Resumo Um levantamento preliminar de viroses de plantas cultivadas nos arredores de Manaus foi feito em março de 1977. Diversas propriedades particulares e campos experimentais foram inspecionados, anotando-se as plantas exibindo sintomatologia suspeita. A verificação da sua possível etiologia viral foi feita através de testes de transmissão, serologia e exames electrono microscópicos. Foram constatadas diversas viroses em tomateiro, pimentão, quiabeiro, feijoeiro, cucurbitáceas, soja, feijão-de-asa, milho. etc. Como regra geral, ao contrário do que sucede no Sul do País, as viroses transmitidas por afídeos foram de ocorrência rara, presumivelmente porque as condições climáticas da região seriam desfavoráveis à biologia desses insetos.

Estudos citoquímicos, ao nível do microscópio óptico, foram efetuados para determinar a natureza química de inclusões intranucleares, de aspecto fibroso, induzidas pelo vírus do mosaico amarelo do salsão na maioria de suas hospedeiras. Os testes citoquímicos foram conduzidos em material foliar fresco ou fixado (aldeído glutárico, Carnoy 3:1 ou Bouin), tendo sido feitas as seguintes reações: hematoxilina férrica (testemunha); Sudan IV e Azul do Nilo (lipídios); iodo-iodeto (amido); Feulgen, Azur B e verde-de-metila-pironina (ácidos nucleicos); ninidrina-Schiff e "Fast Green", este último em soluções ácida e alcalina (proteínas). Os testes com verde-de-metila-pironina, Azur B e ninidrina-Schiff foram combinados com digestão enzimática pela ribonuclease ou pepsina. Os dados obtidos sugerem que, dentro da sensibilidade dos testes realizados, a inclusão contenha proteína, mas não tenha amido, lipídios ou ácidos nucleicos. Isso permite supor, portanto, que essas inclusões não sejam formadas de partículas de vírus.

Cytochemical studies at optical microscopic level were made to determine the chemical nature of intranuclear inclusions with fibrous aspect which were induced by the celery yellow mosaic virus (CYMV) in most of its hosts. The cytochemical tests were carried on fresh as well on fixed foliar material, fixation being in glutaric aldeid, Carnoy 3:1 or Bouin. The following reactions were tried: ferric haematoxylin (control); Sudan IV and Nile blue (for lipids); iodine ioduret (for starch); Feulgen, azur B and methyl green-pyronin (for nucleic acids); ninhydrin-Schiff and fast-green, the latter in acid and in alcaline solution (for protein). The tests with methyl green-pyronin, azur B and ninhydrin-Schiff were combined with enzimatic digestion with RNase or pepsin. The results suggest that, within the sensibility of the tests, the inclusion contains protein but does not contain starch, lipids or nucleic acids. This permit to suppose, therefore, such inclusions not to be formed of virus particles.

Exames electrono-microscópicos de tecido foliar ou radicular de milho (Zea maysL.) afetado pelo enfezamento do milho, tanto a forma vermelha como a pálida, e de órgãos da cigarrinha vectora, Dalbulus maidisDe L. & W., portadora, demonstraram a ocorrência de corpúsculos pleomórficos, do tipo micoplasma, consistentemente associados a essa anomalia. Não se notou diferença na morfologia entre os microrganismos do tipo micoplasma associados às duas formas do enfezamento da planta nem tampouco entre estes e os presentes no inseto vector. Verificou-se também que na planta esses corpúsculos do tipo micoplasma ocorriam somente nos vasos crivados, e que no inseto eles se achavam presentes em diversos tipos de tecidos de diferentes órgãos - tubo digestivo, músculo, túbulos de Malphigi, epiderme, gânglio nervoso, glândula salivar, tecido adiposo. Nas células do inseto, os corpúsculos ocorriam dispersos no citoplasma ou em cavidades limitadas por membrana.

Corn stunt in São Paulo State is usually of minor importance during normal summer crops but might induce significant losses if corn is planted late in the season. It is transmitted by leaf - hopper Dalbulus maidisDe L. & W. and two different forms of this disease have been recognized the chlorotic, similar to the Rio Grande type of the U.S., and the red, resembling the Mesa Central type of Mexico. Electron microscopic examination of tissues from both affected plants or leafhopper reared on diseased plants, demonstrated the presence of pleomorphic, mycoplasma-like bodies, consistently associated with the corn stunt, which probably represent the causal agent the latter. No significant difference could be observed in the morphology of these mycoplasma-like bodies associated with the two disease types or with the insect vector. In the affected plants, these corpuscles were only found in the sieve tubes; in the insect body they were detected in several types of tissues of different organs - intestine, Malphigian tubules, muscle, nervous ganglion, salivary gland, fat body, epidermis. In the insect cells, the pleomorphic bodies occurred either scattered in the cytoplasm or in cytoplasmic cavities bounded by membrane.

Fragmentos da epiderme inferior de fôlhas de trigo com sintomas típicos da anomalia conhecida como "espiga branca", examinados ao microscópio convencional, mostraram a constante ocorrência de inclusões intracelulares, de dimensões avantajadas e de aspecto fibrilar e enovelado. Freqüentemente, células adjacentes aquelas que continham inclusões apresentavam formações aciculares, em seu interior. Seções ultrafinas dessas folhas, examinadas ao microscópio electrô-nico, revelaram que tais inclusões eram de localização citoplasmática e formadas por uma massa de partículas filamentosas de 7-10 m¼ em diâmetro e de comprimento indeterminado, idênticas àquelas encontradas em preparações "leaf dip". Várias alterações celulares, como hipertrofia do nucléolo, degeneração dos cloroplastos e vesicularização do retículo endoplasmático, puderam também ser notadas. Ocasionalmente, formações cristalinas foram notadas na periferia e mesmo no interior do núcleo. A semelhança das inclusões citoplasmáticas e das partículas que as compõem, com aquelas descritas, associadas à infecção do vírus da "hoja blanca" do arroz, e também o fato de o trigo desenvolver sintomas do tipo espiga branca quando inoculado experimentalmente com o vírus da "hoja blanca", parecem reforçar a sugestão de que a espiga branca do trigo teria etiologia virosa e que o agente causal seria do grupo do vírus da "hoja blanca" do arroz. A constante associação das inclusões celulares com a condição de espiga branca, em trigo, constitui mais um elemento para sua rápida diagnose.

Light microscopic examination of epidermal strips from leaves of wheat (Triticum sativumL.) showing typical symptoms of the white spike (WS) disease, demonstrated the constant occurrence of huge, fibrous and whorled intracellular inclusions. Occasionally cells adjacent to those having inclusions contained needle-like formations. The whorled inclusions appeared in ultrathin section profiles as loose aggregates of threadlike elements, 7-10 m¼ in diameter and of indeterminable length, within the cytoplasm. They seem to represent filamentous particles found in leaf dip preparations from affected plants, in situ. Nucleolus hypertrophy, chloroplast degeneration and changes in endoplasmic reticulum were frequently noticed in affected tissues. Occasionally small crystalline inclusions were found nearby or within the nucleus. The presence of these fibrous, whorled inclusions associated to WS condition, reinforces the suggested viral etiology, due to the similarity of these inclusions with virus aggregates found in tissues infected with several other viruses of the beet yellows virus group. Besides symptomatology, the particle and inclusion morphology of rice "hoja blanca" virus are very similar to WS of wheat, suggesting that both diseases are induced by viruses of the same complex. The ease with which the inclusions are detected in epidermal strips, constitutes a quick and secure method to diagnose the WS disease.

Exames electrono-microscópicos de secções ultrafinas de tecidos foliares de cenoura (Daucus carota L.) e coentro (Coriandrum sativumL.) infetados pelo vírus do mosaico da cenoura (VMC) revelaram a ocorrência de inclusões em forma de bandas densas no citoplasma. Exames mais detalhados dessas bandas revelaram serem elas constituídas pela justaposição de lamelas delgadas (10-15m¼ de espessura), as quais parecem eventualmente desprender-se e formar outros tipos de inclusão, como as de perfil circular e em forma de catavento, comumente associadas à infecção provocada por vírus do grupo Y da batata. Ocasionalmente, partículas do VMC foram observadas nas proximidades dessas inclusões. As dimensões das bandas densas atingiram até 0,l-0,2¼ x 3-4¼, visíveis mesmo em exames ao microscópio convencional. Além da ocorrência dessas inclusões, pôde também ser observada a presença de grande número de vesículas no citoplasma, aparentemente associadas a uma atividade do complexo de Golgi.

A virus, inducing mosaic and malformation of carrot leaves (Daucus carota L.), was found in Piedade, SP. It was termed carrot mosaic virus (CMV), and is both mechanically and aphid transmitted. Morphologically it belongs to the potato virus Y group (15m¼ x 740m¼). Electron microscopic examination of thin sections of leaf tissues from carrot or coriander (Coriandrum sativum L.) infected with CMV demonstrated the presence of cytoplasmic inclusions, usually in the form of dense bands. They could reach sizes up to 0.2¼ x 4¼ and were detectable even under light microscopic examination. These bands, at higher magnification, showed to be built up of thin lamella (10-15m¼ thick), closely apposed. Occasionally individual or group of lamella appeared to loose from the bands, producing other type of profile, such as pin wheels and rings. CMV particles were sometimes observed in the vicinity of these inclusions, often laying parallel to their surface. These inclusions are identical to those observed in tissues infected with other components of the potato Y virus group, and their detection seems to corroborate the previous inclusion of CMV in this group, basead on particle morphology. Besides these cytoplasmic inclusions, some cells contained a large number of vesicles in the cytoplasm, apparently associated with Golgi complex activity.

Partículas alongadas de 15 mµ de diâmetro e 650 mµ de comprimento normal foram consistentemente detectadas em exames electrono--microscópicos de preparações "leaf dip" de 6 espécies diferentes de plantas infetadas pelo vírus latente da couve (Brassica oleracea L. var. acephala) (VLC). Tais partículas são consideradas como sendo de um vírus que poderia ser incluído no grupo do vírus S da batata, na classificação dos vírus alongados de Brandes. Exames de secções ultrafinas de tecidos foliar e radicular de couve infetada pelo VLC, demonstraram a ocorrência do VLC, formando agregados mais ou menos organizados no citoplasma. Não se notou alterações citológicas sensíveis como conseqüência da infecção, o que está de acordo com a ausência de sintomas externos em couve infetada pelo VLC.

Electron microscopic examination of leaf dip preparations made from cole (Brassica oleraceaL. var. acephala), Chenopodium amaranticolorCoste & Reyn., radish (Raphanus sativusL.), mustard(Brassica albaBoiss. Rabenh.), bean (Phaseolus vulgaris L.)and Gomphrena globosaL. plants infected with cole latente virus (CLV) demonstrated consistently the presence of slender rods. These particles, considered as CLV, were about 15 mµ wide and 650 mµ in normal length (NL). The NL was determined in a series of comparative measurements using turnip mosaic virus (NL = 750 mµ) as a standard. Morphological characteristics of CLV permit its inclusion in the potato virus S group, in Brandes' system of classification of elongated plant viruses. Thin section profiles of root and leaf tissues, from CLV-infected cole, showed the frequent occurrence of fibrillar aggregates in the cytoplasm. The particles component of these aggregates were identified as CLV in situ due to the constant association with the infection and their mophological similarities with the particles found in leaf dip preparations. CLV-particles appeared with their longer axis laying side--by-side within these aggregates, often forming a spiral arrangement. Vesiculated areas were occasionally seen in the cytoplasm, with virions in or around them. Virus particles were found in most of the examined cells, except within the tracheids and sieve tubes in the leaf, and within the meristematic zone, in th root. Besides these abnormalities, no other remarkable changes in normal cell structure could be noticed, in agreement with the lack of external symptoms.

Partículas tubulares, ca. 25 m¼. em diâmetro externo e com um canal axial de 4 m¼ de largura, foram observadas em preparações rápidas ou purificadas e no interior de tecidos de plantas infetadas pelo vírus do anel do pimentão (VAP). Dois tipos de partículas, quanto ao comprimento normal, respectivamente 55 e 200 m¼, foram notadas em preparações in vitro, e com infetividade associada somente às partículas longas. Partículas, de preparações purificadas, quando incubadas com ribo-nuclease ou tripsina, não se alteravam, embora em algumas das experiências a tripsinização houvesse induzido uma agregação terminal das partículas. Quando aquecidas a temperaturas superiores a 65-70°C/10' há, paralelamente à redução da infetividade, uma decomposição dos virions, que se transformam em material pulverulento. Em secções ultra-finas de tecidos infetados foram encontrados agregados ordenados de partículas similares àquelas encontradas in vitro, no citoplasma. Essas inclusões constituiam-se somente de partículas longas (ca. 200 m¼), e a ausência de grupos de partículas curtas características sugere que estas representem fragmentos aproximadamente iguais a 1/4 das longas.

Tubular particles, about 25 m¼ wide, with an axial channel 4 m¼ in diameter, were found in leaf dip or purified preparations and also within tissues, from plants infected with pepper ringspot virus (PRSV), but not in uninoculated control plants. The particle length determinations showed two prevalent types of particles in vitro, respectively with ca. 55 m¼ and 200 m¼ in normal length. These values were independent of the virus isolate, host plant or preparative procedures for electron microscopy employed. In thin section profiles, a dense rim was observed bordering the axial channel, in cross section of particles stained with uranyl acetate, which might represent the location of the viral nucleic acid in the virion. The long, 200 m¼, particles can be separated from the short, 55 m¼ particles through sucrose gradient density ultracentrifugation, when it can be demonstrated that only the longer particles are infective. Incubation of purified preparations with ribonuclease and/or trypsin, did not affect infectivity or the structure of the virions. However, in some experiments, the trypsin treatment induced an end-to-end aggregation of the particles. Purified preparations lose infectivity after being heated for 10 minutes at 65-70°C. Simultaneously a generalized degradation of virions is noticeable. The end product of this degradation is a powdery material, composed of granules 30-40 Aº in diameter. In ultrathin sections of PRSV-infected tissues, ordered aggregates of particles, similar to those found in vitro,were observed in the cytoplasm. Such inclusions consisted of long (200 m¼) particles only. In no instance, groups of typical 55 m¼, short particles were found, and this suggests that they are fragments of the longer, 200 m¼. particles, rather than products of self multiplication.