Resumen La Altillanura es un ecosistema único de los Llanos colombianos, caracterizado por sabanas bien drenadas y grandes extensiones de bosques ribereños. La Altillanura alberga ricas comunidades poco estudiadas y actualmente amenazadas por la agroindustria a gran escala y no planificada. Además, el número de áreas protegidas públicas en la Altillanura no es suficiente para conservar los hábitats y especies amenazados. Por lo tanto, los esfuerzos de las reservas privadas son cruciales para la conservación de la biodiversidad de la región. Presentamos el primer listado de especies del Tomogrande, reserva natural privada y estación de investigación científica en el municipio de Santa Rosalía, Vichada, Colombia. Después de diez años de investigación en curso, hemos registrado 299 especies de plantas, 189 especies de aves y 47 especies de mamíferos. En comparación con otras reservas naturales privadas en Vichada y con el Parque Nacional Tuparro, el área protegida más grande de la región, Tomogrande hace una contribución sustancial a la conservación de los tres grupos taxonómicos. Abogamos por una mejor planificación del paisaje y que prácticas sostenibles sean obligatorias en la Altillanura, a fin de proteger su biodiversidad y los medios de vida de todos los actores que habitan esta región.

Abstract The Altillanura is a unique ecosystem within the Colombian Llanos, characterized by well-drained savannas and extensive riparian forests. The Altillanura harbors a rich assemblage of species, largely understudied and currently under threat by large-scale and unplanned agribusiness. Moreover, the number of public protected areas in the Colombian Llanos, particularly in the Altillanura, is insufficient to conserve the threatened habitats and species. Therefore, conservation efforts by private reserves are crucial for the protection of the region’s biodiversity. Here we present the first species list of the Tomogrande, a private nature reserve and scientific research field station in the municipality of Santa Rosalía, Vichada, Colombia. After ten years of ongoing research, we have recorded 299 species of plants, 189 species of birds, and 47 species of mammals. Compared to other private nature reserves in Vichada and the Tuparro National Park, the largest protected area in the region, Tomogrande makes a substantial contribution to the conservation of all three taxonomic groups. We advocate that better landscape planning and sustainable practices should become mandatory in the Altillanura to protect its biodiversity and the livelihoods of all stakeholders that inhabit this region.

Se diseñó y caracterizó un sistema reportero para ser capturado por anticuerpos enlazados a placas de ELISA. El sistema fue diseñado con una proteína altamente antigénica y específica, la rK346 de Leishmania infantum. La rK346 fue acoplada a la peroxidasa C de rábano picante (HRPc) de Armoracia rusticana usando glutaraldehido o sulfo-SMCC. La conjugación con glutaraldehido fue realizada en dos pasos. La separación de los conjugados fue llevada a cabo a través de una cromatografía de exclusión molecular sefarosa S-200 (CES), las fracciones fueron analizadas midiendo la actividad HRPc y por placas ELISA sensibilizadas con inmunoglobulina G policlonal anti-rK346, purificada desde suero de conejo. Se obtuvo una población heterogénea de conjugados rK346-HRPc en un rango de pesos moleculares entre 109,7 ± 16,5 a 67,6 ± 10,1 kDa; con estequiometria rK346-HRPc de 1:2; 2:1; 3:1; y 2:2. La conjugación usando sulfo-SMCC se llevó a cabo primero introduciendo grupos -SH en la HRPc usando el reactivo SATA; el antígeno se modificó con sulfo-SMCC. La separación y el análisis de los conjugados se realizaron de forma similar que con el glutaraldehido, resultando en una población heterogénea de conjugados rK346-HRPc con un rango de pesos moleculares entre 150,5 ± 22,6 a 80,0 ± 12,0 kDa; con estequiometria rK346-HRPC de 2:1; 1:2; 2:2 y 1:3, y con una eficiencia de conjugación incrementada en comparación con glutaraldehido. De esta forma, se habilitó al sulfo-SMCC como un reactivo potencial para acoplar antígenos a la HRPc, como método para el diseño de un sistema reportero económico, especifico y fácil de aplicar, útil en la evaluación de individuos en riesgo y/o en estados tempranos o avanzados de leishmaniasis visceral.

It was designed and characterized a reporter system to be captured by antibodies bound to ELISA plates. The system was designed with the rK346 from Leishmania infantum, a highly antigenic and specific protein. The rK346 was coupled to the horseradish peroxidase C (HRPc) from Armoracia rusticana using glutaraldehyde or sulfo-SMCC. Glutaraldehyde conjugation was performed in two steps. Separation of conjugates was carried out using a Sepharose S-200 in size exclusion chromatography (SEC); fractions were analyzed via HRPc activity and through ELISA plates sensitized with polyclonal anti-rK346 IgG purified from rabbit serum. A heterogeneous population of conjugates rK346-HRPc was obtained with molecular weights ranging between 109.7 ± 16.5 to 67.6 ± 10.1 kDa; with rK346-HRPc stoichiometries of 1:2; 2:1; 3:1; and 2:2. Conjugation using sulfo-SMCC was carried out first by introducing -SH groups onto the HRPc using the SATA reagent and the antigen was modified with sulfo-SMCC during 45 min. Separation and analysis of conjugates was performed similarly as with glutaraldehyde, resulting in a heterogeneous population of conjugates rK346-HRPc with molecular weights between 150.5 ± 22.6 to 80.0 ± 12.0 kDa; with rK346-HRPC stoichiometries of 2:1; 1:2; 2:2; and 1:3, with an increased conjugation efficiency in comparison with glutaraldehyde. This enables sulfo-SMCC to be used as a potential reagent for coupling the antigen to the HRPc, to design an economic, specific and easy method to apply as a reporter system, available to assess individuals at risk and/or at early and late stages of visceral leishmaniasis.