Resumen: Introducción. Fusarium es un grupo heterogéneo de hongos, difícil de clasificar y con una amplia gama de estilos de vida, que actúa como saprofito, parásito de plantas o patógeno de humanos y animales. La prevalencia de la fusariosis clínica y la falta de tratamientos han incrementado el interés en su diagnóstico preciso, lo que conlleva la caracterización molecular de las poblaciones. Objetivo. Comparar marcadores de genotipificación en la evaluación de la variabilidad genética e identificación de aislamientos clínicos de Fusarium. Materiales y métodos. Se evaluó la huella genética producida por dos cebadores aleatorios: M13, que amplifica una secuencia minisatélite, y (GACA)4, que corresponde a una secuencia repetitiva de ADN. Utilizando el índice discriminatorio de Hunter Gaston (HGDI), el análisis de varianza molecular (AMOVA) y una prueba de Mantel, se comparó la resolución de estos marcadores con métodos de genotipificación basados en secuenciación y PCR. Resultados. El mayor HGDI se asoció con el marcador M13, seguido de (GACA)4. Las pruebas AMOVA y Mantel mostraron correlación entre las clasificaciones obtenidas con M13 y la referencia basada en la secuenciación parcial del factor de elongación de transcripción 1-alfa (TEF1-α) y el ADNr 28S. Conclusión. La fuerte correlación entre la clasificación obtenida con M13 y el método de referencia, así como su alta resolución, demuestran su idoneidad para la caracterización de poblaciones de Fusarium.

Abstract: Introduction: Fusarium is a very heterogeneous group of fungi, difficult to classify, with a wide range of living styles, acting as saprophytes, parasites of plants, or pathogens for humans and animals. Prevalence of clinical fusariosis and lack of effective treatments have increased the interest in the precise diagnosis, which implies a molecular characterization of Fusarium populations. Objective: We compared different genotyping markers in their assessment of the genetic variability and molecular identification of clinical isolates of Fusarium. Materials and methods: We evaluated the performance of the fingerprinting produced by two random primers: M13, which amplifies a minisatellite sequence, and (GACA)4, which corresponds to a simple repetitive DNA sequence. Using the Flunter Gaston Discriminatory Index (HGDI), an analysis of molecular variance (AMOVA), and a Mantel test, the resolution of these markers was compared to the reference sequencing-based and PCR genotyping methods. Results: The highest HGDI value was associated with the M13 marker followed by (GACA)4. AMOVA and the Mantel tests supported a strong correlation between the M13 classification and the reference method given by the partial sequencing of the transcription elongation factor 1-alpha (TEF1-α) and rDNA 28S. Conclusion: The strong correlation between the M13 classification and the sequencing- based reference together with its higher resolution demonstrates its adequacy for the characterization of Fusarium populations.

Resumen Objetivo. Proporcionar información sobre el ciclo de vida del psílido de la concha (o del escudo), Glycaspis brimblecombei en Colombia, y sus enemigos naturales, principalmente la avispa parasitaria Psyllaephagus bliteus, en una plantación de eucalipto en Jericó (Antioquia). Alcance. A través de ensayos experimentales, se muestran los resultados del ciclo de vida y las principales características de la plaga, en una plantación de Eucalyptus camaldulensis. Metodología. Los estados de desarrollo del insecto en campo se evaluaron mediante la selección aleatoria de hojas aisladas mediante mangas entomológicas. La identificación de los enemigos naturales se realizó por observación directa y colecta manual durante julio y agosto de 2016. Principales resultados. Primer reporte para Colombia del tiempo de duración en campo del ciclo de vida de G. brimblecombei. El desarrollo completo tuvo una duración de 32.83 ± 4.2 días (promedio ± EE) bajo condiciones de campo (temperatura media: 27°C). Las ninfas alcanzaron una duración de 14.42 ± 1.15 días, entre la eclosión y el estado adulto. El tiempo reportado para cada etapa (I, II, III, IV y V) fue de 4.11 ± 1.17, 7.00 ± 1.13, 9.74 ± 1.51, 11.95 ± 1.64 y 13.42 ± 1.7 días, respectivamente. Los enemigos naturales encontrados incluyen insectos de las familias Coccinellidae, Formicidae, Encyrtidae y Crysopidae; se resalta la presencia e importancia del parasitoide P. bliteus, reportado como el principal controlador biológico asociado con la dispersión de la plaga desde su centro de origen (Australia). Conclusiones. El registro de P. bliteus destaca su papel ecológico, comúnmente descrito como agente efectivo de control biológico de este psílido. Estos resultados son fundamentales para establecer futuros programas de MIP en plantaciones forestales de eucalipto en el país.

Abstract Objective. To provide information on the life cycle of the shell (or shield) psyllid, Glycaspis brimblecombei in Colombia, and its natural enemies, mainly the parasitic wasp Psyllaephagus bliteus, in a eucalyptus plantation in Jericó (Antioquia). Scope. Through experimental trials, the results of the life cycle and the main characteristics of the pest are shown in a Eucalyptus camaldulensis plantation. Methodology. The development stages of the insect in the field were identified by random selection of isolated leaves using entomological sleeves. The identification of natural enemies was carried out by direct observation and manual collection during July and August 2016. Main results. First report for Colombia of the duration in the field of the life cycle of G. brimblecombei. The complete development lasted 32.83 ± 4.2 days (mean ± SE) under field conditions (mean temperature: 27°C). The nymphs reached a duration of 14.42 ± 1.15 days between hatching and adult stage. The time reported for each stage (I, II, III, IV and V) was 4.11 ± 1.17, 7.00 ± 1.13, 9.74 ± 1.51, 11.95 ± 1.64 and 13.42 ± 1.7 days, respectively. The natural enemies found include insects of the families Coccinellidae, Formicidae, Encyrtidae and Crysopidae. The presence and importance of the parasitoid P. bliteus is highlighted, reported as the main biological controller associated with the spread of the pest from its center of origin (Australia). Conclusions. The record of P. bliteus highlights its ecological role, commonly described as an effective biological control agent for this psyllid. These results are essential to establish future IPM programs in eucalyptus forest plantations in the country.

RESUMEN Physalis peruviana L. es actualmente el segundo cultivo frutícola más exportado de Colombia; sin embargo, las plagas asociadas con el cultivo han sido poco estudiadas, lo cual es importante ya que algunos nóctuidos pueden causar una reducción del 20% en su producción. En esta investigación se estudió las especies de nóctuidos asociadas a P. peruviana en tres fincas del municipio de La Unión, Antioquia, Colombia. Doce unidades de muestreo, con plantas entre 30 y 40 días de trasplantadas, fueron distribuidas en las fincas y muestreadas quincenalmente, del primero de marzo al veintinueve de agosto de 2014. En el dosel de la planta y el área plantada se registró el total de estados inmaduros y se construyeron modelos estadísticos con el fin de describir su tendencia. La identificación taxonómica de adultos se hizo por comparación con la colección de Noctuidae del Museo Entomológico Francisco Luis Gallego de la Universidad Nacional de Colombia - Sede Medellín, y mediante el uso de claves taxonómicas. En total se encontraron nueve especies de nóctuidos. Se construyeron seis modelos, cuatro de oviposición para las especies Agrotis ipsilon y Spodoptera spp, Copitarsia decolora y Heliothis subflexa, Peridroma saucia, y Megalographa biloba; uno para larvas y otro para pupas. El modelo de oviposición de P. saucia fue el más ajustado con una Diferencia Cuadrática Media de Predicción (RMSPD por sus siglas en inglés) de 0,84. Los otros modelos estudiados describen adecuadamente la tendencia de los estados inmaduros, excepto el correspondiente a M. biloba. Esta investigación reveló características ecológicas de las especies Noctuidae asociadas al cultivo de uchuva que afectan su productividad.

ABSTRACT Physalis peruviana L. is currently the second fruit crop more exported of Colombia; however, the pests associated with the culture have been little studied which is important considering that some Noctuidae can cause a decrease of 20% in its production. In this research, the Noctuidae species related to P. peruviana were studied in three farms of La Unión, Antioquia, Colombia. Twelve sampling units, with 30- and 45-day transplanted plants, were distributed throughout the farms and sampled biweekly from March 1st to August 29th of 2014. In the plant canopy and the planted area, immature stages were registered, and statistic models were built in order to describe their trend. The taxonomic identification of adults was made by comparing with the Noctuidae collection of Museo Entomológico Francisco Luis Gallego at Universidad Nacional de Colombia - Sede Medellín, and by using taxonomic keys. Nine Noctuidae species were found in total. Six models were built, four oviposition models for Agrotis ipsilon and Spodoptera spp., Copitarsia decolora and Heliothis subflexa, Megalographa biloba, and Peridroma saucia; a model for larvae and pupae stages was built. The oviposition model for P. saucia was the more adjusted, with a Root mean squared predictive difference (RMSPD) of 0.84. The other studied models were suitable to describe the trend of the immature stages; except for M. biloba model. This research revealed the ecological characteristics of the Noctuidae species associated with the golden berry crop that affect its productivity.

RESUMEN Objetivo Identificar aislamientos de Fusarium en pacientes con micosis por medio de las técnicas moleculares de PCR y secuenciación. Métodos Se tomaron 101 muestras de pacientes con micosis sintomática, entre los años 2004 y 2006. Para la detección de aislamientos como pertenecientes al género Fusarium, se amplificó parcialmente por PCR la región 28S del DNAr; y posteriormente -para la detección de la especie de Fusarium- se utilizaron cebadores específicos para F. oxysporum y F. solani. La verificación de la identidad de la especie de los aislamientos se hizo por secuenciación parcial de los genes 28S DNAr y TEF1-α Resultados El total de 101 aislamientos fueron detectados como pertenecientes al género Fusarium utilizando un cebador universal de la region 28S DNAr; 52 y 29 aislamientos se detectaron como F. oxysporum o F. salani, respectivamente con los cebadores específicos, y la secuenciación parcial de los genes 28S rDNA o TEF1-α confirmó la identidad de las especies. Conclusión La secuenciación parcial del gen TEF1-α es aún el mejor marcador molecular para identificar aislamientos de Fusarium a nivel de especie. Sin embargo, en la mayoría de los casos es posible discriminar entre aislamientos de F. oxysporum y F. solani por PCR con cebadores específicos, lo que proporciona una ventaja importante considerando la simplicidad de la técnica y el rápido diagnóstico.

ABSTRACT Objective Identifying Fusarium isolates from mycosis symptomatic patients through molecular techniques as PCR and sequencing. Methods In this study, samples were taken from 101 mycosis symptomatic patients in-between 2004-2006. To determine isolates belonging to the Fusarium genus, the DNAr 28S region was amplified through PCR and specific PCR primers further confirmed their identity to the species level. Additionally, in order to confirm the identity of the species of the isolates, 75 isolates of these were analyzed by partial sequencing of the 28S rDNA and the TEF1-α gene. Results The 28S rDNA portion detected all 101 isolates as belonging to Fusarium and the PCR specific primers detected 52 and 29 isolates as F. oxysporum and F. solani, respectively; 34 and 41 of these, afterwards studied by partial sequencing of the 28S rDNA and TEF1- α genes respectively, were effectively identified by the technique. Conclusion From all the molecular markers used to identify Fusarium isolates, the sequence of the TEF1-α gene provided the best resolution in the identification of species level; however it is possible to discriminate between F. oxysporum and F. solani isolates by PCR, in most of the cases, what is important considering the simplicity of the technique and a faster diagnosis.

ABSTRACT Objective Identifying Fusarium isolates from mycosis symptomatic patients through molecular techniques as PCR and sequencing. Methods In this study, samples were taken from 101 mycosis symptomatic patients in-between 2004-2006. To determine isolates belonging to the Fusarium genus, the DNAr 28S region was amplified through PCR and specific PCR primers further confirmed their identity to the species level. Additionally, in order to confirm the identity of the species of the isolates, 75 isolates of these were analyzed by partial sequencing of the 28S rDNA and the TEF1-α gene. Results The 28S rDNA portion detected all 101 isolates as belonging to Fusarium and the PCR specific primers detected 52 and 29 isolates as F. oxysporum and F. solani, respectively; 34 and 41 of these, afterwards studied by partial sequencing of the 28S rDNA and TEF1- α genes respectively, were effectively identified by the technique. Conclusion From all the molecular markers used to identify Fusarium isolates, the sequence of the TEF1-α gene provided the best resolution in the identification of species level; however it is possible to discriminate between F. oxysporum and F. solani isolates by PCR, in most of the cases, what is important considering the simplicity of the technique and a faster diagnosis.

RESUMEN Objetivo Identificar aislamientos de Fusarium en pacientes con micosis por medio de las técnicas moleculares de PCR y secuenciación. Métodos Se tomaron 101 muestras de pacientes con micosis sintomática, entre los años 2004 y 2006. Para la detección de aislamientos como pertenecientes al género Fusarium, se amplificó parcialmente por PCR la región 28S del DNAr; y posteriormente -para la detección de la especie de Fusarium- se utilizaron cebadores específicos para F. oxysporum y F. solani. La verificación de la identidad de la especie de los aislamientos se hizo por secuenciación parcial de los genes 28S DNAr y TEF1-α Resultados El total de 101 aislamientos fueron detectados como pertenecientes al género Fusarium utilizando un cebador universal de la region 28S DNAr; 52 y 29 aislamientos se detectaron como F. oxysporum o F. salani, respectivamente con los cebadores específicos, y la secuenciación parcial de los genes 28S rDNA o TEF1-α confirmó la identidad de las especies. Conclusión La secuenciación parcial del gen TEF1-α es aún el mejor marcador molecular para identificar aislamientos de Fusarium a nivel de especie. Sin embargo, en la mayoría de los casos es posible discriminar entre aislamientos de F. oxysporum y F. solani por PCR con cebadores específicos, lo que proporciona una ventaja importante considerando la simplicidad de la técnica y el rápido diagnóstico.

RESUMEN Objetivo Evaluar la susceptibilidad antifúngica in vitro de aislamientos de Fusarium a los antimicóticos amfotericina B, itraconazol y voriconazol. Métodos La susceptibilidad de 44 aislamientos clínicos de Fusarium fue evaluada por el método de difusión en disco, E-test. Resultados Todos los aislamientos fueron resistentes al itraconazol, y 89 % y 54,5 % fueron resistentes a la amfotericina B y al voriconazol, respectivamente. Discusión Los resultados confirman el alto nivel de resistencia reportado, independiente de la especie o la cepa de Fusarium involucrada. Los valores tan altos de MICs son preocupantes y sugieren la necesidad de evaluar nuevos medicamentos.

ABSTRACT Objective The aim of the present study was to evaluate the antifungal susceptibilities of isolates of Fusarium to amphotericin B, itraconazole and voriconazole. Methods The susceptibility of 44 isolates of Fusarium was tested by the E-test methodology. Results All the isolates were resistant to itraconazole, and 89 % and 54,5 % were resistant to amphotericin B and voriconazole, respectively. Discussion The results confirm the high level of resistance reported, regardless of the species or the strain of Fusarium involved. The high MICs level observed are worrying and suggest that new drugs are needed.

ABSTRACT Objective The aim of the present study was to evaluate the antifungal susceptibilities of isolates of Fusarium to amphotericin B, itraconazole and voriconazole. Methods The susceptibility of 44 isolates of Fusarium was tested by the E-test methodology. Results All the isolates were resistant to itraconazole, and 89 % and 54,5 % were resistant to amphotericin B and voriconazole, respectively. Discussion The results confirm the high level of resistance reported, regardless of the species or the strain of Fusarium involved. The high MICs level observed are worrying and suggest that new drugs are needed.

RESUMEN Objetivo Evaluar la susceptibilidad antifúngica in vitro de aislamientos de Fusarium a los antimicóticos amfotericina B, itraconazol y voriconazol. Métodos La susceptibilidad de 44 aislamientos clínicos de Fusarium fue evaluada por el método de difusión en disco, E-test. Resultados Todos los aislamientos fueron resistentes al itraconazol, y 89 % y 54,5 % fueron resistentes a la amfotericina B y al voriconazol, respectivamente. Discusión Los resultados confirman el alto nivel de resistencia reportado, independiente de la especie o la cepa de Fusarium involucrada. Los valores tan altos de MICs son preocupantes y sugieren la necesidad de evaluar nuevos medicamentos.