The objective of this study was to evaluate the effect of pasteurization, lyophilization and spray-drying on the lipid profile of donated human milk (DHM) at different lactation stages. Nine frozen samples of colostrum, transitional and raw mature human milk (HM) were collected from the Human Milk Bank (HMB) of the Hospital Universitário de Maringá (HUM). Samples were thawed and pooled according to lactation stage. Thereafter, it was submitted to pasteurization, lyophilization and spray-drying processes and later the fatty acid (FA) composition and the lipid profile analyses were performed. Gas chromatograph (GC) with flame ionization detector (FID) and electrospray ionization (ESI) mass spectrometer (MS) were used, respectively. In the FA composition analysis, it was observed that the same classes of saturated FA (SFA), monounsaturated FA (MUFA) and polyunsaturated FA (PUFA) were preserved throughout the process and in all lactation stages. The lipid profiles were also preserved after processing. Therefore, the lyophilization and spray-drying processes are promising techniques to preserve the DHM in the HMB, once the components evaluated were preserved, and both techniques facilitate the transport and storage, as the techniques reduce the sample volume.

The cafeteria diet is widely used as a model for inducing obesity in animals, and the zebrafish (Danio rerio) has emerged as a promising model for this purpose. In this context, this study evaluated the effect of a cafeteria diet on the composition of fatty acids in zebrafish fillets. Zebrafish grown in tanks for a period of 60 days were treated with standard (ST) and cafeteria (CAF) diets. The CAF diet presented higher total lipid and energy values than ST diet, due to the addition of peanut, chocolate and biscuit in its preparation. Moreover, CAF diet showed the highest concentrations of palmitic (19.44 ± 0.55 mg g-1), oleic (102.58 ± 2.85 mg g-1) and linoleic (44.47 ± 1.32 mg g-1) acids. A significant increase in oleic and linoleic acid concentrations (39.77 ± 2.69 and 14.31 ± 0.86 mg g-1, respectively) and in the omega-6/omega-3 ratio (11.52 ± 0.81) was observed in the zebrafish fillets between 0 and 60 days for CAF diet, indicating incorporation of these fatty acids.

A análise de polimorfismos únicos de nucleotídeos (SNPs) de citocinas pode ser útil em estudos de frequências alélicas e genotípicas em populações saudáveis de diversas regiões, em estudos de associação com doenças infecciosas ou autoimunes, em estudos antropológicos e na evolução pós-transplante. Estes SNPs podem ser avaliados por diferentes métodos moleculares. O objetivo deste estudo foi aperfeiçoar uma metodologia PCR-SSP simples e rápida para a genotipagem de três SNPs de citocinas usando um único teste laboratorial. Para a identificação de IL2-330T/G e IL2+166G/T foram utilizados dois procedimentos na mesma genotipagem, cada um baseado no uso de quatro iniciadores. Para a detecção de TNF-238G/A foram utilizados dois iniciadores que amplificam a guanina e adenina na posição -238. Este estudo permitiu aperfeiçoar um método simples e rápido para identificar três SNPs de citocinas num único teste, podendo ser utilizado em qualquer laboratório de biologia molecular, como alternativa ao uso de kits de alto custo.

The analysis of cytokine single nucleotide polymorphisms (SNPs) can be useful in studies of allelic and genotypic frequencies in healthy populations from different regions of Brazil, in association studies of infectious or auto-immune diseases, in anthropological studies and in studies on post-transplant evolution. These SNPs can be assessed by different molecular methods. The objective of this study was to improve a simple and fast methodology, PCR-SSP, for the genotyping of three cytokine SNPs using a single laboratorial test. To identify IL2-330T/G and IL2+166G/T, two procedures were used in the same genotyping assay, each one based on the use of 4 primers. To detect TNF-238G/A, two primers were used that amplify guanine and adenine at position -238. This study enabled the improvement of a simple and fast method for identifying three cytokine SNPs in a single test, which can be adopted in any Molecular Biology laboratory as an alternative to the use of expensive kits.

Estudos de vários genes candidatos têm demonstrado que polimorfismos genéticos em genes de citocinas contribuem com variações nos níveis de citocinas produzidas e esta variação pode influenciar a ocorrência e gravidade de complicações após o transplante de células-tronco hematopoéticas (TCTH). Neste trabalho comparamos as concentrações séricas de TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10 e TGF-β 1 em 13 receptores seguindo o TCTH com os polimorfismos TNF-308, IFNG+874, IL6-174, IL10-1082,-819,-592 e TGFB1+869,+915. Os níveis séricos de citocinas foram medidos usando-se kits comerciais de ELISA para TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10 e TGF-β 1 (BioSource®, Nivelles, Belgium, Europe). Os genótipos de doadores/receptores para estes polimorfismos de citocinas foram analisados pela reação em cadeia da polimerase com sequências específicas de primer (PCR-SSP) com o kit Cytokine Genotyping Primers (One Lambda, Canoga Park, CA, USA). Encontramos correlação entre os níveis de IL-6 e IL-10 seguindo o TCTH e os polimorfismos IL6-174 e IL10-1082,-819,-592, mas não para outras citocinas investigadas neste estudo. Aqueles com genótipos relativos à baixa produção de IL-6 e IL-10 produziram mais baixos níveis destas citocinas que aqueles com genótipos relativos à produção alta e/ou intermediária destas citocinas (P < 0,05).

Several candidate gene studies have demonstrated that genetic polymorphisms in cytokine genes contribute to variations in the levels of cytokines produced and this variation may influence the occurrence and severity of complications after stem cell transplantation (HSCT). In this work we compared the serum concentrations of TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10, and TGF-β1 in 13 recipients following HSCT with the TNF-308, IFNG+874, IL6-174, IL10-1082,-819,-592, and TGFB1+869,+915 polymorphisms. Serum cytokine levels were assessed using commercial ELISA kits for TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10, and TGF-β1 (BioSource®, Nivelles, Belgium, Europe). Donor/recipient genotypes for these cytokine polymorphisms were analyzed by polymerase chain reaction-sequence-specific primer (PCR-SSP) with the Cytokine Genotyping Primers Kit (One Lambda , Canoga Park, CA, USA). We found correlation between the levels of IL-6 and IL-10 concentrations following HSCT and the IL6-174 and IL10-1082,-819,-592 polymorphisms, but not for other cytokines investigated in this study. Those with genotypes associated with low production of IL-6 and IL-10 produced lower levels of these cytokines than those with genotypes associated with high or intermediate production of these cytokines (P < 0.05).

O transplante de células progenitoras hematopoéticas é o tratamento de escolha para muitas doenças hematológicas e imunodeficiências primárias. A doença do enxerto contra o hospedeiro (DECH) é ainda uma grave complicação após o transplante alogênico e a principal causa de mortalidade e morbidade. O estudo da patogênese da DECH auxilia no desenvolvimento de medidas preventivas da doença, assim como na escolha de terapias imunossupressoras adequadas de tratamento. Este estudo discute os principais componentes imunológicos envolvidos na patogênese da DECH aguda e crônica, com ênfase à participação das citocinas e seu controle.

Stem cell transplantation is the first line treatment of many hematological diseases and primary immunodeficiencies. Graft-versus-host disease (GVHD) is still a severe complication after allogeneic transplantation and the main cause of mortality and morbidity. The study of the pathogenesis of GVHD may help to develop ways to prevent the disease, as well as to choose adequate immunosuppressant therapies. This study discusses the main immunological components involved in the pathogenesis of acute and chronic GVHD, with emphasis on the participation of cytokines and their control.

Este estudo foi realizado para investigar se os níveis séricos de sIL-2R, TNF-alfa, IFN-gama, IL-6, IL-10 e TGF-beta1 estavam associados com o desenvolvimento de DECH (Doença do Enxerto Contra o Hospedeiro) aguda. Os níveis de citocinas foram seqüencialmente mensurados por Elisa em 13 pacientes que haviam sido submetidos ao transplante alogênico de células progenitoras hematopoiéticas. Os níveis de sIL-2R e IL-10 da 1ª a 15ª semanas pós-transplante foram significativamente maiores no grupo que desenvolveu DECH aguda que naquele sem a doença. Os níveis de sIL-2R aumentaram em direta correlação com a pega do enxerto e ao tempo do DECH aguda, enquanto os níveis de IL-10 aumentaram transitoriamente pós-transplante. A média da concentração de TNF-alfa nas primeiras semanas após o transplante foi maior no grupo que desenvolveu DECH aguda. Além disso, uma queda dos níveis de TGF-beta1 após a pega esteve significativamente associada à DECH aguda. Nenhuma correlação foi encontrada entre DECH aguda e as outras citocinas investigadas. Estes resultados suportam a idéia de que um balanço entre as citocinas derivadas de linfócitos T auxiliadores do tipo 1 e 2 pode ser importante no desenvolvimento e controle da DECH aguda. Embora os níveis de sIL-2R, TNF-alfa, IL-10 e TGF-beta1 tenham sido correlacionados com a DECH aguda, os níveis de sIL-2R ao tempo da pega podem prover um melhor parâmetro para a detecção precoce de DECH aguda após o transplante alogênico.

This study was performed to investigate whether the serum levels of sIL-2R, TNF-alpha, IFN-gamma, IL-6, IL-10, and TGF-beta1 are associated with the development of acute GVHD. Serum cytokine levels were sequentially measured by sandwich Enzyme Linked-Immuno-Sorbent Assay (Elisa) in 13 patients who had received full match allogeneic stem cell transplantation. Serum sIL-2R and IL-10 levels from the 1st to the 15th week post transplantation were significantly higher in the group who developed acute GVHD than in the group without acute GVHD. Soluble IL-2R levels increased in direct correlation to engraftment and onset of acute GVHD, while IL-10 levels increased transiently following transplantation. The mean TNF-alpha concentration in the first weeks after transplantation was augmented in the group that developed acute GVHD. Furthermore, a drop in TGF-beta1 levels after the engraftment was significantly associated to acute GVHD. No correlation was found between acute GVHD and the other evaluated cytokines. These results support the idea that a balance between cytokines derived from type 1 and type 2 T-helper cells may be important in the development and control of acute GVHD. Although sIL-2R, TNF-alpha, IL-10, and TGF-beta1 levels, correlated with acute GVHD, sIL-2R levels at the engraftment may provide a better parameter for the early detection of acute GVHD after allogeneic stem cell transplantation.

Após a transplantação de células progenitoras hematopoiéticas, todos os receptores desenvolvem um período de profunda neutropenia e imunodeficiência que é significativamente responsável pelas graves complicações infecciosas que ocorrem após o transplante. Devido ao intensivo regime de condicionamento pré-transplante, tanto a resposta celular quanto a humoral estão severamente comprometidas. A reconstituição imunológica é um importante componente para o sucesso do transplante, não somente porque os defeitos imunes estão relacionados à morbidade pós-transplante, mas também porque eles podem influenciar o risco de recaída e o desenvolvimento de malignidades secundárias após o transplante. Este estudo apresenta uma revisão sobre as principais variáveis envolvidas na reconstituição imunológica, após o transplante de medula óssea alogênico: uma falta de manutenção da imunidade antígeno-específica do doador, uma deficiência na reconstituição da ontogenia linfóide, as diferenças de histocompatibilidade entre doador e receptor, o efeito da GVHD e suas terapias e, a redução na função tímica do receptor.

After the hematopoietic progenitor cell transplantation, all receptors experience a period of profound neutropenia and immunodeficiency that is responsible for a significant number of the serious infectious complications that can occur after a transplant. Due to the intensive regimen of pre-transplant conditioning, both cellular and humoral responses are greatly affected. Immune reconstitution is an important component of successful bone marrow transplantation, not only because immune defects are related to infectious post-transplant morbidity, but also because they may influence the risk of relapse and the development of secondary malignancies after transplantation. This study gives a revision about the primary variables involved in immunologic reconstitution, after allogeneic bone marrow transplantation: a lack of sustained transference of donor antigen-specific immunity, a deficiency in the lymphoid ontogeny reconstitution, histocompatibility differences between donor and receptor, the effect of GVHD and its therapy, and decreased thymic function of the receptor.

Realizou-se inquérito sorológico e epidemiológico para cisticercose em indivíduos de cinco municípios da região Norte do Estado do Paraná, Brasil. De 2.180 indivíduos investigados através da reação de imunofluorescência indireta, 69 (3,2%) apresentaram títulos significativos de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae. Os percentuais de indivíduos com títulos significativos encontrados em Sarandi (6,6%) e Marialva (4,7%) não diferem estatisticamente (Z=1.319, P=0,0936), mas diferem dos percentuais encontrados em Mandaguaçu, Paiçandu e Maringá (P<0,01). Destes indivíduos, 47,9% estavam na faixa etária de 21 a 49 anos e 79,4% eram do sexo feminino. Foi comum o relato de queixas como "dores de cabeça" (70,6%), "tonturas" (57,4%) e "convulsões" (7,4%), além de história de teníase (22,1%) e hábitos de ingestão de carne crua bovina (41,2%) ou suína (27,9%) e carne com "canjiquinha" (25,0%).

An epidemiological and serological study was carried out on a sample of 2,180 individuals, in five counties in the north of Paraná State - Brazil, using the indirect immunofluorescence test to detect anti-Cysticercus cellulosae antibodies. These individuals, 69 (3.2%) showed significant titers of antibodies. No single significant difference between the proportion of reactivity in Sarandi (6.6%) and in Marialva (4.7%) was observed (Z=1,319, P=0,0936), but it was significantly higher than that observed in Mandaguaçu, Paiçandu and Maringá (P<0.01). Of these individuals, 47.9% were within 21-49 years old and 79.4% were of female sex. "Headache" (70.6%), "faintness" (57.4%), and "convulsions" (7.4%) were among the most frequent by reported, moreover, cases of Taenia infections (22.1%) and the custom of eating uncooked beef (41.2%) or pork (27.9%) and meat containing cysticerci (25.0%) were also related.

Realizou-se inquérito sorológico e epidemiológico para cisticercose em indivíduos de cinco municípios da região Norte do Estado do Paraná, Brasil. De 2.180 indivíduos investigados através da reação de imunofluorescência indireta, 69 (3,2%) apresentaram títulos significativos de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae. Os percentuais de indivíduos com títulos significativos encontrados em Sarandi (6,6%) e Marialva (4,7%) não diferem estatisticamente (Z=1.319, P=0,0936), mas diferem dos percentuais encontrados em Mandaguaçu, Paiçandu e Maringá (P<0,01). Destes indivíduos, 47,9% estavam na faixa etária de 21 a 49 anos e 79,4% eram do sexo feminino. Foi comum o relato de queixas como "dores de cabeça" (70,6%), "tonturas" (57,4%) e "convulsões" (7,4%), além de história de teníase (22,1%) e hábitos de ingestão de carne crua bovina (41,2%) ou suína (27,9%) e carne com "canjiquinha" (25,0%).

An epidemiological and serological study was carried out on a sample of 2,180 individuals, in five counties in the north of Paraná State - Brazil, using the indirect immunofluorescence test to detect anti-Cysticercus cellulosae antibodies. These individuals, 69 (3.2%) showed significant titers of antibodies. No single significant difference between the proportion of reactivity in Sarandi (6.6%) and in Marialva (4.7%) was observed (Z=1,319, P=0,0936), but it was significantly higher than that observed in Mandaguaçu, Paiçandu and Maringá (P<0.01). Of these individuals, 47.9% were within 21-49 years old and 79.4% were of female sex. "Headache" (70.6%), "faintness" (57.4%), and "convulsions" (7.4%) were among the most frequent by reported, moreover, cases of Taenia infections (22.1%) and the custom of eating uncooked beef (41.2%) or pork (27.9%) and meat containing cysticerci (25.0%) were also related.