RESUMO: Este estudo tem como objetivo descrever um novo método de detecção de uma reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qPCR) visando o gene da proteína da membrana externa de 28 kDa (p28), bem como comparar este método com um PCR convencional (cPCR), que visa o mesmo gene, a fim de avaliar o desempenho da técnica desenhada neste estudo na detecção de Ehrlichia canis (E. canis). As concentrações ideais de oligonucleotídeos foram alcançadas e a sensibilidade analítica e a especificidade do qPCR foram determinadas. Um total de 218 amostras de sangue total de cães foram coletadas convencionalmente para este estudo. O DNA foi extraído de cada amostra. Posteriormente, as amostras foram testadas por um cPCR estabelecido e o novo qPCR para comparar os desempenhos entre cada técnica. A curva padrão revelou 100% de eficiência e coeficiente de determinação (R2) equivalente a 99,8%. Dentre as amostras examinadas por qPCR, 24,31% foram consideradas positivas, percentual significativamente maior do que as detectadas por cPCR (15,13%). A técnica qPCR atingiu uma sensibilidade maior do que a cPCR na detecção de E. canis. A qPCR padronizada neste estudo é um método eficiente para a confirmação do diagnóstico de erliquiose monocítica canina (EMC) e pode fornecer o monitoramento de níveis de parasitemia ao longo do tratamento da doença.

ABSTRACT: This study aims to describe a new detection method of a quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) targeting the 28 kDa outer membrane protein gene (p28) as well as to compare this method with a conventional PCR (cPCR), which targets the same gene, in order to evaluate the performance of the technique designed in this study in detecting Ehrlichia canis (E. canis). Optimum oligonucleotides concentrations were reached, and the analytical sensitivity and specificity of the qPCR were performed. A total of 218 dogs’ whole blood samples were conventionally collected for this study. The DNA was extracted from each sample. Subsequently, the samples were tested by an established cPCR and the new qPCR to compare each technique’s performances. This new qPCR method for the molecular detection of E. canis presented a detection limit of ten copies of the fragment and was considered specific for E. canis according to analytical specificity analyses performed in vitro and in silico. The standard curve revealed 100% efficiency and a coefficient of determination (R2) equivalent to 99.8%. Among the samples examined by qPCR, 24.31% were considered positive, significantly greater than those detected by cPCR (15.13%). The qPCR technique reached a higher sensitivity than the cPCR when targeting the p28 gene in detecting E. canis. The qPCR standardized in this study is an efficient method for confirming canine monocytic ehrlichiosis (CME) diagnosis and might provide the parasitemia monitoring during the disease treatment.

Resumo Ornithocoris toledoi é um inseto hematófago que parasita aves, particularmente os galiformes. Embora a ocorrência deste artrópode seja relativamente baixa no país, este é um ectoparasito importante relacionado à criação rústica de galinhas. O objetivo estudo foi relatar a ocorrência de O. toledoi em uma criação rústica de galinhas no estado do Rio de Janeiro, incluindo aspectos sobre a sua identificação taxonômica, biologia e epidemiologia.

Abstract Ornithocoris toledoi is a hematophagous insect that parasites birds, particularly, galliformes. Although the occurrence of this arthropod is relatively low in Brazil, this is an important ectoparasite associated with backyarding poultry. The objective of this study was to report the occurrence of O. toledoi in a free-range chicken farm in the state of Rio de Janeiro, Brazil, including aspects of its taxonomic identification, biology and epidemiology.

Resumo Este estudo teve por objetivo detectar Mycoplasma spp. em gatos naturalmente infectados do Rio de Janeiro e avaliar as alterações hematológicas e fatores associados à infecção. Dos 197 gatos amostrados, 11,2% apresentaram estruturas compatíveis com hemoplasmas em esfregaços de sangue. Em contraste, 22,8% foram positivas para Mycoplasma spp. por meio da reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR), baseado no gene 16S rRNA, o que reflete a fraca concordância entre as técnicas. As taxas de infecção, por meio da reação em cadeia da polimerase convencional baseada no gene 16S rRNA, foi de 4,6%, 4,6% e 11,7% para Mycoplasma haemofelis (Mhf), 'Candidatus Mycoplasma turicensis' (CMt) e 'Candidatus Mycoplasma haemominutum' (CMhm), respectivamente. Infecção por Mhf e CMhm foram mais frequentes no verão (p> 0,05). Anemia (p<0,02), linfocitose (p<0,03), trombocitopenia (p<0,04), e presença de monócitos ativados (p<0,04) foram associados à infecção por Mhf. Nenhuma alteração hematológica foi associada à infecção por CMt ou CMhm. Gatos machos estão mais propensos à infecção por Mhf ou CMhm (p<0,01). Gatos adultos têm maiores chances de se infectarem por CMhm. Há ocorrência de três espécies de hemoplasmas na Região Metropolitana do Rio de Janeiro e Mhf parece ser o mais patogênico, tendo a anemia como principal alteração hematológica.

Abstract This study aimed to detect Mycoplasma spp. in naturally infected cats from Rio de Janeiro and to evaluate hematological abnormalities and factors associated with this infection. Out of the 197 cats sampled, 11.2% presented structures compatible with hemoplasma organisms on blood smears. In contrast, 22.8% were positive for Mycoplasma spp. by means of 16S rRNA gene real-time polymerase chain reaction, which reflects the weak concordance between techniques. The infection rates, by means of 16S rRNA gene conventional polymerase chain reaction, was 4.6%, 4.6% and 11.7% for Mycoplasma haemofelis (Mhf), ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’ (CMt) and ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ (CMhm), respectively. Mhf and CMhm infections are more frequent in the summer (p>0.05). Presence of anemia (p < 0.02), lymphocytosis (p < 0.03), thrombocytopenia (p < 0.04) and activated monocytes (p < 0.04) was associated with Mhf infection. No hematological abnormality was associated with CMt or CMhm infection. Male cats were more prone to be infected by Mhf or CMhm (p < 0.01). Adult cats had more chance to be infected by CMhm. Three hemoplasma species occur in the metropolitan region of Rio de Janeiro and Mhf seems to be the most pathogenic of them. Anemia is the most important hematological abnormality.

The bovine anaplasmosis is a disease of cattle caused by the rickettsia Anaplasma marginale. The major surface proteins encoded by genes with conserved sequences are potential candidates for vaccines. Among these proteins, MSP1a is expressed by a single copy gene (msp1a). The molecular weight of MSP1a varies among A. marginale isolates from different geographical regions due to the presence, in a variable number, of a sequence of 28-29 amino acids in tandem repeats. In the present study, the sequences of the repeats and of the microsatellite of the protein MSPla of two isolates of A. marginale from bovines in a farm of the Cuban western region were examined. Both isolates belongs to the genotype G, and the isolate 21G presented the repeats T-B-B-C and the 25G of the types T-C. The analysis of these repeated sequences are very important because they include markers for transmissibility by ticks and are of great value for the future development of a vaccine candidate against this hemoparasite.

La anaplasmosis bovina es una enfermedad causada por la rickettsia Anaplasma marginale. Las principales proteínas de superficie de esta bacteria, codificadas por genes con secuencias conservadas, constituyen candidatos potenciales para vacunas. Dentro de estas proteínas, MSP1a se expresa por un gen de simple copia (msp1a) y su peso molecular varía entre aislados de A. marginale de diferentes regiones geográficas debido a la presencia, en número variable, de una secuencia de 28-29 aminoácidos repetida en tándem. En el presente estudio se analizaron las secuencias de los repetidos y del microsatélite de la proteína MSP1a de dos aislados de A. marginale provenientes de bovinos de una granja de la región occidental de Cuba. Ambos aislados pertenecen al genotipo G y el aislado 21G presenta los repetidos T-B-B-C y el 25G los tipos T-C. El análisis de estas secuencias repetidas resulta muy importante, pues incluyen marcadores para la transmisibilidad por garrapatas y son de gran valor para el desarrollo de un futuro candidato vacunal contra este hemoparásito.

Resumo Este estudo investigou a ocorrência de anticorpos anti-Neospora caninum e anti-Toxoplasma gondii por ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) e reação de imunofluorescência indireta (RIFI), assim como os fatores de risco associados à toxoplasmose e à neosporose em 204 cães provenientes de áreas urbana e rural do município de Araguaína, Estado de Tocantins, Brasil. Cento e trinta amostras (63,7%) foram positivas para T. gondii, destas 57,1% e 70,7% oriundas de áreas urbanas e rurais, respectivamente. Considerando-se o teste RIFI, a frequência de soropositividade para T. gondii foi de 57,4% com distribuição de 62,6% e 52,4% entre áreas rurais e urbanas, respectivamente. Fatores associados à toxoplasmose canina foram raça e idade, com soropositividade maior para animais mais velhos (p<0,05). Em relação à N. caninum, 88 (43,1%) amostras foram positivas, segundo ELISA, sendo distribuídas em 42,9% para área urbana e 43,3% para área rural. Por meio da RIFI, anticorpos anti-N. caninum foram detectados em 62 (30,4%) cães, sendo distribuídos em 31,3% e 29,5% entre áreas rurais e urbanas, respectivamente. Os fatores associados à ocorrência de neosporose, pela RIFI, foram idade e raça (p<0,05). Este estudo representa a primeira detecção de anticorpos IgG para toxoplasmose e neosporose canina no Estado de Tocantins e evidencia a importância de cães na cadeia epidemiológica dessas doenças.

Abstract This study investigated occurrences of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii IgG antibodies by means of the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and indirect immunofluorescence assay (IFAT), along with risk factors associated with toxoplasmosis and neosporosis, in 204 dogs from urban and rural areas of the municipality of Araguaína, state of Tocantins, Brazil. One hundred and thirty samples (63.7%) were positive for T. gondii using ELISA: 57.1% and 70.7% in the urban and rural areas, respectively. The seropositivity frequency for T. gondii observed through IFAT was 57.4%, distributed between rural and urban areas as 62.6% and 52.4%, respectively. The factors associated with canine toxoplasmosis were age and breed (p<0.05). In relation to N. caninum, 88 samples (43.1%) were positive, according to ELISA, distributed as 42.9% in urban areas and 43.3% in rural areas. Anti - N. caninum antibodies were detected through IFAT in 62 dogs (30.4%), distributed as 31.3% and 29.5% between rural and urban areas, respectively. Age and breed were associated with neosporosis occurrence (p<0.05) by IFAT. This study provides the first detection of IgG antibodies for canine toxoplasmosis and neosporosis in the state of Tocantins and highlights the importance of dogs in the epidemiological chain of these diseases.

From the sequencing of the entire genome of Anaplasma marginale isolates, genes encoding membrane proteins of this hemoparasite have been identified, as well as novel immunogens as potential vaccine candidates. However, little is known about the genetic variability of genes encoding membrane proteins of Anaplasma marginale isolates. The aim of this study was to determine the degree of conservation of the genes encoding the VirB9, VirB10 proteins, conjugal transfer protein (CTP) and the elongation factor ( Ef- Tu) in the nucleotide sequence of a Cuban Anaplasma marginale isolate and from the deduced amino acid sequence and compare them with those described for Florida and Saint Maries Anaplasma marginale isolates and Anaplasma (centrale) marginale from Israel . The gene and deduced amino acid sequences showed high degree of identity with the sequences described for other isolates of Anaplasma marginale.

A partir de la secuenciación del genoma completo de aislamientos de Anaplasma marginale, se ha logrado la identificación de genes que codifican para proteínas de membrana de este hemoparásito y la identificación de nuevos inmunógenos, como posibles candidatos vacunales. Sin embargo, se conoce poco acerca de la variabilidad genética de genes que codifican para proteínas de membrana de aislamientos de Anaplasma marginale. El objetivo del presente estudio fue determinar el grado de conservación en la secuencia nucleotídica de los genes que codifican para las proteínas VirB9, VirB10, la proteína conjugal de transferencia (CTP) y el factor de elongación -Tu (Ef-Tu) de un aislamiento cubano de Anaplasma marginale, así como de la secuencia deducida de aminoácidos, y compararlas con las descritas para los aislamientos Florida y Saint Maries de Anaplasma marginale y el aislamiento Israel de Anaplasma (centrale) marginale. La secuencia de los genes y la secuencia deducida de aminoácidos mostraron alto grado de identidad con las secuencias descritas para otros aislamientos de Anaplasma marginale.

O objetivo deste estudo foi avaliar os fatores associados á infestação por Amblyomma cajennense em equinos em duas microrregiões do estado do Rio de Janeiro. Equinos de 62 fazendas nos municípios das microrregiões de Itaguaí e Serrana foram avaliados entre janeiro e maio de 2009. Os animais foram inspecionados quanto á presença e ao nível de infestação destes carrapatos. As condições de criação e o manejo foram avaliados em cada propriedade, por um questionário epidemiológico. Dos 635 equinos avaliados, 41,6% apresentavam-se infestados por A. cajennense. Observou-se que as criações dos animais em regiões de baixas altitudes (OR=3,69, IC: 2,3-5,8), em propriedades com manejo zootécnico e sanitário insatisfatório (OR=5,92, IC: 3,8-9,2) e em sistema de criação extensivo (OR=4,25, IC: 2,1-8,5) foram fatores associados (p < 0,05) á infestação, sendo também relacionados á intensa infestação nos equinos. O uso de carrapaticida nos equinos também apresentou associação (p < 0,05) á infestação, sendo descritas pelos proprietários, diferentes condutas terapêuticas, em intervalos alternados de tratamento. Baixas altitudes, condição de manejo insatisfatória, criação extensiva e o uso inadequado dos produtos carrapaticidas são fatores associados á ocorrência de A. cajennense em diferentes níveis de infestação nos equinos dos municípios estudados.

The objective of this study was to evaluate factors associated with infestation by Amblyomma cajennense on horses in two microregions of the state of Rio de Janeiro. Horses on 62 farms in the municipalities of the Itaguaí and Serrana microregions were evaluated between January and May 2009. The animals were examined to determine the presence of ticks and infestation level. The animals' rearing and management were assessed on each farm property using an epidemiological questionnaire. Out of the 635 horses evaluated, 41.6% were infested with A. cajennense. It was observed that farms in low-altitude regions (OR=3.69; CI: 2.3-5.8), with unsatisfactory zootechnical and sanitary management (OR=5.92; CI: 3.8-9.2) and an extensive rearing system (OR=4.25; CI: 2.1-8.5) were factors associated with tick infestation (p < 0.05) and also with cases of high infestation on horses. Use of chemical acaricides on horses was also associated with infestation (p < 0.05); the owners described different therapeutic approaches with different treatment intervals. From the present study, low altitudes, unsatisfactory management, extensive rearing and inappropriate use of acaricide products were factors associated with occurrences of A. cajennense at different infestation levels on horses in these municipalities.

Este estudo avaliou os fatores associados à frequência de anticorpos específicos para Leishmania spp. em cães domiciliados na microrregião de Itaguaí, Rio de Janeiro. Foram colhidas amostras de sangue de 524 cães. As amostras de soro foram submetidas a reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e ensaio imunoenzimático indireto (ELISA-teste) para Leishmania spp. A frequência de cães soropositivos foi de 28,24% (n = 148) na microrregião e, entre os três municípios avaliados, a maior frequência (p < 0,05) foi observada em Seropédica (59,46%), seguida de Itaguaí (29,05%) e Mangaratiba (11,49%). Em relação aos fatores associados ao hospedeiro, observou-se que cães sem raça definida e aqueles com idade acima de dois anos apresentaram maior frequência de anticorpos para Leishmania spp. (p < 0,05). Em relação aos fatores relacionados ao ambiente e ao hábito do animal, os cães residentes em áreas rurais (RF = 1,67, p = 0,0002), animais que vivem fora da residência (RF = 1,42, p = 0,0197), com acesso à mata, córregos e pastagens (FR = 2,81, p = 0,0007), que permanecem soltos (RF = 1,66, p = 0,0073), e aqueles que não possuem abrigo (RF = 2,16, p < 0,0001) apresentaram maior chance de serem soropositivos. A leishmaniose canina é uma enfermidade com elevada ocorrência na microrregião de Itaguai, e aspectos como definição racial, idade, hábitos e cuidados estabelecidos pelo proprietário mostraram associação significativa nessa microrregião.

This study evaluated factors associated with the frequency ofLeishmania spp. antibodies in dogs residing in the Itaguai micro-region, State of Rio de Janeiro, Brazil. Blood samples were collected from 524 dogs. The serum samples were submitted to indirect fluorescent antibody test (IFAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) forLeishmania spp. The frequency of seropositive dogs was 28.24% (n = 148) in the micro-region, and among the three municipalities within that region, the highest frequency (p < 0.05) was observed in Seropedica (59.46%), followed by Itaguai (29.05%) and Mangaratiba (11.49%). Regarding factors associated with the host, mongrel dogs and those over the age of two presented higher frequency of antibodies to Leishmaniaspp. (p < 0.05). Concerning factors related to the environment and habits of the animal, dogs residing in rural areas (FR = 1.67, p = 0.0002), living outside the residence (FR = 1.42, p = 0.0197), with access to forest, streams and pastures (FR = 2.81, p = 0.0007), remaining loose (FR = 1.66, p = 0.0073), and those that had no shelter (FR = 2.16, p < 0.0001) were more likely to be seropositive. Canine leishmaniasis is a disease with high occurrence in the Itaguai micro-region, and aspects such as the definition of breed, age, habits and care by owners showed significant association in this micro-region.

Rangelia vitalii é um protozoário que infecta cães e foi descrito nas regiões Sul e Sudeste do Brasil. R. vitalii é filogeneticamente próxima à Babesia spp., mas dados deste misterioso parasito ainda são escassos. O objetivo deste trabalho foi detectar a presença de piroplasmas em cães naturalmente infectados no estado do Rio de Janeiro, através da amplificação do gene 18S rRNA pela PCR, clivagem com enzimas de restrição (RFLP) e caracterização genética através do sequenciamento. De 103 cães, sete (6,8%) foram positivos para Babesia spp. pela PCR. Os produtos amplificados foram digeridos por enzimas de restrição para a diferenciação das espécies de Babesia e uma amostra foi identificada como Babesia vogeli. O padrão de amplificação observado nas outras seis amostras não correspondeu ao padrão descrito para babesias que infectam cães. O sequenciamento das seis amostras confirmou ser uma espécie geneticamente idêntica a R. vitalii apresentando grande homologia (99-100%) com a sequência do sul do Brasil. Este estudo confirma a presença de Babesia vogeli e Rangelia vitalii infectando cães em Teresópolis, Rio de Janeiro, Brasil.

Rangelia vitalii is a protozoon described from dogs in the south and southeast regions of Brazil. It is phylogenetically related to Babesia spp. that infects dogs, but data on this enigmatic parasite is still limited. The aim of this work was to detect piroplasm species in dogs in the state of Rio de Janeiro, Brazil, by 18S rRNA gene-based PCR assay, restriction fragment length polymorphism (RFLP) and sequence analyses. Of 103 dogs examined, seven (6.8%) were positive for Babesia spp. by PCR. The amplified products were digested by restriction enzymes to differentiate the Babesia species, and one sample was identified as Babesia vogeli. The pattern observed for the other six amplification products did not match with pattern described for large Babesia infecting dogs. Sequencing analysis confirmed these six samples as R. vitalii, with high homologies (99-100%) with a sequence from south Brazil. This study confirms the presence of Babesia vogeli and Rangelia vitalii circulate in domestic dogs in Teresópolis, Rio de Janeiro, Brazil.

O objetivo do presente estudo foi investigar a soroprevalência de anticorpos da classe IgG contra Anaplasma marginale em bovinos de corte da região Sul de Moçambique. Para esse efeito, 809 amostras de soro foram coletadas e avaliadas pelo ensaio imunoadsorção enzimático indireto (ELISA-i). O teste Qui-Quadrado, a 5% de significância, foi utilizado para avaliar a associação entre a soroprevalência e as variáveis sexo, idade e origem geográfica dos animais. A soropositividade geral foi de 76,5% (n = 619), e anticorpos anti-A. marginale foram detectados em 89,1% (n = 156), 68,4% (n = 308) e 84,2% (n = 155) dos animais nas províncias de Maputo, Gaza e Inhambane, respectivamente. Uma associação significativa (p < 0,05) foi observada entre a origem geográfica dos animais, enquanto o sexo não demonstrou uma relação significativa. A frequência de soropositivos com relação à faixa etária foi de 63,2% (n = 72), 80,0% (n = 92), 83,1% (n = 98) e 77,3% (n = 357) para animais de <12; >12 a <24; >24 <36; >36 meses, respectivamente. Os resultados demonstram que, no Sul de Moçambique, existem áreas de estabilidade enzoótica para A. marginale, em animais maiores de 12 meses. Assim, monitoramento epidemiológico deve ser realizado para o acompanhamento do status imunológico dos animais na região.

The current study aimed to investigate the seroprevalence of IgG antibodies to Anaplasma marginale in cattle from Maputo, Gaza and Inhambane provinces, south Mozambique. A total of 809 serum samples from cattle were obtained and tested by indirect enzyme-linked immunosorbent assay (i-ELISA). The chi-square test at 5% significance was used to assess the association between seroprevalence and the variables gender, age and geographic origin of animals. The overall seropositivity was 76.5% (n = 619) and anti-A. marginale antibodies were detected in 89.1% (n = 156), 68.4% (n = 308) and 84.2% (n = 155) of the animals in the provinces of Maputo, Gaza and Inhambane, respectively. A significant association (p < 0.05) was found with the geographic origin of the animals, while sex had no significant relationship. The frequencies of seropositive in the age groups were 63.2% (n = 72), 80.0% (n = 92), 83.1% (n = 98) and 77.3% (n = 357) for animals <12; >12 and <24; >24 and <36; >36 months, respectively. These results indicate that in southern Mozambique there are areas of enzootic stability to A. marginale. Thus, epidemiological monitoring is required to monitor the immune status of animals in the region.

A neosporose e a toxoplasmose são doenças parasitárias que podem causar problemas reprodutivos em caprinos e ovinos. O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de anticorpos IgG anti-Neospora caninum e anti-Toxoplasma gondii em caprinos e ovinos dos municípios de Amarante do Maranhão e Buritirana, microrregião de Imperatriz, Oeste maranhense, Nordeste do Brasil, bem como avaliar fatores associados à infecção por esses agentes etiológicos. Amostras de sangue de 110 animais (46 caprinos e 64 ovinos), provenientes de cinco propriedades, foram coletadas, e a reação de imunofluorescência indireta utilizada para o diagnóstico sorológico. Das 46 amostras de caprinos, 17,39% (n = 8) apresentaram anticorpos anti-N. caninum e 4,35% (n = 2) anti-T. gondii, enquanto das 64 amostras de ovinos, 4,69% (n = 3) e 18,75% (n = 12) apresentaram anticorpos anti-N. caninum e anti-T. gondii, respectivamente. Não houve diferença significativa, considerando-se a presença de gato e/ou cão na propriedade e assistência veterinária para ambos os agentes estudados. Entretanto, suplementação alimentar e presença de animais com problemas reprodutivos diferiram significativamente (p < 0,05) em ovinos e caprinos, respectivamente. Os resultados do presente estudo demonstraram que caprinos e ovinos, da região Oeste do Maranhão são expostos aos coccídios N. caninum e T. gondii. Essa é a primeira evidência desses agentes em pequenos ruminantes nessa região.

Neosporosis and toxoplasmosis are parasitic diseases which can cause reproductive problems in goats and sheep. The current study aimed to determine the occurrence of anti-Neospora caninum and anti-Toxoplasma gondii IgG antibodies in goats and sheep from the districts of Amarante do Maranhão and Buritirana, Imperatriz microregion, western area of Maranhão State, northeastern Brazil, and to assess factors associated to infection by these etiologic agents. Blood samples from 110 animals (46 goats and 64 sheep) from five herds were collected, and indirect immunofluorescence assay was used for serological testing. Of 46 goat samples, 17.39% (n = 8) showed anti-N. caninum antibodies and 4.35% (n = 2) anti-T. gondii, while of 64 sheep samples 4.69% (n = 3) and 18.75% (n = 12) showed anti-N. caninum and anti-T. gondii antibodies, respectively. No significant difference regarding the presence of domestic cats and/or dogs on the property and veterinary care was seen for both etiologic agents studied. However, food supplementation and animal reproductive failure were significantly (p < 0.05) for N. caninum among sheep and goats, respectively. The current study showed that goats and sheep in western Maranhão are exposed to N. caninum and T. gondii. It is the first evidence of these agents in small ruminants in this region.

Amostras de soro de 714 equídeos das microrregiões de Itaguaí e Serrana, Rio de Janeiro, Brasil, foram submetidas ao teste de imunofluorescência indireta (título 1:80) para Theileria equi. A prevalência entre as microrregiões e os fatores associados à soropositividade foram avaliados e a razão de prevalência (RP) calculada. A prevalência geral para T. equi foi de 81,09% (n = 579), com maior prevalência (p < 0,05) para microrregião de Itaguaí (85,43%), quando comparado a Serrana (76,92%). A região, altitude, nível da propriedade e origem dos equídeos foram associados (p < 0,05) com a soropositividade para T. equi. Equídeos criados na microrregião de Itaguaí (RP = 1,11; p = 0,003) e em altitudes abaixo de 500 m (RP = 1.10; p = 0,014) apresentaram maior chance de se tornarem soropositivos para T. equi. Além disso, quando são criados em propriedades de nível ruim (RP = 1,13; p = 0,018) e nascidos na propriedade (RP = 1,10; p = 0,008) apresentaram mais chance de terem contato com T. equi. As principais espécies de carrapatos encontradas parasitando os equídeos foram Amblyomma cajennense e Dermacentor (Anocentor) nitens. As microrregiões estudadas são endêmicas para theileriose equina e de estabilidade enzoótica para T. equi. Apenas os fatores relacionados à área de coleta das amostras de soro influenciaram a soropositividade dos equídeos para T. equi naquela região.

Serum samples from 714 equids of Itaguaí and Serrana microregions, Rio de Janeiro, southeastern Brazil, were examined by indirect fluorescent antibody test (titer 1:80) for Theileria equi. The prevalence in the microregions and factors associated with seropositivity were evaluated and the prevalence ratio (PR) calculated. The overall prevalence of T. equi infection was 81.09% (n = 579), with higher prevalence (p < 0.05) in the Itaguaí (85.43%) when compared to Serrana microregion (76.92%). The geographic area, altitude, farming condition and area of origin of equids were associated (p < 0.05) with seropositivity for T. equi. Equids reared in the Itaguaí microregion (PR = 1.11, p = 0.003) and at altitudes below 500 m (PR = 1.10; p = 0,014) were more likely to be seropositive for T. equi. Furthermore, when equids were born in the farm (PR = 1.10, p = 0.008) and reared with poor farming conditions (PR = 1.13, p = 0.018) they were more likely to be exposed to T. equi. The main ticks found on equids were Amblyomma cajennense and Dermacentor (Anocentor) nitens. The microregions studied are endemic areas for equine theileriosis and there exists enzootic stability for T. equi. Only factors related to the collection area of serum samples influenced the seropositivity of equids for T. equi in that region.

Os parâmetros do ciclo biológico de Argas (Persicargas) miniatus, fase adulta, foram estudados em condições controladas (27±1°C e 80±10% UR) e em condições ambientais não controladas (ambiente de laboratório nas estações chuvosa e seca). Nessas condições, os machos se originaram preferencialmente de N2 e as fêmeas de N3. As fêmeas realizaram até 18 posturas (em condições controladas), enquanto que as fêmeas mantidas nas estações chuvosa e seca realizaram até 9 e 12 posturas, respectivamente. O número total de ovos foi 1350 (em condições controladas), 443 ovos na estação chuvosa e 894 ovos na estação seca. Em jejum, os carrapatos machos sobreviveram por 165 dias (condições controladas) e 135 dias em ambiente de laboratório; as fêmeas sobreviveram por 300 dias em condições controladas e 240 dias no ambiente de laboratório. Nas condições ambientais não controladas, os parâmetros biológicos do estágio adulto de Argas (Persicargas) miniatus sofreram alterações negativas, principalmente durante a estação chuvosa.

The life cycle of Argas (Persicargas) miniatus in adult stage was studied in controlled conditions (27±1°C and 80±10% RH) and uncontrolled temperature and humidity conditions (room conditions during wet and dry season). Males originated preferentially from N2 and females from N3. Females in controlled conditions laid eggs up to 18 times, while females in uncontrolled room conditions, during wet and dry seasons, laid eggs 9 to 12 times, respectively. In controlled conditions, females laid 1350 eggs, whereas in uncontrolled conditions females laid 443 eggs during the wet season and 894 eggs during the dry season. Male ticks survived without feeding for 165 days in controlled conditions and 135 days in uncontrolled conditions, while females survived for 300 days in controlled conditions and 240 days in uncontrolled conditions. In ambient conditions, biological parameters of Argas (Persicargas) miniatus adult stage were negatively affected especially during the wet season when compared with adult stage kept in controlled condition.

Os aspectos biológicos de ninfas de primeiro e segundo instares de Argas (Persicargas) miniatus quando submetidas a diferentes períodos de jejum (15, 30 e 60 dias), foram estudados em estufa climatizada (27 ± 1 ºC e 80 ± 10% de umidade relativa) e em ambiente de laboratório. Ninfas de primeiro instar que foram submetidas a um período de jejum de 15 e 30 dias mudaram para ninfas de segundo e terceiro instar, em ambas as condições estudadas. No período de 60 dias de jejum verificou-se mortalidade de 28 e 37% das ninfas de primeiro instar, em estufa climatizada e em ambiente de laboratório, respectivamente. As ninfas sobreviventes não se fixaram sobre os hospedeiros. As ninfas de segundo instar, após 60 dias de jejum, desenvolveram-se em ninfas de terceiro instar ou machos, quando alimentadas em Gallus gallus. Ainda neste grupo, as ninfas de terceiro instar mudaram para adultos (42,42 e 40,54% machos; 36,36 e 48,65% fêmeas, nas condições ambiente de laboratório e estufa climatizada, respectivamente) e o restante desenvolveu-se em ninfas de quarto instar que por sua vez mudaram para fêmeas. Então, a situação de jejum (60 dias) em que as ninfas foram submetidas determinou o número de ninfas no ciclo biológico de A. miniatus, sob as condições experimentais estudadas.

The current study investigated the biology of nymphs of the first and second instars of Argas (Persicargas) miniatus. Nymphs were deprived of food for 15, 30 or 60 days and held at 27 ± 1 ºC and 80 ± 10% relative humidity (controlled conditions) or at room conditions of temperature and relative humidity. Nymphs of first instar deprived of food for 15 or 30 days molted to second and third instars in both controlled and room conditions. Nymphs of the first instar deprived of food for 60 days had 28 and 37% mortality in controlled and room conditions, respectively; and survivors did not attach to the host. Nymphs of the second instar, deprived of food for 60 days, molted either to the third instar or to males after feeding on Gallus gallus, and the nymphs of the third instar developed to adults (42.42% males and 36.36% females when nymphs were held in controlled temperature and humidity conditions, and 40.54% males and 48.65% females when nymphs were held in room conditions). The remainder of the nymphs molted to the fourth instar and then molted to females. In conclusion, the nymphal starvation period of 60 days determined the number of nymph instars in the life cycle of A. miniatus under the experimental conditions studied.

Este estudo descreve características biológicas da fase parasitária de Rhipicephalus (Boophilus) microplus em equinos experimentalmente infestados. Quatro equinos foram infestados experimentalmente inicialmente com 20.000 e, posteriormente, três vezes com 40.000 larvas. Em todas as infestações, os animais desenvolveram intensa reação cutânea no local de fixação das larvas, caracterizadas pelo intenso prurido local e pela elevação do pelo, seguida por áreas de alopecia com lesões ulceradas circunscritas. Foi observada mortalidade aproximada de 90% e 60% para larvas e ninfas, respectivamente. Na infestação inicial com 20.000 larvas, nenhuma fêmea ingurgitada ou semi-ingurgitada foi recuperada. Após três infestações realizadas com 40.000 larvas de R. microplus, dois equinos foram considerados resistentes à infestação por não terem sido recuperadas nenhuma fêmea ingurgitada ou semi-ingurgitada. Um equino foi considerado moderadamente resistente, do qual um número pequeno de fêmeas semi-ingurgitadas foi recuperado e um susceptível, no qual R. microplus completou seu ciclo parasitário com mortalidade de 30% dos adultos e duração média da fase parasitária de 33,3; 36,9 e 38,5 dias, respectivamente nas três infestações realizadas com 40.000 larvas. A taxa de recuperação das fêmeas variou entre 0,9% e 1,8%. Este estudo mostra que é possível estudar a biologia de R. microplus em equinos, a partir de infestações experimentais de R. microplus. Contudo, o número de larvas a ser usado para infestação e a existência de equinos susceptíveis e resistentes devem ser considerados.

This study describes biological characteristics of Rhipicephalus (Boophilus) microplus in the parasitic phase from equines experimentally infested. Four equine were experimentally infested, initially with 20,000 and then, in a sequence of three times with 40,000 larvae each. In all infestations the animals developed intense cutaneous reaction on the larvae fixation area. This reaction was characterized by intense local itch and hair elevation, followed by alopecic areas, with bounded ulcerated lesions. Larvae and nymphs mortality was nearly 90% and 60%, respectively. From the initial infestation, none engorged or semi-engorged female was recovered. After infestations accomplished with 40,000 larvae of R. microplus, two equines were considered resistant to the infestation, because none engorged or semi-engorged female was recovered. One equine was considered moderately resistant, since a few semi-engorged female were recovered. One equine was considered susceptible. In this last one, R. microplus completed its parasitic cycle with 30% of adult mortality. The average period of parasitic phase were 33.3; 36.9 and 38.5 days, respectively, to three infestations accomplished with 40,000 larvae. Recovery rates of engorged female ranged from 0.9% to 1.8%. This research shows that it is possible to study the R. microplus biology from experimental infestations in equine. However, the number of larvae used for infestation, as well as the existence of susceptible and resistant equines should be considered.