RESUMO Este estudo foi realizado com o objetivo de avaliar a incidência de Fusarium spp. em híbridos comerciais de milho e manejos de irrigação por pivô central em segunda safra. O experimento foi conduzido em delineamento de blocos casualizados em esquema de parcelas subdivididas, sendo as parcelas constituídas pelos manejos de irrigação com cinco frequências (1, 2, 3, 4, 5 dias, primeiro experimento) e cinco lâminas d’água (25, 50, 75, 100 e 125% da evapotranspiração da cultura) e as subparcelas com cinco híbridos de milho (2B810, MG580, AS1633, DKB290 e AG8544), em quatro repetições. Foram avaliadas altura de planta, altura de inserção de espigas, umidade no momento da colheita, produtividade e incidência de podridão no colmo. Tanto as a frequências de irrigação como as lâminas de irrigação não influenciaram a incidência da doença. A frequência de irrigação de um dia proporcionou o maior rendimento de híbridos de milho. O híbrido 2B810 apresentou o maior rendimento e a menor incidência da doença.

ABSTRACT This study aimed to verify the incidence of Fusarium spp. in commercial maize hybrids and irrigation management strategies utilizing center pivot systems. The experiment was carried out during the second season in a randomized block design with a split-plot arrangement with five maize hybrids (2B810, MG580, AS1633, DKB290, and AG8544). The plots were irrigated with five frequencies (1, 2, 3, 4, and 5 days) in one experiment, and five water depths (at 25, 50, 75, 100, and 125% of crop evapotranspiration) in another experiment. Plant height, ear insertion height, moisture at harvest time, yield, and incidence of stalk rot were evaluated. Neither irrigation frequency nor irrigation depth influenced the incidence of disease. The one-day irrigation frequency provided the highest yield for maize hybrids. Hybrid 2B810 showed the highest yield and the lowest incidence of the disease.

ABSTRACT Zika virus (ZIKV) clinical presentation and frequency/duration of shedding need further clarification. Symptomatic ZIKV-infected individuals identified in two hospitals in Sao Paulo State, Brazil, were investigated regarding clinical characteristics, shedding in body fluids, and serodynamics. Ninety-four of 235 symptomatic patients (Site A: 58%; Site B: 16%) had Real-Time PCR-confirmed ZIKV infection; fever, headache and gastrointestinal symptoms were less frequent, and rash was more frequent compared to ZIKV-negative patients. Real-Time PCR in serum had worse performance compared to plasma, while urine had the highest sensitivity. Shedding in genital fluids and saliva was rare. IgM positivity was the highest <14 days after the symptoms onset (86%), decreasing >28 days (24%); IgG positivity increased >14 days (96%) remaining positive in 94% of patients >28 days. ZIKV prevalence varied importantly in two neighboring cities during the same transmission season. Urine Real-Time PCR can improve diagnostic sensitivity; serum testing is less useful. Accurate serological tests are needed to improve diagnosis and surveillance.

RESUMOEste estudo avaliou a aplicabilidade do kDNA-PCR como método de rotina para diagnóstico de leishmaniose tegumentar americana (ATL) no Instituto de Infectologia Emílio Ribas (IIER), São Paulo, SP, Brasil. O método kDNA-PCR detectou DNA de Leishmania em 87,5% (112/128) dos pacientes com suspeita de ter leishmaniose e, os métodos tradicionais apresentaram as seguintes porcentagens de positividade: 62,8% (49/78) para o teste de Montenegro, 61,8% (47/76) para a pesquisa direta e 19,3% (22/114) para cultura in vitro. O método molecular confirmou a doença em amostras negativas ou inconclusivas pelos métodos laboratoriais tradicionais e, mostrou-se capaz de auxiliar na identificação de infecções causadas pela espécie Leishmania (V.) braziliensis. Além disso, a revisão dos prontuários médicos confirmou a importância do método PCR-RFLP no diagnóstico final de ATL, prognóstico e escolha do tratamento. Assim, recomendamos a inclusão do PCR como método diagnóstico de ATL na rotina hospitalar, e sugerimos um fluxograma para solicitação de exames laboratoriais.

SUMMARYThis study evaluated the applicability of kDNA-PCR as a prospective routine diagnosis method for American tegumentary leishmaniasis (ATL) in patients from the Instituto de Infectologia Emílio Ribas (IIER), a reference center for infectious diseases in São Paulo - SP, Brazil. The kDNA-PCR method detected Leishmania DNA in 87.5% (112/128) of the clinically suspected ATL patients, while the traditional methods demonstrated the following percentages of positivity: 62.8% (49/78) for the Montenegro skin test, 61.8% (47/76) for direct investigation, and 19.3% (22/114) for in vitro culture. The molecular method was able to confirm the disease in samples considered negative or inconclusive by traditional laboratory methods, contributing to the final clinical diagnosis and therapy of ATL in this hospital. Thus, we strongly recommend the inclusion of kDNA-PCR amplification as an alternative diagnostic method for ATL, suggesting a new algorithm routine to be followed to help the diagnosis and treatment of ATL in IIER.

A Pentamidina (PEN) é um composto alternativo para o tratamento de pacientes com leishmaniose que apresentam resistência ao antimônio, cujo alvo celular continua incerto. Uma abordagem para se identificar prováveis alvos seria a identificação e super-expressão de genes capazes de mediar resistência a PEN. A partir de uma genoteca construída com o DNA de Leishmania major em um vetor - cosmídio que se desenvolve tanto em bactérias como nas células do parasita, isolamos um locus que após transfecção é capaz de produzir resistência a PEN às células do parasita. Almejando o mapeamento desse locus de leishmania, o inserto clonado nesse cosmídio foi deletado através de duas digestões parciais sucessivas com enzimas de restrição, seguida de transfecção em células selvagens, super-expressão gênica, indução e testes funcionais na presença de PEN. Para determinar o gene de Leishmania relacionado com a resistência a PEN, o seqüenciamento de nucleotídeos foi executado após inserção de elementos transposicionais de Drosophila melanogaster no interior do inserto deletado para atuar como 'ilhas de iniciadores'. Descrevemos aqui o mapeamento desse locus, após a inserção transposicional, que além de facilitar o seqüenciamento de nucleotídeos de grandes fragmentos de DNA, permite uma rápida identificação do gene relacionado com esse fenótipo. Experimentos posteriores revelaram neste locus a presença do gene de uma Glicoproteína-P de membrana, cujo papel no metabolismo na Leishmania está sendo analisado.

Pentamidine (PEN) is an alternative compound to treat antimony-resistant leishmaniasis patients, which cellular target remains unclear. One approach to the identification of prospective targets is to identify genes able to mediate PEN resistance following overexpression. Starting from a genomic library of transfected parasites bearing a multicopy episomal cosmid vector containing wild-type Leishmania major DNA, we isolated one locus capable to render PEN resistance to wild type cells after DNA transfection. In order to map this Leishmania locus, cosmid insert was deleted by two successive sets of partial digestion with restriction enzymes, followed by transfection into wild type cells, overexpression, induction and functional tests in the presence of PEN. To determine the Leishmania gene related to PEN resistance, nucleotide sequencing experiments were done through insertion of the transposon Mariner element of Drosophila melanogaster (mosK) into the deleted insert to work as primer island. Using general molecular techniques, we described here this method that permits a quickly identification of a functional gene facilitating nucleotide sequence experiments from large DNA fragments. Followed experiments revealed the presence of a P-Glycoprotein gene in this locus which role in Leishmania metabolism has now been analyzed.

As doenças oportunistas (DO) são a causa mais comum de morte em pacientes com AIDS. Para acessar a incidência de DO e a sobrevida na imunodeficiência avançada, foram incluídos 79 pacientes com AIDS tratados no Hospital Evandro Chagas (FIOCRUZ) no período de Setembro de 1997 a Dezembro de 1999, com ao menos uma contagem de células CD4 <= 100/mm³. A incidência de DO foi analisada pela regressão de Poisson e a sobrevida pela analise de Kaplan Meier e Cox, considerando um período retrospectivo (anterior à contagem de CD4 <= 100 cels/mm³) e um prospectivo (após a contagem de CD4 <= 100 cels/mm³) e controlando-se características demográficas clínicas e laboratoriais. O intervalo de confiança estipulado foi o de 95%. O período médio de acompanhamento foi de 733 dias (IC = 683 - 782). Durante o estudo, nove (11,4%) pacientes morreram. A sobrevida a partir do diagnóstico de AIDS foi em média de 2589 dias (IC = 2363 - 2816) e da data da contagem de CD4 <= 100 cels/mm³ foi em média de 1376 dias (IC = 1181 - 1572). A incidência de DO foi de 0,51 pp/ano no período pré-CD4 <= 100 cels/mm³ e 0,29 pp/ano no período pós-CD4 <= 100 cels/mm³. Um menor número de DO acumuladas no período pré-CD4 <= 100 cels/mm³ foi associado com taxas de incidência menores no período pós-CD4 <= 100 cels/mm³.O diagnóstico de AIDS baseado em contagem de CD4+ <= 200 cels/mm³ foi associado com menores taxas de incidência durante o período pós-CD4 <= 100 cels/mm³. As contagens basais de células CD4 acima de 50 cel/mm³ (HR = 0,16) foram associadas a um menor risco de morte assim como a restauração da contagem basal acima de 100 cels/mm³ (HR = 0,16). Controlando-se ambas, somente a restauração da contagem basal manteve sua significância estatística (HR = 0,22, p = 0,04) Encontramos uma baixa incidência de DO durante o período pós-CD4 <= 100 cels/mm³ e uma sobrevida longa após CD4 <= 100 cels/mm³. A sobrevida foi significativamente associada com a restauração das contagens de CD4 basais.

Opportunistic diseases (OD) are the most common cause of death in AIDS patients. To access the incidence of OD and survival in advanced immunodeficiency, we included 79 patients with AIDS treated at Hospital Evandro Chagas (FIOCRUZ) from September 1997 to December 1999 with at least one CD4 count <=100 cells/mm³. The incidence of OD was analyzed by Poisson's regression, and survival by Kaplan Meier and Cox analysis, considering a retrospective (before CD4 <=100 cells/mm³) and a prospective (after CD4 <=100 cells/mm³) period, and controlling for demographic, clinical and laboratory characteristics. The confidence interval estipulated was 95%. Mean follow-up period was 733 days (CI = 683-782). During the study 9 (11.4%) patients died. Survival from AIDS diagnosis was a mean of 2589 days (CI = 2363-2816) and from the date of the CD4 count CD4 <=100 cells/mm³ was a mean of 1376 (CI = 1181-1572) days. Incidence of OD was 0.51 pp/y before CD4 <= 100 cells/mm³ and 0.29 pp/y after CD4 <= 100 cells/mm³. A lower number of ODs before CD4 < 100 cells/mm³ was associated with lower incidence rates after CD4 <= 100 cells/mm³. AIDS diagnosis based on CD4+ counts <= 200 cells/mm³ was associated with lower incidence rates after CD4 <= 100 cells/mm³. Baseline CD4 counts above 50 cells/mm³ (HR = 0.13) and restoration of baseline CD4+ counts above 100 cells/mm³ (HR = 0.16) were associated with a lower risk of death. Controling both variables, only restoration of baseline counts was statistically significant (HR = 0.22, p = 0.04). We found a very low incidence of OD and long survival after CD4 < 100 cells/mm³. Survival was significantly associated with restoration of baseline CD4 counts above 100 cells/mm³.

Entre as viroses que causam prejuízos às culturas de leguminosas no Brasil, principalmente soja (Glycine max), feijão (Pliaseolus vulgaris) e caupi (Vigna unguiculata), inclui-se o mosaico severo do caupi, "cowpea severe mosaic Comovirus" - CpSMV, transmitido por Cerotoma arcuata (Coleóptera; Chrysomelidae). Um isolado deste vírus, denominado CpSMV-SP, proveniente de plantas de Vigna luteola coletadas no litoral sul do Estado de São Paulo, está sendo estudado no Laboratório de Fitovirologia e Fisiopatologia/ Instituto Biológico. O objetivo do presente trabalho consistiu em uma avaliação da preferência alimentar de C. arcuata em cultivares de soja e da suscetibilidade destes cultivares ao vírus. Na avaliação da preferência alimentar, os ensaios foram feitos com discos foliares colocados em placas de Petri, cobertas por copos plásticos, constituindo "arenas". Introduziu-se um coleóptero em cada "arena", realizando-se testes em confinamento, tanto com múltipla escolha (11 cultivares) como sem (um único cultivar). Os cultivares avaliados foram: 'BR-4', 'COODEPEC-201', 'EMBRAPA-48', 'EMBRAPA-59', 'IAC-177IAC-15-1', 'IAC-20', 'IAC-100', 'IAS-5', 'IGUAÇU' e 'PL-1'. Os ensaios de transmissão foram feitos através de inoculação mecânica e pelo vetor C. arcuata. Os resultados mostraram que os 11 cultivares são suscetíveis ao vírus, quando a inoculação é feita por extrato (mecanicamente). Ocorre também transmissão pelo coleóptero, porém não no caso de IAC-20 e IAC-100. C. arcuata alimenta-se de todos os cultivares, em maior ou em menor intensidade, exceção feita ao IAC-20, fato que pode justificar a não transmissão pelo menos para estas plantas. Considerando que a disseminação natural do CpSMV-SP ocorre através do vetor, e que ela é negativa para os dois cultivares referidos, pode-se recomendar preferencialmente o seu plantio, no Estado de São Paulo.

In Brazil, among the viruses causing crop losses in leguminous plants, mainly on soybean {Glycine max), bean (Phaseolus vulgaris) and cowpea (Vigna unguiculata), the cowpea severe mosaic virus (CpSMV), vectored by Cerotoma arcuata, is one of the best known. An isolate of CpSMV, named CpSMV-SP, was found on the Southern coastal region of São Paulo State infecting Vigna luteola, and has been subsequently studied at the Laboratory of Phytopathological Virology and Physiopathology of the Biological Institute. The feeding preference trials of C. arcuata, on soybean cultivars, were performed as follows: leaf discs were placed in Petri dishes covered with plastic glass-shaped lids to form an "arena" in which a single beetle was confined, taking into consideration multiple choice (11 cultivars), or not (a sole cultivar). The tested cultivars were 'BR-4', 'COODEPEC-201', 'EMBRAPA-48', 'EMBRAPA-59', 'IAC-177IAC-15-1', 'IAC-20', 'IAC-100', 'IAS-5', 'IGUAÇU' and 'PL-1'. For the susceptibility evaluation of cultivars, CpSMV-SP was C. arcuata and mecanically inoculated. Results showed that the feeding preference of C. arcuata varied and that the vector did not feed on IAC-20 only. When mecanicaly inoculated, all cultivars were susceptible to CpSMV-SP however, IAC-20 and IAC-100 were not infected when inoculated by C. arcuata. The former, probably due to the vector not fed on it, and the latter because the vector presented low or no efficiency. Considering these results and the natural occurrence of CpSMV-SP, the use of the cultivars IAC-20 and IAC-100 could be recommended for São Paulo State.

São apresentados os resultados obtidos na coleta de mosquitos do gênero Culex na área urbana da cidade de São Paulo, Brasil. Foram empregadas armadilhas luminosas automáticas tipo "New Jersey 50". Os resultados revelaram a presença de outras populações representadas principalmente por Culex chidesteri, C. dolosus e C. bidens as quais, em conjunto, chegaram algumas vezes a sobrepujar a de Culex pipiens fatigans. O maior rendimento foi obtido em áreas com abastecimento de água mas sem rede de esgotos. As coletas intradomiciliares revelaram franca predominância de C. pipiens fatigans.

With the use of New Jersey-50 light traps, a survey of Culex mosquitoes was made in the urban área of São Paulo City, Brazil. Beside Culex pipiens fatigans several other species were found, mainly represented by Culex chidesteri, C. dolosus and C. bidens. The combined incidence of these three populations follows nearly the fatigans one and frequently exceeding it. The most high levels of density were found at areas with water treatment but without sewage disposal. Domiciliary collections showed great Culex pipiens fatigans predominancy.

São apresentados os resultados obtidos na coleta de mosquitos do gênero Culex na área urbana da cidade de São Paulo, Brasil. Foram empregadas armadilhas luminosas automáticas tipo "New Jersey 50". Os resultados revelaram a presença de outras populações representadas principalmente por Culex chidesteri, C. dolosus e C. bidens as quais, em conjunto, chegaram algumas vezes a sobrepujar a de Culex pipiens fatigans. O maior rendimento foi obtido em áreas com abastecimento de água mas sem rede de esgotos. As coletas intradomiciliares revelaram franca predominância de C. pipiens fatigans.

With the use of New Jersey-50 light traps, a survey of Culex mosquitoes was made in the urban área of São Paulo City, Brazil. Beside Culex pipiens fatigans several other species were found, mainly represented by Culex chidesteri, C. dolosus and C. bidens. The combined incidence of these three populations follows nearly the fatigans one and frequently exceeding it. The most high levels of density were found at areas with water treatment but without sewage disposal. Domiciliary collections showed great Culex pipiens fatigans predominancy.