A coqueluche ou pertussis foi a maior causa de morbidade e mortalidade infantil em todo o mundo até a introdução de uma vacina na década de 1940. Entretanto, desde a década de 1980, a coqueluche tornou-se, em muitos países , um importante problema de saúde pública. Este acontecimento pode ser atribuído à melhoria do diagnóstico laboratorial e da notificação da doença, declínio da imunidade no decorrer do tempo, mudanças demográficas ou adaptação da população bacteriana à imunidade induzida pela vacina. O objetivo deste estudo foi analisar as características fenotípicas e genotípicas de uma coleção de 67 cepas de Bordetella pertussis isoladas no período 1988-2002 em São Paulo, Brasil. Todas as cepas foram submetidas à determinação do perfil de resistência à eritromicina, à sorotipagem e 56 cepas à eletroforese em campo pulsado (PFGE). Todas as cepas foram sensíveis à eritromicina e a maioria delas pertencia ao sorotipo 1,3. As 56 cepas foram classificadas em 11 perfis de PFGE com base nas diferenças no padrão de bandas. Embora mais de 60% das cepas tenham sido isoladas de crianças com menos de três meses de idade, cerca de 15% delas era de adolescentes/adultos evidenciando um aumento da incidência da coqueluche nesse grupo etário.

Whooping cough or pertussis was a major cause of childhood morbidity and mortality in the world until the introduction of a whole-cell vaccine in the 1940's. However, since the early 1980's whooping cough cases have increased in many countries, becoming an important problem of public health. This increase may be due to accuracy of laboratory diagnosis and reporting of the disease, a decline in immunity over time, demographic changes, and adaptation of the bacterial population to vaccine-induced immunity. The purpose of this study was to analyze phenotypically and genotypically a collection of 67 Bordetella pertussis isolates recovered during the period 1988-2002 in São Paulo State, Brazil to determine their characteristics and relatedness. All isolates were submitted to susceptibility testing to erythromycin, serotyping, and 56 isolates were analyzed by Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE). All isolates were susceptible to erythromycin and the majority of them belonged to serotype 1,3. The 56 isolates were classified into 11 PFGE profiles according to the differences in banding patterns. Although more than 60% of the isolates were recovered from patients aged less than three months, almost 15% of them were isolated from adolescents/adults evidencing the increase in the incidence of pertussis among this group of age.

No presente trabalho nós examinamos o uso potencial de sondas de oligonucleotídeos para caracterizar sorotipos de Neisseria meningitidis sem o uso de anticorpos mono-clonais (MAbs). A diversidade antigênica da proteína PorB forma a base do método de sorotipagem, todavia, o atual painel de MAbs utilizados, sub-estima em no mínimo 50% a diversidade desta proteína devido a falta de reagentes para as várias regiões variáveis (VRs) da proteína PorB ou porque várias variantes das VRs não são reagentes com os MAbs disponíveis. Nós analisamos o uso de sondas de oligonucleotídeos para caracterizar os sorotipos 10 e 19 de N. meningitidis. O gene porB da cepa protótipo do sorotipo 10 foi sequenciado e alinhado com outras 7 sequências de diferentes sorotipos, e as individuais VRs foram então analisadas. Os resultados com as sondas 21U (VR1-A) e 615U (VR3-B) contra 72 cepas de N. meningitidis confirmaram que VR1-A e VR3-B codificam epítopos para os MAbs 19 e 10 respectivamente. É possível o uso de sondas para a caracterização dos sorotipos e podemos tipar 100% da diversidade da VR do gene porB. Trata-se de um método simples, rápido, e especialmente útil para a análise de um grande número de amostras.

In the present study we examine the potential use of oligonucleotide probes to characterize Neisseria meningitidis serotypes without the use of monoclonal antibodies (MAbs). Antigenic diversity on PorB protein forms the bases of serotyping method. However, the current panel of MAbs underestimated, by at least 50% the PorB variability, presumably because reagents for several PorB variable regions (VRs) are lacking, or because a number of VR variants are not recognized by serotype-defining MAbs12. We analyzed the use of oligonucleotide probes to characterize serotype 10 and serotype 19 of N. meningitidis. The porB gene sequence for the prototype strain of serotype 10 was determined, aligned with 7 other porB sequences from different serotypes, and analysis of individual VRs were performed. The results of DNA probes 21U (VR1-A) and 615U (VR3-B) used against 72 N. meningitidis strains confirm that VR1 type A and VR3 type B encode epitopes for serotype-defined MAbs 19 and 10, respectively. The use of probes for characterizing serotypes possible can type 100% of the PorB VR diversity. It is a simple and rapid method specially useful for analysis of large number of samples.

Epidemia de doença meningocócica por sorogrupo B tem ocorrido na Grande São Paulo desde 1988. Uma vacina cubana, baseada em proteína de membrana externa de uma cepa de Neisseria meningitidis sorogrupo B: sorotipo 4: sorosubtipo P1.15 (B:4:P1.15), foi administrada em cerca de 2.4 milhões de crianças entre 3 meses a 6 anos de idade durante 1989 e 1990. A administração da vacina teve pouco ou nenhum efeito na evolução da epidemia. Para detectar mudança clonal que poderia explicar o contínuo aumento da doença depois da vacinação, foram sorotipadas 834 cepas isoladas entre 1990 e 1996 de pacientes com doença sistêmica. Cepas B:4:P1.15 isoladas desde 1977, têm sido o fenótipo mais prevalente desde 1988. Essas cepas ainda são prevalentes na região e foram responsáveis por cerca de 68% dos 834 casos por sorogrupo B nos últimos 7 anos. Foram analisados 438 (52%) dessas cepas por RFLP do rRNA gene (ribotipagem), e o perfil mais frequente foi o Rbl (68%). Concluímos que o clone B:4:P1.15 - Rbl foi o mais prevalente e responsável pelo contínuo aumento da doença meningocócica na Grande São Paulo durante os últimos 7 anos apesar da campanha de vacinação.

A large epidemic of serogroup B meningococcal disease (MD), has been occurring in greater São Paulo, Brazil, since 1988.21 A Cuban-produced vaccine, based on outer-membrane-protein (OMP) from serogroup B: serotype 4: serosubtype P1.15 (B:4:P1.15) Neisseria meningitidis, was given to about 2.4 million children aged from 3 months to 6 years during 1989 and 1990. The administration of vaccine had little or no measurable effects on this outbreak. In order to detect clonal changes that could explain the continued increase in the incidence of disease after the vaccination, we serotyped isolates recovered between 1990 and 1996 from 834 patients with systemic disease. Strains B:4:P1.15, which was detected in the area as early as 1977, has been the most prevalent phenotype since 1988. These strains are still prevalent in the area and were responsible for about 68% of 834 serogroup B cases in the last 7 years. We analyzed 438 (52%) of these strains by restriction fragment length polymorphism (RFLPs) of rRNA genes (ribotyping). The most frequent pattern obtained was referred to as Rb1 (68%). We concluded that the same clone of B:4:P1.15-Rb1 strains was the most prevalent strain and responsible for the continued increase of incidence of serogroup B MD cases in greater São Paulo during the last 7 years in spite of the vaccination trial.

Em razão da recente epidemia de doença meningocócica causada por N. meningitidis B na Grande São Paulo, Brasil, foi feita revisão das epidemias dessa doença ocorridas no Brasil desde o início do século e uma análise das vacinas atuais contra N. meningitidis A, C, Y e W135. Também são discutidos os mais recentes avanços no desenvolvimento e aplicação de vacina contra M meningitidis B, um desafio constante para os maiores centros de pesquisa de todo o mundo.

In view of a recent epidemic of meningococcal disease caused by serogroup B N. meningitidis in the Greater S. Paulo area (Brazil), a review of the epidemics that occurred in Brazil during the period from 1900 to 1990 is presented. The current status of vaccines against N. meningitidis A.C.Y. and W135 is analysed. The recent advances in the development and effectiveness of B. meningococci vaccines are discussed.

Em razão da recente epidemia de doença meningocócica causada por N. meningitidis B na Grande São Paulo, Brasil, foi feita revisão das epidemias dessa doença ocorridas no Brasil desde o início do século e uma análise das vacinas atuais contra N. meningitidis A, C, Y e W135. Também são discutidos os mais recentes avanços no desenvolvimento e aplicação de vacina contra M meningitidis B, um desafio constante para os maiores centros de pesquisa de todo o mundo.

In view of a recent epidemic of meningococcal disease caused by serogroup B N. meningitidis in the Greater S. Paulo area (Brazil), a review of the epidemics that occurred in Brazil during the period from 1900 to 1990 is presented. The current status of vaccines against N. meningitidis A.C.Y. and W135 is analysed. The recent advances in the development and effectiveness of B. meningococci vaccines are discussed.