victim 25 days prior to the discovery of the body.

RESUMEN Los insectos atraídos a cadáveres pueden ser usados para estimar el intervalo post mortem (IPM). En este estudio, una muestra de estados inmaduros y adultos de Dermestes maculatus y Chrysomya albiceps fueron recolectados en asociación con un cadáver humano en un ambiente cerrado y acuático en Caquetá, Colombia, y analizada para determinar el IPM. Además, se condujo un experimento con un cadáver porcino para estimar el tiempo de emersión, que comenzó tres días después de la sumersión del cadáver. El IPM mínimo fue 481.5 horas. El tiempo de muerte, tiempo de emersión y el periodo de actividad insectil coincidieron con las acciones de los sospechosos del crimen, quienes confesaron haber asesinado a la víctima 25 días antes del descubrimiento del cadáver.

RESUMEN La determinación del intervalo post mortem a través de la evidencia entomológica es un método muy utilizado para el esclarecimiento de crímenes en entomología forense. El objetivo de esta investigación fue determinar la entomofauna cadavérica y la biodiversidad ecológica asociadas a los restos de Sus scrofa domestica L. El trabajo se realizó en el centro poblado de Chuyugual, La Libertad, se utilizó un ejemplar de “cerdo” de 15 kg, fue incinerado con petróleo diésel y protegido con una jaula de malla metálica. La colecta de los insectos se hizo con las técnicas entomológicas convencionales, determinando las especies con claves taxonómicas especializadas; para la determinación del valor ecológico de entomofauna cadavérica y familias más representativas se usaron los índices de Margalef, Simpson, Shanon y Pielou. La entomofauna encontrada se distribuyó en 2 ordenes, 7 familias, 12 especies y 4 morfotipos. El 35% de abundancia relativa corresponde a la familia Calliphoridae, el 23% pertenecen a los Sarcophagidae, el 18% a los Staphilinidae y el 6% a las familias Musidae, Fannidae, Dermestidae y Silphidae. La biodiversidad es alta en índices de dominancia e índice de Pielou; sin embargo, es baja en índices de riqueza específica y equidad de Shanon. La familia Calliphoridae, tiene índices de diversidad alto; en tanto que, los Sarcophagidae y Staphilinidae muestran índice moderado y bajo, respectivamente. Se concluyó que la entomofauna encontrada en la descomposición de Sus scrofa domestica pertenecen al orden díptera (Calliphoridae, Sarcophagidae, Muscidae y Fannidae) y coleóptera (Staphilinidae, Silphidae y Dermestidae).

ABSTRACT The determination of the postmortem interval through entomological evidence is a widely used method for clarifying crimes in forensic entomology. The objective of this research was to determine the cadaveric entomofauna and the ecological biodiversity associated with the remains of Sus scrofa domestica L. The work was carried out in the town of Chuyugual, La Libertad, a specimen of "pig" of 15 kg, was incinerated with diesel oil and protected with a metal cage. The insects were collected using conventional entomological techniques, species were determined with specialized taxonomic keys; for the determination of the ecological value of the cadaverous entomofauna and the most representative families were used the indices of Margalef, Simpson, Shanon and Pielou. The entomofauna found was distributed in 2 orders, 7 families, 12 species and 4 morphotypes. The 35% of relative abundance corresponds to the Calliphoridae family, 23% to the Sarcophagidae, 18% to the Staphilinidae and 6% to the Musidae, Fannidae, Dermestidae and Silphidae families. Biodiversity is high in dominance indices and the Pielou index; however, it is low in Shanon's specific wealth and equity indices. The Calliphoridae family has high diversity indexes; while the Sarcophagidae and Staphilinidae show moderate and low rates, respectively. It was concluded that the entomofauna found in the decomposition of Sus scrofa domestica belong to the order Diptera (Calliphoridae, Sarcophagidae, Muscidae and Fannidae) and Coleoptera (Staphilinidae, Silphidae and Dermestidae).

Resumen Calliphora vicina Robineau-Desvoidy es una especie colonizadora primaria en cuerpos en descomposición siendo predominante en las estaciones frías en Provincia de Buenos Aires, Argentina. Se estimó el intervalo post-mortem mínimo (PMImin) usando el crecimiento y longitud larvales como evidencia entomológica precisa del tiempo de muerte transcurrido. Se criaron especímenes a 12, 14, 16 y 18 °C para determinar las tasas de crecimiento larvales y pupales. Se registraron diferencias en los tiempos de desarrollo (43,2 días a 12 °C; 34,3 días a 14 °C; 29,1 días a 16 °C y 24,3 días a 18 °C), observándose tiempos de vida más cortos a mayor temperatura, sin alterarse los rangos de longitud larval (~1,5–18,0 mm). La temperatura también afectó la supervivencia y tamaño de los adultos emergidos; registrándose mayor porcentaje de supervivencia a 14 (29,73%) y 16 °C (38,65%) y mayor mortalidad a temperaturas extremas (19,00% a 12 °C y 12,61% a 18 °C). Los adultos criados a 12 °C fueron los más grandes, las hembras mayores que los machos con una relación inversa entre tamaño y supervivencia. Estos resultados permiten estimar el PMI basado en datos de poblaciones locales en lugar de consultar registros obtenidos en otras regiones.

Abstract Calliphora vicina Robineau-Desvoidy is a primary colonizing species of decomposing bodies, being predominant in the cold seasons in Buenos Aires province, Argentina. The minimum post-mortem interval (PMImin) was estimated using growth and larval length parameters as the accurate entomological evidence of the elapsed time since death. Specimens were reared at 12, 14, 16, and 18 °C, and the larval and pupal growth rates were determined. Differences in the developmental times were registered (43.2 days at 12 °C, 34.3 days at 14 °C, 29.1 days at 16 °C, and 24.3 days at 18 °C), with the lifespan shortened at higher temperatures, without changing the larval length range (~1.5–18.0 mm). Temperature also influenced the survival and size of emerged adults; the highest percentage of survival registered at 14 (29.73%) and 16 °C (38.65%), and more mortality in extreme temperatures (19.00% at 12 °C and 12.61% at 18 °C). Adults reared at 12 °C were the largest of all, females were longer than males, and body size showed an inverse relationship with survival. These results allowed the PMI estimation based on data from local populations instead of consulting papers based on other regions.

Resumen El carroñeo de cadáveres humanos es uno de los procesos tafonómicos más comunes y destructivos que afectan a los contextos forenses al aire libre. Sin embargo, a pesar de ser uno de los principales problemas para las investigaciones médico-legales, existen escasas publicaciones sobre este tema en Sudamérica. El grado de alteración producido por el carroñeo varía en relación con múltiples factores; es por esto que los estudios actualísticos aportan información valiosa desde su particularidad. Este trabajo presenta el análisis de dos casos forenses de cadáveres humanos afectados por carnívoros, hallados en la provincia de Mendoza (Argentina). Se describen, desde un enfoque tafonómico, la desarticulación, la dispersión, la preservación ósea diferencial y los diferentes tipos de marcas presentes en los restos. Adicionalmente, se incorpora el análisis entomológico que permitió discutir el intervalo post mortem y comprender los contextos de hallazgo. Los resultados muestran el impacto negativo del carroñeo para la reconstrucción del perfil osteobiográfico, la evaluación de la causa de muerte y su identificación. Se pone de manifiesto la importancia de la presencia de personal especializado para maximizar la recuperación de evidencia en escenarios complejos al aire libre.

Abstract Scavenging of human corpses is one of the most common and destructive taphonomic process that affect outdoor forensic contexts. However, despite being one of the main problems for forensic investigations, there are few publications on this topic in South America. The degree of alteration produced varies in relation to multiple factors, which is why actualistic studies provide valuable information from their particularity. In this work, is presented the study of two forensic cases of human corpses affected by carnivores found in the province of Mendoza (Argentina). For this, the disarticulation, dispersion, differential bone preservation and marks produced are described from a taphonomic approach. In addition, entomological analysis is incorporated to discuss the postmortem interval and understand the finding contexts. The results show the negative impact of scavenging for the reconstruction of the osteobiographic profile, the evaluation of the cause of death and its identification. The importance of the presence of specialized personnel to maximize the recovery of evidence in complex outdoor scenarios is highlighted.

SUMMARY: The postmortem interval (PMI) equals the time that has elapsed since a human being has died until his postmortem examination. After death, the body experiences modifications in its physical and chemical composition know as postmortem changes expressed by signs that can be analyzed for the calculation of the MPI. The aim of the study was to describe the histological changes present in rat lingual striated musculature in different PMIs. 10 two-month-old male Sprague dawley rats were used. The animals were euthanized and left at room temperature (4-14 ?C) to sample the tongue at different PMIs (0, 6, 12, 24, 48, 72, 96 and 120 hours postmortem). The study was carried out considering the recommendations of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. The samples were fixed in 10% buffered formaldehyde and processed for inclusion in paraplast. 5 μm thick sections were made and stained with HE for análisis with light microscopy. Histological changes in the striated muscle cells of the tongue were associated with the different PMIs. At 6 hours postmortem, there were initial changes in nuclear morphology and its pigmentation. At 12 and 24 hours postmortem, changes in muscle striae and an increase in the number of cases with nuclear alterations were observed. At 48 and 72 hours postmortem, cytoplasmic vacuoles, changes in myofiber coloration, and increased nuclear alterations were evident. At 92 and 120 hours postmortem, a decrease in muscle striae and cell nuclei was observed. The nuclei were pyknotic and pinpoint; there was loss of cell morphology and presence of smooth muscle. In conclusion, changes in the histology of rat lingual skeletal muscle make it possible to estimate MPI. This model could be applicable to forensic medicine.

RESUMEN: El intervalo postmortem (IPM) equivale al tiempo que ha transcurrido desde que un ser humano ha muerto hasta su examinación postmortem. Después de la muerte, el cuerpo experimenta modificaciones en su composición física y química denominados cambios postmortem expresados por signos que pueden ser analizados para el cálculo del IPM. El objetivo del estudio fue describir los cambios histológicos presentes en la musculatura estriada lingual de rata en diferentes IPM. Se utilizaron 10 ratas machos Sprague dawley de dos meses de edad. Los animales fueron eutanasiados y dejados a temperatura ambiente (4 - 14 ?C) para tomar muestras de la lengua a distintos IPM (0, 6, 12, 24, 48, 72, 96 y 120 horas postmortem). El estudio se llevó a cabo considerando las recomendaciones de la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio. Las muestras fueron fijadas en formaldehido tamponado a 10 % y procesadas para su inclusión en paraplast. Se realizaron cortes de 5 μm de grosor y fueron teñidas con HE para su análisis con microscopía óptica. Los cambios histológicos en las células musculares estriadas de la lengua estaban asociados a los distintos IPM. A las 6 horas postmortem, hubo cambios iniciales en la morfología nuclear y su pigmentación. A las 12 y 24 horas postmortem, se observaron cambios en las estrías musculares y aumento en el número de casos con alteraciones nucleares. A las 48 y 72 horas postmortem, eran evidentes las vacuolas citoplasmáticas, cambios en la coloración de las miofibras y aumento en las alteraciones nucleares. A las 92 y 120 horas postmortem, se observó disminución de las estrías musculares y núcleos celulares. Los núcleos eran picnóticos y puntiformes; hubo pérdida de la morfología celular y presencia de musculo liso. En conclusión, los cambios de la histología del músculo estriado lingual de rata permiten estimar el IPM. Este modelo podría ser aplicable a la medicina forense.

Abstract Dermester ater De Geer is recorded for the first time from the state of Yucatan, Mexico. Within the field of Forensic Entomology, it is a species of relevance for its usefulness in the estimation of the postmortem interval (PMI). Adult specimens of this species were collected from mummified and dried remains of pig heads (Sus scrofa domestica Linnaeus, 1758) used as necrotraps placed in a semi-urban area. Photographs of D. ater, an identification key and illustrations for the 4 species of Dermestes present in the state are included.

Resumen Se registra por primera vez a Dermestes ater De Geer en el estado de Yucatán, México. Dentro del campo de la Entomología Forense es una especie de relevancia por su utilidad en la estimación del intervalo postmortem (IPM). Ejemplares adultos de esta especie fueron recolectados en los estados de momificación y restos secos de cabezas de cerdo (Sus scrofa domestica Linnaeus, 1758) utilizadas como necrotrampas colocadas en una zona semiurbana. Se incluyen fotografías de D. ater, una clave de identificación e ilustraciones para las 4 especies de Dermestes presentes en el estado.

SUMMARY: The postmortem interval (PMI) is an important challenge to be solved in forensic pathology, and it consists of being able to determine the time elapsed from death to the moment of autopsy. Given the unreliability of some methods due to the great influence of external factors and those specific to the corpse, forensic biochemistry has received considerable attention for its levels of safety. The city of Quito is located in the Andes mountain range at 2850 meters above sea level, however, in the literature there are no reports of measurement of these parameters at a height like this. The objective was to establish a correlation between sodium (Na+), chlorine (Cl-) and potassium (K+) of the vitreous humor and the MPI at a height of 2,850 masl. For the study, 128 samples of vitreous humor were used from 16 autopsies performed in the Zone 9 Legal Medicine Unit, in IPM of 6, 12, 24, 48, 72, 96, 120 and 144 hours. To obtain the vitreous humor, the conventional method was followed, it was divided for the 8 aliquots and it was frozen at -20 ° C until the moment of its analysis. The quantification of the concentration of electrolytes Na+, Cl- and K+ was carried out using an ISE analyzer from Roche Cobas (Roche Diagnostics) C501, calibrated for urinalysis, and no dilution was necessary. During calibration and every third sample, an internal standard was measured to correct for the effects of systematic deviation on the calibration. The statistical approach was based on a linear correlation analysis, using the Spearman correlation coefficient. The correlation between the postmortem hours and the concentrations of the different electrolytes were statistically significant. A significant linear correlation between the PMI and the increase in K+ in vitreous humor could be corroborated.

RESUMEN: El intervalo Postmortem (IPM) es un importante desafío por resolver en la patología forense, y consiste en poder determinar el tiempo transcurrido desde la muerte hasta el momento de la autopsia. Dada la poca confiabilidad de algunos métodos por la gran influencia de factores externos y propios del cadáver, la bioquímica forense ha recibido considerable atención por sus niveles de seguridad. La ciudad de Quito se ubica en la cordillera de Los Andes a 2850 msnm, sin embargo, en la literatura no existen reportes de medición de estos parámetros a una altura como ésta. El objetivo fue establecer una correlación entre sodio (Na+), cloro (Cl-) y potasio (K+) del humor vítreo del cuerpo vítreo y el IPM a la altura de la ciudad de Quito. Para el estudio se utilizaron 128 muestras de cuerpo vítreo provenientes de 16 autopsias practicadas en la Unidad de Medicina Legal Zona 9, en IPM de 6, 12, 24, 48, 72, 96, 120 y 144 horas. Para la obtención del humor vítreo se siguió el método convencional, se dividió para las 8 alícuotas y se llevó a congelación -20 °C hasta el momento de su análisis. La cuantificación de la concentración de electrolitos Na+, Cl- y Potasio+ se realizó mediante analizador ISE de Roche Cobas (Roche Diagnostics) C501, calibrado para uroanálisis, y no fue necesaria la dilución. Durante la calibración y cada tres muestras, se midió un estándar interno para corregir los efectos de la desviación sistemática en la calibración. El enfoque estadístico se basó en un análisis de correlación lineal, utilizando el coeficiente de correlación de Spearman. La correlación entre las horas postmortem y las concentraciones de los diferentes electrolitos, fueron estadísticamente significativas. Se pudo corroborar una correlación lineal significativa entre el IPM y el aumento del K+ en el HV.

Resumen Una de las dificultades encontradas es la correcta identificación de insectos asociados a la descomposición cadavérica, por la cual ha llevado a buscar y generar nuevas herramientas en biología molecular que facilitan la determinación de especímenes para la estimación del Intervalo Post-Mortem de una forma efectiva y certera a partir de estadios inmaduros; la colecta y taxonomía morfológica de Dípteros se realizaron en primera instancia y posteriormente se utilizó el sistema de Códigos de Barras (COI Barcode) para la identificación molecular de insectos problema por medio del gen mitocondrial COI en cualquier fase del ciclo biológico. Identificando tres especies de adultos con una probabilidad de correspondencia del 100%; los especímenes: Sarconesia versicolor de la Familia Calliphoridae y Fannia sp., no fueron hallados en las bases de datos mundiales del GenBank y del Boldsystems, siendo necesario su actualización realizando patrones de sucesión cronológica de fauna cadavérica en diferentes zonas geográficas, cuya práctica se aplicaría en las investigaciones criminales.

Abstract One of the difficulties encountered is the correct identification of insects associated with cadaveric decomposition, which has led to the search and generation of new tools in molecular biology that facilitate the determination of specificities for the modification of the Post-Mortem Interval in an effective and accurate from immature stages; the collection and morphological taxonomy of Diptera were made in the first instance and then the Bar Code System (COI Barcode) was used for the molecular identification of problem insects by means of the mitochondrial COI gene in any phase of the biological cycle. Identifying three species of adults with a probability of 100% correspondence; the specimens: Sarconesia versicolor of the Calliphoridae Family and Fannia sp., were not found in the world databases of the GenBank and the Boldsystems, being necessary to update them by chronological succession patterns of cadaveric fauna in different geographical areas, whose practice would be applied in criminal investigations.

Resumen El objetivo fue desarrollar una escala visual para la evaluación del color en carne de bovino. Se analizaron 1,165 lomos, a las 24 h post mortem, en cuatro rastros de la República Mexicana. En cada muestra se evaluó el color con ayuda de un patrón visual y con un espectrofotómetro (escala CIELAB), tomándose una fotografía de cada lomo. Por el método visual se identificaron siete categorías, (de rojo muy pálido a rojo muy oscuro) y las variables instrumentales del color (L*, a*, b*, C* y h*) se usaron para generar modelos de predicción de las categorías visuales. La escala se construyó utilizando L* como único predictor, pues este modelo explicó >90 % de la variación observada. El patrón se ilustró con fotos de las muestras con valor de L* dentro del intervalo de confianza al 95% de la media en cada categoría, desde rojo muy pálido (48.1<L*<48.8) hasta rojo muy oscuro (32.7<L*<33.4). La diferencia total de color entre categorías fluctuó entre 2.8 y 5.5, lo que sugiere que éstas son diferenciables a simple vista. La escala se validó mediante pruebas con un panel sensorial entrenado y otro de consumidores. Los jueces entrenados calificaron correctamente las muestras en el 92.6 % de las evaluaciones. En carne con apariencia de corte oscuro (CO), el panel entrenado tuvo 100 % de aciertos y el de consumidores 85.3 %. El patrón visual propuesto se sustenta en mediciones instrumentales y mostró ser técnicamente viable para la evaluación del color en carne de bovino por personal entrenado y por consumidores.

Abstract This study aimed to develop a visual scale for beef color evaluation. A total of 1,165 loins were analyzed 24 h postmortem in four slaughterhouses in Mexico. In each sample, it was determined color using a visual pattern and a spectrophotometer (CIELAB scale), taking a photograph of each loin. Seven categories were identified using the visual method (from very light red to very dark red), and the instrumental color variables (L*, a*, b*, C*, and h*) were used to create prediction models for the visual categories. The scale was constructed using L* as the sole predictor, as this model explained > 90 % of the observed variation. The pattern was illustrated with photos of the samples with an L* value within the 95 % confidence interval of the mean in each category, from very light red (48.1 <L*<48.8) to very dark red (32.7 <L*<33.4). The total color difference between the categories fluctuated between 2.8 and 5.5, which suggests that these are distinguishable with the naked eye. A trained sensory panel and a consumer panel, through tests, validated the scale. Trained panelists correctly rated the samples in 92.6 % of the evaluations. In meat with dark-cutting (DC) appearance, the trained panelists had 100 % hits, and the consumer panelists 85.3 %. The proposed visual pattern is supported by instrumental measurements and proved to be technically feasible for the evaluation of color in beef by trained personnel and consumers.

RESUMEN: El intervalo postmortem (IPM) es un importante desafío a resolver en patología forense, y consiste en poder determinar el tiempo transcurrido desde la muerte hasta el momento de la autopsia. Dada la poca confiablidad de algunos métodos por la gran influencia de factores externos, la Histoquímica (HQ) y la Inmunohistoquímica (IHQ), entre otros, han recibido considerable atención por sus niveles de objetividad en la investigación forense. Se presenta una revisión con búsqueda sistemática de estudios experimentales que apliquen métodos HQs e IHQs para la estimación del IPM sobre material cadavérico humano. Se identificaron 1053 artículos de los cuales 12 cumplieron con los criterios, a los que se agregaron 4 mediante una búsqueda manual (n=16 artículos). Alemania fue el país con más publicaciones destacando con 8 artículos. Las técnicas HQs de AgNORs, TRAP y PAS fueron utilizadas en 5 estudios (glándulas sudoríparas, piel, hígado, médula ósea y mucosa labial), mientras que las IHQs fueron empleadas con diferentes grupos antigénicos en 12 estudios (páncreas, cerebro, pulmón, tiroides, hígado, glándulas pituitarias, glándulas sudoríparas y mucosa gingival). Las estimaciones del IPM fueron posibles con márgenes entre 2-3 h. hasta los 20 días dependiendo de la técnica. El análisis de tejidos provenientes de cavidad oral asegura una vía no invasiva, de fácil acceso y bajo resguardo natural a la influencia de factores ambientales. Si bien no existe un método único que permita de manera confiable estas estimaciones, la introducción de nuevas técnicas permitiría evitar la producción de errores.

SUMMARY: The postmortem interval (IPM) is an important challenge to be solved in forensic pathology, and it consists in determine the time elapsed since death until the autopsy. Given the low reliability of some methods due to the great influence of external factors, Histochemistry (HQ) and Immunohistochemistry (IHQ), among others, have received considerable attention for their levels of objectivity in forensic investigation. A scoping review of experimental studies that apply HQs and IHQs methods to estimate the MPI on human cadaveric material is presented. We identified 1053 articles, of which 12 met the criteria; we added 4 articles through a manual search (n = 16 articles). Germany was the most productive country, with 8 articles. HQ techniques of AgNORs, TRAP and PAS were used in 5 studies (on sweat glands, skin, liver, bone marrow and labial mucosa), while IHQs techniques were used with different antigenic groups in 12 studies (on pancreas, brain, lung, thyroid, liver, pituitary glands, sweat glands and gingival mucosa). IPM estimates were possible with margins between 2-3 hours up to 20 days depending on the technique. The analysis of oral tissues ensures a non-invasive route, easily accessible and under natural protection to the influence of environmental factors. Although there is no single method that reliably allows these estimates, the introduction of new techniques would prevent the production of errors.

Resumen La identificación del género Lucilia es importante cuando se recolectan adultos o larvas en casos forenses porque el intervalo post-mortem puede ser estimado. En este trabajo se analizó morfológica y molecularmente un panel de especímenes de Lucilia (n = 42) recolectados en Costa Rica, de los cuales el 21% de las muestras corresponden a moscas criadas a partir de larvas tomadas de cadáveres humanos. Morfológicamente, los ejemplares fueron identificados como Lucilia cuprina (1) (33,3% de los ejemplares), Lucilia eximia (1) (33,3%), Lucilia purpurascens (2) (21,4%) o miembros del complejo Lucilia (11,9%). La identificación molecular, con las regiones de la citocromo oxidasa I (COI) o de la subunidad ribosomal 28S, sólo fue posible para el 43% de las muestras. La mayoría de las secuencias obtenidas con COI fueron concordantes con los análisis morfológicos, pero la región 28S carecía de suficiente resolución para identificar muestras al nivel de especies, excepto para L. cuprina. Juntos, los datos genéticos y morfológicos indican que L. cuprina y L. eximia fueron las especies más comúnmente encontradas; las moscas criadas a partir de larvas tomadas de cadáveres humanos correspondieron sólo a estas especies. Hasta donde sabemos, este trabajo es el primero en Costa Rica y en la región centroamericana en describir la entomofauna cadavérica del género Lucilia, lo cual es valioso para el desarrollo de potenciales aplicaciones forenses.

Abstract The identification of the genus Lucilia is important when adults or larvae are collected in forensic cases because the post-mortem interval might be estimated. In this work, we analyzed morphologically and molecularly a panel of Lucilia specimens (n = 42) collected in Costa Rica of which 21 % of the samples correspond to flies reared from larvae taken from human corpses. Morphologically, specimens were identified as Lucilia cuprina (1) (33.3 % of specimens), Lucilia eximia (1) (33.3 %), Lucilia purpurascens (2) (21.4 %) or members of Lucilia complex (11.9 %). Molecular identification with cytochrome oxidase I (COI) or 28S ribosomal subunit regions was possible for only 43 % of the samples. Most sequences obtained with COI were according to a morphological analysis, but the 28S region lacked sufficient resolution to identify samples to the level of species except L. cuprina. Together, genetic and morphological data indicate that L. cuprina and L. eximia were the most commonly found species; flies reared from larvae taken from human cadavers correspond to only these species. To our knowledge, this work is the first in Costa Rica and the Centro-American region to describe cadaveric entomofauna of Lucilia genus, which is valuable for the development of potential forensic applications.

Resumen Objetivos: Analizar la sucesión de insectos asociados a la descomposición de cuerpos en dos ecosistemas acuáticos en la Amazonia Andina. Metodología: Tres cadáveres fueron ubicados en una quebrada y tres en un lago, los muestreos se realizaron cada cinco horas desde el momento de la muerte hasta su esqueletización. Resultados: La descomposición total duró 14 días en la quebrada y 16 en el lago. Seis estadios de descomposición fueron observados: fresco sumergido; flotación temprana; flotación tardía; deterioro de la flotación; restos flotantes y restos sumergidos. En total se colectaron 1172 individuos en la quebrada y 1585 en el lago. Los gremios tróficos identificados fueron: trituradores; colectores; depredadores; necrófagos; sarcosaprófagos e incidentales. En la quebrada, los trituradores tricópteros fueron los más representativos en la etapa fresco sumergido. En el lago los trituradores, moscas de mayo y los depredadores hemípteros y odonatos fueron los más representativos en la etapa de flotación temprana. Los dípteros necrófagos y sarcosaprófagos fueron los más representativos en las etapas donde el cuerpo estuvo expuesto a la superficie en ambos ecosistemas. Conclusiones: El ISMP para ambos cadáveres fue similar en los dos hábitats, cada uno evidenció seis etapas de descomposición, lo que confirma que la descomposición en los ecosistemas acuáticos es diferente a la observada para los entornos terrestres.

Abstract Objectives: Analyze the succession of insects associated with the decomposition of bodies in two aquatic ecosystems in the Andean Amazon. Scope: Provide information on the insects associated with bodies that decompose within aquatic habitats and the duration times of each decomposition phase as a tool for the determination of the post-mortem submerged interval (PMSI). Methodology: Three carcasses were placed in a stream and three in a lake, the sampling carried out every five hours, from the moment of death to its skeletonization. Main results: Total decomposition lasted for 14 days in the stream and 16 days in the lake. Six decomposition stages were observed: submerged fresh, early floating, floating decay, bloated deterioration, floating remains and sunken remains. A total of 1172 organisms were collected on the carcasses in the stream and 1585 in the lake. Trophic relationships identified were: Shredders, collectors, predators, necrophages, sarcosaprophages and incidentals. In the stream, the caddisfly shredders were the most representative organisms in the submerged fresh stage. In the lake, the mayfly shredders, and hemipterous and odonate predators, were the most representative organisms in the early floating stage. The necrophagous and sarcosaprophagous diptera were the most representative organisms in the stages exposed to the surface in both ecosystems. Conclusions: The PMSI for both carcasses was similar in the two habitats, each showing six stages of decomposition, confirming that decomposition in lotic and lentic ecosystems is different from that observed for terrestrial environments.