RESUMO: Eurytrema coelomaticum são trematódeos que parasitam bovinos, bubalinos, caprinos, ovinos e camelídeos, e de forma acidental, humanos e felinos. O animal acometido geralmente apresenta doença pancreática subclínica, mas os danos causados à saúde e produção animal são subestimados. Atualmente, o praziquantel é o único medicamento comprovadamente eficaz contra este parasita, mas não há formulações contendo esse medicamento disponíveis para ruminantes no mercado brasileiro. O objetivo deste trabalho foi avaliar separadamente a atividade anti-helmíntica in vitro de praziquantel (PZQ) e nitazoxanida (NTZ) frente ao E. coelomaticum pela avaliação de motilidade após três, 12 e 15 horas de incubação e posterior exame histopatológico dos parasitos. Exemplares de E. coelomaticum foram obtidos do pâncreas de bovinos naturalmente infectados, coletados em animais abatidos na cidade de Concórdia, SC, Brasil. Incubados em placas com meio de cultura (n = 60 por grupo), adicionados de 80µg/ml de PZQ (grupo controle positivo) ou 61,5µg/ml de NTZ (grupo tratado) ou UNT (grupo controle sem tratamento). Em 12h de incubação todos os parasitos dos grupos NTZ e PZQ estavam imóveis ou mortos, enquanto no grupo controle negativo 91,67% (55/60) apresentaram motilidade normal após 15h de incubação (P < 0.001). Por exame histopatológico observou-se danos graves em glândula vitelogênica, intestino, parênquima, tegumento e testículo em ambos os grupos tratado e controle positivo. Concluiu-se que PZQ e NTZ apresentaram ação anti-helmíntica in vitro contra o parasito Eurytrema coelomaticum, pois causaram lesões significativas nos órgãos avaliados e diminuíram a motilidade do parasito.

ABSTRACT: Eurytrema coelomaticum are trematodes that parasitize cattle, buffaloes, goats, sheep, and camelids, and, accidentally, humans and cats. The affected animal usually has a subclinical pancreatic disease, but the damage caused to health and animal production is underestimated. Currently, praziquantel is the unique drug proven effective against this parasite, but no formulations containing this drug are available for ruminants in Brazilian market. The objective of the present study was to separately evaluate in vitro anthelmintic activity of praziquantel (PZQ) and nitazoxanide (NTZ) against E. coelomaticum by assessing motility after 3, 12, and, 15 hours of incubation and subsequent histopathological examination of the parasites. E. coelomaticum specimens were obtained from the pancreas of naturally infected cattle, collected from animals slaughtered in the city of Concordia-SC, Brazil. The specimens were incubated in plates with a culture medium (n = 60 per group), with 80µg/ml of PZQ (positive control group), or 61,5µg/ml of NTZ (treated group), or UNT (untreated control). After 12 hours of incubation all parasites of the NTZ and PZQ groups were motionless or dead, while in the negative control group, 91.67% (55/60) presented normal motility after 15 hours of incubation (P < 0.001). Histopathological examination showed severe damage in vitellogenic gland, intestine, parenchyma, integument, and testicle in both treated and positive control groups. It was concluded that PZQ and NTZ showed in vitro anthelmintic action against the parasite Eurytrema coelomaticum, as they caused significant lesions in the evaluated organs and reduced the parasite’s motility.

A erliquiose canina é causada pela bactéria Ehrlichia canis, que desencadeia no hospedeiro uma doença febril e sistêmica, de patogênese pouco conhecida. O presente estudo avaliou a expressão das citocinas TNF-α, IL-10, IFN-γ, em células esplênicas e em leucócitos sanguíneos, durante a fase aguda da erliquiose e após o tratamento com hiclato de doxiciclina, em cães experimentalmente infectados com a amostra E. canis Jaboticabal. Os resultados mostraram expressão significativa de TNF-α 18 dias após a inoculação, reduzindo aproximadante 70% após o tratamento. Houve um único pico de expressão de IL-10 e de IFN-γ entre 18 e 30 dias após a inoculação, respectivamente. Este estudo sugere que o TNF-α participa da patogenia da fase aguda da erliquiose canina, e que o tratamento com hiclato de doxiciclina reduz os efeitos sistêmicos dessa citocina, possivelmente por reduzir ou eliminar a parasitemia.

Canine ehrlichiosis is caused by the bacterium Ehrlichia canis and is characterized by a systemic febrile disease of unknown pathogenesis. This study evaluated the expression of cytokines TNF-α, IL-10, IFN-γ, in splenic cells and blood leukocytes during the acute phase of ehrlichiosis and after treatment with doxycycline hyclate in dogs experimentally infected with the E. canis Jaboticabal strain. The study results showed a significant expression of TNF-α 18 days post-inoculation, reducing by approximately 70% after treatment. There was a unique peak of expression of IL-10 and IFN-γ 18 and 30 days post-inoculation, respectively. This study suggests that TNF-α plays a role in the pathogenesis of the acute phase of canine ehrlichiosis and that treatment with doxycycline hyclate reduces the systemic effects of this cytokine, possibly by reducing or eliminating parasitemia.

O objetivo desse estudo foi comparar a pesquisa de mórulas de Ehrlichia canis e a nPCR em sangue total e em aspirado de baço. Selecionaram-se 40 cães apresentando trombocitopenia associada a sinais e sintomas sugestivos de erliquiose canina. A pesquisa de mórula mostrou que dentre 35 amostras, 17 apresentaram mórulas nas preparações do baço, e duas nos esfregaços feitos a partir da papa leucocitária. O DNA de Ehrlichia canis foi detectado em 29 de 40 amostras de baço e em 30 de 40 no sangue. No presente estudo observou-se que a pesquisa de mórula é mais eficiente nas preparações citológicas obtidas da punção aspirativa do baço e que tanto a nPCR de baço quanto a de sangue foram eficientes no diagnóstico da doença.

The aim of this study was to compare the detection of Ehrlichia canis morulae and DNA by nPCR in whole blood and spleen aspiration. The sample included 40 dogs showing thrombocytopenia associated to clinical signs suggestive of canine ehrlichiosis. Morulae detection showed that in 35 of the dogs studied, 17 had morulae in spleen tissue, and two in buffy coat smears. E. canis DNA was detected in 29/40 blood samples. We verified that morulae detection is more efficient in cytological preparations from spleen aspiration. On the other hand, nPCR on spleen and blood samples were equally efficient for disease diagnosis.