RESUMO Objetivo. Determinar a evolução da mortalidade por câncer de pulmão na Colômbia no período de 1985 a 2018, na população com 35 anos de idade ou mais, e identificar mudanças na tendência. Métodos. Análise de séries temporais de mortalidade. Foram calculadas taxas específicas e padronizadas por sexo e faixa etária. Por meio da regressão joinpoint, estimou-se o percentual de variação anual das taxas e foram identificados os pontos de variação. Resultados. No período de 1985 a 2018, foram registradas 105.553 mortes por câncer de pulmão na população com 35 anos de idade ou mais. As taxas padronizadas demonstram tendência decrescente no período de 1985 a 2005, exceto para maiores de 64 anos. Conclusões. A tendência das taxas de mortalidade por câncer de pulmão na Colômbia é descendente. É necessário promover medidas de prevenção primária e secundária acerca do consumo de tabaco e monitorar outros fatores de risco, como a exposição ao radônio residencial ou a ocupação.

RESUMEN Objetivo. Determinar la evolución de la mortalidad por cáncer de pulmón en Colombia en el período 1985-2018 en la población de 35 años y más e identificar cambios en la tendencia. Métodos. Análisis de series temporales de mortalidad. Se calcularon las tasas específicas y estandarizadas por sexo y grupos de edad. Mediante la regresión joinpoint se estimó el porcentaje de cambio anual de las tasas y se identificaron puntos de cambio. Resultados. En el período 1985-2018 se registraron 105 553 muertes por cáncer de pulmón en la población de 35 años y más. Las tasas estandarizadas muestran una tendencia decreciente en el período 1985-2005, excepto en mayores de 64 años. Conclusiones. La tendencia de las tasas de mortalidad por cáncer de pulmón es decreciente en Colombia. Es necesario potenciar medidas de prevención primaria y secundaria sobre el consumo de tabaco y vigilar otros factores de riesgo como el radón residencial o la ocupación.

ABSTRACT Objective. To determine lung cancer mortality trends in Colombia during the period 1985-2018 in the population aged 35 years and over and identify changes in the trend. Methods. Analysis of mortality time series. The specific standardized rates by sex and age group were calculated. Using joinpoint regression, the annual percentage change in the rates was estimated and points of change were identified. Results. During the period 1985-2018, 105 553 deaths from lung cancer were reported in the population aged 35 and over. The standardized rates exhibit a downward trend during the period 1985-2005, except in people over the age of 64. Conclusions. Lung cancer death rates in Colombia are trending downward. Primary and secondary prevention measures with respect to tobacco use need to be enhanced and other risk factors, such as residential radon or occupation, monitored.

Abstract Individuals with malignancies and COVID-19 have a lower survival compared with the general population. However, the information about the impact of COVID-19 on the whole hematological population is scarce. We aimed to describe the 30th day overall survival (OS) after COVID-19 infection in pa tients with a hematological disease in Argentina. A completely anonymous survey from the Argentine Society of Hematology was delivered to all the hematologists in Argentina; it started in April 2020. A cut-off to analyze the data was performed in December 2020 and, finally, 419 patients were reported and suitable for the analysis (average age: 58 years, 90% with malignant diseases). After the COVID-19 diagnosis, the 30-day OS for the whole population was 80.2%. From the entire group (419), 101 (24.1%) individuals required intensive care unit admission, where the 30-day OS was 46.6%. Among allogeneic stem cell transplant recipients, the 30-day OS was 70.3%. Factors associated with a low OS were two or more comorbidities, an active hematological disease and history of chemotherapy. In individuals with the three factors, the 30-day OS was 49.6% while the 30-day OS in those without those factors was 100%. Patients with hematological diseases have a higher mortality than the general population. This group represents a challenge and requires careful decision-making of the treatment in order not to compromise the chances of cure.

Resumen El presente estudio tuvo por objetivo primario conocer la mortalidad de pacientes con enfermedad hematológica que presentaron infección por COVID-19 en Argentina. Para ello se difundió una encuesta desde la Sociedad Argentina de Hematología (SAH) entre los hematológos para informar sobre los pacientes con enfermedades hematológicas y diagnóstico de infección por SARS- CoV-2, entre el 19/4/2020, y el 7/12/2020. Se incluyeron individuos de todas las edades con diagnóstico de enfermedad hematológica benigna o maligna e infección por SARS-CoV-2 confirmada por técnica de RT-PCR. Se analizaron 419 pacientes (mediana 58 años; 90% enfermedades malignas). La supervivencia al día 30 fue de 80.2%. La supervivencia fue menor en aquellos que requirieron internación (74.2%), cuidados intensivos (46.6%) y asistencia respiratoria mecánica (36.8%). Entre los trasplantados alogénicos la supervivencia fue 70.3%. Los factores vinculados a la supervivencia global fueron las comorbilidades, el estado de la enfermedad al momento de la infección y el antecedente de quimioterapia. Se pudo establecer un score en el que aquellos que tuvieron un puntaje de 4 alcanzaron una supervivencia del 49.6% al día 30, mientras que la de los pacientes con score 0 fue del 100% a 30 días. En comparación con la población general, los pacientes con enfermedades hematológicas presentan una mayor mortalidad vinculada al COVID-19, motivo por el cual es primordial definir pautas destinadas a disminuir la exposición de los mismos sin comprometer las posibilidades de beneficiarse del tratamiento de la enfermedad de base.

ABSTRACT: Objective: To update the estimation of tobacco attributable mortality (AM) in the Brazilian population aged 35 years old and older. Methods: A prevalence-dependent analysis was applied based on the population attributed fraction. This method estimates the tobacco AM taking into account the mortality observed in Brazil (source: Brazilian Mortality Information System - 2016); the prevalence of smokers, former smokers, and never smokers (National Health Survey Brazil - 2013) and the excess of risk of death (relative risk) of smokers and former smokers in comparison to never smokers (derived from 5 North American cohorts). Estimates of overall AM are shown by gender, age group (35-54; 55-64; 65-74; and 75 years old and older) and 3 groups: malignant tumors, cardiometabolic diseases, and respiratory diseases. Results: In 2016, tobacco consumption caused 163,831 deaths in Brazil, 67% (109,369) were in men and four out of ten (62,791) occurred before the age of 65. Without differences by gender, 42% of the AM is associated with cardiometabolic diseases, followed by respiratory diseases (34%) and malignant tumors (24%). Conclusion: During 2016, 14% of the deaths occurred in the Brazilian population aged 35 years old and older were attributed to tobacco consumption. Periodic tobacco AM estimations are mandatory to assess and strengthen smoking control strategies and policies.

RESUMEN: Objetivo: Actualizar la estimación de la mortalidad atribuida al consumo de tabaco en Brasil en población de 35 y más años. Métodos: Se aplicó un método dependiente de prevalencia, basado en la fracción atribuida poblacional. Este método estima la mortalidad atribuida a partir de la mortalidad observada en Brasil (fuente: Sistema de Información de Mortalidad del Sistema Único de Salud de Brasil-2016); de las prevalencias de fumadores, exfumadores y nunca fumadores (Encuesta Nacional de Salud de Brasil-2013) y del exceso de riesgo de morir (riesgo relativo) que tienen los fumadores y exfumadores en comparación con los nunca fumadores (5 estudios de cohortes norteamericanos). Se presentan estimaciones de mortalidad atribuida globales, por sexo, grupo de edad (35-54; 55-64; 65-74 y 75 años en adelante) y 3 grupos de enfermedades: tumores malignos, enfermedades cardiometabólicas y respiratorias. Resultados: En 2016, el consumo de tabaco causó con 163.831 muertes en Brasil, el 67% (109.369) fue en hombres y cuatro de cada diez (62.791) sucedieron antes de los 65 años. El 42% de la mortalidad atribuida se asocia a enfermedades cardiometabólicas, seguidas de respiratorias (34%) y tumorales (24%), sin diferencias por sexo. Conclusión: El 14% de las muertes que sucedieron en Brasil durante 2016 en población de 35 y más años se atribuye al consumo de tabaco. Realizar de forma periódica estimaciones de MA es necesario para valorar y fortalecer las leyes de control de tabaquismo implantadas.

ABSTRACT: Objective: To update the estimation of tobacco attributable mortality (AM) in the Brazilian population aged 35 years old and older. Methods: A prevalence-dependent analysis was applied based on the population attributed fraction. This method estimates the tobacco AM taking into account the mortality observed in Brazil (source: Brazilian Mortality Information System - 2016); the prevalence of smokers, former smokers, and never smokers (National Health Survey Brazil - 2013) and the excess of risk of death (relative risk) of smokers and former smokers in comparison to never smokers (derived from 5 North American cohorts). Estimates of overall AM are shown by gender, age group (35-54; 55-64; 65-74; and 75 years old and older) and 3 groups: malignant tumors, cardiometabolic diseases, and respiratory diseases. Results: In 2016, tobacco consumption caused 163,831 deaths in Brazil, 67% (109,369) were in men and four out of ten (62,791) occurred before the age of 65. Without differences by gender, 42% of the AM is associated with cardiometabolic diseases, followed by respiratory diseases (34%) and malignant tumors (24%). Conclusion: During 2016, 14% of the deaths occurred in the Brazilian population aged 35 years old and older were attributed to tobacco consumption. Periodic tobacco AM estimations are mandatory to assess and strengthen smoking control strategies and policies.

RESUMEN: Objetivo: Actualizar la estimación de la mortalidad atribuida al consumo de tabaco en Brasil en población de 35 y más años. Métodos: Se aplicó un método dependiente de prevalencia, basado en la fracción atribuida poblacional. Este método estima la mortalidad atribuida a partir de la mortalidad observada en Brasil (fuente: Sistema de Información de Mortalidad del Sistema Único de Salud de Brasil-2016); de las prevalencias de fumadores, exfumadores y nunca fumadores (Encuesta Nacional de Salud de Brasil-2013) y del exceso de riesgo de morir (riesgo relativo) que tienen los fumadores y exfumadores en comparación con los nunca fumadores (5 estudios de cohortes norteamericanos). Se presentan estimaciones de mortalidad atribuida globales, por sexo, grupo de edad (35-54; 55-64; 65-74 y 75 años en adelante) y 3 grupos de enfermedades: tumores malignos, enfermedades cardiometabólicas y respiratorias. Resultados: En 2016, el consumo de tabaco causó con 163.831 muertes en Brasil, el 67% (109.369) fue en hombres y cuatro de cada diez (62.791) sucedieron antes de los 65 años. El 42% de la mortalidad atribuida se asocia a enfermedades cardiometabólicas, seguidas de respiratorias (34%) y tumorales (24%), sin diferencias por sexo. Conclusión: El 14% de las muertes que sucedieron en Brasil durante 2016 en población de 35 y más años se atribuye al consumo de tabaco. Realizar de forma periódica estimaciones de MA es necesario para valorar y fortalecer las leyes de control de tabaquismo implantadas.

Resumo Platynosomum illiciens é um trematódeo do fígado, encontrado principalmente em felinos, embora também tenha sido relatado em aves e outras espécies de mamíferos, incluindo primatas não humanos. Este estudo relata um caso de parasitismo natural por P. illiciens em um primata do gênero Callithrix. O diagnóstico foi feito com uma combinação de técnicas coproparasitológicas, avaliação morfológica de espécimes adultos recuperados do fígado durante a necropsia e análise molecular. Os ovos eram de cor marrom, ovais, operculados e continham um miracídio. Espécimes adultos recuperados durante a necropsia foram medidos e mostraram dimensões compatíveis com P. illiciens. A caracterização molecular do trematódeo envolveu a reação em cadeia da polimerase (PCR) e o sequenciamento de um fragmento de, aproximadamente, 900 pares de bases correspondentes ao DNA robosomal 18S-ITS1-5.8S, que apresentou 100% de identidade da sequência de nucleotídeos com as sequências do GenBank depositadas como derivadas de P. illiciens recuperados de gatos na Malásia e no Brasil, respectivamente. Concluiu-se pelas análises morfológicas e moleculares aqui apresentadas, que o trematódeo é da espécie P. illiciens.

Abstract Platynosomum illiciens is a liver trematode encountered infecting mainly felids although it has also been reported in birds and in additional mammalian species, including non-human primates. The current study reports a natural P. illiciens infection primate of the genus Callithrix. The diagnosis was made using a combination of copro-parasitological techniques, morphological evaluation of adult specimens recovered from the liver during necropsy, and molecular analyses. Eggs were brown in color, oval, operculated, and contained a miracidium. Adult specimens recovered during necropsy were measured and showed dimensions compatible with P. illiciens. Molecular characterization of the trematode involved amplification by polymerase chain reaction (PCR), in combination with nucleotide sequencing, of an approximately 900 base pairs fragment corresponding to 18S-ITS1-5.8S ribosomal DNA. Sequenced amplicons showed 100% nucleotide identity with sequences deposited in the GenBank database as derived from specimens of P. illiciens recovered from cats in Malaysia and Brazil. It was concluded that the morphological and molecular analyses presented herein, confirmed the identification of the trematode recovered as P. illiciens.

Abstract: The purpose of this paper is to reflect about the evolution of the concept of heritage in which throughout history it has overpassed its monumental and national condition to include in a broader context. The Venice Charter (1964), the Convention of the World Cultural and Natural Heritage (1972), the consideration of landscape as heritage with the creation of the cultural landscape and The Recommendation on the Historic Urban Landscape (2011) as the most innovative tool for managing sustainable urban development are the horizons that structure this reflection. Undoubtedly, this review of international Charters and Texts verify that this conceptual change is accompanied by a transformation of the heritage values, which it is a response to the speed of transformation and accelerated growth of world urban development.

Resumen: El objetivo de este texto es reflexionar acerca de la evolución del concepto de patrimonio en el que se ha superado, a lo largo de la historia, su condición monumental y nacional para incardinarlo en un contexto más amplio. La Carta de Venecia de 1964; la Convención del Patrimonio mundial, Cultural y Natural de 1972; la consideración del paisaje como patrimonio con la creación de la figura de Paisaje Cultural; y, la Recomendación sobre el Paisaje Urbano Histórico (PUH) como la herramienta más novedosa para gestionar el desarrollo urbano sostenible, son los horizontes que estructuran esta reflexión. Sin duda, esta revisión de Cartas y Textos internacionales verifican que este cambio conceptual va acompañado de una transformación de los valores patrimoniales, la cual responde a la velocidad de transformación y crecimiento acelerado del desarrollo urbano mundial.

Abstract Riparian ecosystems harbor significant biodiversity and support essential ecological functions that affect ecosystem services provision for human well-being. Anthropogenic disturbances often exceed the natural resilience of these ecosystems thus resulting in their degradation. Ecological restoration promotes restoring biodiversity and riparian ecosystems services, but its success depends on several aspects. This work bases on a study case to exemplify the problem of restoration from an ‘integral’ perspective and discusses ecological, socio-economic and legal aspects that can influence the success of the restoration of these forests. While ecological aspects have been considerably developed, information on economic (e.g. production costs), social (e.g. social acceptance) and legal constraints (e.g. incorporation of restoration in public programs) are still limited for restoration being applied at broader scales. Estimating ecosystem services that could be restored from the restoration of riparian forests may help to integrate these aspects. Addressing these aspects at the local level will provide information for the future development of more efficient regional strategies in terms of the ecological benefit-socioeconomic cost ratio. Finally, we discuss some recommendations relating to the conservation, management and restoration of riparian ecosystems in the humid tropics of Mexico.

Resumen Los bosques ribereños albergan una biodiversidad importante y en ellos se desarrollan funciones ecológicas esenciales que repercuten en la provisión de servicios ecosistémicos relevantes para la sociedad. Las perturbaciones de origen antrópico frecuentemente exceden la resiliencia natural de estos ecosistemas y, en consecuencia, desencadenan procesos de degradación. La restauración ecológica busca recuperar la biodiversidad y los servicios de los bosques ribereños, pero su éxito depende de varios aspectos de contexto. En este trabajo se utiliza un estudio de caso para ejemplificar la problemática de la restauración desde una perspectiva ‘integral’ y se discuten aspectos ecológicos, socio-económicos y legales que pueden influir en el éxito de la restauración de estos bosques. Si bien los aspectos ecológicos han sido considerablemente desarrollados, aún falta información relacionada con las limitaciones económicas (p. ej. los costos de producción), sociales (p. ej. la aceptación social) y legales (p.ej. la incorporación de la restauración ecológica en programas públicos), para ser aplicados a escalas más amplias. La estimación de los servicios ecosistémicos que podrían restablecerse a partir de la restauración de bosques ribereños aportará a la integración de estos aspectos. El abordaje de estos aspectos a escala local aportará información para el desarrollo futuro de estrategias a escala regional más eficientes en términos de la relación beneficio ecológico-costo socioeconómico. Se discuten algunas recomendaciones relacionadas con la conservación, el manejo y la restauración de los bosques ribereños en el trópico húmedo de México.

The 2008 National Addiction Survey demonstrated the existence of 39 million alcohol drinkers, of whom 4.2 million are excessive drinkers and 4.8 million are alcohol dependents. No reports of the comorbidity of psychiatric disorders in alcohol consumers in our country exist. Nevertheless, 40% to 50% of alcohol-dependent patients from other countries have some sort of psychiatric disorder, such as major depression. Serotonergic function is a key mediator of mood states, impulsiveness, and addictive behavior, including alcohol consumption. Several studies have noted alterations in the serotonergic system in alcoholics (as demonstrated by an increase in the shooting frequency of raphe nuclei serotonergic neurons, an increase in serotonin levels in the accumbens nuclei, and a loss in serotonergic neurons in the raphe nuclei) and depressed patients (decreases in the density of serotonin reuptake transporter [5-HTT] and serotonin levels [5-HT]). Clinical studies have documented that excessive alcohol intake reduces 5-HT levels and that this condition potentiates psychiatric disorders, such as anxiety, major depression, and alcohol dependence. These data demonstrate an association between alcoholism, psychiatric disorders, and alcohol dependence. By molecular biology techniques, genetic risk factors have been identified and candidate genes, such as 5-HTT, have been selected. This gene is associated with a greater susceptibility to onset of alcohol-dependence and major depression. The 5-HTT gene lies in the SLC6A4 locus of 1 7q1 1.1-q12 and encodes a 600-amino-acid integral membrane protein. This transporter regulates serotonergic neurotransmission through removal of 5-HT from the synaptic space. Pharmacological research has shown that selective reuptake inhibitors (5-HTT blockers) reduce alcohol intake in alcohol-dependent and major depression patients. Serotonergic system receptors, such as 5-HTT, 5-HT1, and 5-HT2, are expressed in nervous system and immune system cells; thus it is likely that both systems have functional similarities. Due to this property, peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) can be used to research neurodegenerative, psychiatric, and alcohol dependence disorders. The aim of this study was to assess 5-HTT expression levels in the PBMCs from alcohol-dependent patients and patients with comorbid alcohol-dependence and major depression disorder. Materials and methods The Outpatient Consultative Service from the Centro de Ayuda a Alcohólicos y Familiares (CAAF) and the Centro de Alcohólicos y Drogadictos <<Carrasco>> screened 70 patients from February to November 2008. Twenty patients who met the criteria of alcohol dependence, according to the Spanish version of the Mini International Neuropsychiatric Interview (MINI), were accepted. Alcohol dependence was based on the Alcohol Dependence Scale (EDA) that was adapted to the Mexican population. Healthy volunteers (n = 12) were selected concurrently from the general population of Mexico City with the start of patient enrollment. A psychiatrist evaluated the mental health of these patients using MINI. Clinical and laboratory trials demonstrated normal standard reference values. Patients were included based on INPRFNC092318.1 research protocol procedures, which were approved by the Ethics Committee of the Instituto Nacional de Psiquiatría Ramón de la Fuente. All participants were given a detailed explanation concerning the study objectives and gave their signed informed consent. The patients for this study were men and women, aged 18 years and older who presented a diagnosis of alcohol dependence. Patients were grouped as follows: Group A: diagnosed alcohol dependence (n=12) and Group B: diagnosed alcohol dependence depressed patients (n=12). All patients arrived to the clinical laboratory from 8:00 to 9:00 a.m. to undergo a peripheral blood test. Blood was drawn by venous puncture and placed into anticoagulant-coated tubes. The blood was then diluted in an isotonic saline solution (SSI) (1:1, v/v) and transferred to a tube that contained Ficoll-Histopaque solution (1:2, v/v) to form a density gradient. The sample was centrifuged at 1600 rpm for 30 minutes at 4°C. The gradient interphase, which contained the mononuclear cells, was collected, SSI cells were washed, and Trizol was added. RNA isolation and RT-PCR RNA extraction from the PBMCs was performed using Trizol, wherein a monophase phenol solution and guanidine isothiocyanate were used to lyse cells and dividing the sample into 2 phases: aqueous and organic. The aqueous phase was separated with chloroform, and RNA was precipitated with isopropanol. Genetic material was washed with alcohol and allowed to dry. RNA was resuspended with RNase- and DNase-free water. The index of purity of the RNA samples ranged between 1.8 and 2.0. RNA samples were treated with DNase 1 (Invitrogen Life Technologies, CA, USA) to eliminate DNA contamination. Total RNA was used for the generation of cDNA and was performed from 1 |Ig of total RNA in a reaction volume of 20 (xL containing 5X Buffer 5|lL Retro-Transcriptase (Promega, WI, USA), 15 mM MgCl2, 1.25 ul 10 mM dNTP mix (Promega, WI, USA), 200 U M-MLV reverse transcriptase (Promega, WI, USA) and 1 |xL of 10 mM OligodT (GE, UK). The reaction mixture was incubated for 60 minutes at 42°C in a thermocycler (Thermocycler Gradient, Eppendorf, Germany) and applied a final cycle of 90°C for 5 minutes. The reverse-transcribed product (cDNA) was amplified by PCR in a final reaction volume of 25 |xL containing 2 |xL of cDNA, 1 mM deoxyribonucleotide dNTP Mix (Promega, WI, USA), 0.75 mM MgCl2, 2.5 mM oligonucleotide GoTaq and 1.25 units DNA polymerase (Promega, WI, USA). PCR was performed for 25 cycles, using a cycling program of 94°C for 1 minute, 60°C for 1 minute and 72°C for 1.30 minutes in a thermocycler for the amplification of 5-HTT and GAPDH. The oligo-nucleotides used for 5-HTT were: sense 5'-GAACTCCTGGAACAC TGGCAAC-3' and antisense 5'-ATGACAAATCCCGAAACGAAGC-3' (534 base pairs, [bp] product). In the case of GAPDH sequences of oligonucleotides used were: sense 5'-TGGGGAAGGTGAAGGTC GGAGTC-3' and antisense 5'-GACTTCAACAGCGACACCCACTC-3' (874 bp product). The amplicons were separated on an agarose gel and stained with ethidium bromide. The bands were analyzed by computerized densitometry. The optical density values for 5-HTT were calculated as the quotient between the values for 5-HTT and GADPH, expressed as the mean ± standard deviation. Statistic analysis was performed using the Shapiro-Wilk homogeneity test and nonparametric Mann-Whitney test. Differences were considered statistically significant when ≤ p 0.05 Results 5-HTT levels were nondetectable (ND) in patient with comorbid alcohol-dependence and major depressive disorder. By Shapiro Wilk test, healthy volunteers and alcohol-dependent patients did not differ. Healthy volunteers expressed higher levels of 5-HTT gene (0.5012 ± 0.1349) compared with alcohol-dependent patients (0.3150 ± 0.1836) (p < 0.0036, Mann-Whitney). Discussion Our PCR method allowed us to determine that 5-HTT expression is lower in the two groups of patients compared with healthy volunteers. These results are consistent with studies that have reported that 5-HTT expression declines in lymphocytes from major depression disorder patients compared with healthy volunteers. The lack of detection of 5-HTT in alcohol- dependence depressed patients suggests that this comorbidity leads to alterations in the expression of this 5-HTT. Finally, our work is the first preliminary study that characterizes 5-HTT expression in the Mexican population, comparing alcohol dependence patients and patients with comorbid alcohol-dependence and major depression.

La Encuesta Nacional de Adicciones 2008 reportó que en México existen 39 millones de personas que consumen alcohol y 4.8 millones presentan dependencia. A nivel mundial varios estudios indican que los pacientes con dependencia al alcohol (40 a 50%) presentan comorbilidad con algún tipo de padecimiento psiquiátrico. La función serotoninérgica es un mediador clave en los estados de ánimo, la impulsividad y las conductas adictivas, entre ellas el consumo de alcohol. Se ha reportado que el consumo excesivo de alcohol etílico disminuye los niveles de serotonina, aumenta la frecuencia de disparo de las neuronas serotoninérgicas en el núcleo del rafé y aumenta los niveles de serotonina en el núcleo accumbens. Las técnicas de biología molecular han permitido identificar factores de riesgo genético y se han seleccionado genes candidatos del sistema serotoninérgico, siendo uno de ellos el gen para el transportador de serotonina (5-HTT), el cual se ha demostrado que se encuentra asociado tanto a una mayor susceptibilidad para el establecimiento de la dependencia al alcohol como a la depresión mayor. Los receptores del sistema serotoninérgico como el 5-HTT, el 5-HT1 y el 5-HT2 se expresan tanto en las células del Sistema Nervioso como en las células del sistema inmunológico, lo que sugiere una similitud funcional de ambos sistemas. Es por ello que las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) han sido utilizadas como un modelo de estudio en los trastornos de dependencia al alcohol y en los psiquiátricos. El objetivo de este estudio fue evaluar los niveles de expresión del gen 5-HTT en células mononucleares de sangre periférica de pacientes con dependencia al alcohol con y sin depresión mayor comórbida. En el Servicio de Consulta Externa del Centro de Ayuda a Alcohólicos y Familiares (CAAF) y en el Centro de Alcohólicos y Drogadictos <<Carrasco>> se evaluaron 70 pacientes durante el periodo comprendido entre febrero y noviembre de 2008. De entre éstos se incluyeron 24 que cumplieron con los criterios diagnósticos para la dependencia al alcohol de acuerdo al DSM-IV por medio de la entrevista estructurada Mini International Neuropsychiatric Interview (MINI) en su versión en español. Cumplieron además con los siguientes criterios de inclusión: a) Que fueran pacientes de nuevo ingreso, b) Mayores de 18 años, c) De sexo femenino o masculino, d) Libres de tratamiento farmacológico tres semanas antes de incluirlos al estudio y e) Firmar carta de consentimiento informado para participar en el estudio. Se incluyeron para comparación voluntarios sanos (n = 12) los cuales fueron seleccionados de la población abierta de la Ciudad de México en el periodo de febrero a noviembre de 2008 y que cumplieran con los siguientes criterios: a) No tener algún diagnóstico psiquiátrico, para lo cual se aplicó el MINI, b) Mayores de 1 8 años, c) Sexo femenino o masculino, d) Libres de tratamiento farmacológico tres semanas antes de incluirlos en el estudio y e) Firmar carta de consentimiento informado para participar en el estudio. Todos los participantes asistieron de 8:00 hs. a 9:00 hs. al laboratorio clínico del Instituto Nacional de Psiquiatría Ramón de la Fuente para la obtención de la muestra de sangre periférica de la cual se obtuvieron las PBMC. Se realizó la extracción del material genético (RNA) de las muestras de PBMC con el reactivo de Trizol®. Aislamiento del RNA y RT-PCR Las muestras de RNA fueron tratadas con DNasa 1 (Invitrogen Life Technologies; CA, USA) para eliminar la contaminación con DNA. La síntesis de cDNA (DNA copia) fue equivalente para todos los casos y se realizó a partir de 1 |Xg de RNA total en un volumen de reacción de 20|lLque contenía 5¡lLde Buffer 5x para Retro-Transcriptasa (Promega; WI, USA), 15 mM de MgCl2, 1.25 |xl 10 mM de la mezcla dNTP (Promega; WI, USA), 200 U M-MLV transcriptasa reversa (Promega; WI, USA) y 1 |xL de 10 mM OligodT (GE, UK). La mezcla de reacción se incubó durante 60 minutos a 42°C en un termociclador (Gradient Thermocycler; Eppendorf, Germany) y se aplicó un ciclo final de 90°C por cinco minutos. La amplificación para el 5-HTT se realizó en un volumen final de reacción de 25 (xL que contenía 2 (xL de cDNA, 1 mM de desoxiribonucleotidos Mix dNTP (Promega; WI, USA), 0.75 mM de MgCl2, 2.5 mM de oligonucleótidos y 1.25 unidades de GoTaq DNA Polimerasa (Promega; WI, USA) con una fase de desnaturalización de 94°C/1 minuto, una fase de alineación de 60°C/1 minuto y una fase de extensión de 72°C/1.30 minutos, durante 35 ciclos. Los oligonucleótidos utilizados para el 5-HTT fueron los siguientes: sentido (5'-GAACTCCTGGAACACTGGCAAC-3') y el antisentido (5'- ATGACAAATCCCGAAACGAAGC-3') con un peso de 534 pares de bases (pb). En el caso del GAPDH las secuencias de oligonucléotidos utilizadas fueron: sentido (5'-TGGGGAAGGTGAAGG TCGGAGTC-3') y antisentido (5 '-GACTTCAACAGCGACACCCACTC-3') con un peso de 874 pb. Los productos de amplificación se separaron en geles de agarosa al 2% y se tiñeron con bromuro de etidio. El análisis se realizó por densitometría computarizada (QuantityOne, Bio-Rad 2008). Los voluntarios sanos presentaron una mayor expresión del gen (0.5012±0.1349) comparados con los pacientes con dependencia al alcohol (0.3150±0.1836), esta diferencia fue significativa (p<0.0036, Mann-Whitney). Los niveles de expresión del gen 5-HTT para los pacientes con dependencia al alcohol con depresión mayor comórbida fueron significativamente reducidos (no detectables). Con la técnica del PCR se determinó que la expresión del gen 5-HTT está disminuida en los dos grupos de pacientes comparados con los voluntarios sanos. Estos resultados coinciden con los estudios que han reportado que la expresión del gen 5-HTT en linfocitos de pacientes con trastorno depresivo mayor es menor comparada con los sujetos sanos. La no detección del mensaje genético del 5-HTT en los pacientes dependientes al alcohol con depresión mayor comórbida sugiere que la comorbilidad puede potenciar la reducción en la expresión del 5-HTT.