Com o objetivo de melhor conhecer a ação de herbicidas, plantas de capim-carrapicho (Cenchrus echinatus L.) foram tratadas com trifluralin, a 0,84 kg/ha, incorporado nas profundidades de 0 a 3 e 5 a 11cm, e plantas de amendoim-bravo (Euphorbia hetero-phylla L.) foram tratadas com trifluralin, na mesma dose, incorporada até 8cm, pendimetalin a 1,15 kg/ha e 2,4-D amina, a 1,44 kg/ha de i.a., aplicados em pré-emergência, em vasos. O desenvolvimento das plântulas foi observado a partir de sete dias da semeadura e aos 14 dias coletou-se material para observações ao microscópio. O trifluralin causou acentuado aumento de diâmetro do ápice da raiz e do coleóptilo, inibindo o crescimento dessas partes em C. echinatus. Também ocorreu aumento pronunciado das células do córtex e da epiderme e as paredes celulares se tornaram mais delgadas, com células plurinucleadas. Em E. heterophylla houve inibição de raízes secundárias e leve aumento do diâmetro de células do córtex. O pendimetalin causou grande aumento do diâmetro do colo da planta em E. heterophylla, devido ao aumento das células do córtex e epiderme. As paredes celulares se tornaram mais delgadas. Houve pequena inibição de raízes secundárias. O 2,4-D causou a formação de células no centro da medula em algumas plantas e descolamento da epiderme em outras.

Cenchrus echinatus L., seeded in pots at a depth of four cm, was treated with trifluralin at 0.84 kg/ha, incorporated at depths of 0 to 3 and 5 to 11 cm. Euphorbia heterophylla L, seeded at a depth of one cm, was treated with trifluralin at the same rate, incorporated from 0 to 8 cm, pendimethalin at 1.15 kg/ha and 2.4-D, amine, at 1.44 kg/ha at surface, in preemergence. The plants were observed during the two first weeks and after this material was collected and microscopic observations were made on the affected tissues. Trifluralin enlarged the root tip and the coleoptile diameter, inhibiting their growth in C. echinatus. Swelling of cortical cells was observed. The cells had thinner walls and sometimes were multinucleate. In E. heterophylla there was lateral root inhibition and little swelling of cortical cells. Pendimethalin caused great thickening of the transition zone in E. heterophylla, due to swelling of cortical and epidermal cells, which had thinner walls. Small lateral root inhibition occured. The 2.4-D affected tissue formation, originating cells in the pith center. In some plants an epidermal dislocation was observed.

Estudos citoquímicos, ao nível do microscópio óptico, foram efetuados para determinar a natureza química de inclusões intranucleares, de aspecto fibroso, induzidas pelo vírus do mosaico amarelo do salsão na maioria de suas hospedeiras. Os testes citoquímicos foram conduzidos em material foliar fresco ou fixado (aldeído glutárico, Carnoy 3:1 ou Bouin), tendo sido feitas as seguintes reações: hematoxilina férrica (testemunha); Sudan IV e Azul do Nilo (lipídios); iodo-iodeto (amido); Feulgen, Azur B e verde-de-metila-pironina (ácidos nucleicos); ninidrina-Schiff e "Fast Green", este último em soluções ácida e alcalina (proteínas). Os testes com verde-de-metila-pironina, Azur B e ninidrina-Schiff foram combinados com digestão enzimática pela ribonuclease ou pepsina. Os dados obtidos sugerem que, dentro da sensibilidade dos testes realizados, a inclusão contenha proteína, mas não tenha amido, lipídios ou ácidos nucleicos. Isso permite supor, portanto, que essas inclusões não sejam formadas de partículas de vírus.

Cytochemical studies at optical microscopic level were made to determine the chemical nature of intranuclear inclusions with fibrous aspect which were induced by the celery yellow mosaic virus (CYMV) in most of its hosts. The cytochemical tests were carried on fresh as well on fixed foliar material, fixation being in glutaric aldeid, Carnoy 3:1 or Bouin. The following reactions were tried: ferric haematoxylin (control); Sudan IV and Nile blue (for lipids); iodine ioduret (for starch); Feulgen, azur B and methyl green-pyronin (for nucleic acids); ninhydrin-Schiff and fast-green, the latter in acid and in alcaline solution (for protein). The tests with methyl green-pyronin, azur B and ninhydrin-Schiff were combined with enzimatic digestion with RNase or pepsin. The results suggest that, within the sensibility of the tests, the inclusion contains protein but does not contain starch, lipids or nucleic acids. This permit to suppose, therefore, such inclusions not to be formed of virus particles.

As observações de diversos caracteres morfológicos em plantas de berinjela (Solatium melongena L.) provenientes de tratamentos com colquicina levaram à separação de razoável número de possíveis poliplóides. O número de cromossomos determinado em células-mães de pólen revelou a existência de plantas tetraplóides e plantas quiméricas, além das normais diplóides. Numa amostra representando os diferentes tratamentos, encontrou-se uma associação quase perfeita entre a natureza tetraplóide ou quimérica da planta e a irregularidade do tamanho do pólen; tal associação não foi encontrada quando se analisou a quantidade de pólen vazio. Os frutos tetraplóides obtidos produziram sementes maiores e em número bem menor que os diplóides de pesos equivalentes.

The observations on several morphological characteristics made on plants derived from treatments of seed with colchicine in the egg-plant (Solatium melongena L.) led to separation of a reasonable number of possible polyploids. Chromosome number determined in P.M.C. indicated the existence of tetraploid plants, chimeric plants at level 24-48 and at level 48-96 beside the diploid normal ones. In a certain number of plants representing the different treatments, it was found an almost perfect association between tetraploidy and chimeric condition of the plants at one side and irregular size of the pollen at the other side; such an association was not found when the amount of empty pollen was analysed. The tetraploid fruits produced low number of seeds which were not uniform in size but were larger and in general heavier than the diploid ones.

Com o objetivo de conseguir plantas poliplóides de berinjela, foram realizados em 1970 alguns tratamentos com colquicina em sementes do cultivar Santa Genebra. Três séries de tratamentos foram efetuadas, era-pregando-se soluções de diferentes concentrações, variando a duração do tratamento e também seu momento de aplicação, isto é, antes, durante e até a germinação. O número de cromossomos nas raízes e o número de estornas do material tratado, quando comparados com o original diplóide, indicam que a completa poliploidização não foi conseguida. O máximo que se constatou até o estádio de desenvolvimento em que foram levadas as observações, foram plantas quiméricas, tanto na parte aérea como nas raízes, provenientes dos tratamentos de sementes em germinação e dos tratamentos mais fortes (0,4% e 0,6%) aplicados antes da germinação das sementes.

Polyploidization in egg-plant has been tried through colchicine treatments in seeds of the cultivar Santa Genebra from Instituto Agronômico. Several trials were made varying the strenght of the solution, the duration of the treatment and the time of its application, that is, before, during, and after seed germination. Chromosome numbers determined in roots as well as the number of stomata of treated material compared to those of original diploid one, indicate that complete polyploidization was not achieved. Instead, chimeric plants either in aerial part or in the roots were detected, that resulted from treatment of seeds in germination and from those stronger treatments (0.4 and 0.6%) applied before germination.

Estudou-se a microsporogênese de Coffea stenophylla,G. Don e de C. salvatrixSwynn et Phil, espécies diplóides de Coffea, introduzidas respectivamente da Guatemala e da Colômbia e mantidas em coleção no Instituto Agronômico de Campinas. O aspecto dos cromossomos é semelhante ao já descrito para outras espécies do gênero. O emparelhamento ocorre em todos os cromossomos, desde os estádios iniciais da prófase até a primeira metáfase; os 11 bivalentes formados separam-se normalmente nas anáfases, e os micróspores resultantes são haplóides, com n= 11 cromossomos. O comportamento cromossômico nas diversas fases da meiose é regular na maioria das células mães. O número de bivalentes com três, dois e um quiasma é, em média, 1, 4 e 6 para C. stenophyllae 1, 3 e 7 para C. salvatrix, num total de 16 e 17 quiasmas por célula, respectivamente. Parece haver em C. stenophyllavariação maior nos tipos de distribuição dos quiasmas pelos bivalentes. As irregularidades encontradas referem-se principalmente à ocorrência de monovalentes, de retardatários nas anáfases e à distribuição desigual dos cromossomos para os pólos. Discute-se a possibilidade de formação de gametas com números de cromossomos diferentes de 11 e de gametas com conjuntos não balanceados, além dos haplóides normais.

Studies on the microsporogenesis in Coffea stenophylla and C. salvatrix demonstrated that the meiotic chromosomes of both species resemble those of the other diploid species of the genus Coffea. Complete chromosome pairing was observed from early prophase till first metaphase, "with 11 bivalents being formed in most of the cells. These bivalents fall apart in a quite regular manner at the two anaphases. The average numbers of bivalents with three, two and one chiasma at first metaphase are 1, 4 and 6 por C. stenophylla and 1, 3 and 7 for C. salvatrix, the mean number of chiasmata per cell being 17 and 16 respectively. Despite of the very similar numbers of chiasmata per cell, there is a greater variation in the chiasmata distribution to the bivalents in C. stenophylla than in C. salvatrix. The irregularities observed are concerned principally to the occurrence of univalents, chromosomes lagging and unequal chromosome distribution to the poles at both anaphases. The possibility of the formation of gametes either with odd chromosome numbers or unbalanced chromosome set, besides the haploid and normal ones, is discussed.

Contagens de cromossomos foram efetuadas em endosperma de algumas espécies de Coffea, empregando-se a técnica da orceína acética, já referida em trabalho anterior. Os resultados encontrados para C. arabica (variedades typica, semperflorens, 2n = 44, e plantas monossômicas, 2n = 43) ; C. canephora, 2n = 22, C. dewevrei, 2n = 22, C. eugenioides x C. kapakata, 2n = 22 e C. eugenioides duplicado, 2n = 44, são discutidos em cada caso. Em todo o material estudado foi constatada a endomitose. O endosperma é, no início, um tecido de constituição 3x, transformando-se depois num tecido quimérico com células polissomáticas de diferentes graus. As numerosas figuras conseguidas, que permitiram contagens ou microfotografias, confirmam que, no cafeeiro, o endosperma é um material favorável para pesquisas citológicas.

Chromosome countings have been rnade on lhe endosperm of Coffea using the same technique of acetic oreein already referred to in previous work of the author. Endosperm from the varieties typica and semperflorens (2n = 44) and monosomic plants (2n = 43) of C. arabica as well as of other species as C. canephora (2n = 22), C. dewevrei (2n = 22), C. eugenioides x C. kapakata (2n = 22) and duplicated C. eugenioides (2n = 44) were studied. Gametic number of chromosomes are discussed leading in some cases to the conclusion that gametes with missing chromosomes and gametes with supernumerary chromosomes were functional. Endomitosis was observed in all material studied. Endosperm tissue is constituted, therefore, by polysomatic cells (6x, 12x) in addition to the monosomatic ones (3x) initially formed through fertilization. The possible relation of endomitosis and embryo development is also discussed. The great number of photomicrographies obtained indicates once more that coffee endosperm is a favourable material for cytological investigations.

Os cruzamentos realizados entre Coffea arabica e C. kapakata revelaram que há possibilidade de hibridação entre estas duas espécies e que o pegamento é bem mais elevado quando C. arabica é usada como planta feminina. Os resultados das hibridações realizadas, acrescidos aos já existentes sôbre a relação de compatibilidade de C. kapakata com outras espécies, vêm reforçar a sua inclusão dentro do gênero Coffea. As observações feitas na meiose de um híbrido triplóide entre C. arabica e C. kapakata demonstraram a formação de 1,33III 9,45II e 10,07I em média, para diacinese e primeira metáfase. As separações anafásicas são irregulares, bem como as tétrades produzidas. Os grãos de pólen contêm, em sua maioria, 13 a 17 cromossomos. Os híbridos triplóides são vigorosos e vêm sendo utilizados no melhoramento, visando introduzir nos cultivares de C. arabica a resistência à sêca presente em C. kapakata.

The ability of C. kapakata to cross with C. arabica was analysed in the present paper. The ratios between seed-ovules, seedling-seeds and seedling-ovules were taken into account in order to evaluate the kinhood of the two species. It was found that the crossing rate was higher when C. arabica, the tetraploid species, was used as female. In the backcrosses it was found that the hybrid could not be crossed with C. kapakata, while C. arabica crosses in both directions with the F, hybrid. The hybrids were morphologically intermediate to both species. Observations were made about the meiosis of one of the hybrids. The chromosome associations were in average 1.33III 9.45II and 10.07I, for diakinesis and first metaphase. The distribution of the chromosomes during anaphase as well as the tetrades are abnormal. The pollen grains contain more frequently from 13 to 17 chromosomes. The hybrids between C. arabica and C. kapakata have been used as bridge for transferring drought resistance of C. kapakata to the cultivars of C. arabica.

O endosperma de café foi utilizado, com sucesso, para contagens de cromossomos, tendo-se empregado a técnica da orceína acética para sua coloração. Foi possível constatar que, na variedade typica de C. arabica L., todos os endospermas examinados possuiam 3n=66 cromossomos, enquanto que endospermas com 62, 64, 66 e 68 cromossomos ocorreram em plantas monossômicas (2n=43) da referida espécie. Células poliplóides com cêrca de 128 e 132 cromossomos foram também encontradas como resultado da endomitose nesse tecido. A observação direta dos cromossomos de endosperma dá informação exata sôbre a constituição citológica dos gâmetas, inferindo-se daí a provável constituição da progênie.

The endosperm tissue of the coffee seed was used successfully for chromosome countings, acetic orcein technique having proved satisfactorily to stain the well spread metaphasic and prophasic chromosomes. Endosperms with 62, 64, 66 and 68 chromosomes occur in the monosomic plants of C. arabica (n = 43) while only endosperms with 3n = 66 are formed in the typica variety (2n = 44). Polyploid cells with 128 and 132 chromosomes were also observed and this occurrence was probably the result of endomitosis. Direct observation of endosperm chromosomes gives the real cytological constitution of fertile gametes, the probable chromosome numbers of the progeny being inferred in advance.

Dificuldades constantemente encontradas na determinação do número de cromossomos em Arachis trouxeram a necessidade de pesquisar novos métodos. Uma técnica eficiente foi então desenvolvida no laboratório de Citologia do Instituto Agronômico de Campinas e que consta do seguinte: a) pré-tratamento das raízes com solução saturada de paradiclorobenzeno à temperatura de 16 a 20°C durame 4-8 horas ou por uma solução 0,002 mo/1 de oxiquinoleína a 16°C durante 6 a 7 horas; b) hidrólise em orcenína acética (2% de orceína em ácido acético a 70%) e ácido clorídrico na proporção de 9:1; c) coloração e esmagamento em orceína acética a 1% em ácido acético a 45%. Tanto o paradiclorobenzeno como a oxiquinoleína produzem o eteito c-mitótico sôbre os cromossomos do amendoim, aumentando o número de células em metáfase e produzindo o espalhamento e o encurtamento dos cromossomos. Isso permite contá-los com a maior facilidade. São apresentados os detalhes da técnica bem como comentários sôbre o modo de ação do paradiclorobenzeno no material em questão.

The determination of the chromosome number in sections or smears of the peanut plant (Arachis hypogaea L.) is rather difficult because of the small number of cells with polar view of metaphase plates and for the tendency of the peanut chromosomes to clump together. Several techniques were tried in order to overcome these difficulties. The best results were obtained with the following method:(a) pre-treatment of the root tips in a saturated solution of paradichlorobenzene at 16-20°C for 4-8 hours or in a 0,002 M solution of oxyquinoline at 16°C for 6-7 hours; (b) hydrolysis in acetic orcein (2% orcein in 70% acetic acid) and hydrochloric acid in the proportion of 9:1; (c) smear and staining in 1% acetic orcein in 45% acetic acid,Paradichlorobenzene and oxyquinoline produce the c-mitotic effect on the chromosomes of Arachis. Consequentely the number of cells at metaphase is greatly increased and the chromosomes appear shortened and scattered throghout the cell. This makes the countings very easy. Comments about the mode of action of paradichlorobenzene on Arachis chromosomes are made and a detailed schedule of the technique is presented.

"Um híbrido natural de Coffea racemosa Lour. (2n= 22) e C. arabica L. (2n= 44) apresentou-ae com característicos intermediários entre as duas espécies e quase completamente estéril. Trata-se de planta triplóide (2n= 33), na qual se estudou a microsporogênese a fim de comparar com outros híbridos triplóides de C. arabica e C. canephora. A freqüência dos trivalentes é menor no híbrido com racemosa do que no híbrido com canephora; por outro lado, os bivalentes são mais freqüentes no híbrido com racemosa. Outras particularidades da microsporogênese são apresentadas e discutidas, porém, chega-se à conclusão de que há necessidade do conhecimento citológico e genético de outros híbridos antes que se possa confirmar ou não a posição taxonômica das espécies de café.

A natural hybrid of Coffea racemosa Lour. (2n= 22) and C. arabica L. (2n= 44) is triploid (2n= 33), intermediate in many characteristics between both species and highly sterile. Frequency of trivalents is smaller in the racemosa than in the canephora hybrid; bivalents, however, are more frequent in the racemosa hybrid. Other observations on mierosporogenesis are presented and discussed. New hybrids including other species should be obtained and studied before a definite conclusion be drawn as to taxonomical relationships of Coffea species.

Na melancia tetraplóide da variedade Keckley Sweet, observa-se ainda em estados iniciais do desenvolvimento, uma diferenciação no tamanho dos óvulos, diferenciação essa que se acentua cada vez mais. Nos óvulos maiores, a mocrosporogênese ocorre antes da abertura da flor. Quando isso se verifica, quase todos os sacos embrionários estão completos e a fertilização se dá entre 24 e 48 horas após a abertura. As primeiras divisões da célula-ôvo aparecem do 7.° dia em diante, quando o endosperma já apresenta 6 a 16 núcleos. Observou-se a formação do haustório do endosperma de forma tubular, cujo desenvolvimento é máximo cêrca de 10 dias após a abertura, ocasião em que o embrião ainda se apresenta globular. Em óvulos de 13 e 14 dias o haustório se mostra atrofiado, o embrião é cordiforme e o endosperma bastante desenvolvido. Aos 20 e 22 dias de idade, as sementes completam seu desenvolvimento, encontrando-se, de dentro para fora: o embrião tomando todo o espaço correspondente ao endosperma e ao nucelo; o nucelo, reduzido a uma película fina e transparente; finalmente, o tegumento externo, duro e bastante espêsso. Uma correlação entre o desenvolvimento do saco embrionário e o crescimento do nucelo pôde ser estabelecida. Nesta variedade de melancia, constatou-se grande eliminação de óvulos durante o processo de desenvolvimento do fruto: parte antes da fertilização, parte naqueles que foram fertilizados. Essa eliminação se traduz num atraso cada vez mais acentuado no desenvolvimento das diversas portes da semente, produzindo no fruto maduro uma série de sementes "abortadas" e "chôchas". Sòmente uma pequena fração dos óvulos se transforma em sementes normais e, em conseqüência esta forma tetraplóide apresenta poucas sementes.

Megasporogenesis, embryo-sac formation and endosperm and embryo development were studied in a tetraploid variety of watermelon which was artificially obtained some years ago at the Instituto Agronômico de Campinas, State of São Paulo. Since the first stages of embryo-sac formation the avules are of different sizes. In the "larges" ovules, megasporogenesis occurs before the opening of the flowers; almost all the ovules show complete embryo-sac at the day of anthesis and fertilization takes place 24 to 48 hours afterwards. Egg cell begins to divide about the seventh day; at this time the endosperm has about 16 nuclei. Cholozol endosperm houstorium has been detected and its maximum length is shown in ten-day ovules, in which the embryo is at a globular stage. In the ovules of 13 and 14 days it hos been observed well developed endosperm with an atrophied haustorium when present; the embryo was then heart-shaped. Completely mature seeds were found in unripe fruits 20 and 22 days old; in such seeds the embryo occupies the whole inner space before being filled by the endosperm and the nucellus; the latter is reduced to o thin and transparent envelop of the embryo; externally there is the hard and thick outer integument. A relation between the embryo-sac development and nucellar growth hos been well established. It was noticed a very large elimination of ovules during fruit formation either before or after fertilization: the ovules became more and more delayed in the development of their different parts and eventually formed a large series of "aborted" seeds in the ripe fruit. Only a small port of the ovules became normal seeds thus explaining why this tetroploid variety of watermelon shows a much smaller number of seeds than the original diploid.