Resumo O fator de crescimento transformador-β (TGF-β), um mediador do crescimento prostático, induz a angiogênese e inibe a proliferação celular. Neste estudo, esse marcador foi utilizado com o objetivo de avaliar sua imunomarcação no tecido normal e com lesões proliferativas benignas, pré-neoplásicas e neoplásicas da próstata canina. Para isso, foram selecionadas 54 glândulas com histomorfologia normal, hiperplasia prostática benigna (HPB) epitelial, HPB estromal, atrofia inflamatória proliferativa (PIA), neoplasia intraepitelial prostática (PIN) e carcinoma, utilizadas para a confecção de um bloco de microarranjo tecidual (Tissue Microarray - TMA). As lâminas de TMA foram submetidas à técnica de imunoistoquímica com o anticorpo anti-TGF-β, sendo avaliada a intensidade de imunomarcação nas células epiteliais e estromais. Houve imunomarcação de TGF-β no tecido normal e naqueles com lesões proliferativas. Maior imunomarcação de TGF-β foi constatada nas células do tecido prostático normal e com HPB, enquanto as células prostáticas com PIA, PIN e carcinoma exibiram menor imunomarcação dessa citocina, o que sugere a ação do TGF-β na manutenção da homeostase do tecido normal e com lesão proliferativa benigna e na progressão das lesões proliferativas pré-malignas e malignas da próstata canina.

Abstract The transforming growth factor-β (TGF-β), a mediator of prostatic growth induces angiogenesis and inhibits cell proliferation. It was used in this study in order to evaluate its expression in normal prostatic tissue and those with benign proliferative lesions, pre-malignant and malignant prostatic diseases. A total of 54 glands with normal histomorphology, epithelial benign prostatic hyperplasia (BPH), stromal BPH, prostatic inflammatory atrophy (PIA), prostatic intraepithelial neoplasia (PIN), and adenocarcinoma were selected and used in the tissue microarray block (TMA). The TMA slides were subjected to the immunohistochemistry with anti-TGF-β and its staining intensity in epithelial and stromal cells was evaluated. There was TGF-β immunostaining by both normal tissues and those with proliferative lesions. Higher TGF-β immunostaining was observed in cells from normal prostatic tissues and with HPB, whereas prostatic cells with PIA, PIN and carcinoma exhibited lower immunostaining of this cytokine, suggesting the action of TGF-β in the maintenance of normal tissue homeostasis and with benign proliferative lesion and in the progression of pre-malignant and malignant proliferative lesions of the canine prostate.

RESUMO: Este estudo avaliou a correlação entre o escore clínico, a contagem de mastócitos e a imunomarcação de interleucina 31 (IL-31) na pele de cães com dermatite atópica. Foram selecionados 31 cães de diferentes raças, com idade entre um e oito anos, sendo 20 fêmeas e 11 machos, divididos em discretamente, moderadamente e acentuadamente acometidos por dermatite atópica segundo o sistema CADESI-4. Amostras da pele das regiões axilar e interdigital foram colhidas e submetidas às colorações de hematoxilina e eosina para a avaliação cito-histomorfológica e azul de toluidina para a contagem de mastócitos, bem como a técnica de imunoistoquímica para a imunomarcação de IL-31. Os animais com maior escore de dermatite atópica apresentaram maior número de mastócitos e de células imunomarcadas para IL-31. Houve maior número de células imunomarcadas para IL-31 na pele da axila em relação à interdigital nos cães com a doença. Foi constatada correlação entre o escore clínico e a quantidade de mastócitos no interdígito, bem como entre o escore clínico e a quantidade de células imunomarcadas para IL-31 na axila. Também foi verificada correlação entre a quantidade de mastócitos e células imunomarcadas para IL-31 na pele da região axilar, mas não da interdigital. Conclui-se que mastócitos e a IL-31 estão envolvidos na patogenia da DAC, assim como linfócitos e plasmócitos. Também, quanto maior o grau de severidade clínica da doença, maior a quantidade de mastócitos e IL-31 na pele dos animais com DAC, o que remete à influência desses componentes imunológicos na gênese do prurido e progressão da doença.

ABSTRACT: In this study the correlation between the clinical score, mast cell count and interleukin 31 (IL-31) immunostaining in the skin of dogs with atopic dermatitis was determined. A total of 31 dogs of different breeds, from one to eight years of age, were chosen for the study. The 20 females and 11 males were categorized based on the CADESI-4 system, as having discrete, moderate or marked atopic dermatitis. Skin samples were collected from the axillary and interdigital regions and stained with hematoxylin and eosin for cytohistomorphological analyses and toluidine blue to evaluate the mast cell counts, and immunohistochemistry for the IL-31 immunostaining. Animals revealing higher atopic dermatitis scores had greater numbers of mast cells and IL-31 immunolabeled cells. More numbers of cells immunolabeled for IL-31 were evident in the axillary skin compared with the interdigital skin in dogs having this condition. A correlation was identified between the clinical scores and mast cell numbers in the interdigital region, as well as between the clinical scores and number of cells immunolabeled for IL-31 in the axillary area. A correlation was also reported between the mast cell numbers and IL-31 immunolabeled cells only in the axillary skin, and none in the interdigital regions. It was thus concluded that the mast cells and IL-31 are involved in the pathogenesis of the canine atopic dermatitis (CAD), as well as lymphocytes and plasma cells. It was also observed that the higher the degree of clinical severity of the disease, the more the numbers of mast cells and IL-31 in the skin of those animals suffering from CAD, which implies the influence of these immunological constituents on the genesis of pruritus and disease progression.

RESUMO: A expressão gênica de ErbB1 e ErbB2 e a imunomarcação de EGFR (Her1) e Her2 (c-erbB-2) foram avaliadas para verificar o envolvimento desses receptores em lesões pré-malignas e malignas da próstata canina, como a atrofia proliferativa inflamatória (PIA) e o carcinoma prostático (PC). Em relação à intensidade de imunomarcação para EGFR, não houve diferença entre o tecido prostático normal e com PIA e PC. Em relação a Her2, observou-se diferença de imunomarcação entre o tecido prostático normal e aqueles com PIA e PC e entre os com PIA e PC. Não houve correlação entre EGFR e Her2. O gene ErbB1 foi detectado em duas amostras normais, uma de PIA e em todas as amostras de PC. O gene ErbB2 foi detectado em duas amostras de PIA e em todas as amostras de PC, não sendo detectado no tecido prostático normal. Conclui-se que EGFR e Her2 atuam nas lesões de PIA e PC, sugerindo o envolvimento destes na carcinogênese da próstata canina.

ABSTRACT: Gene expression of ErbB1 and ErbB2, and immunostaining of EGFR (Her1) and Her2 (c-erbB-2) were evaluated in this study to ascertain whether these receptors are involved in the evolution of canine premalignant and malignant prostatic lesions, as proliferative inflammatory atrophy (PIA) and prostatic carcinoma (PC). With regards to the intensity of EGFR immunostaining, there was no difference between normal prostatic tissue and tissues with PIA or PC. In relation to Her2 immunostaining, there were differences between normal prostatic tissue and those with PIA and PC, as also differences between prostates with PIA and PC. There was no correlation between EGFR and Her2 immunostaining. ErbB1 gene product was detected in two normal tissue samples, in one with PIA, and in all samples with PC. ErbB2 mRNA was recorded in two canine samples with PIA, in all with PC, but was not detected in normal prostatic tissue. It was concluded that EGFR and Her2 play roles in canine PIA and PC, suggesting that those receptors may be involved in canine prostatic carcinogenesis.

Resumo A leishmaniose visceral canina (LVC) é uma doença que envolve lesões multissistêmicas e, dentre os vários tecidos acometidos, a terceira pálpebra está frequentemente envolvida. Este anexo ocular tem sido alvo de estudo tanto para a elucidação da patogênese da doença quanto para o avanço diagnóstico. O presente trabalho teve por objetivo avaliar as alterações histológicas presentes na terceira pálpebra de cães naturalmente infectados por Leishmania chagasi e realizar a imunodetecção do parasita. Vinte e seis amostras de terceira pálpebra de cães sintomáticos foram avaliadas quanto à coloração de HE e à imunoistoquímica com soro de cão positivo para Leishmania sp. A principal alteração observada na conjuntiva da terceira pálpebra foi infiltração inflamatória predominantemente linfoplasmocitária, com células de Mott e histiócitos parasitados permeando a área de exsudação. Adicionalmente, perda de estratificação e ulceração epitelial, rarefação ou hiperplasia de células caliciformes foram achados costumazes. Na glândula lacrimal da terceira pálpebra, o mesmo padrão inflamatório foi observado, acompanhado frequentemente de atrofia acinar e dilatação dos ductos secretórios. A imunoistoquímica revelou parasitismo em todas as amostras, em diferentes intensidades.

Abstract Canine visceral leishmaniasis (CVL) is a disease with multisystemic injuries, and among the various tissues affected, the third eyelid (TE) is often involved. This ocular adnexa has been studied for the leishmaniasis pathogenesis elucidation and for diagnosis advance. This study aimed to carry out the parasite immunodetection and evaluate histologic lesions in TE of Leishmania (leishmania) chagasi naturally infected dogs. Twenty-six TE samples from infected dogs were submitted to histologic evaluation and to immunohistochemistry for Leishmania sp. The main lesion observed in the third eyelid conjunctiva (TEC) was lymphoplasmacytic inflammation, with Mott cells and parasitized histiocytes. Additionally, loss of epithelial stratification, ulceration, goblet cells thinning or hyperplasia were often found. The same inflammatory pattern was observed in the third eyelid lacrimal gland (TELG), often accompanied by acinar atrophy and secretory ducts dilatation. Immunohistochemistry revealed parasitism in all samples, in different intensities.

Lesões prostáticas como a neoplasia intraepitelial prostática (PIN) e a atrofia inflamatória proliferativa (PIA) são estudadas na espécie humana e canina devido ao seu potencial de malignidade. O sistema de ativador de plasminogênio (PA) tem sido sugerido como um importante mecanismo na adesão celular, angiogênese, inflamação e invasão tumoral. O receptor ativador de plasminogênio do tipo uroquinase (uPAR) é um componente do PA, expresso em células tumorais e estromais. Avaliou-se, por imunoistoquímica em lâmina de microarranjo tecidual (TMA), a expressão de uPAR no tecido prostático canino normal e com desordens proliferativas (hiperplasia prostática benigna-HPB, atrofia inflamatória proliferativa-PIA, neoplasia epitelial prostática-PIN e carcinoma-CP), com o objetivo de verificar o papel desta enzima na remodelação de matriz extracelular (ECM) e no processo de invasão tecidual. Foram obtidos 298 cores e 355 diagnósticos, sendo 36 (10,1%) próstatas normais, 46 (13,0%) com HPB, 128 (36,1%) com PIA, 74 (20,8%) com PIN e 71 (20,0%) com CP. Há variação na expressão de uPAR na próstata canina de acordo com a lesão, com menor expressão nas glândulas normais e com HPB, e maior naquelas com lesões displásicas e (PIA e PIN) e neoplásicas (CP). A superexpressão de uPAR nos microambientes inflamatório e neoplásico indica aumento da atividade proteolítica em próstatas caninas com PIA, PIN e CP.

Prostatic lesions such as prostatic intraepithelial neoplasia (PIN) and proliferative inflammatory atrophy (PIA) are studied in human and canine species due to their malignance potential. The plasminogen activator (PA) system has been suggested to play a central role in cell adhesion, angiogenesis, inflammation, and tumor invasion. The urokinase-type plasminogen activator receptor (uPAR) is a component of the PA, with a range of expression in tumor and stromal cells. In this study, uPAR expression in both canine normal prostates and with proliferative disorders (benign prostatic hyperplasia-BPH, proliferative inflammatory atrophy-PIA, prostatic intraepithelial neoplasia-PIN, and carcinoma-PC) was evaluated by immunohistochemistry in a tissue microarray (TMA) slide to establish the role of this enzyme in extracellular matrix (ECM) remodeling and in the processes of tissue invasion. A total of 298 cores and 355 diagnoses were obtained, with 36 (10.1%) normal prostates, 46 (13.0%) with BPH, 128 (36.1%) with PIA, 74 (20.8%) with PIN and 71 (20.0%) with PC. There is variation in the expression of uPAR in canine prostate according to the lesion, with lower expression in normal tissue and with BPH, and higher expression in tissue with PIA, PIN and PC. The high expression of uPAR in inflammatory and neoplastic microenvironment indicates increased proteolytic activity in canine prostates with PIA, PIN, and PC.

Este estudo teve como objetivo avaliar a expressão das metaloproteinases 2 (MMP-2) e 9 (MMP-9) em próstatas caninas normais e com desordens proliferativas, verificando o papel dessas enzimas na remodelação da matriz extracelular (MEC) e no processo de invasão tecidual. Um total de 355 amostras prostáticas foram obtidas, sendo 36 (10,1%) normais, 46 (13,0%) com hiperplasia prostática benigna (HPB), 128 (36,1%) com atrofia inflamatória proliferativa (PIA), 74 (20,8%) com neoplasia intraepitelial prostática (PIN) e 71 (20,0%) com carcinoma prostático (CP). Houve diferença de imunomarcação citoplasmática para MMP-2 e MMP-9 entre o epitélio acinar e o estroma periacinar, quanto aos diferentes diagnósticos. Observou-se correlação entre a expressão de MMP-2 e MMP-9 em relação ao número de células marcadas no epitélio acinar e estroma periacinar, bem como para a intensidade de marcação das células estromais periacinares em próstatas caninas com PIA. Conclui-se que há variação na expressão de MMP-2 e MMP-9 em próstatas caninas de acordo com a lesão, com menor expressão em próstatas caninas normais e com HPB, e maior naquelas com PIA, PIN e CP. Ainda, o microambiente inflamatório na PIA influencia a atividade de ambas as enzimas.

In this study the expression of metalloproteinases 2 (MMP-2) and 9 (MMP-9) in canine normal prostates and with proliferative disorders was evaluated to verify the role of these enzymes in extracellular matrix remodeling (ECM) and in the tissue invasion process. A total of 355 prostatic samples were obtained, from which 36 (10.1%) were normal prostates, 46 (13.0%) with benign prostatic hyperplasia (BPH), 128 (36.1%) with proliferative inflammatory atrophy (PIA), 74 (20.8%) with prostatic intraepithelial neoplasia (PIN), and 71 (20.0%) with prostatic carcinoma (PC). Difference in cytoplasmic immunohistochemical staining of MMP-2 and MMP-9 between acinar epithelium and periacinar stroma was found regarding the different diagnosis. The correlation between MMP-2 and MMP-9 expression in relation to the number of labeled cells in acinar epithelium and periacinar stroma, as well as to the staining intensity in the periacinar stromal cells was evidenced in canine prostates with PIA. In conclusion, MMP-2 and MMP-9 expression has a variation in canine prostate according to the lesion, with lower expression in normal tissue and with BPH, and higher expression in those with PIA, PIN and PC. Moreover, the inflammatory microenvironment of the PIA has influence in the activity of both enzymes.

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito antioxidante do extrato hidroalcoolico da casca do pequi (EHCP) em ratos após a administração de doxorrubicina (DOX). Foram utilizados ratos da raça Wistar, distribuídos em quatro grupos, sendo que os animais do G1 (n=6) receberam água e solução salina (grupo controle), G2 (n=7) EHCP e solução salina, G3 (n=7) água e DOX e G4 (n=6) EHCP e DOX. O EHCP foi administrado por gavagem durante 10 dias aos ratos dos grupos G2 e G4 e água aos dos G1 e G3. DOX na dose de 10mg kg-1 e solução salina 0,9% foram administradas por via intravenosa no dia sete após o início do experimento aos animais de G3 e G4 e aos de G1 e G2, respectivamente. Foram avaliados peso e taxa de mortalidade. Dez dias após o início do experimento, foi avaliada a concentração sérica de creatina quinase MB (CK-MB), troponina e mioglobina, e os ratos foram submetidos à eutanásia e à avaliação anatomopatológica. Não houve diferença entre os tratamentos quanto ao peso dos animais (P<0,05). Com relação à taxa de mortalidade, houve aumento no grupo 2 (P<0,05). Os resultados do teste qualitativo para a detecção de CK-MB, troponina I e mioglobina nos quatro grupos foram negativos e não foram observadas alterações macroscópicas nos órgãos dos ratos dos diferentes grupos. Constatou-se necrose tubular aguda multifocal de intensidade moderada a acentuada nas regiões cortical e medular nos rins de todos os ratos avaliados. A DOX em dose única de 10mg kg-1 e via intravenosa não promove alterações cardíacas em ratos e o EHCP nas condições avaliadas aumenta o índice de mortalidade em ratos, o que pode estar relacionado a substâncias tóxicas presentes na casca desse fruto.

The objective of this study was to evaluate the antioxidant effect of the hydroalcoholic extract of pequi peel (HEPP) in rats after administration of doxorubicin (DOX). Were used 26 Wistar rats divided into four groups, which G1 (n=6) received water and saline solution (control group), G2 (n=7) HEPP and saline solution, G3 (n=7) water and DOX, and G4 (n=6) HEPP and DOX. The HEPP was administered by gavage for 10 days to G2 and G4 and water to G1 and G3. DOX and saline solution were administered intravenously on day seven after the start of the experiment, with the DOX (10mg kg-1) applied in G3 and G4, and saline solution 0.9% in G1 and G2. Were evaluated weight and mortality rate. Ten days after the start of the experiment were evaluated creatina kinase MB (CK-MB), troponin and myoglobin, and the rats were euthanized and evaluated morphologically. There was no difference between treatments in weight of animals (P>0.05). About the mortality rate an increase in group 2 was showed (P<0.05). The results of the qualitative test for the detection of CK-MB, troponin I and myoglobin in the four groups were negative and there were no macroscopic changes in different rat's organs of different groups. Multifocal and moderate to severe acute tubular necrosis in cortical and medullary regions of the kidneys was observed in all rats studied. DOX intravenous and in a one dose of 10mg kg-1 don't induce cardiac changes in rats and the HEPP in conditions here evaluated increase the rate of mortality of rats, which may be related to toxic substances in the peel of this fruit.

A atrofia inflamatória proliferativa (PIA) é uma lesão prostática pré-maligna de grande ocorrência na próstata humana e, mais recentemente, também observada em cães. Esta pesquisa teve por objetivo verificar os aspectos histomorfológicos da PIA na próstata canina. Foram utilizadas 43 próstatas de cães adultos, de várias raças e portes, e com histórico ou não de doença prostática. Os focos de PIA apresentaram epitélio displásico, formado por ácinos atróficos e com mais de uma camada de células de morfologia atípica, especialmente anisocitose, anisocariose, citoplasma reduzido, núcleo volumoso e com nucléolo evidente. As alterações epiteliais eram sempre acompanhadas de infiltrado inflamatório intersticial periacinar predominantemente linfocitário. Foi observado um índice de 65% de PIA. Destes, 39% corresponderam à PIA com infiltrado inflamatório discreto, 42% à PIA com infiltrado moderado e 19% à PIA com infiltrado acentuado. Dessa forma, foi possível caracterizar a PIA prostática canina e constatar alta ocorrência dessa alteração nos cães examinados. Considera-se de grande importância a caracterização histomorfológica da PIA em cães, já que essa lesão vem sendo estudada na próstata humana quanto ao potencial pré-maligno. Ressalta-se ainda a possibilidade de utilização da próstata do cão como modelo experimental da PIA humana, considerando a semelhança dessa afecção prostática em ambas as espécies.

Proliferative inflammatory atrophy (PIA) is a premalignant prostatic change with high occurrence in human prostate and it has been recently observed in dogs. This research aimed to verify the morphologic aspects of the PIA in canine prostate. It was studied 43 glands of adult dogs of several breeds and sizes and with or without a history of prostatic disease. PIA focus was characterized by dysplastic epithelium, atrophic acini formed by several layers of cells with variable degrees of anisocytosis, anisokaryosis, reduced amount of cytoplasm and nuclei with prominent nucleoli. The epithelial changes were always accompanied by periacinar interstitial infiltrate composed of mononuclear cells, especially lymphocytes. The histomorphological evaluation showed occurrence of 65% of PIA. Out of these, 39% were PIA with discrete inflammatory infiltration, 42% PIA with moderate infiltrate and 19% PIA with marked infiltration. Thus, it was possible to characterize the PIA in the canine prostate which had high occurrence. The histomorphological characterization of canine PIA is considered of great importance because the premalignant characteristic of it have been studied in human prostate. The canine prostate can be used as an experimental model of human PIA, because the lesion is similar in both species.