ABSTRACT Introduction To know the natural infestation by triatominae and their infection by Trypanosoma cruzi (T. cruzi) in Acrocomia Aculeata (A. aculeata) or coyol palm in the state of Anzoátegui, Venezuela. Materials and Methods Triatominic infestation and its infection by T. cruzi was studied in non-affected A. aculeata in phytosanitary campaigns. The presence of the parasite was determined by microscopy and PCR-kDNA, and its characterization was made by means of molecular markers. Results Fourteen palm trees with triatominic infestation were found; 48.8% of the individuals corresponded to Rhodnius prolixus and 48.2% to Maculata Triatoma, with ontogenetic development towards adult. The parasitology and molecular tests, their typical morphology and the infection in the murine model revealed the presence of T. cruzi in an average of 54,8%, for both species of triatominae, with circulation of the TcI genotype of T. cruzi. Conclusions The infestation of coyol palm trees with Rhodnius prolixus and Maculata Triatoma was reported for the state of Anzoátegui in Venezuela, as well as the presence of TcI sub-populations of T. cruzi, being this palm tree the peridomicilar habitat of the triatominae-T. cruzi binomial and possible bioindicador of risk of infection for surrounding human populations.

RESUMEN Objetivos Conocer la infestación natural por triatominos y su infección por Trypanosoma cruzi (T. cruzi) en Acrocomia aculeata (A. aculeata) o palma corozo en el estado Anzoátegui, Venezuela. Materiales y métodos Se estudió la infestación triatomínica y su infección por T. cruzi en A. aculeata desafectadas en campañas fitosanitarias. La presencia del parásito se determinó por microscopia y PCR-kDNA, y se realizó su caracterización mediante marcadores moleculares. Resultados Se encontraron 14 palmeras con infestación triatomínica, el 48,8 % de los ejemplares correspondieron a Rhodnius prolixus y el 48,2 % a Triatoma maculata, con desarrollo ontogénico hacia el adulto. Las pruebas parasitológicas y moleculares, su morfología típica y la infección en el modelo murino revelaron la presencia de T. cruzi en 54,8 % en promedio, para ambas especies de triatominos, con circulación del genotipo TcI de T. cruzi. Conclusiónes Se reportó para el estado Anzoátegui en Venezuela, la infestación de palma corozo con Rhodnius prolixus y Triatoma maculata y la presencia de subpoblaciones TcI de T. cruzi, siendo esta palma el hábitat peridomiciliar del binomio triatominos-T. cruzi y posible bioindicador de riesgo de infección para poblaciones humanas circunvecinas.

Introduction. To know the natural infestation by triatominae and their infection by Trypanosoma cruzi (T. cruzi) in Acrocomia Aculeata (A. aculeata) or coyol palm in the state of Anzoátegui, Venezuela. Materials and Methods. Triatominic infestation and its infection by T. cruzi was studied in non-affected A. aculeata in phytosanitary campaigns. The presence of the parasite was determined by microscopy and PCR-kDNA, and its characterization was made by means of molecular markers. Results. Fourteen palm trees with triatominic infestation were found; 48.8% of the individuals corresponded to Rhodnius prolixus and 48.2% to Maculata Triatoma, with ontogenetic development towards adult. The parasitology and molecular tests, their typical morphology and the infection in the murine model revealed the presence of T. cruzi in an average of 54,8%, for both species of triatominae, with circulation of the TcI genotype of T. cruzi. Conclusions. The infestation of coyol palm trees with Rhodnius prolixus and Maculata Triatoma was reported for the state of Anzoátegui in Venezuela, as well as the presence of TcI sub-populations of T. cruzi, being this palm tree the peridomicilar habitat of the triatominae-T. cruzi binomial and possible bioindicador of risk of infection for surrounding human populations.

Objetivos. Conocer la infestación natural por triatominos y su infección por Trypanosoma cruzi (T. cruzi) en Acrocomia aculeata (A. aculeata) o palma corozo en el estado Anzoátegui, Venezuela. Materiales y métodos. Se estudió la infestación triatomínica y su infección por T. cruzi en A. aculeata desafectadas en campañas fitosanitarias. La presencia del parásito se determinó por microscopia y PCR-kDNA, y se realizó su caracterización mediante marcadores moleculares. Resultados. Se encontraron 14 palmeras con infestación triatomínica, el 48,8 % de los ejemplares correspondieron a Rhodnius prolixus y el 48,2 % a Triatoma maculata, con desarrollo ontogénico hacia el adulto. Las pruebas parasitológicas y moleculares, su morfología típica y la infección en el modelo murino revelaron la presencia de T. cruzi en 54,8 % en promedio, para ambas especies de triatominos, con circulación del genotipo TcI de T. cruzi. Conclusiónes. Se reportó para el estado Anzoátegui en Venezuela, la infestación de palma corozo con Rhodnius prolixus y Triatoma maculata y la presencia de subpoblaciones TcI de T. cruzi, siendo esta palma el hábitat peridomiciliar del binomio triatominos-T. cruzi y posible bioindicador de riesgo de infección para poblaciones humanas circunvecinas.

En este estudio se desarrolló y se evaluó el ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA), para la detección de anticuerpos en sueros de pacientes con esporotricosis, para lo cual se empleó un antígeno crudo de Sporothrix schenckii sensu stricto obtenido a partir de la forma micelial. Los sueros positivos para esporotricosis fueron ensayados por otras técnicas serológicas: inmunodifusión doble (IDD) y contrainmunoelectroforesis (CIE). El ensayo fue validado utilizando sueros de otras patologías como histoplasmosis, paracoccidioidomicosis, tuberculosis, leishmaniasis, lupus y sueros de individuos sanos como controles negativos. Se encontró una especificidad de 100 % con las técnicas utilizadas y una sensibilidad del antígeno de S.schenckii sensu stricto, por encima del 98% para IDD, CIE y ELISA. Estos resultados demuestran la alta sensibilidad y especificidad del antígeno de S. schenckii sensu stricto, para el diagnóstico de la esporotricosis, empleando las técnicas de IDD, CIE y ELISA. Los resultados sugieren, que este antígeno podría ser usado en conjunto con otras pruebas convencionales para el diagnóstico diferencial y puede ser útil para monitorizar la evolución de la enfermedad y respuesta al tratamiento.

We developed and analyzed an Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) in order to detect antibodies in sera from sporotrichosis patients. We used a crude antigen of Sporothrix schenckii sensu stricto, obtained from the mycelial phase of the fungi. Positive sera were analyzed by other serological techniques such as double immunodiffusion (IGG) and counterimmunoelectrophoresis (CIE). The assay was validated by using sera from patients with other pathologies such as: histoplasmosis, paracoccidioidomycosis, tuberculosis, leishmaniasis, lupus and healthy individuals as negative controls. For the Sporothrix schenckii sensu stricto antigen, we found a 100% of specificity by every technique and sensitivity higher than 98% with IDD, CIE and ELISA. Our results show a high sensitivity and specificity for the Sporothrix schenckii sensu stricto antigen, so it can be used for IDD, CIE and ELISA. The results suggest that this antigen could be used in conjunction with other conventional tests for differential diagnosis and may be useful for monitoring the disease progression and response to treatment.

La tiroiditis de Hashimoto (TH) es una enfermedad autoinmune de la glándula tiroides. Los pacientes pueden tener o no un estado hipotiroideo y suelen presentar manifestaciones de miopatía. Este trabajo estudia los síntomas y signos clínicos de alteración muscular esquelética que puedan estar presentes en pacientes con TH, describe los cambios patológicos musculares y los relaciona con el estado funcional de la glándula tiroides y la condición autoinmune del paciente. Diez pacientes y tres sujetos controles fueron examinados clínicamente, se midieron los niveles de hormonas tiroideas, se practicó electromiografía y se tomó biopsia del vasto lateral del músculo cuádriceps crural para microscopía de luz (histoquímica e inmunofluorescencia) y microscopía electrónica. Todos los pacientes mostraron alteraciones musculares focales, atrofia moderada a severa, presencia de autofagosomas (glucogenosomas), necrosis, activación de las células satélites, infiltración de macrófagos y mastocitos, así como alteraciones en los capilares, similares a las de las enfermedades autoinmunes. La intensidad de los signos y síntomas no estuvo relacionada con los hallazgos morfológicos en músculo, los resultados de la electromiografía ni con el estado funcional tiroideo. La reacción a las inmunoglobulinas fue positiva en el músculo de 80% de los pacientes. La proporción de fibras musculares tipo II estuvo incrementada en los pacientes excepto en aquellos que recibieron tratamiento con L-tiroxina. En conclusión, el proceso autoinmune hacia el músculo parece asociarse a las alteraciones en éste, independientemente del estado funcional tiroideo, sin embargo, la proporción de las fibras tipo II puede haber sido normalizada por el tratamiento con L-tiroxina.

Hashimoto thyroiditis (HT) is an autoimmune disease of the thyroid gland. Patients may present or not a hypothyroid state, and frequently have manifestations of myopathy. The present work was aimed to assess the clinical symptoms and signs of skeletal muscle alterations in HT, describe the muscular pathological changes and relate them to the functional thyroid status and to the autoimmune condition of the patient. Clinical and laboratory studies were performed in ten HT patients and three control subjects (hormonal levels and electromyography). Biopsies from their vastus lateralis of quadriceps femoris muscle were analyzed under light (histochemistry and immunofluorescense) and electron microscopy. All patients showed muscle focal alterations, ranging from moderate to severe atrophy, necrosis, activation of satellite cells, presence of autophagosomes, capillary alterations and macrophage and mast cell infiltration, common to autoimmune diseases. The intensity of clinical signs and symptoms was not related to the morphological muscle findings, the electromyography results, or to the state of the thyroid function. Reactions for immunoglobulin in muscle fibers were positive in 80% of the patients. Fiber type II proportion was increased in all patients, with the exception of those treated with L-thyroxine. In conclusion, autoimmune processes in several of the patients may be associated to the skeletal muscle alterations, independently of the functional state of the thyroid gland; however, fiber II type proportion could have been normalized by L-thyroxine treatment.

The aim of this work was to determine the ability of the lichen Parmotrema sancti-angelii (Lynge) Hale to characterize and quantify polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) present in the air of the Caracas city. The lichens were transplanted from a suburban area to six locations in the city, where they were exposed for a period of four months. Sixteen (16) PAHs were studied which only thirteen (13) were above the limit of quantification. The total concentration of PAHs ranged from 2553 to 7654 ng /g. The lichens showed an enrichment in high molecular weight compounds (5 and 6 rings) for the studied locations, associated with atmospheric particles commonly generated by combustion processes. The ratio Fen/Ant suggests a remarkable pyrogenic origin and the ratio Ind/Ind+B[g,h,i] P indicates the presence of PAHs from burning vegetation in all locations.

El objetivo de este trabajo fue determinar la capacidad del liquen identificado como Parmotrema sancti-angelii (Lynge) Hale, para caracterizar y cuantificar los hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAP) presentes en el aire de la ciudad de Caracas. Los líquenes fueron trasplantados desde una zona suburbana hacia seis localidades en la ciudad, donde estuvieron expuestos por un periodo de cuatro meses. Fueron estudiados dieciséis (16) HAP, de los cuales trece (13) estuvieron sobre el límite de cuantificación. La concentración total de HAP estuvo en el rango de 2553 ng/g a 7654 ng/g. Los líquenes mostraron un enriquecimiento en compuestos de alto peso molecular (5 y 6 anillos), asociados estos a las partículas atmosféricas comúnmente generadas en los procesos de combustión. La relación Fen/Ant sugiere un aporte marcadamente pirogénico y la relación Ind/Ind+B[g,h,i]P indica la presencia de HAP provenientes de la quema de vegetación en todas las localidades.

Los líquenes pueden ser empleados como biomonitores para la investigación y el control de la contaminación del aire, por comportarse como instrumentos válidos para evaluar la calidad del aire afectada por emisiones provenientes de fuentes móviles o fijas. En este contexto, esta publicación pretende recopilar abundante información sobre el progreso de las investigaciones relativas al uso de los líquenes como biomonitores de la calidad del aire, con énfasis en la determinación de hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAP). El objetivo de esta revisión es recopilar los resultados de investigaciones que en esta materia se han desarrollado, posteriores al año 2001, cuando se realiza la publicación de Conti & Cecchetti (Biological monitoring: lichens as bioindicators of air pollution assessment - a review). La presente revisión señala las líneas más importantes en el estado del arte del conocimiento en este campo, evaluando las aplicaciones metodológicas de los líquenes (muestreo, tratamiento físico y químico, instrumentación analítica, herramientas estadísticas y perspectivas futuras) al igual que las ventajas/desventajas con respecto a los métodos de monitoreo convencionales.

Lichens can be used as a biomonitors for research and control of air pollution since they are valid instruments for assessing air quality affected by emissions from mobile or fixed sources. In this context, this paper manages to collect extensive information about the progress of research on the use of lichens as biomonitors of air quality, with emphasis on the determination of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs). The aim of this review is to compile the results of research in this area that have been developed after 2001, when performing the publication of Conti and Cecchetti (Biological monitoring: lichens as bioindicators of Pollution assessment - a review). This review discusses the most important lines in the state of the art knowledge in this field, assessing the lichens methodological applications (sampling, physical and chemical treatment, instrumental analysis techniques, statistical tools and future prospects) and their advantages / disadvantages with respect to conventional research methods.

Este trabajo describe cualitativamente y analiza cuantitativamente las variaciones ultraestructurales de la glándula adrenal de ratones durante el desarrollo de infecciones murinas experimentales por dos aislados venezolanos de Trypanosoma evansi, uno proveniente de asno y otro de caballo. Las modificaciones submicroscópicas observadas incluyeron alteraciones en el retículo endoplasmático liso, mitocondrias, gotas lipídicas, aparato de Golgi y núcleo. También se apreciaron alteraciones en el número de vesículas de epinefrina, norepinefrina, gránulos de lipofucsina y presencia singular de figuras mielínicas. Estos cambios ultraestructurales estarían asociados a problemas metabólicos que inducirían la muerte de los animales infectados. El estudio cuantitativo demostró diferencias significativas en las características y las magnitudes del daño causado por ambos aislados, siendo el tripanosoma proveniente de caballo más patogénico. El análisis multivariante de los cambios submicroscópicos discriminó la acción patogénica en la glándula adrenal de tripanosomas de la misma especie que provienen de hábitats diferentes (Equus asinus y E. caballus) y de zonas geográficas distintas (estado Apure y estado Guárico).

This work describes qualitatively and analyzes quantitatively the ultrastructural variations of the mice adrenal gland during the development of murine experimental infections by two Venezuelan isolates of Trypanosoma evansi, one de rived from a donkey and another from a horse. The submicroscopic modifications included modifications in the smooth endoplasmic reticulum, mitochondria, lipid droplets, Golgi apparatus, and nucleus. Alterations in the number of epinephrine, norepinephrine vesicles, and lipofuscin granules and singular myelin-like figures were also observed. Such ultrastructural changes would be associated to metabolic problems including the infected animal’s death. The quantitative study demonstrated significant differences in the characteristics and magnitude of the damage caused by both isolates, being more pathogenic the horse derived trypanosome. The multivariate analysis of the submicroscopic changes discriminated the pathogenic action of trypanosomes of the same species coming from different habitats (Equus asinus and E. caballus) and different geographic zones (Apure state and Guarico state) in the adrenal gland.

La inducción de la síntesis de proteínas de choque térmico ha sido relacionada con la defensa del organismo frente a infecciones diversas. Este trabajo examina la acumulación de Hsp60 en Mus musculus infectados experimentalmente con un aislado equinos de Trypanosoma evansi, agente etiológico de la “derrengadera” en los Llanos venezolanos. Ratones NMRI (♀; 20 gr de peso corporal), normales e inmunosuprimidos (ciclofosfamida; 250 mg/kg) fueron inoculados intradermicamente con 1 tripomastigote/gr de peso corporal. La acumulación de Hsp60 se determinó mediante Western blot con el uso de un anticuerpo monoclonal en muestras de plasma obtenidas cada cuatro días post-inoculación. Los niveles de parasitemia también fueron registrados. Se observa acumulación diferencial y variable de Hsp60 que se correlaciona la parasitemia y la condición inmune del hospedador. Los resultados sugieren un control inmunológico en la regulación de la expresión de Hsp60, cuyos patrones de expresión dependen de la condición fisiológica del hospedador y los niveles de parasitemia.

Heat shock protein induction has been related to organism defense in diverse kinds of infection. This investigation examines Hsp60 accumulation in Mus musculus infected ex - perimentally with Trypanosoma evansi isolated from horse. This parasite is the causal agent of the “derrengadera” in Venezuelan planes. Normal and immunosupressed (cyclophosphamide( 250 mg/kg).) NMRI mice (♂; 20 gr body weight) were intra-dermal inoculated with 1 trypomastigote/ gr body weight; control groups were injected with distillated water in the same conditions. Hsp60 accumulation was analyzed by Western blot with a monoclonal antibody in plasma samples obtained each four days post-inoculation. Parasitemia levels were also registered. We observed a differential accumulation of Hsp60, which correlates with pa - rasitemia and immune conditions of the host. These results suggest an immunological control of Hsp60 expression that depends on the physiological condition of the host and parasitemia.

En este estudio investigamos los cambios ultraestructurales a corto y largo plazo provocados por la toxina botulínica tipo A inyectada a dosis sub-letales in vivo en el levator auris longus de ratones. La neurotoxina actuó temporalmente sobre los terminales nerviosos e indujo una parálisis generalizada que afectó la morfología de la preparación neuromuscular estudiada influyendo sobre: tamaño y complejidad de la terminación nerviosa, población vesicular, apariencia de las mitocondrias, fisonomía de las células de Schwann, desarrollo y distribución de los pliegues de la membrana postsináptica, y morfología de los núcleos de los diferentes elementos de la placa motora. Además, la cantidad de tejido conectivo endomisial aumentó significativamente con relación a los casos control, siendo estos cambios marcados en las primeras semanas. Entre los 20 y 25 días, período correspondiente al proceso de recuperación observamos terminales nerviosos de apariencia variable, unos completamente degenerados rodeados por restos de prolongaciones de células de Schwann y otros nuevos contactos caracterizados ultraestructuralmente por su pequeño calibre y población vesicular escasa, rodeadas parcialmente por la célula de Schwann, axones tempranamente mielinizados, pliegues sinápticos escasamente desarrollados. Sesenta días posteriores a la inyección, el axón terminal recobró su apariencia normal: las vesículas sinápticas llenaban el axoplasma, las mitocondrias exhibían crestas y densidades electrónicas de apariencia habitual. Se puede concluir que la toxina botulínica tipo A provoca fenómenos de desnervación en el nervio terminal y en los componentes de la placa motora. Las células de Schwann juegan un papel importante en la recuperación morfofuncional de los terminales nerviosos y en su degradación.

We studied the short and long term ultrastructural changes produced by botulinum neurotoxin type A injected in vivo, at a sublethal dose, in mouse levator auris longus muscle. The neurotoxin had a temporary effect on nerve terminals which consisted in a generalized paralysis, that affected the following features of the neuromuscular sample’s morphology: size of the nerve terminals, vesicle population, mitochondrial appearance, Schwann cell’s morphology, development and distribution of post-synaptic membrane folds, and nuclear morphology of the different elements of the motor end plate. Besides, the amount of endomysial connective tissue was significantly greater compared to non-intoxicated cases, and these changes were more notorious during the first couple of weeks. 20 to 25 days after the injection, during the recovery phase, we observed nerve terminals with a variable appearance: some completely degenerated, enveloped by Schwann cell processes, and new contacts characterized ultrastructurally for their small size, scarce vesicles, partially enveloped by Schwann cells, early myelinized axons and barely developed synaptic folds. Sixty days after the injection, the axon terminal recovered its normal appearance: synaptic vesicles filled the axon’s cytoplasm, and the mitochondria showed normal appearing cristae and electronic densities. We conclude that botulinum neurotoxin type A produces changes related to denervation of the nerve terminals and affects the motor end plate components. Schwann cells play an important role both in the morphofuntional recovery of nerve terminals and in their degradation.