OBJECTIVE: To describe the virological characteristics of the influenza strains circulating in Argentina in 2005-2008 and to assess the prevalence of antiviral resistance. METHODS: On the basis of their geographical spread and prevalence, influenza A and B isolates grown in Madin-Darby canine kidney cells were selected after antigenic and genomic characterization to be analyzed for antiviral resistance by enzymatic assay and pyrosequencing. Amantadine susceptibility was evaluated by pyrosequencing for known resistance markers on 45 strains of influenza A. Susceptibility to oseltamivir and zanamivir was evaluated by enzymatic assay of 67 influenza A and 46 influenza B strains, some of which were further analyzed by sequencing the neuraminidase gene. RESULTS: Resistance to amantadine was observed only on A(H3N2) strains (29/33); all of them carried the mutation S31N in their M2 sequence. Oseltamivir resistance was observed in 12 (34.3%) of the 35 A(H1N1) strains from 2008; all of them carried the mutation H275Y in their neuraminidase sequence. All these viruses remained sensitive to zanamivir. CONCLUSIONS: This study describes a high incidence of amantadine-resistant influenza A(H3N2) viruses since 2006 and an unprecedented increase in oseltamivir resistance detected only in influenza A(H1N1) viruses isolated in 2008. Influenza A and B viruses were more sensitive to oseltamivir than to zanamivir, and influenza A viruses were more sensitive to both neuraminidase inhibitors than the influenza B viruses. The national data generated and analyzed in this study may help increase knowledge about influenza antiviral drug resistance, which is a problem of global concern.

OBJETIVO: Describir las características virológicas de las cepas de virus de la gripe que circulaban en la Argentina entre el 2005 y el 2008, y evaluar la prevalencia de la resistencia a los antivíricos. MÉTODOS: Según su diseminación geográfica y su prevalencia, se seleccionaron aislados de gripe A y B cultivados en células renales caninas de Madin-Darby después de su caracterización antigénica y genómica, y se analizó su resistencia a los antivíricos mediante análisis enzimático y pirosecuenciación. La sensibilidad a la amantadina se evaluó por pirosecuenciación para los marcadores conocidos de resistencia en 45 cepas de gripe A. La sensibilidad al oseltamivir y al zanamivir se evaluó mediante análisis enzimático de 67 cepas de gripe A y 46 cepas de gripe B, algunas de las cualesse analizaron en mayor profundidad mediante la secuenciación del gen de la neuraminidasa. RESULTADOS: Se observó resistencia a la amantadina solo en las cepas de gripe A (H3N2) (29/33); todas ellas tenían la mutación S31N en su secuencia de M2. Se observó resistencia al oseltamivir en 12 (34,3%) de las 35 cepas de gripe A (H1N1) aisladas en el 2008; todas ellas tenían la mutación H275Y en su secuencia de neuraminidasa. Todos estos virus conservaron su sensibilidad al zanamivir. CONCLUSIONES: En este estudio se describe una incidencia elevada del virus de la gripe A (H3N2) resistente a la amantadina desde el 2006 y un aumento sin precedentes de la resistencia al oseltamivir detectada solo en los virus de la gripe A (H1N1) aislados en el 2008. Los virus de la gripe A y B fueron más sensibles al oseltamivir que al zanamivir y los virus de la gripe A fueron más sensibles a ambos inhibidores de la neuraminidasa que los virus de la gripe B. Los datos nacionales generados y analizados en este estudio pueden ayudar a aumentar los conocimientos acerca de la resistencia a los fármacos antivíricos dirigidos contra el virus de la gripe, lo que es un motivo de preocupación mundial.

By the end of year 2002 there was an outbreak of atypical pneumonia in Southeast Asia which soon spread to other continents. This new severe acute respiratory syndrome (SARS) was produced by a novel coronavirus. Due to the severity of the situation and risk of introduction of this pathology in our country, the need to arrange specific laboratory diagnostic tests arose. Classic techniques, such as the electron microscopy and molecular biology test such as retrotranscription followed by the polymerase chain reaction (RT-PCR) were implemented. The araldit included cells infected with bovine coronavirus which allowed the viral particles to be visualized easily but it took more time in comparison with the negative staining of free particles from viral cultures. RT-PCR was able to detect RNA of isolated viruses from cases in Hong Kong and Germany.

A fines del año 2002 se inicia un brote de neumonía atípica en el Sudeste asiático el cual se extiende posteriormente a otros continentes. El nuevo síndrome respiratorio agudo grave (SARS) era producido por un coronavirus novedoso. Debido a la gravedad de la situación y al riesgo de introducción de esta patología en Argentina, se implementaron técnicas de diagnóstico clásicas como la microscopía electrónica, y moleculares como una reacción de retrotranscripción seguida de una reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR). La inclusión en araldita de células infectadas con un coronavirus bovino permitió visualizar más fácilmente las partículas virales, pero requirió más tiempo en comparación con la coloración negativa de partículas libres de cultivos virales. La RT-PCR implementada fue capaz de detectar ARN de cepas de casos de Hong Kong y de Alemania.

Objective. Due to the lack of correlation from 1994 to 1997 between the A H3N2 component of the influenza vaccine recommended for this period and the circulating viruses in Argentina, we decided to study the antigenic and genomic relationships of the 1998 A H3N2 Argentine circulating strains with the corresponding vaccine component for that year as recommended by the World Health Organization (WHO). Methods. We selected 18 influenza A H3N2 strains isolated in Argentina during 1998 to carry out an antigenic and genomic study of their hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA) proteins. For the genomic study we added 3 isolates from Uruguay. We compared the Argentine and Uruguayan strains with available reference strains. Results. We found that all 18 strains from Argentina were similar to the A/Sydney/5/97 (H3N2) strain, as opposed to the A/Wuhan/359/95 (H3N2) strain, which was the vaccine component. This result was confirmed by the genomic study. Conclusions. The approach that we applied in Argentina has improved the quality and quantity of information about influenza in the country. This type of work should be encouraged in other countries in order to help choose the most appropriate vaccine components each year and provide individuals with the best possible protection against influenza.

Objetivos. Debido a la ausencia de correlación entre el componente A H3N2 de la vacuna antigripal recomendada para el período de 1994 a 1997 y los virus entonces circulantes en Argentina, se decidió estudiar las relaciones antigénicas y genómicas entre las cepas A H3N2 circulantes en Argentina en 1998 y el correspondiente componente de la vacuna recomendada para ese año por la Organización Mundial de la Salud. Métodos. Se seleccionaron 18 cepas de virus influenza A H3N2 aisladas en Argentina en 1998 y se efectuó un estudio antigénico y genómico de sus proteínas hemaglutinina (HA) y neuraminidasa (NA). En el estudio genómico también se investigaron 3 aislados procedentes de Uruguay. Las cepas argentinas y uruguayas se compararon con las cepas de referencia. Resultados. Se comprobó que las 18 cepas argentinas eran similares a la cepa A/ Sydney/5/97 (H3N2), y no a la cepa A/Wuhan/359/95 (H3N2), componente de la vacuna. El estudio genómico confirmó este resultado. Conclusiones. El método aplicado en este estudio ha mejorado cuantitativa y cualitativamente la información acerca de la influenza en Argentina. Se deberían alentar estudios de este tipo en otros países, con el fin de contribuir a la elección de los componentes más adecuados para la vacuna de cada año y proporcionar a los vacunados la mejor protección posible frente a la influenza.