Abstract: Increasing concerns over the environmental impact of chemical pesticides have prompted the exploration of alternative, and eco-friendly solutions for controlling insect pests. The use of entomopathogenic fungus (EPF) as a biological control agent is of paramount importance. We aimed to investigate the effect of different concentrations ofMetarhizium anisopliae(Metschnikoff) Sorokin on larval mortality and pupal formation, of sawfly larvae, a major pest of rose plants. Our study revealed a concentration-dependent effect ofM. anisopliaeon sawfly larvae. At 7 days after EPF exposure, the highest concentration (1 × 109conidia/ml) led to a mortality rate of 65.0% and at the 11th day, the larval mortality was reached up to 82.5%. The highest EPF concentration resulted in a minimal pupal formation (7.5%). This study demonstrates the potential ofM. anisopliaeas a valuable biological control agent against sawfly larvae infestations in rose plants.

Resumen: La creciente preocupación por el impacto ambiental de los pesticidas químicos ha impulsado la exploración de soluciones alternativas y ecológicas para controlar las plagas de insectos. El uso de hongos entomopatógenos (FPE) como agente de control biológico es de suma importancia. Nuestro objetivo fue investigar el efecto de diferentes concentraciones deMetarhizium anisopliae(Metschnikoff) Sorokin sobre la mortalidad larvaria y la formación de pupas de larvas de mosca sierra, una plaga importante de las plantas de rosas. Nuestro estudio reveló un efecto dependiente de la concentración deMetarhizium anisopliaesobre las larvas de mosca sierra. A los 7 días después de la exposición al EPF, la concentración más alta (1 × 109conidios/ml) condujo a una tasa de mortalidad del 65.0 % y al día 11 la mortalidad larvaria alcanzó hasta el 82.5 %. La concentración más alta de EPF resultó en una formación de pupas mínima (7.5 %). Este estudio demuestra el potencial deMetarhizium anisopliaecomo un valioso agente de control biológico contra las infestaciones de larvas de mosca sierra en plantas de rosas.

Resumo O impacto dos antibióticos no crescimento e na produção do casulo foi avaliado, além do isolamento e caracterização das bactérias associadas ao intestino de larvas infectadas do bicho-da-seda. A criação das larvas foi mantida nas condições recomendadas de temperatura e umidade. As larvas do bicho-da-seda com sintomas anormais foram coletadas do grupo controle e dissecadas para coleta do intestino. As bactérias foram isoladas do conteúdo intestinal por espalhamento em placas de ágar e incubadas a 37° C durante 48 horas. A identificação bacteriana e a análise filogenética foram realizadas pelo sequenciamento do gene 16S rRNA. As bactérias isoladas foram submetidas a teste de sensibilidade antimicrobiana (métodos de difusão em disco) com penicilina (10 µg / mL), tetraciclina (30 µg / mL), amoxicilina (25 µg / mL), ampicilina (10 µg / mL) e eritromicina (15 µg / mL). Todas as cepas isoladas apresentaram resultados positivos para o teste da catalase. Isolamos e identificamos cepas bacterianas (n = 06) do intestino de larvas de bicho-da-seda saudáveis e doentes. Com base na sequência do gene 16S rRNA, as bactérias isoladas mostraram estreita relação com Serratia, Bacillus e Pseudomonas spp. Notavelmente, 83,3% das cepas eram resistentes a penicilina, tetraciclina, amoxicilina, ampicilina e eritromicina, mas 16,6% mostraram suscetibilidade aos antibióticos comumente usados mencionados acima. As larvas do bicho-da-seda alimentadas com folhas tratadas com penicilina apresentaram melhora significativa no peso larval, comprimento larval e produção de casulo. Peso larval significativamente maior (6,88g), comprimento larval (5,84cm) e peso do casulo (1,33g) foram registrados para larvas alimentadas com folhas tratadas com penicilina, em comparação com outros antibióticos. Cepas bacterianas isoladas mostraram estreita relação com Serratia spp., Bacillus spp. e Pseudomonas spp.

Abstract The impact of antibiotics on growth, cocoon production was assessed in addition to isolation and characterization of bacteria associated with silkworm gut of infected larvae. Larval rearing was maintained at recommended conditions of temperature and humidity. Silkworm larvae showing abnormal symptoms were collected from the control group and dissected for gut collection. Bacteria were isolated from the gut content by spreading on agar plates and incubated at 37 °C for 48 hrs. Bacterial identification and phylogenetic analysis were carried out by 16S rRNA gene sequencing. The isolated bacteria were subjected to antimicrobial susceptibility test (disc diffusion methods) by using Penicillin (10 µg/mL), Tetracycline (30 µg/mL), Amoxicillin (25 µg/mL), Ampicillin (10 µg/mL), and Erythromycin (15 µg/mL). All isolated strains showed positive results for the catalase test. We isolated and identified bacterial strains (n = 06) from the gut of healthy and diseased silkworm larvae. Based on the 16S rRNA gene sequence, isolated bacteria showed close relation with Serratia, Bacillus, and Pseudomonas spp. Notably, 83.3% of strains were resistant to Penicillin, Tetracycline, Amoxicillin, Ampicillin, and Erythromycin but 16.6% showed antibiotic susceptibility to the above-mentioned commonly used antibiotics. Silkworm larvae fed on penicillin-treated leaves showed significant improvement in larval weight, larval length, and cocoon production. Significantly higher larval weight (6.88g), larval length (5.84cm), and cocoon weight (1.33g) were recorded for larvae fed on leaves treated with penicillin as compared to other antibiotics. Isolated bacterial strains showed close relation with Serratia spp., Bacillus spp. and Pseudomonas spp.

Resumo Earias vittella Fabricius, 1794 (Noctuidae: Lepidoptera) é considerada uma das pragas mais destrutivas de algodão e quiabo no mundo, incluindo a Ásia. Essa praga estabeleceu resistência a vários inseticidas sintéticos. O uso de biopesticidas é uma das abordagens não convencionais para desenvolver um ecossistema saudável sem prejudicar as pragas não alvo e a fauna natural benéfica de insetos. No presente estudo, os níveis de toxicidade do extrato de semente de Citrullus colocynthis foram avaliados nas populações de E. vittella em condições de laboratório padronizadas. Os efeitos tóxicos de C. colocynthis nos períodos de desenvolvimento, conteúdo de proteína e atividade esterase das fases de vida de E. vittella também foram avaliados. Os níveis de toxicidade de metanol, etanol, hexano, água e profenofós foram avaliados em larvas de 1º instar de E. vittella. As concentrações de LC30 e LC80 apresentaram eficácia do extrato de sementes de C. colocynthis à base de metanol contra larvas de 1º instar de E. vittella. Os períodos larval e pupal aumentados foram revelados nas amostras tratadas durante a comparação com as amostras não tratadas. A taxa intrínseca de aumento e a taxa reprodutiva líquida nas concentrações de larvas expostas LC30 e LC80 permaneceram menores do que o tratamento controle. A fecundidade, a atividade da esterase e o conteúdo de proteína diminuíram nas amostras tratadas com LC30 e LC80 em comparação com o controle. As presentes descobertas sugerem que os extratos de C. colocynthis à base de inseticidas botânicos são benéficos, sustentáveis para o ecossistema e podem ser integrados com programas de manejo de insetos do ponto de vista da segurança ambiental.

Abstract Earias vittellaFabricius, 1794 (Noctuidae: Lepidoptera) is deliberated to be one of the most destructive pests of cotton and okra vegetation in the world including Asia. The pest has established resistance to various synthetic insecticides. The use of bio-pesticide is one of the unconventional approaches to develop a vigorous ecosystem without harming non- target pests and beneficial natural insect fauna. In the present study, the toxicity levels of Citrullus colocynthis seed extract have been evaluated against the populations of E. vittellaunder standardized laboratory conditions. The toxic effects of C. colocynthis on development periods, protein contents and esterase activity of the life stages of E. vittella were also evaluated. The toxicity levels of methanol, ethanol, hexane, water and profenofos were evaluated on the 1st instar larvae of E. vittella. LC30 and LC80 concentrations exhibited the effectiveness of methanol-based C. colocynthis seed extract against 1st instar larvae of E. vitella. The enhanced larval and pupal periods were revealed in treated samples during the comparison with untreated samples. The intrinsic rate of increase, net reproductive rate in the LC30 and LC80 concentrations exposed larvae remained less than the control treatment. Fecundity, the esterase activity and protein contents were declined in LC30 and LC80 treated samples as compared to the control. The present findings suggest that C. colosynthis extracts based botanical insecticides are beneficial, ecosystem sustainable and can be integrated with insect management programs from environment safety perspective.

Resumo Diversidade molecular, morfológica, perfil químico qualitativo e atividade antioxidante de fungos filamentosos do trato digestivo de Phylloicus sp. (Trichoptera: Calamoceratidae). Este estudo visou identificar por análises molecular, morfológica, química e por extrato antioxidante, fungos filamentosos isolados do trato digestivo de Phylloicus sp, um inseto aquático que vive entre folhagens em riachos tropicais, e participam junto com os fungos da decomposição de substratos vegetais em habitats aquáticos. Larvas de insetos de Phylloicus sp. foram coletadas em riachos no Estado do Tocantins, Brasil. Os fungos foram isolados a partir do trato digestivo das larvas após desinfecção e dissecção, depois descritos e purificados para fins de identificação e testes para atividade antioxidante. A identidade molecular foi realizada do sequenciamento ITS1 e ITS4, TUB e TEF. Os extratos fúngicos foram produzidos em solução etanólica 70% e posterior liofilização. Para análise de grupos químicos dos extratos, foi realizada cromatografia em camada delgada (CCD) em duas fases móveis e diferentes reveladores. A morfologia foi realizada por microscopia óptica corada com Azul de Toluidina e a mensuração realizada no programa ImageJ. A atividade antioxidante realizada em CCD e por método quantitativo para os radicais DPPH e peróxido de hidrogênio (H2O2). Foram identificados quatro fungos: Endomelanconiopsis endophytica, Myxospora musae, Neopestalotiopsis cubana e Fusarium pseudocircinatum. Na CCD foi evidenciado várias manchas com fase móvel acetona/clorofórmio e reveladores UV 254 nm e vapor de I2. Os extratos fúngicos demonstram ação antioxidante para redução do radical livre DPPH e em especial para H2O2 acima de 50%, E. endophytica 91.6%, M. musae 87.8%, N. cubana 89.5% e 92.3% para F. pseudocircinatum. Este estudo demonstrou que a técnica molecular por PCR foi satisfatória para identificação dos fungos, e os extratos com inúmeros grupos químicos e potentes agentes redutores. Com isso, trabalhos futuros deverão ser realizados avaliando essas quatro espécies para uso industrial.

Abstract This study aimed to identify by molecular analysis, morphology, chemistry and antioxidant extracts of filamentous fungi isolated from the digestive tract of Phylloicus sp, an aquatic insect that lives on leaf packages in tropical streams and participates together with fungi of the decomposition of plant substrates in aquatic habitats. Insect larvae of Phylloicus sp. were collected in streams in the state of Tocantins, Brazil. Fungi were isolated from the digestive tract of larvae after disinfection and dissection, then described and purified for identification purposes and testing for antioxidant activity. Molecular identity was performed of ITS1 and ITS4, TUB e TEF sequencing. Fungal extracts were produced in 70% ethanol solution and later lyophilized. For analysis of chemical groups of extracts, thin layer chromatography (TLC) was performed in two mobile phases and different developers. Morphology was performed by optical microscopy stained with Toluidine Blue and measurement performed using the ImageJ program. Antioxidant activity performed in TLC and by quantitative method for DPPH and hydrogen peroxide (H2O2) radicals. Four fungi were identified: Endomelanconiopsis endophytica, Myxospora musae, Neopestalotiopsis cubana and Fusarium pseudocircinatum. The TLC showed several spots with acetone/chloroform mobile phase and UV 254 nm developers and I2 vapor. Fungal extracts demonstrate antioxidant action to reduce the DPPH free radical and especially for H2O2 above 50%, E. endophytica 91.6%, M. musae 87.8%, N. cubana 89.5% and 92.3% for F. pseudocircinatum. This study demonstrated that the molecular technique by PCR was satisfactory for identifying fungi, and extracts with numerous chemical groups and potent reducing agents. Thus future work, should be carried out evaluating these four species for industrial use.

Resumo Os aspectos de bioecologia e infestação de Neotuerta platensis Berg, 1882 (Lepidoptera: Noctuidae) em plantas são pouco conhecidos. Esse inseto se alimentou das folhas de beldroega comum, Portulaca oleracea L. (Portulacaceae) por dois anos consecutivos, o que desencadeou seu estudo nos cinco anos seguintes em Januária, Minas Gerais, Brasil. O objetivo deste trabalho foi estudar a bioecologia e os aspectos da infestação de N. platensis em plantas de P. oleracea em campo e laboratório. A duração média (± DP) dos estágios de ovo, larva e pupa foi de 3,6 ± 0,89, 11,5 ± 2,81 e 10,7 ± 1,97 dias, respectivamente. Os números médios de posturas e ovos por fêmea (± DP) foram de 3,8 ± 1,16 e 891,6 ± 116,83, respectivamente. A porcentagem de plantas infestadas foi de 59, 74, 0, 78 e 75% e os números médios de larvas por planta (± DP) variaram de 0,7 ± 0,45 a 1,6 ± 0,49 indivíduos, respectivamente de 2015 a 2019. Larvas de N. platensis infestaram plantas de P. oleracea em quatro dos cinco anos avaliados.

Abstract The bioecology and infestation aspects of Neotuerta platensis Berg, 1882 (Lepidoptera: Noctuidae) on plants are poorly known. This insect fed on the leaves of common purslane, Portulaca oleracea L. (Portulacaceae) for two consecutive years, which triggered its study in the following five years in Januária, Minas Gerais State, Brazil. The objective of this work was to study the bioecology and infestation aspects of N. platensis on P. oleracea plants in the field and laboratory. The mean duration (± SD) of the egg, larva and pupa stages was 3.6 ± 0.89, 11.5 ± 2.81 and 10.7 ± 1.97 days, respectively. The mean numbers of egg masses and eggs per female (± SD) were 3.8 ± 1.16 and 891.6 ± 116.83, respectively. The percentage of infested plants was 59, 74, 0, 78 and 75% and the mean numbers of larvae per plant (± SD) ranged from 0.7 ± 0.45 to 1.6 ± 0.49 individuals, respectively from 2015 to 2019. Neotuerta platensis larvae infested P. oleracea plants in four out of five years evaluated.

Resumo Nematoides entomopatogênicos (NEP) das famílias Heterorhabditidae e Steinernematidae são amplamente utilizados no controle de insetos-pragas. No Brasil, os estudos relacionados a caracterização e identificação destes entomopatógenos são recentes e escassos. Nesse sentido, o objetivo deste estudo foi isolar NEP de amostras de solos coletadas em diferentes áreas no estado do Paraná, Brasil. Um isolado Heterorhabditis (UEL 08) detectado em amostra de solo em área de pastagem cultivada com braquiária, localizada em Londrina, Paraná, Brasil (23º34´311´´S, 050º58´298´´W), utilizando o método de “inseto-isca” com lagartas de Galleria mellonella. Para a identificação foram realizados estudos de morfometria e identificação molecular a partir da amplificação da região ITS. Algumas diferenças foram encontradas em termos de morfometria em comparação com a descrição original, entretanto, os dados moleculares demonstraram que a sequência obtida para o isolado UEL 08 é idêntica à sequência de referência de H. amazonensis (DQ665222), com a qual apresentou 100% de similaridade. Os estudos das características biológicas de H. amazonensis (UEL 08) revelaram que o isolado tem dois ciclos de vida distintos, um curto (216 h) e outro longo (288 h), sendo que ocorrem duas gerações em ambos os ciclos. O isolado UEL 08 H. amazonensis foi patogénico e virulento sobre os três hospedeiros avaliados. Notadamente, as larvas de G. mellonella e Alphitobius diaperinus foram consideradas mais susceptíveis do que os adultos do percevejo Dichelops (Diacereus) melacanthus, com percentagens de mortalidade de 100%, 85% e 46% de mortalidade, respectivamente. O ensaio de produção in vivo revelou um rendimento médio diário de 3,4 × 103 juvenis infectantes/g de larva hospedeira.

Abstract Entomopathogenic nematodes (EPNs) from Heterorhabditidae and Steinernematidae families are extensively used to control insect pests. In Brazil, however, relatively few studies have identified and characterized these entomopathogens. The objective of this study was to identify and characterize an EPN isolate obtained from soil samples collected in the state of Paraná, Brazil. An isolate (UEL 08) of Heterorhabditis was detected in a soil sample collected from a pasture area cultivated with Brachiaria grass in Londrina, state of Paraná, Brazil (23°34ʹ311ʹʹS, 050°58ʹ298ʹʹW), using the insect-baiting technique with Galleria mellonella larvae as hosts. The nematode was identified through morphometric studies and molecular analyses based on amplification of the rDNA ITS region. Although we identified certain morphometric differences compared with the original description, the molecular data indicated that the ITS sequence obtained for the UEL 08 isolate is identical to the reference sequence of H. amazonensis (DQ665222) and presented 100% similarity. Thus, the findings of our morphological and molecular studies confirmed that the isolated nematode is H. amazonensis, which is the first time this species has been registered in Paraná. Study of the biological characteristics of H. amazonensis (UEL 08) revealed that the isolate has two distinct life cycles – one short (216 h) and the other long (288 h) – and produces two generations in both cycles. We observed that H. amazonensis (UEL 8) was pathogenic and virulent to the three evaluated hosts, although with different virulence against these hosts. The larvae of G. mellonella and Alphitobius diaperinus were more susceptible than adult Dichelops (Diacereus) melacanthus, with 100%, 85%, and 46% mortality, respectively. Furthermore, an in vivo production assay revealed a mean daily yield of 3.4 × 103 infective juveniles/g host larvae.

Resumo O presente estudo foi conduzido para investigar a variedade de hospedeiros, distribuição e avaliar a toxicidade de quatro inseticidas: imidaclopride, fipronil, cipermetrina e clorpirifós isoladamente e em combinação contra larva de 3º ínstar e estágio adulto da mosca-das-frutas Bactrocera diversa Coquillett, 1904 (Diptera: Tephritidae) durante 2021. Larvas de B. diversa foram encontradas se alimentando vigorosamente dentro dos hospedeiros de cucurbitáceas (abóbora, pepino, cabaça amarga, melancia, melão redondo, cabaça) coletados em diferentes localidades da divisão Poonch de Azad Jammu e Caxemira, Paquistão, e essa espécie é relatada pela primeira vez como novo registro para essa região. A suscetibilidade de B. diversa a inseticidas foi avaliada por método tópico. A mortalidade foi verificada após 3, 6, 8 e 24 horas de exposição. A cipermetrina foi mais eficaz para matar 50% do estágio larval e adulto com menos CL50 [7,2(1,040 ± 0,214), 17,4 (0,748±0,193)], respectivamente, seguido por imidaclopride. O imidaclopride matou mais efetivamente 90% da população larval e adulta com o menor valor de LC90 [73,2 (3,013 ± 0,708) 16,9 (1,886 ± 0,437)], respectivamente, após 24 horas. Cipermetrina com clorpirifós matou mais efetivamente 50% e 90% do estágio larval e adulto de B. diversa com valor mínimo de LC50 [11,3 (1,085 ± 0,245), 2,5 (0,759 ± 0,252)] e valor mínimo de LC90 [171,3 (1,085 ± 0,245), 121,9 (0,759 ± 0,252)], respectivamente, após 24 horas de exposição. A toxicidade de cada inseticida aumentou com a exposição por mais tempo e com o aumento da dose. A cipermetrina é sugerida como mais eficaz contra os estágios larval e adulto de B. diversa em combinação com clorpirifós seguido de imidaclopride.

Abstract The present study was conducted to investigate the array of hosts, distribution and to evaluate the toxicity of four insecticides: imidacloprid, fipronil, cypermethrin and chlorpyrifos alone and in combination against 3rd instar maggot and adult stage of fruit fly Bactrocera diversa Coquillett, 1904 (Diptera: Tephritidae) during 2021. B. diversa maggots were found vigorously feeding inside the cucurbit hosts (pumpkin, cucumber, bitter gourd, watermelon, round melon, bottle gourd) collected from different localities of Poonch division of Azad Jammu & Kashmir, Pakistan, and this species is reported for the first time as new record to this region. Susceptibilities of B. diversa to insecticides were evaluated using topical method. Mortality was checked after 3, 6, 8 and 24h of exposure. Cypermethrin was most effective to kill 50% of both larval and adult stage with least LC50 [7.2(1.040±0.214), 17.4(0.748±0.193)], respectively followed by imidacloprid. Imidacloprid most effectively killed 90% of both larval and adult population with least LC90 value [73.2 (3.013±0.708) 16.9 (1.886±0.437)] respectively after 24 hours. Cypermethrin with chlorpyrifos most effectively killed 50 and 90 percent of both larval and adult stage of B. diversa with least LC50 value [11.3 (1.085±0.245), 2.5 (0.759±0.252)] and least LC90 value [171.3 (1.085±0.245), 121.9 (0.759±0.252)], respectively after 24h of exposure. Toxicity of each insecticide increased with exposure for longer time and increased dose. Cypermethrin is suggested as most effective against both larval and adult stages of B. diversa in combination with chlorpyrifos followed by imidacloprid.

Resumo As respostas funcionais de larvas de Chrysoperla carnea foram avaliadas em sete diferentes densidades de ninfas de 3º instar de Aphis craccivora e Gynaikothrips ficorum, a fim de descobrir a relação entre as densidades de predadores e suas presas, e sua capacidade de controle biológico de pulgões e tripes. Os resultados revelaram que todos os instares larvais testados de Ch. carnea apresentaram resposta de tipo II em relação à presa. Além disso, os coeficientes de taxa de ataque (a) e tempo de manejo (Th) diferiram entre os vários instares de crescimento do predador e para a espécie de presa. As larvas de 3º instar de Ch. carnea manifestaram a maior taxa de ataque (1,23 e 1,22) nas ninfas de 3º instar de A. craccivora e G. ficorum, respectivamente. Além disso, a maior taxa de predação máxima (Na máx.) (50,00 e 52,63) apresentou-se em ninfas de A. craccivora e G. ficorum, respectivamente, em comparação aos demais tratamentos. Assim, é possível concluir que o Ch. carnea pode ser considerado um agente de biocontrole promissor para o manejo de A. craccivora e G. ficorum.

Abstract The functional responses of Chrysoperla carnea larvae were evaluated at different seven densities of the 3rd instar nymphs of Aphis craccivora and Gynaikothrips ficorum in order to find out the relationship between predator densities and its prey by the, and also to find out their capability for biological control of aphids and thrips. Results revealed that all tested larval instars of Ch. carnea exhibited a type II response in relation to the prey. Moreover, the coefficients of attack rate (a) and handling time (Th) was differed among various growing instars of predator and for the prey species. The 3rd instar larvae of Ch. carnea manifested the highest attacking rate (1.23 and 1.22) on the 3rd instar nymphs of A. craccivora and G. ficorum, respectively. In addition it exhibited the highest maximum predation (Na max) (50.00 and 52.63) on A. craccivora and G. ficorum nymphs, respectively as compared with the other treatments. Accordingly, Ch. carnea could be considered as a promising bio-control agent for A. craccivora and G. ficorum management.

Resumo O veneno do escorpião contém uma variedade de neurotoxinas que interagem com os canais iônicos e afetam suas atividades. O presente estudo foi desenhado para avaliar o potencial do veneno de escorpião como inibidor da acetilcolinesterase (AChE) usando o Aedes aegypti como organismo modelo. Venenos de duas espécies, Hottentota tamulus (Fabricus, 1798) e Androctonus finitimus (Pocock, 1897) foram selecionados para este estudo. Dois peptídeos (36 kDa de H. tamulus e 54 kDa de A. finitimus) foram separados do veneno de escorpião usando HPLC. Peptídeos selecionados causaram mortalidade significativamente maior em larvas e adultos de Aedes aegypti do que o controle (não foram observadas mortalidades nos grupos controle). O potencial inibitório significativo da acetilcolinesterase (AChE) de ambos os peptídeos foi registrado por espectrofotômetro. O peptídeo de A. finitimus causou mortalidade significativamente maior (95 ± 1,53% em larvas e 100% em adultos) que o peptídeo de H. tamulus (84,33 ± 2,33% em larvas e 95,37 ± 1,45% em adultos). Enquanto o peptídeo de H. tamulus foi mais eficiente na redução da atividade da AChE (0,029 ± 0,012 em larvas e 0,03 ± 0,003 em adultos) do que o peptídeo de A. finitimus (0,049 ± 0,005 em larvas e 0,047 ± 0,001 em adultos). Concluiu-se que o peptídeo do veneno de H. tamulus foi mais eficiente na redução da atividade da AChE, podendo ser um potencial bioinseticida que pode ser sintetizado em escala industrial para o controle de insetos nocivos.

Abstract Scorpion venom contains a variety of neurotoxins which interact with ion channels and affect their activities. The present study was designed to evaluate the potential of scorpion venom as acetylcholinesterase (AChE) inhibitor by using Aedes aegypti as model organism. Venoms of two species, Hottentota tamulus (Fabricus, 1798) and Androctonus finitimus (Pocock, 1897) were selected for this study. Two peptides (36 kDa from H. tamulus and 54 kDa from A. finitimus) were separated from scorpion venom by using HPLC. Selected peptides caused significantly higher mortality in larvae and adults of Aedes aegypti than control (no mortalities were observed in control groups). Significant acetylcholinesterase (AChE) inhibitory potential of both peptides was recorded by spectrophotometer. The peptide of A. finitimus caused significantly higher mortality (95±1.53% in larvae and 100% in adults) than the peptide of H. tamulus (84.33±2.33% in larvae and 95.37±1.45% in adults). While H. tamulus peptide was more efficient in reducing AChE activity (0.029±0.012 in larvae and 0.03±0.003 in adults) than the peptide of A. finitimus (0.049±0.005 in larvae and 0.047±0.001 in adults). It was concluded that H. tamulus venom peptide was more efficiently reducing AChE activity, thus it could be a potential bio-insecticide which can be synthesized at industrial scale for the control of harmful insects.

Resumo Uma das pragas mais comuns das palmeiras é o gorgulho vermelho da palmeira, Rhynchophorus ferrugineus Olivier. Cinco dietas artificiais foram avaliadas para criar RPW e facilitar seus estudos comportamentais e biológicos. O desenvolvimento de R. ferruginus foi estudado nas dietas artificiais testadas baseadas principalmente em pedaços de caule de cana-de-açúcar (1ª dieta; controle), abóbora-doce (2ª dieta), cana-de-açúcar + abóbora-doce (3ª dieta), batata-doce (4ª dieta) e cana-de-açúcar moída + batata-doce (5ª dieta) em sala de criação (28 ± 1 °C e 75 ± 5 UR%) na Faculdade de Agricultura do distrito de Benha. Os aspectos biológicos, pré-oviposição, oviposição, durações de larvas e pupas, a longevidade de machos e fêmeas adultos e o período de geração de R. ferrugineus foram todos estimados. Além disso, o impacto dessas dietas artificiais nas quantidades de proteínas totais, carboidratos e lipídios foi determinado nas larvas adultas. Os resultados obtidos mostraram que o inseto manifestou os menores períodos larval e pupal e a maior longevidade para machos e fêmeas quando a criação de R. ferruginus ocorreu em uma dieta artificial à base de batata-doce como uma forma bem-sucedida e econômica para a criação massal do gorgulho vermelho da palmeira em condições de laboratório. Larvas alimentadas com a dieta 4 (batata-doce) foram as que apresentaram a menor duração (114,80 dias), enquanto a 1ª dieta (pedaços de caule de cana-de-açúcar) foi a que apresentou o maior período (125,00 ± dias). Da mesma forma para a pupação e longevidade de machos e fêmeas, os períodos mais curtos resultaram da alimentação das larvas na 4ª dieta (14,65, 49,40 e 48,0 dias, respectivamente). Ao contrário, o período pupal mais longo foi relatado com a 5ª dieta (15,70 dias). A maior porcentagem de eclodibilidade dos ovos (96,53%) resultou da criação de larvas de R. ferruginus na 4ª dieta. As análises químicas das larvas adultas indicaram que os maiores teores de carboidratos totais (45,57 µg/g), lipídios (28,46 µg/g) e proteínas (20,01µg/g) foram obtidos no caso de larvas criadas na 1ª e 4ª dietas, respectivamente. Consequentemente, o desenvolvimento dos estádios de R. ferruginus foi ligeiramente menor tanto na 1ª quanto na 4ª dieta artificial. Assim, ambas foram dietas artificiais bem-sucedida e econômica para o desenvolvimento de RPW em condições de laboratório. Portanto, este estudo adicionou ingredientes alternativos valiosos para preparar substrato alimentar mais prático e econômico para a criação do gorgulho para auxiliar na proposta de seu manejo e conservação em plantações de palmeiras.

Abstract One of the most common palm pests is the red palm weevil, Rhynchophorus ferrugineus Olivier. Five artificial diets were evaluated to rear RPW, and to facilitate its behavioral and biological studies. The developmental of R. ferruginus was studied on the tested artificial diets based on primarily composed of sugarcane stem pieces (1st diet; control), sweet pumpkin (2nd diet), ground sugarcane + sweet pumpkin (3rd diet), sweet potato (4th diet) and ground sugarcane + sweet potato (5th diet) under rearing room (28 ± 1 °C and 75 ± 5 RH%) at Faculty of Agriculture in Benha district. The biological aspects, pre-oviposition, oviposition, larval & pupal durations, the longevity of male and female adults and the generation period of R. ferrugineus have all been estimated. Moreover, the impact of these artificial diets on the quantities of total proteins, carbohydrates and lipids were determined in the full-grown larvae. Obtained results showed that the insect manifested the shortest larval and pupal periods and the longest longevity for males and females when rearing of R. ferruginus took place on an artificial diet based on sweet potato as a successful and economical for mass rearing of the red palm weevil under laboratory conditions. Larvae fed on diet 4 (sweet potato) was exhibited the shortest duration (114.80 days), while 1st diet (Sugarcane stem pieces) was recorded the longest period (125.00 ± days). Similarly for pupation and both male and female longevity, the shortest periods resulted from larvae feeding on 4th diet (14.65, 49.40 and 48.0 days, respectively). Contrariwise, the longest pupal period was reported with 5th diet (15.70 days). The highest of eggs hatchability % (96.53%) resulted from the rearing nof R. ferruginus larvae on the 4th diet. Chemical analyses of the full-grown larva were indicated that the highest contents of total carbohydrates (45.57 µg/g), lipids (28.46 µg/g) and proteins (20.01µg/g) were obtained in case of larvae reared on 1st and 4th diets, respectively. Consequently, the development of R. ferruginus stages was slightly lower on both 1st and 4th artificial diets. So that, both of them were a successful and economic artificial diet for RPW development under laboratory conditions. Therefore, this study added valuable alternative ingredients to prepare more practical and economical feeding substrate for weevil rearing to help for proposal of its management and conservation in palm plantations.

Abstract Aim This study aimed to evaluate the spatial and temporal distribution of ichthyoplankton in the Peri Lagoon, a coastal freshwater lagoon in Brazil. Methods Ichthyoplankton samples were collected every two months from June 2008 to April 2010 with 500 µm conical-cylindrical planktonic nets at five sampling stations. Results In total, 181 fish eggs and 1,315 larvae, representing estuarine and freshwater species, were captured. The most representative species were Awaous tajasica, Ctenogobius sp1, and Platanichthys platana. Significant differences were found in temporal egg distribution and larval spatiotemporal distribution (Kruskal-Wallis test, p < 0.05). Eggs were predominantly captured during the autumn, winter, and spring Neotropical seasons. Geospatial analysis demonstrated spatial segregation in the distribution of larval assemblages, with higher abundances in areas adjacent to riparian forests, following stream mouths, and deeper areas with rocky substrates. Conclusions Proximity to streams and areas surrounded by dense forests is crucial for the spawning and development of fish species in the Peri Lagoon. The findings of this study provide valuable insights into the conservation of the ichthyofauna in this unique environment.

Resumo Objetivo Este estudo teve como objetivo avaliar a distribuição espacial e temporal do ictioplâncton na lagoa do Peri, uma lagoa costeira de água doce no Brasil. Método s: O ictioplâncton foi coletado bimestralmente de junho de 2008 a abril de 2010 com redes cônico-cilíndricas planctônicas de 500 µm em cinco estações de amostragem. Resultados Neste estudo, foram capturados 181 ovos e 1.316 larvas de peixes de espécies estuarinas e de água doce. As espécies mais representativas foram Awaous tajasica, Ctenogobius sp1 e Platanichthys platana. O teste de Kruskal-Wallis (H) indicou que existem diferenças significativas na distribuição temporal dos ovos e na distribuição espaço-temporal das larvas (p<0,05). Em geral, os ovos foram capturados durante as estações de outono, inverno e primavera na Região Neotropical. A relevância do fator geoespacial mostrou segregação espacial na assembleia de larvas. As larvas foram capturadas em ambientes cercados por mata ciliar, próximo à foz de córregos, em áreas mais profundas com fundo rochoso. Conclusões Regiões próximas a córregos e cercadas por florestas densas parecem ser essenciais para a desova e desenvolvimento de espécies de peixes na lagoa do Peri. Este estudo pode orientar importantes diretrizes ambientais para a preservação da ictiofauna desse ambiente intocado e particular.

Abstract The present study is the first to investigate the chemical composition, antimicrobial and larvicidal activities of the essential oils from the leaves of Syzygium attopeuense (Gagnep.) Merr. & L.M.Perry and Syzygium tonkinense (Gagnep.) Merr. & L.M.Perry collected in Vietnam. The essential oils were extracted by hydrodistillation and analyzed by GC and GC–MS. The study indicated the presence of a high percentage of sesquiterpenes in both investigated essential oils. The major components of S. attopeuense essential oil were bicyclogermacrene (24.26%), (E)-caryophyllene (11.72%), and (E)-β-ocimene (6.75%), whereas S. tonkinense essential oil was dominated by (E)-caryophyllene (80.80%). The antimicrobial activity of essential oils was evaluated by broth microdilution assay to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) and median inhibitory concentration (IC50). Both essential oils exhibited remarkable inhibitory activity against all tested Gram-positive bacteria and yeast than Gram-negative bacteria. Among them, essential oils of S. attopeuense and S. tonkinense possessed the strongest activity against Enterococcus faecalis (MIC = 4.00 μg/mL; IC50 = 1.69 μg/mL) and Candida albicans (MIC = 16.00 μg/mL; IC50 = 8.67 μg/mL), respectively. Furthermore, the larvicidal activity of essential oils was tested using fourth-instar larvae of Aedes aegypti. Results from the larvicidal test revealed that both essential oils had an excellent inhibitory effect against A. aegypti larvae with LC50 values from 25.55 to 30.18 μg/mL and LC90 values from 33.00 to 39.01 μg/mL. Our findings demonstrate that the essential oil extracted from S. attopeuense and S. tonkinense are potential sources of natural antimicrobials and can act as inexpensive mosquito larvicidal agents.

Resumo O presente estudo é o primeiro a investigar a composição química, as atividades antimicrobiana e larvicida dos óleos essenciais das folhas de Syzygium attopeuense (Gagnep.) Merr. & L.M.Perry e Syzygium tonkinense (Gagnep.) Merr. & L.M.Perry coletadas no Vietnã. Os óleos essenciais foram extraídos por hidrodestilação e analisados por GC e GC–MS. O estudo indicou a presença de alta porcentagem de sesquiterpenos em ambos os óleos essenciais investigados. Os principais componentes do óleo essencial de S. attopeuense foram biciclogermacreno (24,26%), (E)-cariofileno (11,72%) e (E)-β-ocimeno (6,75%), enquanto o óleo essencial de S. tonkinense foi dominado por (E)-cariofileno (80,80%). A atividade antimicrobiana dos óleos essenciais foi avaliada pelo ensaio de microdiluição em caldo para determinar a concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração inibitória mediana (IC50). Ambos os óleos essenciais exibiram notável atividade inibitória contra todas as bactérias Gram-positivas e leveduras testadas do que bactérias Gram-negativas. Entre eles, os óleos essenciais de S. attopeuense e S. tonkinense possuíam a atividade mais forte contra Enterococcus faecalis (CIM = 4,00 μg/mL; IC50 = 1,69 μg/mL) e Candida albicans (CIM = 16,00 μg/ml; IC50 = 8,67 μg/ml), respectivamente. Além disso, a atividade larvicida de óleos essenciais foi testada usando larvas de quarto instar de Aedes aegypti. Os resultados do teste larvicida revelaram que ambos os óleos essenciais tiveram um excelente efeito inibitório contra larvas de A. aegypti com valores de CL50 de 25,55 a 30,18 μg/ml e valores de CL90 de 33,00 a 39,01 μg/ml. Nossos achados demonstram que o óleo essencial extraído de S. attopeuense e S. tonkinense são fontes potenciais de antimicrobianos naturais e podem atuar como agentes larvicidas baratos para mosquitos.

Abstract Silver nanoparticles are opted to have various applications in different fields ranging from traditional medicines to culinary items. It is toxic and most effective against bacteria, fungi viruses, parasites, parasite carrying vectors such as mosquitoes and their larvae and other eukaryotic microorganisms at low concentration without any side effects and toxicity to humans. In view of these data, the present research has been investigated by synthesizing silver nanoparticles using 1mM silver nitrate and aqueous extract of Passiflora foetida. The variation of nanoparticles in size and shape concerning the concentration of extract prepared were analysed. The formation of silver nanoparticles was confirmed by colour changing from yellowish green to reddish-brown implicating the surface plasmon resonance. Further, it was concluded by obtaining an absorbance peak at 420 nm using UV-Visible spectrophotometer analysis. FTIR analysis was used to identify the capping ligands, which included alkanes, aromatic groups and nitro compounds. The average grain size of ~12 nm to 14 nm with crystalline phase was revealed by X-ray Diffraction studies. The SEM images depicted the surface morphology with agglomeration; TEM studies showed the shape of nanoparticles as spherical and hexagonal with sizes ranging from 40 nm to 100 nm and EDAX analysis confirmed the presence of elemental silver as the principal constituent. The characterized silver nanoparticles were then tested for synergistic antibacterial effects with tetracycline, and the results show that they are more active against E. coli and S. aureus, but moderately effective against B. cereus and K. pneumoniae . It also had a strong larval and pupal toxic effects on the dengue vector, Aedes aegypti with the highest mortality. As a result, silver nanoparticles could be a viable alternative for a variety of applications.

Resumo Os nanopartículos de prata são optados por ter várias aplicações em diferentes áreas que variam de medicamentos tradicionais a itens culinários. É tóxico e mais eficaz contra bactérias, vírus de fungos, parasitas, parasitas que transportam vetores como mosquitos e suas larvas e outros microorganismos eucarióticos em baixa concentração, sem efeitos colaterais e toxicidade para os seres humanos. Em vista desses dados, a presente pesquisa foi investigada sintetizando nanopartículas de prata usando nitrato de prata de 1 mm e extrato aquoso de Passiflora foetida. Foi analisada a variação de nanopartículas em tamanho e forma relativa à concentração de extrato preparado. A formação de nanopartículas de prata foi confirmada pela mudança de cor de verde amarelado para marrom-avermelhado, implicando a ressonância plasmônica da superfície. Além disso, foi concluído pela obtenção de um pico de absorvância a 420 nm usando análise do espectrofotômetro visível por UV. A análise do FTIR foi usada para identificar os ligantes de captura, que incluíam alcanes, grupos aromáticos e compostos nitro. O tamanho médio dos grãos de ~ 12 nm a 14 nm com fase cristalina foi revelado por estudos de difração de raios-X. As imagens SEM retratavam a morfologia da superfície com aglomeração; Os estudos de TEM mostraram a forma das nanopartículas como esféricas e hexagonais, com tamanhos variando de 40 nm a 100 nm e a análise EDAX confirmou a presença de prata elementar como constituinte principal. As nanopartículas de prata caracterizadas foram então testadas quanto a efeitos antibacterianos sinérgicos com tetraciclina, e os resultados mostram que são mais ativos contra E. coli e S. aureus, mas moderadamente eficazes contra B. cereus e K. pneumoniae. Ele também teve um forte efeito tóxico larval e pupal no vetor de dengue, Aedes aegypti com a maior mortalidade. Como resultado, as nanopartículas de prata podem ser uma alternativa viável para uma variedade de aplicações.

Abstract The ixodicidal activity of the methanolic extracts of Artemisia ludoviciana (Astereceae), Cordia boissieri (Boraginaceae) and Litchi chinensis (Sapindaceae) against two field populations of Rhipicephalus (Boophilus) microplus from the state of Nuevo Leon (NL) and Veracruz (VER) was evaluated. The extract of L. chinensis in the concentration of 150 mg/ml showed efficacies of 100% and 99% against engorged females and mortalities of 98% and 99% against larvae. C. boissieri in the same concentration showed efficacies of 71% and 37% against engorged adults and mortalities of 33.04% and 10.33% against larvae and A. ludoviciana had efficacies of 94% and 83% in adults and mortalities of 89.39% and 89.21% against larvae in both populations respectively. The enzymatic activity of Acetylcholinesterase (AChE), Carboxylesterase (CaE), Glutathione-S-Transferase (GST) and Alkaline Phosphatase (ALP) was measured in both populations of ticks. As a result, a significant difference between both populations was shown, being the VER population the one that exhibited a higher enzymatic activity (p ≤ 0.05). It can be concluded that the methanolic extract of the seed of L. chinensis shows potential ixodicidal activity and can be used as an alternative source of tick control, however, prior characterization, toxicity and formulation studies are necessary.

Resumo No presente trabalho, a atividade ixodicida de extratos metanólicos de Artemisia ludoviciana (Astereceae), Cordia boissieri (Boraginaceae) e Litchi chinensis (Sapindaceae) contra Rhipicephalus (Boophilus) microplus foi avaliada em duas populações de campo nos estados de Nuevo León (NL) y Veracruz (VER). O extrato de L. chinensis na concentração de 150 mg/ml, apresentou eficácia de 100% e 99% contra fêmeas ingurgitadas, e taxas de mortalidade de 98% e 99% contra larvas. C. boissieri, na mesma concentração, apresentou eficácia de 71% e 37% contra adultas ingurgitados, e taxas de mortalidade de 33,04% e 10,33% contra larvas e A. ludoviciana apresentou eficácias de 94% e 83% em adultos e mortalidade de 89,39% e 89,21% contra larvas em ambas as populações respectivamente. Por outro lado, a atividade enzimática da Acetilcolinesterase (AChE), Carboxilesterase (CaE), Glutationa-S-Transferase (GST) e Fosfatase Alcalina (ALP) foi medida em ambas as populações de carrapatos. Como resultado, foi apresentada uma diferença significativa entre as populações, sendo a população VER a que apresentou maior atividade enzimática (p ≤ 0,05). Assim, pode-se concluir que o extrato metanólico da semente de L. chinensis apresenta potencial atividade ixodicida e pode ser utilizado como fonte alternativa de controle de carrapatos, porém estudos prévios de caracterização, toxicidade e formulação são necessários.

Abstract Phytophagous mites are dangerous pests, causing economic losses to the world’s crops. Nanotechnology is a promising field for pests and disease management, and enhancement of agricultural productivity. The aim of the study was to evaluation of the effectiveness of copper nanoparticles (CuNP) against all stages of eriophyid mite, the citrus rust mite, Phyllocoptruta oleivora (Ashmead) (Acari: Eriophyidae) and tetranychid mite, the citrus brown mite Eutetranychus orientalis (Klein) (Acari: Tetranychidae), and Tenuipalpid mite, the false spider mite, Brevipalpus obovatus Donnadieu (Acari: Tenuipalpidae). This includes its impacts on predacious mites, Amblyseius swirskii Athias-Henriot and Euseius scutalis (Athias-Henriot) (Acari: Phytoseiidae), on orange trees under field conditions. Five different concentrations of copper nanoparticles (40, 80, 160, 240, and 320 ppm), as well as the control (well water) were examined. The obtained results indicated that the mortality rate of both phytophagous and predacious mites was associated with an increase in the concentrations of copper nanoparticles. Copper nanoparticles were significantly effective in killing P. oleivora, E. orientalis and B. obovatus with minimal effects on A. swirskii and E. scutalis. The mortality percentage was 15.24, 20.32, 46.32, 78.97 and 86.37% for P. oleivora, 6.87, 9.86, 28.91, 56.30 and 77.52% for E. orientalis and 8.38, 23.50, 48.83, 68.80 and 84.08% for B. obovatus while the mortality percentage was 0.00, 0.56, 5.83, 9.91 and 15.19% for A. swirskii and 0.44, 3.96, 6.93, 8.63 and 21.39% for E. scutalis one week after exposure to 40, 80, 160, 240 and 320 ppm of copper nanoparticles, respectively. Moreover, the results showed that copper nanoparticles caused a reduction in the percentage of eggs hatching. The percentages of larvae hatching from eggs were 96.29, 80.00, 64.13, 45.66 and 32.17% for P. oleivora, 97.38, 83.28, 69.41, 48.01 and 35.29 for E. orientalis and 96.60, 76.92, 56.38, 40.55 and 33.28% for B. obovatus one week after exposure to copper nanoparticles at 40, 80, 160, 240 and 320 ppm respectively, compared with the control (well water). According to the results, the use of copper nanoparticles significant effect on reducing the population of phytophagous mites associated with orange trees, with low detrimental effects on predatory mites.

Resumo Os ácaros fitófagos são pragas perigosas, causando prejuízos econômicos às lavouras mundiais. A nanotecnologia é um campo promissor para o manejo de pragas e doenças, aumentando a produtividade agrícola. O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficácia de nanopartículas de cobre (CuNP) em laranjeiras em condições de campo, contra todos os estágios das seguintes espécies: o ácaro eriofídeo, também chamado de ácaro da falsa ferrugem dos citros, ou Phyllocoptruta oleivora (Ashmead) (Acari: Eriophyidae); o ácaro tetraniquídeo, também chamado de ácaro marrom dos citros, ou Eutetranychus orientalis (Klein) (Acari: Tetranychidae); e o ácaro Tenuipalpidae, também chamado de falso ácaro, ou Brevipalpus obovatus (Donnadieu) (Acari: Tenuipalpidae). Isso inclui seus impactos sobre ácaros predadores, como o Amblyseius swirskii Athias-Henriot e o Euseius scutalis (Athias-Henriot) (Acari: Phytoseiidae). Foram examinadas cinco diferentes concentrações de nanopartículas de cobre (40, 80, 160, 240 e 320 ppm), assim como o controle (água de poço). Os resultados obtidos indicaram que a taxa de mortalidade de ácaros fitófagos e predadores esteve associada ao aumento das concentrações de nanopartículas de cobre. As nanopartículas de cobre foram significativamente eficazes em matar o P. oleivora, o E. orientalis e o B. obovatus, com efeitos mínimos sobre o A. swirskii e o E. scutalis. As porcentagens de mortalidade foram: 15,24, 20,32, 46,32, 78,97 e 86,37% para P. oleivora; 6,87, 9,86, 28,91, 56,30 e 77,52% para E. orientalis; 8,38, 23,50, 48,83, 68,80 e 84,08% para B. obovatus; 0,00, 0,56, 5,83, 9,91 e 15,19% para A. swirskii; e 0,44, 3,96, 6,93, 8,63 e 21,39% para E. scutalis, uma semana após a exposição a 40, 80, 160, 240 e 320 ppm de nanopartículas de cobre, respectivamente. Além disso, os resultados mostraram que as nanopartículas de cobre causaram uma redução na porcentagem de eclosão dos ovos. As porcentagens de larvas eclodindo dos ovos foram: 96,29, 80,00, 64,13, 45,66 e 32,17% para P. oleivora; 97,38, 83,28, 69,41, 48,01 e 35,29 para E. orientalis; e 96,60, 76,92, 56,38, 40,58 e 33,29 para B. obovatus, uma semana após a exposição às nanopartículas de cobre a 40, 80, 160, 240 e 320 ppm, respectivamente, em comparação com o controle (água de poço). De acordo com os resultados, o uso de nanopartículas de cobre teve efeito significativo na redução da população de ácaros fitófagos associados às laranjeiras, com baixo efeito prejudicial aos ácaros predadores.