ABSTRACT Objectives: To standardize and validate a western blot test for the diagnosis of human immunodeficiency virus. Methods: A prospective observational study was carried out during 2017 and 2018. The western blot test was standardized, using the polyacrylamide gel electrophoresis technique with sodium dodecyl sulfate (SDS PAGE), being the nitrocellulose blot strips prepared with an Optimal HIV-1 antigen concentration of 2.71 µg / mm. The western blot was validated in the laboratory against 400 reference samples (300 sera and 100 plasmas): 200 positive and 200 negatives for antibodies against HIV-1, being the reference test the Immunoblot of the Fujirebio brand. Diagnostic performance parameters were estimated using Epidat v3.1 and Excel. Results: Eight important bands of the HIV-1 antigen were identified: p17, p24, p31, p39, gp41, p55, p66, and gp120. According to the Consortium for the normalization of serology for retroviruse, those that were taken as specific diagnostic bands were: p24, p31, gp41, and gp120. The sensitivity, specificity, positive and negative predictive value and validity index against sera were: 96.7%, 96.0%, 96.0%, 96.6%, 96.3%; and against plasmas: 98.0%, 100.0%, 100.0%, 98.0%, 99.0% respectively. No false positives and negatives were found, but some were undetermined. Conclusion: The development of this western blot test with proprietary technology presented similar diagnostic performance to the reference test, without showing cross-reactions, being useful for confirming HIV.

RESUMEN Objetivos: Estandarizar y validar una prueba de western blot para el diagnóstico del virus de inmunodeficiencia humana. Métodos: Se realizó un estudio observacional prospectivo durante el 2017 y 2018. Se estandarizó la prueba de western blot, usando la técnica de electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (SDS PAGE), siendo las tiras blot de nitrocelulosa preparadas con una concentración óptima de antígeno de VIH-1 de 2,71 µg/mm. Se validó el western blot en laboratorio, frente a 400 muestras referentes (300 sueros y 100 plasmas): 200 positivas y 200 negativas a anticuerpos contra VIH-1, siendo la prueba de referencia el Inmunoblot de la marca Fujirebio. Se estimaron los parámetros de rendimiento diagnóstico usando el programa Epidat v3.1 y Excel. Resultados: Se logró identificar ocho bandas importantes del antígeno de VIH-1: p17, p24, p31, p39, gp41, p55, p66 y gp120. De ellas, las que se tomaron como bandas diagnósticas específicas según el Consorcio de normalización de serología para los retrovirus, fueron: p24, p31, gp41 y gp120. La sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y negativo e índice de validez frente a sueros fueron: 96,7%, 96,0%, 96,0%, 96,6%, 96,3%; y frente a plasmas: 98,0%, 100,0%, 100,0%, 98,0%, 99,0% respectivamente. No se encontraron falsos positivos y negativos, pero si algunos indeterminados. Conclusión: El desarrollo de esta prueba western blot con tecnología propia, presentó similar rendimiento diagnóstico a la prueba de referencia, sin mostrar reacciones cruzadas; siendo útil para la confirmación del VIH.

ABSTRACT The main aim of this research is to identify the transmitted resistance (RT) of the Human Immunodeficiency Virus (HIV) in subjects from nine cities of Peru. For this, a descriptive and cross-sectional study was carried out in 135 adult subjects who agreed to participate through an informed consent. Blood samples were collected to perform the CD4 / CD8 cell count, viral load and HIV Genotyping. Socio-epidemiological information was collected from the participants through surveys. The results revealed a RT frequency of 9.8% (13/132). The information from this research might help improve the intervention and monitoring programs for antiretroviral resistance in the country.

RESUMEN El estudio tuvo como objetivo determinar la resistencia transmitida (RT) del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) en pacientes procedentes de nueve departamentos del Perú. Para ello, se realizó un estudio descriptivo en 132 adultos que aceptaron participar mediante un consentimiento informado. Se colectaron muestras de sangre para realizar el recuento de células CD4/CD8, determinar la carga viral y la genotipificación del VIH. Se recabó información socioepidemiológica de los participantes mediante encuestas. Los resultados revelaron una frecuencia de RT de 9,8% (13/132). Los resultados del estudio ayudarán a mejorar los programas de intervención y monitoreo de la resistencia a los antirretrovirales en el país.

ABSTRACT The main aim of this research is to identify the transmitted resistance (RT) of the Human Immunodeficiency Virus (HIV) in subjects from nine cities of Peru. For this, a descriptive and cross-sectional study was carried out in 135 adult subjects who agreed to participate through an informed consent. Blood samples were collected to perform the CD4 / CD8 cell count, viral load and HIV Genotyping. Socio-epidemiological information was collected from the participants through surveys. The results revealed a RT frequency of 9.8% (13/132). The information from this research might help improve the intervention and monitoring programs for antiretroviral resistance in the country.

RESUMEN El estudio tuvo como objetivo determinar la resistencia transmitida (RT) del virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) en pacientes procedentes de nueve departamentos del Perú. Para ello, se realizó un estudio descriptivo en 132 adultos que aceptaron participar mediante un consentimiento informado. Se colectaron muestras de sangre para realizar el recuento de células CD4/CD8, determinar la carga viral y la genotipificación del VIH. Se recabó información socioepidemiológica de los participantes mediante encuestas. Los resultados revelaron una frecuencia de RT de 9,8% (13/132). Los resultados del estudio ayudarán a mejorar los programas de intervención y monitoreo de la resistencia a los antirretrovirales en el país.

Abstract As Peru is endemic to HTLV-1, it is important to know the reliability of the most used screening trademarks in our country. In the present study, we evaluated two brands of ELISA (Biokit and Wantai) for the detection of antibodies against HTLV-1/2 against Peruvian samples. Both brands were evaluated against 242 sera: 123 positive for HTLV-1 and 119 negative for HTLV-1 (Reference: Immunoblot). We estimated diagnostic accuracy parameters. The sensitivity, specificity, PPV, NPV and validity index of Biokit were: 100%, 93.2%, 93.8%, 100%, 96.6%; respectively and Wantai were 99.1% for all parameters. We conclude that the Biokit brand is the most suitable for use in the National Reference Laboratory of Sexually Transmitted Viruses HIV/AIDS, Peru.

Resumen Por ser el Perú un país endémico de HTLV-1, es importante conocer la confiabilidad de las marcas comerciales para el diagnóstico más usadas en nuestro país. En el presente estudio, evaluamos dos marcas comerciales de pruebas de ELISA (Biokit y Wantai) para la detección de anticuerpos contra HTLV-1 frente a muestras peruanas. Ambas marcas comerciales fueron evaluadas frente a 242 sueros: 123 positivos a HTLV-1 y 119 negativos a HTLV-1 (referencia: inmunoblot). Se estimaron los parámetros de precisión diagnóstica. La sensibilidad, especificidad, VPP, VPN e índice de validez de Biokit fueron: 100%, 93,2%, 93,8%, 100%, 96,6%; respectivamente y de Wantai fue de 99,1% para todos los parámetros. Concluimos, que la marca Biokit fue la más adecuada para ser usada en el Laboratorio de Referencia Nacional de Virus de Transmisión Sexual, VIH/SIDA de Perú.