Resumo As orquídeas, com sua grande variedade de espécies, são de grande importância ao comércio global de flores. Papilionanthe Miss Joaquim, conhecida como orquídea híbrida, também reconhecida como flor oficial nacional de Cingapura é uma orquídea resiliente, amante do sol, que floresce durante todo o ano. Embora uma vagem derivada de uma única flor contenha milhões de sementes semelhantes a um pó muito fino, devido à ausência de endosperma, as sementes não podem germinar sem a ajuda de um fungo simbionte. A produção comercial de mudas, portanto, continua sendo um desafio. Portanto, neste estudo, relata-se um novo protocolo de germinação de sementes assimbióticas padronizado para Papilionanthe Miss Joaquim’ (um híbrido de Papilionanthe hookeriana x Papilionanthe teres) que pode ser adaptado para cultivo em massa em uma escala comercial. Sementes de Papilionanthe Miss Joaquim foram tratadas com 0,1% H2O2 e 0,1% KNO3 para aumentar as taxas de germinação. As vagens de sementes também foram submetidas a vários métodos de esterilização de superfície para reduzir contaminações. Empregando Carbendazim (1% P/V), Triciclazol (1% p v-1), Hipoclorito de Sódio (0,5% v v-1) e Etanol (80% v v-1) no processo de esterilização de superfície, resultou em maior porcentagem de culturas assépticas. As sementes foram inoculadas em meio Murashige e Skoog (MS) suplementado com 3 mg L-1 de BAP (6-Benzilaminopurina), + 0,5 mg L-1 de NAA (ácido 1-Naftalenoacético) e combinação de ácido 2,4-Diclorofenoxiacético (2,4-D) de 3 mg L-1 de BAP (6-Benzilaminopurina) + 0,5 mg L-1 de NAA (ácido 1-naftalenoacético) mostrou-se mais eficaz para induzir a germinação (84,67 ± 3,2%). Posteriormente, as plântulas germinadas foram submetidas a diferentes níveis de BAP e NAA para atingir o maior número de plântulas. Essas plântulas foram multiplicadas e posteriormente subcultivadas em meio MS contendo 0,5 mg L-1 de BAP e 3 mg L-1 de NAA para induzir o enraizamento. As mudas obtidas foram aclimatizadas em substrato contendo casca de coco e pedaços de carvão.
Abstract Orchids with their sheer variety of species are amazing, a major sharer in global floriculture trade. Papilionanthe Miss Joaquim, well known hybrid orchid, also recognized as official National flower of Singapore is a resilient, sun loving orchid, which blossoms throughout the year. Though a seed pod derived from a single flower contains millions of dusty seeds, due to lack of endosperm, seeds cannot germinate without the help of symbiont fungus. Commercial production of seedlings thus remains challenging. Therefore, in this study, we report a novel asymbiotic seed germination protocol standardized for ‘Papilionanthe Miss Joaquim’ (a hybrid of Papilionanthe hookeriana x Papilionanthe teres) which could be adapted for mass cultivation in a commercial setup. Seed of Papilionanthe Miss Joaquim were treated with 0.1% H2O2 and 0.1% KNO3 to increase the germination rates. Seed pods were also subjected to various regimes of surface sterilization methods to reduce contaminations. Employing Carbendazim (1% w v-1), Tricyclazole (1% w v-1), Sodium hypochlorite (0.5% v v-1) and Ethanol (80% v v-1) in surface sterilization process, resulted in highest percentage of aseptic cultures. Seeds were inoculated on to Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with BAP (6-Benzylaminopurine), NAA (1-Naphthaleneacetic acid) and 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) combination of 3 mg L-1 BAP (6-Benzylaminopurine) + 0.5 mg L-1 NAA (1-Naphthaleneacetic acid) found to be most effective to induce germination (84.67 ± 3.2%). Subsequently, germinated seedlings were subjected to different levels of BAP and NAA levels to achieve the highest number of plantlets. thus, multiplied plantlets were later subcultured onto MS medium containing 0.5 mg L-1 BAP and 3 mg L-1 NAA to induce rooting. Consequently, developed plantlets were acclimatized on a substratum containing coconut husk and charcoal pieces.
