RESUMO: Atta sexdens rubropilosa (cortadeira de folha) possui associação simbiótica com fungos e interação negativa com outros fungos devido ao parasitismo do fungo cultivado pelas formigas. Quando colônias da formiga cortadeira de folhas são submetidas ao tratamento com iscas tóxicas, diversas espécies de fungos surgem dentro da colônia, podendo contribuir com a morte ou sobrevivência da colônia. Para entender os relacionamentos ecológicos em colônias de formigas, a identificação de espécie de fungos se torna muito importante e, o uso de DNA barcoding tem sido um método rápido e eficiente para identificação de espécies usando métodos moleculares. No presente trabalho, usamos a região ITS (internal transcribed spacer) para identificar fungos em colônias tratadas com iscas tóxicas. Dois experimentos com iscas tóxicas foram aplicados: 0.75g de Fipronil [0.003%] e 0.75g de Sulfluramid [0.3%]. As amostras, contendo os possíveis fungos, foram coletadas e cultivadas em meio Czaped durante sete dias para o crescimento do fungo e posterior identificação. O DNA total foi isolado de 100-150mg de micélio usando o método CTAB, usado para amplificar a região ITS por PCR empregando primers universais (ITS5 e ITS4). O sequenciamento foi realizado utilizando o método de Sanger. As sequências foram submetidas ao BLAST, permitindo identificar nove diferentes espécies das ordens Agaricales, Eurotiales, Hypocreales, Pleosporales, Saccharomycetales e Tremellales, mostrando variação 96-100% de identidade. Empregando a análise “The Automatic Barcode Gap Discovery”, identificou-se nove grupos, correspondendo as espécies descritas no NCBI. As distâncias K2P foram usadas para gerar uma árvore usando Neighbour-Joining, apresentando que as espécies foram agrupadas de acordo com as filogenias dos grupos. Conclui-se que as colônias de formigas cortadeira de folhas apresentam grande diversidade de fungos e que DNA barcoding é eficiente para identificação destes.

ABSTRACT: Atta sexdens rubropilosa (leaf-cutter ants) has a symbiotic association with a fungus and has a negative interaction with other fungi due to parasitism of the fungus cultivated by ants; also, there are several other fungi with no exact known role occurring in their cultivated fungus garden. In the present study, we use the ITS region (internal transcribed spacer) to identify fungi in colonies treated with toxic baits. Experiments using two toxic baits were carried out: 0.75g of sulfluramid [0.3%] and 0.75g fipronil [0.003%]. Samples of fungi were collected and cultured in Czapek medium for seven days to allow fungal growth and subsequent identification. Total DNA was isolated from 100-150 mg of mycelium using the CTAB method and using PCR, with the universal primers (ITS4 and ITS5), to amplify the ITS region. Sequencing was performed using the Sanger method. Sequences were subjected to BLAST, allowing the identification of nine different species of the orders Agaricales, Eurotiales, Hypocreales, Pleosporales, Saccharomycetales and Tremellales showing a variation in identity of 96-100%. Using “The Automatic Barcode Gap Discovery” analysis, nine groups were identified, corresponding to species described in NCBI. The K2P distances were used to generate a tree using Neighbour-joining, demonstrating that the species were grouped according to phylogenetic groups. We concluded that leaf-cutter ant colonies exhibited a wide variety of fungi and this study suggested that there is no correlation between the species of fungi isolated with the control method used on the ant nest.

Folhas de acalifa (Acalypha spp.) são de grande aceitação pelas formigas cortadeiras e, por isso, utilizadas na manutenção de colônias em laboratório. Baseado nesses fatos, procedeu-se a uma avaliação da atratividade de isca granulada feita com folhas de Acalypha wilkesiana, usando a formiga cortadeira Atta sexdens rubropilosa como modelo, com o objetivo de determinar o seu potencial atrativo frente ao citros, atualmente utilizado na formulação comercial de iscas formicidas. Foram formuladas artesanalmente iscas atóxicas, contendo pó (90% p/p) de polpa cítrica ou de A. wilkesiana. As iscas foram colocadas simultaneamente em uma arena de forrageamento até o carregamento total de uma delas. Os resultados mostram que a isca de acalifa é menos atrativa que a de citros, o que inviabiliza a substituição.

Leaves of copperleaf (Acalypha spp.) are greatly accepted by leaf-cutting ants and therefore used to maintain colonies in the laboratory. In order to determine the attractive potential of granulated bait of Acalypha wilkesiana leaves versus citrus pulp, currently used in commercial baits, an evaluation was performed, by using the leaf-cutting ant Atta sexdens rubropilosa as model. The handmade non-toxic baits contained powder (90% w/w) of either citrus pulp or A. wilkesiana were offered simultaneously in the foraging arena until the total loading of one of them. Results showed that copperleaf baits are less attractive than the citrus ones, which invalidates the viability of the substitution.

O uso de iscas tóxicas, formuladas à base de polpa cítrica desidratada, para o controle de formigas cortadeiras de gramíneas pode levar a resultados insatisfatórios devido à baixa atratividade do substrato às operárias. Este trabalho foi realizado com o objetivo de identificar substâncias atrativas e com potencial para incorporação em matrizes de iscas granuladas para formigas cortadeiras de gramíneas, dentre diversos tipos de açúcares e edulcorantes artificiais. Os experimentos foram realizados em ninhos adultos de Atta capiguara Gonçalves, em área de pastagem. Inicialmente, as substâncias estudadas foram: sacarose, frutose, amido solúvel, rafinose, maltose, lactose, sorbose, celobiose, arabinose, xilose, glicose, galactose, raminose, arabinose, melizitose, sacarina e ciclamato (5,0% p/v). Posteriormente, estudaram-se soluções de maltose, xilose, sacarose, frutose e glicose a 5,0%, 7,5%, 10,0% e 20,0% p/v. Retângulos de celulose foram usados como veículo. Avaliou-se o número de retângulos carregados para o interior das colônias. De modo geral, as taxas de carregamento foram muito baixas, com médias máximas de 9,6% para lactose e de 6,0% para arabinose e ciclamato, na concentração 5,0%, não diferindo da testemunha (água destilada). No esquema fatorial, não foram verificados efeitos de solução, de concentração e de interação entre esses fatores. Os açúcares e edulcorantes artificiais estudados não são atrativos às operárias de Atta capiguara, inviabilizando sua inclusão em iscas tóxicas, com a finalidade de melhorar sua atratividade.

Using of toxic baits made of dehydrated citric pulp to control grass-cutting ants can lead to unsatisfactory results because of the low attractiveness of the substrate to worker ants. This work aimed to identify attractive substances, with potential for incorporation in a matrix of granulated baits for grass-cutting ants, among several kinds of sugars and substances used in artificial sweeteners. Experiments were carried out in mature nests of Atta capiguara (Hym.: Formicidae) set in pasture. Studied substances were sucrose, fructose, soluble starch, raffinose, maltose, lactose, sorbose, cellobiose, arabinose, xylose, glucose, galactose, rhamnose, arabinose, melezitose, saccharine and cyclamate (at 5.0% w/v). Later, on maltose, xylose, sucrose, fructose and glucose solutions were included at 5.0%, 7.5%, 10.0% and 20.0% w/v, respectively. Cellulose rectangles were used as vehicle and number of rectangles carried into the colonies was evaluated. Carrying rates were very low with maximum means of 9.6% for lactose and 6.0% for arabinose and cyclamate, at the 5.0% concentration. No differences (P > 0.05) were observed relatively to the control (distilled water). No effects were detected for solution, concentration and for the interaction of these factors. Sugars and artificial sweeteners studied were not attractive to Atta capiguara workers, turning their inclusion as attractants in toxic ant baits not viable.