Abstract Natural spawning of the leopard grouper (Mycteroperca rosacea) was studied in captivity from 2004 to 2008 under natural photoperiod conditions. Fish spawned naturally in 2006, but only 90,000 unfertilized eggs were collected. A total of 43 and 27 spawning days were observed in 2007 and 2008, respectively. Spawning season began in March and lasted until May-June and was related to an increase in water temperature from 21.1 to 23.8 °C. The mean (SE) number of eggs released each day was 101,705 (13,876) in 2007 and 40,510 (7,874) in 2008, and the total number of eggs collected in 2007 and 2008 was 4.37 × 106and 1.07 × 106, respectively. The number of eggs collected per month was not significantly different within each year (P> 0.05), although a significant difference was observed between 2007 and 2008 (P< 0.05). The annual relative number of eggs released was 288,750 eggs·kg-1in 2007 and 72,919 eggs·kg-1in 2008, and viable egg production was 184,800 eggs kg-1in 2007 and 25,375 eggs kg-1in 2008. The fertilization rate (%) of the eggs collected daily differed significantly throughout the spawning season of 2007 (P< 0.05). The fertilization rate also differed (P< 0.05) between 2007 (61.10%) and 2008 (32.30%). Statistical analysis of the 2 consecutive spawning seasons indicated no correlation between the fertilization rate and fecundity. The effect of the moon phase on spawning was also considered. The fish spawned at dusk before total darkness. Mean (SD) egg diameter was 864.0 ± 22.0 µm.

Resumen Se estudió el desove natural de la cabrilla sardinera,Mycteroperca rosacea, en cautiverio, de 2004 a 2008 en condiciones naturales de luz y temperatura. Los peces desovaron naturalmente en 2006, pero solo se recolectaron 90,000 huevos no fertilizados. Se observó un total de 43 días de desove en 2007 y 27 días en 2008. La temporada de desove comenzó en marzo y se prolongó hasta mayo-junio, lo cual se relacionó con un aumento en la temperatura del agua de 21.1 a 23.8 °C. La media (error estándar) del número de huevos liberados diariamente fue de 101,705 (13,876) en 2007 y 40,510 (7,874) en 2008, y el número total de huevos recolectados fue de 4.37 × 106y 1.07 × 106, respectivamente. El número de huevos recolectados por mes no fue significativamente diferente dentro de cada año (P> 0.05), pero sí al comparar 2007 y 2008 (P< 0.05). La puesta relativa anual fue de 288,750 huevos·kg-1en 2007 y 72,919 huevos·kg-1en 2008, y la producción de huevos viables fue de 184,800 huevos·kg-1en 2007 y 25,375 huevos·kg-1en 2008. La tasa de fertilización (%) de los huevos recolectados diariamente fue significativamente diferente a lo largo de la temporada de desove de 2007 (P< 0.05). La tasa de fertilización también difirió significativamente (P< 0.05) entre 2007 (61.10%) y 2008 (32.30%). El análisis estadístico indicó que no hubo correlación entre la tasa de fertilización y el número de huevos liberados en ambas temporadas de desove. El efecto de la luna sobre el desove también se analiza en el documento. Durante todo el estudio, los peces desovaron al anochecer antes de la oscuridad total. El diámetro medio (± desviación estándar) del huevo fue de 864.0 ± 22.0 µm.

Resumen Se determinó el efecto acaricida de 18 plantas mexicanas contra Rhipicephalus microplus. Los resultados del ensayo larvicida revelaron que 5 extractos metanólicos produjeron una actividad alta (86-100 % de mortalidad), 3 extractos mostraron una actividad relativamente alta (71-85 % de mortalidad), 2 extractos mostraron una actividad moderada (56-70 % de mortalidad), 2 extractos presentaron baja actividad (31-55 % mortalidad) y 6 extractos mostraron actividad acaricida no significativa (0-30 % mortalidad). Los extractos que inducían >56 % de mortalidad se analizaron posteriormente contra garrapatas ingurgitadas de R. microplus mediante una prueba de inmersión de adultos a una concentración de 5.0% p/v. En términos generales, los resultados en larvas y garrapatas adultas indicaron que los extractos metanólicos de Annona globiflora, Annona scleroderma, Litchi chinensis y Azadirachta indica mostraron las mayores actividades. El extracto crudo de A. indica fue sometido a una purificación cromatográfica, lo que llevó al aislamiento de 3-O-butil-(-)-epigalocatequina (1), 3-O-butil-(-)-epicatequina (2), (-)-epigalocatequina (3), (+)-galocatequina (4), (-)-epicatequina (5), β-sitosterol (6), estigmasterol (7), glucósido de estigmasterol (8), trilinoleína (9), azadiractina A (10) y el éster de ácido octadecanoico-tetrahidrofurano-3,4-diílico (11). Las estructuras químicas de los compuestos aislados fueron identificadas mediante la interpretación de los datos espectroscópicos de RMN y HRESI-MS. Los compuestos aislados se ensayaron frente a garrapatas ingurgitadas de R. microplus a una concentración de 6 mM. Sobre la base de los resultados obtenidos, se concluyó que el 3-O-butil-(-)-epigalocatequina (1), el 3-O-butil-(-)-epicatequina (2), la azadiractina A (10) y el ácido octadecanoico-tetrahidrofurano-3,4-diil éster (11) muestran la mayor eficacia.

Abstract This work determined the acaricidal effect of 18 Mexican plants against Rhipicephalus microplus. The results of the larvicidal assay revealed that 5 methanolic extracts produced high activity (86-100 % mortality), 3 extracts exhibited relatively high activity (71-85 % mortality), 2 extracts displayed moderate activity (56-70 % mortality), 2 extracts presented low activity (31-55 % mortality) and 6 extracts showed non-significant acaricidal activity (0-30 % mortality). Extracts inducing >56 % mortality were subsequently assayed against engorged ticks of R. microplus by adult immersion test at a concentration of 5.0% w/v. In general terms, the results on larvae and adult ticks indicated that the methanolic extracts of Annona globiflora, Annona scleroderma, Litchi chinensis and Azadirachta indica showed the greatest activities. The crude extract of A. indica was subjected to chromatographic purification, which has led to the isolation of 3-O-butyl-(-)-epigallocatechin (1), 3-O-butyl-(-)-epicatechin (2), (-)-epigallocatechin (3), (+)-gallocatechin (4), (-)-epicatechin (5), β-sitosterol (6), stigmasterol (7), stigmasterol glucoside (8), triolein (9), azadirachtin A (10), and the octadecanoic acid-tetrahydrofuran-3,4-vinyl ester (11). The isolated compounds' chemical structures were identified by the interpretation of NMR and HRESI-MS spectroscopic data. The isolated compounds were assayed against engorged ticks of R. microplus at a concentration of 6 mM. Based on the results obtained, it was concluded that 3-O-butyl-(-)-epigallocatechin (1), 3-O-butyl-(-)-epicatechin (2), azadirachtin A (10), and octadecanoic acid-tetrahydrofuran-3,4-vinyl ester (11) show the highest effectiveness.

RESUMEN: El pollo doméstico es una especie de ave que ha sido ampliamente estudiada en cuanto a su biología y como organismo modelo para la ciencia. La reproducción de la especie es por la puesta de huevos fecundados, que en un período de 21 días desarrollarán un polluelo en su interior. Se han descrito varios métodos para desarrollar embriones ex-ovo, permitiendo la observación y manipulación del organismo. Este trabajo tuvo como objetivo estandarizar un método que permita el desarrollo de los embriones dentro del sistema de incubación artificial, el cual tiene un bajo costo y es fácil de realizar. En este trabajo se utilizaron 100 huevos de gallina para estudiar los efectos de la humedad, la suplementación mineral y el tiempo de preincubación del huevo sobre la incubación ex-ovo de los embriones. El desarrollo embrionario se documentó a través de los diferentes días. Se seleccionó la cáscara de huevo pulverizada como una fuente óptima para proporcionar calcio, magnesio, fósforo y otros minerales al embrión en desarrollo. Al suministrar 900-1200 mg de cáscara de huevo pulverizada, 40 mL de la solución de cloruro de benzalconio al 0.001 % y un tiempo de preincubación de aproximadamente 56 h, los embriones lograron desarrollarse hasta los 19 días, y aunque no llegaron a eclosionar, los embriones lograron desarrollarse hasta los 19 días. Se lograron condiciones de incubación que permitieron la supervivencia y desarrollo de los embriones hasta etapas tardías. Así, debido a las condiciones establecidas de calcio, humedad y tiempo de preincubación, en el presente trabajo los pollitos alcanzaron los 19 días de desarrollo.

SUMMARY: The domestic chicken is a species of bird that has been extensively studied in regard to its biology and as a model organism for science. The reproduction of the species is by the laying of fertilized eggs, which in a period of 21 days will develop a chick inside. Several methods have been described to develop embryos ex-ovo, allowing the observation and manipulation of the organism. This work has the propose to standardize a method that allows the development of the embryos inside the artificial incubation system, which has a low cost and is easy to make. In this work, 100 chicken eggs were used to study the effects of humidity, mineral supplementation, and the preincubation time of the egg on the incubation ex-ovo of the embryos. Embryo development was documented through the different days. Pulverized eggshell was selected as an optimal source to provide calcium, magnesium, phosphorus, and other minerals to the developing embryo. By providing 900-1200 mg of pulverized eggshell, 40 mL of the 0.001 % solution of benzalkonium chloride, and a preincubation time of approximately 56 h, the embryos were able to develop until 19 days, and even though they did not reach hatching, the incubation conditions that allowed the survival and development of embryos until late stages were achieved. Thus, due to the conditions established for calcium, humidity and preincubation time, in the present work, the chicks reached 19 days of development.

Resumen: El asesoramiento psicoeducativo es un proceso que busca la mejora de las prácticas educativas y el desarrollo de la autonomía de los agentes educativos implicados. Este proceso se constituye como una conversación en la que los usos del lenguaje del asesor juegan un rol crítico. El artículo presenta una revisión de alcance de la evidencia científica publicada entre 2000 y 2020 en relación con los recursos discursivos del asesor, es decir, con sus usos del lenguaje en procesos de asesoramiento psicoeducativo, con el doble objetivo de mapear dicha evidencia e identificar algunas implicaciones prácticas que se derivan de ella. Los resultados se han organizado en torno a tres cuestiones: las posiciones comunicativas de asesores y asesorados en términos de control, los principales recursos discursivos que usan los asesores, y los efectos sobre el proceso de asesoramiento del uso de determinados recursos discursivos por parte de los asesores. La revisión ha permitido identificar una importante base de recursos y orientaciones para la práctica y revela que el área de estudio tiene un carácter plural a nivel conceptual y metodológico, y una naturaleza emergente y no consolidada.

Abstract: Psychoeducational consultation is a process that seeks to improve teaching practices and to develop the autonomy of the educational agents involved. This process is constituted as a conversation, in which the uses of the consultant’s language play a critical role. This article presents a scope review of the scientific evidence published between the years 2000 and 2020 regarding the consultant’s discursive resources, i.e., their uses of language in processes of psychoeducational consultation. This review pursues the dual objective of mapping scientific evidence published over this period, and of identifying some of the practical implications derived from this evidence. The results have been organized into three areas, which represent the thematic cores around which the scientific efforts in the area have focused. These areas are the communicative positions of the psychoeducational consultants and consultees in terms of control, the main discursive resources used by psychoeducational consultants, and the effects of the use of certain discursive resources by the psychoeducational consultants in the consultation process. The review allowed us to identify diverse resources and guidelines for professional practice, and reveals that the field is plural both conceptually and methodologically, and that it is still emergent.

Resumen Este estudio examina el hábito lector en 7.094 estudiantes universitarios ecuatorianos a partir de encuestas online. Se analiza el hábito de lectura por sexos de las tres áreas geográficas de Ecuador, de la distinción Grado/Posgrado y de las áreas de conocimiento. Se comparan las diferencias en horas de dedicación semanales, número de libros leídos, frecuencia de asistencia a la biblioteca, tipos de lecturas que hacen en ella, número de libros comprados/descargados y porcentaje que ocupa la lectura en el tiempo libre frente a otras actividades en las categorías mencionadas. Los alumnos de Artes y Humanidades y los de Ciencias de la Salud son los que presentan un mejor hábito lector. No obstante, el hábito lector del conjunto de la muestra es bajo, por lo que es necesaria la preparación del profesorado para afrontar esta problemática.

Abstract This work examines the reading habit of 7.094 Ecuadorian university students through an online survey. They are analyzed according to gender, the three geographic areas of Ecuador, the undergraduate/postgraduate distinction, and the areas of knowledge. Differences are compared in hours spent per week, number of books read, frequency of library attendance, types of reading done there, number of books purchased/downloaded, and percentage spent reading in free time compared to other activities in the mentioned categories. The students of Arts and Humanities and those of Health Sciences are the ones with the best reading habit. However, the reading habit of the sample as a whole is low, which is why the preparation of professors is necessary to face this problem.

RESUMEN: La compleja realidad de las instituciones de Educación Secundaria y la inmediatez de los cambios acontecidos en ellas requieren de docentes con capacidad para intervenir adecuadamente. Sin embargo, estudios recientes han puesto de relieve ciertas limitaciones en su preparación, sobre todo pedagógica y práctica. Con objeto de mejorar las competencias de los futuros docentes, se ha realizado una experiencia de innovación educativa denominada Propuesta Interdisciplinar Cooperativa (PIC), basada en la resolución compartida de problemas propuestos desde diversas materias, con 405 estudiantes del Máster en Formación del Profesorado de ESO, Bachiller, FP y EI de la UMH (Elche, España). Se presenta la descripción de la experiencia y las valoraciones de estudiantes respecto a cómo ha afectado al aprendizaje, su nivel competencial medio, el grado de implicación en la realización de tareas, la aplicación eficaz de técnicas cooperativas y el género. Se concluye mostrando los beneficios percibidos en todas las variables estudiadas.

ABSTRACT: The complex reality of Secondary Education institutions and the immediacy of the changes occurring in them require teachers with the capacity to intervene appropriately. However, recent studies have highlighted certain limitations in their preparation, especially in pedagogical and practical terms. To improve the competencies of future teachers, an educational innovation experience called Interdisciplinary Cooperative Proposal (ICP), based on the shared resolution of problems proposed from different subjects, has been carried out with 405 students of the Master's Degree in Teacher Training for Secondary Education, Baccalaureate, Vocational Training and Secondary Education of the UMH (Elche, Spain). The description of the experience and the students' evaluations of how it has affected learning, their average level of competence, the degree of involvement in the completion of tasks, the effective application of cooperative techniques, and gender are presented. It concludes by showing the perceived benefits in all the variables studied.

Abstract Agricultural practices can have detrimental impacts on biodiversity, but some studies have shown the benefits of agroforestry practices like shade-grown coffee to bird communities and, to a lesser extent, to mammal communities. To better understand whether shade-grown coffee plantations can contribute to the conservation of mammal communities, we deployed camera traps in private reserves with a matrix of shade-grown coffee plantations and forest in the highlands of Guatemala. At each reserve we estimated species richness of terrestrial medium- and large-sized mammals. We also estimated mammal relative abundance and occupancy probabilities as proxies for mammalian habitat associations and evaluated how these were affected by key landscape features (e.g., land-use type, asphalt roads, and distance to protected areas). We used hierarchical multi-species Bayesian abundance models that account for imperfect detection to estimate our parameters of interest and model the influence of landscape features on site-level species richness and species relative abundance. We detected 14 species across all reserves and found a strong influence of land use and presence of asphalt roads on mammalian relative abundances and species richness. More species used areas around the camera traps in forest than in shade-grown coffee plantations and far from asphalt roads. Our study shows that reserves with shade-grown coffee plantations can harbor terrestrial mammalian communities of conservation interest. Our results also suggest that to maintain mammalian diversity and abundances in our study area, shade-grown coffee crops should be mixed in with natural forests and the presence of asphalt roads within these should be avoided or minimized.

Resumen Las prácticas agrícolas pueden tener impactos perjudiciales en la biodiversidad, pero algunos estudios han demostrado beneficios de prácticas agroforestales, como el café bajo sombra, para comunidades de aves y, en menor medida, comunidades de mamíferos. Para entender mejor si las plantaciones de café bajo sombra pueden contribuir a la conservación de comunidades de mamíferos, colocamos cámaras trampa en reservas privadas con plantaciones de café bajo sombra y bosque en el altiplano de Guatemala. En cada reserva estimamos la riqueza de especies de mamíferos medianos y mayores. También estimamos la abundancia relativa y probabilidad de ocupación como aproximaciones a las asociaciones de hábitat de mamíferos y evaluamos cómo estas son afectadas por características clave de paisaje (p.ej. tipo de uso de suelo, carreteras y distancia a áreas protegidas). Utilizamos modelos jerárquicos bayesianos multiespecies de abundancia que consideran que la detección de especies es imperfecta para estimar nuestros parámetros de interés y modelar la influencia de características del paisaje en la riqueza y abundancia relativa de especies a nivel de sitio. Detectamos 14 especies en todas las reservas y encontramos una fuerte influencia del uso de la tierra en la abundancia relativa y la riqueza de especies de mamíferos. Más especies utilizaron áreas cercanas a las cámaras trampa en el bosque que a las plantaciones de café bajo sombra y lejos de carreteras. Nuestro estudio demuestra que las plantaciones de café bajo sombra pueden albergar comunidades de mamíferos terrestres de interés para la conservación. Nuestros resultados también sugieren que para mantener la diversidad y abundancia de mamíferos en el área de estudio, las plantaciones de café bajo sombra deben estar mezcladas con bosques nativos diversos, así como que la presencia de carreteras debe ser evitada o reducida.

Resumen Este artículo tiene por objetivo reportar los significados de la concavidad a partir de situaciones que propicien el estudio del cambio en la gráfica de funciones, para que sea de utilidad a la comunidad docente y al estudiantado en la comprensión de este conocimiento. Con elementos de la teoría socioepistemológica de la matemática educativa y una metodología cualitativa, se construyen fases que inician con una problematización del saber matemático, diseño e implementación de situaciones de aprendizaje y, finalmente, socialización de los materiales y reflexiones con el colectivo docente. Se implementa la situación con seis estudiantes mujeres y se muestran algunas similitudes entre sus argumentos con los aportes de la matemática Agnesi en relación con la explicación del punto de inflexión desde el estudio de la variación. Esto permite reportar seis formas de interpretar a la concavidad en funciones y refuerza los resultados presentados por otros autores.

Abstract The purpose of this article is to report the meanings of concavity taking into accounts such situations that favor the study of change in the graph of functions, so that it is useful to the teaching community and the student body for understanding this knowledge. Using elements of the socio-epistemological theory of educational mathematics and a qualitative methodology, we build a series of phases beginning with the problematization of mathematical knowledge, followed by the design and implementation of learning situations and, finally, the socialization of the materials and reflections with the teaching group. The situation is implemented with six female students and some similarities are found between their arguments and the contributions of the mathematician Agnesi in relation to the explanation of the turning point from the perspective of the study of variation. This allows us to report six ways of interpreting concavity in functions and reinforces the results presented by other authors.

Background: The population of actively working older people is growing rapidly. The relationship between quality of life, levels of physical activity and functionality in this population is not entirely clear. Aim: To determine the association between quality of life, levels of physical activity and functional tests in actively working adults and older people. Material and Methods: Cross sectional assessment of 138 adults aged 40 to 50 years (53% women) and 119 older people aged 60 to 75 years (53% women) who were actively working in two public services. Quality of life was measured with the SF-36 questionnaire and usual physical activity was assessed with the International Physical Activity Questionnaire (IPAQ-short). Handgrip strength, the timed up and go (TUG) and chair stand test (CST) were used as functional tests. Results: Compared to older people, adults had better physical functional tests (P < 0.01). Older people had better scores in the mental health component (MHC) of quality of life (p < 0.05). In adults, the physical health component of quality of life (CSF) had a positive association with physical activity (Spearman Rho (rs)= 0.270; p = 0.01), grip strength (rs = 0.330; p < 0.01) and the TUG (rs = −0.229; p < 0.01). In older patients, CSM and CST were positively correlated (rs = 0.201; P = 0.029). In both groups, a correlation was observed between CSM, grip strength (adults rs = 0.283; p < 0.01; older people rs = 0.211; P = 0.02) and with TUG (adults rs = −0.197; P = 0.021; older people rs = - 0.212; p = 0.02). Conclusions: There is a positive correlation between quality of life and level of physical activity in working adults, which is not observed in older people. Adequate performance in physical functional tests is positively correlated with better quality of life (CSF and CSM) in adults and only with the mental health component in older people.

RESUMEN Introducción: En México, la enfermedad renal crónica (ERC) representa un gran problema de salud y las glomerulopatías (GP) representan la tercera causa de ERC. Objetivo: Describir, desde una base de datos de biopsias renales (BR) nativas, los diferentes patrones morfológicos de GP en México. Métodos: Se analizaron registros de BR de riñón nativo en un centro de referencia en nefropatología, todas las BR fueron evaluadas por una única nefropatóloga (AVP). El diagnóstico final en cada caso se basó en parámetros clínicos e histopatológicos. Resultados: Fueron revisadas 2084 BR, con edad de 34.4 ± 17.6 años. 1085 BR (52.1%) en género femenino; el síndrome nefrótico fue más frecuente en hombres (p<0.001) y síndrome nefrítico fue más frecuente en mujeres (p<0.001). GP primarias y nefropatías túbulo-intersticiales fueron más diagnosticadas en hombres (p<0.01). Nefritis lúpica (NL) fue la GP secundaria más reportada. La glomeruloesclerosis focal y segmentaria (GEFS) fue la GP primaria diagnosticada con mayor frecuencia en ambos géneros. Vasculitis por inmunoglobulina A fue la enfermedad vascular más frecuentemente detectada. Síndrome nefrótico fue la indicación más frecuente de BR (42.9%), seguido de: síndrome nefrítico (23.9%), proteinuria aislada (16.4%), daño renal agudo (8.7%), alteraciones urinarias asintomáticas (6.2%) y ERC (1.8%). Conclusiones: La GP primarias con mayor frecuencia fueron GEFS. Las GP secundarias más frecuentemente reportadas fueron NL, predominantemente en mujeres. Se observó nefropatía IgA con mayor frecuencia en comparación con otras series publicadas en México. Hubo diferencias significativas en la presentación de GP en relación con el género y la edad del paciente.

ABSTRACT Introduction: In Mexico, chronic kidney disease (CKD) represents a major health problem, and glomerulopathies (GP) represent the third leading cause of CKD. Aim: From a database of native kidney biopsies (KB), describe the different morphological patterns of GP in Mexico. Methods: Records of native KB in a nephropathology referral center were evaluated by a single nephropathologist. The final diagnosis in each case was based on clinical parameters and histopathological findings. Results: 2084 KB were analyzed, patients were 34.4±17.6 years of age, there were 1085 KB (52.1%) in females; nephrotic syndrome was most frequent in males (p<0.001), and nephritic syndrome was more frequent in females (p <0.001). Primary GP and túbulo-interstitial diseases were most diagnosed in males (p <0.01). Lupus nephritis (LN) was the most-reported secondary GP. Focal and segmental glomerulosclerosis (FSGS) was the primary GP most often diagnosed in both genders. The most frequently detected vascular disease was immunoglobulin A vasculitis. Nephrotic syndrome was the most frequent indication for KB (42.9%), followed by: nephritic syndrome (23.9%), isolated proteinuria (16.4%), acute kidney injury (8.7%), asymptomatic urinary alterations (6.2%), and CKD (1.8%). Conclusions: The most frequently observed primary GP was FSGS, and LN was the most frequent secondary GP, predominantly in females, and IgA nephropathy was observed more frequently in comparison with other series published in Mexico. There were significant differences in GP presentation in relation to patient sex and age.

RESUMEN:Se explora el uso de plantas alucinógenas sagradas en el proceso creativo y compositivo de 2 canciones del músico argentino Gustavo Cerati. Salvia Divinorum en la canción "Planta" del disco de Soda Stereo: "Sueño Stereo" (1995) y el cactus Peyote en la canción "Cáctus" del disco "Fuerza Natural" (2009). La metodología es a través de entrevistas respecto del proceso compositivo, hechas al propio músico argentino publicadas en diversas fuentes escritas y online.

ABSTRACT:The use of sacred hallucinogenic plants in the creative and compositional process of 2 songs by the Argentine musician Gustavo Cerati is explored. Salvia Divinorum in the song "Planta" from the Soda Stereo album: "Sueño Stereo" (1995) and the Peyote cactus in the song "Cactus" from the album "Fuerza Natural" (2009). The methodology is through interviews regarding the compositional process, made to the Argentine musician himself, published in various written and online sources.

Resumen Antecedentes: la diabetes de tipo 2 (DM2) es un factor de riesgo para la enfermedad del hígado graso no alcohólico (EHGNA). Objetivo: evaluar la prevalencia de la EHGNA en una cohorte de pacientes con DM2. Métodos: estudio descriptivo observacional realizado entre mayo de 2018 y diciembre de 2019 en la Unidad de Endocrinología y Nutrición. Se realizó una prueba de χ² para las variables cualitativas y una prueba no paramétrica para la comparación de medianas de variables cuantitativas. El grado de esteatosis se definió mediante el parámetro coeficiente atenuado (CAP): (S0: < 248 dB/m; S1: 248-288 dB/m; S2: 268-288 dB/m; S3: > 288 dB/m) o rigidez: F0-F1: < 8 kPa; F2: 8-10 kPa; F3: 10-15 kPa; F4: > 15 kPa, usando la elastografía transitoria (TE) (FibroScan®). Se realizó un análisis univariante y posteriormente un análisis multivariante con las variables estadísticamente significativas para estudiar los factores predictivos de esteatosis intensa y fibrosis avanzada. Resultados: n = 104 pacientes con DM2; 84 (80,7 %) eran obesos. La TE demostró fibrosis avanzada en el 20 % y esteatosis intensa (S3) en más del 50 %. Los niveles disminuidos de bilirrubina total (OR: 0.028; 95 % CI: (0.002-0.337); p = 0.005) se encontraron como factores independientes para la esteatosis S3 en el analisis multivariable. El IMC (OR: 1.497; 95 % CI: (1.102-2.034); p = 0.01) fue un factor predictivo de fibrosis avanzada. Conclusiones: la esteatosis intensa asociada a EHGNA y la fibrosis asociada a EHGNA se encontraron comúnmente en pacientes con DM2 y obesidad. Los pacientes diabéticos deben someterse a pruebas de detección de enfermedad hepática como un órgano diana más.

Abstract Background: type 2 diabetes (T2D) is a risk factor for nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD). Objective: to evaluate the prevalence of NAFLD in a cohort of patients with T2D. Methods: an observational, descriptive study performed between May 2018 and December 2019 at the Endocrinology and Nutrition Unit. The χ² test was performed for qualitative variables and a non-parametric test for the comparison of medians of quantitative variables. Steatosis degree was defined by the coefficient attenuated parameter (CAP): (S0: < 248 dB/m; S1: 248-268 dB/m; S2: 268-288 dB/m; S3: > 288 dB/m) or stiffness: F0-F1: < 8 kPa; F2: 8-10 kPa; F3: 10-15 kPa; F4: > 15 kPa, using transient elastography (TE) (FibroScan®). A univariate analysis was performed and subsequently a multivariate analysis with statistically significant variables used to study the predictive factors of intense steatosis and advanced fibrosis. Results: n = 104 patients with T2D; 84 (80.7 %) were obese. TE demonstrated advanced fibrosis in 20 % and intense steatosis (S3) in more than 50 %. Lower total bilirubin (OR: 0.028; 95 % CI: [0.002-0.337]; p = 0.005) was found to be an independent factor for S3 steatosis in the multivariate analysis. BMI (OR: 1.497; 95 % CI: [1.102-2.034]; p = 0.01) was a predictive factor for advanced fibrosis in a multivariate analysis. Conclusions: NAFLD-associated intense steatosis and NAFLD-associated fibrosis were commonly found in patients with T2DM and obesity. Diabetic patients should be screened for liver disease as one more target organ.

ABSTRACT Introduction: Actinoporins (AP) are pore-forming proteins (PFPs) that readily bind to membranes leading to cell death. Sticholysins I and II (St, StI/II) are among the most potent AP described in nature. This proposal aimed to characterize the influence of lipid composition and dynamic properties of membranes on binding and pore-formation by StI/II and nigrelysin (Ngr), a novel AP here described. Methods: Binding and pore-formation were studied using model membranes such as liposomes and lipidic monolayers combined with fluorescence spectroscopy and microscopic techniques. Results and Discussion: St and Ngr bind and preferentially permeabilize membranes containing sphingomyelin (SM) over phosphatidylcholine (PC). This is explained by the presence of the PC phosphocholine unit plus a ceramide moiety (Cer) in SM. StI also recognizes Cer and gangliosides although to a lesser extent. In terms of dynamic properties, StI penetrates preferentially membranes with high lateral mobility and moderately enriched in SM. Also, StI permeabilizes more efficiently membranes containing sterols, in addition to SM. The appearance of borders resulting from lipidic domains coexistence is not a determining factor for binding or activity in membranes. Indeed, the activity is enhanced by membrane molecular heterogeneity beyond the presence of lipidic domains. As a conclusion these studies explain the relevance of SM and sterols for St, Ngr, and by extension, to APs binding to membrane and explain the contribution of other Cer-based lipids to their activity. In dynamic terms, a highly fluid phase, and moderately enriched in SM and sterols, is an ideal platform for the formation of pores in the membrane for AP.

RESUMEN Introducción: Las actinoporinas (AP) son proteínas formadoras de poro (PFP) que se asocian a membranas conduciendo a la muerte celular. Sticholysinas I y II (St, StI/II) se encuentran entre las AP más potentes descritas en la naturaleza. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la influencia de la composición lipídica y dinámica de la membrana en la unión y formación de poros por StI/II y nigrelysina (Ngr), una nueva AP aquí descrita. Métodos: La unión y formación de poros se estudiaron mediante membranas modelo combinadas con espectroscopía de fluorescencia y microscopía. Resultados y discusión: St y Ngr se unen y permeabilizan preferencialmente membranas que contienen esfingomielina (SM) cuando se compara con fosfatidilcolina (PC), debido a la presencia, en SM, de la unidad de fosfocolina de PC más la unidad ceramida (Cer). StI reconoce a Cer y a gangliósidos, aunque en menor extensión. En términos de propiedades dinámicas, StI penetra preferencialmente membranas con elevada movilidad lateral y adecuado nivel de SM. StI permeabiliza más eficientemente membranas con esteroles además de SM. Los bordes de la coexistencia de dominios lipídicos no constituyen un factor determinante para su unión y actividad. La heterogeneidad molecular de las membranas, más allá de la presencia de dominios, favorece la actividad de AP. Conclusiones. Estos estudios explican la relevancia de SM, otros lípidos de base Cer y esteroles a la actividad de St, Ngr, y por extensión, a las AP. Desde una perspectiva dinámica, una fase altamente fluida y moderadamente enriquecida en SM y esteroles constituye una plataforma ideal para la formación de poros por AP.

ABSTRACT Introduction: Ticks are ectoparasites, which are vectors of infectious diseases for humans and animals. Vaccination could be an ecological alternative to chemicals to control these ectoparasites. A peptide of the ribosomal protein P0 conjugated to hemocyanin from the mollusk Megathura crenulata (KLH) has shown an effectiveness of more than 90 % against Rhipicephalus sanguineus and R. microplus tick species. However, KLH is an expensive protein that is not an economically viable alternative for developing this peptide as a commercial vaccine. Methods: The synthetic P0 peptide was chemically conjugated to the Bm86 protein obtained by fermentation of a recombinant Pichia pastoris yeast. This conjugate was characterized by SDS-PAGE analysis and mass spectrometry and was used in immunization and challenge experiments against different tick species. Results: SDS-PAGE analysis of this conjugate showed that it is very heterogeneous and that there are from 1 to 18 molecules of pP0 per molecule of Bm86. LC-MS/MS analysis and the combination of 4 different software showed that 49 of the 54 lysine residues and the N-terminal end of the Bm86 protein were partially conjugated to pP0. This conjugate pP0-Bm86 generated an immune response against the peptide when used as an antigen in immunization experiments of different animals. This immune response affected the viability and reproductive potential of different tick species. Conclusion, these results demonstrate that the P0 peptide is a broad spectrum antigen and permit its development as an anti-tick vaccine.

RESUMEN Introducción: Las garrapatas son ectoparásitos vectores de enfermedades infecciosas para humanos y animales. La vacunación pudiera ser una alternativa ecológica respecto a los químicos para controlar estos ectoparásitos. Un péptido de la proteína ribosomal P0 conjugado a hemocianina del molusco Megathura crenulata (KLH) ha mostrado una efectividad de más del 90 % contra garrapatas de la especie Rhipicephalus sanguineus y microplus. Sin embargo, KLH es una proteína costosa que no es una alternativa económicamente viable para el desarrollo del péptido como una vacuna comercial. Métodos: El péptido de P0 sintético se conjugó químicamente a la proteína Bm86 obtenida en fermentación de un clon de levadura Pichia pastoris recombinante. Este conjugado se caracterizó mediante un análisis de SDS-PAGE y espectrometría de masas y se utilizó en experimentos de inmunización y reto contra diferentes especies de garrapatas. Resultados: El análisis de SDS-PAGE de este conjugado demostró que es muy heterogéneo y que hay de 1 a 18 moléculas de pP0 por molécula de Bm86. El análisis de LC-MS/MS y la combinación de 4 softwares diferentes mostró que 49 de los 54 residuos de lisina y el extremo N-terminal de la proteína Bm86 se encontraron parcialmente conjugados al pP0. Este conjugado pP0-Bm86 en experimentos de inmunización de diferentes animales generó una respuesta inmune contra el péptido que afectó la viabilidad y el potencial reproductivo de diferentes especies de garrapatas. En conclusión, estos resultados demuestran que el péptido de P0 es un antígeno de amplio espectro y permite su desarrollo como vacuna anti-garrapatas.