RESUMO: O diagnóstico definitivo da leptospirose canina é geralmente realizado demonstrando a seroconversão em amostras do paciente no período agudo e de convalescença por serologia. No entanto, a aplicação de técnicas de PCR pode contribuir para a confirmação de casos suspeitos num período de tempo mais curto. O objetivo deste estudo foi avaliar dois ensaios de PCR publicados em humanos (PCR-lipL32 em tempo real e PCR-rrs convencional) em culturas puras e em amostras de sangue com anticoagulante, soro e urina experimentalmente contaminados. Posteriormente, investigamos a utilidade de ambos os ensaios de PCR em amostras clínicas de cães com suspeita de leptospirose tomando a técnica de microaglutinação (MAT) como referência. A sensibilidade analítica foi de 1 e 10 genoma equivalente por reação para PCR-lipL32 em tempo real e para PCR-rrs convencional, respectivamente. Ambos os ensaios amplificaram corretamente as 14 estirpes patogênicas, mas foram negativos para avaliar o ADN de outros microrganismos que poderiam estar presentes em amostras clinicas. Em nas amostras experimentalmente contaminadas PCR-LipL32 em tempo real detectou 100 bactérias/mL em sangue total, 1000 bactérias/mL em soro e 10 bactérias/mL em urina. Enquanto o PCR-rrs convencional detectou 1000 bactérias/mL em sangue total e soro e 100 bactérias/mL na urina. Dos 51 cães suspeitos, sete foram considerados casos confirmados pela MAT. O PCR-lipL 32 em tempo real detectou seis dos sete casos confirmados, enquanto o PCR-rrs convencional foi positivo em quatro deles. As técnicas de PCR avaliadas provaram ser uma ferramenta de diagnóstico útil na confirmação de casos clínicos caninos quando utilizados em conjunto com a técnica MAT.

ABSTRACT: Canine leptospirosis is definitely diagnosed by demonstrating seroconversion in paired serum samples from the acute and convalescent period by the microagglutination test (MAT). However, the application of a polymerase chain reaction (PCR) assay can provide earlier confirmation of suspected cases. The objective of this study was to evaluate two PCR assays used in diagnosis of human leptospirosis (lipL32 real-time PCR and rrs conventional PCR) in cultured microorganisms and experimentally contaminated samples (whole blood, serum, urine), and investigate their applicability in clinical samples from dogs with presumptive diagnosis of leptospirosis by using the MAT as a reference. The analytical sensitivity of the lipL32 real-time PCR was 1 genome equivalent per reaction, whereas that for the rrs conventional PCR was 10 genome equivalents per reaction. Both assays amplified the pathogenic strains but were negative when evaluating the DNA of other microorganisms that may be present in clinical samples. The lipL32 real-time PCR detected 100 bacteria/mL in whole blood samples, 1000 bacteria/mL in serum samples and 10 bacteria/mL in urine samples, whereas the rrs conventional PCR detected 1000 bacteria/mL in whole blood and serum samples and 100 bacteria/mL in urine samples. Seven out of the 51 samples from dogs with presumptive diagnosis of leptospirosis were considered as confirmed cases. ThelipL32 real-time PCR detected positive results in six of the seven confirmed cases, whereas the rrs conventional PCR detected four. The PCR assays evaluated proved to be useful diagnostic tools in the confirmation of canine leptospirosis when used together with the MAT.

Epidemiological data related to Latrodectus bites over a 10-year period (1979-1988) in Buenos Aires Province, Argentina, are presented. Data on distribution of accidents by year, month, sex, residence of person bitten and general symptomatology are given. Statistical analysis showed a mean of 28.1 bites cases per year, 80% in males, most of whom were farm workers. The Latrodectus bites were localized in arms, pelvic waist and legs. Forty-six per cent of bitten persons visit the clinic within 1 to 3 hours after the incident, and only 15% capture the animal responsible for the accident.

El presente trabajo tiene por objeto dar a conecer los resultados del Latrodectismo y su tratamiento especifico, durante un periodo de 10 años (1979-1988) en la Provincia de Buenos Aires. Se suministran datos de la distribución de casos por año, por meses, incidencia según sexo, residencia del accidentado, región corporal de la picadura, sintomatologia presentada, tiempo transcurrido entre el accidente y la aplicación del suero antilatrodectus y captura del animal agresor. Con respecto al año se produjo um pico entre 1982 y 1983 con 38 accidentes, correspondiendo al periodo de 10 años una media de 28,1 accidentes anuales los que presentan mayor incidencia de diciembre a marzo. Con respecto al sexo y residencia del accidentado un 80% corresponde a hombres, siendo principalmente trabajadores rurales los afectados. El mayor porcentaje de accidentados se produjo en antebrazos, cintura pélvica y muslos. Con respecto al tiempo transcorrido desde el accidente hasta la aplicación del suero, el 46% lo realiza entre las tres primeras horas. Sólo un 15% capturó al animal agresor.

São relatados os resultados do latrodectismo e seu tratamento específico durante um período de 10 anos (1979-1988), em Buenos Aires, Argentina. São evidenciados dados de distribuição de acidentes por ano, meses, por sexo, residência do acidentado, região corporal da picada, sintomas apresentados, tempo transcorrido entre o acidente e a aplicação do soro antilatrodectus e a captura do animnal agressor. Observou-se um pico entre 1982 e 1983 com 83 acidentes e uma média de 28,1 acidentes anuais, com maior índice de dezembro a março. Com respeito ao sexo e local de residência do acidentado, 80% corresponde a homens, sendo principalmente trabalhadores rurais os mais afectados. A maior percentagem dos acidentes localizou-se no antebraço, cintura pélvica e coxa. Com respeito ao tempo transcorrido desde o acidente até a aplicação do soro, 46% foi realizado entre as três primeiras horas, sendo que foram capturados apenas 15% dos animais agressores.

São relatados os resultados do latrodectismo e seu tratamento específico durante um período de 10 anos (1979-1988), em Buenos Aires, Argentina. São evidenciados dados de distribuição de acidentes por ano, meses, por sexo, residência do acidentado, região corporal da picada, sintomas apresentados, tempo transcorrido entre o acidente e a aplicação do soro antilatrodectus e a captura do animnal agressor. Observou-se um pico entre 1982 e 1983 com 83 acidentes e uma média de 28,1 acidentes anuais, com maior índice de dezembro a março. Com respeito ao sexo e local de residência do acidentado, 80% corresponde a homens, sendo principalmente trabalhadores rurais os mais afectados. A maior percentagem dos acidentes localizou-se no antebraço, cintura pélvica e coxa. Com respeito ao tempo transcorrido desde o acidente até a aplicação do soro, 46% foi realizado entre as três primeiras horas, sendo que foram capturados apenas 15% dos animais agressores.

Epidemiological data related to Latrodectus bites over a 10-year period (1979-1988) in Buenos Aires Province, Argentina, are presented. Data on distribution of accidents by year, month, sex, residence of person bitten and general symptomatology are given. Statistical analysis showed a mean of 28.1 bites cases per year, 80% in males, most of whom were farm workers. The Latrodectus bites were localized in arms, pelvic waist and legs. Forty-six per cent of bitten persons visit the clinic within 1 to 3 hours after the incident, and only 15% capture the animal responsible for the accident.

El presente trabajo tiene por objeto dar a conecer los resultados del Latrodectismo y su tratamiento especifico, durante un periodo de 10 años (1979-1988) en la Provincia de Buenos Aires. Se suministran datos de la distribución de casos por año, por meses, incidencia según sexo, residencia del accidentado, región corporal de la picadura, sintomatologia presentada, tiempo transcurrido entre el accidente y la aplicación del suero antilatrodectus y captura del animal agresor. Con respecto al año se produjo um pico entre 1982 y 1983 con 38 accidentes, correspondiendo al periodo de 10 años una media de 28,1 accidentes anuales los que presentan mayor incidencia de diciembre a marzo. Con respecto al sexo y residencia del accidentado un 80% corresponde a hombres, siendo principalmente trabajadores rurales los afectados. El mayor porcentaje de accidentados se produjo en antebrazos, cintura pélvica y muslos. Con respecto al tiempo transcorrido desde el accidente hasta la aplicación del suero, el 46% lo realiza entre las tres primeras horas. Sólo un 15% capturó al animal agresor.