Resumo As bactérias foram isoladas de amostras de suco de maçã fresco de lojas de três diferentes localidades de Lahore. A análise de amostras dos mercados Liberty, Anarkali e Yateem khana mostram diferentes níveis de contaminação. Havia bactérias patogênicas e não patogênicas em todas as amostras e foram identificadas pelos testes morfológicos e bioquímicos. A maioria dos plasmídeos de bactérias patogênicas tinha 4 kb em seu tamanho molecular. A ribotipagem do sequenciamento do gene do RNA ribossômico 16S foi realizada para confirmar a cepa de Helicobacter pylori e Gluconobacter oxydans. A maior sensibilidade de 210 mm foi mostrada por Enterobacter sp. contra disco de azteromisina (15µg) enquanto Micrococcus sp. foi altamente resistente a todos os antibióticos aplicados. A resistência a antibióticos de bactérias patogênicas também foi verificada contra extratos de plantas de Ricinus communis, todos os patógenos bacterianos isolados foram resistentes, mas apenas E. coli foi inibida em 300µl dos extratos. A presença de bactérias patogênicas nas amostras de suco de maçã deveu-se à contaminação da água de esgoto na água potável, enquanto algumas dessas bactérias patogênicas vieram da árvore da maçã e outras de armazéns de frutas.

Abstract Bacteria were isolated from samples of Fresh Apple juices from shops of three different localities of Lahore. Analysis of samples from Liberty, Anarkali and Yateem khana Markets show different levels of contamination. There were pathogenic and non-pathogenic bacteria in all samples and were identified by the morphological and biochemical tests. Most of the plasmids of pathogenic bacteria were 4kb in their molecular size. Ribotyping of 16S ribosomal RNA gene sequencing was done to confirm Helicobacter pylori strain and Gluconobacter oxydans. The highest sensitivity of 210mm was shown by Enterobacter sp. against Aztheromysine disk (15µg) while Micrococcus sp. was highly resistant against all of the Antibiotics applied. The antibiotic resistance of pathogenic bacteria was also checked against Ricinus communis plant's extracts, all isolated bacterial pathogens were resistant but only, E.coli was inhibited at 300µl of the extracts. Presence of pathogenic bacteria in Apple juice samples was due to contamination of sewage water in drinking water while some of these pathogenic bacteria came from Apple's tree and other from store houses of fruits.

Resumo O presente estudo envolve a análise química e bacteriológica de água de diferentes fontes, ou seja, furo, poços, garrafa e torneira, dos distritos de Peshawar, Mardan, Swat e Kohat da província de Khyber Pakhtunkhwa (KP), Paquistão. De cada distrito, 50 amostras de água (10 amostras de cada fonte), independentemente do status urbano e rural, foram coletadas dessas fontes e analisadas para sulfatos, nitratos, nitritos, cloretos, sólidos solúveis totais e coliformes (E. coli). Os resultados indicaram que a maioria das fontes de água tinha uma contagem inaceitável de E. coli, ou seja, > 34 UFC / 100 mL. As amostras positivas para E. coli foram elevadas no distrito de Mardan, seguido por Kohat, Swat e distrito de Peshawar. Além disso, algumas fontes de água também foram contaminadas quimicamente por diferentes fertilizantes inorgânicos (nitratos/nitritos de sódio, potássio), mas em níveis seguros, enquanto os resíduos agrícolas e industriais (compostos de cloreto e sulfato) estavam em níveis inseguros. Entre todos os distritos, a qualidade da água foi considerada comparativamente mais deteriorada nos distritos de Kohat e Mardan do que nos distritos de Peshawar e Swat. Essas fontes de água química e bacteriologicamente impróprias para beber podem causar problemas à saúde humana.

Abstract The present study involves the chemical and bacteriological analysis of water from different sources i.e., bore, wells, bottle, and tap, from Peshawar, Mardan, Swat and Kohat districts of Khyber Pakhtunkhwa (KP) province, Pakistan. From each district, 50 water samples (10 samples from each source), regardless of urban and rural status, were collected from these sources and analysed for sulphates, nitrates, nitrites, chlorides, total soluble solids and coliforms (E. coli). Results indicated that majority of the water sources had unacceptable E. coli count i.e.> 34 CFU/100mL. E. coli positive samples were high in Mardan District, followed by Kohat, Swat and Peshawar district. Besides this, the some water sources were also chemically contaminated by different inorganic fertilizers (nitrates/nitrites of sodium, potassium) but under safe levels whereas agricultural and industrial wastes (chloride and sulphate compounds) were in unsafe range. Among all districts, the water quality was found comparatively more deteriorated in Kohat and Mardan districts than Peshawar and Swat districts. Such chemically and bacteriologically unfit water sources for drinking and can cause human health problems.

Resumo Os antioxidantes são materiais que eliminam ou removem os radicais livres dos sistemas vivos. O processo de oxidação termina na produção de radicais livres. Esses radicais livres são o principal local de nascimento das células cancerosas. Os agentes antioxidantes removem os intermediários dos radicais livres ao encerrar os processos de oxidação ao serem eles próprios oxidados. Por outro lado, as doenças infecciosas afetam o mundo em grande escala. Para combater essas doenças, diversos compostos sintéticos têm sido utilizados. Os medicamentos à base de plantas desempenham um papel importante a este respeito. Assim, o objetivo da pesquisa atual é investigar o efeito antibacteriano e antioxidante do extrato da casca da raiz de Berberis lycium Royle (BLR). Berberis lycium Royle foi utilizado para análises fitoquímicas e também como agentes antimicrobianos e antioxidantes. A atividade antimicrobiana foi avaliada pelo método de difusão em ágar em poço. A partir do estudo atual, observou-se que o BLR era rico em fitoquímicos e tóxico contra bactérias patogênicas testadas. BLR apresentou maior atividade contra S. pyogenes (13,3 ± 0,8 mm). A menor atividade antibacteriana foi relatada contra E. coli (0 ± 0 mm). No caso de concentração inibitória mínima, observou-se que BLR com concentração de 10 μg / mL apresentou maior atividade, enquanto BLR 2,5 μg / mL apresentou menor atividade inibitória. A maior atividade antioxidante in vitro foi registrada como 65% a 100 µg / mL. No caso do nível de atividade antioxidante in vivo de CAT, GSH e SOD diminuiu, enquanto o de MDA aumentou nos grupos tratados com CCl4 em comparação com o grupo controle. O tratamento com extrato de BLR reverteu todas essas mudanças significativamente. Os resultados atuais indicam que o BLR é eficaz contra patógenos bacterianos e também tem atividade antioxidante.

Abstract Antioxidants are materials that scavenge or remove free radicals from living systems. The oxidation process ends in the production of free radicals. These free radicals are the chief birthplace of cancerous cells. Antioxidizing agents remove free radical intermediates by terminating oxidation processes by being oxidized themselves. On the other hand, infectious diseases affect the world on a large scale. To fight these diseases several synthetic compounds have been used. Plant based medications play important role in this regard. So, the current research aimed to investigate the antibacterial and antioxidant effect of Berberis lycium Royle root bark (BLR) extract. Berberis lycium Royle was used for phytochemical analysis and also as antimicrobial and antioxidant agents. The antimicrobial activity was evaluated by the agar well diffusion method. Current study revealed that BLR was rich in phytochemicals and toxic against tested pathogenic bacteria. BLR showed the highest activity against S. pyogenes (13.3±0.8 mm). The lowest antibacterial activity was reported against E. coli (0±0 mm). In case of minimum inhibitory concentration, it was observed that BLR with 10 μg/mL concentration showed the highest activity while 2.5 μg/mL of BLR showed the least inhibitory activity. The highest In vitro antioxidant activity was recorded as 65% at 100 µg/mL. In case of in vivo antioxidant activity level of CAT, GSH and SOD were decreased while that of MDA was enhanced in groups treated with CCl4 as compared to the control group. BLR extract treatment reversed all these changes significantly. Current results indicate that BLR is effective against bacterial pathogens and also has antioxidant potential.

Resumo O fruto-oligossacarídeo (FOS) é amplamente utilizado em muitos alimentos e indústrias farmacêuticas, e é produzido por meio de diferentes maneiras, como extraí-lo de plantas ou produzi-lo usando enzimas de plantas e microrganismos. Em um estudo anterior, extraímos a enzima frutosiltransferase (Ftase) do resíduo de abacaxi e produzimos FOS. Neste estudo, medimos a atividade antagônica de dois simbióticos: o primeiro simbiótico contendo Lactobacillus acidophilus e o FOS produzido, e o segundo simbiótico contendo Lactobacillus acidophilus e o FOS padrão, contra bactérias patogênicas (P. aeruginosa, E. coli, S. aureus e B. cereus). Os resultados mostraram que a atividade antagônica de ambos os tipos simbióticos foi muito próxima, pois não houve diferenças significativas entre eles, exceto na atividade antagônica contra S. aureus, em que houve uma diferença significativa entre o simbiótico contendo o FOS padrão, que foi o mais alto em sua atividade antagônica, em comparação com o simbiótico contendo o FOS produzido neste estudo. A atividade do fruto-oligossacarídeo (FOS) extraído do resíduo de abacaxi ficou evidente no aumento da atividade da bactéria probiótica (L. acidophilus), que teve papel importante na produção de ácidos e compostos inibidores das bactérias patogênicas. Os diâmetros das áreas de inibição no estudo atual variaram entre 19,33 e 28 mm, e E. coli foi mais suscetível à inibição, seguida por S. aureus, P. aeruginosa e B. cereus, respectivamente.

Abstract Fructooligosaccharide is used widely in many foods and pharmaceutical industries and produced by using different ways such as extracting it from plants or producing it by using plants and microorganisms’ enzymes. In a previous study, we extracted Fructosyltransferase (Ftase) enzyme from pineapple residue and produced FOS. In this study, we measured the antagonistic activity of two synbiotics, the first synbiotic containing Lactobacillus acidophilus and the produced FOS, the second synbiotic containing Lactobacillus acidophilus and standard FOS, against pathogenic bacteria (P. aeruginosa, E. coli, S. aureus and B cereus). The results showed that the antagonistic activity of both synbiotic types was very close, as there were no significant differences between them except in the antagonistic activity against S. aureus, there was a significant difference between the synbiotic containing the standard FOS, which was the highest in its antagonistic activity compared to the synbiotic containing the produced FOS in this study. The activity of the fructooligosaccharide (FOS) extracted from pineapple residue was evident in enhancing the activity of the probiotic bacteria (L. acidophilus), which had a major role in the production of acids and compounds that inhibited the pathogenic bacteria. The diameters of inhibition areas in the current study ranged between 19.33-28 mm, and E. coli was more susceptible to inhibition, followed by S. aureus, P. aeruginosa, and B. cereus, respectively.

Resumo Nanopartículas de óxido de zinco foram sintetizadas a partir do extrato foliar de Brassica oleracea L., grupo Acephala (couve), seguidas de sua caracterização em Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV) e Raio X por Energia Dispersiva (EDX). As propriedades antibacterianas das nanopartículas de zinco foram testadas em bactérias Gram-negativas, Pseudomonas aeruginosa (ATCC® 9027™), Escherichia coli (ATCC® 8739™) e Klebsiella pneumoniae (ATCC® BAA-1705™), e bactérias Gram-positivas, Staphylococcus aureus (ATCC® 6538™) e Listeria monocytogenes (ATCC® 13932™), em quatro concentrações diferentes (50,00 µg / ml; 100,00 µg / ml; 500,00 µg / ml; e 1 mg / ml) de suspensão de nanopartículas de óxido de zinco. Os resultados revelaram que as nanopartículas sintetizadas exibem fortes efeitos antibacterianos contra P. aeruginosa, L. monocytogenes, K. pneumonia, S. aureus e E. coli em concentrações de 500,00 µg / ml-1 mg / ml. Um aumento na eficácia das nanopartículas com a diminuição de seu tamanho também foi evidente. Este é o primeiro relatório sobre nanopartículas à base de B. oleracea L. que demonstra que 500,00 µg-1 mg / ml de concentração de nanopartículas de óxido de zinco têm atividade antibacteriana contra bactérias Gram-negativas e Gram-positivas e que essas nanopartículas têm potencial para ser consideradas um agente antibacteriano no futuro.

Abstract Zinc oxide nanoparticles were synthesized from the leaf extract of Brassica oleracea L. Acephala group (collard green) followed by their characterization using Scanning Electron Microscope (SEM), and Energy Dispersive X-ray (EDX). The antibacterial properties of zinc nanoparticles were tested against Gram-negative bacteria, Pseudomonas aeruginosa (ATCC ® 9027™), Escherichia coli (ATCC ® 8739™), Klebsiella pneumoniae (ATCC® BAA-1705™) and Gram-positive bacteria, Staphylococcus aureus (ATCC ® 6538™) and Listeria monocytogenes (ATCC ® 13932™), at four different concentrations (50.00 µg/ml, 100.00 µg/ml, 500.00 µg/ml and 1 mg/ml) of zinc oxide nanoparticles suspension. Results revealed that the synthesized nanoparticles exhibit strong antibacterial effects against Pseudomonas aeruginosa, Listeria monocytogenes, Klebsiella pneumonia, Staphylococcus aureus and Escherichia coli at 500.00 µg/ml-1 mg/ml concentrations. An increase in efficacy of nanoparticles with the decrease of their size was also evident. This is a first ever report on Brassica oleracea, L. based nanoparticles which demonstrates that 500.00 µg-1 mg/ml conc. of zinc oxide nanoparticles have antibacterial activity against both Gram -ve and Gram +ve bacteria and have the potential to be considered as an antibacterial agent in future.

Resumo O estudo teve como objetivo analisar os efeitos dos antibióticos promotores de crescimento (AGPs), di-hidrato de oxitetraciclina e fosfato de tilosina na microflora intestinal de frangos de corte. Os AGPs foram fornecidos em diferentes concentrações isoladamente ou em combinações por 42 dias de criação. Amostras fecais foram coletadas do intestino (duodeno, jejuno e ceco) de frangos de corte no 14º, 28º e 42º dias de ensaio. As amostras foram cultivadas em diferentes meios seletivos e a identificação bacteriana foi realizada por diferentes ferramentas de diagnóstico bioquímico e molecular. Os resultados mostraram um efeito significativo dos AGPs no crescimento de microrganismos patogênicos como Escherichia coli e Clostridium perfringens no intestino. Curiosamente, um crescimento prejudicado foi observado para ambas as bactérias, mostrando um efeito significativo (P <0,05) de AGPs em E. coli e C. perfringens nos dias 14, 28 e 42. Este efeito foi observado apenas e em combinação com o uso de AGPs. Os dados mostraram ainda que o efeito foi mais proeminente em combinação e com um aumento da concentração de AGPs. Nenhum comprometimento foi observado no crescimento de L. reuteri em diferentes locais do intestino e duração (14º, 28º e 42º dias). Os resultados mostraram que o uso de AGPs na dieta não tem efeito nocivo nas bactérias benéficas, no entanto, foi observado um crescimento prejudicado nas bactérias nocivas. Sugere-se que uma combinação de AGPs (OXY-1.0+TP-0.5) seja econômica e não tenha efeito prejudicial sobre o frango de corte. O uso de AGPs em uma dose recomendada e por um período de tempo específico é seguro para uso em aves tanto como promotor de crescimento quanto para prevenção de doenças.

Abstract The study was aimed to analyse the effects of antibiotic growth promoters (AGPs), Oxytetracycline di-hydrate and Tylosin phosphate on the intestinal microflora in broiler chicken. The AGPs were provided in different concentrations solely or in combinations for 42 days of rearing. Faecal samples were collected from the intestine (duodenum, jejunum and caeca) of broiler chicken on 14th, 28th and 42nd days of trial. Samples were cultured on different selective medium and bacterial identification was performed by different biochemical and molecular diagnostic tools. Results showed a significant effect of AGPs on the growth of pathogenic microorganisms such as Escherichia coli and Clostridium perfringens in the intestine. Interestingly, an impaired growth was observed for both bacterium showing a significant effect (P<0.05) of AGPs on E. coli and C. perfringens on day 14th, 28th, and 42nd. This effect was observed solely and in combination while using AGPs. Data further showed that the effect was more prominent in combination and with an increase concentration of AGPs. Remarkably, no impairment was seen on the growth of L. reuteri at different sites of intestine and duration (14th, 28th, and 42nd days). The results showed that the use of AGPs in diet has no harmful effect on beneficial bacteria, however, an impaired growth was seen on the harmful bacteria. It is suggested that a combination of AGPs (OXY-1.0+TP-0.5) is economical and have no harmful effect on the broiler chicken. The use of AGPs in a recommended dose and for a specific period of time are safe to use in poultry both as growth promoter and for the prevention of diseases.

Resumo Asphodelus fistulosus (A. fistulosus) é uma planta selvagem que cresce na Jordânia. Tradicionalmente, é usada para tratar diferentes condições médicas e doenças, como doenças respiratórias, contra queimaduras e infecções dermatomucosas. Bactérias positivas e Escherichia coli (E. coli) como bactérias gram-negativas e investigar qual delas será afetada por extratos brutos aquosos e/ou etanólicos de partes de tiro de A. fistulosus que foram coletadas em Jerash no norte da Jordânia. O método de difusão em poço de ágar foi utilizado para avaliar a atividade antibacteriana dos extratos brutos. Além disso, MIC (concentração inibitória mínima) e MBC (concentração bactericida mínima) foram determinados contra ambos os tipos de bactérias. Os resultados mostraram que o extrato aquoso de flores de A. fistulosus foi muito eficaz contra E. coli (20,0 + 0,50 mm) e causou uma inibição (14,0 + 0,50 mm) para S. aureus. O extrato etanólico do caule foi muito eficaz, causando inibição (19,0 + 0,50 mm) em ambas as espécies bacterianas. Respectivamente, tanto S. aureus quanto E. coli foram inibidos pelos extratos etanólico e aquoso (mistura 1 e mistura 2) (15,0 + 0,00 mm e 10,5 + 0,50 mm). A maior atividade antibacteriana foi observada para o extrato aquoso das folhas contra E. coli (0,06120 mg/mL). Os valores de CIM obtidos dos extratos de partes de A. fistulosus demonstraram atividade antibacteriana variando entre 7,606 e 0,06120 mg/mL. A maior atividade antimicrobiana foi registrada no extrato aquoso das folhas contra E. coli. O valor de CBM do extrato aquoso do caule foi de 5,00 mg/mL contra S. aureus e E. coli. Por outro lado, os extratos etanólico e aquoso das folhas apresentaram valores de CBM de 5,00 mg/mL e 0,156 mg/mL, respectivamente, contra E. coli, efeito de extratos aquosos e etanólicos de partes de tiro de A. fistulosus no crescimento de E. coli e S. aureus. Somando-se a isso, o extrato etanólico do caule é o mais eficaz contra S. aureus enquanto o extrato aquoso da flor é o mais eficaz contra E. coli. Assim, recomenda-se a realização de estudos futuros sobre os componentes bioativos do extrato bruto de partes fotografais de A. fistulosus e o mecanismo de como esses constituintes afetam esses tipos de bactérias.

Abstract Asphodelus fistulosus (A. fistulosus) is a wild plant grows in Jordan. Traditionally, it is used to treat different medical conditions and diseases such as respiratory ailments, against burns and dermatomucosal infections.This study aims to find out the effects of A. fistulosus aqueous and ethanolic crude extracts on Staphylococcus aureus(S. aureus) as gram positive bacteria and Escherichia coli (E. coli) as gram negative bacteria and to investigate which one will be affected either by aqueous and/or ethanolic crude extracts of A. fistulosus shooting parts that were collected from Jerash in the north of Jordan. Agar well diffusion method was used to evaluate the antibacterial activity of the crude extracts. In addition, MIC (minimum inhibitory concentration) as well as MBC (minimum bactericidal concentration) were determined against both types of bacteria. The results showed that flower aqueous extract of A. fistulosus was very effective against E. coli (20.0 ± 0.50) mm and caused a (14.0 ± 0.50) mm inhibition to S. aureus. The ethanolic extract of stem was very effective cauesed a (19.0 ± 0.50) mm inhibition in both bacterial species. Respectively, both S. aureus and E. coli were inhibited by ethanolic and aqueous extracts (mixture1 and mixture2) (15.0 ± 0.00 mm and 10.5 ± 0.50 mm). The highest antimbacterial activity was observed for the leaves aqueous extract against E.coli (0.06120 mg/mL). The obtained MIC values from A. fistulosus parts extracts demonstrated antibacterial activity ranged between 7.606 and 0.06120 mg/mL. The highest antimicrobial activity was recorded in the leaves aqueous extract against E. coli.The MBC value of stem aqueous extract was 5.00 mg/mL against both S. aureus and E. coli. On the other hand, ethanolic and aqueous extracts of the leaves gave MBC values 5.00 mg/mL, and 0.156 mg/mL, respectively, against E. coli.Based on the results of this study, it can be concluded that there is good inhibitory effect of aqueous and ethanolic of A. fistulosus shooting parts extracts on growth of E. coli and S. aureus. Adding to that, stem ethanolic extract has the most effective against S. aureus while aqueous extract of flower has the most effective against E. coli.So, it is recommended to have further future studies on the A. fistulosus shooting parts crude extract bioactive components and the mechanism of how these constituents affect these types of bacteria.

Resumo O surgimento de colistina mediada por plasmídeo e genes de resistência a β-lactamases de espectro estendido (ESBL) afetou a eficácia de medicamentos colistina e β-lactâmicos, como as cefalosporinas de 3ª e 4ª geração. O presente estudo teve como objetivo investigar genes de resistência antimicrobiana (ARGs) entre isolados de Escherichia coli em frangos de corte comerciais no Paquistão. Duzentas (n = 200) amostras fecais foram coletadas durante janeiro de 2018 a agosto de 2019. Para o isolamento de E. coli, colônias rosas em ágar MacConkey foram transferidas para ágar EMB. As colônias de cores de brilho metálico foram testadas bioquimicamente usando o kit API-20E. A identificação molecular de E. coli (n = 153) foi direcionada pela amplificação do gene uid através da reação em cadeia da polimerase (PCR) e diferentes ARGs, ou seja, gentamicina, estreptomicina, tetraciclina, colistina, medicamentos β-lactâmicos, quinolona e ampicilina, seguido de análise de sequência. Genotipicamente, seguido por fenotipicamente de ARGs resistentes de E. coli isoladas foram confirmadas por PCR (153) como resistente contra gentamicina (aac(3)-IV), estreptomicina (aadA1), tetraciclina (tetA), colistina (mcr-1), ampicilina (bla-TEM) e bla-CTX-M, demonstrando resultados de 86%, 88%, 86%, 88%, 83% e 77%, respectivamente. Cerca de 33/38 (86%) do isolado foi positivo para resistência às quinolonas. Os genes de resistência à colistina (mcr-1), ESBLs (bla-TEM) e (bla-CTX-M) foram 88%, 83% e 77%, respectivamente. Cerca de 33 E. coli isoladas continham os genes mcr-1 e ESBLs. Todos os isolados de E. coli foram considerados sensíveis à ceftriaxona (CTX-30) e imipenem (IMP-10). A E. coli isolada apresentou decadência de um ou vários clados. As sequências de E. coli e ARGs apresentaram decadência de um ou vários clados. Este é o primeiro estudo abrangente do Paquistão que descreveu as evidências moleculares de ARGs e sua coexistência em isolados únicos originados de aves comerciais. Dessa forma, é possível concluir que o Frango comercial (Broilers) pode atuar como caldeirão de genes de resistência a antibióticos para o ser humano. É uma situação alarmante para a vigilância do programa de resistência a antibióticos devido à prescrição mais regulamentada de agentes antimicrobianos no Paquistão

Abstract Emergence of plasmid mediated colistin and extended spectrum β-lactamases (ESBL) resistant genes has been impacted the efficacy of colistin and β-lactams drugs like 3rd, 4th generation cephalosporin. Current study was aimed to investigate antimicrobial resistance genes (ARGs) among Escherichia coli isolates from meat producing commercial broilers in Pakistan. Two hundred (n=200) fecal samples were collected during January-2018 to August-2019. For isolation of E. coli, pink colonies on MacConkey agar were transferred to EMB agar. Metallic sheen color colonies were tested biochemically using API-20E kit. The molecular identification of E. coli (n=153) was targeted by amplification of uid gene through polymerase chain reaction (PCR) and different ARGs i.e. gentamicin, streptomycin, tetracycline, colistin, β-lactams drugs, quinolone and ampicillin followed by sequence analysis. Genotypically, followed by phenotypically of resistant ARGs of isolated PCR-confirmed E. coli (153) shoed resistant against gentamicin (aac(3)-IV), streptomycin (aadA1), tetracycline (tetA), colistine (mcr-1), ampicillin (bla-TEM) and bla-CTX-M were 86%, 88%, 86%, 88%, 83% & 77% respectively. 33/38 (86%) of the isolate was positive for quinolone resistance. Colistine (mcr-1), ESBLs (bla-TEM) and (bla-CTX-M) resistance genes were 88%, 83% and 77% respectively. About 33 isolated E. coli harbored the both mcr-1 and ESBLs genes. All of E. coli isolates were found sensitive to ceftriaxone (CTX-30) and imipenem (IMP-10). The Isolated E. coli showed single or multi clade decadency. The E. coli and ARGs sequences showed single or multi clade decadency. This is first comprehensive study from Pakistan that described the molecular evidences of ARGs and their co-existence in single isolates originated from commercial poultry. Commercial chicken (Broilers) can act as melting pot of antibiotic resistance genes for human being. It is alarming situation for surveillance of antibiotic resistance program because of more regulated prescription of antimicrobial agents in Pakistan

Resumo Os nanopartículos de prata são optados por ter várias aplicações em diferentes áreas que variam de medicamentos tradicionais a itens culinários. É tóxico e mais eficaz contra bactérias, vírus de fungos, parasitas, parasitas que transportam vetores como mosquitos e suas larvas e outros microorganismos eucarióticos em baixa concentração, sem efeitos colaterais e toxicidade para os seres humanos. Em vista desses dados, a presente pesquisa foi investigada sintetizando nanopartículas de prata usando nitrato de prata de 1 mm e extrato aquoso de Passiflora foetida. Foi analisada a variação de nanopartículas em tamanho e forma relativa à concentração de extrato preparado. A formação de nanopartículas de prata foi confirmada pela mudança de cor de verde amarelado para marrom-avermelhado, implicando a ressonância plasmônica da superfície. Além disso, foi concluído pela obtenção de um pico de absorvância a 420 nm usando análise do espectrofotômetro visível por UV. A análise do FTIR foi usada para identificar os ligantes de captura, que incluíam alcanes, grupos aromáticos e compostos nitro. O tamanho médio dos grãos de ~ 12 nm a 14 nm com fase cristalina foi revelado por estudos de difração de raios-X. As imagens SEM retratavam a morfologia da superfície com aglomeração; Os estudos de TEM mostraram a forma das nanopartículas como esféricas e hexagonais, com tamanhos variando de 40 nm a 100 nm e a análise EDAX confirmou a presença de prata elementar como constituinte principal. As nanopartículas de prata caracterizadas foram então testadas quanto a efeitos antibacterianos sinérgicos com tetraciclina, e os resultados mostram que são mais ativos contra E. coli e S. aureus, mas moderadamente eficazes contra B. cereus e K. pneumoniae. Ele também teve um forte efeito tóxico larval e pupal no vetor de dengue, Aedes aegypti com a maior mortalidade. Como resultado, as nanopartículas de prata podem ser uma alternativa viável para uma variedade de aplicações.

Abstract Silver nanoparticles are opted to have various applications in different fields ranging from traditional medicines to culinary items. It is toxic and most effective against bacteria, fungi viruses, parasites, parasite carrying vectors such as mosquitoes and their larvae and other eukaryotic microorganisms at low concentration without any side effects and toxicity to humans. In view of these data, the present research has been investigated by synthesizing silver nanoparticles using 1mM silver nitrate and aqueous extract of Passiflora foetida. The variation of nanoparticles in size and shape concerning the concentration of extract prepared were analysed. The formation of silver nanoparticles was confirmed by colour changing from yellowish green to reddish-brown implicating the surface plasmon resonance. Further, it was concluded by obtaining an absorbance peak at 420 nm using UV-Visible spectrophotometer analysis. FTIR analysis was used to identify the capping ligands, which included alkanes, aromatic groups and nitro compounds. The average grain size of ~12 nm to 14 nm with crystalline phase was revealed by X-ray Diffraction studies. The SEM images depicted the surface morphology with agglomeration; TEM studies showed the shape of nanoparticles as spherical and hexagonal with sizes ranging from 40 nm to 100 nm and EDAX analysis confirmed the presence of elemental silver as the principal constituent. The characterized silver nanoparticles were then tested for synergistic antibacterial effects with tetracycline, and the results show that they are more active against E. coli and S. aureus, but moderately effective against B. cereus and K. pneumoniae . It also had a strong larval and pupal toxic effects on the dengue vector, Aedes aegypti with the highest mortality. As a result, silver nanoparticles could be a viable alternative for a variety of applications.

Resumo Os sabonetes têm um papel importante para a nossa higiene e saúde, pois eles além de ter efeito bactericida, também removem as sujeiras presentes no corpo humano. Avaliar a eficácia de sabonetes com atividade antimicrobiana de diferentes marcas comerciais vendidas no Brasil. Foram realizados ensaios da atividade antimicrobiana dos diferentes sabonetes através do método difusão em ágar frente aos microrganismos Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter cloacae, Acinetobacter baumannii, Proteus mirabilis e Candida albicans. Todos os sabonetes comerciais testados apresentaram formação de halo de inibição antimicrobiana frente às bactérias S. aureus e P. aeruginosa. Apenas dois sabonetes comerciais apresentaram inibição das espécies A. baumannii e C. albicans. Nenhum dos sete produtos estudados apresentou inibição das bactérias E. cloacae, P. mirabilis e E. coli. Na comparação das informações contidas nas embalagens dos produtos com os resultados obtidos durante a pesquisa realizada foram observadas divergências. Os sabonetes que apresentaram maior eficiência contra os microrganismos testados foram aqueles das apresentações 1 e 2, que se mostraram eficazes contra as espécies de bactérias S. aureus, P. aeruginosa e A. baumannii e contra a espécie de fungo C. albicans. As marcas 3, 4, 5, 6 e 7 apresentaram o mesmo resultado de sensibilidade frente as bactérias das espécies S. aureus e P. aeruginosa, com variação quantitativa apenas do halo de inibição. Houve divergência entre as informações contidas nas embalagens dos sete produtos em estudo e os resultados dos testes experimentais.

Abstract Soaps play an important role in our hygiene and health, as they not only have a bactericidal effect but also remove dirt from the human body. To evaluate the effectiveness of soaps with antimicrobial activity from different commercial brands sold in Brazil. Tests of the antimicrobial activity of different soaps were carried out through diffusion in agar against the microorganisms Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter cloacae, Acinetobacter baumannii, Proteus mirabilis, and Candida albicans. All commercial soaps tested transfer antimicrobial inhibition halo formation against S. aureus and P. aeruginosa bacteria. Only two commercial soaps inhibit the species A. baumannii and C. albicans. None of the seven products studied showed inhibition of E. cloacae, P. mirabilis, and E. coli bacteria. When comparing the information contained in the packaging of the products with the results obtained during a survey, divergences were observed. The soaps that provide greater efficiency against the tested microorganisms were presented in presentations 1 and 2, which become useful against the bacteria species S. aureus, P. aeruginosa, and A. baumannii and a fungus species C. albicans. Marks 3, 4, 5, 6, and 7 parallel the same sensitivity result opposite as bacteria of the species S. aureus and P. aeruginosa, with quantitative variation only of the inhibition halo. There was a divergence between the information contained in the packaging of the seven products under study and the results of the experimental tests.

Resumo A administração de doenças de plantas é difícil devido à natureza dos fitopatógenos. O controle biológico é um método seguro para evitar problemas relacionados a doenças fúngicas que afetam a produtividade das culturas e algumas bactérias patogênicas ao homem. Para isso, a atividade antimicrobiana da alga marinha Sargassum muticum metanol e de extratos aquosos foi investigada contra patógenos bacterianos humanos e fitopatógenos fúngicos. Usando metanol a 70%, o pó de algas marinhas foi extraído do ensaio de aditivos alimentares, a ultraestrutura (TEM). Os resultados revelaram inibição significativa do extrato metanólico de S. muticum contra Salmonella typhi (25,66 mm), Escherichia coli (24,33 mm), Staphylococcus aureus (22,33 mm) e Bacillus subtilis (19,66 mm). Alguns fitopatógenos fúngicos inibiram significativamente Fusarium moniliforme (30,33 mm), Pythium ultimum (26,33 mm), Aspergillus flavus (24,36 mm) e Macrophomina phaseolina (22,66 mm). A investigação fitoquímica do extrato de S. muticum mostrou a presença de compostos fenólicos e flavonoides. Os resultados sugeriram que há um nível apreciável de potencial antioxidante na atividade de eliminação de DPPH de S. muticum (79,86%). Estudos ultraestruturais da hifa de Fusarium moniliforme cultivada em meio contendo extrato de S. muticum na concentração de 300 mg/ml mostraram espessamento da parede celular, desintegração do citoplasma, grandes corpos lipídicos e vacúolos. Em conclusão, nosso estudo revelou a atividade antibacteriana do extrato de S. muticum significativamente contra algumas bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e atividade antifúngica contra alguns fungos fitopatogênicos e alguns produtores de micotoxinas. Flavonoides e fenólicos desempenham papel importante como antioxidantes e propriedades antimicrobianas. Tal estudo revelou que o extrato metanólico de S. muticum pode ser usado como biocontrole ecologicamente correto para fungos fitopatogênicos e aditivos alimentares para proteger os produtos pecuários.

Abstract Plant disease administration is difficult due to the nature of phytopathogens. Biological control is a safe method to avoid the problems related to fungal diseases affecting crop productivity and some human pathogenic bacteria. For that, the antimicrobial activity of the seaweed Sargassum muticum methanol and water extracts were investigated against human bacterial pathogens and fungal plant pathogens. By using 70 percent methanol, the seaweed powder was extracted, feeding additives assay, ultrastructure (TEM). Results revealed significant inhibition of S. muticum methanol extract against Salmonella typhi (25.66 mm), Escherichia coli (24.33 mm), Staphylococcus aureus (22.33 mm) and Bacillus subtilis. (19.66 mm), some fungal phytopathogens significantly inhibited Fusarium moniliforme (30.33mm), Pythium ultimum (26.33 mm), Aspergillus flavus (24.36mm), and Macrophomina phaseolina (22.66mm). Phytochemical investigation of S. muticum extract showed the presence of phenolic and flavonoid compounds. Results suggested that there is an appreciable level of antioxidant potential in S. muticum (79.86%) DPPH scavenging activity. Ultrastructural studies of Fusarium moniliforme hypha grown on a medium containing S. muticum extract at concentration 300mg/ml showed a thickening cell wall, disintegration of cytoplasm, large lipid bodies and vacuoles. In conclusion, our study revealed The antibacterial activity of S. muticum extract significantly against some Gram positive, Gram negative bacteria and antifungal activity against some phytopathogenic and some mycotoxin producer fungi. Flavonoids, phenolic play an important role as antioxidants and antimicrobial properties. Such study revealed that S. muticum methanol extract could be used as ecofriendly biocontrol for phytopathogenic fungi and feeding additives to protect livestock products.

ABSTRACT: This study determined the extraction conditions, chemical composition, and antimicrobial activities of the essential oils of Citrus nobilis. The results illustrated that soaking in the 9% (w/v) NaCl solution for 2 h with a sample and solvent ratio of 1:3 (w/v) and a subsequent extraction time of 45 min yielded the highest extraction efficiency, reaching 3.66% (w/w). The main chemical components of the essential oils were limonene (90.42%), β-myrcene (4.7%), and α-pinene (1.22%). The minimum inhibitory concentration (MIC) at the density of 5x104, 5x105, and 5x106 cells/mL of Escherichia coli were 100, 125, and 125 mg/mL, respectively; for Staphylococcus aureus were 75, 100, and 125 mg/mL, respectively; and for Bacillus cereus were 50, 75, and 100 mg/mL, respectively. The minimum bactericidal concentration (MBC) at densities of 5x104, 5x105, 5x106 cells/mL of E. coli were 175, 225, 225 mg/mL, S. aureus were 150, 200, 225 mg/mL, and B. cereus were 125, 175, 200 mg/mL, respectively. The inhibitory activities of Aspergillus flavus of orange essential oils according to the agar dilution method at concentrations of 0.025-0.1%) on the 5th day were 8.84-30.61%.

RESUMO: Este estudo teve como objetivo determinar as condições de extração, composição química e atividades antimicrobianas dos óleos essenciais de Citrus nobilis. Os resultados demonstram que a imersão na solução de NaCl a 9% (p/v) por 2 h com uma proporção de amostra e solvente de 1:3 (p/v) e um tempo de extração subsequente de 45 min produziu a maior eficiência de extração, atingindo 3,66 % (p/p). Os principais componentes químicos dos óleos essenciais foram limoneno (90,42%), β-mirceno (4,7%) e α-pineno (1,22%). A concentração inibitória mínima (CIM) na densidade de 5x104, 5x105 e 5x106 células/mL de Escherichia coli foram 100, 125 e 125 mg/mL, respectivamente, e para Staphylococcus aureus foram 75, 100 e 125 mg/mL, respectivamente, e para Bacillus cereus foram 50, 75 e 100 mg/mL, respectivamente. A concentração bactericida mínima (MBC) em densidades de 5x104, 5x105, 5x106 células/mL de E. coli foram 175, 225, 225 mg/mL, S. aureus foram 150, 200, 225 mg/mL e B. cereus foram 125, 175, 200 mg/mL, respectivamente. As atividades inibitórias de Aspergillus flavus dos óleos essenciais de laranja, de acordo com o método de diluição em ágar nas concentrações 0,025-0,1%, no dia cinco foram 8,84-30,61%.

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Abstract (Objective) The objective of this study was to analyze antimicrobial resistance in Peruvian aquaculture. (Methodology) An observational, descriptive study was carried out. Samples of Argopectenpurpuratus, Oncorhynchus mykiss, Oreochromis niloticus and Litopenaeus vannamei were included. The bacteria Enterococcus spp., Salmonella spp., Erichia coli, Vibrio parahaemolyticus, Aeromonas spp., and Flavobacterium psychrophilum were isolated. Antibiotic resistance was evaluated using antibiograms, and resistant samples were sequenced to identify antimicrobial resistance genes. Absolute and percentage frequencies were calculated. In addition, Wald, Clopper-Pearson, and pooled prevalence confidence intervals were estimated. (Results) In the case of A. purpuratus, 22.2% (95% CI:2.81-60.00) of the E. coli samples were resistant to oxytetracycline. Resistant samples were found in 4.44% (n=2) of the aquaculture production centers (APCs). In O. mykiss, 88.89% (95% CI:51.16-99.72) of the Enterococcus spp. were resistant to osfomycin and oxytetracycline. Resistant samples were found in12.96% of the APCs (n=7). Regarding O. niloticus, 47.31% (95% CI: 37.16-57.46) of the E. coli samples were resistant to oxytetracycline ampicilline>chloramphenicol>fosfomycin and azithromycin. Resistant samples were encountered in 50% of the APCs (n=19). In addition, 89.36% (95% CI:80.55-98.18) of the Enterococcus spp. were resistant to Fosfomycin> chloranphenicol and colistin> oxytetracycline>azithromycin>ampicilline; resistant samples were found in 36.84% of the APCs (n=14). In L. vannamei, 87.11% (95% CI:83.00-91.21) of the Enterococcus spp. samples were resistant to Fosfomycin> colistin> oxytetracycline> azithromycin> ampicilline and resistant samples were found in 100% of the APCs (n=33). Likewise, 35.05% (95% CI:29.74-40.23) of the V. parahaemolyticus samples were resistant to ampicilline>fosfomycin>oxytetracycline>azithromycin>eritromicine>enrofloxacin>ampicilline> chloranfhenicol. Resistant samples were found in 78.79% (n=26) of the APCs (Conclusions) The percentage of APCs with O. niloticus and L. vannamei showed that antimicrobial resistance was high.

Resumo (Objetivo) O objetivo foi analisar a resistência antimicrobiana na aquicultura peruana. (Metodologia) Foi realizado um estudo observacional, descritivo. Foram incluídas amostras das espécies Argopecten purpuratus, Oncorhynchus mykiss, Oreochromis niloticus e Litopenaeus vannamei. Foram isoladas bactérias dos gêneros Enterococcus spp., Salmonella spp., Aeromonas spp., e espécies de Escherichia coli, Vibrio parahaemolyticus e Flavobacterium psychrophilum. A resistência antimicrobiana foi avaliada por meio de antibiograma, e amostras resistentes foram sequenciadas para identificar genes de resistência antimicrobiana. Foram calculadas as frequências absoluta e percentual, além dos intervalos de confiança de Wald, Clopper-Pearson e as prevalências agrupadas. (Resultados) Em relação a A. purpuratus, 22,2% (IC 95%: 2,81-60,00) das amostras de E. coli foram resistentes à oxitetraciclina. Estes pertenciam a 4,44 % (n=2) dos centros de produção aquícola (CPA). Em O. mykiss, 88,89% (IC 95%: 51,16-99,72) das amostras de rococcus spp. foram resistentes à fosfomicina e oxitetraciclina. Estas pertenciam a 12,96% das CPAs (n=7). Em relação a O. niloticus, 47,31 % IC 95%: 37,16-57,46) das amostras de E. coli foram resistentes à oxitetraciclina>ampicilina>cloranfenicol fosfomicina e azitromicina. Estas pertenciam a 50% das CPAs (n=19). Além disso, 89,36% (IC95%: 80,55-98,18) das amostras de Enterococcus spp. foram resistentes a fosfomicina>cloranfenicol e colistina>oxitetraciclina>azitromicina>ampicilina; estas pertenciam a 36,84% das CPAs (n=14). Em L. vannamei, 87,11% (IC 95%: 83,00-91,21) das amostras de Enterococcus spp foram resistentes à fosfomicina>colistina>oxitetraciclina>azitromicina eritromicina>enrofloxacina> ampicilina>cloranfenicol e pertenciam a 100% das CPAs (n=33). Além disso, 3 ,05% (IC 95%: 29,74-40,23) das amostras de V.parahaemolyticus foram resistentes à ampicilina>fosfomicina>colistina>oxitetraciclina>azitromicina. Estas pertenciam a 78,79% (n=26) das CPAs. (Conclusões) A porcentagem de CPA de O. niloticus L. vannamei, mostrou maior resistência antimicrobiana do estudo.

Resumen Introducción: La acuacultura de truchas ha incrementado gradualmente en las tierras altas de Costa Rica. Las aguas residuales de esta actividad son descartadas directamente en los ríos, sin tratamientos previos. Como consecuencia, la actividad truchícola puede contaminar severamente el agua de los ríos con bacterias que pueden afectar la salud humana. Objetivo: Evaluar la contaminación bacteriana por la acuacultura de truchas en el río Savegre, Costa Rica. Métodos: Contamos los coliformes totales y Escherichia coli de muestras mensuales (2015-2018) en tres secciones del proyecto de acuacultura más grande de la cuenca alta del río. Recolectamos las muestras en la entrada de los estanques para las truchas, a la salida, y 200 m hacia abajo. Resultados: Encontramos menos coliformes totales y E. coli en el agua recolectada justo en la salida del agua de los estanques. El número de coliformes totales fue mayor en el 2016 y 2017, y de E. coli en el 2016. Conclusiones: Conteos de coliformes y de E. coli es muy alto en el río, pero inesperadamente, su número disminuye en el agua residual descartada de los estanques. Podría ser que el mucus producido por las truchas o sustancias liberadas del musgo que cubre la pared de los estanques reduzca el crecimiento de bacterias, como se ha sido sugerido en otros estudios. La contaminación del río parece venir de otras fuentes.

Abstract Introduction: The trout aquacultural activity has gradually increased in Costa Rican highlands. Residual waters from this activity are discarded directly in the rivers without any previous treatment process. Consequently, this activity could severely contaminate the river with bacteria that can affect human health. Objective: To evaluate bacterial contamination from trout aquaculture on Río Savegre, Costa Rica. Methods: We counted total coliforms and Escherichia coli from monthly samples (2015-2018) at three sections of the largest aquacultural development in the upper drainage of the river. We collected samples at the fish ponds entrance, exit and 200 m downwards. Results: We found fewer total coliforms and E. coli in the water collected just at the exit of the fish ponds. We counted more total coliforms in 2016 and 2017, and more E. coli in 2016. Conclusions: Coliform and E. coli counts are high in the river, but, unexpectedly, low in the water discarded from the fish tanks. Perhaps the mucus produced by the trouts or substances released by mosses on the fish tank walls reduce bacterial growth, as suggested by other studies. River pollution appears to come from other sources.

Resumen La diarrea está asociada con bacterias infecciosas que ocasionan mortalidad en terneros como Escherichia coli, representando un problema para los productores de leche y carne a nivel global, provocando grandes pérdidas económicas. En este estudio se evaluó la resistencia a cepas de E. coli aisladas de heces diarreicas de terneros recién nacidos de la región Cajamarca. Se recolectaron 52 muestras de heces de terneros de cinco provincias de la región Cajamarca para el aislamiento de E. coli en agar MacConkey con sorbitol. La identificación molecular de E. coli se realizó mediante la amplificación del gen uidA por PCR convencional y luego se evaluó la susceptibilidad/resistencia a antibióticos utilizando la metodología de Kirby-Bauer y el uso de discos de antibiótico con neomicina, tetraciclina, sulfametoxazol-trimetroprim y enrofloxacina. Los resultados fueron que el 96.15 % de cepas de E. coli fueron resistentes a tetraciclina, el 51.92 % a sulfametropim, el 26.92 % a neomicina y el 9.61 % a enrofloxacina. También se demostró que el 30.76 % presentaban resistencia a dos fármacos, el 19.23 % a tres fármacos y el 5.76 % a cuatro fármacos; se encontró diferencia significativa de resistencia a tetraciclina (P<0.0001). Se concluye que los terneros neonatos de la región Cajamarca que presentaban diarrea son portadores de E. coli resistentes a antibióticos, representando un problema para los criadores de ganado vacuno, ya que estas cepas pueden causar la muerte de los animales y contribuyen a la diseminación de la resistencia de antibióticos.

Abstract Diarrhea is associated with infectious bacteria that cause mortality in calves, such as Escherichia coli, representing a problem for milk and meat producers globally, causing large economic losses. This study assessed the resistance to E. coli strains isolated from diarrheal feces of newborn calves from the Cajamarca region. Fifty two (52) fecal samples from calves from five provinces of the Cajamarca region were collected for the isolation of E. coli on MacConkey agar with sorbitol. The molecular identification of E. coli was performed by amplification of the uidA gene by conventional PCR and then antibiotic susceptibility/resistance was assessed using the Kirby-Bauer methodology and antibiotic discs with neomycin, tetracycline, sulfamethoxazole-trimethoprim and enrofloxacin. The results were that 96.15 % of E. coli strains were resistant to tetracycline, 51.92 % to sulfamethoprim, 26.92 % to neomycin and 9.61 % to enrofloxacin. It was also demonstrated that 30.76 % had resistance to two drugs, 19.23 % to three drugs and 5.76 % to four drugs; a significant difference was found in resistance to tetracycline (P<0.0001). It is concluded that newborn calves from the Cajamarca region that presented diarrhea are carriers of antibiotic-resistant E. coli, representing a problem for cattle farmers, since these strains can cause the death of animals and contribute to the spread of antibiotic resistance.