Abstract Leishmaniasis is an anthropozoonosis with vector transmission, and knowledge regarding the occurrence of this parasitosis in sentinels can contribute to infection and disease control measures in humans. The objectives of this study were to evaluate the occurrence of Leishmania exposure and infection in dogs from urban and rural areas in the North Pioneer Mesoregion of the state of Paraná, to evaluate possible risk factors, and to analyze the statistical agreement between the serological techniques that were used. Using a convenience sampling, serum and whole blood samples were collected to perform serological and molecular assays, respectively. The enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect fluorescent antibody test (IFAT) identified 29/204 (14.2%) and 20/204 (9.8%) seropositive dogs, respectively. Five dogs (2.4%) were seropositive for both serological tests, and four dogs presented high titers in the IFAT. None of the samples tested positive for Leishmania spp. DNA according to polymerase chain reaction analysis. No factors were significantly associated with infection. Leishmania parasites circulate in urban and rural dogs in the North Pioneer Mesoregion of the state of Paraná. Despite the absence of clinical cases, seropositive animals with high antibody titers should serve as a warning to the local population that should be properly informed regarding the prevention.

Resumo A Leishmaniose é uma antropozoonose e sua transmissão ocorre através da picada de flebotomíneos de diferentes gêneros, dependendo da localização geográfica. O conhecimento sobre a ocorrência desta parasitose nos reservatórios pode colaborar com medidas de controle da infecção e doença nos humanos. Os objetivos deste estudo foram: avaliar a ocorrência da infecção por Leishmania, em cães de áreas urbanas e rurais, na região da mesorregião Norte Pioneiro do Paraná; avaliar possíveis fatores de risco à infecção e analisar a concordância estatística entre as técnicas sorológicas utilizadas. Para tanto, foram colhidas 204 amostras de soro e sangue total de cães escolhidos aleatoriamente de municípios da mesorregião Norte Pioneiro do Paraná para a detecção de anticorpos anti-Leishmania spp., pelo ensaio imunoenzimático (ELISA) e reação de imunofluorescência indireta (RIFI), e para a detecção de DNA de Leishmania spp. pela reação em cadeia pela polimerase (PCR). Dos 204 cães testados, 29 (14,2%) e 20 (9,8%) foram soropositivos pelo ELISA e RIFI, respectivamente. Cinco cães (2,4%) foram soropositivos em ambos os testes sorológicos. Não foram observados fatores abióticos e bióticos associados à infecção. A concordância entre as técnicas diagnósticas calculada por Kappa foi de 0,34. Conclui-se que, apesar da baixa ocorrência de positividade para leishmaniose e da ausência de casos sintomáticos, os resultados deste estudo devem ser um alerta para a população local por se tratar de uma importante zoonose e, portanto, medidas de prevenção e controle não devem ser negligenciadas.

Resumo Trichinella spp. é um parasito zoonótico de distribuição mundial detectado em carnívoros e onívoros de sangue quente e humanos. Até o momento, o Brasil é considerado pela Organização Mundial de Saúde Animal livre do ciclo doméstico da doença, enquanto o ciclo silvestre do parasito tem status de infecção em áreas limitadas. No entanto, em países vizinhos como a Argentina, larvas do parasito foram encontradas na fauna silvestre. O presente estudo teve como objetivo determinar a ocorrência de Trichinella spp. em animais silvestres atropelados no Paraná, Brasil. Amostras biológicas de 71 animais silvestres – 29 Didelphis albiventris, 11 Nasua-nasua, dez Cerdocyon thous, sete Dasypus novemcinctus, seis Leopardus gattulus, seis Sphiggurus spinosus e dois Puma concolor– coletadas de novembro de 2016 a novembro de 2021 foram submetidas à digestão artificial, seguindo a metodologia descrita do REGULAMENTO (CE) Nº2075/2005. Não foram encontradas larvas de Trichinella spp. nas carcaças dos animais selvagens atropelados. No entanto, considerando o amplo espectro de possíveis reservatórios que podem atuar como elo entre os ciclos silvestre e doméstico e considerando a condição atual da triquinelose silvestre no Brasil em áreas limitadas, o monitoramento frequente da fauna silvestre é necessário.

Abstract Trichinella spp. are zoonotic parasites that are widely distributed in warm-blooded carnivores and omnivores, including humans. Until the present moment, Brazil has been considered by World Animal Health Organization free from the domestic cycle of trichinellosis, whereas the parasite’s sylvatic cycle has the status of infection in limited zones. However, neighboring countries such as Argentina have reports of parasite larvae in the wild fauna. The present study aimed to determine the occurrence of Trichinella spp. in road-killed wild animals in Paraná, Brazil. Biological samples from 71 wild animals—29 Didelphis albiventris, 11 Nasua nasua, ten Cerdocyon thous, seven Dasypus novemcinctus, six Leopardus guttulus, six Sphiggurus spinosus and two Puma concolor—collected from November 2016 to November 2021 were subjected to artificial digestion, following the methodology described in the REGULATION (EC) No. 2075/2005. No Trichinella spp. larvae were detected in the carcasses of the road-killed wild animals. However, considering the wide spectrum of possible reservoirs that could act as a link between the sylvatic and domestic cycles and considering the current Brazilian status of sylvatic trichinellosis in limited zones, frequent monitoring of wild fauna remains necessary.

Resumo O objetivo deste trabalho foi identificar os parasitas intestinais de felinos silvestres mortos em estradas nas regiões Norte Central e Norte, Paraná, sul do Brasil. Os animais foram monitorados por amostragem de transectos previamente estabelecidos. Os locais de atropelamento foram mapeados, os animais foram identificados e enviados para autópsias, durante as quais amostras de fezes foram coletadas e submetidas a técnicas coproparasitológicas de sedimentação espontânea, flutuação em solução hipersaturada de NaCl e flutuação por centrífugação em sulfato de zinco e fotografadas, quando estruturas parasitárias estavam presentes. Nas análises coproparasitológicas, foram identificados oocistos de Cystoisospora spp., ovos de Ancylostomatidae e Capillaria spp, Aelurostrongylus spp., Toxocara spp., Physaloptera spp., Taenia spp. e Spirometra spp.; larvas de Aelurostrongylus abstrusus; e ovos e adultos de Ancylostoma cati e Taenia spp. Um dos felídeos estava parasitado por Ctenocephalides felis felis. Com base nesses resultados, os animais analisados neste estudo forneceram amostras importantes para a avaliação da diversidade parasitária do Norte do Paraná e sugeriram que esta região pode apresentar condições que possibilitem a manutenção dos ciclos de vida desses parasitas no ambiente e entre a vida silvestre.

Abstract This study aimed to identify the intestinal parasites of road-killed wild felines in the North Central and North, Paraná state, southern Brazil. The animals were monitored by sampling previously established transects. The places where the felines were run over were mapped, the animals were identified, and the gastrointestinal tract was evaluated. The feces were submitted to coproparasitological techniques of spontaneous sedimentation, floating in hypersaturated NaCl solution and centrifugal floating in zinc sulfate. All the parasitic structures detected were photomicrographed. In the coproparasitological analyses were identified oocysts of Cystoisospora spp., eggs of Ancylostomatidae, and Capillaria spp.; eggs of Aelurostrongylus spp., Toxocara spp., Physaloptera spp., Taenia spp., and Spirometra spp.; Aelurostrongylus abstrusus larvae; and eggs and adults of Ancylostoma cati and Taenia spp. One of the cats was parasitized by a flea of Ctenocephalides felis felis. Based on these results, the animals analyzed in this study supplied important samples for the evaluation of parasitic diversity of North of Paraná and suggested that this region may have conditions that allow the maintenance of these parasites life cycles in the environment and among wildlife.

Resumo O objetivo do presente estudo foi avaliar uma metodologia de vigilância ativa da leishmaniose visceral por meio da detecção de DNA de Leishmania em órgãos de animais silvestres atropelados, de novembro de 2016 a outubro de 2018, no Norte do Paraná, Brasil. Os pontos de coleta dos animais silvestres atropelados foram georreferenciados. Os animais foram autopsiados e amostras de medula óssea, linfonodo, fígado, baço, e pele de orelha foram coletados. DNA genômico foi extraído e submetido à PCR para amplificação de quatro diferentes regiões de Leishmania spp.: 18S, kDNA, HSP70 e ITS1, sequenciamento de DNA foi realizado. Os iniciadores utilizados para a amplificação dos genes kDNA, ITS1 e HSP70 apresentaram resultados inespecíficos. Dos 66 mamíferos coletados em 24 diferentes municípios, um tamanduá-mirim (Tamandua tetradactyla) apresentou DNA de Leishmania spp. em linfonodo na PCR, que amplificou o gene 18S. O sequenciamento de DNA confirmou o resultado e demonstrou a presença do subgênero Viannia. Sugere-se o uso da metodologia apresentada no presente estudo na vigilância ativa e precoce da leishmaniose visceral em área não endêmica.

Abstract The present study aimed to evaluate a methodology for active surveillance of visceral leishmaniasis by detecting Leishmania DNA in organs of wild road-killed animals from November 2016 to October 2018 in the North of Paraná, Brazil. The collection points of road-killed wild animals were georeferenced. The animals were autopsied and samples of bone marrow, lymph node, liver, spleen, and ear skin were collected. Genomic DNA was extracted and subjected to PCR for amplification of Leishmania spp. 18S, kinetoplastic DNA (kDNA), HSP70, and ITS1 genes, and DNA sequencing was performed. The primers used for the amplification of kDNA, ITS1, and HSP70 genes presented non-specific results. Of the 66 mammals collected from 24 different municipalities, one Southern Tamandua (Tamandua tetradactyla) presented DNA of Leishmania spp. in lymph nodes by 18S PCR. DNA sequencing confirmed the results of the subgenus, Viannia, identification. We suggest using the methodology showed in the present study in the active and early surveillance of visceral leishmaniasis in a non-endemic area.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar a soroprevalência e os fatores de risco associados à presença de anticorpos contra Toxoplasma gondii e Neospora caninum em ovinos do Paraná. A detecção dos anticorpos para T. gondii e N. caninum foi realizada, usando-se testes de ELISA indireto caseiro e comercial, respectivamente. A análise de regressão logística múltipla foi usada para verificar os fatores de risco associados à soroprevalência. Anticorpos anti-T. gondii e anti-N. caninum foram observados em 42,7% e em 17,6% dos animais, respectivamente. Os fatores de proteção associados à soropositividade foram “algum nível de confinamento (confinamento ou semiextensivo)” (OR=0,53) para T. gondii e “presença de mão de obra especializada” para N. caminum (OR=0,64). Os fatores de risco foram “presença de gatos” para T. gondii (OR=1,75) e “alimentação de cães com resíduos placentários” (OR=1,79) para N. caninum. Além de apresentar uma significante e simultânea soroprevalência para ambos os agentes (9,9% dos animais), os resultados também indicam que as deficiências em gestão e saneamento ambiental, a presença de reservatórios e os tipos de exploração favorecem a soropositividade. Dessa forma, estudos como estes podem auxiliar em programas sanitários e políticas públicas para a prevenção de T. gondii e N. caninum nos rebanhos ovinos do Paraná.

Abstract The aim of this study was to evaluate the seroprevalence and factors associated with the presence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies in sheep from Paraná state. The detection of antibodies for T. gondii and N. caninum was performed by homemade and commercial indirect ELISA, respectively. Multiple logistic regression analysis was used to verify the factors associated with the seroprevalence. Antibodies anti-T. gondii and anti-N. caninum were observed in 42.7% and in 17.6% of the animals, respectively. The protective factors associated to seropositive were “some level of confinement” (full or semi-extensive confinement) (OR=0.53) for T. gondii and “use of skilled labor” (OR=0.64) for N. caninum. The risk factors were “presence of cats” (OR=1.75) for T. gondii and “feeding of dogs with sheep placental remains” (OR=1.79) for N. caninum. In addition, to presenting a significant and simultaneous seroprevalence for both agents (9.9% of the animals), the results also indicate that deficiencies in management and environmental sanitation, the presence of reservoirs, and types of exploitation enhance the seropositivity. Thus, studies like this might support sanitary programs and public policies for the prevention of T. gondii and N. caninum in the sheep herds of Paraná state.

Resumo O gado é uma fonte importante de espécies zoonóticas de Cryptosporidium para o homem. O objetivo deste estudo foi investigar a presença de Cryptosporidium, identificar a espécie e determinar os fatores de risco relacionados ao meio ambiente, aos animais e ao manejo em bezerros leiteiros em oito estados brasileiros. Um total de 408 amostras fecais de bezerros, com idade entre 1 e 60 dias, foram analisadas. Um questionário epidemiológico foi preenchido. A triagem das amostras foi realizada pela técnica de Ziehl-Neelsen, e as amostras positivas foram submetidas à “nested” PCR. As espécies de Cryptosporidium foram identificadas pela técnica de PCR-RFLP, utilizando-se as enzimas SSPI, ASEI e MBOII. A técnica de Ziehl-Neelsen mostrou que 89,7% (35/39) das fazendas e 52,9% (216/408) das amostras foram positivas. Por meio de nested PCR, esses protozoários foram detectados em 54,6% das amostras. As 56 amostras submetidas à PCR-RFLP apresentaram Cryptosporidium parvum. Houve maior prevalência do parasita em animais de 7 a 28 dias (62,6%). Diarreia, idade entre sete e 28 dias, e fonte de água mineral foram fatores associados ao risco de infecção. O sistema de manejo do tipo “casinha” para bezerros foi associado à redução da infecção. Esses achados demonstram o alto nível de Cryptosporidium spp. em circulação nos rebanhos bovinos e o predomínio da espécie C. parvum.

Abstract Cattle are an important source of zoonotic species of Cryptosporidium for humans. The aim of this study was to investigate the presence of Cryptosporidium, identify the species and determine the risk factors relating to environment, animals and management among dairy calves in eight Brazilian states. A total of 408 fecal samples from calves aged 1-60 days were analyzed. An epidemiological questionnaire was completed. Sample screening was performed using Ziehl-Neelsen technique and the positive samples were subjected to nested PCR. Cryptosporidium species were identified by means of the PCR-RFLP technique, using SSPI, ASEI and MBOII enzymes. The Ziehl-Neelsen technique showed that 89.7% (35/39) of the farms and 52.9% (216/408) of the samples were positive. Through nested PCR, these protozoa were detected in 54.6% of the samples. The 56 samples subjected to PCR-RFLP presented Cryptosporidium parvum. There was higher prevalence of the parasite in animals aged 7 to 28 days (62.6%). Diarrhea, ages between seven and 28 days and a spring water source were factors associated with the risk of infection. The calf hutch-type management system was associated with reduced infection. These findings demonstrate the high level of Cryptosporidium spp. circulation in cattle herds and the predominance of the species C. parvum.

Resumo O oocisto, forma resistente do Toxoplasma gondii, desempenha um papel importante na transmissão desse protozoário. O objetivo desta revisão foi relatar os métodos capazes de inativar oocistos por meio de uma revisão sistemática da literatura realizada nas bases de dados Scientific Electronic Library Online, Web of Science, Science Direct, PubMed e Scopus. As palavras-chave pesquisadas foram (((efeitos OR infectividade OR resistência) AND Toxoplasma) AND oocyst). Foram selecionados 16 artigos que descreveram 309 tratamentos diferentes. Dentre todos os protocolos avaliados, 35,60% (110/309) foram eficazes na inativação de oocistos. Os métodos físicos foram mais eficazes do que outros métodos (p <0,05). Oocistos esporulados e a cepa VEG de T. gondii foram mais resistentes (p <0,05) aos tratamentos. Embora seja eficaz contra vírus e bactérias, o uso de desinfetantes na água tem pouco ou nenhum efeito sobre os oocistos de T. gondii. O uso de radiação e pressão foram eficazes na inativação de oocistos. Como esses tratamentos não incluem mudança de temperatura, podem ser utilizados em alimentos de consumo cru, tais como vegetais, pois não acarretarão substancialmente alterações nas suas características físico-químicas. Portanto, esses métodos podem ser alternativas viáveis para o controle de T. gondii.

Abstract The oocyst, a resistant form of Toxoplasma gondii, plays an important role in the transmission of this protozoan. The objective of this review was to report the methods capable of inactivating oocysts through a systematic review of the literature carried out in the Scientific Electronic Library Online, Web of Science, Science Direct, PubMed and Scopus databases. The keywords searched were (((effects OR infectivity OR resistance) AND Toxoplasma) AND oocyst). We selected 16 articles that described 309 different treatments. Among all the protocols evaluated, 35.60% (110/309) were effective in inactivating oocysts. Physical methods were more effective than other methods (p <0.05). Sporulated oocysts and the T. gondii VEG strain were more resistant (p <0.05) to treatments. Although it is effective against viruses and bacteria, the use of disinfectants in water has little or no effect on T. gondii oocysts. The use of radiation and pressure were effective in inactivating oocysts, as these treatments do not include changes in temperature, they can be used in foods for raw consumption, such as vegetables, as it will not cause substantially changes in their physical and chemical characteristics. Therefore, these methods can be viable alternatives for the control of T. gondii.

ABSTRACT BACKGROUND: Prenatal toxoplasmosis remains a neglected disease worldwide and few government programs focusing on its prevention are available. Success in these programs has been extensively reported in the literature, yet the strategies used for their implementation, as a model for such actions in different communities, have not been described. OBJECTIVE: To describe the aspects of prenatal care strategies in 13 municipalities within the regional healthcare unit of Araçatuba, in the northwestern region of the state of São Paulo in 2017, focusing on congenital toxoplasmosis. DESIGN AND SETTING: Descriptive study on prenatal healthcare within the Brazilian National Health System, in 13 participating municipalities. METHODS: Data on serological tests, referral clinics, notifications, healthcare strategies, health education and drugs for infected children were requested through a questionnaire that was sent via e-mail to people responsible for healthcare services in these municipalities. RESULTS: Major differences relating to diagnoses, reference outpatient clinics, notifications, health education and healthcare and drugs for infected children were reported among the prenatal strategies of these 13 municipal healthcare services. CONCLUSION: The lack of standardized prenatal strategy in the study area may compromise the prevention of infection. However, our identification of each aspect of prenatal care corroborates the need to implement a healthcare surveillance program relating to congenital toxoplasmosis.

Resumo O consumo de vegetais aumentou nos últimos anos devido à busca de uma dieta mais saudável, rica em fibras e com menos calorias. Para avaliar a contaminação parasitária de alface vendida nos mercados, foi realizado um levantamento de parasitas em vegetais folhosos de uma cadeia de supermercados da cidade de Londrina, Paraná. Um total de 30 amostras foram compradas nos dez mercados visitados, três em cada, dos quais dez foram convencionalmente cultivados, dez cultivados hidroponicamente e dez foram cultivados organicamente. Todas as amostras foram analisadas, usando-se os métodos de sedimentação de Hoffman, Pons e Janer e o método de flutuação de Faust e colaboradores e Willis com adaptações. Além disso, as amostras foram submetidas à extração de DNA por um kit comercial e reação em cadeia da polimerase (PCR) para detectar Toxoplasma gondii, Cryptosporidium spp. e Giardia spp., que são protozoários causadores de surtos transmitidos pela água e alimentos. Todas as amostras foram negativas para técnicas de sedimentação e flutuação. Uma das amostras cultivadas hidroponicamente foi positiva para T. gondii. Os resultados demonstram o risco de contaminação por alface crespa do cultivo hidropônico e a necessidade de limpeza adequada desses alimentos antes do consumo.

Abstract The consumption of vegetables has increased in recent years due to the search for a healthier diet that is rich in fiber and has fewer calories. To assess the parasitic contamination of lettuce sold in markets, a survey of parasites was carried out from a supermarket chain in the city of Londrina, Paraná. A total of thirty samples of lettuce were purchased in the ten markets visited, three in each, of which ten were conventionally cultivated, ten were hydroponically cultivated, and ten were organically cultivated. All samples were analyzed using the sedimentation methods of Hoffman, Pons and Janer and the fluctuation method of Faust and colleagues and Willis with adaptations. In addition, the samples were subjected to DNA extraction by a commercial kit and polymerase chain reaction to detect Toxoplasma gondii, Cryptosporidium spp. and Giardia spp., which are protozoa that cause food and waterborne parasitic outbreaks. All samples were negative for sedimentation and flotation techniques. One of the hydroponically cultivated samples was positive for T. gondii. The results demonstrate the risk of curly lettuce contamination from hydroponic cultivation and the need for proper cleaning of these foods before consumption.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta imune humoral em suínos imunizados pelas vias intranasal e intramuscular com proteínas recombinantes rROP2 do Toxoplasma gondii associadas ao adjuvante Iscomatrix. Doze suínos cruzados divididos em 3 grupos (n=4) foram utilizados. O G1 recebeu proteína recombinante ROP2 (200mg/dose) associada ao adjuvante Iscomatrix; o G2 recebeu PBS associado ao Iscomatrix; e o G3 foi o grupo controle. As vias intranasal (IN) e intramuscular (IM) foram utilizadas. Os animais foram desafiados por via oral com a cepa VEG e tratados no dia três após o desafio. Febre, anorexia e prostração foram os sinais clínicos observados em todos os animais. Todos os animais do G1 produziram anticorpos acima do ponto de corte no dia do desafio, enquanto os animais do G2 e G3 permaneceram abaixo do ponto de corte no desafio. Proteção parcial contra parasitemia e formação de cistos teciduais foram observadas nos suínos do G1 comparados ao G3. Os fatores de proteção contra a formação de cistos teciduais foram 40,0% e 6,1% no G1 e G2, respectivamente, comparados com o G3. Como conclusão, não houve estimulação da resposta imune humoral sistêmica nos suínos após as imunizações IN com rROP2+Iscomatrix. Estes animais, porém, após a imunização IM, produziram títulos de anticorpos mais altos que os animais controles. Esses resultados foram associados a uma proteção parcial contra a parasitemia e formação de cistos teciduais.

Abstract This study aimed to evaluate the humoral immune response in pigs immunized intranasally and intramuscularly with recombinant Toxoplasma gondii rROP2 protein in combination with the adjuvant Iscomatrix. Twelve mixed breed pigs divided into three groups (n=4) were used, G1 received recombinant ROP2 proteins (200 µg/dose) plus Iscomatrix, G2 received PBS plus Iscomatrix, and G3 as the control group. The intranasal (IN) and intramuscular (IM) routes were used. Animals were challenged orally with VEG strain oocysts and treated on day three after challenge. Fever, anorexia, and prostration were the clinical signs observed in all animals. All the G1 animals produced antibodies above the cut-off on the day of the challenge, while the G2 and G3 remained below the cut-off. Better partial protection against parasitemia and cyst tissue formation was observed in G1 than G3. The protection factors against tissue cyst formation were 40.0% and 6.1% for G1 and G2, respectively, compared to G3. In conclusion, there were not systemic antibody responses in pigs with IN immunization with rROP2+Iscomatrix; however, after IM immunization, those animals produced higher titers than animal controls. We associated these results with partial protection obtained against parasitemia and tissue cysts formation.

Resumo O objetivo desse estudo foi avaliar a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum e seus fatores associados em caprinos de propriedades do Estado do Paraná, Sul do Brasil. A análise sorológica foi realizada, utilizando-se ELISA indireto em 629 amostras de soro caprino, coletadas em 32 propriedades distribuídas em cinco mesorregiões do Estado. A soropositividade foi observada em 30,7% dos animais para T. gondii, 6,3% para N. caninum e 3,0% para ambos. Os modelos finais de regressão múltipla mostraram que o uso de reprodução assistida reduziu a chance de soropositividade para T. gondii (PR=0,70), enquanto a presença no local de abate na fazenda (PR=2,03) aumentou. Para N. caninum, o fornecimento de ração concentrada (OR=4,80) e a morte dos animais no pré-desmame (OR=9,96) aumentaram a chance de soropositividade. O estudo das variáveis associadas às soropositividades sugere deficiências no saneamento e no manejo reprodutivo dos Animais. Além disso, reconhece pontos críticos para a infecção no manejo da produção animal.

Abstract The aim of this study was to determine the occurrence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies and their associated factors among goats in farms from the Paraná state, South Brazil. The serological analysis was performed by indirect ELISA on 629 goat serum samples collected from 32 farms distributed in five mesorregions from the state. Seropositivity was observed in 30.7% of the animals for T. gondii, 6.3% for N. caninum, and 3.0% for both agents. Final multiple regression models showed that the use of assisted reproduction decreased the chance of seropositivity for T. gondii (PR=0.70) and the slaughtering site on the farm (PR=2.03) increased it. To N. caninum, the supplying concentrated feed to animals (OR=4.80) and animal pre-weaning death (OR=9.96) increased the chance of seropositivity. The variables associated with these seropositivities suggest deficiencies in sanitation and reproductive management. In addition, it recognizes critical points of infection for animal production management.

Resumo O objetivo deste estudo foi confirmar a emergência da leishmaniose visceral canina em Foz do Iguaçu próximo à fronteira com a Argentina e ao Paraguai, por meio do isolamento e identificação molecular de Leishmania infantum. Em um primeiro estágio de coleta de animais (2012), três amostras de aspirados de linfonodos e 46 camadas leucocitárias foram obtidas de cães soropositivos para leishmaniose. Em um segundo estágio de coleta (2013), foram coletadas amostras de camada leucocitária de 376 cães de 20 localidades próximas à fronteira com o Paraguai, rio Paraná, centro e periferia da cidade. Seis isolados foram obtidos, quatro da primeira etapa (4/49) e dois da segunda etapa (2/376); estes isolados foram submetidos à amplificação com iniciadores K26F/R, e a análise de sua sequência confirmou a espécie como L. infantum. A autoctonia dos casos foi confirmada, pois 100% dos cães nunca haviam saído da cidade. O estudo confirma a emergência de leishmaniose visceral canina no Paraná com identificação de L. infantum em cães da cidade de Foz do Iguaçu. Assim, medidas de controle devem ser elaboradas e implementadas por órgãos públicos e instituições de pesquisa do Brasil, Argentina e Paraguai em parceria com o objetivo de controlar a disseminação de zoonoses e os casos humanos de LV.

Abstract The aim of this study was to confirm the emergence of canine visceral leishmaniasis among dogs in Foz do Iguaçu. The disease was diagnosed through the isolation and molecular identification of Leishmania infantum. In the first sample collection stage (2012), three lymph node aspirates and 46 buffy coat samples were obtained mostly from the dogs that were seroreagents for leishmaniasis. In the second sample collection stage (2013), the buffy coat samples were collected from 376 dogs located close to Paraguay, Paraná river, center and peripheral parts of the city. The DNA from the six isolates, four from the first sampling stage (4/49) and two from the second sampling stage (2/376), was subjected to polymerase chain reaction using the K26F/R primers. The isolate was confirmed as L. infantum by sequencing. As none of the dogs had ever left the city, the isolates were confirmed as autochthonous. Further, the study confirmed the emergence of canine visceral leishmaniasis in Paraná through the identification of L. infantum among dogs in Foz do Iguaçu city. Hence, collaborative control measures should be designed and implemented by the public agencies and research institutions of Brazil, Argentina, and Paraguay to control the spread of visceral leishmaniasis.

Resumo O objetivo deste estudo foi relatar um surto de toxoplasmose humana em uma instituição de pesquisa em Londrina, Paraná, no período de dezembro de 2015 a fevereiro de 2016. Amostras de sangue de 26 indivíduos sintomáticos foram coletadas e o imunoensaio de quimioluminescência de micropartículas foi realizado para detectar IgM, IgG e teste de avidez de IgG específica em laboratório oficial. Um total de 20 pessoas com sintomas e sorologia compatíveis com toxoplasmose aguda (IgM positiva e IgG com baixa avidez) foi selecionado como casos, enquanto 45 funcionários assintomáticos que trabalhavam nas mesmas equipes e durante os mesmos turnos foram utilizados como controles. Todos os participantes da investigação responderam a um questionário epidemiológico. Foram coletadas três amostras de água e uma de lodo das cisternas de abastecimento da instituição, 10 de solo, 11 de vegetais, três amostras de fezes de gato e um cadáver de filhote felino doméstico para detecção de T. gondii pela reação em cadeia da polimerase (PCR). Após análise dos dados epidemiológicos, o consumo de hortaliças no restaurante da instituição foi a única variável associada à ocorrência da doença. Em resultados laboratoriais, todas as amostras apresentaram resultados negativos a PCR. O rápido reconhecimento do surto, notificação e investigação prematura poderia ter quebrado a cadeia de transmissão, evitando assim o surgimento de novos casos. Além disso, a adoção de boas práticas de manipulação de alimentos poderia ter impedido a ocorrência do surto.

Abstract The objective of this study was to report an outbreak of human toxoplasmosis at a research institution in Londrina, Paraná, from December 2015 to February 2016. Blood samples from 26 symptomatic individuals were collected and the microparticle chemiluminescence immunoassay was performed to detect IgM, IgG and specific IgG avidity test in the official laboratory. A total of 20 people with symptoms and serology compatible with acute toxoplasmosis (IgM positive and IgG with low avidity) were selected as cases, while 45 asymptomatic employees working in the same teams and during the same shifts were selected as controls. All the participants of the investigation answered an epidemiological questionnaire. Three samples of water and one sludge from the institution's supply cisterns, 10 soil samples, 11 plant samples, three cat fecal samples and one domestic feline cadaver were collected for analysis of the polymerase chain reaction (PCR) for T. gondii. After analyzing the epidemiological data, the consumption of vegetables in the restaurant of the institution was the only variable associated with the occurrence of the disease. In laboratory results, all the samples showed negative results to PCR. The rapid recognition of the outbreak, early notification and investigation could have broken the chain of transmission early, thus preventing the emergence of new cases. In addition, the adoption of good food handling practices could have prevented the occurrence of the outbreak.

Resumo Este estudo avaliou a soroprevalência de Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Leptospira spp. em cães de Foz do Iguaçu, Paraná, Brasil. O teste de imunofluorescência indireta foi utilizado para detectar anticorpos anti-T. gondii e anti-N. caninum. Ensaio imunoenzimático e soroaglutinação microscópica foram utilizados para pesquisa de anticorpos anti-T. gondii e anti-Leptospira spp., respectivamente. Os resultados obtidos foram: 67,02% (435/649) das amostras reativas para T. gondii e, 1,38% (9/649) para N. caninum, ambas com ausência de variáveis significativas estatisticamente. Para Leptospira spp. os resultados indicaram soroprevalência de 23,11% (153/649). A análise das variáveis sem distinção de sorovar mostraram associação para caraterísticas intrísecas como raça, idade, estado nutricional e categoria de cães. Para as variáveis extrínsecas, a região da cidade e ter acesso à rua mostraram associação estatística (p<0,05). Os sorovares mais prevalentes foram: Canicola com 59,47% (91/153); Bratislava 13,07% (20/153) e Butembo 15,68% (24/153). As variáveis que compõem o modelo de análise multivariada ajustada usando como desfecho Leptospira spp. foram: idade, raça, estado nutricional e área. Para o sorovar Canicola, as variáveis significantes (p<0,05) foram sexo, estado nutricional e área; para o sorovar Bratislava, as variáveis significantes (p<0,05) foram linfadenomegalia e presença de pulgas. Dos resultados obtidos, cães podem ser usados como sentinelas para infecção por T. gondii e Leptospira spp. na cidade de Foz do Iguaçu e em outras cidades com desfechos similares. Além disso, medidas preventivas devem ser tomadas pelas autoridades de saúde, pois são zoonoses e os seres humanos também estão em risco.

Abstract This study evaluated the seroprevalence of Toxoplasma gondii, Neospora caninum and Leptospira spp. in dogs from Foz do Iguaçu, Paraná, Brazil. Indirect immunofluorescent antibody test was used to detect antibodies anti-T.gondii and anti-N. caninum. Immunoenzymatic assay and microscopic serum agglutination were used for screening antibodies anti-T.gondii and anti-Leptospira spp., respectively. The results were: 67.02% of the samples reactive for T.gondii and 1.38% for N. caninum, both without statistically significant variables. For Leptospira spp. the results indicated seroprevalence of 23.11%. The analysis of the variables without distinction of serovar showed association for intrinsic characteristics as breed, age, nutritional status and dog category. The extrinsic variables as city region and access to the street presented association (p<0.05). The most prevalent serovars were: Canicola 59.47%; Bratislava 13.07% and Butembo 15.68%. Variables that make up the adjusted multiple analysis model using Leptospira spp. were: age, breed and nutritional status; serovar Canicola, sex, nutritional status and area (p<0.05); serovar Bratislava, lymphadenomegaly and presence of fleas (p<0.05). Given the results obtained, dogs can be used as sentinels for toxoplasmosis and leptospirosis in Foz do Iguaçu and other cities with similar outcomes. In addition, preventive measures should be taken by health authorities because they are zoonoses and humans are also at risk.

Resumo Cryptosporidium e Giardia são protozoários causadores de diarreia em animais e humanos. A caracterização molecular destes protozoários em esgoto pode prover dados ainda desconhecidos da ocorrência de espécies. O objetivo do presente estudo foi monitorar a ocorrência de Giardia e espécies de Cryptosporidium em esgoto bruto e tratado em uma estação de tratamento de esgoto (ETE) de Londrina, Paraná. Amostras de esgoto bruto e tratado foram coletadas no período de um ano, com periodicidade quinzenal. A ocorrência destes protozoários foi caracterizada por meio de concentração das amostras e posterior extração de DNA seguida de nested-PCR para amplificação de fragmentos dos genes 18S rRNA de Giardia e 18S rRNA de Cryptosporidium. A caracterização das espécies de Cryptosporidium foi realizada por meio de análise por polimorfismo de comprimento do fragmento de restrição (RFLP) dos produtos obtidos. Foram coletadas no total 25 amostras de cada, esgoto bruto e esgoto tratado. Para Giardia, todas as amostras de esgoto bruto e 76% das de esgoto tratado foram positivas. Cryptosporidium esteve presente em 84% das amostras de esgoto bruto e em 8% do tratado. No esgoto tratado foi encontrado apenas C. muris, já nas amostras de esgoto bruto foram encontradas cinco espécies: C. muris, C. hominis, C. baileyi, C. suis e C. parvum em 100%, 19%, 9%, 9% e 4%, respectivamente. A presença de espécies mistas foi observada em 19,04% das amostras. A presença de Giardia e Cryptosporidium em esgoto tratado pode pôr em risco a saúde humana. A discriminação de espécies de Cryptosporidium revelou a presença de espécies zoonóticas incomuns como C. suis e C. muris.

Abstract Cryptosporidium and Giardia are protozoan parasites that cause diarrhea in humans and animals. Molecular characterization of these pathogens in sewage may provide insight on their occurrence and prevalence in Brazil. This study aimed to investigate the presence of Giardia and Cryptosporidium in raw and treated sewage from Londrina, Paraná, Brazil. Samples were collected every two weeks during a year. Samples were concentrated, then DNA was extracted and subjected to a nested PCR targeting the Giardia 18S rRNA gene and the Cryptosporidium 18S rRNA gene. Species of Cryptosporidium were characterized by restriction fragment length polymorphism (RFLP). All raw sewage and 76% of the treated sewage were positive for Giardia; 84% of raw sewage samples and 8% of treated sewage were positive for Cryptosporidium. C. muris, C. hominis, C. baileyi, C. parvum and C. suis were detected in 100%, 19%, 9%, 9% and 4% of raw sewage, respectively. C. muris was the only species found in treated sewage. Multiple species of Cryptosporidium were present in 19.04% of the raw sewage. Treated sewage water can pose a threat to human health. The speciation of Cryptosporidium revealed the presence of non-common zoonotic species as C. suis and C. muris.