Abstract Bovine trypanosomosis, caused by Trypanosoma vivax, is a disease that originated in Africa and currently affects cattle in several South American countries, including almost all Brazilian states. Despite the reports on T. vivax infection in southern Brazil, data on its circulation status is currently unavailable. In this study, we aimed to detect anti-Trypanosoma spp. IgG antibodies in cattle from Rio Grande do Sul and suggest areas with T. vivax transmission risk. A total of 691 serum samples from cattle in the intermediate regions of Rio Grande do Sul were analyzed using indirect immunofluorescence assay (IFA). The overall seroprevalence of anti-Trypanosoma antibodies in cattle was 24.6% (170/691). The detection rate ranged from 0-37.3%, with a high prevalence in the intermediate regions of Ijuí (37.3%), Uruguaiana (30.7%), and Passo Fundo (28.9%). Thus, these regions were suggested as possible bovine trypanosomosis risk areas due to the high seroprevalence. This is the first serological study to determine Trypanosoma spp. infection status in cattle from Rio Grande do Sul, providing data on the epidemiology of trypanosomosis in the state.

Resumo A tripanossomose bovina, causada por Trypanosoma vivax, é uma doença que teve origem na África, e atualmente, afeta bovinos em diversos países da América do Sul, incluindo quase todos os estados brasileiros. Apesar dos relatos de infecção por T. vivax, no sul do Brasil, dados sobre seu status de circulação não estão disponíveis atualmente. Neste estudo, o objetivo foi detectar anticorpos IgG anti-Trypanosoma spp. em bovinos do Rio Grande do Sul e sugerir possíveis áreas de risco de transmissão de T. vivax. Foi analisado um total de 691 amostras de soro de bovinos, das regiões intermediárias do Rio Grande do Sul, usando-se o ensaio de imunofluorescência indireta (IFA). A soroprevalência geral de anticorpos anti-Trypanosoma em bovinos foi de 24,6% (170/691). A taxa de detecção variou de 0 a 37,3%, com uma alta prevalência nas regiões intermediárias de Ijuí (37,3%), Uruguaiana (30,7%) e Passo Fundo (28,9%). Portanto, essas regiões foram sugeridas como possíveis áreas de risco para a tripanossomose bovina, devido à alta soroprevalência. Este é o primeiro estudo sorológico a determinar o status de infecção por Trypanosoma spp., em bovinos do Rio Grande do Sul, fornecendo dados sobre a epidemiologia da tripanossomose no estado.

RESUMO: O oomiceto aquático Pythium insidiosum é um patógeno emergente de relevância em medicina humana e veterinária. É o agente etiológico da pitiose, uma enfermidade de distribuição mundial, que acomete principalmente em equinos, caninos e seres humanos, podendo apresentar-se nas formas cutâneas, subcutâneas, oculares, gastrointestinais e sistêmicas. Considerando que os métodos terapêuticos disponíveis para o tratamento da doença não são completamente efetivos, há uma necessidade de investigar formas de tratamentos com melhor eficácia, como os compostos de diferentes classes farmacológicas, compostos de origem natural, bem como, novas alternativas tecnológicas, incluindo a nanotecnologia. Deste modo, este trabalho objetivou avaliar publicações científicas referentes a utilização de nanotecnologia em P. insidiosum. Para isso, realizou-se uma revisão sistemática da literatura, buscando artigos no período de 2010 a 2022, nas bases de dados LILACS, MEDLINE, Google Scholar, PubMed e SciELO, utilizando-se os descritores Pythium insidiosum, pitiose, nanotecnologia, nanopartículas, nanoemulsão e tratamento. Encontrou-se 162 artigos com familiaridade a temática pesquisada; no entanto, apenas quatro estudos foram incluídos, pois atendiam os critérios estabelecidos na pesquisa. Para análise estatística dos dados obtidos nos estudos in vitro, utilizou-se meta-análise. Demonstrou-se o promissor uso de nanotecnologia como alternativa no desenvolvimento de compostos antimicrobianos com atividade anti-P. insidiosum. Entretanto, constata-se que estudos adicionais se fazem necessários para verificar o potencial uso desta tecnologia na terapêutica clínica contra infecções por P. insidiosum.

ABSTRACT: The aquatic oomycete Pythium insidiosum is an emerging pathogen highly relevant in human and veterinary medicine and an etiologic agent of pythiosis, a disease of worldwide distribution mainly affecting horses, dogs, and humans, presenting cutaneous, subcutaneous, ocular, gastrointestinal, and systemic forms. The available therapeutic methods to treat this disease and its forms are not entirely effective, thus highlighting the need to investigate the forms of treatments with better efficacy, such as compounds from different pharmacological classes, compounds of natural origin, and new technological alternatives, including nanotechnology. Therefore, this study evaluated scientific publications regarding the use of nanotechnology in P. insidiosum treatment. For this, a systematic literature review, was carried out on articles published from 2010 to 2022 on the LILACS, MEDLINE, Google Scholar, PubMed, and SciELO databases using the descriptors ‘Pythium insidiosum,’ ‘pythiosis,’ ‘nanotechnology,’ ‘nanoparticles,’ ‘nanoemulsion,’ and ‘treatment.’ We reported 162 articles for the researched theme; although, only four studies were included because they met the criteria established herein. A meta-analysis was used for the statistical analysis of the data obtained in vitro studies, and we reported the use of nanotechnology can be a promising alternative in developing antimicrobial compounds with anti-P. insidiosum activity. Nevertheless, additional research is needed to verify the potential use of this technology in clinical therapy against P. insidiosum infections.

ABSTRACT: Cattle are considered intermediate hosts of Sarcocystis, which can cause clinical signs and lower performance in the acute phase of infection. Sarcocystis spp. are usually not visible to the naked eye during the post mortem inspection. Moreover, fresh microscopic examination and transmission electron microscopy techniques are difficult to apply to large samples. Therefore, extensive studies on Sarcocystis infection in cattle using molecular and serological methods are required. Here, we investigated Sarcocystis spp. infection in cattle using fresh microscopic examination and polymerase chain reaction of myocardium samples and compared the results with the presence of antibodies against Sarcocystis spp. in corresponding serum samples detected using indirect fluorescent antibody test. Microscopic Sarcocystis were observed in 100% of the myocardial samples, and Sarcocystis DNA was present in 86% (43/50) of these samples. Antibodies against Sarcocystis spp. were detected in 96% (48/50) and 80% (40/50) of the serum samples at 1:25 and 1:200 dilutions, respectively. The three associated methods (fresh microscopic examination, PCR and serology) showed good sensitivity and detection for Sarcocystis spp. compared with fresh microscopic examination (only), and they may facilitate diagnosis in live animals on a large scale as well as monitoring of the herd status.

RESUMO: Os bovinos são considerados hospedeiros intermediários de Sarcocystis, podendo causar sinais clínicos e menor desempenho na fase aguda da infecção. Sarcocystis spp. geralmente não são visíveis a olho nu durante a inspeção post mortem. Além disso, o exame microscópico a fresco e as técnicas de microscopia eletrônica de transmissão são difíceis de aplicar a uma amostras de grande tamanho. Portanto, são necessários extensos estudos sobre a infecção por Sarcocystis em bovinos usando métodos moleculares e sorológicos. Aqui, investigamos a infecção de Sarcocystis spp. em bovinos por meio de exame microscópico a fresco e reação em cadeia da polimerase de amostras de miocárdio e comparado os resultados com a presença de anticorpos contra Sarcocystis spp. em amostras de soro correspondentes detectadas usando o teste de anticorpos fluorescentes indiretos. Sarcocistos microscópicos foram observados em 100% das amostras de miocárdio, e o DNA de Sarcocystis estava presente em 86% (43/50) dessas amostras. Anticorpos contra Sarcocystis spp. foram detectados em 96% (48/50) e 80% (40/50) das amostras de soro nas diluições 1:25 e 1:200, respectivamente. Os três métodos associados (exame microscópico a fresco, PCR e sorologia) mostraram boa sensibilidade e detecção para Sarcocystis spp. em comparação com o exame microscópico fresco (apenas) e podem facilitar o diagnóstico em animais vivos em larga escala, bem como o monitoramento do status do rebanho.

Abstract Domestic birds such as Gallus gallus, Meleagris gallopavo, Anser anser and Numida meleagris are widely distributed throughout the world and maintain contact with humans and other animal species considered reservoirs of both Visceral Leishmaniasis (VL) and American Tegumentary Leishmaniasis (ATL), including dogs and cats; wild canids, marsupials; and synanthropic animals such as rodents and chiroptera. Therefore, this study aimed to detect the presence of anti-Leishmania spp. antibodies in birds from a rural area of the municipality of Santa Maria, southern Brazil. From May to December 2022, 262 blood samples were collected from 244 chickens, 8 turkeys, 7 guinea fowl and 3 geese, distributed in 27 rural properties in 6 districts. All the sites visited presented positive birds for the presence of Leishmania spp. Thus, it is inferred that, contact with this protozoan can induce the production of antibodies, suggesting that these animals can be used as sentinels for the circulation of this agent. In addition, the blood of these animals is a preferred food source for insects of the subfamily Phlebotominae, which can be used them as bioindicators of the presence of these phlebotomes.

Resumo Aves domésticas, como Gallus gallus, Meleagris gallopavo, Anser anser e Numida meleagris, são amplamente distribuídas pelo mundo e mantêm contato com humanos e outras espécies animais consideradas reservatórios tanto da Leishmaniose Visceral (LV) quanto da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA), incluindo-se cães e gatos, canídeos silvestres, marsupiais; e animais sinantrópicos, como roedores e quirópteros. Portanto, este estudo teve como objetivo detectar a presença de anticorpos anti-Leishmania spp. em aves de uma área rural do município de Santa Maria, sul do Brasil. De maio a dezembro de 2022, foram coletadas 262 amostras de sangue de 244 galinhas, 8 perus, 7 pintadas e 3 gansos, distribuídas em 27 propriedades rurais de 6 distritos. Todos os locais visitados apresentaram aves positivas para a presença de Leishmania spp. Assim, infere-se que o contato com esse protozoário pode induzir a produção de anticorpos, sugerindo que esses animais possam ser utilizados como sentinelas para a circulação desse agente. Além disso, o sangue desses animais é uma fonte de alimento preferencial para insetos da subfamília Phlebotominae, que podem ser utilizados como bioindicadores da presença desses flebotomíneos.

RESUMO: O objetivo desta revisão foi abordar a aplicabilidade da nanotecnologia na medicina veterinária, com ênfase nas pesquisas no Brasil de 2013 a 2020. Primeiramente, apresentam-se os aspectos gerais da aplicabilidade da nanotecnologia em medicina veterinária e, posteriormente, apontam-se as pesquisas envolvendo nanociência realizadas no Brasil, no período estudado. A nanotecnologia é o campo da ciência capaz de organizar a matéria em estruturas de nanoescala (1 a 100 nm), permitindo inovações em diferentes áreas, incluindo biotecnologia, agricultura, diagnóstico de doenças, indústria de alimentos e vestuário, eletrônica e terapias farmacológicas. Na medicina veterinária, diversos estudos estão sendo realizados no mundo, principalmente nas áreas que envolvem a busca de novas opções de tratamento e o desenvolvimento de imunoterapia, bem como no diagnóstico de doenças. No Brasil, está claro que o uso da nanotecnologia na medicina veterinária ainda é incipiente, mas pode ser considerada uma área em crescimento. Além disso, vários pontos devem ser refletidos e pesquisados, incluindo alguns efeitos adversos e implicações para validar o uso seguro da nanotecnologia na medicina veterinária. Nesta revisão, destaca-se a nanotecnologia como uma alternativa promissora no atual contexto de inovação tecnológica brasileira, envolvendo saúde animal, o diagnóstico e o potencial uso terapêutico no controle de doenças em medicina veterinária. Em relação às perspectivas futuras, acredita-se que maiores investimentos em ciência e tecnologia são fatores fundamentais a contribuir para o avanço e fortalecimento da nanotecnologia no Brasil.

ABSTRACT: The purpose of this review was to address the applicability of nanotechnology in veterinary medicine, with an emphasis on research in Brazil from 2013 to 2020. Firstly, we introduced to the general aspects of applicability of nanotechnology in veterinary medicine, and lately we pointed the research involving nanoscience performed in Brazil, in the studied period. Nanotechnology is the field of science that has the capacity to organize matter in nanoscale structures (1 to 100 nm), enabling innovations in different areas including biotechnology, agriculture, disease diagnosis, food and clothing industry, electronics, and pharmacological therapies. In veterinary medicine, several studies are being carried out in the world, mainly in the areas that involve search of new treatment options and the development of immunotherapy, as well as in the diagnosis of diseases. In Brazil, it is clear that the use of nanotechnology in veterinary medicine is still incipient, but it can be considered a growing area. In addition, several points have to be reflected and researched, including some adverse effects and implications to validate the safe use of nanotechnology in veterinary medicine. Therefore, this review highlighted the nanotechnology as a promise alternative in the current context of Brazilian technological innovation involving animal health, as well as a possible diagnostic tool and highlighting its potential therapeutic use in disease control in veterinary medicine. Regarding future perspectives, we believed that greater investment in science and technology could contribute to the advancement and strengthening of nanotechnology in Brazil.

RESUMO: A caprinocultura leiteira é um setor produtivo em crescimento, devido à alta demanda dos produtos lácteos considerados nutritivos e hipoalergênicos. Em consequência disso, são exigidas medidas de segurança na cadeia produtiva a fim de fornecer produtos inócuos ao consumidor. No entanto, os conceitos de biosseguridade ainda são incipientes na caprinocultura brasileira. Desta forma, este estudo tem a finalidade de revisar as principais medidas de biosseguridade aplicadas à caprinocultura leiteira e sugerir um programa que contemple estas medidas visando promover a saúde e o bem-estar animal. Além disso, a biosseguridade propicia a sustentabilidade do meio ambiente e potencializa melhorias neste setor agropecuário. Salienta-se que um programa de biosseguridade (PB) é composto por um conjunto de medidas e procedimentos de atenção à saúde do plantel, aplicados em todas as etapas da criação animal, interagindo com diversos setores que compõe o sistema produtivo, além de propiciar a implantação de um conjunto de políticas e normas operacionais, com o objetivo de proteger os rebanhos contra a introdução de qualquer agente infeccioso potencialmente patogênico. O PB necessita de planejamento, execução, monitoramento, auditorias, atualizações, bem como demanda de compreensão dos procedimentos e da sensibilização de todos os envolvidos nos processos da cadeia produtiva. Adicionalmente, inclui programas de educação continuada de todos os indivíduos e a elaboração de planos de contingência para situações emergenciais específicas. As informações incluídas neste estudo fornecerão aporte às propriedades de caprinocultura de leite para a implementação de ações que promovam melhorias na produtividade deste setor agropecuário.

ABSTRACT: The goat milk industry has unquestionably grown in recent years due to the high demand for dairy products, which are considered nutritious and hypoallergenic. As a result, security measures are required in the production chain to provide consumers with safe products, although the concept of biosecurity is still incipient in Brazilian goat farming. Therefore, this study aimed to review the main biosecurity measures applied to dairy goat farms and suggest a program that contemplates these measures to promote animal health and welfare, given that biosecurity bolsters environmental sustainability and improves this agricultural sector. Biosecurity programs (BP) are composed of a set of measures and procedures aimed at herd health and applied in all stages of animal husbandry, interacting with different sectors that make up the production system and providing a set of policies and operational norms to protect herds against potentially pathogenic agents. Thus, BP require planning, execution, monitoring, audits, updates, understanding of the procedures, and awareness of those involved in the production chain. In addition, it includes continuing education programs and the development of contingency plans for specific emergencies. The information included in this study provides input to dairy goat farms to implement practices that improve the productivity of this agricultural sector.

Resumo A soroprevalência de Sarcocystis spp. e Toxoplasma gondii foi pesquisada em suínos criados em Santa Maria, RS, Brasil. Amostras de soro de 84 suínos de 31 fazendas foram testadas pela reação deimunofluorescência indireta (IFA) para ambos os agentes. Adicionalmente, 53 amostras de embutidos suínos e tecidos cárneos destinados ao consumo humano, incluindo: salame, linguiça, morcela, coração, língua, cérebro e músculo da costela foram submetidas à PCR para detecção de DNA para cada agente. A frequência de anticorpos anti-Sarcocystis spp. foi de 36,9% (31/84), com títulos variando de 32 a 1.024; e 25% (21/84) para anticorpos anti-T. gondii, com títulos variando de 64 a 2048. A presença de DNA de Sarcocystis spp. e T. gondii foi detectada em 67,9% (36/53) e 13,2% (7/53) das amostras avaliadas, respectivamente. A detecção de anticorpos e DNA de Sarcocystis spp. e T. gondii sugere que os suínos foram infectados e podem servir como um importante reservatório de ambos os parasitas. A circulação desses agentes na população suína é relevante para a saúde pública devido ao seu potencial zoonótico.

Abstract The seroprevalence of Sarcocystis spp. and Toxoplasma gondii was researched in swine raised in Santa Maria, RS, Brazil. Serum samples from 84 pigs from 31 farms were tested using indirect immunofluorescence assay (IFA) for both agents. Additionally, 53 samples of pork sausages and tissues destined for human consumption, including: salami, sausage, black pudding, heart, tongue, brain, and rib muscle, were submitted to PCR to detect DNA for each agent. The frequency of anti-Sarcocystis spp. antibodies was 36.9% (31/84), with titers ranging from 32 to 1024, and 25% (21/84) for anti-T. gondii antibodies, with titers ranging from 64 to 2048. Sarcocystis spp. and T. gondii DNA were detected in 67.9% (36/53) and 13.2% (7/53) of samples, respectively. The presence of antibodies and the detection of DNA from Sarcocystis spp., and T. gondii suggests that the pigs were infected and may serve as an important reservoir for both parasites. The infection by these protozoa in the swine population is relevant to public health due to their zoonotic potential.

RESUMO: Os bacteriófagos têm sido investigados como alternativa ao tratamento de infecções bacterianas em animais de produção, incluindo a mastite bovina. Nesta meta-análise, avaliamos a eficiência in vitro de fagos de Staphylococcus aureus contra S. aureus envolvidas na etiologia da mastite bovina. Dezessete estudos foram incluídos e a atividade lítica bacteriana foi extraída usando análise de proporção. A eficiência lítica dos fagos foi obtida nesta meta-análise, usando um modelo de efeitos aleatórios (diferença significativa (P <0,05)). Os gráficos de Forest plots foram usados para representar graficamente a eficiência dos fagos em isolados bacterianos. Os fagos avaliados, na sua grande maioria, (por exemplo, CS1, DW2, ΦSA011, ΦSA012, ΦSA022, ΦSA023, ΦSA024, ΦSA025, ΦSA037, ΦSA038, ΦSA039, ΦSA041, ΦSA042, ΦSA043, ΦSAf e U0f, ua04 SPW, vB_SauM_JS25, SaPh1 a SaPh6, SA, SANF, SA2, ΦSA012, ΦSA039, phi11, phiIPLA88, phiIPLA35, phiIPLA-RODI, phiIPLA-C1C, SAJK-IND, vBSP-A1, vBSP-A2, STA1.ST29, EB1.ST11, EB1.ST27, Remus, e ISP) foram eficientemente líticos ou infectaram a maioria dos isolados de S. aureus, demonstrando 80% (P < 0,05) de eficiência lítica. Os fagos SA, SANF e SA2 também demonstraram atividade lítica ou infectaram os isolados Staphylococcus não-aureus e Macrococcus caseolyticus. Nesta meta-análise, comparamos e demonstramos a eficiência in vitro e gama de hospedeiros de fagos de S. aureus. Adicionalmente, os fagos representam uma alternativa a ser pesquisada para o tratamento da mastite bovina em gado leiteiro causada pelo microrganismo prevalente, ou seja S. aureus.

ABSTRACT: Bacteriophages have been investigated as alternative to the treatment of bacterial infections, including bovine mastitis, in production animals. In this meta-analysis, we evaluated in vitro efficiency of phages of Staphylococcus aureus against S. aureus, which is involved in the etiology of bovine mastitis. Seventeen studies were included and the bacterial lytic activity was extracted using proportion analysis. The lytic efficiency of phages was obtained in this meta-analysis using a random-effects model [significant difference (P<0.05)]. Forest plots were used to graphically represent the efficiency of phages on bacterial isolates. Most phages (e.g., CS1, DW2, ΦSA011, ΦSA012, ΦSA022, ΦSA023, ΦSA024, ΦSA025, ΦSA037, ΦSA038, ΦSA039, ΦSA041, ΦSA042, ΦSA043, ΦSA044, MSA6, Ufv-aur2 to Ufv-aur11, SAH-1, SPW, vB_SauM_JS25, SaPh1 to SaPh6, SA, SANF, SA2, ΦSA012, ΦSA039, phi11, phiIPLA88, phiIPLA35, phiIPLA-RODI, phiIPLA-C1C, SAJK-IND, vBSP-A1, vBSP-A2, STA1.ST29, EB1.ST11, EB1.ST27, Remus, and ISP) were efficiently lytics or infected most S. aureus isolates, demonstrating 80% (P<0.05) lytic efficiency. The phages SA, SANF and SA2, also demonstrated lytic activity or infected the non-Staphylococcus aureus and Macrococcus caseolyticus isolates. In this meta-analysis, we compared and demonstrated the in vitro efficiency and host range of S. aureus phages. Additionally, the phages represent an alternative to be researched to treat bovine mastitis in dairy cattle caused by the prevalent microorganism, S. aureus.

RESUMO: O bugio ruivo (Alouatta guariba clamitans) é uma espécie de primata amplamente distribuída na América do Sul. As infecções por protozoários são comuns em primatas. Entretanto, estudos sobre protozoários em primatas no Brasil são escassos, portanto o objetivo deste estudo foi pesquisar DNA dos protozoários Apicomplexa Neospora caninum, Sarcocystisspp. e Toxoplasma gondii em tecidos de A. guariba clamitans. A extração de DNA foi realizada em amostras de tecido do coração, cérebro, fígado, baço, pulmão e intestino de seis A. guariba clamitans oriundos de Santa Maria, Região Central do Rio Grande do Sul, Brasil. Foi realizada PCR convencional utilizando primers geral do gene 18S rRNA para Apicomplexa e também primers específicos para amplificação de DNA de Neospora spp.e Toxoplasma gondii. Todos os animais foram positivos no PCR geral para Apicomplexa e no sequenciamento genético confirmou-se a presença de DNA de Sarcocystis nos tecidos de quatro animais pertencentes a pelo menos duas espécies (S. neurona e S. gigantea), e DNA de T. gondii foi detectado nos outros dois animais. Uma amostra positiva para T. gondii foi caracterizada genotipicamente como atípico pela técnica de polimorfismo do comprimento do fragmento de restrição. Não foi detectado DNA de N. caninum nas amostras testadas. A presença de DNA de protozoários apicomplexa nos tecidos dos seis animais testados neste estudo destaca a importância dos bugios ruivos como mantenedores desses patógenos na natureza.

ABSTRACT: The brown howler monkey (Alouatta guariba clamitans) is a primate species widely distributed in South America. Infections by protozoa are common in primates. However, studies on protozoa in primates in Brazil are scarce, so the goal of this study was to investigate DNA from the apicomplexan protozoa Neospora caninum, Sarcocystis spp. and Toxoplasma gondii in tissues of A. guariba clamitans. DNA extraction was performed on tissue samples from the heart, brain, liver, spleen, lung and intestine of six A. guariba clamitans from Santa Maria, Central Region of Rio Grande do Sul, Brazil. Conventional PCR was performed using 18S rRNA gene general primers for Apicomplexa and also specific primers to amplify Neosporaspp. and Toxoplasma gondii DNA. All animals were positive in the 18S PCR and the genetic sequencing confirmed the presence of Sarcocystis spp. DNA in the tissues of four animals belonging to at least two species (S. neurona and S. gigantea) and T. gondii DNA in the other two animals. One positive sample for T. gondii was genotypically characterized as atypical by the restriction fragment length polymorphism technique. N. caninum DNA was not detected in the tested samples. The presence of Apicomplexa protozoan DNA in the tissues of the six animals tested in this study highlights the importance of howler monkeys as maintainers of these pathogens in nature.

Resumo Os aspectos macroscópicos, histológicos e moleculares de Sarcocystis spp. foram examinados nos tecidos de dois bovinos e quatro ovinos, 16 e oito fragmentos analisados, respectivamente, condenados no matadouro. Todas as 24 amostras foram coletadas e analisadas para detecção de macrocistos e lesões macroscópicas. Posteriormente, subdivididas para exame direto, reação em cadeia da polimerase e exame histopatológico. Todas as amostras de tecidos de ovelha apresentavam cistos grosseiramente visíveis, caracterizados como brancos, de redondos a ovais e estruturas variando de 0,3 a 1 cm de diâmetro. Em contraste, os tecidos de bovinos não apresentavam cistos grosseiramente visíveis, mas tinham focos branco-amarelos com contornos irregulares, distribuídos aleatoriamente. Todas as amostras de bovinos e ovinos apresentavam cistos microscópicos. No exame histológico de tecidos ovinos foram observadas estruturas basofílicas circulares a alongadas, encapsuladas, variando de 30 a 3.000 µm de comprimento e 20 a 1.000 µm de largura dentro das fibras do músculo esquelético. Nos tecidos de bovinos, todos os quatro fragmentos de músculo cardíaco analisados continham estruturas basofílicas circulares a alongadas, dentro dos cardiomiócitos e em algumas fibras de Purkinje. PCRs foram realizadas utilizando-se os "primers" 2L e 3H. Em conclusão, todos os 24 tecidos estavam infectados com Sarcocystis spp., sendo S. gigantea (em ovinos) e S. cruzi (em bovinos) as espécies identificadas por sequenciamento.

Abstract The macroscopic, histological, and molecular aspects of Sarcocystis spp. were examined in the tissues of two cattle and four sheep, 16 and eight fragments analyzed respectively, condemned in the slaughterhouse. All 24 samples were collected and analyzed for detecting macrocysts and macroscopic lesions. Subsequently, subdivided for direct examination, polymerase chain reaction and histopathological examination. All sheep tissues samples had grossly white round to oval tissue cysts, ranging from 0.3 to 1 cm in diameter. In contrast, cattle tissues did not present grossly visible cysts but had randomly distributed white-yellow foci with irregular contours. All samples from cattle and sheep had microscopic cysts. In the histological examination of sheep tissues, circular to elongated, encapsulated, basophilic structures ranging from 30 to 3,000 µm in length and 20 to 1,000 µm in width were observed within the skeletal muscle fibers. In cattle tissues, all cardiac muscle four fragments analyzed contained circular to elongated basophilic structures inside cardiomyocytes and in some Purkinje fibers. PCR were performed using the primers: 2L and 3H. In conclusion, all 24 tissues were infected with Sarcocystis spp., and S. gigantea (in sheep) and S. cruzi (in cattle). were the identified species by sequencing.

RESUMO: A giardíase é uma zoonose importante e prevalente em cães e humanos, sendo causada por Giardia spp. A estreita relação entre animais de estimação e seres humanos traz benefícios físicos, emocionais e sociais. Os cães têm um papel importante no ciclo e transmissão de Giardia duodenalis. Este estudo teve como objetivo verificar a ocorrência do parasita em cães da Região Central, em Santa Maria, RS, Brasil, de abril a outubro de 2018. As fezes de cães (230) foram submetidas a técnica coproparasitológica de Faust e análises moleculares. As amostras positivas no nested-PCR (gene β-giardin) foram enviadas para sequenciamento de DNA e posterior análise filogenética (Neighbor-Joining). A ocorrência de G. duodenalis foi de 5,6% (13/230) e 4,3% (10/230) detectados pela técnica coproparasitológica e nested-PCR, respectivamente. Não houve diferença na sensibilidade dos testes utilizados. Das amostras fecais analisadas, não houve diferenças entre as variáveis: técnicas de diagnóstico, local, sexo e idade dos animais (p>0,05). Somente na metodologia de exame de fezes observou-se diferença entre as idades (p<0,05). As assemblages de G. duodenalis encontradas foram C e D, frequentemente relatadas em cães. A estreita relação entre cães e pessoas pode permitir co-infecções de parasitas circulantes na população, incluindo Giardia spp. e aumentando o risco de transmissão de agentes zoonóticos.

ABSTRACT: Giardiasis is an important and prevalent zoonosis in dogs and humans caused by Giardia spp. The close relationship between pets and humans has physical, emotional and social benefits. The dogs have an important role in Giardia duodenalis cycle and transmission. This study aimed to verify the occurrence of the parasite in dogs from Central Region, in Santa Maria, Rio Grande do Sul State, Brazil, from April to October 2018. Dog feces (230) were submitted to Faust coproparasitological and molecular analyses. The positive samples in the nested-PCR (β-giardin gene) were sent for DNA sequencing and phylogenetic analyses (Neighbor-Joining). The occurrence of G. duodenalis, was 5.6% (13/230) and 4.3% (10/230) detected by coproparasitological technique and nested-PCR, respectively. There was no difference in the sensitivity of the tests used. From the faecal samples analyzed, there were no differences among the variables: diagnostic techniques, local, sex, and age of the animals (p>0.05). Only in the stool examination methodology a difference was observed between the ages (p<0.05). G. duodenalis assemblages were C and D, frequently reported in dogs. The close relationship between dogs and people may allow co-infections of circulating parasites in the population, including Giardia spp. and increasing the risk of transmission of zoonotic agents.

RESUMO: A detecção molecular de espécies de Eimeria em amostras fecais pode ser útil para fins experimentais e de diagnóstico. No entanto, a quantidade de parasitas nas fezes e a parede do oocisto são um obstáculo nos protocolos de extração de DNA. Portanto, uma amostragem adequada e a ruptura efetiva dos oocistos são essenciais para melhorar a precisão da detecção de DNA por PCR. Os objetivos deste estudo foram avaliar seis protocolos para extração de DNA de Eimeria spp. em amostras de bovinos e ovinos. Foram distribuídos 20 grupos de amostras fecais de bovinos (10 grupos) e ovinos (10 grupos) em seis protocolos de extração de DNA: kit comercial, kit comercial com modificação, DNAzol, brometo de cetil-trimetil amônio (CTAB), pérolas de vidro e kit comercial para amostras fecais. As amostras fecais foram submetidas à extração de DNA e PCR. Entre os protocolos testados, CTAB foi considerado o mais adequado para extração de DNA de oocistos (90% de detecção de DNA por PCR); DNAzol e CTAB resultaram em maior detecção de DNA em amostras de bovinos (80%). CTAB e kit comercial com modificação melhoraram a detecção por PCR de Eimeria spp. em amostras de ovinos, amplificação positiva de DNA em todas as amostras testadas.

ABSTRACT: Molecular detection of Eimeria species in fecal samples can be useful for experimental and diagnostic purposes. However, the parasite quantity presence in feces and the oocyst wall are an obstacle in DNA extraction protocols. Therefore, adequate sampling and effective disruption of the oocysts are essential to improve the accuracy of DNA detection by PCR. The aims of this study were to evaluate the suitability of six protocols for DNA extraction from Eimeria spp. present in bovine and sheep. Twenty pools of fecal samples from cattle (10 pools) and sheep (10 pools) were distributed to six DNA extraction protocols: commercial kit, commercial kit with modification, DNAzol, cetyl-trimethyl ammonium bromide (CTAB), glass beads and commercial kit for fecal samples. Fecal samples were submitted to DNA extraction and PCR. Among the protocols tested, CTAB was determined to be most suitable for DNA extraction from oocysts (90% of DNA detection by PCR); DNAzol and CTAB resulted in higher DNA detection from bovine samples (80%). CTAB and commercial kit with modification improved PCR detection of Eimeria spp. in sheep samples, with positive amplification of DNA in all tested samples.

Resumo O sistema semi-intensivo de criação de equinos favorece infecções por nematoides gastrointestinais. O tratamento dessas infecções é baseado no uso de anti-helmínticos. No entanto, o uso inadequado desses medicamentos levou à resistência parasitária aos princípios ativos disponíveis. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia das principais classes de antiparasitários (ATP), utilizados no controle em animais adultos e jovens, incluindo: benzimidazois (fenbendazol), pirimidinas (pamoato de pirantel), lactonas macrocíclicas (ivermectina e moxidectina), bem como a combinação de ingredientes ativos (ivermectina + pamoato de pirantel). O estudo foi realizado em dois estabelecimentos militares, localizados no Rio Grande do Sul (RS), de janeiro a dezembro de 2018. Os intervalos entre os tratamentos foram realizados de 30 a 90 dias. As avaliações coproparasitológicas foram determinadas pela redução da contagem de ovos nas fezes. Foram identificadas larvas de ciatostomíneos nas coproculturas pré e pós tratamentos. Os resultados demonstraram a resistência parasitária múltipla dos ciatostomíneos ao fenbendazol, moxidectina em animais jovens, febendazole e pamoato de pirantel em animais adultos. Estabelecer o diagnóstico da resistência parasitária auxiliará na elaboração de um controle parasitário profilático, reduzindo o tratamento supressivo com ATP juntamente com alternativas de controle integrado. Dessa forma, o avanço da resistência parasitária poderá ser retardado.

Abstract Semi-intensive equine breeding system favors gastrointestinal nematode infections. The treatment of these infections is based on the use of anthelmintics. However, the inappropriate use of these drugs has led to parasitic resistance to the available active principles. The objective of this study was to evaluate the efficacy of the main classes of antiparasitic (ATP) used in control in adult and young animals, including: benzimidazoles (fenbendazole), pyrimidines (pyrantel pamoate), macrocyclic lactones (ivermectin and moxidectin), as well as the combination of active ingredients (ivermectin + pyrantel pamoate). The study was carried out in two military establishments, located in Rio Grande do Sul (RS), from January to December, 2018. The intervals between the treatments of the animals were performed from 30 to 90 days. Coproparasitological evaluations were determined by the egg count reduction in the faeces. Cyatostomine larvae were identified in pre and post-treatment cultures. The results demonstrated the multiple parasitic resistance of cyathostomins to fenbendazole, moxidectin in young animals, and to fenbendazole, pyrantel pamoate in adult animals. Thus, it is necessary to define or diagnose parasitic resistance to assist in the creation of prophylactic parasitic control, using suppressive treatment with ATP associated with integrated alternatives. The progress of parasitic resistance can be slowed.

RESUMO: O objetivo deste estudo foi genotipar isolados clínicos de Pythium insidiosum da América do Sul utilizando polimorfismos de nucleotídeo único (SNP) de sequências de rDNA. Anteriormente, um multiplex-PCR baseado em SNP foi capaz de distinguir P. insidiosum em três diferentes clados. Dessa forma, utilizamos este método para avaliar isolados clínicos de P. insidiosum da América do Sul (n=32), cepas padrão da Costa Rica (n=4), Tailândia (n=3), Japão (n=1) e Índia (n=1), uma cepa padrão de Pythium aphanidermatum e isolados ambientais brasileiros de Pythium torulosum; Pythium rhizo-oryzae e Pythium pachycaule voucher (n=3). Os isolados analisados foram alocados aos clados: I (americanos), II (isolados da Índia, Japão e Tailândia), e III (um isolado tailandês). P. aphanidermatum, P.torulosum, P.rhizo-oryzae e P.pachycaule voucher não foram amplificados. Pela primeira vez, um isolado de P. insidiosum do Uruguai foi incluído em análises moleculares. Através da multiplex-PCR baseada em SNP, foi possível realizar a identificação e genotipagem dos isolados sul-americanos de P. insidiosum, demonstrando características genéticas semelhantes entre esses isolados.

ABSTRACT: We aimed to genotype the South American clinical isolates of Pythium insidiosum using the single nucleotide polymorphisms (SNP) of the ribosomal DNA sequences (rDNA). Previously, an SNP-based multiplex-PCR was able to distinguish three different clades of P. insidiosum isolates. Thus, we used this assay to evaluate South American clinical isolates of P. insidiosum (n=32), standard strains from Costa Rica (n=4), Thailand (n=3), Japan (n=1), and India (n=1), a standard strain of Pythium aphanidermatum, and Brazilian environmental isolates of Pythium torulosum, Pythium rhizo-oryzae and Pythium pachycaule voucher (n=3). It was possible to allocate each American P. insidiosum isolate to clade I, the isolates of India, Japan, and Thailand to clade II, and the Thai isolate to clade III. P. aphanidermatum, P.torulosum, P.rhizo-oryzae and P.pachycaule voucher isolates were not amplified. For the first time, a P. insidiosum isolate from Uruguay, South America, was included in molecular analyzes. By SNP-based multiplex-PCR, it was possible to perform the identification and genotyping of the South American isolates of P. insidiosum, demonstrating similar genetic characteristics of these isolates.

Resumo Este estudo avaliou a eficiência acaricida de piretroides sintéticos (SP) associados a organofosforados (OP) sobre populações de Rhipicephalus (Boophilus) microplus no estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Carrapatos foram coletados em 54 fazendas de bovinos, testados in vitro pelo teste de imersão de teleóginas, contra quatro associações acaricidas comercialmente disponíveis de SP e OP. Apenas um dos quatro acaricidas, constituído por associação de cipermetrina, clorpirifós e fenthion, teve eficiência média superior a 95%, sendo eficaz em 94,44% (51/54) das fazendas testadas. O acaricida com associação de cipermetrina, clorpirifós e citronelal teve menor eficiência média (62,11%), sendo efetivo em 29,62% (16/54) das fazendas testadas. Além disso, o R. (B.) microplus no sul do Brasil, apresentou diferentes graus de resistência às associações de SP e OP. Os resultados sugerem que a presença do fenthion contribui para a maior eficiência da formulação com esse princípio ativo. Possivelmente, isso ocorre em função da sua recente introdução no mercado, já que as populações de carrapatos foram pouco desafiadas com este produto. Monitorar a resistência dos carrapatos aos carrapaticidas é fundamental para maximizar a eficiência desses produtos no controle de R. (B.) microplus.

Abstract This study evaluated the acaricidal efficiency of synthetic pyrethroids (SP) associated with organophosphates (OP) against Rhipicephalus (Boophilus) microplus populations in the state of Rio Grande do Sul, Southern Brazil. Ticks were collected in 54 cattle farms and tested using in vitro adult immersion test against four commercially available acaricide mixtures of SP and OP. Only one of four acaricides, comprising a mixture of cypermethrin, chlorpyrifos, and fenthion, had a mean efficiency higher than 95%, and was effective in 94.44% (51/54) of the cattle farms tested. The acaricide with a mixture of cypermethrin, chlorpyrifos, and citronelall had the lowest mean efficiency (62.11%), and was effective in 29.62% (16/54) of cattle farms tested. Furthermore, R. (B.) microplus in Southern Brazil exhibited differing degrees of resistance to SP and OP mixtures. The results suggest that the presence of fenthion contributes to the higher efficiency of the formulation with this active principle. This is possibly due to its recent commercial availability, as tick populations have been lower challenged with this product. Monitoring the resistance of ticks to carrapaticides is essential to maximize the efficiency of these products in the control of R. (B.) microplus.