O presente estudo avaliou o efeito da presença do líquido folicular e hormônios durante a maturação nuclear e citoplasmática em ovócitos suínos. Para avaliar o efeito do líquido folicular, os oócitos foram maturados in vitro em TCM-199 na presença de hormônios, em que o meio foi suplementado com 10% de soro fetal bovino (SFB), 10% de líquido folicular de folículos grandes (l-pFF), 10% de líquido folicular de folículos médios (m-pFF) ou nenhum suplemento. Quando os oócitos foram maturados no meio contendo hormônios, a adição de diferentes suplementos não afetou (P<0,05) a maturação nuclear. Entretanto, mudanças no suplemento provocaram uma alteração na maturação citoplasmática, sendo que as maiores taxas (P<0,05) foram observadas no grupo com l-pFF. Para determinar o efeito da presença de hormônios e/ou suplemento durante a maturação, os oócitos foram cultivados em TCM-199, TCM-199 com hormônios, TCM-199 com 10% l-pFF ou TCM-199 com hormônio e 10% l-pFF. A maior proporção de oócitos que sofreram maturação nuclear e citoplasmática ocorreu no grupo em que ambos, hormônios e líquido folicular, estavam presentes. A expansão do cumulus influenciou (P<0,05) na maturação citoplasmática, sendo que os oócitos sem expansão apresentaram menor taxa de maturação em todos os grupos. Quando diferentes concentrações de gonadotrofinas foram utilizadas durante a maturação, não foi observado nenhum efeito na maturação nuclear ou citoplasmática. Os resultados deste estudo sugerem que as mudanças na composição do meio podem afetar as taxas de maturação, sendo que o líquido folicular, combinado com hormônios, proporciona as melhores condições para maturação de oócitos suínos.

To evaluate the effect of follicular fluid on in vitro maturation, pig oocytes were cultured in the presence of hormones where 10% of fetal calf serum (FCS), 10% of follicular fluid from large follicles (l-pFF), 10% of follicular fluid from medium follicles (m-pFF) or no supplement were added. When oocytes where matured in medium containing the hormones the addition of different supplements did not affect (P<0.05) nuclear maturation. However, changing the supplement altered the cytoplasmic maturation, with higher rate (P<0.05) observed in the l-pFF group. To determine the effect of the presence of hormone and/or supplement during maturation, the oocytes were cultured either in presence of TCM-199 alone, with hormones, with 10% l-pFF or with hormones and 10% l-pFF. The highest proportion of oocytes undergoing nuclear and cytoplasmic maturation was obtained when both hormones and follicular fluid were present. Cumulus expansion had a significant (P<0.05) effect on cytoplasmic maturation with the non-expanded groups showing a lower percentage of maturation in all groups. When the adequacy of gonadotropins levels were evaluated by adding higher or lower concentrations into the maturation medium neither beneficial nor detrimental effects were observed in either nuclear or cytoplasmic maturation. These results suggest that changes in the composition of the medium can alter the percentage of oocytes completing maturation. Follicular fluid combined with hormones was found to give better conditions for pig oocyte maturation in vitro.

No presente experimento, foi determinado o efeito da fetuina, uma a1-glicoproteina com capacidade de inibir protease, no bloqueio da polispermia. Complexos cumulus-oócitos de murideos superovulados com eCG foram maturados in vitro na presença de 0, 0,01. 0,1, lê Idmg/ml de fetuina em TCM 199 modificado. Oócitos maturados in vivo e in vitro foram fecundados na presença de fetuina e incubados por 6 e 24 horas. Fetuina presente em uma concentração de 1 mg/ml durante a fecundação. mas não no meio de maturação, foi capaz de induzir polispermia em 52,5% dos óvulos. Houve uma relação positiva entre u concentração de fetuina no meio de fecundação e a percentagem de óvulos polispérmicos (p<0.05). Uma interação significativa entre 0,1 e l,0mg/ml de fetuina durante a maturação e fecundação foi observada (p<0.05). Os resultados destes experimentos demonstram a inibição do bloqueio da polispermia utilizando um inibidor de protease durante a fecundação.

The effect of fetuin, an a1-glycoprotein that has protease inhibitor activity, on the biock to potyspermy was determined. Cumulus-oocyte complexes from eCG primed mice were matured in vitro in the presence of 0, 0.01, 0.1, l and 10mg/ml of fetuin in modifica TCM 199. Both in vivo and in vitro matured oocytes were fertilized in the presence of fetuin and incubated for 6 and 24h. Fetuin present in a concentration of 1 mg/ml in the ferlilization but not in the maturation medium was able to induce polyspermy in 52.4% of the eggs. There was a positive relationship between concentration of fetuin in the fertilization medium and the proportion of polyspermic eggs (p<0.05). A significant interaclion between 0.1 and l mg/ml of fetuin during maturation and fertilization was observed (p<0.05). The results of these experiments demonstrate the inhibition of the block to polyspermy using a protease inhibitor during the fertilization.