ABSTRACT The primates that inhabit the rainforest surrounding the city of Manaus (Amazonas, Brazil) have long been recognised as potentially important reservoirs of emerging and re-emerging infectious diseases (ERIDs). PCR amplification of filarial sequences from wild-caught Simulium oyapockense has been used to incriminate potentially important Amazon-region ERID bridge vectors by showing they had previously fed on non-human primates. The broader use of filarial parasite sequences for the incrimination of biting insects as potentially important zoonotic disease vectors is limited by a paucity of primate-derived filarial parasite reference sequences which can be matched to the PCR amplified sequences obtained from insect-vector vectors. Here we have used shotgun sequencing to obtain reference data from an adult Dipetalonema gracile parasite which was found infecting a wild pied tamarin (Saguinus bicolor) in a peripheral region of Manaus. We report the parasite´s complete mitochondrial genome (which is 13,647 base pairs in length), 894,846 base pairs of its Wolbachia genome and 6,426 base pairs of its ribosomal DNA locus (spanning from the start of its 18S subunit to the end of its 28S subunit). Despite being critically endangered, S. bicolor is commonly encountered around the periphery of Manaus and in urban forest fragments. The reported sequences may be a useful reference tool for identifying ERID bridge vectors and potentially provide some insights into the amount and the nature of contact between primate pathogen reservoirs and the residents of Manaus.

RESUMO Os primatas que habitam a floresta tropical ao redor da cidade de Manaus (Amazonas, Brasil) há muito são reconhecidos como reservatórios potencialmente importantes de doenças infecciosas emergentes e reemergentes. Sequências de DNA de parasitas filariais detectadas por PCR em amostras de Simulium oyapockense foram usadas para demonstrar que eles haviam se alimentado anteriormente de primatas não humanos e, dessa maneira, incriminar vetores-ponte da região amazônica. O uso mais amplo de detecção de parasitas filariais para a incriminação de vetores-ponte é limitado por uma escassez de sequências referência de parasitas filarias obtidas de hospedeiros. Aqui nós usamos o sequenciamento tipo shotgun para obter dados de referência de um parasita adulto Dipetalonema gracile encontrado infectando um sauim-de-coleira, Saguinus bicolor no entorno de Manaus. Relatamos o genoma mitocondrial completo do parasita (que tem 13.647 pares de bases de comprimento), 894.846 pares de bases de seu genoma de Wolbachia e 6.426 pares de bases de seu locus de DNA ribossômico (desde o início de sua subunidade 18S até o final de sua subunidade 28S). Apesar de criticamente ameaçado, S. bicolor é comumente encontrado no entorno de Manaus e em fragmentos florestais urbanos. As sequências relatadas podem ser uma ferramenta de referência útil para identificar vetores ponte e potencialmente fornecer algumas informações sobre o contato entre reservatórios de patógenos de primatas e os moradores de Manaus.

Abstract The canine filarial parasite Dirofilaria immitis has not been reported in Brazil´s Amazonas state capital, Manaus, for over a century. Here, we report one imported and 27 autochthonous D. immitis infections from a microfilarial survey of 766 domestic dog blood samples collected between 2017 and 2021 in Manaus. An Overall prevalence estimate of 15.44% (23/149) was calculated from our two rural collection sites; a prevalence of 1.22% (4/328) was estimated at our periurban collection site, and an overall prevalence of 0.35% (1/289) was calculated from our two urban clinic collections. Our data suggest that in the urban areas of Manaus, where the parasites are very likely vectored by the same species of mosquito that historically vectored Wuchereria bancrofti (Culex quinquefasciatus), prevalence levels are very low and possibly maintained by an influx from rural areas where sylvatic reservoirs and/or more favorable vector transmission dynamics maintain high prevalences.

Resumo O parasita filarial canino, Dirofilaria immitis, causa doença zoonótica, mas não tem sido registrado em Manaus, capital do estado do Amazonas, há mais de um século. Neste trabalho, foi relatado uma infecção por D. immitis alóctone e 27 autóctones de um levantamento de microfilárias em 766 amostras de sangue em cães domésticos, coletados entre 2017 e 2021 em Manaus. A prevalência de 15,44% (23/149) foi estabelecida em áreas rurais, 1,22% (4/328) para áreas periurbanas e de 0,35% (1/289) para duas clínicas veterinárias localizadas na zona urbana da cidade. Estes dados sugerem, portanto, que nas áreas urbanas de Manaus, nas quais o parasita é provavelmente vetorizado pela mesma espécie de mosquito que, historicamente, transmitiu Wuchereria bancrofti (Culex quinquefasciatus). Também os níveis de prevalência são baixos e, possivelmente, mantidos por um influxo de áreas rurais onde reservatórios silvestres e/ou dinâmicas de transmissão vetorial mais favoráveis mantêm uma prevalência mais elevada.

In a recent issue of Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, published in Rio de Janeiro in February 2014 (109: 87-92), Adami et al. have published a survey reporting Mansonella parasite prevalence in the Amazon Region. This report makes a useful contribution to the existing knowledge of filarial parasite distribution within the Amazon area, parasite prevalence rates in relation to age and occupation and provides observations on the possible clinical impact of Mansonella ozzardi. Their publication also provides an account of what appears to be a novel ELISA that has recently been used in the Simuliidae and Onchocerciasis Laboratory of the Oswaldo Cruz Institute, Rio de Janeiro, Brazil. We are concerned that the publication of this ELISA may have created an excessively positive impression of the effectiveness of the onchocerciasis recrudescence serological surveillance tools that are presently available for use in the Amazonia onchocerciasis focus. In this letter we have, thus, sought to highlight some of the limitations of this ELISA and suggest how continuing insecurities concerning the detection of antibodies to Onchocerca volvulus within the Amazonia onchocerciasis focus might be minimised.