RESUMO Abortamento e complicações na reprodução são importantes causas de perda econômica na equideocultura. Estudos dos agentes causais podem ajudar a identificar patógenos ou outros fatores envolvidos e definir medidas apropriadas para reduzir sua ocorrência. Esta pesquisa investigou as causas primárias de aborto, natimortalidade e mortalidade perinatal em equinos de diversas regiões do Brasil. Tecidos de fetos abortados, natimortos e potros submetidos ao Instituto Biológico de São Paulo, Brasil, no período de janeiro de 2010 a julho de 2013, foram processados por meio de técnicas de isolamento viral e bacteriano, PCR, histologia e imuno-histoquímica. Infecção bacteriana foi a causa mais detectada, encontrada em 16 de 53 amostras submetidas à análise bacteriana, seguida de causa viral em 2 de 105 amostras, e causas não infecciosas (isoeritrólise neonatal) em 2 de 105 amostras. Fungo foi encontrado em uma única amostra de 53 testadas. As bactérias isoladas mais frequentemente foram Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, E. coli associada a Streptococcus spp., Staphylococcus spp. associado a Bacillus spp. Os seguintes agentes foram observados em uma única amostra cada: Arcanobacterium pyogenes, Streptococcus spp., Corynebacterium spp., Actinobacillus spp. e Rhodococcus equi. A identificação predominante de bactérias fecais e outras bactérias oportunistas, ao invés de outros patógenos comumente associados a quadros de abortamento equino, tais como Leptospira spp. e Herpesvírus equino tipo 1, sugere a necessidade de maior atenção no manejo higiênico das éguas em reprodução, a fim de prevenir infecções bacterianas que possam causar perda fetal, natimortalidade e mortalidade perinatal.

ABSTRACT Abortion and complications in reproduction are important causes of economic loss in horse breeding. Studies of its causal agents can help to identify the primary pathogens or other factors involved and define appropriate measures to reduce its occurrence. This research aimed to investigate the primary causes of equine abortion, stillbirth, and perinatal mortality in regions of Brazil. Tissue from aborted fetuses, stillbirths, neonates and foals submitted to the Biological Institute of São Paulo, Brazil, from January 2010 to July 2013 were processed for viral and bacterial isolation, polymerase chain reaction (PCR), histology, and immunohistochemistry. Bacterial infection was the primary detected cause of abortion, found in 16 of the 53 animals submitted for bacterial analysis followed by viruses analysis in 2 of 105 animals, and noninfectious causes (neonatal isoerythrolysis) in 2 of 105 animals. Fungi were found in a single sample of 53 tested. The most frequent bacteria recovered were Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, combined E. coli and Streptococcus spp., Staphylococcus spp., and Bacillus spp. The following agents were each observed in a single sample: Arcanobacterium pyogenes, Streptococcus spp., Corynebacterium spp., Actinobacillus spp., and Rhodococcus equi. The predominant identification of fecal and other opportunistic bacteria as opposed to pathogens commonly associated with equine abortion, such as Leptospira spp. and equine herpesvirus type 1 (EHV-1), suggests the need of improving hygiene management of breeding mares to prevent bacterial infection that may cause fetal loss, stillbirth, and perinatal mortality.

RESUMO Os alimentos preparados com produtos de origem animal são os mais envolvidos em casos de intoxicação alimentar estafilocócica; portanto a pesquisa do Staphylococcus spp. em queijos tipo Emmental é relevante. O objetivo foi isolar e identificar espécies de Staphylococcus coagulase negativas (CNS)de queijo Emmental acondicionado em vários tipos de embalagem, por meio de técnicas bacteriológicas e bioquímicas e detectar, por PCR, a presença de nove genes responsáveis pela produção de enterotoxinas. Das 180 amostras, foram isoladas 204 cepas de CNS, que foram identificadas por provas bioquímicas como: 46 (22,6%) S. saprophyticus, 27 (13,2%) S. hominis spp. hominis, 22 (10,8%) S. sciuri, 21 (10,3%) S. xylosus, 19 (9,3%) S. epidermidis , 19 (9,3%) S. haemolyticus , 17 (8,3%) S. lentus , 17 (8,3%) S. warneri , 11(5,4%) S. equorum e 5 (2,5%) S. cohnii . Na PCR multiplex, em 14 (6,9%) isolados foi detectada a presença dos genes para enterotoxina E (SEE), em 11 (78,6%) J (SEJ), em 1 (7%) C (SEC) e em 1 (7%) I (SEI). Com base nos resultados, o tipo de embalagem não interferiu na multiplicação dos Staphylococcus spp. isolados dos queijos. Neste estudo, verificou-se que a capacidade para a produção de coagulase pela bactéria não pode ser concebida como indicativa de enterotoxigenicidade, portanto devem-se considerar os CNS como objeto de importância na epidemiologia das intoxicações estafilocócicas, fazendo-se necessária a atenção com relação à pesquisa dos CNS nos alimentos, uma vez que foram detectados genes responsáveis pela produção de toxinas, e nenhuma das amostras apresentou contagem para Staphylococcus spp. acima do limite permitido pela legislação.

ABSTRACT Food prepared with products derived from animals are involved in most cases of staphylococcal poisoning; therefore, the research of Staphylococcus spp. in Emmental cheese is more applicable. The objective of this study was to identify coagulase-negative Staphylococcus spp. (CNS) in cheese using biochemical and molecular techniques to detect the presence of nine genes responsible for the production of enterotoxins. From 180 samples analyzed, 204 CNS strains were obtained and identified as being 46 (22.6%) S. saprophyticus strains, 27 (13.2%) S. hominis spp. hominis strains, 22 (10.8%) S. sciuri strains, 21 (10.3%) S. xylosus strains, 19 (9.3%) S. epidermidis strains, 19 (9.3%) S. haemolyticus strains, 17 (8.3%) S. lentus strains, 17 (8.3%) S. warneri strains, 11 (5.4%) S. equorum strains and 5 (2.5%) S. cohnni . Using the PCRm protocol, 14 (6.9%) strains with the presence of the genes on the enterotoxin E (SEE)11 (78.6%), J (SEJ) 1 (7%), C (SEC) 1 (7%) and I (SEI) 1 (7%) were detected. Based on the results, the type of package is not interfered of growth and isolated that Staphylococcus spp. in cheese. It was observed that bacteria capacity to produce coagulase cannot be understood as an indicative of enterotoxigenicity; therefore, the CNS should be considered as a target of importance in the epidemiology of staphylococcal intoxications. It can be concluded that CNS need to be included in bacterial foodborne disease research, since the genes responsible for the production of toxins were detected and none of the studied samples presented Staphylococcus spp. counting above the limits allowed by legislation.

Com base no histórico de distúrbios reprodutivos, foram realizados inquéritos sorológicos e tentativas de isolamento de Brucella ovis em 28 propriedades do estado de São Paulo, totalizando 294 ovinos. Os soros colhidos por ocasião das visitas aos estabelecimentos rurais foram submetidos ao teste de fixação do complemento. Durante os exames clínicos, também foram colhidas amostras de materiais biológicos suspeitos para posterior cultivo bacteriológico em meio Brucella ágar, num total de 16 fetos abortados, um útero, seis secundinas, 13 secreções uterinas, seis zaragatoas de muco vaginal, 17 amostras de sêmen e três zaragatoas prepuciais. A proporção de ovinos com histórico de distúrbios reprodutivos e sororreativos para B. ovis foi de 1,7% (5/294), sendo um macho e quatro fêmeas, com títulos variando de 800 UI a 1.600 UI. Quatro rebanhos dos 28 pesquisados apresentaram animais sororreagentes (14,3%). Todos os cultivos das amostras biológicas foram negativos, inclusive sêmen e órgãos reprodutivos de carneiro da raça Texel, positivo em dois testes de fixação de complemento com intervalo de seis meses. Nos rebanhos de ovinos do estado de São Paulo examinados, não foi possível relacionar os distúrbios reprodutivos à sorologia positiva para B. ovis.No entanto, foi detectada presença de focos, fator de risco para a disseminação da bactéria nos rebanhos.

Based upon a history of reproductive disorders, a serological survey and attempts to isolate Brucella ovis were performed in 28 farms in the State of São Paulo, in a total of 294 sheep. The sera sampled on the occasion of the visit to the farms were subject to complement fixation. During clinical examination, samples of several suspicious biological materials were collected for further bacterial culture in Brucella agar medium, in a total of 16 aborted foetuses, one uterus, one placenta, 13 uterine discharge, six vaginal swabs, 17 semen samples and three preputial swabs. The proportion of sheep with a history of reproductive disorders and serum reactive for B. ovis was of 1.7% (5/294), including one ram and four ewes, with titres ranging from 800 IU to 1600 IU. Four of the 28 sheep herds surveyed had serum reactive animals (14,3%). All cultures of biological samples were negative, including semen and swabs from the reproductive organs of a Texel ram, positive in two complement fixation tests, six months apart. In the sheep herds surveyed in the State of São Paulo, it was not possible to relate the reproductive disorders to the positive serology for B. ovis, however, foci were detected, representing a risk factor for bacterial dissemination in the herds.

Campylobacteriosis is a worldwide distributed zoonosis. One of the main virulence factors related to Campylobacter spp. in animals and humans is the cytolethal distending toxin (CDT), encoded by three adjacent genes (cdtA, cdtB, cdtC). The occurrence of Campylobacter spp. in samples of vegetables has not been reported in Brazil yet, and has seldom been described in the international literature. The detection of CDT in these strains has not been reported, either. The objectives of the present study were to determine the occurrence of Campylobacter spp. strains carrying virulence factors in samples of poultry and vegetables (lettuce and spinach) from different points of sale, thus verifying if vegetables are as an important vehicle for potentially virulent Campylobacter spp. strains as poultry. Twenty four strains were identified as Campylobacter jejuni by phenotypic and genotypic methods: 22 from broiler carcasses and two from lettuce samples. Three strains were identified as Campylobacter coli: two from broiler carcasses and one from lettuce. The presence of the cdt genes were detected in 20/24 (83.3%) C. jejuni strains, and 3/3 (100%) C. coli strains. The isolation of Campylobacter spp. strains with the cdt gene cluster in lettuce samples points to a new possible source of contamination, which could have an impact in the vegetable production chain and risk to public health. Results show that potentially virulent C. jejuni and C. coli strains remain viable in samples of broiler carcasses and vegetables at the points of sale.

To determine the frequency of anti-Brucella canis antibodies in dogs attended in veterinary clinics from Patos, Paraíba State, Brazil, as well as to identify risk factors and to isolate and identify the agent, 193 dogs were used. Agar gel immunodiffusion test (AGID) was used to detect B. canis antibodies in sera. Isolation of B. canis was carried out in blood and bone marrow from seropositive animals. Six animals tested seropositive in AGID, resulting in a frequency of 3.11%. B. canis was isolated from bone marrow of one seropositive animal, with confirmation by PCR. Lack of cleaning of the dog's environment was identified as risk factor (odds ratio = 7.91). This is the first report of isolation of B. canis in dogs from the Northeast region of Brazil.

Foram analisadas 192 amostras de queijo clandestinas provenientes de várias regiões do Estado de São Paulo e Minas Gerais, Brasil, para isolamento e detecção de DNA de Brucella spp. através das técnicas de cultivo microbiológico e reação da polimerase em cadeia (PCR), respectivamente. Para as amostras positivas foi pesquisada a ocorrência da espécie Brucella abortus (biovares 1, 2 e 4), além da diferenciação do DNA em cepa vacinal B19 ou de campo por PCR. Não foi possível isolar o microrganismo de nenhuma amostra, porém, na PCR, 37 amostras (19,27%) foram positivas na reação com primers gênero específicos e destas, todas (100%) foram comprovadas como sendo Brucella abortus. A diferenciação da cepa revelou que 30/37 amostras (81,08%) eram cepa vacinal B19 e sete (18,92%) eram cepas de Brucella abortus de campo. Os resultados mostraram uma maior sensibilidade diagnóstica da PCR em relação ao cultivo microbiológico, e a padronização da reação de diferenciação da cepa em vacinal ou campo permitiu que todas as amostras positivas para Brucella abortus fossem analisadas, sendo uma metodologia confiável e aplicável a infecções naturais pelo microrganismo.

A total of 192 samples of illegal cheese from different regions of the states of São Paulo and Minas Gerais, Brazil, were analyzed for the isolation and detection of Brucella spp. DNA by means of microbiological culture and polymerase chain reaction (PCR), respectively. Samples that yielded positive results were submitted to the analysis of the occurrence of Brucella abortus (biovars 1, 2 e 4), as well as to the differentiation of DNA in B19 vaccinal strain or Brucella abortus field strain using PCR. Although the microorganism was not isolated from any sample, PCR detected 37 positive samples (19.27%) using genus-specific primers. From these, all (100%) were Brucella abortus. Differentiation of the strain showed that 30/37 samples (81.08%) were vaccinal strain B19 and seven (18.92%) were Brucella abortus field strains. Results showed that diagnostic sensitivity of PCR was greater than that of microbiological culture. The standardization of the reaction for the differentiation of vaccinal and field strains enabled the analysis of all samples positive for Brucella abortus. It is, therefore, a reliable method, also applicable to natural infections caused by the microrganism.

O gênero Campylobacter tem grande destaque em saúde pública, principalmente por pertencerem a este gênero várias espécies que podem causar diarréia. Estas espécies podem ser encontradas em amostras de água, alimentos e no trato intestinal das aves. Este estudo investigou a presença de Campylobacter jejuni e Campylobacter coli em abatedouros de aves no Estado de São Paulo. As 288 amostras foram coletadas em seis estabelecimentos e incluíram: fezes; penas; água de escaldamento, de evisceração e de resfriamento; e água de enxaguadura de carcaça não eviscerada, eviscerada e resfriada. Após o isolamento microbiológico das amostras positivas de Campylobacter spp. foi realizada uma Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) utilizando o gene HIP, da hipuricase, específico para Campylobacter jejuni e o gene da enzima aspartoquinase, específico para Campylobacter coli. A porcentagem de amostras positivas para Campylobacter spp. foi de 4,9% (14/288), sendo que o isolamento foi maior em amostras de fezes (22%, 8/36). Foi isolada uma amostra positiva para C. coli. Em conclusão, os resultados indicam que há uma necessidade de melhorar a qualidade higiênico-sanitária do controle de Campylobacter em abatedouros de aves.

The genus Campylobacter is of great importance to public health because it includes several species that may cause diarrhea. These species may be found in water, food and in the intestinal tract of chickens. This study investigated the presence of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli in chicken abattoirs in São Paulo State, Brazil. A total of 288 samples of feces, feathers, scald water, evisceration water, chiller water, and the rinse water of eviscerated, not eviscerated and chilled carcasses were collected in six chicken abattoirs. Polymerase Chain Reaction (PCR) was performed in Campylobacter spp.-positive isolates using the gene HIP, specific for hippuricase enzyme from Campylobacter jejuni and aspartokinase gene, specific to detect Campylobacter coli. The percentage of positive isolates of Campylobacter jejuni was 4.9% (14/288). Isolation was greater in feces samples (22%, 8/36). One sample was positive for the species C. coli. In conclusion, the results indicate that it is necessary to improve quality control for Campylobacter spp. in chicken abattoirs.

O objetivo foi relatar que a concentração de microrganismos aceitável para uma amostra de sêmen utilizada para inseminação pode não ser segura para a realização de fertilização in vitro. Aparentemente a amostra deve ser isenta da presença de contaminantes, pois a condição in vitro promove ambiente favorável para seu crescimento.

The aim of this study was to report that the acceptable concentration of microorganisms in a semen sample for insemination may not be safe for an in vitro fertilization procedure. It seems that the semen sample should be completely germ-free, because of the excellent microorganism proliferation condition promoted by the in vitro environment.

O objetivo do presente trabalho foi caracterizar geneticamente estirpes de Campylobacter jejuni subsp. jejuni isoladas de humanos e de diferentes origens animais (bovinas, suínas, cães, primatas, javalis, suínos e aves de corte). Um total de 828 amostras (fezes, carcaças, fetos abortados e útero histerectomizado) foram analisadas por métodos de rotina bacteriológica e 36 estirpes de C. jejuni foram isoladas. Trinta estirpes de origem fecal humana foram obtidas de laboratórios de análises clínicas da cidade de São Paulo. As 66 estirpes de C. jejuni isoladas foram submetidas à caracterização genética. Oligonucleotídeos baseados no gene fla A foram usados na reação de polimerase em cadeia (PCR) e amplificou um fragmento de 702 pb. Os produtos obtidos pela PCR foram avaliados pelas técnicas de seqüenciamento e análise genealógica. Análise da variabilidade genética das 66 estirpes revelou 44 diferentes subtipos de C. jejuni. Um subtipo de origem humana apresentou seqüência idêntica à de C. jejuni depositada no GenBank (GENBANK acesso número AF050186). A subtipagem das estirpes de C. jejuni baseadas no seqüenciamento da região variável do gene fla A e na análise do alinhamento das seqüências pelo método da Máxima Parcimônia, mostraram-se altamente discriminatórios fornecendo melhores condições para a correta diferenciação entre estirpes originárias de surto e as isoladas esporadicamente. Este foi o primeiro estudo de subtipagem molecular de estirpes de C. jejuni de origem humana e animal utilizando a técnica do seqüenciamento com análise genealógica realizado no Estado de São Paulo, Brasil.

The objective of the present trial was to characterize genetically strains of Campylobacter jejuni subsp. jejuni isolated from humans and several animal sources (bovines, swine, dogs, primates, wild boars and poultry). A total of 828 different animal samples (feces, carcass, aborted fetus and hysterectomized uterus) were analysed by means of routine bacteriological methods, and 36 C. jejuni strains were isolated. Thirty strains of human fecal origin were obtained in clinical analysis laboratories in the city of São Paulo. The 66 C. jejuni strains isolated were submitted to genetic characterization. Primers based on fla A gene were used in a polymerase chain reaction (PCR) and amplified a fragment of the 702 bp. PCR products were evaluated by means of sequencing and genealogic analysis. Genetic variability analysis of 66 strains showed 44 different subtypes of C. jejuni. One subtype was identical to a C. jejuni strain of human origin with the sequence in the GenBank (GENBANK accession number AF050186). Subtyping analysis of C. jejuni strains based on sequencing of the fla A gene variable region and analysis of sequence alignment by the Maximum Parsimony method showed to be highly discriminatory, providing the best conditions to differentiate strains involved in outbreaks from those sporadically isolated. This is the first study of molecular subtyping analysis of human and animal C. jejuni strains using sequencing technique and genealogic analysis in the state of São Paulo, Brazil.

O presente trabalho avaliou a PCR na detecção de leptospiras em sêmen e urina de dez touros sorologicamente reagentes, comparando seus resultados com aqueles obtidos por outras técnicas de diagnóstico. Foram realizadas duas colheitas de materiais em dias alternados. As amostras de sêmen e de urina foram separadas em alíquotas para visualização direta em microscopia de campo escuro, inoculação em hamsters (apenas para o sêmen), isolamento em meio de cultura e PCR. Nenhum hamster apresentou positividade na prova de soroaglutinação microscópica (SAM); fragmentos de rins e fígado desses animais foram utilizados para a tentativa de isolamento em meio de cultura, sendo positivo o cultivo a partir do rim de hamster inoculado com semen de um touro, e do fígado de hamsters inoculados com o semen de três touros. O isolamento em meio de cultura foi negativo para todas as amostras de sêmen, mas foi positivo para cinco amostras de urina. Na PCR não houve resultado positivo para as amostras de sêmen, e apenas uma amostra de urina apresentou resultado positivo, sendo coincidente com uma das culturas positivas. Não foi possível visualizar leptospiras em nenhuma das amostras por exame direto em microscopia de campo escuro.

This study evaluated PCR for the detection of leptospires in semen and urine of ten serologically reactive bulls, comparing these results with those obtained with other diagnosis techniques. Two collections of materials were done in alternate days. Semen and urine samples were separated in aliquots for: direct visualization in dark field microscopy; inoculation in hamsters (for semen only); isolation in culture media; and PCR. No hamster was positive by the microscopic agglutination test (MAT); kidney and liver fragments from the hamsters were used in an isolation attempt in culture media, with one positive isolation from the kidney of a hamster inoculated with semen of one bull, and from liver of hamsters inoculated with semen of three bulls. Isolation in culture was negative for all semen samples, but positive for five urine samples by direct inoculation. In PCR there was no positive result for semen samples, and only one urine sample was positive, which was coincident with one of the positive cultures. It was not possible to visualize leptospires in any of the samples by dark field microscopy.

A leptospirose é uma zoonose de ampla distribuição geográfica que acomete os animais domésticos e silvestres, tendo o homem como ponto final da cadeia epidemiológica. O diagnóstico da leptospirose em primatas é dificultado em relação a outras espécies animais, porque os sinais clínicos e lesões são menos evidentes e a resposta de anticorpos é detectada apenas em curtos períodos. O presente trabalho tem por objetivo descrever a detecção de Leptospira spp empregando-se a Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) em amostras clínicas provenientes de um macaco prego (Cebus apella) criado em cativeiro, que apresentou ao exame macroscópico realizado durante a necrópsia, características sugestivas de leptospirose (icterícia e rins hemorrágicos). Amostras de urina e fragmento de rim friável foram submetidas às técnicas cultivo e inoculação experimental em cobaias e PCR empregando-se primers gênero específicos da seqüência do gene 16S rRNA de Leptospira interrogans sorovar canicola. Na PCR as amostras clínicas revelaram um fragmento amplificado de 330 pb correspondente ao gênero Leptospira. O isolamento do agente foi negativo nas demais técnicas empregadas. Pelos resultados obtidos, verifica-se que a técnica de PCR representou uma importante ferramenta de detecção de leptospiras em primatas não-humanos, principalmente considerando-se que não foi necessária a viabilidade do patógeno, permitindo a detecção do agente em amostras autolisadas, congeladas ou amostras mal conservadas, que prejudicaram o isolamento e a inoculação experimental.

Leptospirosis is a widely distributed zoonosis that affects domestic and wild animals, and that has the man as the end point of its epidemiological chain. Leptospirosis diagnosis in primates is more difficult than in other animal species, as clinical signs and lesions are less evident and antibody response is detected only for short periods. The aim of this article was to describe the detection of Leptospira spp using polymerase chain reaction (PCR), in clinical samples from one captive black-capped Capuchin monkey (Cebus apella), which presented characteristics compatible with leptospirosis (jaundice and haemorrhagic kdney) in the macroscopic post-mortem examination. A friable kidney fragment and urine sample were cultured and submitted to experimental inoculation in guinea pigs and PCR using genus specific primer pair targeting the 16S rRNA region from Leptospira interrogans serovar canicola. Isolation of the agent was negative both in culture and experimental inoculation. The PCR amplification of the clinical samples showed a 330 pb amplified fragment that corresponds to the Leptospira genus. Based on these results PCR was considered an important tool for leptospira detection in nonhumam primates, more sensitive and specific than other techniques, especially considering that the viability of the pathogen was not possible. These advantages enable the detection of the leptospiras in urine and kidney, even when autolysed, frozen or badly conserved, which prevented the isolation and experimental inoculation from positive results.

Perfis eletroforéticos de proteínas de cepas Campylobacter jejuni subsp. jejuni isoladas de fezes de diferentes espécies animais, inclusive o homem, foram comparados. Quatorze cepas (duas de cada espécie) mais duas cepas de origem humana e a cepa de referência foram rompidas por ultra-som e suas proteínas solúveis totais analisadas através das técnicas de SDS-PAGE em gel de poliacrilamida a 12% e análise densitométrica. Todas as cepas tinham em comum bandas que migraram em regiões que correspondiam ao peso molecular de 45 e 66 Kda. As regiões discordantes correspondiam principalmente às regiões entre 97 e 200 Kda. Das 17 cepas, 13 (76.5%), foram classificadas como biotipo I, três (17.6%) como biotipo II e uma (5.8%) como biotipo III. Uma vez que os extratos de proteínas foram obtidos de células que se desenvolveram sob condições idênticas, possibilitando a expressão do mesmo fenótipo, estas regiões protéicas discordantes poderiam estar relacionadas a diferentes sorotipos ou genótipos.

Electrophoretic protein profiles of Campylobacter jejuni subsp. jejuni strains isolated from feces of seven animal species, including man, were compared. Fourteen strains (two from each species) plus two human strains and the reference one, were ruptured by ultrasound and their total soluble proteins were analyzed by SDS-PAGE technique in a 12% polyacrylamide gel with computerized densitometric reading by the molecular analyst software. All the strains had bands in common that correspond to 45 and 66 Kda molecular weight. The disagreement corresponded to a 97 to 200 Kda molecular weight region. From the 17 strains, 13 (76.5%), were classified as biotype I, three (17.6%) as biotype II and one (5.8%) as biotype III. Since protein extracts were obtained from cells grown under identical conditions, and thus, able to express the same phenotype, this disagreement region could be related to different genotypes or serotypes.

Avaliou-se a reação de contraimunoeletroforese (CIE) como teste gênero-específico para diagnóstico da leptospirose suína, usando-se três extratos solúveis de Leptospira sp, sorovares pomona, icterohaemorrhagiae e patoc, obtidos pelo tratamento com Triton X-100 a quente e aplicados a amostras de soro de suínos subdivididos em três grupos: Grupo 1, 10 suínos experimentalmente infectados com estirpe Pomona; Grupo 2, 50 suínos naturalmente infectados e Grupo 3, controle. As amostras de soros foram submetidas à reação de CIE e os resultados comparados aos da Soroaglutinação Microscópica (SAM), técnica de referência pela WHO. Os Grupos 1 e 3 foram monitorados por 93 dias após a inoculação (p.i.). Pela SAM a soroconversão do Grupo 1 ocorreu por volta do 10º dia p.i., enquanto pela CIE, empregando-se qualquer extrato antigênico, foi anterior à SAM. Quando a CIE foi realizada frente a antigeno homólogo à infecção, seus resultados foram equivalentes aos da SAM, não se verificando o mesmo frente aos antígenos heterólogos. Neste aspecto, os Grupos 1 e 3 mostraram comportamento diferente pois não houve diferença significativa entre os resultados da CIE frente aos três antígenos, o que poderia significar serem independentes do sorovar responsável pelo surto ou infectante. Embora a CIE seja segura, rápida, de fácil execução, de baixo custo e ideal para análise em grande escala de amostras, revelou-se de limitada capacidade gênero-específica, o que não é desejavel para testes de triagem de campo; mas poderia ser útil na detecção precoce de resposta sorológica em relação à SAM.

The Counterimmunoelectrophoresis reaction (CIE) was tested as a genus specific test for swine leptospirosis diagnosis using three soluble extracts obtained from Leptospira sp, serovars pomona, icterohaemorrhagiae and patoc. The extracts were treated with hot Triton X-100 and applied to serum samples of animals divided in three groups: Group 1, 10 swines experimentally infected with the Pomona strain; Group 2, 50 naturally infected swines and Group 3, 10 swines control. These animals were serologically evaluated by CIE and by the Microscopic Agglutination Test (MAT), the WHO reference technique. Groups 1 and 3 were monitored during a period of 93 days after infection (a.i.). Group 1 serum convertion took place around the 10th day a.i. by MAT but ocurred earlier by CIE using any antigen. When CIE was carried out with the homologous antigen to the experimental infection, the results were consistent with MAT, but not when the heterologous antigens were used. Groups 1 and 3 showed distinct results: in Group 3, diferences between results of CIE accomplished with any three antigen extracts were not significant, indicating lack of dependence on the serovar responsible for the outbreak. Although being safe, fast, easy to perform, inexpensive and ideal for analysis of large number of samples, CIE revealed limited genus specificity, which is not convenient for field screening tests. The advantage of CIE is the capability to detect antibodies earlier than MAT.