Este estudo teve como objetivo avaliar a frequência de mastite clínica e subclínica e descrever os micro-organismos envolvidos no processo inflamatório da glândula mamária nos rebanhos de búfalos leiteiros no Nordeste do Brasil. Foram analisadas 1.896 amostras de leite provenientes de 474 búfalos em quatro propriedades localizadas nos Estados de Alagoas, Bahia, Ceará e Pernambuco. Após o exame físico da glândula mamária, as amostras de leite de cada teto foram submetidas aos testes da caneca do fundo preto e CMT (California Mastitis Test). As amostras que apresentaram scores ++ e +++ no CMT e as positivas para a caneca do fundo preto foram submetidas ao exame microbiológico. Do total de amostras estudadas, 90/1.896 (4,74%) apresentaram mastite clínica. Com relação ao CMT, observou-se que 802/1.896 (42,2%) das amostras demonstraram mastite subclínica. Staphylococcus spp. foram os micro-organismos mais frequentes, seguidos de Corynebacterium spp. e bactérias gram-negativas. Os resultados obtidos neste trabalho demonstram uma elevada prevalência de mastite subclínica em rebanhos bubalinos no Nordeste do Brasil, especialmente causadas por Staphylococcus coagulase negativa (SCN). Recomenda-se que o processo de ordenha seja aprimorado, incluindo melhorias na higiene e treinamento de ordenhadores, a fim de reduzir a frequência da doença nos rebanhos.

O presente estudo teve como objetivo avaliar a sensibilidade in vitro de Aeromonas hydrophila frente a extratos etanólicos de própolis (uma verde e duas marrons) obtidos em três estados brasileiros (Minas Gerais, Ceará e Pernambuco). Para verificar a atividade antimicrobiana in vitro da própolis, 15 isolados de A. hydrophila foram testados para determinar a Concentração Bactericida Mínima (CBM) dos extratos. Curvas de sobrevivência para o crescimento bacteriano foram determinadas pela incubação dos isolados em extratos etanólicos de própolis a 15% por 24 horas. As médias da CBM dos extratos de própolis foram 1,68% para a própolis verde, 2,31% para a própolis marrom do Ceará e 3,75% para a própolis marrom de Pernambuco. A curva de sobrevivência dos isolados demonstrou uma inibição parcial com até três horas de incubação. Este resultado é compatível com o efeito bacteriostático da própolis, o que pode ser de interesse para a terapia em aquicultura, como alternativa às poucas drogas antimicrobianas disponíveis.

The present study was aimed to evaluate the in-vitro susceptibility of Aeromonas spp. to ethanolic extracts of propolis (one green and two brown) from three Brazilian states (Minas Gerais, Ceará and Pernambuco). In order to verify the antimicrobial activity of the propolis in vitro, 15 Aeromonas spp. isolates were tested to determine the minimal bactericidal concentration (MBC) of the extracts. Ethanol at 70% was used as a control. Survival curves for the bacterial growth were determined by incubation of the isolates in ethanolic extracts of propolis at 15% for 24 hours. The averages of the MBC of propolis extracts were 1.68% for the green propolis of Minas Gerais, 2.31% for the brown propolis of Ceará, and 3.75% for the brown propolis of Pernambuco. The survival curve of the isolates showed partial inhibition until three hours of incubation. This result is compatible with the bacteriostatic effect of propolis that may be useful to antibiotic therapy in aquaculture, as an alternative to few available antimicrobial drugs.

Foram analisados 24 isolados bacterianos oriundos de leite e pele de búfalas (Bubalus bubalis), os quais foram previamente identificados como Rhodococcus equi com o auxílio de fenotipia concisa. Testes fenotípicos complementares e ferramentas moleculares foram utilizados com o objetivo de caracterizar esses isolados, bem como diferenciá-los de outros microrganismos intimamente relacionados. Observaram-se três fenótipos distintos, porém a identificação dos isolados foi inconclusiva. Apenas um dos isolados foi comprovado como sendo R. equi com a realização da PCR espécie-específica, sequenciamento e análise dos fragmentos de DNA. Os demais isolados só foram identificados pelo sequenciamento de fragmento do gene que codifica a região 16S do rRNA universal de bactérias, indicando tratar-se de Dietzia maris. O perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos revelou maior resistência dos isolados de D. maris para oxacilina (96%) e rifampicina (87%). O isolado de R. equi apresentou resistência à amicacina, oxacilina, penicilina, rifampicina e tetraciclina. Alerta-se para o risco da incorreta identificação dos isolados baseados em testes fenotípicos concisos e para a necessidade de utilização de testes complementares para diferenciação entre R. equi e D. maris.

Twenty-four bacterial isolates from milk and skin of buffalo females (Bubalus bubalis), which previously had been identified as Rhodococcus equi by using a restricted number of phenotypical tests for bacterial characterization, were analyzed. The goal of this study was to perform the characterization of these isolates, as well as the differentiation of other microorganisms closely related by using additional phenotypical tests and molecular tools. Based on the phenotypical results, three different biotypes were obtained. However, the identification of the isolates was inconclusive. Only one of the isolates was confirmed as R. equi by the PCR specifically for this species, as well DNA sequencing and DNA fragment analysis. All the other isolates only could be precisely identified after the DNA sequencing, and they were characterized as Dietzia maris. The sensitivity profile to antimicrobials demonstrated the highest resistance of D. maris to oxacillin and rifampin, 96% and 87%, respectively. R. equi isolate, presented resistance to amikacin, oxacillin, penicillin, rifampin, and tetracycline. Thus, it is important to alert for the risk of the incorrect identification of the bacterial isolates by using diagnostic analysis based on phenotypical tests in order to differentiate R. equi and D. maris, besides the necessity to use complementary tests for differentiation of these microorganisms.

RESUMO Rhodococcus equi é uma importante causa de broncopneumonia em potros com menos de seis meses de idade, sendo responsável pela mortalidade de eqüinos no mundo inteiro. É um microrganismo intracelular capaz de sobreviver e se multiplicar no interior de macrófagos. Apresenta três níveis de virulência de acordo com os diferentes antígenos expressos em sua superfície. Cepas virulentas apresentam um plasmídeo que codifica a proteína de superfície VapA e são isoladas principalmente de potros com pneumonia e de alguns pacientes humanos. Cepas com virulência intermediária expressam a proteína VapB e predominam em suínos e humanos com AIDS. Cepas avirulentas não expressam antígenos de superfície e são encontradas principalmente no ambiente e em pacientes humanos. Um dos fatores responsáveis pela ampla distribuição da enfermidade em potros é a imaturidade do sistema imunológico dos animais acometidos pela infecção, que pode se tornar endêmica em alguns criatórios. Em humanos, as formas de infecção são ainda desconhecidas, mas o contato com eqüinos é relatado em um terço dos casos. Devido à importância clínica da doença, são necessários métodos diagnósticos que promovam sua identificação precoce, facilitando e aumentando as chances de sucesso com o tratamento. Os métodos mais utilizados atualmente são o cultivo microbiológico, testes sorológicos para detecção de anticorpos séricos nos animais e técnicas de PCR que detectam a região 16S do rDNA e o fragmento do gene vapA do microrganismo.

ABSTRACT Rhodococcus equi is an important cause of bronchopneumonia in 1to 6-month-old foals, being responsible for 3% of horse death in many countries of the world. It is an intracellular microorganism able to survive and to multiply inside macrophages. Three virulence levels have been identified in R. equi, by the presence of virulence associated antigens on the bacteria surface. Virulent strains have a plasmid encoding VapA protein and are isolated from diseased foals and some human patients. Intermediate virulent strains show VapB protein and are commonly found in swine and HIV infected patients. Avirulent strains do not show virulence antigens and are found in the environment and humans. The immature immune system is the major cause of the susceptibility of foals to the R. equi pneumonia. In humans, the infection routes are still unknown, but contact with horses is related with one-third of human infections. Due the clinical importance of the disease, diagnostic methods for early identification in animals are necessary, increasing the chances for treatment. The more common diagnostic methods are microbiologic culture, serologic tests and PCR techniques for 16S rDNA and vapA detection.

A campilobacteriose venérea bovina, ocasionada principalmente pelo Campylobacter fetus subsp. fetus e Campylobacter subsp. venerealis, é transmitida através do coito ou por inseminação com sêmen contaminado. O propósito deste estudo foi determinar a susceptibilidade in vitro de isolados de C. fetus subesp. venerealis a agentes antimicrobianos comumente utilizados para o tratamento clínico e de sêmen. Foram testadas duas cepas padrão, sendo uma de C. fetus subsp. fetus e outra de C. fetus subsp. venerealis, bem como 21 amostras de isolados clínicos de C. fetus subsp. venerealis. Os testes foram realizados conforme o método de Kirby-Bauer. A amostra padrão de C. fetus subsp. fetus demonstrou-se resistente à lincomicina, penicilina e ácido nalidíxico, enquanto a de C. fetus subsp. venerealis apresentou susceptibilidade a todos antimicrobianos testados, com exceção do ácido nalidíxico. Todas as amostras de C. fetus subsp. venerealis foram susceptíveis à amicacina, ampicilina, cefalotina, estreptomicina, gentamicina, penicilina e tetraciclina. Foi observada resistência de 42,86% à lincomicina e 4,76 % a enrofloxacina, e de 100% ao ácido nalidíxico. Ainda, 4,76% apresentaram susceptibilidade intermediária à enrofloxacina, neomicina e polimixina B e 9,52% à lincomicina. Os resultados evidenciaram a sensibilidade das amostras analisadas aos antimicrobianos comumente utilizados para o tratamento clínico e do sêmen.

Venereal campylobacteriosis is associated with infection of Campylobacter fetus subsp. fetus and Campylobacter fetus subsp. venerealis. The etiological agent is transmitted by natural bull breeding or artificial insemination using contaminated semen. The present study aimed to determine the in vitro susceptibility of C. fetus subsp. venerealis isolates to antimicrobial drugs generally used in clinical and semen treatment. Reference strains of C. fetus subsp. fetus and C. fetus subsp. venerealis and 21 C. fetus isolates were tested. The susceptibility test was performed by using the modified Kirby-Bauer diffusion disc method. C. fetus subsp. fetus reference strain was resistant to lincomycin and penicillin. C. fetus subsp. venerealis was susceptible to all antimicrobial tested, with exception to C.C. KrewerDnalidixic acid. C. fetus subsp. venerealis samples were sensible to amikacin, ampicillin, cefalotin, streptomycin, gentamycin, penicillin and tetracycline. Drug resistance was observed on 42.86% of lincomycin, 4,76 % of enrofloxacin, and 100% to nalidixic acid. In addition 4.76% of the isolates showed intermediate susceptibility to enrofloxacin, neomycin, polimixin B and 9.52% to lincomycin. The susceptibility of C. fetus isolates to antimicrobial drugs commonly used in clinical and semen treatment was demonstrated.