Resumo Os microRNAs (miRNAs) são reconhecidos como biomarcadores do diabetes mellitus tipo 2 (DM2), úteis para a compreensão do metabolismo da doença, e possuem grande potencial como alvos terapêuticos. O aumento da expressão de BDNF e IGF1 está altamente envolvido nos benefícios as vias de insulina e glicose, porém, são regulados negativamente em condições de resistência à insulina, enquanto seu aumento de expressão está correlacionado com a melhora do metabolismo da glicose e da insulina. Estudos sugerem a regulação desses genes por microRNA em vários contextos diferentes, proporcionando uma nova abordagem de investigação para compreender o metabolismo do DM2 e revelar potenciais alvos terapêuticos. No presente estudo, investigamos em diferentes modelos animais (humanos, ratos e camundongos) miRNAs que têm como alvo BDNF e IGF1 em tecido muscular esquelético com condições fisiológicas de DM2. As análises foram realizadas utilizando ferramentas de bioinformática e bancos de dados para predição de miRNA, homologia molecular, validação experimental de interações, expressão na condição fisiológica estudada e interação em rede. Os resultados mostraram três candidatos a miRNAs para IGF1 (miR-29a, miR-29b e miR-29c) e um para BDNF (miR-206). As avaliações experimentais e a busca pela expressão no músculo esquelético de indivíduos com DM2 confirmaram a interação prevista entre miRNA-mRNA para miR-29b e miR-206 através de modelos humanos, ratos e camundongos. Essa interação foi reafirmada em múltiplas análises de rede. Em conclusão, nossos resultados mostram a relação de regulação entre miR-29b e miR-206 com os genes investigados, em diversos tecidos, sugerindo um padrão de inibição. Contudo, esses dados mostram um grande número de possíveis processos fisiológicos de interação para perspectivas biotecnológicas.

Abstract microRNAs (miRNAs) are recognized as diabetes mellitus type 2 (T2DM) biomarkers useful for disease metabolism comprehension and have great potential as therapeutics targets. BDNF and IGF1 increased expression are highly involved in the benefits of insulin and glucose paths, however, they are down-regulated in insulin resistance conditions, while their expression increase is correlated to the improvement of glucose and insulin metabolism. Studies suggest the microRNA regulation of these genes in several different contexts, providing a novel investigation approach for comprehending T2DM metabolism and revealing potential therapeutic targets. In the present study, we investigate in different animal models (human, rat, and mouse) miRNAs that target BDNF and IGF1 in skeletal muscle tissue with T2DM physiological conditions. Bioinformatics tools and databases were used to miRNA prediction, molecular homology, experimental validation of interactions, expression in the studied physiological condition, and network interaction. The findings showed three miRNAs candidates for IGF1(miR-29a, miR-29b, and miR-29c) and one for BDNF (miR-206). The experimental evaluations and the search for the expression in skeletal muscle from T2DM subjects confirmed the predicted interaction between miRNA-mRNA for miR-29b and miR-206 through human, rat, and mouse models. This interaction was reaffirmed in multiple network analyses. In conclusion, our results show the regulation relationship between miR-29b and miR-206 with the investigated genes, in several tissues, suggesting an inhibition pattern. Nevertheless, these data show a large number of possible interaction physiological processes, for future biotechnological prospects.

Resumo O uso de produtos naturais obtidos de plantas, por exemplo, as plantas invasoras, oferece uma variedade de aleloquímicos com potencial fungicida. Tendo isso em vista, objetivou-se avaliar o potencial fungicida de extratos etanólicos de plantas do Cerrado sobre Rhizoctonia solani e Macrophomina phaseolina. Foi preparado o extrato hidroalcoólicos etanólico das 12 plantas apontadas como invasoras no Cerrado brasileiro (Anacardium humile Saint Hill; Baccharis dracunculifolia DC.; Cenchrus echinatus L; Commelina erecta L.; Erigeron bonariensis L.; Digitaria horizontalis Willd.; Digitaria insularis L.; Porophyllum ruderale Jacq. Cass; Richardia brasiliensis Gomes; Sida rhombifolia L.; Turnera ulmifolia L.; Smilax fluminensis Steud) e foi realizado o screening fitoquímico e a determinação de fenóis e flavonoides totais. Para avaliar a atividade antifúngica in vitro, as soluções hidroalcóolicas nas concentrações de 800, 1200, 1600, 2000 e 2400 µL 100 mL-1 foram incorporadas, separadamente, em ágar BDA, e vertidas em placa de Petri, seguido do disco de micélio do fungo. Como controle, foram preparadas duas soluções, uma solução etanólica adicionada ao meio BDA (2400 µg 100 mL-1), e outra somente com meio BDA, a testemunha. Foram vertidas em placas de Petri, seguido um disco de 0,5 cm de diâmetro de micélio do fungo, incubados (23±2 ºC), com fotoperíodo de 24 horas. Dentre os constituintes encontrados nas plantas, 75% estão os compostos fenólicos, 58,3% estão os heterosídeos cardiotônicos, 50% estão os esteroides, 33,3% estão os flavonoides, 16,7% estão as antraquinonas e 8,3% estão os alcaloides, saponinas e açúcares redutores. Das 12 espécies, apenas os extratos de C. erecta e R. brasiliensis foram ativos para M. phaseolina e R. solani. Desse modo, conclui-se que o extrato etanólico de C. erecta apresenta potencial fungicida para controle de doenças causadas por fungos habitantes do solo. Das demais espécies, a A. humille, B. dracuncufolia, D. insulares, C. erecta, D. insulares, P. ruderale e R. brasiliensis possuem potencial fungitóxicos naturais por destacarem nos teores de polifenóis eficientes na redução do crescimento micelial de M. phaseolina e R. solani.

Abstract The use of natural products obtained from plants, for example, invasive plants, offers a variety of allelochemicals with fungicidal potential. With this in perspective, the objective was to evaluate the fungicidal potential of ethanolic extracts of Cerrado plants on Rhizoctonia solani and Macrophomina phaseolina. The ethanolic hydroalcoholic extract of the 12 plants identified as invaders in the Brazilian Cerrado was prepared (Anacardium humile Saint Hill; Baccharis dracunculifolia DC.; Cenchrus echinatus L; Commelina erecta L.; Erigeron bonariensis L.; Digitaria horizontalis Willd.; Digitaria insularis L.; Porophyllum ruderale Jacq. Cass; Richardia brasiliensis Gomes; Sida rhombifolia L.; Turnera ulmifolia L.; Smilax fluminensis Steud)) and phytochemical screening and determination of total phenols and flavonoids were performed. To evaluate the in vitro antifungal activity, the hydroalcoholic solutions at concentrations of 800, 1200, 1600, 2000, and 2400 µL 100 mL-1 were separately incorporated into BDA agar and poured into Petri dishes, followed by the mycelium disk of the fungus. As a control, two solutions were prepared, one ethanolic solution added to the BDA medium (2400 µg 100 mL-1) and the other with BDA medium only. They were poured into Petri dishes, followed by a 0.5 cm diameter disk of mycelium of the fungus, incubated (23±2 ºC), with a 24-hour photoperiod. Among the constituents found in the plants, 75% are phenolic compounds, 58.3% are cardiotonic heterosides, 50% are steroids, 33.3% are flavonoids, 16.7% are anthraquinones, and 8.3% are alkaloids, saponins, and reducing sugars. Out of the 12 species, only the extracts of C. erecta and R. brasiliensis were active for M. phaseolina and R. solani. Thus, it is concluded that the ethanolic extract of C. erecta has the fungicidal potential to control diseases caused by fungi that are soil inhabitants. Of the other species, A. humille, B. dracuncufolia, D. insulares, C. erecta, D. insulares, P. ruderale, and R. brasiliensis have natural fungitoxic potential because they stand out in the content of polyphenols efficient in reducing the mycelial growth of M. phaseolina and R. solani.

Resumo No atual contexto de patógenos fúngicos resistentes emergentes tais como Candida albicans e Candida parapsilosis, a descoberta de novos agentes antifúngicos é uma questão urgente. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar o potencial antifúngico da 2-cloro-N-fenilacetamida contra cepas clínicas de C. albicans e C. parapsilosis resistentes a fluconazol. A atividade antifúngica da substância foi avaliada in vitro através da determinação da concentração inibitória mínima (CIM), concentração fungicida mínima (CFM), ruptura e inibição da formação de biofilme, ensaios de sorbitol e ergosterol, e associação entre esta molécula e antifúngicos comuns, anfotericina B e fluconazol. O produto teste inibiu todas as cepas de C. albicans e C. parapsilosis, com uma CIM variando de 128 a 256 µg.mL-1, e uma CFM de 512-1,024 µg.mL-1. Também inibiu até 92% da formação de biofilme e causou a ruptura de até 87% de biofilme pré-formado. A 2-cloro-N-fenilacetamida não promoveu atividade antifúngica pela ligação ao ergosterol da membrana celular fúngica, tampouco danificou a parede celular. Antagonismo foi observado ao combinar esta substância com anfotericina B e fluconazol. A substância exibiu atividade antifúngica significativa ao inibir tanto as células planctônicas quanto o biofilme das cepas resistentes ao fluconazol. Sua combinação com outros antifúngicos deve ser evitada e seu mecanismo de ação deve ser estabelecido.

Abstract In the current context of emerging drug-resistant fungal pathogens such as Candida albicans and Candida parapsilosis, discovery of new antifungal agents is an urgent matter. This research aimed to evaluate the antifungal potential of 2-chloro-N-phenylacetamide against fluconazole-resistant clinical strains of C. albicans and C. parapsilosis. The antifungal activity of 2-chloro-N-phenylacetamide was evaluated in vitro by the determination of the minimum inhibitory concentration (MIC), minimum fungicidal concentration (MFC), inhibition of biofilm formation and its rupture, sorbitol and ergosterol assays, and association between this molecule and common antifungal drugs, amphotericin B and fluconazole. The test product inhibited all strains of C. albicans and C. parapsilosis, with a MIC ranging from 128 to 256 µg.mL-1, and a MFC of 512-1,024 µg.mL-1. It also inhibited up to 92% of biofilm formation and rupture of up to 87% of preformed biofilm. 2-chloro-N-phenylacetamide did not promote antifungal activity through binding to cellular membrane ergosterol nor it damages the fungal cell wall. Antagonism was observed when combining this substance with amphotericin B and fluconazole. The substance exhibited significant antifungal activity by inhibiting both planktonic cells and biofilm of fluconazole-resistant strains. Its combination with other antifungals should be avoided and its mechanism of action remains to be established.

RESUMO O uso de bioestimulantes no milho segunda safra (Zea mays) pode promover maior atividade fisiológica das plantas, resultando em maior produtividade de grãos. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar as características de crescimento e produtividade do milho segunda safra sob aplicação de fitormônios e nicotinamida. O delineamento estatístico utilizado foi em blocos casualizados dispostos em esquema fatorial com 2 doses de fitohormônios (0 e 500 mL ha-1) × 5 concentrações de nicotinamida (0, 200, 400, 600 e 800 mg L-1) com quatro repetições. O uso dos dois bioestimulantes favoreceu todas as variáveis avaliadas para a cultura do milho. O uso isolado de fitormônios e nicotinamida promoveu produtividades de grãos de 6.089,6 e 6.242,5 kg ha-1, representando respectivamente, ganhos de 6,0 e 11,6%, em relação à testemunha. A aplicação de 800 mg L-1 de nicotinamida proporcionou maior produtividade de grãos de milho. O uso de fitohormônios e nicotinamida, isolados ou associados, foram favoráveis às características de crescimento e produtividade do milho segunda safra. Houve efeito sinérgico de fitormônios e nicotinamida para altura de inserção da primeira espiga e o número de fileiras por espiga.

ABSTRACT The use of biostimulants in second-crop maize (Zea mays) can promote higher physiological activity in plants, resulting in higher grain yield. This study aimed to evaluate the effects of phytohormones and nicotinamide on growth and yield traits of second-crop maize. The statistical design used was a randomized block design arranged in a factorial scheme with two doses of phytohormones (0 and 500 mL ha-1) × five concentrations of nicotinamide (0, 200, 400, 600, and 800 mg L-1) with four replications. The use of biostimulants favored all variables evaluated for the maize crop. The isolated use of phytohormones and nicotinamide promoted grain yields of 6089.6 and 6242.5 kg ha-1, respectively, representing gains of 6.0 and 11.6%, respectively, compared with the control. The application of 800 mg L-1 nicotinamide resulted in the highest maize grain yield. The use of phytohormones and nicotinamide, isolated or associated, was favorable for the growth characteristics and grain yield of second-crop maize. A synergistic effect was noted between phytohormones and nicotinamide on the first ear insertion height and number of rows per ear.

This work describes a green synthesis, the characterization, and biological evaluation of silver nanoparticles (AgNPs). The AgNPs suspension was synthesized using aqueous leaf extract of Eucalyptus grandis, which presented a characteristic band at 407 nm in the UV-Vis spectrum. The AgNPs presented a spherical shape and size of 9.7 ± 0.3 nm. The nanoparticles were stable over a month, indicating that E. grandis’ extract is suitable for their preparation and stabilization. The X-ray analysis showed that the crystallinity of AgNPs corresponded to the centered face phase of silver. The antibacterial and leishmanicidal activities of AgNPs were evaluated. The AgNPs presented antibacterial activity on the Gram-negative bacteria Escherichia coli at 53.9 µg mL-1. The leishmanicidal activity evaluation against promastigote forms of Leishmania infantum, Leishmania amazonensis, and Leishmania braziliensis showed that the biological response is dependent on the volume of AgNP suspension. It was demonstrated that L. infantum was more sensitive to the nanoparticle’s treatment than L. amazonensis and L. braziliensis. The treatment of L infantum promastigotes with 150 µL of AgNP suspension reduced parasite growth by 67.9%, a result which was similar to the treatment with 1 (66.7%) or 2 µL (70.6%) of amphotericin B used as a positive control.

RESUMO Os sistemas de produção de suínos contribuem com emissões de gases de efeito estufa (dióxido de carbono - CO2, óxido nitroso - N2O e metano - CH4) e amônia - NH3 para a atmosfera. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar metodologias para determinação das emissões de amônia e gases de efeito estufa em uma unidade de produção comercial de suínos durante a fase de terminação, que possui ventilação natural. Foram medidas as concentrações de gases no ar pelo analisador de gases (INNOVA 1412) e foi calculada a vazão de emissões considerando a taxa de ventilação e as diferenças de concentração de gases entre o interior e o exterior da instalação. Os resultados mostraram que a vazão de emissão obtida pela metodologia simplificada em [g suíno por hora] foi: 2,689 para CO2, 0,30 para N2O, 4,39 para CH4, 13,55 para NH3 e 3,273 para vapor d’água. A vazão obtida para a metodologia contínua em [g suíno por hora] foi de 574 para CO2, 0,67 para N2O, 19,50 para CH4, 5,84 para NH3 e 7,2 para vapor d’água. A metodologia simplificada foi altamente precisa para estimar as emissões de GEE em sistemas de produção de suínos com ventilação natural.

ABSTRACT Swine production systems contribute to emission of greenhouse gases (CO2, N2O, and CH4) and ammonia (NH3) into the atmosphere. Therefore, the objective of this study was to evaluate methods for determining the emissions of ammonia and greenhouse gases (GHG) in a commercial swine production unit with natural ventilation during the finishing phase. The concentrations of gases in the air were measured using a gas analyzer (INNOVA 1412), and the flow emission was calculated by considering the ventilation rate and the differences in gas concentration between the interior and exterior of the installation. The results showed that the emission flow obtained via the simplified method in [g per swine h-1] was 2.689, 0.30, 4.39, 13.55, and 3.273 for CO2, N2O, CH4, NH3, and water vapor, respectively. The flow obtained using the continuous method in [g per swine h-1] was 574, 0.67, 19.50, 5.84, and 7.2 for CO2, N2O, CH4, NH3, and water vapor, respectively. The proposed simplified method was highly accurate for estimating GHG emissions from swine production systems with natural ventilation.

This study aims to analyze Tetragonisca angustula honey from southwestern Bahia for its physicochemical characteristics, phenolic compounds and glioma cell inhibitory effect, in samples from different periods of the year, dry (DP) and rainy (RP) period. The analyses showed that samples obtained in the DP and RP are statistically different for the physicochemical profile (p < 0.05). DP honey has a darker color, greater acidity, content of reducing sugars and ash and lower moisture, when compared to RP. The content of total phenolics and flavonoids was determined spectrometrically, using the Folin-Ciocalteu method and reaction with aluminum chloride, respectively, and there was no statistical difference between the samples (p > 0.05). For the extraction of phenolic compounds, dispersive liquid-liquid microextraction was used, besides analysis by high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection (HPLC-UV), which identified chlorogenic acid and quantified caffeic acid and rutin (1.7723 and 0.9384 μg 100 mg-1 honey, respectively). Glioma cell inhibition effect lines were observed for DP at concentrations 1000 ng mL-1 of honey. Principal component analysis (PCA) proposes the physicochemical parameters as the main distinguishing factors between the DP and RP samples. DP samples showed similarity for the parameters ash content, acidity and reducing sugars and the samples of the RP had consonance between pH and moisture.

Resumo As bactérias podem ser a causa inicial de determinadas patologias como também um agente secundário responsável pelo desenvolvimento de complicações como as infecções das lesões por pressão. As lesões por pressão configuram um problema de saúde persistente, principalmente em pacientes imunocomprometidos, e associadas a infecção por microrganismos oportunistas com resistência antimicrobiana, como por exemplo a Klebisiella pneumoniae, ressaltam a necessidade do desenvolvimento de novas abordagens antimicrobianas. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antibacteriana e antiaderente do óleo essencial de Origanum vulgareL. (orégano) contra cepas da Klebisiella pneumoniae, bem como o efeito da sua associação com antimicrobianos sintéticos. Para isso foram realizadas as análises da Concentração Mínima Inibitória (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) em placas de micro diluição. O ensaio da Concentração Mínima de Aderência (CIMA), com tubos de ensaio. Como também, o estudo de associação através do método de disco de infusão contendo ampicilina, gentamicina, ciprofloxacino e ceftriaxona. Assim sendo, foi possível obter que o óleo essencial de orégano apresenta atividade antimicrobiana e bactericida, com CIM variando entre 128μg/mL e 256 μg/mL e CBM entre 256 μg/mL e 512 μg/mL, sobre as cepas de K. pneumoniae testadas. Quando utilizado em associação com a ampicilina e gentamicina, o óleo essencial de orégano demonstrou efeito sinérgico para algumas cepas. Portanto, observa-se que o óleo essencial testado pode atuar como um promissor antibacteriano no tratamento de doenças causadas por K. pneumoniae.

Abstract Bacteria may be the initial cause of certain pathologies as well as a secondary agent responsible for the development of complications such as pressure ulcer infections. Pressure ulcers are a persistent health problem, especially in immunocompromised patients, and associated with infection by opportunistic microorganisms with antimicrobial resistance, such as Klebsiella pneumoniae, highlight the need for the development of new antimicrobial approaches. Thus, the aim of this study was to evaluate the antibacterial and anti-adherent activity of Origanum vulgare L. (oregano) essential oil against Klebsiella pneumoniae strains, as well as the effect of its association with synthetic antimicrobials. To this end, the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) analyses were performed on microdilution plates. The assay of the Minimum Inhibitory Adherence Concentration (MIAC), with test tubes. As well as, the association study through the infusion disc method containing ampicillin (AMP), gentamicin (GEN), ciprofloxacin (CIP) and ceftriaxone (CEF). Therefore, it was possible to obtain that the essential oil of oregano presents antimicrobial and bactericidal activity, with MIC ranging between 128μg/mL and 256 μg/mL and MBC between 256 μg/mL and 512 μg/mL, on the tested K. pneumoniae strains. When used in association with ampicillin and gentamicin, oregano essential oil showed synergistic effect for some strains. Therefore, it is observed that the tested essential oil can act as a promising antibacterial in the treatment of diseases caused by K. pneumoniae.

Resumo O presente estudo procurou avaliar a atividade antibacteriana do trans-anetol contra cepas de Enterobacter cloacae e Enterococcus faecalis de origem alimentar. O estudo foi realizado utilizando métodos de Concentração Inibitória Mínima (CIM), e Concentração Bactericida Mínima (CBM), além disso, foi utilizada a técnica de difusão de disco para avaliar a associação do trans-anetol com antimicrobianos. O teste de Concentração Inibitória Mínima de Aderência (CIMA) também foi realizado. Os resultados revelaram que o trans-anetol não apresentou atividade antibacteriana em nenhuma das concentrações utilizadas contra as cepas de E. cloacae testadas. No entanto, o trans-anetol apresentou efeito antibacteriano contra cinco das seis cepas bacterianas de E. faecalis testadas, com valores de CIM variando de 500 μg/mL a 1000 μg/mL. Além disso, ao analisar os resultados da CBM contra E. faecalis, observa-se que o composto apresentou valores variando de 500 μg/mL a 1000 μg/mL. Quanto às associações, observou-se que o trans-anetol quando combinado com os antimicrobianos ampicilina, gentamicina, ciprofloxacino, e ceftriaxona apresentou efeito sinérgico contra a maioria das cepas de E. faecalis. No entanto, tanto o trans-anetol quanto o controle clorexidina (0,12%) não apresentaram efeito antibiofilme contra a cepa de E. faecalis. Em suma, o trans-anetol apresentou potencial antibacteriano contra cepas de E. faecalis de origem alimentar, podendo, mediante estudos mais aprofundados, ser utilizado isoladamente ou em associação com antimicrobianos sintéticos para combater infecções causadas por esta bactéria.

Abstract The present study sought to evaluate the antibacterial activity of trans-anethole against food-borne strains of Enterobacter cloacae and Enterococcus faecalis. The study was performed using Minimum Inhibitory Concentration (MIC), and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) methods, in addition, disc diffusion technique was used to evaluate the association of trans-anethole with synthetic antimicrobials. Minimum Inhibitory Concentration for Adherence (MICA) testing was also performed. The results revealed that trans-anethole presents no antibacterial activity at any of the concentrations used against the E. cloacae strains tested. However, trans-anethole presented antibacterial effect against five of the six E. faecalis bacterial strains tested, with MIC values ranging from 500 μg/mL to 1000 μg/mL. Further, when analyzing the MBC results against E. faecalis, it was observed that the compound presented values ranging from 500 μg/mL to 1000 μg/mL. As for the associations, it was observed that trans-anethole when combined with the antimicrobials ampicillin, gentamicin, ciprofloxacin, and ceftriaxone presented synergistic effect against most strains of E. faecalis. However, both trans-anethole and the control chlorhexidine (0.12%) presented no antibiofilm effects against strains of E. faecalis. In short, trans-anethole presented potential antibacterial against E. faecalis strains of food origin, and may upon further study, it may be used alone or in association with synthetic antimicrobials to combat infections caused by this bacterium.

RESUMO: No gênero Borrelia (Spirochaetes) encontram-se dois grupos de agentes responsáveis por duas doenças zoonóticas, que têm roedores como reservatórios e acometem humanos: o grupo de Lyme, transmitido por carrapatos ixodídeos, e a febre recorrente, que pode ser transmitida por carrapatos argasídeos ou piolhos. Poucas são as informações sobre epidemiologia e agentes patogênicos que acometem animais, podendo representar uma riquíssima fonte de informações, principalmente em locais nunca estudados, pois podem ser bioindicadores de qualidade do ambiente e saúde. Desta forma, no presente estudo foi realizada a pesquisa de Borrelia spp. em amostras de sangue de mamíferos silvestres e domésticos, assim como de carrapatos, do Parque Nacional do Catimbau, Pernambuco. Foi realizada a captura e colheita sanguínea de 77 animais pertencentes às famílias Didelphidae (45), Echimyidae (21), Cricetidae (7), Caviidae (2) e Dasypodidae (2). Adicionalmente, amostras de sangue foram obtidas de 120 ovinos, 119 caprinos, 70 cães e 47 bovinos. Foram coletados 286 carrapatos no ambiente, identificados como Ornithodoros cf. tabajara (188) e Ornithodoros rietcorreai (98); além de carrapatos coletados nos animais: Ornithodoros spp. em Thrichomys laurentius (4 espécimes) e Monodelphis domestica (1); O. rietcorreai em Didelphis albiventris (2) e T. laurentius (1); Amblyomma parvum em T. laurentius (4); Rhipicephalus sanguineus (sensu lato) em cães (121) e R. microplus em bovinos (47). Todas as amostras sanguíneas, 120 carrapatos de vida livre, sendo 46 O. rietcorreai e 74 O. cf. tabajara, e 12 R. sanguineus s. l. foram submetidos à extração de DNA para realização da reação em cadeia da polimerase (nested-PCR), visando amplificação de um fragmento do gene flaB presente em todas as espécies de Borrelia. Não houve amplificação nas amostras sanguíneas dos animais, no entanto em um espécime de O. cf. tabajara de vida livre (1,3%) foi detectado o DNA de Borrelia. A não detecção nos mamíferos pode estar relacionada com a ausência de infecção ou à baixa concentração do agente nos hospedeiros. A baixa prevalência encontrada nos carrapatos pode ser justificada devido à baixa infecção nos vetores. Novos estudos focando na determinação de anticorpos, assim como no sequenciamento e isolamento de Borrelia devem ser estimulados para uma melhor compreensão da epidemiologia do agente na região.

ABSTRACT: Spirochetes in the genus Borrelia (Spirochaetes) are the etiological agents of two zoonotic diseases that have rodents as reservoirs: the Lyme disease, transmitted by ixodid ticks (Ixodidae), and tick-borne relapsing fever, which is transmitted mostly by argasid ticks (Argasidae). The information on the epidemiology of pathogens that affect animals is scarce, especially in places that have been barely studied, such as the Caatinga biome. Thus, in the present study, we aimed to detect DNA of Borrelia in the blood of wild and domestic mammals, as well as in ticks collected in the Catimbau National Park, State of Pernambuco, Northeast Brazil. Blood was collected from 77 captured wild animals belonging to Didelphidae (45), Echimyidae (21), Cricetidae (7), Caviidae (2), and Dasypodidae (2) families. Additionally, blood samples from 120 sheep, 119 goats, 70 dogs, and 47 cattle were obtained. A total of 286 ticks were collected in the environment and identified as Ornithodoros cf. tabajara (188) and Ornithodoros rietcorreai (98); in addition, larvae of Ornithodoros spp. were collected on Thrichomys laurentius (4 specimens) and Monodelphis domestica (1); larvae of O. rietcorreai on Didelphis albiventris (2) and T. laurentius (1); Amblyomma parvum on T. laurentius (4); Rhipicephalus sanguineus (sensu lato) on dogs (121) and Rhipicephalus microplus on cattle (47). All blood samples, 120 free-living ticks, 46 O. rietcorreai and 74 O. cf. tabajara, and 12 R. sanguineus s.l. were submitted to DNA extraction to perform a polymerase chain reaction (nested PCR), aiming at amplifying a fragment of the flaB gene present in all species of Borrelia. Only one free-living specimen of O. cf. tabajara (1.3%) was positive. Negative detections in mammals may be related to the absence of infection or the low concentration of the spirochetes in the hosts. The low prevalence of Borrelia found in ticks can be explained by the low infection rates that these spirochetes depict in their vectors. New studies focusing on the detection of antibodies, as well as on the sequencing and isolating Borrelia spp. should be encouraged for a better understanding of the epidemiology of these bacterial agents in the region.

Resumo O óleo essencial de citronela (Cymbopogon winterianus) possui diversas atividades biológicas, entre elas a ação repelente a insetos. Alguns estudos mostraram que os ésteres do ácido cinâmico podem ser aplicados como pesticidas naturais, inseticidas e fungicidas. Nesse contexto, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a produção de ésteres a partir do óleo essencial de citronela com ácido cinâmico via esterificação enzimática. Além disso, foi investigada a toxicidade do óleo essencial antes e após a esterificação contra Artemia salina e a ação larvicida sobre Aedes aegypti. Os ésteres foram produzidos utilizando ácido cinâmico como agente acilante e óleo essencial de citronela (3: 1) em heptano e 15% em peso da enzima NS 88011 como biocatalisadores, a 70 ° C e 150 rpm. As taxas de conversão de cinamatos de citronelil e geranil foram 58,7 e 69,0% para NS 88011, respectivamente. Para a toxicidade sobre Artemia salina foram obtidos CL50 de 5,29 μg mL-1 para o óleo essencial e 4,36 μg mL-1 para os óleos esterificados com NS 88011. Na atividade inseticida contra larvas de Aedes aegypti, obteve-se CL50 de 111,84 μg mL-1 para o óleo essencial de citronela e 86,30 μg mL-1 para os óleos esterificados com a enzima NS 88011, indicando alta toxicidade dos ésteres. Os resultados demonstraram que as amostras avaliadas apresentam potencial de aplicação como bioinseticida.

Abstract The essential oil of citronella (Cymbopogon winterianus) has several biological activities, among them the insect repellent action. Some studies showed that cinnamic acid esters can be applied as natural pesticides, insecticides and fungicides. In this context, the objective of the present work was to evaluate the production of esters from citronella essential oil with cinnamic acid via enzymatic esterification. Besides, the essential oil toxicity before and after esterification against Artemia salina and larvicidal action on Aedes aegypti was investigated. Esters were produced using cinnamic acid as the acylating agent and citronella essential oil (3:1) in heptane and 15 wt% NS 88011 enzyme as biocatalysts, at 70 °C and 150 rpm. Conversion rates of citronellyl and geranyl cinnamates were 58.7 and 69.0% for NS 88011, respectively. For the toxicity to Artemia salina LC50 results of 5.29 μg mL-1 were obtained for the essential oil and 4.36 μg mL-1 for the esterified oils obtained with NS 88011. In the insecticidal activity against Aedes aegypti larvae, was obtained LC50 of 111.84 μg mL-1 for the essential oil of citronella and 86.30 μg mL-1 for the esterified oils obtained with the enzyme NS 88011, indicating high toxicity of the esters. The results demonstrated that the evaluated samples present potential of application as bioinsecticide.

Abstract Paratanaisia bragai is a digenetic trematode that reaches sexual maturity in the kidney collecting ducts of domestic and wild birds, while the snails Subulina octona and Leptinaria unilamellata serve as its intermediate hosts in Brazil. The present study analyzed the morphology and morphometry of P. bragai. Adult specimens of the parasite were collected from naturally infected Columba livia kidneys, fixed and prepared for observation via bright field and differential interference contrast light microscopy and scanning electron microscopy. The parasite has an elongated and flattened body, with a subterminal oral sucker located at the anterior end of the body, as observed by all techniques used. Staining the parasite with hematoxylin-eosin enabled observation of the pharynx, located posteriorly to the oral sucker, the vitelline glands, which are extra-cecal and extend anteriorly to the pre-ovarian region and later to the median region of the body, and intestinal caeca parallel to the vitelline glands. The presence and functionality of the acetabulum are controversial points in the literature, but it was observed in all specimens analyzed by scanning electron microscopy, with a major diameter of 38.36 ± 6.96 (28.77 – 45.39) and minor diameter of 31.59 ± 7.04 (21.75 - 38.16). Close to the acetabulum, scales were observed in the integument of the parasite. Scales with (1 - 5) blade divisions were identified. In the genital pore, it was possible to see the everted cirrus with rosette shape. The excretory pore (first morphometric record) is dorsal and subterminal, with major diameter of 12.27 ± 9.16 (5.79 - 18.75) and minor diameter of 3.95 ± 1.49 (2.89 - 5.00).

Resumo Paratanaisia bragai é um trematódeo digenético que atinge a maturidade sexual nos ductos coletores de aves domésticas e silvestres, enquanto os moluscos Subulina octona e Leptinaria unilamellata atuam como seus hospedeiros intermediários no Brasil. O presente estudo analisou a morfologia e morfometria de P. bragai. Amostras adultas do parasito foram coletadas de rins de Columba livia naturalmente infectada, fixadas e preparadas para observação na microscopia de campo claro e microscopia de luz de contraste de interferência diferencial e microscopia eletrônica de varredura. O parasite possui corpo alongado e achatado, com uma ventosa oral subterminal localizada na extremidade anterior do corpo, conforme observado por todas as técnicas utilizadas. A coloração do parasito com hematoxilina-eosina permitiu observar a faringe, localizada posteriormente à ventosa oral, as glândulas vitelogênicas, que são extracecais e estendem-se anteriormente à região pré-ovariana e posteriormente à região mediana do corpo, e os cecos intestinais paralelos às glândulas vitelinas. A presença e funcionalidade do acetábulo são pontos controversos na literatura, mas foi observado em todos os espécimes analisados por microscopia eletrônica de varredura, com diâmetro maior de 38.36 ± 6.96 (28.77 – 45.39) e diâmetro menor de 31.59 ± 7,04 (21.75 – 38.16). Próximo ao acetábulo foram observadas escamas no tegumento do parasito. Escamas com (1 - 5) divisões de lâmina foram identificadas. No poro genital, foi possível visualizar o cirro evertido com formato de roseta. O poro excretor (primeiro registro morfométrico) é dorsal e subterminal, com diâmetro maior de 12.27 ± 9.16 (5.79 – 18.75) e diâmetro menor de 3.95 ± 1.49 (2.89 – 5.00).

Resumo A onicomicose é a doença mais comum que afeta a unidade ungueal e representa pelo menos 50% de todas as doenças ungueais. Além disso, a Candida albicans é responsável por aproximadamente 70% das onicomicoses causadas por leveduras. Nesse estudo, foi investigado o efeito antifúngico dos enantiômeros (R) e (S)-citronelal, bem como seu mecanismo de ação preditivo sobre C. albicans de onicomicoses resistentes ao voriconazol. Para este propósito, foram aplicadas técnicas in vitro de microdiluição em caldo e docking molecular de forma preditiva e complementar para os mecanismos de ação. Os principais resultados deste estudo indicam que C. albicans foi resistente ao voriconazol e sensível aos enantiômeros (R) e (S)-citronelal na dose de 256 e 32 µg/mL respectivamente. Além disso, houve aumento da concentração inibitória mínima (CIM) dos enantiômeros na presença do sorbitol e do ergosterol, indicando que estas moléculas possivelmente afetem a integridade da parede e da membrana celular de C. albicans. O docking molecular com proteínas chave da biossíntese e manutenção da parede celular e da membrana plasmática fúngica, demonstraram a possibilidade do (R) e (S)-citronelal interagir com duas importantes enzimas: 1,3-β-glucan sintase e lanosterol 14α-demetilase. Portanto, os achados desse estudo indicam que os enantiômeros (R) e (S)-citronelal são fungicidas sobre C. albicans de onicomicoses e provavelmente essas substâncias causem danos a parede e a membrana celular desses microrganismos possivelmente por interagir com as enzimas da biossíntese destas estruturas fúngicas.

Abstract Onychomycosis is the most common disease affecting the nail unit and accounts for at least 50% of all nail diseases. In addition, Candida albicans is responsible for approximately 70% of onychomycoses caused by yeasts. This study investigated the antifungal effect of (R) and (S)-citronellal enantiomers, as well as its predictive mechanism of action on C. albicans from voriconazole-resistant onychomycoses. For this purpose, in vitro broth microdilution and molecular docking techniques were applied in a predictive and complementary manner to the mechanisms of action. The main results of this study indicate that C. albicans was resistant to voriconazole and sensitive to the enantiomers (R) and (S)-citronellal at a dose of 256 and 32 µg/mL respectively. In addition, there was an increase in the minimum inhibitory concentration (MIC) of the enantiomers in the presence of sorbitol and ergosterol, indicating that these molecules possibly affect the integrity of the cell wall and cell membrane of C. albicans. Molecular docking with key biosynthesis proteins and maintenance of the fungal cell wall and plasma membrane demonstrated the possibility of (R) and (S)-citronellal interacting with two important enzymes: 1,3-β-glucan synthase and lanosterol 14α-demethylase. Therefore, the findings of this study indicate that the (R) and (S)-citronellal enantiomers are fungicidal on C. albicans from onychomycoses and probably these substances cause damage to the cell wall and cell membrane of these micro-organisms possibly by interacting with enzymes in the biosynthesis of these fungal structures.

Abstract Healthcare workers present an increased risk of contagion for the SARS-CoV-2 virus due to their labor exposure. Here, we describe the clinical, laboratory, and immunological characteristics of healthcare workers, before vaccine application, exposed to SARS-CoV-2-infected patients. We collected sociodemographic, clinical, and laboratory information from 50 professionals who worked during the COVID-19 pandemic at the Clinical Hospital of the Northwest in Brazil. The results showed that most workers are women, over 50 years old, and worked as nursing technicians. Approximately 56% of workers were positive for a previous infection by RT-PCR and/or anti-SARS-CoV-2-immunoglobulin tests. Increased levels of hematocrit, neutrophils, NK lymphocytes, and fibrinogen, were found in positive healthcare workers, suggesting a light inflammatory status. The immunological findings showed an increase in IL-17 production and a Th2/Th17/Th22 profile followed by high serology for anti-SARS-CoV-2 IgM and IgG. Those data reveal the importance of studies with healthcare workers to investigate if the continuous exposition to the virus may result in chronic activation of the immune system and/or pulmonary inflammation in this target group.