RESUMO A mancha foliar causada por Exserohilum turcicum é uma importante doença em milho, cuja severidade depende mais do crescimento da lesão do que do número. O objetivo deste trabalho foi caracterizar sítios de infecção de E. turcicum em milho resistente e suscetível com base em análises histológicas, mecanismos estruturais e bioquímicos. As folhas foram inoculadas em pontos específicos utilizando microcâmara de inoculação. Foram coletadas amostras para acompanhar o desenvolvimento fúngico e lignificação utilizando microscopias ótica e eletrônica de varredura (MEV), além da atividade específica e padrão eletroforético de peroxidase. Os tempos de germinação de esporos e formação de apressórios foram praticamente iguais para os genótipos suscetível e resistente, no entanto, com relação à penetração, houve um atraso de 12 h no genótipo resistente, acompanhada pela lignificação do tecido hospedeiro, o que não ocorreu no genótipo suscetível. A análise por MEV mostrou micélio nos vasos do xilema em ambos os genótipos, entretanto, no resistente, a colonização do patógeno foi restrita às células do mesófilo ao redor da área de penetração, onde foram produzidos pontos cloróticos. No genótipo suscetível, após a penetração e formação de manchas cloróticas, o patógeno continuou crescendo dentro dos vasos do xilema e foi capaz de colonizar o tecido do mesófilo distante da área de penetração, dando origem a lesões necróticas. O padrão eletroforético de peroxidases foi semelhante nos dois genótipos, com três isoenzimas em todos os tecidos amostrados. Duas novas isoenzimas foram detectadas em pontos cloróticos, lesões necróticas e tecido verde em torno das lesões.

ABSTRACT Northern leaf blight caused by Exserohilum turcicum is an important disease of maize (Zea mays L.), and its severity depends more closely on growth lesions than on spot number. Here, we characterized the infection sites of E. turcicum on resistant and susceptible maize genotypes by analyzing the histology of lesions as well as the structural and biochemical mechanisms of infection. Maize leaves were inoculated with the pathogen at specific points and incubated in a microhumidity chamber. Samples were obtained to follow fungal development and host tissue lignification using light and electron microscopy, and the activity and electrophoretic patterns of peroxidases were determined. The time course of spore germination and appressorium formation was essentially the same for both genotypes; however, a delay of 12 h in fungal penetration, accompanied by host tissue lignification, was noted in the resistant genotype, as opposed to that in the susceptible one. Scanning electron microscopy revealed fungal mycelium in the xylem vessels of both genotypes; however, in the resistant genotype, pathogen colonization was restricted to mesophyll cells around the penetration point, where chlorotic flecks were produced. Meanwhile, in the susceptible genotype, following penetration and chlorotic fleck formation, the pathogen continued to grow inside the xylem vessels and profusely colonized mesophyll tissue distant from the penetration point, resulting necrotic lesion development. Electrophoretic patterns of peroxidases were similar between the two genotypes, with three isoenzymes present in all tissues. In addition, two novel isoenzymes were detected in chlorotic flecks, necrotic lesions, and green tissue around the lesions.

RESUMO Devido ao impacto ambiental gerado pelo uso indiscriminado de fungicidas, busca-se novas alternativas para o controle das doenças, como a utilização de nutrientes, os quais podem inibir o desenvolvimento de patógenos ou diminuir a suscetibilidade da planta a doenças. O objetivo deste trabalho foi verificar se produtos à base de cálcio, cobre, manganês e zinco inibem a germinação de esporos de Puccinia sorghi, Cercospora sp. e Exserohilum turcicum. Foram realizados dois experimentos: o primeiro com meio de cultura ágar-água, onde os tratamentos e os esporos foram colocados no mesmo momento; e o segundo utilizando folhas de milho como substrato, onde os tratamentos foram administrados zero, uma, duas, três, quatro e cinco horas após os esporos serem pulverizados. Utilizou-se como tratamentos produtos à base de cálcio, cobre, manganês e zinco na forma de quelato 15%, 5%, 15% and 10%, fungicida (estrobilurina e triazol, 20% azoxistrobin and 8% ciproconazole + triazol, 25% propiconazole) e água destilada. Realizou-se a contagem dos esporos 24 horas após a aplicação dos tratamentos. Para o primeiro ensaio, os quelatos apresentaram, em média, redução de 39%, tanto na germinação de esporos de P. sorghi quanto de Cercospora sp.. Para o segundo experimento, os mesmos patógenos tiveram redução média de 52%, 59%, 77%, 87%, 81% e 64% para P. sorghi e 40%, 33%, 17%, 18%, 4% e 2% para Cercospora sp., ambos nos tempos, zero, 1, 2, 3, 4 e 5 horas após o tratamento, respectivamente. Para E. turcicum não houve efeito inibitório em nenhum ensaio. Conclui-se que os metais na forma de quelato testados apresentam atividade antifúngica a P. sorghi e Cercospora sp..

ABSTRACT Due to the environmental impact generated using fungicides, new alternatives for disease control have been arising, such as the use of nutrients that may act on the development of certain pathogens or decrease the host susceptibility to diseases. The objective of this work was to verify if chelates of calcium, copper, manganese and zinc inhibit the germination of Puccinia sorghi, Cercospora sp. and Exserohilum turcicum spores. Two experiments were carried out: the first with agar-water culture medium, where the treatments and spores were placed at the same moment and the second using corn leaves as substrate, where treatments were administered zero, one, two, three, four and five hours after the spores are sprayed. Calcium, copper, manganese and zinc products were used as treatments in the form of chelate 15%, 5%, 15% and 10%, fungicide (strobilurine and triazole, 20% azoxistrobin and 8% ciproconazole + triazole, 25% propiconazole) and distilled water. The spores were counted 24 hours after the application of the treatments. In the first experiment, chelates showed an average reduction of 39% in both germination of P. sorghi and Cercospora sp. spores. For the second assay, the same pathogens had a mean reduction of 52%, 59%, 77%, 87%, 81% and 64% for P. sorghi and 40%, 33%, 17%, 18%, 4% and 2% for Cercospora sp., both at zero, 1, 2, 3, 4 and 5 hours after treatment, respectively. E. turcicum had no inhibitory effect under treatments. The metal-chelates tested were fungitoxic to P. sorghi and Cercospora sp. spores.

Abstract Endogenous viral elements (EVEs) are the result of heritable horizontal gene transfer from viruses to hosts. In the last years, several EVE integration events were reported in plants by the exponential availability of sequenced genomes. Eucalyptus grandis is a forest tree species with a sequenced genome that is poorly studied in terms of evolution and mobile genetic elements composition. Here we report the characterization of E. grandis endogenous viral element 1 (EgEVE_1), a transcriptionally active EVE with a size of 5,664 bp. Phylogenetic analysis and genomic distribution demonstrated that EgEVE_1 is a newly described member of the Caulimoviridae family, distinct from the recently characterized plant Florendoviruses. Genomic distribution of EgEVE_1 and Florendovirus is also distinct. EgEVE_1 qPCR quantification in Eucalyptus urophylla suggests that this genome has more EgEVE_1 copies than E. grandis. EgEVE_1 transcriptional activity was demonstrated by RT-qPCR in five Eucalyptus species and one intrageneric hybrid. We also identified that Eucalyptus EVEs can generate small RNAs (sRNAs),that might be involved in de novo DNA methylation and virus resistance. Our data suggest that EVE families in Eucalyptus have distinct properties, and we provide the first comparative analysis of EVEs in Eucalyptus genomes.

RESUMOO objetivo deste trabalho foi determinar a prevalência das infecções latentes por BoHV-1 e por BoHV-5 em bovinos de corte criados no Estado do Paraná. Os gânglios do nervo trigêmeo foram coletados de 400 bovinos hígidos, entre 18 e 36 meses de idade, provenientes de 90 propriedades rurais localizadas em diferentes mesorregiões geográficas do Estado e abatidos em frigorífico com Serviço de Inspeção Federal. A reação em cadeia da polimerase com amplificação do gene que codifica a glicoproteína C foi empregada para a detecção do DNA viral. Cento e nove bovinos eram herpéticos (27,25%), sendo 14,25% (57/400) infectados com BoHV-1, 9,75% (39/400) infectados com BoHV-5 e 3,25% (13/400) portadores de infecção mista. A distribuição geográfica foi heterogênea e as infecções foram mais prevalentes nas mesorregiões localizadas ao norte do Estado. A vigilância para a encefalite por BoHV-5 deve ser intensificada na mesorregião Noroeste.

ABSTRACTThe prevalence of latent infection with BoHV-1 or BoHV-5 in beef cattle raised in the state of Paraná, Brazil, was studied. The trigeminal ganglia were collected in a slaughterhouse from 400 healthy cattle, 18 to 36 months old, raised in 90 farms located in distinct geographical regions of the state. Polymerase chain reaction for amplification of the gene encoding C glycoprotein was performed to detect virus DNA. One hundred and nine (27.25%) animals were herpetic; 14.25% (57/400) were infected with BoHV-1, 9.75% (39/400) were infected with BoHV-5 and 3.25% (13/400) had mixed infection. The geographical distribution was heterogeneous and the infections were more prevalent in the north of the state. The surveillance for BoHV-5 encephalitis should be intensive in the Northwest region.