ABSTRACT Background: Methicillin resistance and biofilm-producing Staphylococci are emerging as multidrug-resistant strains narrowing the efficacy of antimicrobial therapy. Although vancomycin is used as the drug of choice to treat such isolates, different studies worldwide have documented the emergence of strains that are intermediately susceptible or resistant to this antibiotic. Objective: The study aimed to determine the minimum inhibitory concentration of vancomycin to methicillin-resistant and biofilm-producing staphylococci isolated from different clinical specimens. Methods: 375 staphylococci isolated from different clinical specimens over one year were included in the study. Biofilm formation was determined by the Tissue culture plate method (TCP), and ica genes were identified by Polymerase Chain Reaction (PCR). Antibiotic susceptibility and methicillin resistance were done following Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) guidelines. The minimum inhibitory concentration (MIC) of vancomycin in all isolates was determined by the agar dilution method. Results: Among 375 Staphylococci studied, 43% and 57% represented S. aureus and Coagulase- Negative Staphylococci (CNS), respectively. The rate of Methicillin-Resistant S. aureus (MRSA) and Methicillin-Resistant Coagulase Negative Staphylococci (MRCNS) were 81.4% and 66.8% respectively and determined by the disc diffusion method. The most potential antibiotics were tetracycline and chloramphenicol showing sensitivity to more than 90% isolates. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) value of oxacillin for staphylococci ranged from 0.125-32 μg/ml. Oxacillin agar diffusion method showed 51.6% and 79.9% isolates as MRSA and MRCNS, respectively, revealing a very high percentage of S. aureus and CNS isolates as methicillin-resistant. All isolates had susceptible vancomycin MICs that ranged from 0.125-2 μg/ml. Two S. aureus isolated from Central Venous Catheter (CVC) and catheter specimens were detected with intermediate susceptibility to vancomycin. Similarly, three CNS isolated from blood, CVC, and wound/pus (w/p) were intermediately susceptible to vancomycin. Strong biofilm formation was observed in 22.1% of clinical isolates, and the ica gene was detected among 22.9% of isolates. Only one S. aureus detected as a biofilm producer by the TCP method was found to have intermediate susceptibility to vancomycin. Conclusions: The increment in vancomycin MIC among methicillin-resistant and biofilm-producing staphylococci is alarming. Strict control measures to prevent methicillin-resistant isolates spread and routine surveillance for vancomycin-resistant isolates must be incorporated in hospitals to prevent antimicrobial treatment failure.

RESUMEN Antecedentes: Los estafilococos resistentes a la meticilina y productores de biopelículas están surgiendo como cepas multirresistentes que reducen la eficacia del tratamiento antimicrobiano. Aunque la vancomicina se utiliza como fármaco de elección para tratar dichos aislados, diferentes estudios realizados en todo el mundo han documentado la aparición de cepas intermedias susceptibles o resistentes a este antibiótico. Objetivo: El estudio tenía como objetivo determinar la concentración mínima inhibitoria de la vancomicina para los estafilococos resistentes a la meticilina y productores de biofilm aislados de diferentes muestras clínicas. Métodos: Se incluyeron en el estudio 375 estafilococos aislados de diferentes muestras clínicas durante un año. La formación de biopelículas se determinó mediante el método de la placa de cultivo de tejidos (TCP), y los genes ica se identificaron mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). La susceptibilidad a los antibióticos y la resistencia a la meticilina se realizaron siguiendo las directrices del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). La concentración inhibitoria mínima (MIC) de vancomicina en todos los aislados se determinó por el método de dilución en agar. Resultados: Entre los 375 estafilococos estudiados, el 43% y el 57% representaban S. aureus y estafilococos coagulasa-negativos (ECN), respectivamente. La tasa de S. aureus resistente a la meticilina (SARM) y de estafilococos coagulasa negativos resistentes a la meticilina (ECNM) fue del 81,4% y el 66,8%, respectivamente, y se determinó por el método de difusión de discos. Los antibióticos más potenciales fueron la tetraciclina y el cloranfenicol, que mostraron una sensibilidad superior al 90% de los aislados. El valor de la concentración inhibitoria mínima (CIM) de la oxacilina para los estafilococos osciló entre 0,125-32 μg/ml. El método de difusión en agar de la oxacilina mostró que el 51,6% y el 79,9% de los aislados eran SARM y MRCNS, respectivamente, lo que revela que un porcentaje muy elevado de los aislados de S. aureus y CNS son resistentes a la meticilina. Todos los aislados tenían MIC de vancomicina susceptibles que oscilaban entre 0,125-2 μg/ml. Se detectaron dos S. aureus aislados de muestras de catéteres venosos centrales (CVC) y catéteres con una susceptibilidad intermedia a la vancomicina. Del mismo modo, tres S. aureus aislados de sangre, CVC y herida/pus (w/p) fueron intermedianamente susceptibles a la vancomicina. Se observó una fuerte formación de biopelículas en el 22,1% de los aislados clínicos, y se detectó el gen ica en el 22,9% de los aislados. Sólo un S. aureus detectado como productor de biopelículas por el método TCP resultó tener una susceptibilidad intermedia a la vancomicina. Conclusiones: El incremento de la MIC de vancomicina entre los estafilococos resistentes a la meticilina y productores de biofilm es alarmante. Para evitar el fracaso del tratamiento antimicrobiano, deben incorporarse en los hospitales medidas de control estrictas para prevenir la propagación de los aislados resistentes a la meticilina y una vigilancia rutinaria de los aislados resistentes a la vancomicina.

Abstract Background: Cystic fibrosis (CF) is a genetic disease in which thick, sticky mucus is produced in the lungs (and other organs) that impairs ciliary clearance, leading to respiratory problems, increased chronic bacterial infections, and decreased lung function. Staphylococcus aureus is one of the primary bacterial pathogens colonizing the lungs of CF patients. This study aimed to characterize the genetic relatedness of S. aureus, its presence in children with CF, and its cytotoxic activity in THP1 cell-derived macrophages (THP1m) Methods: Genetic relatedness of S. aureus isolates from a cohort of 50 children with CF was determined by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). The VITEK® 2 automated system was used to determine antimicrobial susceptibility, and methicillin-resistance S. aureus (MRSA) was determined by diffusion testing using cefoxitin disk. The presence of mecA and lukPV genes was determined by the polymerase chain reaction and cytotoxic activity of S. aureus on THP1m by CytoTox 96® assay Results: From 51 S. aureus isolates from 50 children with CF, we identified 34 pulsotypes by PFGE. Of the 50 children, 12 (24%) were colonized by more than one pulsotype, and 5/34 identified pulsotypes (14.7%) were shared between unrelated children. In addition, 3/34 pulsotypes (8.8%) were multidrug-resistant (MDR), and 2/34 (5.9%) were MRSA. Notably, 30/34 pulsotypes (88.2%) exhibited cytotoxicity on THP1m cells and 14/34 (41.2%) altered THP1m monolayers. No isolate carried the lukPV gene Conclusions: Although a low frequency of MRSA and MDR was found among clinical isolates, most of the S. aureus pulsotypes identified were cytotoxic on THP1m.

Resumen Introducción: La fibrosis quística (FQ) es una enfermedad genética en la que se produce moco espeso y pegajoso en los pulmones (y otros órganos), lo que conduce a problemas respiratorios, incremento de las infecciones bacterianas crónicas y disminución de la función pulmonar. Staphylococcus aureus es uno de los principales patógenos que colonizan los pulmones de los pacientes con FQ. El objetivo de este trabajo fue caracterizar la relación genética de S. aureus, su presencia en niños con FQ y su actividad citotóxica en macrófagos derivados de células THP1 (THP1m) Métodos: La relación genética de los aislados de S. aureus provenientes de una cohorte de 50 pacientes con FQ fue determinada por electroforesis en gel de campo pulsado (PFGE). La sensibilidad a los antimicrobianos se determinó mediante el sistema automatizado VITEK® 2, y la resistencia a la meticilina (SARM) mediante la prueba de difusión utilizando discos de cefoxitina. La presencia de los genes mecA y lukPV se determinó mediante reacción en cadena de la polimerasa, y la actividad citotóxica de S. aureus sobre células THP1m mediante el ensayo CytoTox96® Resultados: A partir de 51 aislados de S. aureus provenientes de 50 niños con FQ se identificaron 34 pulsotipos por PFGE. De los 50 niños, 12 (24%) estaban colonizados por más de un pulsotipo y 5 de los 34 pulsotipos (14.7%) los compartían niños que no estaban relacionados. De los 34 pulsotipos, 3 (8.8%) presentaron multirresistencia (MDR) y 2 (5.9%) fueron SARM. Además, 30 pulsotipos (88.2%) fueron citotóxicos sobre células THP1m y 14 (41.2%) alteraron su monocapa. Ninguno de los pulsotipos presentó el gen lukPV Conclusiones: Aunque se encontró una baja frecuencia de SARM y MDR en los aislados, la mayoría de los pulsotipos de S. aureus identificados fueron citotóxicos para células THP1m.

Resumen Se describe el resultado de la búsqueda de Staphylococcus aureus resistentes a meticilina (SARM) en la cavidad nasal de cerdos de cría intensiva, durante los años 2019 y 2021, con el objetivo de dar a conocer si existe circulación, en Argentina, de este patógeno relevante en la salud pública. Se procesaron 64 muestras obtenidas en 5 granjas de las provincias de Buenos Aires, Santa Fe y San Luis. Se aislaron 19 (29,7%) SARM, confirmados por la presencia del gen mecA y con resistencia múltiple (3 o más familias de antibióticos). Todos los SARM fueron sensibles a rifampicina, nitrofurantoína y linezolid y resistentes a cloranfenicol, tetraciclina y ciprofloxacina. La resistencia a eritromicina fue del 68,4% (13/19), a clindamicina del 78,9% (15/19) y la no sensibilidad a gentamicina del 57,9% (11/19). Las edades de los animales portadores fueron de 27, 80, 120 y 154 días y, en todas las granjas muestreadas, se identificó SARM. Los aislamientos del año 2019 se caracterizaron como complejo clonal 1 (SARM de la comunidad) prevalentes en la población humana. Estos hallazgos demuestran la circulación de SARM en cerdos de producción intensiva y resaltan la necesidad de implementar su control para tomar medidas apropiadas que eviten su diseminación.

Abstract In the present work, the presence of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) was evaluated in the nasal cavity of pigs from intensive farms during 2019 and 2021, with the aim to report MRSA circulation of this relevant public health pathogen in Argentina. A total of 64 samples obtained from 5 farms in Buenos Aires, Santa Fe and San Luis provinces were studied. Nineteen (29.7%) MRSA were isolated, confirmed by the presence of the mecA gene; all isolates were multidrug resistant (3 or more families of antibiotics). All MRSA were susceptible to rifampin, nitrofurantoin, and linezolid and resistant to chloramphenicol, tetracycline, and ciprofloxacin. Resistance to erythromycin, to clindamycin and non-susceptibility to gentamicin was 68.4% (13/19), 78.9% (15/19), and 57,9% (11/19), respectively. Carrier animals were 27, 80, 120 and 154 days old, and MRSA was identified in all the sampled farms. The isolates from 2019 were characterized as clonal complex 1 (community MRSA), which is prevalent in the human population. These findings show the circulation of MRSA in pigs from intensive farms and highlight the need for surveillance in order to take appropriate measures to prevent its spread.

Abstract Background: Staphylococcus aureus is part of the nasal microbiota in 20-30% of the population. This colonization is also a reservoir for its dissemination, which is worrying in the case of strains with resistance to methicillin (MRSA). Aim: To determine S. aureus nasal carriage in nursing and medical students of San Felipe Campus and characterize theirs isolates. Methods: During 2017, nasal swabs were taken from 225 students and seeded in salt manitol agar. Antibiotypes were determined by agar diffusion and the genetic clonality was assessed by PFGE and MLST in isolated S. aureus. SCCmec cassette and Panton-Valentine leukocidin gene (pvl) presence were determined in the MRSA isolates. Results: 61 students carried S. aureus (27.1%) including two MRSA strains (0.9%). S. aureus showed resistance to penicillin (75%), erythromycin (14%) and clindamycin (10%), chloramphenicol (1.6%) and levofloxacin, oxacillin, cefoxitin (3.3%). Nineteen PFGE-types were differentiated, and their sequence-types coincided with main clonal complexes described in S. aureus carriers from different places worldwide: CC30, CC8, CC97, CC15, CC22 and CC1. MRSA strains belonged to CC5 and they corresponded to the Chilean/Cordobes and USA100NY/J clones. Conclusion: Nasal carriage of S. aureus and MRSA in students, coincided with the general population and sensitive-methicillin strains showed clonal diversity and high antimicrobial susceptibility except for penicillin.

Resumen Introducción. Staphylococcus aureus es parte de la microbiota nasal en 20-30% de la población general, colonización que constituye un reservorio para su transmisión, lo que es preocupante en cepas resistentes a meticilina (SARM). Objetivo: Determinar la prevalencia de S. aureus en estudiantes de Medicina y Enfermería del Campus San Felipe y caracterizar sus aislamientos. Material y Métodos: El 2017 se midió la portación nasal a 225 estudiantes, a las cepas aisladas se le analizó su antibiotipo por difusión en agar, la relación clonal por electroforesis de campo pulsado y MLST. En SARM se determinó el cassette SCCmec y gen de la leucocidina de Panton-Valentine. Resultados: 61 estudiantes portaron S. aureus (27,1%) incluyendo dos cepas SARM (0,9%). Staphylococcus aureus mostró resistencia a penicilina (75%), eritromicina (14%) y clindamicina (10%), cloranfenicol (1,6%) y levofloxacina, oxacilina, cefoxitina (3,3%). Se diferenciaron diecinueve pulsotipos y el secuenciotipo coincidió con complejos clonales descritos a nivel mundial en portadores de S. aureus: CC30, CC8, CC97, CC15, CC22 y CC1. Las dos cepas SARM correspondieron con los clones chileno/cordobés y USA100NY/J, ambas del CC5. Conclusión: La portación nasal de S. aureus y SARM en los estudiantes coincidió con la portación en la población general y las cepas sensibles a meticilina mostraron diversidad clonal y alta susceptibilidad antimicrobiana, exceptuando a penicilina.

ABSTRACT Increasing antimicrobial resistance amongStaphylococcus aureusnecessitates a new antimicrobial with a different site of action. We have isolated a novel cyclic peptide-1 (ASP-1) fromBacillussubtiliswith potent activity against methicillin-resistantS. aureus(MRSA) at a minimum inhibitory concentration (MIC) of 8-64μg/ml. Scanning electron micrographs demonstrated drastic changes in the cellular architecture of ASP-1 treated cells ofS. aureusATCC 29213 and an MRSA clinical isolate at MICs, with damages to the cell wall, membrane lysis and probable leakage of cytoplasmic contents at minimum bactericidal concentrations. The ultrastructure alterations induced by ASP-1 have also been compared with those of oxacillin-treated MRSA cells at its MIC using scanning electron microscopy.

RESUMEN El incremento de la resistencia antimicrobiana entre los tipos deS. aureusexige un nuevo agente antimicrobiano con un sitio de acción diferente. Aislamos un nuevo péptido cíclico (ASP-1) deBacillussubtiliscon potente actividad frente aS. aureusresistente a meticilina (SARM) en una concentración inhibitoria mínima (CIM) de 8-64μg/ml. Las micrografías obtenidas con microscopio electrónico de barrido mostraron cambios drásticos en la arquitectura celular de las células deS. aureusATCC 29213 tratadas con ASP-1, y un aislamiento clínico de SARM a la CIM, con daños a la pared celular, lisis de la membrana y probable fuga de contenido citoplasmático a concentraciones bactericidas mínimas. Comparamos también, las alteraciones de la ultraestructura inducidas por ASP-1 con las de células de SARM tratadas con oxacilina a su CIM, utilizando microscopio electrónico de barrido.

ABSTRACT The study aimed to identify Staphylococcus spp with phenotypes and genotypes of methicillin resistance, as well as to identify variants of the coa + gene polymorphism in S. aureus. In total, 97 strains of Staphylococcus spp isolated from chickens were used and antibiograms and multiplex PCR, conventional PCR and sequencing tests were carried out. The phenotypic results indicate the presence of resistance to 2 MRSA and 26 SCN resistant to methicillin (cefoxitin) and 2 S. aureus and 67 SCN with presumed resistance to methicillin (oxacillin) in the antibiograms. Using PCR, the mecA gene responsible for methicillin resistance was identified in 24 strains: 2 MRSA and 22 SCNRM. In addition, 4 S. aureus genotypes with variants of the coagulase gene polymorphism were identified. The results suggest a constant genetic activity, the appearance of clones and the expression of genes for resistance to the main antibiotics faced by Staphylococcus spp.

RESUMEN El estudio tuvo como objetivo identificar Staphylococcus spp con fenotipos y genotipos de resistencia a meticilina, así como identificar variantes del polimorfismo del gen coa + en S. aureus. Se utilizaron 97 cepas de Staphylococcus spp aislados de pollos y se hicieron antibiogramas y pruebas de PCR multiplex, PCR convencional y secuenciamiento. Los resultados fenotípicos indican la presencia de resistencia a 2 SARM y 26 SCN resistentes a meticilina (cefoxitina) y 2 S. aureus y 67 SCN con presunta resistencia a meticilina (oxacilina) en las pruebas de antibiograma. Mediante PCR se identificó el gen mecA responsable de la resistencia a meticilina en 24 cepas: 2 SARM y 22 SCNRM y se identificaron cuatro genotipos de S. aureus con variantes del polimorfismo del gen coagulasa. Los resultados sugieren una actividad genética constante, la aparición de clones y la expresión de genes para la resistencia a los principales antibióticos que enfrentan Staphylococcus spp.

Abstract A descriptive cross-sectional investigation was carried out with the objective of establishing the prevalence of nasal carriers of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) in health workers of a Specialty Hospital in Quito. The sample was non-probabilistic for convenience, with the participation of 191 people from the areas of Neonatology, Operating Rooms, Intensive Care and Traumatology Annex, who underwent a bacteriological culture of nasal swab tests. A survey was applied to characterize health workers according to their age, sex, the area where they work and the position they hold. The results revealed that 95% of the participants had Staphylococcus. 12.5% of the sample carried methicillin resistant Staphylococcus aureus. In addition, the service with the highest distribution of MRSA was Intensive Care with 13.19%. The staff with the most cases of methicillin-resistant S. aureus was the nursing staff with 31%. In conclusion, a low prevalence of MRSA carriers was determined; however, it is known that the nasal carrier plays a transcendental role in infections caused by Staphylococcus, since the lack of symptoms could cause direct contagion.

Resumen Se realizó una investigación transversal de nivel descriptivo con el objetivo de establecer la prevalencia de portadores nasales de Staphylococcus aureus meticilino resistente (SARM) en los trabajadores de salud de un Hospital de Especialidades en Quito. La muestra fue no probabilística por conveniencia con la participación de 191 personas de las áreas de Neonatología, Quirófanos, Cuidados Intensivos y Anexo de Traumatología, a los cuales se les realizó un cultivo bacteriológico de pruebas de hisopado nasal. Se aplicó una encuesta para caracterizar a los servidores de salud según su edad, sexo, el área donde trabajan y el cargo que desempeñan. Los resultados revelaron que el 95 % de los participantes presentaban Staphylococcus. El 12,5 % de la muestra portaban Estafilococo aureus meticilino resistente. Además, el servicio con mayor distribución de SARM fue Cuidados Intensivos con el 13,19 %. El personal con más casos de S. aureus meticilino resistente fue el de enfermería con 31 %. En conclusión, se determinó una baja prevalencia de portadores de SARM, sin embargo, se conoce que el portador nasal desempeña un papel transcendental en las infecciones causadas por Staphylococcus, puesto que la carencia de sintomatología podría originar un contagio directo.

ABSTRACT Introduction: Staphylococcus aureusis considered one of the most critical human pathogens worldwide, and its levels of methicillin resistance have increased even in strains isolated from people without nosocomial risk factors. Therefore the genetic typing of circulating clones is essential to understand dissemination patterns. Objective: Obtain the MRSA typing that caused invasive infections in children by using the automated multi-locus variable number of tandem repeats (MLVA) analysis technique. Materials and methods: Observational, descriptive, cross-sectional. Results: 25 strains MRSA representing more than 700S. aureusisolates collected in 2010, 2012, and 2013 from 4 national reference hospitals were analyzed. The MLVA automation included the typing of 88% (22/25) isolates, resulting in 3 different profiles, each one associated with a different spa type, being the 1-t019 the predominant (86%), followed by the 3-t002 profile (9%), yielding 100% concordance with the MLVA manual, as well as high concordance with the standard gold method, PFGE. Conclusions: The inclusion of an automated fragment analysis method led to the characterization of isolates, improving response time, and maintaining high sensitivity compared to the manual process.

RESUMEN Introducción: Staphylococcus aureus es considerado uno de los patógenos humanos más importantes a nivel mundial y sus niveles de resistencia a meticilina han aumentado incluso en cepas aisladas de personas sin factores de riesgo nosocomial, por lo que la tipificación genética de los clones circulantes es fundamental para comprender los patrones de diseminación. Objetivo: Obtener la tipificación de SARM que causaron infecciones invasivas a niños mediante el empleo de la técnica de análisis multi-locus de número variable de repeticiones en tándem (MLVA) automatizada. Materiales y Métodos: Estudio observacional, descriptivo de corte transverso. Resultados: Se analizaron 25 cepas SARM que representan más de 700 aislamientos de S. aureus colectados en los años 2010, 2012 y 2013 de 4 hospitales de referencia nacional. La automatización de la técnica MLVA incluyó la tipificación del 88% (22/25) de los aislamientos en estudio, resultando 3 perfiles diferentes, cada uno asociado a un “spa tipo” distinto, siendo el perfil 1-t019 el predominante (86%), seguido por el perfil 3-t002 (9%), arrojando 100% de concordancia con el método MLVA manual, así como una alta concordancia con el método estándar de oro, PFGE. Conclusiones: La inclusión de un método de análisis de fragmentos automatizado permitió llevar a cabo la caracterización de aislamientos mejorando el tiempo de respuesta y manteniendo una alta sensibilidad en comparación con el método manual.

ABSTRACT Objective: Typify the SCCmec cassette in methicillin-resistant strains of Staphylococcus aureus in clinical isolates from health centers in the State of Aragua-Venezuela and compare the presence of SCCmec genotypes among the state health centers and according to the type of infection. Materials and methods: 81 MRSA strains from four health centers of the Aragua-Venezuela State were studied. Methicillin resistance was performed with the Kirby-Bauer method with oxacillin (1 µg) and cefoxitin (30 µg) disks. The mecA gene and SCCmec were analyzed by the multiple PCR technique. Results: Only 55 isolates (67.9%) amplified the mecA gene, and 24 strains (43.6%) amplified SCCmec. SCCmec type I was the most frequency, followed by SCCmec IV and SCCmec III, representing 62.5%, 25% and 12.5%, respectively. SCCmec I was predominant in health center A (80%), while in B and C 60% and 100% respectively were SCCmec IV. At health center D, 50% turned out to be SCCmec I and 50% SCCmec IVd. A relationship was found between the SCCmec and the health center with statistical significance. SCCmec I predominated in skin and soft tissue and respiratory infections with 63.2% and 50%, respectively. There was no association between genotype and type of infection with a p value greater than 0.05. Conclusions: The prevalence of SCCmec I and IV will allow establishing new measures in the use of antibiotics and epidemiological control.

RESUMEN Objetivos: Tipificar el casette SCCmec en cepas de Staphylococcus aureus resistentes a meticilino (SARM) en aislados clínicos de centros de salud del Estado Aragua-Venezuela y comparar la presencia de los genotipos SCCmec entre los centros de salud del estado y según el tipo de infección. Materiales y métodos: Durante enero y agosto de 2015 se estudiaron 81 cepas SARM de cuatro centros de salud del estado de Aragua en Venezuela. La resistencia al meticilino se midió con el método de Kirby-Bauer con discos de oxacilina (1 µgr) y cefoxitina (30 µgr). El gen mecA y el SCCmec se analizaron por la técnica de reacción en cadena de polimerasa múltiple. Resultados: 55 aislados (67,9%) amplificaron el gen mecA, y 24 cepas (43,6%) amplificaron el SCCmec. El SCCmec I fue el más frecuente, seguido de SCCmecIV y SCCmec III, representaron el 62,5%, 25% y 12,5%, respectivamente. El SCCmec I fue predominante en el centro de salud A (80%), mientras que el SCCmec IV se encontró en el centro de salud B (60%) y C (100%). En el centro de salud D, 50% resultó ser SCCmec I y 50% SCCmec IVd. Se encontró relación entre el SCCmec y el centro de salud con significancia estadística. En infecciones de piel y tejidos blandos y en las respiratorias predominó el SCCmec I con 63,2% y 50% respectivamente. Conclusiones: La frecuencia de SCCmec I y IV permitirá establecer nuevas medidas en el uso y control de la resistencia a los antibióticos.

Resumen Introducción. Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (SARM) es un microorganismo que coloniza las fosas nasales y diferentes partes del cuerpo, lo cual se considera un factor de riesgo para adquirir infecciones invasivas, especialmente en pacientes sometidos a cirugía cardiovascular. Objetivo. Determinar la colonización nasal por SARM y establecer las características clínicas en pacientes programados para cirugía cardiovascular. Materiales y métodos. Se hizo un estudio descriptivo entre febrero y diciembre de 2015. Se incluyeron pacientes adultos programados para cirugía cardiovascular en el Hospital Universitario San Ignacio de Bogotá. La colonización se identificó mediante reacción en cadena de la polimerasa (Polymerase Chain Reaction, PCR) en tiempo real en muestras obtenidas mediante hisopados nasales. Los pacientes fueron descolonizados con mupirocina al 2,0 % intranasal dos veces al día y baños con gluconato de clorhexidina al 4 % del cuello hacía abajo durante cinco días, al cabo de lo cual se hizo una PCR de control. Resultados. Se incluyeron 141 pacientes, 52 hospitalizados y 89 ambulatorios. Del total, 19 (13,4 %) tenían colonización nasal por SARM, correspondientes a 9 (17,3 %) de los 52 hospitalizados y 10 (11,2 %) de los 89 ambulatorios. Todos los pacientes sometidos a descolonización tuvieron resultado negativo en la PCR al final del proceso y ninguno presentó infección del sitio operatorio por S. aureus. Conclusiones. Se demostró colonización nasal por SARM tanto en los pacientes hospitalizados como en los ambulatorios. La descolonización con mupirocina fue efectiva para erradicar el estado de portador a corto plazo, lo que podría tener efecto en las tasas de infección del sitio operatorio en las cirugías cardiovasculares.

Abstract Introduction: Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is a microorganism that colonizes nostrils and different parts of the body, which is considered a risk factor to acquire invasive infections, especially in cardiovascular surgery patients. Objective: To determine the frequency of nasal colonization by MRSA and to establish the clinical characteristics in patients scheduled for cardiovascular surgery. Materials and methods: This was a descriptive study conducted between February and December, 2015. We included adult patients scheduled for cardiovascular surgery at the Hospital Universitario San Ignacio in Bogotá, Colombia. Colonization was identified by real-time PCR from nasal swabs. Colonized patients were treated with mupirocin 2.0% intranasally twice a day and bathed with chlorhexidine 4% from the neck downwards for five days. At the end of this treatment, PCR control was carried out. Results: We included 141 patients with a percentage of nasal colonization of 13.4% (19/141). There were 52 hospitalized patients and 89 outpatients with a percentage of nasal colonization of 17.3% (9/52), and 11.2% (10/89), respectively. All colonized patients who received treatment had a negative PCR at the end of the regime and none of the participating patients had a surgical site infection by S. aureus at the end of the study. Conclusions: Nasal colonization was observed both in hospitalized patients and outpatients. Decolonization treatment with mupirocin was effective to eradicate the carrier state in the short term, which could impact the rates of surgical wound infection associated with cardiovascular surgery.

Abstract: Objective: To describe the clinical and molecular characteristics of methicillin-resistantStaphylococcus aureus(MRSA) strains that were collected in theHospital Regional de Alta Especialidad de Veracruz(HRV). Materials and methods: A total of 107 MRSA strains from individual patients were examined. The strains were collected between September 2009 and September 2010. The clinical and demographic characteristics of patients were analyzed; molecular typing by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE), staphylococcal chromosomal cassette mec (SCCmec) typing and multilocus sequence typing were used to characterize the isolates. Results: Two PFGE patterns (NY/J and IB) were identified with 4 and 3 subtypes respectively. The isolates analyzed showed two SCCmec types (I and II) and two sequence types (ST): ST247 and ST5 related with the Iberian and New York/Japan clones respectively. Conclusion: This study establishes the presence of two very important clonal lineages of MRSA: New York/Japan and Iberian clone in the hospital environment.

Resumen: Objetivo: Describir las características clínicas y moleculares de cepas deStaphylococcus aureusresistentes a meticilina (SARM) que fueron recolectadas en el Hospital Regional de Alta Especialidad de Veracruz (HRV). Material y métodos: Un total de 107 cepas de SARM fueron analizadas en el presente estudio. Las cepas estudiadas fueron recolectadas de septiembre de 2009 a septiembre de 2010. Las características clínicas y demográficas de los pacientes fueron analizadas; la tipificación molecular de las cepas se hizo por electroforesis en campos pulsados, casete cromosomal estafilococócico (SCCmec, en inglés) y secuenciación de múltiples locus. Resultados: Dos patrones electroforéticos (NY/J y IB) fueron identificados con 4 y 3 subtipos respectivamente. Los aislamientos analizados mostraron dos tipos de SCCmec (I y II) y dos secuencias tipo (ST): ST247 y ST5 relacionados con las clonas Ibérica y Nueva York/Japón respectivamente. Conclusión: Este estudio estableció la presencia en el medio hospitalario de dos linajes clonales de SARM importantes: Nueva York/Japón e Ibérico.

Abstract: Objective: To describe the clinical and molecular characteristics of methicillin-resistantStaphylococcus aureus(MRSA) strains that were collected in theHospital Regional de Alta Especialidad de Veracruz(HRV). Materials and methods: A total of 107 MRSA strains from individual patients were examined. The strains were collected between September 2009 and September 2010. The clinical and demographic characteristics of patients were analyzed; molecular typing by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE), staphylococcal chromosomal cassette mec (SCCmec) typing and multilocus sequence typing were used to characterize the isolates. Results: Two PFGE patterns (NY/J and IB) were identified with 4 and 3 subtypes respectively. The isolates analyzed showed two SCCmec types (I and II) and two sequence types (ST): ST247 and ST5 related with the Iberian and New York/Japan clones respectively. Conclusion: This study establishes the presence of two very important clonal lineages of MRSA: New York/Japan and Iberian clone in the hospital environment.

Resumen: Objetivo: Describir las características clínicas y moleculares de cepas deStaphylococcus aureusresistentes a meticilina (SARM) que fueron recolectadas en el Hospital Regional de Alta Especialidad de Veracruz (HRV). Material y métodos: Un total de 107 cepas de SARM fueron analizadas en el presente estudio. Las cepas estudiadas fueron recolectadas de septiembre de 2009 a septiembre de 2010. Las características clínicas y demográficas de los pacientes fueron analizadas; la tipificación molecular de las cepas se hizo por electroforesis en campos pulsados, casete cromosomal estafilococócico (SCCmec, en inglés) y secuenciación de múltiples locus. Resultados: Dos patrones electroforéticos (NY/J y IB) fueron identificados con 4 y 3 subtipos respectivamente. Los aislamientos analizados mostraron dos tipos de SCCmec (I y II) y dos secuencias tipo (ST): ST247 y ST5 relacionados con las clonas Ibérica y Nueva York/Japón respectivamente. Conclusión: Este estudio estableció la presencia en el medio hospitalario de dos linajes clonales de SARM importantes: Nueva York/Japón e Ibérico.

ABSTRACT Objective: Typify the SCCmec cassette in methicillin-resistant strains of Staphylococcus aureus in clinical isolates from health centers in the State of Aragua-Venezuela and compare the presence of SCCmec genotypes among the state health centers and according to the type of infection. Materials and methods: 81 MRSA strains from four health centers of the Aragua-Venezuela State were studied. Methicillin resistance was performed with the Kirby-Bauer method with oxacillin (1 µg) and cefoxitin (30 µg) disks. The mecA gene and SCCmec were analyzed by the multiple PCR technique. Results: Only 55 isolates (67.9%) amplified the mecA gene, and 24 strains (43.6%) amplified SCCmec. SCCmec type I was the most frequency, followed by SCCmec IV and SCCmec III, representing 62.5%, 25% and 12.5%, respectively. SCCmec I was predominant in health center A (80%), while in B and C 60% and 100% respectively were SCCmec IV. At health center D, 50% turned out to be SCCmec I and 50% SCCmec IVd. A relationship was found between the SCCmec and the health center with statistical significance. SCCmec I predominated in skin and soft tissue and respiratory infections with 63.2% and 50%, respectively. There was no association between genotype and type of infection with a p value greater than 0.05. Conclusions: The prevalence of SCCmec I and IV will allow establishing new measures in the use of antibiotics and epidemiological control.

RESUMEN Objetivos: Tipificar el casette SCCmec en cepas de Staphylococcus aureus resistentes a meticilino (SARM) en aislados clínicos de centros de salud del Estado Aragua-Venezuela y comparar la presencia de los genotipos SCCmec entre los centros de salud del estado y según el tipo de infección. Materiales y métodos: Durante enero y agosto de 2015 se estudiaron 81 cepas SARM de cuatro centros de salud del estado de Aragua en Venezuela. La resistencia al meticilino se midió con el método de Kirby-Bauer con discos de oxacilina (1 µgr) y cefoxitina (30 µgr). El gen mecA y el SCCmec se analizaron por la técnica de reacción en cadena de polimerasa múltiple. Resultados: 55 aislados (67,9%) amplificaron el gen mecA, y 24 cepas (43,6%) amplificaron el SCCmec. El SCCmec I fue el más frecuente, seguido de SCCmecIV y SCCmec III, representaron el 62,5%, 25% y 12,5%, respectivamente. El SCCmec I fue predominante en el centro de salud A (80%), mientras que el SCCmec IV se encontró en el centro de salud B (60%) y C (100%). En el centro de salud D, 50% resultó ser SCCmec I y 50% SCCmec IVd. Se encontró relación entre el SCCmec y el centro de salud con significancia estadística. En infecciones de piel y tejidos blandos y en las respiratorias predominó el SCCmec I con 63,2% y 50% respectivamente. Conclusiones: La frecuencia de SCCmec I y IV permitirá establecer nuevas medidas en el uso y control de la resistencia a los antibióticos.

Abstract Background: Staphylococcus aureus is one of most prevalent pathogens in the world associated with a high mortality rate and a rapid development of resistance to antibiotics. Despite its pathogenicity, epidemiological monitoring in Mexico is scarce. Aim: To analyze the local molecular epidemiology and determine the clonal origin of methicillin-resistant (MR) strains isolated from patients admitted to Hospital “Dr. Ignacio Morones Prieto”. Methods: A cross-sectional prospective study was carried out from July to December 2016. The characterization of the strains was carried out by Spa genotyping, frequency of specific virulence genes by PCR and antibiogram. Results: The prevalence of MRSA was 25.7%, highlighting the presence of the Spa type t895 in 76% of the resistant strains and a similar pattern of susceptibility to antibiotics. Conclusion: The results of this study indicate that the regional prevalence of MRSA has not changed in the last 10 years and provide valuable information on the clonal origin and the virulence factors of the strains of S. aureus isolated in the region.

Resumen Introducción: Staphylococcus aureus es uno de los patógenos con mayor prevalencia en el mundo, asociado a una alta tasa de mortalidad y un rápido desarrollo de resistencia a los antimicrobianos. A pesar de su patogenicidad, su seguimiento epidemiológico en México es escaso. Objetivo: Analizar la epidemiología molecular local y determinar el origen clonal de cepas resistentes a meticilina (RM) aisladas de pacientes internados en el Hospital Central “Dr. Ignacio Morones Prieto”. Métodos: Se llevó a cabo un estudio prospectivo de corte transversal, de julio a diciembre de 2016. La caracterización de las cepas se realizó mediante genotipificación Spa, la determinación por RPC punto final de la frecuencia de genes de virulencia específicos y su antibiograma. Resultados: A partir de estos datos, se obtuvo que la prevalencia de S. aureus RM fue de 25,7%, destacando la presencia del tipo Spa t895 en 76% de las cepas resistentes y un patrón similar de susceptibilidad a antimicrobianos. Conclusión: Los resultados de este estudio indican que la prevalencia regional de SARM no se ha modificado en los últimos 10 años y proporcionan información valiosa del origen clonal y los factores de virulencia de las cepas de S. aureus aisladas en la región.

Introducción: El objetivo del trabajo ha sido identificar los factores de riesgo que podrían favorecer la aparición de resistencia a meticilina en aislamientos de Staphylococcus aureus y aquellos que influirían en la mortalidad por las bacteriemias producidas por este patógeno. Métodos: Se realizó un estudio observacional de casos y controles en los 57 pacientes diagnosticados de bacteriemia por Staphylococcus aureus en el Hospital de Barbastro. Para el análisis se utilizaron los test estadísticos de Chi cuadrado de Pearson, test de Fisher y regresión logística múltiple. Resultados: Del total de bacteriemias, 63,15% correspondieron a Staphylococcus aureus sensible a meticilina y 36,84% a Staphylococcus aureus resistente a meticilina. Se asociaron a resistencia a meticilina, la adquisición nosocomial de la infección, el uso previo de antibióticos y la edad mayor de 65 años. La mortalidad de los casos de bacteriemia por SARM y SAMS fue respectivamente del 28,57% y del 36,11%, siendo estas diferencias estadísticamente no significativas. Todos los aislamientos fueron sensibles in vitro a vancomicina. Conclusiones: En nuestro sector sanitario, las estrategias más efectivas para disminuir la incidencia de bacteriemias por SARM serían el control y uso adecuado de antimicrobianos y la aplicación de programas de prevención de infecciones nosocomiales. En los pacientes con bacteriemia por Staphylococcus aureus, la resistencia a meticilina no se asocia a más mortalidad.

Introduction: The objective of this work has been to identify the risk factors that could favor the appearance of methicillin resistance in isolates of Staphylococcus aureus (SA) and those that would influence mortality due to bacteremia produced by this pathogen. Methods: An observational case-control study was carried out in 57 patients diagnosed with bacteremia by SA at the Barbastro's Hospital. Pearson Chi square statistical test, Fisher test and multiple logistic regression were used for the analysis. Results: Of the total Bacteriemias, 63.15% corresponded to methicillin-sensitive Staphylococcus aureus (MSSA) and 36.84% to methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Nosocomial acquisition of the infection, previous use of antibiotics and the age over 65 years, were associated with methicillin resistance. The mortality of cases of MRSA and SAMS bacteremia was 28.57% and 36.1 1% respectively, these differences being statistically not significant. All isolates were sensitive in vitro to vancomycin. Conclusions: In our health sector, the most effective strategies to reduce the incidence of MRSA bacteremia would be the control and proper use of antimicrobials and the application of nosocomial infection prevention programs. Patients with SA bacteremia, are not associated with more mortality caused by MRSA.