A fisiologia de B. subtilis R14 foi investigada em meio mínimo em condições de excesso e limitação de oxigênio. Crescimento e esporulação eficientes foram obtidas em culturas com excesso de oxigênio em meio contendo fontes de carbono e nitrogênio de fácil assimilação, que permitiram alta taxa de crescimento e alto rendimento em biomassa. Uma fase de transição curta, entre o crescimento exponencial e a esporulação, pode ser obtida pela formulação de um meio com razão C/N balanceada. Sob limitação de oxigênio, mas em presença de nutrientes essenciais, B. subtilis R14 produziu compostos bioativos. Os compostos apresentaram atividade contra várias bactérias fitopatogênicas. Sob condição de anaerobiose, o microrganismo não cresceu, nem através de fermentação nem de respiração anaeróbica. A adição de piruvato ao meio permitiu o crescimento, tanto através de fermentação como de respiração anaeróbica. O conhecimento adquirido neste trabalho é relevante tanto para o projeto do processo de produção quanto para a formulação de um produto comercial eficiente para biocontrole.

The physiology of B. subtilis R14 was investigated in minimal medium under excess-oxygen and oxygen-limited conditions. Growth and efficient sporulation could be achieved in excess-oxygen culture on medium with readily metabolizable carbon and nitrogen sources, which allowed high growth rate and high biomass yield. A short transition phase between the exponential growth and sporulation could be attained by formulating a medium with a well-balanced C/N ratio. Under oxygen-limitation, but in the presence of essential nutrients (i.e. excess-nutrient cultivation), B. subtilis R14 produced bioactive compounds, which showed activity against several phytopathogenic bacteria. Under anaerobic condition, the organism did not grow neither through fermentation nor anaerobic respiration. However, addition of pyruvate to the medium allowed its growth through fermentation and anaerobic respiration. The knowledge acquired in this work could be relevant both for the design of a production process as well as for the formulation of an effective commercial biocontrol product.

Os fragmentos florestais são considerados os únicos redutos detentores de biodiversidade do planeta. Conhecer os processos que decorrem após a fragmentação, a exemplo da estrutura arbórea ocorrente na borda, é de fundamental importância para se proporem medidas conservacionistas. Os objetivos deste trabalho, desenvolvido em uma área de 83,8 ha, localizada no Município de Nazaré da Mata, PE, foram efetuar o levantamento fitossociológico de espécies arbóreas adultas sob efeito de borda e verificar a similaridade florística entre as parcelas. A área amostral foi de 10.000 m², equivalentes à implantação de 10 transectos de 10 x 100 m perpendiculares à borda, distribuídos de forma sistemática. Foram amostrados, etiquetados e identificados todos os indivíduos arbóreos com CAP e" 15 cm. Posteriormente, realizaram-se os cálculos dos parâmetros fitossociológicos e da similaridade florística. Neste estudo, amostraram-se 1.238 indivíduos, pertencentes a 72 táxons, distribuídos em 26 famílias botânicas. As espécies Campomanesia xanthocarpa, Zanthoxylum rhoifolium e Anadenanthera colubrina apresentaram o maior valor de importância, pois, teoricamente, conseguiram explorar melhor o recurso proporcionado pelo hábitat.

Forest fragments are considered the last refuges for biodiversity in the planet. Knowing the processes that occur after fragmentation, such as the tree structure that occurs in the edge, is fundamental to propose conservationist measures. The objective of this work was to carry out a phytosociological survey of adult tree species under edge effect and verify the floristic similarity among the plots. The work was developed in an area of 83,8 ha located in the municipality of Nazaré da Mata - PE. The sample area comprised 10.000 m², equivalent to the implantation of 10 contiguous transects of 10 x 100 m perpendicular to the edge. All tree individuals with CAP e" 15 cm were sampled, labeled and identified. Afterward, phytosociological parameters and the floristic similarity were calculated. In this study, 1238 individuals, belonging to 72 táxons and distributed into 26 botanical families were sampled. The species Campomanesia xanthocarpa, Zanthoxylum rhoifolium, and Anadenanthera colubrina, showed the largest importance value, as theoretically, they managed to better exploit habitat resources.

In this work, four different process configurations, including three simultaneous saccharification and fermentation (SSF) schemes and one separate hydrolysis and fermentation (SHF) scheme, were compared, at 8% water-insoluble solids, regarding ethanol production from steam-pretreated and alkali-delignified sugar cane bagasse. Two configurations included a 16 h lasting enzymatic presaccharification prior to SSF, and the third one was a classical SSF without presaccharification. Cellulose conversion was higher for the delignified bagasse, and higher in SSF experiments than in SHF. The highest cellulose-to-ethanol conversion (around 60% in 24 h) and maximum ethanol volumetric productivities (0.29-0.30 g/L.h) were achieved in the presaccharification-assisted SSF.

In this work, a methodology for the characterization of sugar cane bagasse was validated. Bagasse pre-treated with steam in a 5000 L reactor at a pressure of 15.3 kgf/cm², during 7 min, was used to test the methodology. The methodology consisted of the hydrolysis of the material with H2SO4 at 72% v/v, for the quantification of carbohydrates, organic acid, furfural and hydroxymethylfurfural by HPLC; insoluble lignin and ash by gravimetry; and soluble lignin by spectrophotometry. Linearity, repeatability, reproducibility and accuracy of the results obtained in two Research Laboratories were determined, and were considered to be suitable for the validation of the methodology.

Os lipopeptídeos representam uma classe de surfactantes microbiológicos com crescente interesse científico, terapêutico e biotecnológico. O gênero Bacillus é um dos maiores produtores destes compostos ativos. Dentre as espécies produtoras de biossurfactante, B. subtilis produz surfactina um dos mais conhecidos. Estes compostos atuam como antibióticos, antivirais, agente antitumorais, imunomoduladores e inibidores enzimáticos. O objetivo deste trabalho foi determinar a atividade antimicrobiana de biossurfactantes, obtidos pelo cultivo de B. subtilis R14, frente a bactérias multidroga-resistentes. Durante o cultivo em meio quimicamente definido, a tensão superficial do meio foi reduzida de 54 mN/m no início do crescimento microbiano para 30 mN/m depois de 20 h. Uma concentração de surfactante bruto de 2 g/L foi obtida depois de 40h de cultivo. Uma caracterização preliminar sugeriu que dois surfactantes foram produzidos. A avaliação antimicrobiana destes compostos foi realizada frente a vinte e nove bactérias. O perfil de multidroga-resistência foi previamente definido para Enterococcus faecalis (11 cepas) Staphylococcus aureus (6 cepas), Pseudomonas aeruginosa (7 cepas) e Escherichia coli IC18. Todas as cepas foram sensíveis aos surfactantes, em particular Enterococcus faecalis. Os resultados demonstraram que os lipopeptídios têm um amplo espectro de ação, incluindo microrganismos multidroga-resistentes.

Lipopeptides represent a class of microbial surfactants with increasing scientific, therapeutic and biotechnological interests. The genus Bacillus is a producer of these active compounds, and among them B. subtilis produces surfactin, the most potent biosurfactant known. These compounds can act as antibiotics, antivirals, antitumorals, immunomodulators and enzyme inhibitors. In this work, the antimicrobial activity of biosurfactants obtained by cultivation of B. subtilis R14 was investigated against multidrug-resistant bacteria. During cultivation in defined medium, the surface tension of the medium was reduced from 54 mN/m in the beginning of the microbial growth to 30 mN/m after 20 hours. A crude surfactant concentration of 2.0 g/L was obtained after 40 hours of cultivation. A preliminary characterization suggested that two surfactants were produced. The evaluation of the antimicrobial activity of these compounds was carried out against 29 bacteria. Enterococcus faecalis (11 strains), Staphylococcus aureus (6 strains) and Pseudomonas aeruginosa (7 strains) and Escherichia coli CI 18 (1 strain) displayed a profile of well defined drug resistance. All strains were sensitive to the surfactants, in particular Enterococcus faecalis. The results demonstrated that lipopeptides have a broad spectrum of action, including antimicrobial activity against microorganisms with multidrug-resistant profiles.

Paclobutrazol is a plant growth retardant which is used world-wide for increasing the yield of cereal crops. However, this compound remains active in the soil for several years and can severely affect the growth and development of subsequent crops, mainly by reducing vegetative vigor. The aim of this work was to develop and validate methods for the determination of paclobutrazol concentrations by both high performance liquid chromatography and spectroscopy. Both methods were satisfactory and showed appropriately low quantification limits. The determination by spectroscopy has, however, the advantage of being a method significantly less expensive than high performance liquid chromatography.

A mancha-aquosa, causada por Acidovorax avenae subsp. citrulli (Aac) causa grandes prejuízos à cultura do melão. O controle dessa doença foi estudado in vivo, com microbiolização de sementes de melão Amarelo infectadas, com líquidos fermentados de Bacillus subtilis R14, B. megaterium pv. cerealis RAB7, B. pumilus C116 e Bacillus sp. MEN2, com e sem células bacterianas. O mecanismo de ação dos isolados foi estudado in vitro pelo método de difusão em ágar e os compostos bioativos parcialmente caracterizados por testes de hemólise e atividade surfactante. Nos testes in vivo, não houve diferença significativa entre os tratamentos com e sem células, indicando que o controle ocorreu devido à presença de compostos bioativos produzidos durante as fermentações. Todos os tratamentos diferiram da testemunha sem diferir entre si (P=0,05%). B. megaterium pv. cerealis RAB7 proporcionou redução da incidência (89,1%) e do índice de doença (92,7%), elevou o período de incubação da mancha-aquosa de 9,8 para 11,9 dias e reduziu a AACPD de 3,36 para 0,17. In vitro, todos isolados apresentaram antibiose contra Aac e os compostos bioativos foram parcialmente caracterizados como lipopeptídeos.

The bacterial fruit blotch, caused by the bacterium Acidovorax avenae subsp. citrulli (Aac), is responsible for great losses in melon production. The control of this disease was investigated in vivo by treating infected yellow melon seeds with fermented broths of B. subtilis R14, B. megaterium pv. cerealis RAB7, B. pumilus C116 and Bacillus sp. MEN2, with and without bacterial cells. The mechanism of action of the strains was studied in vitro by the agar diffusion technique. The bioactive compounds produced were partially characterized by hemolysis test and surfactant activity. Regarding the tests conducted in vivo there was no statistical difference between the treatments with and without bacterial cells, which indicated that the control was due to the presence of bioactive compounds produced during fermentations. All treatments were different from the control (P = 0.05%) but they did not differ among them. The B. megaterium pv. cerealis RAB7 reduced disease incidence (89.1%), disease index (92.7%), increased the incubation period from 9.8 to 11.9 days and reduced the area under disease progress curve from 3.36 to 0.17. In the in vitro tests, all strains showed antibiosis against Aac and the bioactive compounds were partially characterized as lipopeptides.

Investigação sobre o antagonismo de oito isolados de Bacillus: B. subtilis R14, B. megaterium pv. cerealis RAB7, B. megaterium pv. cerealis C211, B. megaterium C116, Bacillus sp. RAB9, B. cereus C240, Bacillus sp. C11 e B. cereus C210, contra nove linhagens de X. campestris pv. campestris (bactéria responsável pela podridão negra das crucíferas) foi realizada para se verificar a participação de lipopeptídeos neste mecanismo. Testes de atividades antimicrobiana e hemolítica (surfactante) foram realizados, utilizando-se o método de difusão em ágar. Antibiose e hemólise foram positivas para quatro isolados de Bacillus: R14, RAB7, C116 e C210. A correlação observada entre as atividades antimicrobiana e a hemolítica indica que lipopeptídeos estão envolvidos no mecanismo de antibiose dos isolados investigados. As fermentações foram realizadas com os isolados que demonstraram melhores resultados nos testes de atividades antimicrobiana e hemolítica: R14, RAB7 e C116, para acompanhar o crescimento e a produção de compostos bioativos e surfactantes. As fermentações foram realizadas em mesa agitadora, usando frascos Fernbach. A produção de compostos bioativos e tensoativos foi observada durante a fase final de crescimento dos isolados Bacillus estudados.

The antagonism of eight Bacillus isolates was investigated against nine strains of Xanthomonas campestris pv. campestris (causal agent of crucifers black rot) to assess the role of lipopeptides in this process. Antimicrobial and hemolytic (surfactant) activity tests were performed in vitro using agar diffusion methods. Antibiosis and hemolysis were positive for four Bacillus isolates against all X. campestris pv. campestris strains. The correlation observed between antimicrobial and hemolytic activities indicated that lipopeptides were involved in the antibiosis mechanism of the studied antagonists. Fermentation studies were carried out with the isolates that showed highest antimicrobial and hemolytic activities, to follow up growth and production of bioactive and surfactant compounds. Production of bioactive and surfactant compounds was observed during the late growth phase of the Bacillus isolates.

As antraciclinas têm sido estudadas intensamente devido à importância destas como agentes anticancerígenos. Neste trabalho, foi investigada a produção de ciclamicina, um complexo antitumoral da classe das antraciclinas, produzido por Streptomyces capoamus. O meio de fermentação consistiu de glicose, como principal fonte de carbono, e leite de soja, como única fonte de nitrogênio. Os experimentos foram realizados em um biorreator descontínuo de 5 litros, sob condições limitantes de carbono e de nitrogênio. Crescente atividade antibiótica, intra e extracelular, foi observada durante o crescimento nas duas condições de limitação nutricional. Em ambos os casos, foi observada perda progressiva de atividade antibiótica após a exaustão de glicose do meio. Os resultados obtidos mostraram que o final do processo em batelada deve ser controlado pelo nível de glicose presente no meio e o nitrogênio deve ser, preferencialmente, o substrato limitante do processo. Alternativamente, os resultados indicam que a extensão da produção poderia ser realizada em batelada alimentada com nitrogênio como substrato limitante.

Anthracyclines have been intensely studied worldwide due to their importance as anticancer agents. In this work investigation was made on the production of ciclamycin, an antitumour complex of the anthracycline class, produced by Streptomyces capoamus. The fermentation medium consisted of glucose, as the main carbon source, and soymilk, as the sole nitrogen source. Experiments were performed in a 5-liter batch bioreactor under nitrogen and carbon-limiting conditions. Increasing antibiotic activity was observed both intra and extracellularly during growth under the two conditions used. Progressive loss of activity occurred in both cases after glucose was depleted from the medium. The results obtained showed that harvest of ciclamycin in a batch process should be controlled by the level of glucose in the reactor and that nitrogen should preferably be the limiting substrate. Alternatively, results indicate that extended production might be achieved in a fed-batch process where nitrogen was the limiting substrate.