Resumo Crotalaria (Linnaeus, 1753) (Fabaceae) ocorre abundantemente em regiões tropicais e subtropicais e tem cerca de 600 espécies conhecidas. Estas plantas são amplamente utilizadas na agricultura, principalmente como cobertura e adubos verdes, além da sua utilização no manejo de fitonematoides. Uma característica marcante destas espécies é a produção de alcalóides pirrolizidinicos (APs), aleloquímicos secundários envolvidos na defesa das plantas contra os herbívoros. Nas espécies de Crotalaria, a monocrotalina é a AP predominante, que tem muitas atividades biológicas relatadas, incluindo citotoxicidade, tumorigenicidade, hepatotoxicidade e neurotoxicidade, além de uma vasta gama de interações ecológicas. Assim, estudos têm procurado elucidar os efeitos desse composto para promover um incremento na flora e fauna (principalmente insetos e nematoides) associados aos agroecossistemas, favorecendo o controle biológico natural. Esta revisão compila informações sobre a monocrotalina, mostrando tais efeitos nesses ambientes, tanto acima como abaixo do solo e a sua potencial utilização em programas de manejo de pragas.

Abstract Crotalaria (Fabaceae) occurs abundantly in tropical and subtropical regions and has about 600 known species. These plants are widely used in agriculture, mainly as cover plants and green manures, in addition to their use in the management of phytonematodes. A striking feature of these species is the production of pyrrolizidine alkaloids (PAs), secondary allelochemicals involved in plant defense against herbivores. In Crotalaria species, monocrotaline is the predominant PA, which has many biological activities reported, including cytotoxicity, tumorigenicity, hepatotoxicity and neurotoxicity, with a wide range of ecological interactions. Thus, studies have sought to elucidate the effects of this compound to promote an increase in flora and fauna (mainly insects and nematodes) associated with agroecosystems, favoring the natural biological control. This review summarizes information about the monocrotaline, showing such effects in these environments, both above and below ground, and their potential use in pest management programs.

Resumo Os microRNAs (miRNAs) são reconhecidos como biomarcadores do diabetes mellitus tipo 2 (DM2), úteis para a compreensão do metabolismo da doença, e possuem grande potencial como alvos terapêuticos. O aumento da expressão de BDNF e IGF1 está altamente envolvido nos benefícios as vias de insulina e glicose, porém, são regulados negativamente em condições de resistência à insulina, enquanto seu aumento de expressão está correlacionado com a melhora do metabolismo da glicose e da insulina. Estudos sugerem a regulação desses genes por microRNA em vários contextos diferentes, proporcionando uma nova abordagem de investigação para compreender o metabolismo do DM2 e revelar potenciais alvos terapêuticos. No presente estudo, investigamos em diferentes modelos animais (humanos, ratos e camundongos) miRNAs que têm como alvo BDNF e IGF1 em tecido muscular esquelético com condições fisiológicas de DM2. As análises foram realizadas utilizando ferramentas de bioinformática e bancos de dados para predição de miRNA, homologia molecular, validação experimental de interações, expressão na condição fisiológica estudada e interação em rede. Os resultados mostraram três candidatos a miRNAs para IGF1 (miR-29a, miR-29b e miR-29c) e um para BDNF (miR-206). As avaliações experimentais e a busca pela expressão no músculo esquelético de indivíduos com DM2 confirmaram a interação prevista entre miRNA-mRNA para miR-29b e miR-206 através de modelos humanos, ratos e camundongos. Essa interação foi reafirmada em múltiplas análises de rede. Em conclusão, nossos resultados mostram a relação de regulação entre miR-29b e miR-206 com os genes investigados, em diversos tecidos, sugerindo um padrão de inibição. Contudo, esses dados mostram um grande número de possíveis processos fisiológicos de interação para perspectivas biotecnológicas.

Abstract microRNAs (miRNAs) are recognized as diabetes mellitus type 2 (T2DM) biomarkers useful for disease metabolism comprehension and have great potential as therapeutics targets. BDNF and IGF1 increased expression are highly involved in the benefits of insulin and glucose paths, however, they are down-regulated in insulin resistance conditions, while their expression increase is correlated to the improvement of glucose and insulin metabolism. Studies suggest the microRNA regulation of these genes in several different contexts, providing a novel investigation approach for comprehending T2DM metabolism and revealing potential therapeutic targets. In the present study, we investigate in different animal models (human, rat, and mouse) miRNAs that target BDNF and IGF1 in skeletal muscle tissue with T2DM physiological conditions. Bioinformatics tools and databases were used to miRNA prediction, molecular homology, experimental validation of interactions, expression in the studied physiological condition, and network interaction. The findings showed three miRNAs candidates for IGF1(miR-29a, miR-29b, and miR-29c) and one for BDNF (miR-206). The experimental evaluations and the search for the expression in skeletal muscle from T2DM subjects confirmed the predicted interaction between miRNA-mRNA for miR-29b and miR-206 through human, rat, and mouse models. This interaction was reaffirmed in multiple network analyses. In conclusion, our results show the regulation relationship between miR-29b and miR-206 with the investigated genes, in several tissues, suggesting an inhibition pattern. Nevertheless, these data show a large number of possible interaction physiological processes, for future biotechnological prospects.

Resumo Extratos de espécies do gênero Cordia têm sido relatados com potencial atividade biológica, como antioxidante, antimicrobiana, antiviral e antiparasitária. O objetivo deste estudo foi desenvolver microemulsões contendo extratos etanólicos de folhas de C. glabrata e avaliar sua estabilidade e atividades biológicas. As cinco microemulsões desenvolvidas apresentaram estabilidade físico-química e apresentaram comportamento newtoniano quando submetidas à análise reológica. Os valores de diâmetro dos glóbulos variaram entre 225,74 e 273,33 nm e o potencial zeta das formulações permaneceu entre -22,40 e -25,08. Todos os ácidos fenólicos do extrato, quantificados por CLAE, apresentaram consistência após serem microemulsionados. Os valores de EC50 para a atividade antioxidante pelo método de eliminação DPPH variaram entre 38,13 e 45,54 µgmL-1, e entre 34,46 e 39,60 mM para o método de eliminação ABTS+. A atividade viricida apresentou CV50 <0,195 µgmL-1 e índice de seletividade maior que 20. Os resultados da fotoproteção variaram entre 2,14 a 2,84. O estudo revelou microemulsões estáveis e potencialização do efeito antioxidante nos extratos microemulsionados.

Abstract Extracts of species from the Cordia genus have been reported with potential biological activities, such as antioxidant, antimicrobial, antiviral, and antiparasitic. The aim of this study was to develop microemulsions containing ethanolic extracts of C. glabrata leaves and to evaluate their stability and biological activities. The five developed microemulsions presented physicochemical stability and presented Newtonian behavior when submitted to rheological analysis. The diameter values of the globules ranged between 225.74 and 273.33 nm and the zeta potential of the formulations remained between -22.40 and -25.08. All phenolic acids of the extract, quantified by HPLC, showed consistency after being microemulsified. The EC50 values for the antioxidant activity by the DPPH scavenging method ranged between 38.13 and 45.54 µgmL-1, and between 34.46 and 39.60 mM for the ABTS+ scavenging method. The virucidal activity presented a CV50 <0.195 µgmL-1 and a selectivity index greater than 20. The photoprotection results ranged between 2.14 to 2.84. The study revealed stable microemulsions and potentiation of the antioxidant effect in the microemulsified extracts.

ABSTRACT Sweet potato is among the most important food crops in the world. Due to its high genetic diversity, this species has cultivars that can respond in different ways depending on mineral fertilization. Among the nutrients, phosphorus is related to physiological and biochemical processes that can influence the final quality of the product. This study aimed to assess the influence of P doses on the quality and bioactive compounds of sweet potato cultivars - Paraná, BRS Amélia, and BRS Cuia. The pH, soluble solids (SS), titratable acidity (TA), SS/TA ratio, soluble sugars, and the bioactive compounds - flavonoids, anthocyanins, and carotenoids - were evaluated. The P doses influenced sweet potato cultivars. The dose of 120 kg ha-1 promoted increments in the parameters pH, SS, TA, and SS/TA ratio for the cultivar BRS Cuia. The same dose promoted an increase in total soluble sugars for the cultivar BRS Amélia. P dose of 240 kg ha-1 promoted higher levels of flavonoids and anthocyanins in the cultivar Paraná, and there was an increase in carotenoid content at the dose of 60 kg ha-1.

RESUMO A batata-doce está entre as culturas alimentícias mais importantes do mundo. Por apresentar alta diversidade genética, essa espécie possui cultivares que podem responder de maneiras diferentes em função da adubação mineral. Dentre os nutrientes, o fósforo está relacionado com processos fisiológicos e bioquímicos que podem influenciar na qualidade final do produto. Este estudo teve como objetivo avaliar a influência de doses de P na qualidade e compostos bioativos de cultivares de batata-doce - Paraná, BRS Amélia e BRS Cuia. Foram avaliados o pH, sólidos solúveis (SS), acidez titulável (AT), relação SS/AT, açúcares solúveis e os compostos bioativos - flavonoides, antocianinas e carotenoides. As doses de P influenciaram as cultivares de batata-doce. A dose de 120 kg ha-1 promoveu incrementos nos parâmetros pH, SS, AT e relação SS/AT para a cultivar BRS Cuia. A mesma dose promoveu incrementos nos açúcares solúveis totais para a cultivar BRS Amélia. A dose de 240 kg ha-1 promoveu maiores teores de flavonoides e antocianinas na cultivar Paraná, e houve aumento no teor de carotenoides na dose de 60 kg ha-1.

Investigating specialized plant metabolites, traditionally referred to as ‘secondary metabolites’ present in leaf extracts of cashew trees (Anacardium occidentale) resistant and susceptible to anthracnose disease was carried out using metabolomics combined with chemometric tools. We used clones of dwarf-cashew with the following variations of characteristics: resistant and healthy (CCP 76, BRS 226, BRS 189), susceptible and healthy (BRS 265), and another clone also susceptible but affected by the disease (BRS 265). The UPLC-QTOF-MSE (ultra performance liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight mass spectrometry) analysis of the leaves of Anacardium clones allowed us to annotate a total of 39 metabolites. The multiple orthogonal partial discriminant analysis of the least-squares (OPLS-DA) allowed twelve metabolites to be potential biomarkers of differentiation among the clones studied. Namely, the triene-(17:3)-anacardic acid found on CCP 76 and BRS 189 clones, respectively, is the main candidate for biomarker of resistance. While catechin, B-type procyanidin isomers, and procyanidin dimer monogallate identified in BRS 265 are significant potential biomarkers of susceptibility.

Losartan potassium and hydrochlorothiazide are often combined in pharmaceutical formulations for the treatment of hypertension. Therefore, the determination of these compounds in a single run is highly desirable for rapid quality control applications. The present study describes an ultra-fast (ca. 85 injections h-1) and environmentally friendly method based on capillary electrophoresis (CE) with capacitively coupled contactless conductivity detection for simultaneous quantification of potassium, losartan and hydrochlorothiazide. Cation (potassium) and anions (losartan and hydrochlorothiazide) were analyzed in a single run using a background electrolyte composed by 10.0 mmol L-1 boric acid (pH = 9.0, adjusted with sodium hydroxide). The limits of detection were 4.0, 3.0 and 10.0 μmol L-1 for potassium, losartan and hydrochlorothiazide, respectively. The proposed method is simple, fast, with minimal waste generation, and accurate (recovery values between 98 and 102%). The results obtained with the CE method were statistically similar (95% confidence level) to those obtained by high-performance liquid chromatography (losartan and hydrochlorothiazide) and flame photometry (potassium).

ABSTRACT Salinity can have detrimental effects on plant development. To minimize this damage, strategies such as balanced maintenance of plants’ nutritional status have been proposed previously. The objective of this study is to investigate whether the optimization of foliar nitrogen fertilization can promote the growth and photochemical efficiency of purple basil subjected to salt stress. The experiment was performed using a randomized block design with an incomplete 5 × 5 factorial arrangement generated through experimental matrix Central Composite Design with two parameters: salinity of irrigation water at 0.5, 0.81, 2.75, 4.69, and 5.50 dS m-1; and nitrogen doses at 0, 58.58, 200, 341.42, and 400 mg L-1. It was found that an increase in the salinity of irrigation water reduced the growth and photochemical efficiency of purple basil. However, the foliar application of nitrogen at the concentration of 400 mg L-1 attenuated the harmful effects of salinity on both the absolute and relative growth rates of stem diameter, the relative growth of plant height, and chlorophyll A fluorescence. These results showed that foliar nitrogen fertilization is a suitable strategy to help mitigate salt stress in basil plants.

RESUMO A salinidade pode promover efeitos danosos ao desenvolvimento vegetal, sendo o necessário o uso de estratégias para minimizar os danos promovidos, como a manutenção equilibrada do estado nutricional da planta. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da adubação nitrogenada foliar e da salinidade no crescimento e eficiência fotoquímica de manjericão roxo. O experimento foi conduzido com o delineamento de blocos casualizados, em arranjo fatorial incompleto 5 × 5 (salinidades da água de irrigação: 0,5; 0,81; 2,75; 4,69 e 5,50 dS m-1 × doses de nitrogênio: 0; 58,58; 200; 341,42 e 400 mg L-1), gerados através da matriz experimental Composto Central de Box. O aumento da salinidade da água de irrigação reduz o crescimento e a eficiência fotoquímica das plantas de manjericão roxo. Todavia, a aplicação foliar de 400 mg L-1 de N atenuou os efeitos deletérios da salinidade sobre as taxas de crescimento absoluto e relativo para o diâmetro do caule e relativo para a altura de plantas, assim como na fluorescência da clorofila a. Esses resultados mostram que a adubação foliar nitrogenada é uma estratégia para mitigar o estresse salino em plantas de manjericão.

Abstract Considering the side effects in the oral cavity and dental structures of radiotherapy (RDT) for head and neck cancer, this study aimed to evaluate the effects of RDT on the root dentin concerning the obliteration of dentinal tubules, the inorganic composition of intra-radicular dentin, and the integrity of collagen fibers. Thirty human canines were selected from a biobank and randomly divided into two groups (n=15). The samples were sectioned buccolingually, and a hemisection was used for structural analysis by scanning electron microscopy (SEM) and energy-dispersive X-ray spectrometer (EDS). Low-vacuum SEM images were obtained at 2000-x magnification to observe the obliteration of the dentinal tubules. Moreover, compositional evaluation was performed using EDS. After RDT, the SEM and EDS analyses were repeated using the same methodology. RDT was applied fractionally at 2 Gy per day, 5 days per week, for 7 weeks, resulting in a total dose of 70 Gy. The collagen integrity of the irradiated and non-irradiated samples was analyzed using Masson’s trichrome and picrosirius red staining polarization microscopy. Samples subjected to RDT exhibited dentinal tubule obliteration (p < 0.001); low integrity of type I and III collagen fibers (p < 0.05); compositional reduction of calcium (p = 0.012), phosphorus (p = 0.001), and magnesium (p < 0.001); an increased Ca/P ratio (p < 0.001). RDT affects the structure of dentinal tubules, the inorganic composition of intra-radicular dentin, and the collagen fiber integrity in the root dentin, which may interfere with the effectiveness and durability of dental procedures.

Resumo Considerando os efeitos colaterais na cavidade oral e estruturas dentárias da radioterapia (RDT) para o câncer de cabeça e pescoço, este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da RDT sobre a dentina radicular quanto à obliteração dos túbulos dentinários, a composição inorgânica da dentina intra-radicular e a integridade das fibras colágenas. Trinta caninos humanos foram selecionados de um biobanco e divididos aleatoriamente em dois grupos (n=15). As amostras foram seccionadas no sentido vestíbulo-lingual, e uma hemissecção foi utilizada para análise estrutural por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e espectrômetro de raios X de dispersão de energia (EDS). Imagens de MEV de baixo vácuo foram obtidas com aumento de 2500x para observar a obliteração dos túbulos dentinários. Além disso, a avaliação composicional foi realizada usando EDS. Após a RDT, as análises em MEV e EDS foram repetidas usando a mesma metodologia. A RDT foi aplicada fracionada a 2 Gy por dia, 5 dias por semana, durante 7 semanas, resultando em uma dose total de 70 Gy. A integridade do colágeno das amostras irradiadas e não irradiadas foi analisada usando microscopia de polarização de coloração com tricrômio de Masson e picrosirius red. As amostras submetidas a RDT apresentaram obliteração dos túbulos dentinários (p < 0,001); baixa integridade das fibras colágenas tipo I e III (p < 0,05); redução composicional de cálcio (p = 0,012), fósforo (p = 0,001) e magnésio (p < 0,001); e uma relação Ca/P aumentada (p < 0,001). A RDT afeta a estrutura dos túbulos dentinários, a composição inorgânica da dentina intra-radicular e a integridade das fibras colágenas na dentina radicular, o que pode interferir na eficácia e durabilidade dos procedimentos odontológicos.

Resumo Espécies do gênero Cordia apresentam atividades biológicas, como anti-inflamatória, analgésica, antioxidante, antiviral e antifúngica. Para a espécie Cordia glabrata (MART) A.DC., ainda não existem informações sobre seu perfil fitoquímico e possíveis atividades biológicas, deste modo, o presente estudo teve como objetivo avaliar este perfil em extratos etanólicos de folhas jovens, adultas e senescentes, bem como o potencial antioxidante, fotoprotetor, antimicrobiano e virucida. A análise fitoquímica foi realizada por CCD (Cromatografia em Camada Delgada), mostrando a presença de flavonóides, taninos e terpenos. Na avaliação por CLAE EM/EM (Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência acoplada a Espectrometria de Massas) foi evidenciado a presença dos ácidos caféico (3,89 mgL-1), p-cumárico (6,13 mgL-1) e ferúlico (0,58 mgL-1), paralelamente, na CG/EM (Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas) verificou-se maior quantidade dos ácidos graxos palmítico (51,17%), esteárico (20,34%), linoléico (9,62%) e mirístico (8,16%). Os radicais DPPH (2,2-Difenil-1-picrilhidrazil) e ABTS+ (2′-Azino-bis (ácido 3-etilbenzotiazolina-6-sulfônico)) foram utilizados para verificar o potencial antioxidante, observando-se uma atividade superior para o extrato da folha em sua fase fenológica adulta: 54,63 ± 1,06 µgmL-1 (DPPH) e 44,21 ± 1,69 mM (ABTS+). A potencial atividade fotoprotetora dos extratos foi determinada espectrofotometricamente e os valores in vitro de FPS (Fator de Proteção Solar) em folhas jovens e adultas (5,47 e 5,41 respectivamente) apresentaram valores próximos ao FPS mínimo de 6,0 exigido pela ANVISA (Agência Nacional de Vigilância Sanitária). Não foi observada atividade antimicrobiana para Staphylococcus aureus sendo a concentração inibitória mínima de 2000 μgmL-1, no entanto o ensaio anti-herpético contra o vírus Herpes simplex tipo 2 (HSV-2) mostrou uma potente atividade virucida nas concentrações testadas com um valor de CV50 <0,195 μgmL-1 e um Índice de Seletividade (IS = CC50 / CV50) maior que 448. Os resultados obtidos neste estudo sugerem que extratos de folhas de C. glabrata em seu estágio fenológico adulto apresentam potencial antioxidante, fotoprotetora e virucida, considerando os resultados de testes in vitro.

Abstract Species of the genus Cordia have shown biological activities, such as anti-inflammatory, analgesic, antioxidant, antiviral, and antifungal activities. The species Cordia glabrata (MART) A.DC. Has no information concerning its phytochemical profile and possible biological activities. Thus, this study aimed to evaluate this profile in ethanolic extracts of young, adult and senescent leaves, as well as their antioxidant, photoprotective, antimicrobial, and virucidal potentials. Phytochemical analysis was performed by TLC (thin-layer chromatography) and showed the presence of flavonoids, tannins, and terpenes. The evaluation by UPLC-MS/MS (Ultra performance liquid chromatography - tandem mass spectrometer) evidenced the presence of caffeic (3.89 mgL-1), p-cumaric (6.13 mgL-1), and ferulic (0.58 mgL-1) acids, whilst, in GC/MS (Gas chromatography–mass spectrometry) analysis there was a greater amount of palmitic (51.17%), stearic (20.34%), linoleic (9.62%), and miristic (8.16%) fatty acids. The DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) and ABTS+ (2′-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)) radicals were used to verify the potential antioxidant activity, observing a better activity for the leaf extract in the adult phenological stage: 54.63 ± 1.06 µgmL-1 (DPPH) and 44.21 ± 1.69 mM (ABTS). The potential photoprotective activity of the extracts was determined by spectrophotometry and the in vitro values of SPF (Sun Protection Factor) in young and adult leaves (5.47 and 5.41, respectively) showed values close to the minimum SPF of 6.0 required by ANVISA (Brazilian Health Regulatory Agency). It was not observed an antimicrobial activity for Staphylococcus aureus with a minimum inhibitory concentration of 2000 μgmL-1, however the anti-herpetic assay against the Herpes simplex virus type 2 (HSV-2) showed a potent virucidal activity at the tested concentrations with CV50 value <0.195 μgmL-1 and a Selectivity Index (SI = CC50 / CV50) greater than 448. The results obtained in this study suggest that extracts of leaves of C. glabrata in their adult phenological stage have potential antioxidant, photoprotective and virucidal activity, considering in vitro test results.

Resumo Pesquisas morfofisiológicas em espécies selvagens são fundamentais, e o diagnóstico por imagem é uma excelente técnica, já usada e com grande aplicação, não invasiva e que fornece informações em tempo real de cada órgão. Peixes-boi-amazônico encontram-se na lista de animais ameaçados de extinção classificados na categoria vulnerável e o conhecimento do padrão normal da anatomia ultrassonográfica de órgãos e tecidos é importante para a manutenção e bem-estar de espécimes em cativeiro contribuindo para ações de reintrodução. O objetivo deste estudo foi padronizar a técnica de exame e descrever os achados ultrassonográficos do fígado, vesícula biliar, estômago, vesícula urinária e o tecido subcutâneo da região abdominal em Trichechus inunguis, de modo a contribuir com o conhecimento anátomo-sonográfico e auxiliar no diagnóstico e prognóstico de doenças. O estudo utilizou 18 animais para descrever a anatomia ultrassonográfica normal na cavidade abdominal de peixe-boi amazônico. Durante a varredura abdominal foi possível visualizar as características dos órgãos obtendo resultados satisfatórios neste estudo, concluindo ser uma técnica eficiente para avaliação de determinados órgãos abdominais em peixe-boi amazônico. Entretanto, outras estruturas não foram identificadas principalmente pelo tempo reduzido, muita gordura e gases nos intestinos dos animais

Abstract Morphophysiological species researches are fundamental, and diagnostic imaging is an excellent technique, already used in wild animals, with great application, not invasive and provide real-time information of each body. Amazonian manatees are on the list of endangered animals classified in the vulnerable category and knowledge of the normal pattern of ultrasound anatomy of organs and tissues is important for the maintenance and well-being of captive specimens contributing to reintroduction actions. The objective of the study was to standardize the examination technique and describe the ultrasound findings of the liver, gallbladder, stomach, urinary bladder and the subcutaneous tissue of the abdominal region in Trichechus inunguis, in order to contribute with the anatomical and sonographic knowledge and assist in the diagnosis and prognosis diseases. The study used 18 animals to describe the normal sonographic anatomy in the abdominal cavity of the Amazonian manatee. During abdominal scan, it was possible to visualize the features of the liver, gallbladder, stomach, urinary bladder obtained satisfactory results in this study. Therefore, other structures were not primarily identified by the reduced time, lots of fat and gases in intestines of animals.

Abstract Bacteria responsible for causing infections are common in hospital environments, water, soil, and food products. The infection risk is intensified by the absence of public sanitation, poor quality of life, and food scarcity. These external factors promote the dissemination of pathogens by direct contamination or biofilm formation. In this work, we identified bacterial isolates obtained from intensive care units in the southern region of Tocantins, Brazil. We compared matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) techniques and 16S ribosomal ribonucleic acid (rRNA) molecular analysis; we also performed phenotypic characterization. Fifty-six isolates characterized using morphotinctorial tests were classified as gram-positive (80.4%; n = 45) and gram-negative (19.6%; n = 11) and were resistant to several antibiotic classes; notably, we identified the blaOXA-23 resistance gene in the ILH10 isolate. Microbial identification using MALDI-TOF MS resulted in the identification of Sphingomonas paucimobilis and Bacillus circulans. 16S rRNA sequencing revealed four isolates belonging to the genera Bacillus and Acinetobacter. The similarity was superior to 99% for Acinetobacter schindleri in the Basic Local Alignment Search Tool (BLAST), grouped in the clade superior to 90%. Several strains isolated from intensive care units (ICU) were resistant to various antibiotic classes. These techniques allowed for the identification of several microorganisms of importance in public health, enabling improvements in human infection control and proving the quality of inputs, food, and water.

Resumo As bactérias responsáveis por causar infecções são comuns em ambientes hospitalares, água, solo e produtos alimentícios. O risco de infecção é intensificado pela ausência de saneamento público, má qualidade de vida e escassez de alimentos. Esses fatores externos promovem a disseminação de patógenos por contaminação direta ou formação de biofilme. Neste trabalho, identificamos isolados bacterianos obtidos de unidades de terapia intensiva na região sul do Tocantins, Brasil. Comparamos técnicas de espectrometria de massa de tempo de voo com ionização por dessorção a laser assistida por matriz (MALDI-TOF MS) e análise molecular de ácido ribonucleico ribossômico 16S (rRNA); também realizamos caracterização fenotípica. Cinquenta e seis isolados caracterizados por testes morfotintoriais foram classificados como gram-positivos (80,3%; n = 45) e gram-negativos (19,6%; n = 11) e foram resistentes a várias classes de antibióticos; notavelmente, identificamos o gene de resistência blaOXA-23 no isolado de ILH10. A identificação microbiana usando MALDI-TOF MS resultou na identificação de Sphingomonas paucimobilis e Bacillus circulans. O sequenciamento do 16S rRNA revelou quatro isolados pertencentes aos gêneros Bacillus e Acinetobacter. A similaridade foi superior a 99% para Acinetobacter schindleri no BLAST, agrupado no clado superior a 90%. Várias cepas isoladas de ICU foram resistentes a várias classes de antibióticos. Essas técnicas permitiram a identificação de diversos microrganismos de importância em saúde pública, possibilitando melhorias no controle de infecções humanas e comprovando a qualidade dos insumos, alimentos e água.

ABSTRACT: We describe an outbreak of leishmaniasis in seven guinea pigs (Cavia porcellus) in which nodular ulcerated skin lesions of varying sizes were observed in the nasal cavity, upper lip, pinnae, vulva, and periarticular region of the limbs. Cytologic exam of collected samples of the lesions in the auricle of one of the animals revealed macrophages containing parasitophorous vacuoles of approximately 4.0μm in diameter in their cytoplasm with morphology suggestive of Leishmania sp. Although skin lesions spontaneously regressed in two of the Guinea pigs, only one survived. All six animals that died were necropsied. Grossly, all animals showed bloody nodular cutaneous lesions with crusts. One of the guinea pigs had distended dark red and firm lungs. Histopathology of the skin lesions revealed histiocytic interstitial acanthotic dermatitis associated with a myriad of Leishmania organisms within macrophages cytoplasm. In the lung, the lesions were characteristic of broncho-interstitial pneumonia with focal infiltrates of neutrophils, epithelioid macrophages, and multinucleated giant cells containing 2µm basophilic amastigotes with morphology compatible with Leishmania spp. A focal granulomatous lesion ,associated with the causal agent in the lung is a novel description of leishmaniasis in guinea pigs caused by L. enriettii. The polymerase chain reaction (PCR) technique with mini-exon primer performed in samples of lesions from two affected guinea pigs was positive and equal to the reference strain, identifying Leishmania enriettii. The cytological, macroscopic, and histological lesions associated with the PCR technique allowed the diagnosis of leishmaniasis and the identification of the specie L. enriettii.

RESUMO: Descrevemos um surto de leishmaniose em sete cobaias (Cavia porcellus), com lesões cutâneas nodulares ulceradas de tamanhos variados observadas na cavidade nasal, lábio superior, pavilhões auriculares, vulva e região periarticular dos membros. No exame citológico foram encontrados macrófagos contendo vacúolos parasitóforos no citoplasma de aproximadamente 4.0μm em diâmetro com morfologia sugestiva de Leishmania sp. Apesar de regressão espontânea das lesões cutâneas terem ocorrido em duas das sete cobaias, apenas um sobreviveu. Seis dos sete animais afetados morreram e foram necropsiados. Macroscopicamente, todos os animais apresentaram lesões cutâneas nodulares, crostosas e sanguinolentas. Uma das cobaias tinha pulmões vermelho-escuros, distendidos e firmes. A histopatologia das lesões cutâneas revelou dermatite acantótica intersticial histiocítica associada a miríades de organismos de Leishmania no citoplasma de macrófagos. Nos pulmões as lesões eram características de pneumonia bronco-intersticial com infiltrado focal de neutrófilos, eosinófilos, macrófagos epitelioides e células gigantes multinucleadas contendo amastigotas basofílicos de 2µm com morfologia compatível com Leishmania spp. Lesões granulomatosas focais associadas ao agente no pulmão são um achado inédito na leishmaniose causada por L. enriettii em cobaias. A técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) com primer mini-exon realizada em amostras de lesões de duas cobaias afetadas foi positiva, identificando Leishmania enriettii. Os aspectos macroscópicos, citológicos, e histológicos associados à técnica da (PCR), permitiram o diagnóstico da leishmaniose e a identificação da espécie L. enriettii.

Abstract Objective: To evaluate inactivated CoronaVac prime vaccination, antibody decay, booster dose, and safety in ANCA-Associated Vasculitis (AAV) patients. Methods: Fifty-three AAV patients and 106 Controls (CG) received CoronaVac on days: D0 (first dose), D28(second dose), and D210 (booster dose, 32 AAV: 32 CG). The primary outcome was immunogenicity after the second vaccine dose (day 69) assessed by Seroconversion Rates (SC) of anti-SARS-CoV-2 S1/S2 IgG and Neutralizing Antibodies (NAb). Secondary outcomes were safety, immunogenicity (D28/D240), 6-months antibody decay (D210) and the booster dose response (D240). Results: At D69 SC (65.1% vs. 96.8%, p = 0.0001), GMT (21.3 UA/mL vs. 67.7 UA/mL, p < 0.001) and NAb- positivity (53.7% vs. 80.6%, p = 0.001) were moderate but lower in naïve-AAV patients than CG. Patients without SC used more often IS (93.3% vs. 53.3%, p = 0.015), mycophenolate mofetil (20% vs. 0%, p = 0.037) and prednisone (60.0% vs. 28.6%, p = 0.057) than seroconverted. NAb negativity in AAV patients was associated with prednisone treatment (57.9% vs. 18.2%, p = 0.015) and IS (84.2% vs. 55.0%, p = 0.046). Logistic regression analysis models showed that only prednisone was associated with lower seroconversion (OR = 0.2, 0,95% CI 0.05–0.86, p = 0.030) and with lower NAb positivity (OR = 0.2, 0,95% CI 0.05–0.88, p = 0.034). After six months (D69–D210) a decrease in IgG positivity occurred in 32 AAV patients (15.7%, p = 0.074) and 32 CG (18.7%, p = 0.041). For the NAb positivity, the 6-month decrease was not significant (p = 0.114) whereas a major reduction occurred for CG (p < 0.001). A booster dose (D240) resulted in an increment in IgG-positivity (21.9%, p = 0.023) and NAb-positivity (34.4%, p = 0.006) in AAV patients. No moderate/severe adverse events attributable to the vaccine were observed. Conclusion: This study provides novel data on the excellent safety and moderate immunogenicity of CoronaVac in AAV patients. A six-month mild antibody waning was observed with a good response to the booster dose, although levels remained lower than CG (CoronavRheum-NCT04754698).

Abstract The isolation of multidrug-resistant Klebsiella pneumoniae in hospitals is a major public health threat, increasing patient hospitalization costs, morbidity and mortality. Therefore, this work investigated the resistance mechanisms that produced different carbapenems susceptibility profiles in two isogenic strains of K. pneumoniae isolated from the same patient in a public hospital in Recife, Pernambuco. The genes that encode the main porins in K. pneumoniae, ompK35 and ompK36, and several beta-lactamase genes were analyzed. The expression of these genes was evaluated by quantitative real time PCR (polymerase chain reaction) with reverse transcriptase (RT-qPCR). SDS-PAGE (sodium dodecyl sulphate–polyacrylamide gel electrophoresis) was performed to analyze the outer membrane proteins. The analysis of the ompK36 genetic environment disclosed an IS903 insertion sequence disrupting this gene in the ertapenem resistant isolate (KPN133). The blaKPC-2 gene showed down-regulated expression in both isolates. Our findings show that changes in porins, especially OmpK36, are more determinant to carbapenems susceptibility profile of bacterial isolates than variations in blaKPC gene expression.

Resumo O isolamento de Klebsiella pneumoniae multirresistente em hospitais é uma grande ameaça à saúde pública, aumentando os custos de internação, morbidade e mortalidade dos pacientes. Portanto, este trabalho investigou os mecanismos de resistência que produziram diferentes perfis de suscetibilidade aos carbapenêmicos em duas cepas isogênicas de K. pneumoniae isoladas do mesmo paciente em um hospital público em Recife, Pernambuco. Foram analisados os genes que codificam as principais porinas em K. pneumoniae, ompK35 e ompK36, e diversos genes de beta-lactamases. A expressão desses genes foi avaliada por PCR (reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real) com transcriptase reversa (RT-qPCR). SDS-PAGE (dodecil sulfato de sódio-poliacrilamida gel eletroforese) foi realizada para analisar as proteínas da membrana externa. A análise do ambiente genético ompK36 revelou uma sequência de inserção IS903 interrompendo este gene no isolado resistente ao ertapenem (KPN133). O gene blaKPC-2 apresentou expressão negativamente regulada em ambos os isolados. Nossos achados mostram que alterações nas porinas, especialmente OmpK36, são mais determinantes no perfil de suscetibilidade aos carbapenêmicos de isolados bacterianos do que variações na expressão do gene blaKPC.