Para ampliar conhecimentos sobre a incidência de bacteriófagos de bactérias lácticas na indústria de leite do Estado de São Paulo e a sua influência sobre a capacidade acidificante de fermentos lácticos disponíveis em nosso mercado, o presente trabalho foi conduzido com o intuito de esclarecer a real situação dos laticínios no Estado. Foram coletadas 33 amostras de soro de queijo em 17 laticínios. Foram isolados 16 bacteriófagos, 12 específicos para Lactococcus lactis, 3 para L. diacetylactis e um capaz de lisar ambos os microrganismos. Os experimentos mostraram que, uma diminuição de 10% na acidez em presença de soro suspeito, ao contrário do estabelecido na literatura, não reflete a veracidade da presença de bacteriófagos na amostra, uma vez que a maioria apresentou redução acima desse valor embora atividade fágica estivesse presente em apenas 65% das indústrias avaliadas. Utilizando uma mistura de bacteriófagos isolados, procedeu-se testes com 12 fermentos lácticos comerciais, e, em 8 horas, somente 2 tipos mostraram diferença na capacidade de acidificação. Verificou-se também que os fermentos, quando submetidos a repicagem diária, mantiveram os bacteriófagos após 20 subcultivos. A partir dos fermentos comerciais foram obtidas as bactérias componentes, que foram testadas individualmente quanto à resistência aos bacteriófagos, mostrando que o nível de sensibilidade varia consideravelmente entre os diferentes tipos de fermentos (BD, D, O e um de L. diacetylactis). Cinco bacteriófagos isolados não se mostraram infectivos a nenhum dos microrganismos isolados, enquanto 1 deles, mostrou-se infectivo para a quase totalidade dos isolados.

The incidence of phages of lactic acid bacteria in milk industry and their effects on acidification ability of commercial lactic acid starters were studied. Cheese whey samples (33 samples) were collected from 17 factories. A total of 16 bacteriophages were isolated (12 specific for Lactococcus lactis, 3 for L. diacetylactis and one capable of lysing both species). The results showed that 10% reduction in acidification tests was not good indication of phage in the sample. The majority of samples showed reduction higher than 10%, although only 65% were phage positive. The isolated phages were quite stable and showed no reduction in infectivity even after 20 daily replications. A pool of bacteriophages was prepared from isolates and inoculated in 12 commercial lactic starters. After 8 hours of incubation, only 2 showed reduced acidification. Bacterial strains isolated from commercial starters were tested regarding the phage resistance. Considerable difference in phage sensitivity was observed among different starters (BD, D, O and L. diacetylactis). Five bacteriophages showed no infectivity on any isolates but one was infective for most of isolates.

Foi feito um estudo da ocorrência de E.coli O157:H7 em vegetais que são normalmente consumidos crus no Brasil e uma avaliação da sua resistência aos sanitizantes disponíveis no mercado para desinfecção de verduras, equipamentos e utensílios, incluindo compostos clorados e compostos de amônio quaternário. Na avaliação da ocorrência em vegetais foram analisadas 869 amostras, não sendo detectada a presença do patógeno. Os imunoensaios enzimáticos (ELISA) utilizados nas análises (Reveal E.coli O157 Neogem e EHEC Test Kit 3M Company) apresentaram uma taxa de falsos resultados presuntivos de 13,6 e 11,8%, respectivamente, não confirmados como E.coli O157 nos testes bioquímicos posteriores. Na avaliação da resistência aos sanitizantes pelo método 960.9 da AOAC, observou-se que os tratamentos com 100 e 200ppm de hipoclorito de sódio, dicloroisocianurato de sódio e cloreto de benzalcônio/30s se mostraram eficazes contra E.coli ATCC 11229 e E.coli O157:H7 ATCC 43890, promovendo mais de 5 reduções decimais nas populações alvo.

A study of E.coli O157:H7 occurrence in vegetables that are usually consumed raw in Brazil was carried out as well as an evaluation of its resistance to the sanitizers available on the market for disinfection of green vegetables, equipment and utensils, including chlorine and quaternary ammonium compounds. In the evaluation of the occurrence in vegetables, 869 samples were analyzed, without the presence of the pathogen being detected. The enzymatic immunoassay (ELISA) used in the analyses (Reveal E.coli O157 Neogem e EHEC Test Kit 3M Company) presented a false presumtive rate of 13,6 and 11,8%, respectively, not confirmed as E.coli O157 in the subsequent stages of identification. In the evaluation of the resistance to the sanitizers using the AOAC method 960.9 it was observed that the treatment with 100ppm and 200ppm of sodium hypochlorite, sodium dichloroisocyanurate and benzalconium chloride/30s showed effectiveness against E.coli ATCC 11229 e E.coli O157:H7 ATCC 43890, with more than 5 decimal reductions over the population.

A fermentação dos carboidratos de reserva, glicogênio e trealose é um procedimento para aumentar o nível de proteína das células de leveduras com simultâneo aumento na produção de etanol. Este trabalho estudou a cinética de degradação do glicogênio e trealose em duas linhagens industriais de Saccharomyces cerevisiae (PE-2 e SA-1), bem como o efeito de diferentes temperaturas (38º, 40º, 42º e 44ºC) na velocidade de degradação. A fermentação endógena foi conduzida com suspensão de leveduras a 20% (m/v) em massa úmida, no vinho com 3 a 4,5% (v/v) de etanol. A degradação dos carboidratos de reserva, a 40ºC, seguiu uma cinética de primeira ordem, mostrando que sua taxa é dependente da concentração dos carboidratos na célula. A taxa especifica de degradação (k) variou de 0,0387 a 0,0746 h-1. Em relação a outros parâmetros analisados a 40ºC, foi observado que a viabilidade e biomassa seca e úmida foram reduzidas, enquanto a reserva de proteína celular e etanol, glicerol e nitrogênio no meio aumentaram. A degradação do glicogênio e trealose em diferentes temperaturas (38ºC, 40ºC, 42ºC e 44ºC) mostrou que a 38ºC a taxa de degradação foi a menor, ao passo que a partir de 42ºC ou superior, a degradação do glicogênio não mais progrediu após poucas horas de incubação. Portanto, do ponto de vista prático, a melhor temperatura de incubação é em torno de 40ºC. A aplicação da equação de Arrheniusmostrou que as energias de ativação de 40ºC a 42ºC foram 165,90 e 107,94 kcal.ºK-1.mol-1 para trealose e glicogênio respectivamente para a linhagem PE-2, e 190,64 e 149,87 kcal.ºK-1/mol-1, para a linhagem SA-1 respectivamente.

The fermentation of yeast reserve carbohydrates, glycogen and trehalose is a procedure to increase protein level of yeast cells and improve ethanol production. This work studied on the degradation kinetics of glycogen and trehalose carried out with two industrial strains of Saccharomyces cerevisiae (PE-2 and SA-1) and the effect of different temperatures (38º, 40º, 42º and 44ºC) on degradation rate. Endogenous fermentation was carried out in a yeast suspension at 20% (w/v) based on wet weight, suspended in fermented media with 3.0 to 4.5 % (v/v) of ethanol. The degradation of the carbohydrate reserves at 40ºC followed first-order kinetics, showing that its rate is mainly dependent on the carbohydrate concentration in the cell. The degradation rate (k) ranged from 0.0387 to 0.0746 h-1. Analyzing other parameters at 40ºC, it was observed that viability and dry and wet yeast biomass were reduced while cell protein, ethanol, glycerol and nitrogen in the medium increased. Glycogen and trehalose degradation at different temperatures (38º, 40º, 42º e 44ºC) showed that at 38ºC the degradation rate was slow and from 42ºC on the degradation of glycogen stopped after few hours of incubation. Thus, from a practical point of view, the best incubation temperature is around 40ºC. The application of the Arrhenius equation showed that activation energy from 40º to 42ºC was 165.90 and 107.94 kcal.ºK-1.mol-1 for trehalose and glycogen respectively for PE-2 strain, and 190.64 and 149.87 kcal.ºK-1.mol-1 respectively for SA-1 strain.

Foi verificada a ocorrência de Escherichia coli O157:H7 em 340 amostras de produtos cárneos e ambiente industrial, provenientes de frigoríficos do Sul e Sudeste do Brasil, no período de abril/98 a abril/99. A presença de E.coli O157:H7 não foi detectada em nenhuma das amostras analisadas e os resultados da avaliação da sensibilidade dos métodos de detecção evidenciaram que tanto o método cultural quanto o imunoensaio da Neogem foram capazes de detectar a presença de E.coli O157:H7 em cultura pura em concentrações iniciais de menos de 0,5Log UFC/mL do caldo de enriquecimento.

The occurrence of E.coli O157:H7 was evaluated in 340 samples of meat products and industrial environment of meat manufacturers from the South and Southeast regions of Brazil, from April, 1998 to April, 1999. Pathogen was not detected in any of the samples analysed, and the evaluation of the sensibility of the studied detection methods showed that both, culture and immuno-assay methods detected E.coli O157:H7 in pure culture in initial population levels of 0.5Log CFU/mL of enrichment broth.

O efeito antimicrobiano de vários produtos incluindo formulações comerciais usualmente utilizadas em usinas de açúcar e álcool foi determinado pelo teste da Concentração Mínima Inibitória (CMI) adaptada para Saccharomyces cerevisiae e os contaminantes naturais Lactobacillus fermentum and Leuconostoc mesenteroides. O teste da CMI foi feito pela adaptação do método da Macrodiluição em caldo pela formulação de um meio de cultivo com caldo de cana em condições similares ao mosto da fermentação alcoólica. Penicilina V Ácida (CMI= 0,10-0,20 µg/ml) e clindamicina (CMI = 0,05-0,40 µg/ml) foram os mais efetivos contra o crescimento bacteriano em 24 horas. Entre os produtos químicos, sulfito (CMI = 10-40 µg/ml), nitrito (CMI <117 µg/ml) e sulfato de cobre (CMI = 75-300 µg/ml) foram os mais efetivos. Etileno-bis-ditiocarbamato de zinco e manganês e dimetilditilcarbamato não apresentaram efeito inibitório satisfatório (CMI > 50 µg/ml). Metilditiocarbamato foi eficiente apenas para L. fermentum (CMI= 2,5 µg/ml) e S. cerevisiae (CMI= 5,0 µg/ml). Tiocianato (CMI= 1,2-5,0 µg/ml), bromofenato (CMI= 9-18 µg/ml) e n-alquildimetilbenzil cloreto de amônio (CMI= 1-8 µg/ml) afetaram o crescimento de S. cerevisiae em concentrações inibitórias similares à L. mesenteroides ou L. fermentum. Formaldeido foi mais efetivo contra as bactérias (CMI= 11,5-23 µg/ml) em ambos pHs (4,5 e 6,5) em relação à levedura (CMI= 46-92 µg/ml). Vários biocidas testados afetam seriamente o crescimento de S. cerevisiae, nas dosagens similares àquelas que inibem as bactérias, portanto estes produtos deveriam ser evitados, ou usados somente em condições especiais, para o controle bacteriano do processo de fermentação. Para esta etapa, o controle destes contaminantes por antibióticos é mais apropriado e efetivo.

The antimicrobial effect of several products including commercial formulations currently used in sugar and alcohol factories was determined by adapted MIC (Minimal Inhibitory Concentration) test on Saccharomyces cerevisiae and on natural contaminants Lactobacillus fermentum and Leuconostoc mesenteroides. The MIC test by macrodilution broth method was adapted by formulating of the culture medium with cane juice closely simulating industrial alcoholic fermentation must. Acid penicillin V (MIC 0.10-0.20 µg/ml) and clindamycin (MIC 0.05-0.40 µg/ml) were most effective against bacterial growth in 24 h. Among the chemicals, sulphite (MIC 10-40 µg/ml), nitrite (MIC <117 µg/ml) and copper sulphate (75-300 µg/ml) were the most effective. Zinc and manganese ethylene-bis-dithiocarbamate and dimethyldithiocarbamate did not show good inhibitory effect on bacteria (MIC > 50 µg/ml). Methyldithiocarbamate was efficient only on L. fermentum (MIC 2.5 µg/ml) and S. cerevisiae (MIC 5.0 µg/ml). Thiocianate (MIC 1.2-5.0 µg/ml), bromophenate (MIC 9-18 µg/ml) and n- alkyldimethylbenzylammonium cloride (MIC 1-8 µg/ml) affected S. cerevisiae at similar inhibitory concentration for L. mesenteroides or L. fermentum. Formaldehyde was more effective on bacteria (MIC 11.5 - 23 µg/ml) in both pH (4.5 and 6.5) than yeast (MIC 46-92 µg/ml). Several tested formulated biocides seriously affect S. cerevisiae growth in the similar dosages of the bacterial inhibition, so these products should be avoided or used only in special conditions for the bacterium control of fermentation process. For this step, the control of these contaminants by antibiotics are more suitable and effective.