RESUMO: O uso contínuo de inseticidas sintéticos para o controle do mosquito vetor de arbovírus, Aedes aegypti, tem levado à seleção natural de populações resistentes a diferentes grupos químicos. Assim, compostos derivados de plantas surgiram como uma alternativa viável para o controle desses vetores. Desse modo, este estudo foi realizado para determinar se o extrato metanólico bruto (CME) das folhas de Clibadium surinamense possui atividade larvicida contra Ae. aegypti. Para isso, Larvas de terceiro e quarto instar de Ae. aegypti foram mantidas em recipientes contendo 99 mL de água e 1 mL de CME diluído em etanol nas concentrações de 250, 500, 750 e 1000 ppm. O grupo controle continha 99 mL de água e 1 mL de etanol. Três ensaios foram realizados em triplicata para cada grupo. Após 24 horas de observação, de acordo com a análise de variância de uma via,os valores de CL50 e CL90 foram de 283 e 430 ppm, respectivamente. Em conclusão, demonstramos pela primeira vez que o CME das folhas de C. surinamense apresenta atividade larvicida contra Ae. aegypti em condições de laboratório.

ABSTRACT: The continuous use of synthetic insecticides for controlling the arboviral vector Aedes aegypti has led to the natural selection of mosquito populations resistant to different chemical groups. Thus, plant-derived compounds have emerged as a viable alternative for vectorcontrol. This study determined whether the crude methanolic extract (CME) from leaves of Clibadium surinamense has larvicidal activity against Ae. aegypti. Third- and fourth-instar Ae. Aegyptilarvae were kept in recipients containing 99 mL of water and 1mL of ethanol-diluted CMEat concentrations of 250, 500, 750, and 1000 ppm. The control group contained 99 mL of water and 1 mL of ethanol. Three trials were performed in triplicate for each group.After 24 hours of treatment, the LC50 and LC90 values were determined to be 283 and 430 ppm, respectively, according to one-way analysis of variance. In conclusion, we have demonstrated for the first time that the CME from leaves of C. surinamense show larvicidal activity against Ae. aegypti under laboratory conditions.

RESUMO Relatamos dois casos de hemocromatose símile em antas brasileiras, Tapirus terrestris mantidas em cativeiro no estado do Pará, Brasil. Ambas apresentavam lesões de hepatopatia crônica e acentuada, associadas a acúmulo acentuado de hemossiderina. A coloração de Perls demonstrou acúmulo acentuado de ferro nos macrófagos do espaço porta, células de Kupffer e, em menor extensão, hepatócitos na região periportal. Havia, ainda, fibrose portal marcada evidenciada por tricrômico de Masson. Os mecanismos patológicos da doença em antas ainda não estão bem estabelecidos e tem sido sugerido que a espécie apresenta diferentes mecanismos de absorção e eliminação de ferro, sendo sensíveis à elevação dos níveis dietéticos desse metal. Existem dois relatos anteriores da doença em T. terrestres em zoológicos na Austrália e na Escócia. Este é o primeiro relato da doença em antas no Brasil.

ABSTRACT We report two cases of hemochromatosis-like disease in captive Brazilian tapirs, Tapirus terrestris in Pará state, Brazil. Both animals presented symptoms of chronic hepatopathy associated with marked accumulation of hemosiderin. The coloration of Perls demonstrated pronounced iron accumulation in macrophages in the portal space, Kupffer cells, and, to a lesser extent, in the hepatocytes of the periportal region. Marked portal fibrosis was evidenced by Masson’s trichrome. The pathological mechanisms of this disease in tapirs are not yet well established. It has been suggested that the species may have different mechanisms of iron absorption and elimination, rendering them sensitive to elevation in dietary levels of this metal. Two previous reports of this disease in T. terrestris exist from zoos in Australia and Scotland. This is the first report of this disease in tapirs in Brazil based on histopathological and histochemical findings.

Resumo O objetivo deste estudo foi detectar DNA de Toxoplasma gondii em ostras (Crassostrea spp.) comercializadas em sete praias do Estado do Pará, Brasil. De acordo com o Programa Nacional de Controle Higiênico Sanitário de Moluscos Bivalves, 100 g da parte comestível dos moluscos são necessários para a análise de microrganismos contaminantes. Neste estudo, 12 ostras foram consideradas equivalentes a 100 g de partes comestíveis na preparação de cada amostra agrupada. No total, 360 ostras foram compradas de 30 vendedores. De grupos de 12 ostras adquiridas por vendedor, foram obtidas 60 amostras agrupadas, compreendendo 30 tecidos branquiais e 30 tratos gastrointestinais. Para a análise molecular, a nested PCR foi realizada para amplificar um produto de 155 pares de bases do gene B1 de T. gondii. Todas as amostras analisadas foram negativas para T. gondii. Os resultados indicam que as amostras de ostras comercializadas em praias do Estado do Pará não foram contaminadas por T. gondii.

Abstract The aim of this study was to detect Toxoplasma gondii DNA in oysters (Crassostrea spp.) sold on seven beaches in the State of Pará, Brazil. According to the National Program for Hygiene and Sanitary Control of Bivalve Mollusks, 100 g of the edible part of mollusks is required to analyze contaminating microorganisms. In this study, 12 oysters were assumed to be equivalent to 100 g of edible parts when preparing each pooled sample. In total, 360 oysters were purchased from 30 vendors. From groups of 12 oysters purchased per vendor, 60 pooled samples were obtained, comprising 30 gill tissues and 30 gastrointestinal tracts. For molecular analysis, nested-PCR was conducted to amplify a 155-base-pair product of the B1 gene from T. gondii. All analyzed samples were negative for T. gondii. Our findings indicate that the oyster samples sold on the beaches in the State of Pará were not contaminated by T. gondii.

RESUMO Analisamos a presença de Leptospira spp. em tecido hepático e renal de marsupiais e roedores silvestres capturados em uma floresta periurbana no leste da Amazônia brasileira. Foram examinados 25 indivíduos de quatro espécies de marsupial e sete de roedor quanto à presença do gene 16S rRNA de Leptospira no DNA extraído de 47 amostras de tecido hepático e renal usando PCR. Detectamos amostras positivas em 12% (3/25) dos indivíduos, em fragmentos renais de duas espécies de marsupial (Didelphis marsupialis e Marmosops pinheiroi) e em um fragmento hepático de uma espécie de roedor (Echimys chrysurus). Estes são os primeiros registros de Leptospira spp. em M. pinheiroi e E. chrysurus, e é o primeiro levantamento molecular de marsupiais e roedores na Amazônia brasileira.

ABSTRACT We analyzed the presence of Leptospira spp. in liver and kidney tissue of wild marsupials and rodents trapped in a periurban forest in the eastern Brazilian Amazon. We examined 25 individuals of four marsupial and seven rodent species for the presence of the 16S rRNA gene of Leptospira in the DNA extracted from 47 liver and kidney tissue samples using PCR. We detected positive samples in 12% (3/25) of the individuals, in kidney fragments of two marsupial species (Didelphis marsupialis and Marmosops pinheiroi) and in a liver fragment of one rodent species (Echimys chrysurus). These are the first records of Leptospira spp. in M. pinheiroi and E. chrysurus and it is the first molecular survey of marsupials and rodents in the Brazilian Amazon.

Resumo Foi avaliada a prevalência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em amostras de soro, coletadas de gatos domésticos, em Belém, Pará, Brasil. Também correlacionou-se a presença de anticorpos contra T. gondii com variáveis ambientais e hábitos de proprietários. Quatrocentas e quarenta e sete amostras de soro de gatos domésticos foram analisadas. Os soros foram testados por ensaio de imunofluorescência indireta, e as amostras de fezes foram analisadas por meio de reação em cadeia da polimerase. Entre os animais analisados, 21,92% (98/447) foram soropositivos. Foi encontrada associação estatística significante em relação à idade e à sorologia entre os animais acima de 1 ano (p <0,01): no grupo de até 1 ano, 12,82% (20/156) dos animais positivos e, no grupo acima de 1 ano, 26,80% (78/291) positivos. Os resultados mostram que os gatos daquela região possuem anticorpos anti-T. gondii, e seus donos não estão cientes da toxoplasmose ou de como evitar sua transmissão.

Abstract We evaluated the prevalence of anti-Toxoplasma gondii antibodies in the serum samples collected from domestic cats in Belém, Pará, Brazil. We also correlated the presence of T. gondii antibodies with environmental variables and cat-owner habits. Four-hundred and forty-seven serum samples from domestic cats were analyzed. The sera were tested using an indirect immunofluorescence assay. Among the animals analyzed, 21.92% (98/447) were seropositive. A statistically significant association was found in relation to age and serology among the animals over 1 year old (p<0.01): in the group up to 1 year old, 12.82% (20/156) of the animals were positive, and in the group over 1 year old, 26.80% (78/291) were positive. Our results show that the cats in Belém, Pará region have anti-T. gondii antibodies, and their owners are not aware of toxoplasmosis or how to prevent its transmission.

RESUMO: Dirofilaria immitis, um parasito que infecta principalmente canídeos domésticos ou selvagens, embora também possa infectar felinos e humanos, é frequente em muitas áreas do Brasil. O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência da infecção natural em cães provenientes do complexo da Ilha de Algodoal-Maiandeua, região litorânea do estado do Pará, Brasil. Um total de 67 cães tiveram o sangue coletado para detecção de microfilárias de D. immitis e seu DNA. Microfilárias e o DNA de D. immitis foram detectados em 35,8% (24/67) dos animais. Na amostra de um animal, não foram observadas microfilárias, mas o seu DNA foi detectado, sugerindo que as larvas tenham sido recentemente eliminadas ou os adultos tenham morrido antes da coleta da amostra. Portanto, pode-se concluir que a ocorrência de D. immitis é uma ameaça à saúde de canídeos domésticos no complexo da Ilha de Algodoal-Maiandeua, bem como para felinos e seres humanos.

ABSTRACT: Dirofilaria immitis, a parasite that mainly infects domestic or wild canids, but can infect felines or humans as well, is frequent in many Brazilian areas. The main objective of this research was to determine the prevalence of natural canine infection at the Algodoal-Maiandeua Island complex, in the coastal region of the state of Pará, Brazil. A total of 67 dogs were sampled for blood microfilariae detection and for D. immitis DNA detection. Microfilaria and D. immitis DNA could be detected in 35.8% (24/67) of the animals. In one dog’s sample no microfilariae were detected, but the PCR was positive, suggesting that either larvae recently were eliminated or adults died shortly before sample collecting. Therefore, it can be concluded that the occurrence of D. immitis is a health threat for domestic and wild canids at the Island of Algodoal, as well as for feline or human health.

RESUMO: A ocorrência de doenças transmitidas por carrapatos em cães é muito frequente no Brasil, dentre estas enfermidades podemos destacar a erliquiose e a anaplasmose, que são causadas por Ehrlichia canis e Anaplasma platys, respectivamente. O objetivo deste trabalho foi fazer um levantamento da ocorrência destes patógenos em amostras de sangue de cães domiciliados e errantes do município de Belém, Pará. Foram amostrados 276 cães por conveniência, sendo que o DNA extraído do sangue desses animais foi submetido à nested-PCR para a pesquisa de E. canis e A. platys. O DNA de E. canis foi detectado em 39,4% (109/276), e o DNA de A. platys em 23,1% (64/276) dos cães amostrados. Houve diferença estatisticamente significante entre a frequência desses agentes (p<0,0001), pois foi encontrada coinfecção entre os agentes em 13,4% (37/276) dos animais. A frequência de detecção desses parasitos foi maior em cães errantes do que nos domiciliados tanto para E. canis (OR=2,84) quanto para A. platys (OR=10,5). Diante dos resultados, foi possível concluir que E. canis e A. platys estão presentes na população canina estudada, sendo os cães errantes mais acometidos por esses parasitos.

ABSTRACT: The occurrence of diseases transmitted by ticks in dogs is very frequent in Brazil, among these diseases we can highlight the ehrlichiosis and anaplasmosis, which are caused by Ehrlichia canis and Anaplasma platys, respectively. The objective of this study was to survey the occurrence of these pathogens in blood samples from domiciled and stray dogs from the city of Belém, Pará. Two hundred and seventy six dogs were sampled for convenience, and the DNA extracted from the blood of these animals was submitted to nested-PCR for research of E. canis and A. platys. E. canis DNA was detected in 39.4% (109/276) and A. platys DNA in 23.1% (64/276) of the samples, there was a statistically significant difference between the frequency of these agents (P<0.0001), and there was coinfection in 13.4% (37/276) of animals. The frequency of detection of these parasites was higher in stray dogs than in those domiciled for both E. canis (OR=2.84) and A. platys (OR=10.5). Considering the results, it was possible to conclude that E. canis and A. platys are present in the studied population, with stray dogs being more affected by these parasites.

RESUMO: A doença foi estudada em uma propriedade localizada no município de Castanhal, Pará, no período de dezembro de 2009 a dezembro de 2012. A propriedade possuía um plantel de 117 ovinos, 45 da raça Santa Inês e 72 Texel. Dos 72 ovinos da raça Texel, 56 estavam afetados. Os principais sinais clínicos observados foram alopecia, eritema, edema, hiperpigmentação e crostas nas orelhas, parte superior da cabeça e ao redor dos olhos. Em alguns animais as orelhas estavam deformadas, espessadas e com abscessos e/ou miíase. Histologicamente, as lesões caracterizavam-se por hiperqueratose ortoqueratótica, acantose, vacuolização e necrose das células da epiderme. Na derme havia infiltrado inflamatório composto principalmente por eosinófilos e macrófagos, edema e deposição de colágeno. Entre os insetos capturados foram identificados 294 exemplares de Culicoides (Hoffmania) plaumanni Spinelli, 57 de Culicoides (Hoffmania) insignis Lutz e 27 exemplares pertencentes a outras espécies de Culicoides. Conclui-se que C. plaumanni, C. insignis e, possivelmente, outras espécies de Culicoides estejam envolvidos na etiologia da dermatite alérgica nos ovinos da raça Texel no estado do Pará. Ovinos da raça Santa Inês que se encontravam na mesma área e nas mesmas condições não foram afetados, sugerindo menor susceptibilidade.

ABSTRACT: Allergic dermatitis was studied at a farm located in the municipality of Castanhal in the state of Pará, Brazil, from December 2009 to December 2012. Clinical and epidemiological data were obtained during monthly visits to the farm. Skin biopsies were performed for histopathological examinations, and insects were captured with Centers for Disease Control and Prevention (CDC) traps and live-bait entomological vacuum devices. The property housed a herd of both genders, with 45 Santa Inês sheep of different ages and 72 Texel adults. Of the 72 Texel sheep, 56 were affected. Of these, 24 exhibited alopecia, erythema, edema, and crust in the ears, on top of the head, and less often, around the eyes. In addition to the lesions described above, 14 animals exhibited hyperpigmentation of the ears and/or around the eyes and crust in the nose. Another 18 animals exhibited chronic lesions characterized by deformed and thickened ears, alopecia with hyperpigmentation, and in most cases, secondary bacterial infections with abscesses and/or myiasis. Some of these animals had lost part of their ears. Histologically, the lesions were characterized as orthokeratotic hyperkeratosis, acanthosis, vacuolization, and necrosis of epidermal cells. An inflammatory infiltrate was present in the dermis, which was composed mainly of eosinophils and macrophages, some lymphocytes and mast cells, and few neutrophils, in addition to edema and collagen deposition. The Santa Inês sheep were not affected. Among the captured insects, 294 specimens of Culicoides (Hoffmania) plaumanni Spinelli, 57 specimens of C. (Hoffmania) insignis Lutz, and 27 specimens of other Culicoides species were identified. We conclude that C. plaumanni, C. insignis, and possibly other Culicoides species are involved in the etiology of allergic dermatitis in Texel sheep in the state of Pará. Santa Inês sheep in the same region and under the same conditions were not affected, which suggests lower susceptibility of these animals.

RESUMO: O presente estudo objetivou detectar a infecção por Leishmania infantum em cães e avaliar os fatores associados com a leishmaniose visceral canina nas comunidades quilombolas Menino Jesus de Petimandeua e Itaboca, município de Inhangapi, Pará, Brasil. Foram coletadas amostras de sangue e de pele íntegra de 143 cães, sendo aplicado um questionário. A detecção do DNA de L. infantum foi realizada através da PCR com os iniciadores RV1 e RV2. Os locais de coleta foram georreferenciados para realizar a distribuição e análise espacial das residências visitadas e dos cães infectados. DNA de L. infantum foi detectado em 8,4% (12/143) das amostras de pele dos cães e em 1,4% (2/143) das amostras de sangue. No mapa de risco, foram observados três aglomerados em Itaboca e um em Menino Jesus de Petimandeua. Pôde-se constatar que a maioria dos moradores das comunidades quilombolas reside em áreas próximas de mata e não utilizam proteção contra insetos vetores. A presença de reservatórios caninos de L. infantum associada com características ambientais (floresta preservada e áreas de desmatamento) e os hábitos dos proprietários dos cães (que vivem perto de áreas de floresta e não usam qualquer tipo de proteção contra insetos) podem favorecer a transmissão de L. infantum nas áreas estudadas.

ABSTRACT: This study was designed to detect L. infantum infection in dogs and to evaluate the factors associated with canine visceral leishmaniasis in the maroon communities of Menino Jesus de Petimandeua and Itaboca in the municipality of Inhangapi, Pará, Brazil. Whole blood and intact skin samples were collected from 143 dogs, and a questionnaire was applied. L. infantum DNA was detected by polymerase chain reaction (PCR) using primers RV1 and RV2. Collection sites were georeferenced to obtain a spatial distribution of the residences visited and infected dogs. L. infantum DNA was detected in 8.4% (12/143) of the skin samples and in 1.4% (2/143) of the blood samples. On the risk map, three clusters were observed in Itaboca and one was observed in Menino Jesus de Petimandeua. We observed that most of the inhabitants in these maroon communities live close to forested areas and do not use protection against insect vectors. The presence of canine reservoirs of L. infantum associated to environment characteristics (preserved forests and deforested areas) and habits of dog owners (living near forested areas and not using any protection against insects) may favor the transmission of L. infantum in the studied areas.

RESUMO: São relatados dois surtos de tripanossomíase por Trypanosoma evansi , em cavalos no município de Chaves, Ilha do Marajó, Pará, Brasil. O primeiro surto ocorreu em abril de 2011 em uma fazenda com 147 cavalos, em que 47 (31,97%) adoeceram e 40 (27,21%) morreram. O segundo ocorreu em maio de 2012 e envolveu nove propriedades. De um total de 679 cavalos, 209 (30,07%) adoeceram e 183 (26,97%) morreram. Os principais sinais clínicos observados foram perda de peso, edema abdominal, emboletamento dos membros e atrofia da musculatura da região pélvica e membros posteriores. A necropsia foi realizada em dois cavalos, um de cada surto. O equino do primeiro surto não apresentou lesões macroscópicas, enquanto o segundo, do segundo surto, apresentava emagrecimento, palidez e icterícia, aumento do baço com protrusão da polpa branca ao corte. O sistema nervoso central de ambos os animais revelou uma leve à severa encefalite linfoplasmocitária, difusa, com presença de células de Mott. A imunohistoquímica para T. evansi revelou estruturas similares a formas tripomastigotas nas lesões. Entre novembro e dezembro de 2013, um levantamento epidemiológico foi realizado nos municípios de Cachoeira do Arari, Santa Cruz do Arari, Salvaterra, Soure e Chaves. Somente Santa Cruz do Arari e Chaves relataram casos da doença. Foram coletadas amostras de sangue de 243 equinos e realizada a reação em cadeia de polimerase (PCR) para a detecção do DNA de T. evansi das quais 20 foram positivas.

ABSTRACT: Two outbreaks of trypanosomiasis by Trypanosoma evansi in horses in the municipality of Chaves, Marajó Island, Pará State, Brazil are reported. The first outbreak occurred in April 2011 in a farm with 147 horses; of these, 47 (31.97%) got sick, and 40 (27.21%) died. The second outbreak occurred in May 2012 and involved nine properties. Of a total of 679 horses, 209 (30.07%) got sick, and 183 (26.97%) died. The main clinical signs observed in these horses were weight loss, abdominal edema, toe dragging, and pelvic muscle atrophy. Necropsy was performed in two horses, one from each outbreak. Macroscopic alterations were not seen in the horse from the first outbreak; however, the horse from the second outbreak exhibited emaciation, pallor and icterus, as well as enlarged spleen with prominent white pulp at cut surface. Histopathology of the central nervous system of both animals revealed mild to severe, diffuse lymphoplasmacytic encephalitis, with presence of Mott cells. Immunohistochemistry for T. evansi revealed structures similar to intralesional trypomastigote forms. Between November and December of 2013, an epidemiological survey was carried out in the municipalities of Cachoeira do Arari, Santa Cruz do Arari, Salvaterra, Soure, and Chaves. Only Santa Cruz do Arari and Chaves had reported cases of the disease. Blood samples were collected from 243 horses for detection of T. evansi DNA by polymerase chain reaction (PCR) and 20 were positive.

RESUMO: O objetivo do presente estudo foi detectar ovos de helmintos e oocistos de protozoários em amostras de fezes de aves da ordem Passeriformes no estado do Pará, Brasil. Amostras de fezes foram coletadas individualmente de 403 aves Passeriformes oriundas de apreensão e mantidas em cativeiro no estado do Pará. As amostras foram processadas usando a técnica de dupla centrifugação em solução saturada de sacarose e as amostras positivas para oocistos de coccídios foram submetidas à esporulação em dicromato de potássio 2,0%. Ovos de helmintos e/ou oocistos de protozoários foram observados em 43,18% (174/403) das amostras fecais examinadas. Oocistos de coccídios foram detectados em 93,68% (163/174) das amostras positivas, enquanto que ovos de helmintos foram observados em 10,34% (18/174). A esporulação de oocistos ocorreu em 43,56% (71/163) das amostras, e somente oocistos de Isospora spp. foram detectados. Ovos de nematódeos das Superfamílias Trichostrongyloidea (4,60%; 8/174), Ascaridoidea (0,57%; 1/174) e Trichuroidea (0,57%; 1/174) foram diagnosticados nas amostras positivas. Ovos de Cestoda foram diagnosticados em 2,87% (5/174), enquanto que ovos de Trematoda foram detectados em 2,30% (4/174) das amostras positivas. Aves Passeriformes oriundas de apreensão e mantidas em cativeiro nas áreas visitadas estavam parasitadas por helmintos e protozoários, predominando a infecção por coccídios do gênero Isospora.

ABSTRACT: The objective of this study was to detect helminth eggs and protozoan oocysts in samples of feces from birds of the order Passeriformes in Para State, Brazil. Fecal samples were collected individually from 403 passerine birds seized and kept in captivity in Para State. Samples were processed by the double centrifugation technique in saturated sucrose solution and the coccidial oocyst-positive samples were submitted to sporulation in potassium dichromate 2.0%. Helminth eggs and/or protozoan oocysts were observed in 43.18% (174/403) of the fecal samples examined. Coccidial oocysts were detected in 93.68% (163/174) of the positive samples, whereas helminth eggs were observed in 10.34% (18/174) of the positive samples. Oocyst sporulation occurred in 43.56% (71/163) of the samples, and only Isospora spp. oocysts were detected. Nematode eggs of the superfamilies Trichostrongyloidea (4.60%; 8/174), Ascaridoidea (0.57%; 1/174), and Trichuroidea (0.57%; 1/174) were diagnosed in the positive samples. Cestoda eggs were diagnosed in 2.87% (5/174), whereas Trematoda eggs were detected in 2.30% (4/174) of positive samples. Passerine birds seized and kept in captivity in the visited local presented parasitism by intestinal helminths and protozoan, with a predominance of infection with coccidia of the gender Isospora.

RESUMO: O objetivo do presente trabalho foi realizar o diagnóstico da infecção natural por Trypanosoma evansi em procionídeos de vida livre e de cativeiro dos estados do Amapá e Pará, Brasil. Durante o período de fevereiro de 2012 a agosto de 2013, amostras de sangue total e esfregaços sanguíneos foram obtidos de 45 procionídeos de vida livre e de nove mantidos em cativeiro em mantenedores e Parques Zoobotânicos dos estados do Amapá e Pará. As amostras de sangue total foram coletadas e mantidas a -20ºC para pesquisa de DNA de T. evansi pela PCR utilizando-se os iniciadores RoTat 1.2 forward e RoTat 1.2 reverse. Os esfregaços sanguíneos também foram processados e examinados para a pesquisa de formas tripomastigotas do agente. DNA de T. evansi foi detectado em 18,52% (10/54) dos procionídeos, ocorrendo em mãos-peladas de cativeiro e quatis de vida livre e de cativeiro no estado do Pará. Não foram observadas formas tripomastigotas nos esfregaços sanguíneos. DNA de T. evansi foi detectado em P. cancrivorus e N. nasua no estado do Pará, sendo este o primeiro relato em P. cancrivorus.

ABSTRACT: The present study aimed to diagnose the natural infection of captive and free-living procyonids with Trypanosoma evansi in the states of Amapá and Pará, Brazil. From February 2012 to August 2013, whole blood samples and blood smears were obtained from 45 free-living procyonids and from nine procyonids kept in captivity in wild life refuges and zoobotanical parks in the states of Amapá and Pará. Whole blood samples were collected and kept at -20ºC for the detection of T. evansi DNA by PCR using the RoTat 1.2 forward and RoTat 1.2 reverse primers. In addition, the blood smears were processed and examined for the presence of trypomastigote forms of T. evansi. T. evansi DNA was detected in 18.52% (10/54) of the procyonids, namely, in captive crab-eating raccoons and captive and free-living coatis in Pará State. No trypomastigote forms were observed in the blood smears. DNA from T. evansi was detected in P. cancrivorus and N. nasua in Pará State, being this the first such report in P. cancrivorus.

A leishmaniose visceral é uma enfermidade cujo agente etiológico no Brasil é o protozoário Leishmania infantum chagasi. Os cães são considerados reservatórios urbanos da doença, sendo indicadores da ocorrência de casos humanos. O presente trabalho teve como objetivo diagnosticar a infecção por L. infantum chagasi em cães domiciliados e errantes do município de Belém, estado do Pará, através da reação em cadeia da polimerase (PCR) e da reação de imunofluorescência indireta (RIFI), empregando dois antígenos distintos. Amostras de sangue venoso de cães adultos, sem distinção de sexo ou raça, de diferentes bairros e épocas do ano da cidade de Belém-PA, foram colhidas em tubos sem e com anticoagulante para obtenção do soro e do DNA, respectivamente. Esses animais foram divididos em dois grupos: cães errantes capturados pelo Centro de Controle de Zoonoses (Grupo A) e cães domiciliados (Grupo B). Os soros foram analisados através do teste de RIFI para pesquisa de IgG utilizando-se dois antígenos distintos: 1) antígeno do kit Bio-Manguinhos/FIOCRUZ (Ag-PRO) contendo formas promastigotas de Leishmania sp. (complexo major-like); 2) Antígeno do Instituto Evandro Chagas (Ag-AMA) constituído por formas amastigotas de L. infantum chagasi. A avaliação dos dois antígenos foi realizada com as amostras reagentes a partir da titulação 1:80. Já a PCR foi realizada a partir do DNA extraído do sangue total dos animais e amplificado utilizando-se os iniciadores RV1e RV2. Das 335 amostras analisadas, 10,4% (35/335) foram reagentes na RIFI (Ag-PRO) e 0,9% (3/335) reagiram com o Ag-AMA. A distribuição das amostras positivas se deu da seguinte forma: Grupo A 14,8% (25/169) com Ag-PRO e 1,2% (2/169) com Ag-AMA; Grupo B 6% (10/166) com Ag-PRO e 0,6% (1/166) com Ag-AMA; sendo que todas as amostras positivas pelo teste de RIFI com o Ag-AMA também reagiram com o Ag-PRO e em nenhuma das amostras foi detectado o DNA de L. infantum chagasi. Os achados do presente estudo indicam que Belém ainda pode ser considerada área não endêmica para leishmaniose visceral canina e que a natureza do antígeno influencia no resultado da RIFI para a pesquisa de anticorpos anti-L. infantum chagasi em cães, sendo que a RIFI que utiliza formas promastigotas de Leishmania major-like como antígeno deve ser utilizada com cautela como método diagnóstico confirmatório em estudos epidemiológicos em áreas não endêmicas para LVC.

Visceral leishmaniasis is a disease whose etiological agent in Brazil is Leishmania infantum chagasi. Dogs are considered urban reservoirs of the disease, being an indicator of the human cases occurrence. The present study aimed to diagnose L. infantum chagasi infection in stray and owned dogs in Belém, Pará State, by polymerase chain reaction (PCR) and indirect immunofluorescence assay (IFA) using two different antigens. Venous blood samples from adult dogs, regardless of gender or breed, of different neighborhoods in Belém-PA, were collected in tubes with and without anticoagulant to obtain DNA and serum, respectively. These animals were divided into two groups: stray dogs captured by the Center for Zoonosis Control (Group A) and owned dogs (Group B). Sera were analyzed by IFA testing for IgG using two different antigens: 1) Bio-Manguinhos/Fiocruz antigen kit (Ag-PRO) containing promastigotes of Leishmania sp. (Complex Major-Like), 2) Instituto Evandro Chagas Antigen (Ag-AMA) consisting of amastigotes of L. infantum chagasi. The evaluation of the two antigens was performed considering positive the reactions above the 1:80 dilution. Already PCR was performed with DNA isolated from whole blood of animals and amplified with the primers RV1 and RV2. Of the 335 samples analyzed, 10.4% (35/335) were positive by IFA (Ag-PRO) and 0.9% (3/335) with the Ag-AMA. The distribution of positive samples is given as follows: Group A 14.8% (25/169) with Ag-PRO and 1.2% (2/169) with Ag-AMA; Group B 6% (10/166) with Ag-PRO and 0.6% (1/166) with Ag-AMA, being that all samples positive by IFA with Ag-AMA also reacted with Ag-PRO, and none of the samples detected DNA of L. infantum chagasi. The findings of this study indicate that Belém can still be considered non-endemic area for canine visceral leishmaniasis and the nature of the antigen influences the result of the IFA for the detection of anti-L. infantum chagasi antibodies in dogs, and the IFA using promastigotes of Leishmania major-like antigen should be used with caution as a confirmatory diagnostic on epidemiological studies in non-endemic areas.

Mycoplasma haemofelis, 'Candidatus Mycoplasma haemominutum' e 'Candidatus Mycoplasma turicensis' são os agentes causadores da micoplasmose felina, que podem causar anemia aguda ou crônica. O objetivo deste trabalho foi determinar a ocorrência de hemoplasmas em gatos domésticos de Belém, Pará. Para isso, 201 gatos foram divididos em três grupos: Grupo A foi composto por 101 gatos de rua capturados pelo Centro de Controle de Zoonoses, o grupo B foi composto por 62 gatos domiciliados e saudáveis e o grupo C foi composto por 38 gatos domiciliados que apresentavam alguma afecção clínica. Foram coletadas amostras de sangue para a realização de Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) para detectar o DNA destes agentes, os quais foram sequenciados e alinhados. A análise estatística foi realizada para detectar a associação entre a infecção, o sexo dos animais e os grupos experimentais. O DNA de pelo menos uma das espécies de hemoplasmas pesquisados foi detectado em 19,9% (40/201) das amostras, sendo o DNA de 'Candidatus M. haemominutum' encontrado em 7,96% (16/201) das amostras, M. haemofelis em 1,49% (3/201) das amostras, enquanto que o DNA de 'Candidatus M. turicensis' foi detectado em 12,93% (26/201) das amostras. O DNA destes três agentes foi detectado em gatos dos grupos A e C, enquanto que no grupo B foi detectado apenas 'Candidatus M. turicensis' e 'Candidatus M. haemominutum' Foi detectada a influência do sexo sobre a infecção hemoplasmas apenas entre 'Candidatus M. haemominutum' e machos. Estes resultados mostraram que os hemoplasmas circulam entre os gatos domésticos em Belém e 'Candidatus M. turicensis' e 'Candidatus M. haemominutum' foram mais comuns do que M. haemofelis, especialmente em gatos vadios.

Mycoplasma haemofelis, 'Candidatus Mycoplasma haemominutum' and 'Candidatus Mycoplasma turicensis' are the causative agent of the feline mycoplasmosis, which could cause acute or chronic anemia. The aim of this work was to determine the occurrence of hemoplamas in domestic cats from Belém, Pará. To this, 201 cats were divided into three groups: Group A were composed by 101 stray cats captured by Zoonosis Control Center, group B were composed by 62 owners healthy cats and group C were composed by 38 owners cats that were suffering by some medical condition. Blood samples were collected to perform Polymerase Chain Reaction (PCR) to detect the DNA of these agents, which were sequenced and aligned. Statistical analysis was performed to detect association between the infection, the sex of the animals and experimental groups. The DNA of at least one of the hemoplasmas studied were detected in 19,9% (40/201) of the samples, being the DNA of 'Candidatus M. haemominutum' was found in 7.96% (16/201) of samples, M. haemofelis in 1.49% (3/201) of samples, while 'Candidatus M. turicensis' in 12.93% (26/201) of the samples. The DNA of these three agents was detected in cats from groups A and C, while in Group B was detected only 'Candidatus M. turicensis' and 'Candidatus M. haemominutum'. The influence of sex on hemoplasma infection was detected only between 'Candidatus M. haemominutum' and males. These findings showed that hemoplasma circulate among domestic cats in Belém, and 'Candidatus M. turicensis' and 'Candidatus M. haemominutum' were more common than M. haemofelis, especially in stray cats.