RESUMO: A síndrome da vaca caída (SVC) é caracterizada por um bovino alerta que mostra incapacidade ou relutância em permanecer em estação por 12 horas ou mais. O objetivo deste trabalho é relatar os achados clínicos, laboratoriais e patológicos em uma novilha Guzerá com rabdomiólise, pigmentúria e insuficiência renal aguda após a SVC. Uma novilha da raça Guzerá, de 17 meses de idade, foi transportada de caminhão por 350 km e apresentou decúbito esternal, grande dificuldade para assumir estação e caminhar. O exame neurológico não demonstrou alterações, e a novilha possuía resposta normal aos testes de nervos cranianos e medula espinhal. A palpação retal revelou útero grávido de cinco meses. Nenhuma outra anormalidade foi observada na pelve ou na região das articulações coxofemorais. As anormalidades bioquímicas incluíram atividades de enzimas musculares (creatina fosfoquinase e aspartato aminotransferase) extremamente aumentadas e níveis elevados de creatinina. A urinálise revelou urina enegrecida e turva, proteinúria e teste de sangue oculto positivo. O exame ultrassonográfico da medula espinhal não apresentou anormalidades. Este relato evidencia uma apresentação clínica (mioglobinúria) e achados patológicos incomuns em uma novilha com SVC em consequência de extensa lesão muscular compressiva. Veterinários e produtores devem estar atentos aos riscos do transporte rodoviário descuidado por longas distâncias de bovinos, especialmente vacas obesas, evitando assim sofrimento e despesas desnecessárias decorrentes da SVC.

ABSTRACT: The downer cow syndrome (DCS) is characterized by an alert cow showing inability or reluctance to stand for 12 hours or more. This paper reported clinical, laboratory, and pathological findings in a Guzerá heifer with rhabdomyolysis, pigmenturia and acute renal failure following DCS. A 17-month-old Guzerá heifer was transported via a 350-km ride in a truck and showed sternal recumbency and severe difficulty in standing and walking. Neurological examination was unremarkable, and the heifer presented normal response to cranial nerves and spinal cord tests. Rectal palpation revealed a 5-month gravid uterus. No other abnormalities were noted in the pelvis or around the coxofemoral joints. Biochemical abnormalities included extremely high muscular enzyme activities (creatine phosphokinase and aspartate aminotransferase) and high creatinine levels. Urinalysis revealed blackish and cloudy urine, proteinuria, and a positive occult blood test. Spinal cord ultrasonography showed no abnormalities. This report highlighted an uncommon clinical presentation (myoglobinuria) and pathological findings in a heifer with DCS as a consequence of severe compressive muscle damage. Practitioners and producers must be aware of the risk of careless road transportation for long distances of cattle, especially obese cows, avoiding unnecessary suffering and expenses due to DCS.

Resumo Niedenzuella (Tetrapterys) multiglandulosa, uma videira encontrada no Brasil, tem sido correlacionada a surtos de intoxicações em bovinos e búfalos, gerando perdas econômicas relacionadas à morte por insuficiência cardíaca, aborto, natimorto e mortalidade neonatal. O objetivo deste estudo foi examinar o potencial embriotóxico do extrato vegetal aquoso em embriões bovinos in vitro. O estudo in vitro foi realizado em cinco repetições de cultura de embriões bovinos distribuídos em dois grupos: controle, meio de cultura de embriões in vitro sem o extrato aquoso da planta; grupo tratado, com adição de 2,7mg / mL de extrato vegetal aquoso (10%) à cultura do embrião no sexto dia de cultivo. A taxa de clivagem foi avaliada no dia 2 da cultura de células. Viabilidade, eclodibilidade e subdesenvolvimento de blastocistos no sétimo, oitavo e nono dia (D7, D8 e D9, respectivamente) de cultura foram avaliados em microscópio estereoscópico. No dia 7, os blastocistos foram submetidos ao ensaio TUNEL para determinar o índice apoptótico. Observamos redução significativa da produção de blastocisto / número de embriões clivados (60,6% vs 41,5%); redução da produção de blastocistos / número total de oócitos bovinos maturados (35,1% vs 21,3%); e taxas de eclosão embrionária (38,0% vs 10,0%). No entanto, nenhum efeito foi observado na taxa de apoptose. Em conclusão, o extrato aquoso das folhas de N. multiglandulosa reduz a viabilidade do embrião bovino in vitro, sugerindo possíveis efeitos prejudiciais no desenvolvimento embrionário.

Abstract Niedenzuella (Tetrapterys) multiglandulosa, a vine plant found in Brazil, has been correlated to outbreaks of poisoning in cattle and buffaloes, generating economic losses related to the death due to heart failure, miscarriage, abortion, stillbirth, and neonatal mortality. The aim of this study was to examine the embryotoxic potential of the aqueous plant extract on in vitro bovine embryos. In vitro study was performed in five replicates of bovine embryo culture assigned in two groups: control, in vitro embryo culture medium without the aqueous plant extract; treated group, with addition of 2.7mg/mL of aqueous plant extract (10%) to the embryo culture on the sixth day of culture. Cleavage rate was evaluated at day 2 of the cell culture. Viability, hatchability and underdevelopment of blastocysts on the seventh, eighth, and ninth days (D7, D8, and D9, respectively) of culture were assessed under stereoscopic microscope. On day 7, blastocysts were submitted to TUNEL assay to determine apoptotic index. In vitro exposure of bovine embryos to of N. multiglandulosa resulted in reduced embryo development and survival, evaluated by dark cytoplasm indicating poor morphology and poor quality with marked reduction of hatchability. We observed a significant reduction of blastocyst production/number of cleaved embryos (60.6% vs 41.5%); reduction of blastocysts production/total number of matured bovine oocytes (35.1% vs 21.3%); and embryonic hatching rates (38.0% vs 10.0%). However, no effects were observed on the apoptotic rate. In conclusion, aqueous extract of N. multiglandulosa leaves reduces bovine embryo viability in vitro, suggesting possible detrimental effects on embryo development.

Resumo Este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia das células-tronco mesenquimais (CTMs), isoladas ou associadas à dapsona (DAP), no tratamento de feridas dermonecróticas causadas pelo veneno de Loxosceles laeta. Vinte e cinco coelhos machos foram distribuídos em cinco grupos. O controle negativo recebeu água ultrapura (C-), enquanto todos os outros grupos foram injetados com 20 μg de veneno de L. laeta. Após 4 horas, cada grupo recebeu um dos seguintes tratamentos: PBS (C+), DAP, CTMs e DAP + CTMs. Os animais foram avaliados diariamente durante 12 dias, e feitos registros fotográficos para análise da ferida e no 12º dia, foram eutanasiados e, retiradas amostras de pele para análise histológica. Observou-se que a DAP apresentou o melhor percentual de contração da ferida no terceiro dia. Nos tratamentos com CTMs, observou-se uma contração negativa da ferida tanto para as CTMs isoladas, bem como a associação CTMs + DAP em relação ao PBS, possivelmente, pelo aumento da infamação inicial após a aplicação de células-tronco. Isso é devido ao fato de que as CTMs secretam um amplo espectro de moléculas bioativas como citocinas e fatores de crescimento que favorecem a regeneração. Histologicamente, observou-se que os animais de C+ apresentaram extensas áreas de necrose, úlceras, infiltrado neutrofílico, além de mineralização. Houve aumento de deposição de colágeno no tratamento CTMs + DAP, no entanto, a vascularização permaneceu inalterada. Este é o primeiro relato usando CTMs e CTMs + DAP como tratamento para loxoscelismo cutâneo e mais estudos são necessários para determinar seu uso como terapia alternativa para lesões demonecróticas causadas pela aranha Loxosceles.

Abstract This study aimed to evaluate the efficacy of mesenchymal stem cells (MSC), alone or associated with dapsone (DAP), in treating dermonecrotic wounds caused by Loxosceles laeta venom. Twenty-five male rabbits were distributed into five groups. Negative control received ultrapure water (C-), whilst all other groups were injected with 20 μg of L. laeta venom. After 4 hours, each group received one of the following treatments: PBS (C+), DAP, MSC, and DAP+MSC. Animals were evaluated daily and photographic records made for analysis of wound area. Twelve days after, animals were euthanized and skin samples removed for histological analysis. We observed that DAP showed the best percentage of wound contraction at day 3. In the treatments using MSCs, a negative value of wound contraction was observed for the isolated MSCs, as well as a lower contraction value for the association of the MSC + DAP when compared to PBS, probably, by the increase in initial infammation after the application of stem cells, due to the fact that MSCs secrete a broad spectrum of bioactive molecules such as cytokines and growth factors that favor regeneration. Histologically, it was observed that animals of C+ showed extensive areas of necrosis, ulcers, neutrophilic infiltrate, and mineralization. Collagen deposition showed increase in MSC+DAP treatment, however vascularization remained unchanged. This is the first report using MSC and MSC+DAP as a treatment for cutaneous loxoscelism and more studies are needed to determine its use as an alternative therapy for dermonecrotic lesions caused by Loxosceles spider.

RESUMO: A transferência nuclear de células somáticas ou clonagem é uma técnica que permite produzir um indivíduo geneticamente igual a um outro indivíduo adulto. Esta técnica abre inúmeras possibilidades para a medicina e para a reprodução animal. Porém, existem inúmeros relatos de problemas associados à clonagem. A taxa de perda nos períodos embrionário e fetal ainda é muito alta quando comparada a outras biotécnicas; além disso, há uma maior incidência de hidropsias e distocias, diminuindo a eficiência e aumentando o custo da técnica. Os animais que vem a termo frequentemente apresentam uma síndrome chamada de macrossomia, e apresentam dificuldades de adaptação à vida extrauterina e, por isso, o óbito é um desfecho comum. No presente trabalho realizou-se necropsia e coleta de fragmentos de órgãos para avaliação histopatológica de 41 bezerros com óbito neonatal. As lesões macroscópicas mais importantes foram encontradas no fígado (hepatomegalia, congestão e coloração amarelada), rins (coloração amarronzada na superfície e ao corte, e cistos), pulmões (atelectasia, parênquima consolidado, e secreções nos brônquios e bronquíolos), e coração (hipertrofia concêntrica e excêntrica, cistos hemáticos e persistência de ducto arterioso). As principais alterações microscópicas observadas foram presença de pigmento acastanhado no interior dos túbulos corticais renais (aproximadamente 90% dos animais), degeneração hepática (85% das amostras avaliadas) e lesões características de pneumonia (55% dos animais). A pigmentação acastanhada no interior dos túbulos corticais é uma alteração que ainda não havia sido relatada anteriormente em animais clonados. As alterações observadas nestes órgãos foram determinantes para o óbito, e devem ter ocorrido sobretudo devido a problemas na adaptação ao ambiente extrauterino e em decorrência de infecções adquiridas no período neonatal. Os achados encontrados no presente trabalho denotam a necessidade de investigação anatomopatológica detalhada de animais clonados inviáveis, na tentativa de mapear as anormalidades apresentadas por eles.

ABSTRACT: Somatic-cell nuclear transfer is a cloning technique that enables the creation of a viable embryo from a donor adult to produce a genetically identical individual. This technique opens numerous potential possibilities for medicine and animal reproduction. However, several reports have documented cloning-related issues. Embryo and fetal losses remain significantly higher than in other techniques, and there is a high incidence of dystocia and hydrops, which decreases efficiency and increases costs. Animals delivered at term often exhibit a syndrome known as macrosomia and experience difficulties in adapting to life outside the uterus, and death is a common outcome. In the present study, 41 cloned calves that died in the neonatal period were subjected to gross and histopathological examination. Most important gross lesions were found in the liver (enlargement, congestion, yellowish color), kidneys (brownish color at surface and cut, and cysts), lungs (atelectasis, parenchymal consolidation, and secretions in bronchi and bronchioles), and heart (concentric and eccentric hypertrophy, hematic cysts, persistence of ductus arteriosus). Primary microscopic findings were seen in the liver, kidneys, and lungs from neonatal calves. In the liver, 85% of the animals exhibited hepatic degeneration. The presence of a brownish pigment within the cortical tubules of the kidneys was found in approximately 90% of the samples; the presence of this pigment has not been previously reported in cloned calves. In the lungs, a large number of animals exhibiting lesions characteristic of pneumonia (55%). These changes were the pivotal causes of death, mainly due to problems in adapting to life outside the uterus and opportunistic infections in the neonatal period. Further investigation focusing on pathological anatomical changes is necessary to map these abnormalities in cloned animals.

RESUMO: Os ruminantes podem ser afetados por uma grande variedade de doenças do sistema nervoso central (SNC). A análise do líquido cefalorraquidiano (LCR) constitui a base da avaliação diagnóstica ante mortem de ruminantes com sinais clínicos envolvendo o SNC. Apesar de sua importância como ferramenta para auxiliar no diagnóstico, os dados referentes aos exames do LCR em casos espontâneos de doenças do SNC em ruminantes no Brasil são limitados, e, a maioria dos relatos envolve estudos experimentais. Portanto, este trabalho teve como objetivo relatar os resultados da análise do LCR em 58 ruminantes com distúrbios neurológicos. Amostras do LCR foram obtidas de 32 bovinos, 20 ovinos e 6 caprinos por punção da cisterna cerebelo-medular (n=54) ou espaço lombossacro (n=4) para posterior análise. Esses ruminantes apresentaram sinais neurológicos relacionados a infecções virais (n=13), micóticas (n=3) ou bacterianas (n=15), e desordens tóxicas (n=21), traumáticas (n=4) ou congênitas (n=2) A análise do LCR de ruminantes com infecções virais apresentou pleocitose linfocítica, embora, em vários casos de raiva, o LCR não tenha apresentado alterações. Pleocitose neutrofílica, turbidez, presença de coágulos de fibrina e coloração anormal foram evidentes no LCR da maioria dos casos de infecções bacterianas do SNC, como meningoencefalites, meningites, abscessos, mielite e um caso de conidiobolomicose. Por outro lado, o LCR não foi alterado na maioria dos casos dos distúrbios tóxicos, como botulismo e encefalopatia hepática. A densidade elevada no LCR foi observada em 60% dos ruminantes diagnosticados com polioencefalomalácia. Nossos resultados mostram que a avaliação do LCR é uma valiosa ferramenta de diagnóstico, quando usada em associação com os achados epidemiológicos, clínicos e patológicos para o diagnóstico de doenças do SNC em ruminantes.

ABSTRACT: Ruminants may be affected by a wide variety of central nervous system (CNS) diseases. Cerebrospinal fluid (CSF) analysis forms the basis for ante mortem diagnostic evaluation of ruminants with clinical signs involving the CNS. Despite its importance as a tool to aid diagnosis, data regarding CSF examinations in spontaneous cases of CNS diseases in ruminants from Brazil are limited, and most reports involve experimental studies. Therefore, this study aimed to report the results of CSF analysis in 58 ruminants showing signs of neurological disorders. CSF samples for analysis were obtained from 32 cattle, 20 sheep, and 6 goats by cerebello-medullary cistern (n=54) or lumbosacral space (n=4) puncture. These ruminants showed neurological signs related to viral (n=13), mycotic (n=3), or bacterial (n=15) infections, and toxic (n=21), traumatic (n=4), or congenital disorders (n=2). CSF analysis from ruminants with viral infections presented lymphocytic pleocytosis, even though CSF showed no changes in several cases of rabies. Neutrophilic pleocytosis, cloudiness, presence of fibrin clots, and abnormal coloration were evident in the CSF of most cases of CNS bacterial infection, such as meningoencephalitis, meningitis, abscesses, myelitis, and a case of conidiobolomycosis. On the other hand, CSF was unchanged in most cases of toxic disorders, as botulism and hepatic encephalopathy. Elevated CSF density was observed in 60% of ruminants diagnosed with polioencephalomalacia. Our findings show that evaluation of CSF is a valuable diagnostic tool when used in association with epidemiological, clinical and pathological findings for diagnosis of CNS diseases in ruminants.

RESUMO: Embora a difteria em bezerros e a laringite necrótica sejam infecções comuns nos tecidos moles da cavidade oral, a condrite aritenoide é considerada uma complicação grave, mas raramente diagnosticada em bovinos. Este trabalho tem como objetivo descrever os achados clínicos, laboratoriais, de imagem e patológicos em duas bezerras apresentando condrite aritenoide. Uma bezerra Jersey de dois meses de idade e uma bezerra Girolando de três meses de idade apresentavam dificuldades respiratórias por 40 dias. Na primeira, a endoscopia oral revelou aritenoides aumentadas e imóveis, com grande envolvimento da aritenoide esquerda, causando distorção grave e obstrução parcial de rima glottidis. Na segunda, a radiografia látero-lateral da cabeça revelou áreas radioluscentes e espessamento ao nível da laringe até a traqueia dorsal. O exame patológico de uma bezerra revelou infiltrado inflamatório multifocal neutrofílico e áreas de necrose na cartilagem cricoaritenóide, circundadas por abscessos. O diagnóstico definitivo de condrite aritenoide nessas duas bezerras foi estabelecido com base nos achados clínicos, laboratoriais, de imagem (endoscopia e radiografia) e patológicos. O monitoramento diário e minucioso dos rebanhos e o uso de métodos auxiliares de diagnóstico permitem o diagnóstico precoce da enfermidade, sendo que o diagnóstico preciso pode melhorar o prognóstico e aumentar a taxa de sucesso do tratamento.

ABSTRACT: Although, calf diphtheria and necrotic laryngitis are common infections in the oral cavity’s soft tissues, arytenoid chondritis is addressed as a serious but rarely diagnosed complication in cattle. This paper aimed to describe clinical, laboratory, imaging, and pathological findings in two calves with arytenoid chondritis. A 2-month-old Jersey calf and a 3-month-old Girolando calf presented 40-days history of respiratory distress. In the former, oral endoscopy revealed enlarged and immobile arytenoids with major involvement of the left arytenoid, causing severe distortion and partial obstruction of the rima glottidis. In the latter, latero-lateral radiography of the head revealed radiolucent areas and thickening at the level of the larynx to the dorsal trachea. Pathological examination of one calf showed neutrophilic multifocal inflammatory infiltrate and areas of necrosis in the cricoarytenoid cartilage, surrounded by abscessation. Definitive diagnosis of arytenoid chondritis in these two calves was established on the basis of clinical, laboratory, imaging (endoscopy and radiography), and pathological findings. Daily and careful observation of the herds and the use of ancillary diagnostic methods allowed the early diagnosis of the disease, and accurate diagnosis can improve prognosis and increase treatment success rate.

RESUMO: Ratos e camundongos são as espécies mais comumente utilizadas em estudos experimentais de eletrofisiologia cardíaca. O registro do eletrocardiograma (ECG) é de suma importância para o monitoramento de arritmias e função cardíaca em vários modelos de patologias. No entanto, a falta de valores de referência padronizados e a fórmula de correção do QT para diferentes espécies e linhagens animais representam um desafio para a interpretação do ECG. O objetivo deste estudo é fornecer um método melhorado para o registro de ECG, estabelecendo valores de referência e determinar as fórmulas QT com maior correlação com a freqüência cardíaca (FC). Um total de 10 ratos Wistar, 10 camundongos Swiss, 10 camundongos C57BL/6 e 10 camundongos FVB/NJ foram utilizados no estudo. Os animais foram submetidos à anestesia com isoflurano e o registro de ECG foi realizado com eletrocardiógrafo não invasivo de seis canais. O QT foi corrigido usando as seguintes fórmulas: Bazzett, Fridericia, Mitchell, Hodges, Van der Water e Framingham. Os valores da normalidade para os parâmetros do ECG foram estabelecidos em todos os animais estudados. A correlação de Pearson definiu a fórmula de Hodges como a mais adequada para a correção do QT. Este estudo demonstra um método melhorado de registro de ECG com valores de referência para camundongos Swiss, FVB/NJ, C57BL/6 e Wistar. A fórmula de Hodges foi a mais eficaz para correção de QT em roedores, enquanto as fórmulas de Bazett e Friderica apresentaram valores mais baixos de correlação. O presente trabalho contribui para a investigação de arritmias em cardiologia experimental e pode reduzir interpretações erradas no ECG de roedores.

ABSTRACT: Rats and mice are the most common species used in experimental cardiac electrophysiology studies. Electrocardiogram (ECG) recording shows paramount importance for monitoring arrhythmias and cardiac function in several disease models, including QT syndrome. However, the lack of standardized reference values and QT correction formula for different animal species and lineages represent a challenge for ECG interpretation. The aim of this study is to provide an improved method for ECG recording, establishing reference range values and determine the QT formulas with higher correlation to heart rate (HR). A total of 10 Wistar rats, 10 Swiss mice, 10 C57BL/6 mice and 10 FVB/NJ mice were used in the study. Animals were submitted to anesthesia with isoflurane and ECG recording was performed using a six-channel non-invasive electrocardiograph. QT was corrected using the following formulas: Bazzett, Fridericia, Mitchell, Hodges, Van der Water and Framingham. Normal range values for ECG parameters were established in all animals studied. Pearsons’ correlation defined Hodges formula as the most suitable for QT correction. This study demonstrated an improved method of ECG recording with reference values for Swiss, FVB/NJ, C57BL/6 mice, and Wistar rats. Hodges’ formula was the most effective formula for QT correction in rodents, whereas Bazett’s and Friderica formulas were ineffective for such animals. The present work contributes to arrhythmias investigation in experimental cardiology and may reduce misinterpretations in rodents’ ECG.

RESUMO: A conservação do haylage (alimento pré-seco) pode ser desafiadora, considerando o aumento do risco de crescimento de fungos, com consequente produção de micotoxinas. Entretanto, quando a qualidade da higiene e armazenamento é assegurada, o haylage aumenta a palatabilidade da forragem e fornece suplemento de matéria seca suficiente ao longo do ano. Devido à falta de informação relativa aos efeitos dessa alimentação nos parâmetros sanguíneos de equinos alimentados exclusivamente com essa dieta, o objetivo do presente estudo é avaliar o perfil bioquímico sanguíneo dos equinos após administração da haylage em comparação com feno. Doze matrizes Quarto de Milha foram distribuídas em dois grupos, cada um recebendo feno ou haylage de Tifton 85 (Cynodon spp.) por um período de 28 dias. O perfil bioquímico foi realizado em cinco tempos (T) diferentes (T0, antes do início do experimento e cronologicamente, a cada sete dias após o fornecimento das dietas - T1, T2, T3 e T4) para análise de proteína total (PT) e seu perfil fracionado, das enzimas alanina aminotransferase, aspartato aminotransferase, γ-glutamil-transferase, dos produtos de catabolismo creatinina e ureia e, dos íons cálcio e fósforo. Micotoxinas no haylage foram investigadas e mantiveram-se abaixo dos limites determinados pela legislação brasileira. O perfil bioquímico revelou, somente, elevação da PT em T4 no grupo que recebeu haylage, o que pode estar relacionado à sua maior digestibilidade proteica. Nenhuma diferença foi observada nos outros parâmetros estudados em ambos os grupos experimentais. Conclui-se que Haylage é comprovadamente seguro, quando bem preparado para equinos, sem causar efeitos na saúde geral, conforme demonstrado pelos exames bioquímicos no presente estudo.

ABSTRACT: The conservation of haylage (a pre-dried feed) can be challenging, since there is an increased risk of mould growth, which can contaminate this foodstuff with mycotoxins. However, when the hygienic quality is secured, haylage enhances grass palatability and provide enough supply of dry matter throughout the year. Due to the lack of information regarding its effect on blood parameters in horses fed exclusively with this foodstuff, the aim of this study is to provide information regarding its use in comparison to hay and ensure that it does not affect horses’ biochemical profile. Twelve Quarter Horse broodmares were distributed into two groups, each fed with Tifton-85 (Cynodon spp.) hay or haylage for a period of 28 days, and the biochemical profile was done in five different times (T0 before the experiment started and, chronologically, seven days apart - T1, T2, T3 and T4), It was analyzed total protein (TP) and its fractioning; enzymes alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase and γ-glutamyl-transferase; endogenous catabolism products urea and creatinine; and ions calcium and phosphorus. Mycotoxins in haylage were also investigated and remained below the legislation thresholds. Only TP was higher in the last sampling (T4) of the haylage group, which may be related to the foodstuff’s higher protein digestibility. No differences were observed between serum enzymes, urea, creatinine and Ca/P from both experimental groups. Haylage has proven to be safe, when well prepared for horses, without causing impairing side effects, as shown by the normal serum biochemistry parameters presented in this study.

RESUMO: Nerium oleander é uma planta cardiotóxica ornamental encontrada em áreas tropicais e subtropicais do mundo. Sua toxicidade é relacionada á presença de glicosídeos cardioativos, principalmente a oleandrina, encontrada em toda a planta. O presente estudo objetiva descrever um novo e aprimorado método para detecção da oleandrina em amostras de tecido. A determinação da oleandrina foi feita após extração utilizando técnica modificada de QuEChERS e mensuração por UFLC-MS/MS. Um total de 36 cobaios (Cavia porcellus) foi distribuído em três grupos (n=12): grupo controle que recebeu apenas água por via oral (CON), e dois grupos tratados que receberam extrato hidroalcóolico de oleander nas doses de 150mg.kg-1 (OLE 150) e 300mg.kg-1 (OLE 300) em uma única dose oral. Após três horas, fragmentos do coração, rins, fígado e cérebro foram coletados para determinação dos níveis de oleandrina. A extração e procedimentos cromatográficos foram eficientes na detecção e quantificação da oleandrina nos tecidos, com tempo de retenção de 1,2min e limite de detecção de 0,001μg g-1. A análise cromatográfica dos animais tratados indicou que a oleandrina é distribuída de forma equalizada pelos tecidos analisados. A metodologia desenvolvida representa uma forma de diagnóstica segura, efetiva e rápida da intoxicação por N. oleander a partir de amostras de tecidos de necropsia.

ABSTRACT: Nerium oleander is an ornamental cardiotoxic plant found in tropical and subtropical areas of the World. Its toxicity is related to the content of cardioactive glycosides, mainly oleandrin, found throughout the plant. The present study aimed to describe a new and improved method for oleandrin detection in tissue samples. The determination of oleandrin was made after extraction with a modified QuEChERS technique and measurement by UFLC-MS/MS. A total of 36 guinea pigs (Cavia porcellus) were distributed into 3 groups (n=12): control group that received only water orally (CON), and two treated groups that received hydroalcoholic oleander extract at doses of 150mg.kg-1 (OLE 150) and 300mg.kg-1 (OLE 300) in single oral dose. After three hours, fragments of heart, kidneys, liver and brain were collected for determination of oleandrin levels. The extraction and chromatographic procedures were effective for oleandrin detection and quantification in tissues, with retention time of 1.2 min and detection limit of 0.001μg g-1. The chromatographic analysis of treated guinea pigs indicated that oleandrin is distributed equally among the analyzed tissues. The developed methodology is a reliable, effective and rapid form of diagnosis of N. oleander poisoning based on necropsy tissue samples.

ABSTRACT: Cestrum axillare Vell. (formerly Cestrum laevigatum Schltd.), family Solanaceae, is the most important hepatotoxic plant in Brazil that causes acute poisoning. It occurs in the Southeast and Center-West regions and in coastal areas of the Northeast Brazil. Spontaneous poisoning was described in cattle, goats and sheep, with clinical signs evidenced within 24 hours after ingestion of the leaves and death within 48 hours after signs onset. The clinical signs observed in acute poisoning are apathy, anorexia, ruminal arrest, arched back, constipation with feces in small spheres, sometimes covered with mucus and blood streaks, muscle tremors, staggering gait and sometimes sialorrhoea. Neurological signs may be observed, due to interference in the urea cycle due to hepatic insufficiency resulting in hyperammonemia (hepatic encephalopathy). The main pathological finding is centrilobular hepatic necrosis. The toxic principle present in C. axillare was not yet definitively proven, but some authors attribute the toxicity of the plant to the presence of saponins gitogenin and digitogenin. However, it has not been determined whether the saponins present in C. axillare are responsible for the hepatotoxic effect of the plant. Thus, the objective of this work is to determine if the saponins are the compounds responsible for the hepatotoxic effects produced by the ingestion of the leaves of C axillare, using goats as experimental model. For this, the effects of the administration of the leaves were compared with those produced by the saponins isolated from the leaves in goats. Six goats were randomly assigned to three experimental groups that received [1] dry leaves of C. axillare (animals A1 and A2), [2] saponins extract from leaves (animals S1 and S2) or [3] control group (animals C1 and C2). For goats receiving the dry leaves the administered dose of plant was 10g/kg for one animal (A1) and 5g/kg for the other one (A2). For animals receiving the saponins extract, administration was done at a dose equivalent to 20g/kg repeated after 24 hours. The dry leaves administered at a dose of 10g/kg to a goat produced toxic effects, with alterations in biochemistry (indicating hepatic lesion) and histopathology showing centrilobular hepatic necrosis. At the dose of 5 g/kg of dry leaves, clinical signs of poisoning were not observed, but hepatic necrosis was found; after 15 days after the last administration, the hepatic parenchyma of this animal was already normal, with only hemorrhagic areas, demonstrating full regeneration. The administration of extracts of saponins containing gitogenin and digitogenin to goats did not produce significant toxic effects, proving that these compounds are not responsible for intoxication. In addition, goats are a good experimental model for studies of this intoxication.

RESUMO: Cestrum axillare Vell. (anteriormente C. laevigatum Schltd.), família Solanaceae, é a mais importante planta hepatotóxica do Brasil que causa intoxicação aguda. Tem ocorrência nas regiões Sudeste e Centro-Oeste e em áreas litorâneas do Nordeste. A intoxicação natural foi descrita em bovinos, caprinos e ovinos, com sinais clínicos evidenciados em até 24 horas após a ingestão das folhas e morte em até 48 horas após o início da sintomatologia. Os sinais clínicos observados na intoxicação aguda são apatia, anorexia, parada ruminal, dorso arqueado, constipação com fezes em formas de pequenas esferas, por vezes recobertas com muco e com estrias de sangue, tremores musculares, andar cambaleante e, às vezes, sialorreia. Podem ser observados sinais neurológicos, devido à interferência no ciclo da ureia pela insuficiência hepática resultando em hiperamonemia (encefalopatia hepática). O principal achado patológico é a necrose hepática centrolobular. O princípio tóxico presente no C. axillare ainda não está definitivamente comprovado, mas alguns autores atribuem a toxicidade da planta à presença das saponinas gitogenina e digitogenina. No entanto, ainda não foi determinado se as saponinas presentes em C. axillare são as responsáveis pelo efeito hepatotóxico da planta. Assim, o objetivo deste trabalho é determinar se as saponinas são os compostos responsáveis pelos efeitos hepatotóxicos produzidos pela ingestão das folhas de C. axillare, usando caprinos como modelo experimental. Para isto, foram comparados os efeitos da administração das folhas com os produzidos pelas saponinas isoladas destas folhas em caprinos. Foram utilizados seis caprinos, distribuídos aleatoriamente em três grupos experimentais que receberam [1] folhas secas de C. axillare (Caprinos A1 e A2), [2] extrato de saponinas das folhas (Caprinos S1 e S2), e [3] grupo controle (Caprinos C1 e C2). Para os caprinos que receberam as folhas secas a dose administrada de planta foi de 10g/kg para um animal (A1) e de 5g/kg para outro (A2). Para os animais que receberam o extrato de saponinas, a administração foi feita na dose equivalente a 20g/kg, repetida após 24 horas. Foi verificado que as folhas secas, quando administradas na dose de 10g/kg a um caprino, produziram efeitos tóxicos, com alterações na bioquímica (indicando lesão hepática) e histopatológica apresentando necrose hepática centrolobular. Na dose de 5g/kg de folhas secas, não foi observado sintomatologia clínica da intoxicação, mas houve necrose hepática; 15 dias após a última administração, o parênquima hepático deste animal já se encontrava normal, apenas com áreas hemorrágicas, demonstrando plena regeneração. A administração do extrato de saponinas contendo gitogenina e digitogenina a caprinos não produziu efeitos tóxicos significantes, comprovando não serem estes compostos os responsáveis pela intoxicação. Além disto, a espécie caprina é um bom modelo experimental para estudos desta intoxicação.

RESUMO: O objetivo do presente trabalho foi avaliar a utilização das células tronco mesenquimais (MSC) no tratamento da mionecrose induzida pelo veneno de Bothrops alternatus em ratos. 75 ratos Wistar adultos foram distribuídos em três grupos experimentais. G1 e G2 receberam 120μg de veneno de B. alternatus, enquanto o G3 recebeu apenas 200μL de PBS. Três dias após a administração do veneno, os ratos do grupo G1 foram tratados com 5.0 x 106 MSC, enquanto G2 e G3 receberam exclusivamente PBS. A cada três dias, amostras de sangue e tecido muscular foram coletadas de cinco animais de cada grupo para avaliação bioquímica sérica e patológica, respectivamente. A análise histológica revelou lesão muscular mais intensa após a aplicação das MSC, caracterizada pela desorganização e perdas das fibras musculares, com necrose focal e infiltrado inflamatório mononuclear. É possível concluir que a utilização das MSC para o tratamento da lesão local causada pela inoculação do veneno B. alternatus deteriorou a regeneração muscular e interferiu com o processo de cicatrização.

ABSTRACT: The aim of this study was to evaluate the use of mesenchymal stem cells (MSC) in the treatment of myonecrosis induced by Bothrops alternatus venom in rats. Seventy-five male adult Wistar rats were divided into three experimental groups. G1 and G2 were injected in the gastrocnemius muscle with 120μg of B. alternatus venom, while G3 received 200μL of PBS only. Three days after the venom injection, 12 rats from G1 were treated with 5.0 x 106 MSC in PBS, whereas G2 and G3 rats received PBS. Every three days, blood and muscle samples of five animals from each group were taken for serum biochemical and pathological analyses. Histological examinations showed more intense muscle lesions following MSC treatment, characterized by disorganization and loss of muscle fibers, with focal necrosis and inflammatory infiltration by mononuclear cells. In conclusion, the use of MSC for the treatment of local damage caused by inoculation of B. alternatus venom impaired muscle regeneration and interfered in the healing process.

RESUMO: No Brasil, pelo menos 16 espécies de plantas tóxicas podem afetar o sistema nervoso central dos bovinos. Recentemente no estado do Piauí, no Nordeste do Brasil, Brunfelsia uniflora foi relatada como causadora de sinais nervosos em jumentos, bovinos e pequenos ruminantes. Para avaliar a toxicidade de B. uniflora, 20 camundongos foram distribuídos em quatro grupos de cinco animais recebendo diferentes extratos da planta. Os extratos de alcalóides, flavonóides, saponinas ou solução salina (grupo controle) foram administrados por gavagem. Após a administração dos extratos, em dose única (5g kg-1), todos os animais foram observados diariamente. Os camundongos que receberam os extratos de B. uniflora apresentaram sinais clínicos moderados a graves, incluindo piloeração, vocalização e convulsões. Todos os camundongos que receberam extrato de saponinas morreram entre 10 e 20 minutos após. A avaliação bioquímica sérica dos animais que receberam saponinas, revelou discretos aumentos nos níveis de proteína total e diminuição nos níveis de magnésio e cloro. Conclui-se que, as saponinas presentes nas folhas de B. uniflora induzem efeitos neurológicos tóxicos agudos e, morte em camundongos.

ABSTRACT: In Brazil, at least 16 poisonous plant species can affect the central nervous system of livestock. Recently in the state of Piauí, Northeastern Brazil, Brunfelsia uniflora was reported as a cause of nervous signs in donkeys, cattle, and small ruminants. In order to assess the toxicity of B. uniflora extracts, 20 Swiss mice were distributed into four groups (n=5) receiving by gavage alkaloids, flavonoids, saponins, or saline (control group). After administration of the extracts in a single dose (5g kg-1), all mice were observed daily for clinical signs. Mice that received the extracts showed moderate to severe clinical signs, including piloerection, vocalization, and seizures. All mice dosed with saponins died between 10 and 20min after administration. Serum biochemical evaluation of animals that received saponins revealed slight increases in total protein levels and decreased magnesium and chlorite levels. In conclusion, saponins of B. uniflora leaves induced acute toxic neurological effects and death in mice.

RESUMO: Fibroma ossificante é uma neoplasia benigna desfigurante da mandíbula, que afeta animais jovens de várias espécies, incluindo equinos. O presente relato descreve os cuidados pós-operatórios e o acompanhamento a longo prazo após mandibulectomia rostral (MR) no tratamento de um fibroma ossificante em um equino. Um cavalo mestiço de três anos de idade apresentou massa ulcerada, dura, bem definida, medindo 14,5x10x9,5cm, contígua à mandíbula rostral. Os achados radiográficos foram compatíveis com uma deformidade óssea mandibular não agressiva (neoplasia benigna). As características histológicas confirmaram o diagnóstico de fibroma ossificante. Após a MR, o equino adaptou-se lentamente às novas condições de alimentação e recebeu alta clínica totalmente recuperado, sendo capaz de se alimentar em piquetes e beber água por conta própria, no 60o dia. Esta lenta adaptação foi crucial para recuperação pós-cirúrgica e exigiu trabalho árduo no manejo da alimentação e hidratação por meio de sonda nasogástrica durante o período de internação hospitalar.

ABSTRACT: Ossifying fibroma is a disfiguring benign neoplasia of the jaw that affects young animals of several species, including horses. The present report described the postoperative care and long-term follow-up after a rostral mandibulectomy (RM) that was performed to treat an ossifying fibroma in a horse. A 3-year-old crossbred horse presented a hard, well-defined, 14.5×10.0×9.5cm ulcerated mass attached to the rostral mandible. Radiographic findings were compatible with a nonaggressive mandibular bone deformity (benign neoplasia). Histological features confirmed the diagnosis of the ossifying fibroma. After the RM, the horse slowly adapted to the new feeding conditions and was discharged when it fully recovered and was capable of feeding on the paddock and drinking water on its own on day 60. This slow adaptation was crucial for post-surgical recovery and required hard labor to manage the feeding and hydration by nasogastric tube during the hospital stay.

RESUMO Objetivou-se realizar uma avaliação físico-química de amostras de água, sedimento e mata ciliar em uma piscicultura localizada próxima às margens do Ribeirão da Mata, Minas Gerais. As coletas de água foram semanais em quatro pontos assim denominados: (1) nascente; (2) entrada do sistema; (3) efluente concentrado e (4) ponto de lançamento. Foram monitorados os seguintes parâmetros físico-químicos: temperatura (ºC), pH, oxigênio dissolvido, demanda bioquímica de oxigênio, fósforo total, alcalinidade, sólidos dissolvidos totais, fosfato, nitrato, nitrito, sulfato, amônia e fenol das amostras de água. Foram pesquisados metais pesados (chumbo, cádmio, mercúrio e zinco) e agrotóxicos (organoclorados, organofosforados, clorofosforados, carbamatos, piretroides e rodenticidas anticoagulantes) nas amostras de água, sedimento e mata ciliar. Alcalinidade e sólidos totais apresentaram as maiores concentrações, provavelmente devido às características geológicas,por se tratar de região cárstica. Fenol, em todos os pontos, e fosfato, nos pontos 3 e 4, apresentaram valores acima dos limites permitidos para a classe II de água doce, segundo a Resolução CONAMA nº 357. Os outros parâmetros (amônia, nitrato, nitrito e sulfato), em todos os pontos de coleta, apresentaram baixos valores. Nas amostras de água não foram detectados chumbo e mercúrio; zinco apresentou valores abaixo de 0,007 mg.L-1. As amostras de sedimento apresentaram valores de chumbo entre 11,1566 e 37,0438 mg.L-1, estando 12 dessas acima do valor de referência de qualidade. Também em todas as amostras de sedimento foi detectado mercúrio, que variou de 0,35 a 0,82 mg.L-1. Em relação ao cádmio, esse não foi detectado nas amostras de sedimento e plantas. Também não foram detectados agrotóxicos em nenhuma das amostras estudadas.

ABSTRACT The aim of this study was to carry out a physicochemical analysis of water, sediment and riparian vegetation in a fish farm located near the Ribeirão da Mata basin in Minas Gerais State (Brazil). The water samples were collected weekly at four points: (1) source, (2) system entry, (3) discharge point, (4) and point release. The monitored physicochemical parameters in the water samples were: temperature (ºC), pH, dissolved oxygen, biochemical oxygen demand, total phosphorus, alkalinity, total dissolved solids, phosphate, nitrate, nitrite, sulfate, ammonia and phenol. Heavy metals (lead, cadmium, mercury and zinc) and pesticides (organochlorine, organophosphates, clorofosforados, carbamates, pyrethroids and anticoagulant rodenticides) were searched in the samples of water, sediment and riparian vegetation. Alkalinity and total solids presented the highest concentration, probably due to geological features of a carstic area. Phenol, at all points, and phosphate, at points 3 and 4, showed values above the limits allowed for class II freshwater, according to the CONAMA Resolution n. 357. The other parameters (ammonia, nitrate, nitrite and sulfate) in all sampling sites showed low values. It was not detected lead and mercury in the water samples; and zinc values were below 0.007 mg.L-1. However, the sediment samples showed lead values from 11.1566 to 37.0438 mg.L-1, with 12 of those samples above the quality reference value. In addition, it was detected mercury in all sediment samples, which ranged from 0.35 to 0.82 mg.L-1. It was not detected cadmium in samples of sediment neither plants. No pesticides were detected in the samples.

RESUMO: O objetivo desse estudo foi avaliar cobaios hígidos e conscientes como modelos para estudos de eletrofisiologia e descrever os padrões eletrocardiográficos normais em ambiente laboratorial controlado, estabelecendo a melhor fórmula QT para esse método. Gravações eletrocardiográficas de cinquenta cobaios adultos conscientes foram obtidas usando eletrocardiografia computadorizada. As medidas eletrocardiográficas de três trechos diferentes foram analisadas. Os resultados estabeleceram média e desvio padrão para os parâmetros: frequência cardíaca, ondas e intervalos P-QRS-T, assim como o eixo cardíaco médio. Grupos foram separados de acordo com o peso: grupo 1 incluiu animais com 500-699g e o grupo 2 animais de 700-900g. Nenhuma diferença foi encontrada quando as medidas foram comparadas entre os grupos, mostrando que não há diferença significativa entre peso/tamanho corporal com os parâmetros eletrocardiográficos (p<0.05). As médias corrigidas dos valores do QT (QTc) obtidas usando diferentes fórmulas foram significativamente diferentes (p<0.05), sendo a mais consistente a de Van der Water (QTcV). Valores de QTcV fortemente correlacionam com o QT (r=98), com intervalo de confiança a 95% de 185.7 a 195.2 ms. Considerando a simplicidade e confiabilidade, o QTcV foi considerado apropriado para correção do intervalo QT em cobaios conscientes. Os resultados do presente estudo também sugerem que os valores encontrados possam ser utilizados como referência para essa espécie.

ABSTRACT: The purpose of this study is to evaluate healthy conscious guinea pigs as a model for electrophysiology assessment and to describe normal electrocardiographic patterns in controlled laboratory environment, establishing the best QT formula for this method. Electrocardiographic recordings of fifty adult conscious guinea pigs were obtained using a computerized electrocardiography. The electrocardiographic measurements of three different tracings were analyzed. The results obtained established normal mean and range values for the parameters: heart rate, waves and intervals of P-QRS-T deflections, as well as the mean cardiac axis. Groups were separated by body weight: group 1 gathered animals with 500-699g and group 2 with animals 700-900g. No differences were found when measurements were compared between groups, showing no significant difference between weight/body sizes to the electrocardiographic parameters (P<0.05). The mean corrected QT values (QTc) obtained using diverse formulae were significantly different (P<0.05), were the most consistent was Van der Water (QTcV). QTcV values were strongly correlated (r=98) and 95% confidence interval 185.7 to 195.2ms.Considering its simplicity and reliability, the QTcV was deemed the most appropriate to be used for the correction of QT interval in conscious guinea pigs.The results of this study also suggest that the values found can be used as reference for the species.