In small streams, aquatic community obtains energy mainly from leaves of the riparian vegetation. Processing these leaves involves physical, chemical and biological factors that may difer among leaf species. We assessed the efects of litter quality on leaf decomposition and colonization by aquatic invertebrates in a subtropical stream. Leaves from two native, highly represented tree species common in subtropical riparian areas, Ficus luschnathiana and Gasearía sylvestris, were incubated in coarse mesh bags in a stream. Bags were sampled weekly during an incubation of 28 days. The decomposition rates were higher in leaves of F. luschnathiana than in those of C. sylvestris. In the frst seven days of the experiment, leaves of F. luschnathiana lost ~60% of the initial mass, while Cascarla sylvestris lost around 30%. The leaves of C. sylvestris were initially more palatable than the leaves of F. luschnathiana, perhaps due to their lower lignin and cellulose content, and lignin to N ratio (Lignin:N). These structural compounds enhance leaf toughness thereby protecting them from herbivores and detritivores. However, leaves of F. luschnathiana were comparatively softer, which apparently facilitated fungal colonization and conditioning. Thus, leaves of F. luschnathiana attained high shredders density, which was refected in a higher leaf mass loss. Our results suggest that litter decomposition was sensitive to fungal biomass and leaf toughness. We observed that microbial conditioning, rather than the initial chemical quality of the leaf litter, decreased leaf toughness thereby stimulating further colonization by shredders and enhancing the decomposition process. The fungal community has a key-role in the degradation process within aquatic environments, breaking down even low-quality litter (i.e., F. luschnathiana) and promoting changes in the composition and structure of the invertebrate community.

En arroyos de bajo orden, la comunidad acuática obtiene energía principalmente del aporte de la hojarasca que proviene de la vegetación de la ribera. El procesamiento de las hojas implica medios físicos, químicos y factores biológicos que pueden diferir entre especies vegetales. En esta investigación se evaluó el efecto de la calidad del sustrato sobre el proceso de descomposición y sobre la colonización por invertebrados acuáticos asociados, en un arroyo subtropical. Las hojas de dos especies de árboles nativos, Ficus luschnathiana y Cascarla sylvestris, se incubaron en bolsas de malla gruesa en un arroyo durante 28 días, colectándose muestras semanalmente. Las tasas de descomposición fueron mayores en F. luschnathiana que en C. sylvestris. En los primeros siete días del experimento, F. luschnathiana perdió ~60% de la masa inicial, mientras que C. sylvestris perdió ~30%. Las hojas de C. sylvestris fueron inicialmente más palatables que las de F. luschnathiana, tal vez debido a su menor contenido de lignina y celulosa, y a su más baja relación Lignina:N. Estos compuestos estructurales le conferen rigidez a las hojas, las protegen de los herbívoros y las hacen más resistentes a los detritívoros. Sin embargo, la menor dureza de la hoja de F. luschnathiana facilitó la colonización fúngica, lo cual se refejó, a su vez, en una mayor colonización por invertebrados trituradores y, en general, una mayor pérdida de masa. Los resultados sugieren que la descomposición de la hojarasca fue sensible a la biomasa fúngica y a la dureza de las hojas. Se observó que la colonización microbiana y la disminución de la dureza de las hojas tienen un efecto más fuerte sobre la colonización por invertebrados trituradores y sobre el proceso de descomposición que la calidad química inicial de la hojarasca. La comunidad fúngica es clave en los procesos de degradación en el medio acuático, ya que actúa en la descomposición de la hojarasca, aun en aquella de baja calidad (i.e., F. luschnathiana), promoviendo cambios también en la composición y en la estructura de la comunidad de invertebrados colonizadores.

Utilizamos nesta pesquisa 40 corações de cães adultos, machos e fêmeas, de idades variadas, que não portavam nenhuma afecção cardíaca. Os corações tiveram as artérias coronárias injetadas, separadamente, com Neoprene Látex 450, corado com pigmento vermelho, e posteriormente dissecados. Em todas estas preparações verificamos que na vascularização dos ventrículos predominava a artéria coronária esquerda que fornecia os ramos interventriculares paraconal e subsinuoso. Já, a região ocupada pelo nó sinoatrial ficava mais frequentemente (17 vezes, 42,5%) na dependência do ramo proximal atrial esquerdo ou de colateral deste vaso, oriundo do ramo circunflexo esquerdo, ou deste vaso associado ao ramo distal atrial direito (8 vezes, 20%), procedente do ramo circunflexo direito. Com menor frequência (14 vezes, 30%), a área tomada pelo nó sinoatrial, encontramos apenas colaterais do ramo circunflexo direito, mais exatamente somente o ramo distal atrial direito (10 vezes, 25%), apenas o ramo proximal atrial direito (3 vezes, 7,5%) ou ainda exclusivamente o ramo intermédio atrial direito (1 vez, 2,5%). Em um único caso (1 vez, 2,5%) no território do nó sinoatrial observamos apenas colateral do ramo circunflexo esquerdo, isto é o ramo distal atrial esquerdo. A análise destes resultados permite concluir, que nesta espécie não existe qualquer tipo de relação entre o tipo de vascularização dos ventrículos e a irrigação do nó sinoatrial. Sendo assim, considerar os ramos ventriculares isoladamente não é suficiente para um entendimento clínico-cirúrgico aplicado, uma vez que os ramos atriais apresentam uma importante contribuição para a vascularização do nó sinoatrial.

We analyzed 40 hearts of adult dogs, males and females of different ages, without cardiac disease. The hearts had the coronary arteries inject using Neoprene Latex 450, colored with red pigment, and which was then dissected. In the ventricular vascularization the left coronary artery was predominant and gave rise to the paraconal interventricular and subsinuous branches. The region occupied by the sinoatrial node was most frequently (17 times, 42.5%) in dependence of the left atrial proximal branch or in the collateral branch of that vessel, coming from the left circumflex branch, or this vessel was associated with the right atrial distal branch (8 times, 20%). With less frequency (14 times, 30%), in the area occupied by the sinoatrial node we found only the collaterals of the right circumflex branch, only the right atrial distal branch (10 times, 25%), only the right atrial proximal branch (3 times, 7.5%) or exclusively the right atrial intermediary branch (once, 2.5%). In just one case (once, 2.5%) in the area of the sinoatrial node we observed only the collateral of the left circumflex branch, i.e. the left atrial distal branch. According to our results we concluded that in this specie there is no relationship between the type of ventricular vascularization and irrigation of the sinoatrial node. In doing so, to consider just the ventricular branches is not sufficient for a clinical and surgical applied understanding, since the atrial branches make an important contribution to the sinoatrial node vascularization.

Casearia sylvestris Swartz (Salicaceae) ou guaçatonga é uma árvore nativa do México, da América Central, e da América do Sul, com grande importância ecológica, farmacológica, e comercial. No entanto, como a maioria das espécies nativas de interesse medicinal no Brasil, a guaçatonga não é cultivada comercialmente, sendo obtida por extrativismo. O presente trabalho foi conduzido com o objetivo de testar um protocolo de propagação vegetativa de guaçatonga por meio da estaquia, visando identificar qual a melhor estação do ano para o enraizamento de estacas e avaliar o efeito da utilização do regulador vegetal ácido indolbutírico (AIB). No outono, inverno e primavera de 2007, e no verão de 2008, estacas caulinares semilenhosas de 12-14 cm de comprimento e com duas folhas foram preparadas e tratadas com AIB (0, 1000, 2000 e 3000 mg L-1), em solução alcoólica, através da imersão rápida por 10 segundos da base das estacas, e foram plantadas em tubetes contendo substrato Plantmax HT® em casa-de-vegetação sob nebulização intermitente. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com 4 repetições, 4 tratamentos, e 16 estacas por parcela. Todos os experimentos foram avaliados após 90 dias, sendo que para dois deles (primavera 2007 e verão 2008) prolongou-se o tempo de permanência em casa-de-vegetação para melhor desenvolvimento das raízes. Foram avaliados os parâmetros: porcentagem de estacas enraizadas, porcentagem de estacas vivas (com calos e sem raízes, sem calos e sem raízes), porcentagem de folhas retidas, porcentagem de estacas mortas, número de raízes, comprimento das três maiores raízes (cm), e média da massa seca das raízes (mg). Não ocorreu enraizamento nas estacas retiradas no outono e no inverno. Com as estacas retiradas na primavera obteve-se 39,1% de enraizamento. Estacas coletadas no verão não responderam como o esperado, apresentando, após 240 dias, 6,3% de enraizamento no tratamento com 3000 mg L-1 de AIB. O AIB até 3000 mg L-1 não estimulou o enraizamento de estacas de guaçatonga e a melhor estação do ano para a estaquia é a primavera.

Casearia sylvestris Swartz (Salicaceae), or "guaçatonga", is a tree native to Mexico and Central and South America, with great ecological, pharmacological and commercial relevance. Similarly to most native species of medicinal interest in Brazil, "guaçatonga" is not commercially cultivated and is obtained by means of extraction. The aim of this study was to test a protocol for the vegetative propagation of "guaçatonga" by means of stem cutting, identifying the best season for stem rooting and assessing the effect of using the growth regulator indolebutyric acid (IBA). In the fall, winter and spring 2007 and summer 2008, semi-hardwood cuttings with 12-14 cm length and two leaves were prepared and treated with IBA (0, 1000, 2000 and 3000 mg L-1), in alcohol solution, by rapidly immersing for 10 seconds the base of cuttings and planting them in tubes containing Plantmax HT® in greenhouse under intermittent nebulization. Experimental design was completely randomized with 4 replicates, 4 treatments and 16 cuttings per plot. All experiments were evaluated after 90 days, and for two of them the time of maintenance in greenhouse was prolonged in order to improve root development. The following parameters were evaluated: percentage of rooted cuttings, percentage of live cuttings (with callus and without roots, without callus and without roots), percentage of retained leaves, percentage of dead cuttings, number of roots, length of the largest roots (cm) and mean dry mass of roots (mg). There was no rooting on cuttings collected during the fall and the winter. For cuttings collected in the spring, 39.1% rooting was obtained. Cuttings collected in the summer did not show the expected results, presenting after 240 days 6.3% rooting when treated with 3000 mg L-1 IBA. Up to 3000 mg L-1, IBA did not stimulate the rooting of "guaçatonga" cuttings and the best season for cutting is spring.

Melaleuca alternifolia tem como produto principal o óleo essencial extraído das folhas devido às propriedades antifúngicas e antibacterianas. Pouco se tem relatado sobre a propagação desta espécie, sendo a miniestaquia uma alternativa para a propagação vegetativa de clones superiores visando à implantação de campo de produção. Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes substratos, concentrações de AIB, e tipo de miniestaca, no enraizamento de Melaleuca alternifolia. No primeiro experimento foram testados os substratos, areia de granulometria média, Plantmax HT®, Golden-Mix® e vermiculita. No segundo experimento foram avaliadas diferentes concentrações de AIB (0, 500, 1000 e 2000 mg L-1), em dois tipos de miniestacas (apical e mediana). As miniestacas foram confeccionadas com 5 cm de comprimento, mantidas em casa de vegetação com nebulização intermitente, e, após 45 dias do plantio, foram avaliadas as porcentagens de miniestacas enraizadas, com calos e não responsivas, o número de raízes formadas por miniestaca e o comprimento das três maiores raízes (cm). O substrato Golden-Mix® e as miniestacas coletadas da porção apical do ramo submetidas ao tratamento com 500 mg L-1 de AIB apresentaram maior porcentagem de enraizamento e melhor qualidade do sistema radicial.

Melaleuca alternifolia has as major product the essential oil extracted from its leaves due to its antifungal and antibacterial properties. There are scarce reports about the propagation of this species, and minicutting is an alternative for vegetative propagation of superior clones in order to establish a production field. This study aimed to evaluate the effect of different substrates, IBA levels and types of minicuttings on the rooting of Melaleuca alternifolia. In the first experiment, the following substrates were tested: medium sand, Plantmax HT®, Golden-Mix® and vermiculite. In the second experiment, different IBA levels (0, 500, 1000 and 2000 mg L-1) were tested for two minicutting types (apical and medium). Minicuttings were prepared with 5 cm length and were kept in a greenhouse with intermittent mist; then, at 45 days after planting, we evaluated: the percentages of rooted minicuttings, with callus and non-responsive, the number of roots per minicutting and the length of the three longest roots. The substrate Golden-Mix® and the minicuttings collected from the apical part of the branch and treated with 500 mg L-1 IBA presented the largest rooting percentage and the best root system quality.

A espinheira-santa (Maytenus muelleri - Celastraceae) é a planta medicinal nativa do Sul do Brasil, cujas folhas são tradicionalmente utilizadas pela medicina popular para o tratamento de úlceras e outros problemas gástricos. Existem poucos trabalhos publicados sobre a produção de mudas e técnicas de propagação vegetativa da espécie. A propagação de espinheira-santa por estaquia poderia ser um método eficiente para obtenção de material homogêneo, com características genéticas desejáveis, produzido a partir de plantas matrizes selecionadas. O presente trabalho teve por objetivo estudar os efeitos da aplicação de ácido indol butírico (AIB), em solução e em pó, no enraizamento de estacas de espinheira-santa coletadas nas quatro estações do ano (abril/2005 a janeiro/2006), bem como averiguar, por meio de análises anatômicas e histoquímicas das estacas, a presença de possíveis impedimentos à iniciação do enraizamento adventício. Estacas provenientes de ramos de plantas matrizes de seis anos cultivadas da Estação Experimental do Canguiri, Pinhais, PR, foram coletadas e tratadas com AIB (0, 1500, 3000 mg L-1 ou mg kg-1), em solução alcoólica (50% v/v) e em talco. Aos 365 dias foram avaliadas as porcentagens de estacas enraizadas e mortas, número e comprimento médio de raízes formadas por estaca. Análises anatômicas e histoquímicas com lugol e cloreto férrico foram realizadas. A estação mais promissora para o enraizamento foi o verão/2006 com 62,50% para o tratamento controle, devido à menor lignficação dos ramos no período de intenso crescimento vegetativo. O número médio de raízes formadas por estaca foi de 6,94 (solução) e o comprimento médio de raízes formadas/estaca chegou a 4,82 cm nesta mesma estação. As concentrações de AIB aplicadas não foram eficientes na indução radicial, independentemente do modo de aplicação. Foi detectada a presença de uma camada quase contínua de fibras e braquiesclereídes, a qual constitui barreira anatômica à indução radicial. Os testes histoquímicos revelaram a presença de amido e de compostos fenólicos nas estacas, em todas as estações do ano. A dificuldade ou demora no enraizamento não pode ser justificada pela falta de reservas de amido nos tecidos das estacas, mas pode ser justificada pela presença de compostos fenólicos, possivelmente do grupo dos monofenóis, que causam a degradação do AIA, interferindo negativamente na indução do enraizamento.

"Espinheira-santa" (Maytenus muelleri - Celastraceae) is a medicinal plant native to Southern Brazil, the leaves of which are traditionally used in popular medicine for the treatment of stomach ulcers and other gastric problems. There are few published studies about seedling production and vegetative propagation techniques for this species. The propagation of "espinheira-santa" by cuttings could be an efficient method to obtain homogeneous material, with desirable genetic characteristics, produced from selected mother plants. This paper aimed to study the effects of indolebutyric acid (IBA) application, in solution and in powder, on the rooting of "espinheira-santa" cuttings, collected in four seasons (April/2005 to January/2006), as well as to investigate, by means of cutting anatomical and histochemical analyses, the presence of possible impediments to adventitious rooting initiation. Cuttings from branches of six-year mother plants grown at "Estação Experimental do Canguiri", Pinhais, Paraná State, Brazil, were collected and treated with IBA (0, 1500, 3000 mg L-1 or mg kg-1) in alcoholic solution (50% v/v) and in powder. After 365 days, the percentages of rooted and dead cuttings, the number and mean length of roots/cutting were evaluated. Anatomical and histochemical analyses were performed with lugol and ferric chloride. The most promising season for rooting was Summer/2006, with 62.50% of rooting for the control treatment, due to the lesser lignification degree of branches in intense vegetative growth period. The mean number of roots/cutting was 6.94 (solution) and the mean length of roots/cutting was 4.82 cm in that same season. The applied IBA concentrations were not efficient in inducing root growth, regardless of the application method. An almost continuous layer of fibers and stone cells was detected, constituting an anatomical barrier for rooting induction. The histochemical tests revealed the presence of starch and phenolic compounds in cuttings, in all seasons. The difficulty or delay in rooting cannot be justified by the absence of starch reserve in the cutting tissues but by the presence of phenolic compounds, possibly of the group of monophenols, which cause IAA degradation, negatively affecting rooting induction.

O jambolão propaga-se normalmente por sementes o que acarreta variabilidade nas plantas descendentes e um problema quando o objetivo é a formação de pomar comercial. O desenvolvimento de protocolo de propagação vegetativa por meio da estaquia possibilitaria a reprodução de todas as características da planta matriz, uniformidade nas populações e facilidade de propagação. O presente trabalho teve por objetivo avaliar o efeito dos ácidos naftaleno acético (ANA) e indolilbutírico (AIB) no enraizamento de estacas de jambolão. Estacas da região mediana dos ramos foram confeccionadas com 12 cm de comprimento, cortadas em bisel na base e reto acima da última gema axilar, mantendo-se um par de folhas reduzidas à metade. As bases das estacas foram imersas por 10 segundos em soluções aquosas contendo ANA ou AIB nas concentrações de 0, 500, 1.000 e 1.500 mg L-1. Para o plantio foram utilizadas bandejas plásticas contendo areia de granulometria média. As estacas foram mantidas em casa-de-vegetação com nebulização intermitente e após 120 dias do plantio, foram avaliadas as variáveis: porcentagem de estacas enraizadas, com calos, vivas (não enraizadas e sem calos) e mortas, comprimento das três maiores raízes (cm) e número de raízes formadas por estaca. Os melhores resultados de enraizamento foram verificados com 1.000 mg L-1 para ambos os fitorreguladores testados. A porcentagem de enraizamento foi ligeiramente superior com a utilização de ANA quando comparada ao AIB.

Jambul usually propagates by seeds, which causes variability in the descendant plants and represents a problem in the formation of commercial orchards. The development of a protocol for vegetative propagation by cuttings would enable the reproduction of all features of the Mother plant, uniformity in populations and easy propagation. The aim of this work was to evaluate the effect of naphthaleneacetic acid (NAA) and indolebutyric acid (IBA) on rooting of jambul cuttings. Twelve-cm-long cuttings from the median region of branches were prepared through bevel cut in the base and right cut above the last axillary bud, keeping one pair of halved leaves. Cutting bases were immersed for 10s in aqueous solutions containing NAA or IBA at 0, 500, 1000 and 1500 mg L-1 concentrations. Plastic trays containing medium sand were used in the planting. The cuttings were kept in a greenhouse under intermittent nebulization and, at 120 days after planting, the following variables were evaluated: percentage of rooted, with calluses, alive (not-rooted and without calluses) and dead cuttings; length of the three largest roots (cm); and number of roots per cutting. The best rooting was observed by using 1000 mg L-1 of both tested plant growth regulators. Rooting percentage was slightly higher under NAA relative to IBA.

Avaliou-se o efeito da reconstrução do ligamento cruzado cranial, associado ou não ao sulfato de condroitina, na evolução da osteoartrite induzida experimentalmente em cães. Vinte cães hígidos, sem raça definida, machos e fêmeas, com peso corpóreo entre 19 e 25kg, foram submetidos à desmotomia do ligamento cruzado cranial. Trinta dias após, foram separados em dois grupos de 10 animais. Um grupo foi submetido à reconstrução do ligamento cruzado com uso de aloenxerto de ligamento patelar congelado, o outro não. Trinta e um dias após a desmotomia, cada grupo foi dividido em dois subgrupos de cinco animais. Um recebeu sulfato de condroitina, o outro não. Os cães foram avaliados clínica e radiograficamente antes da desmotomia e aos 30, 60 e 90 dias após a desmotomia. No último momento foram realizados exames macro e microscópico. Nos cães submetidos somente à desmotomia e tratados com sulfato de condroitina houve redução na progressão das alterações ósseas, ao exame radiográfico. A reconstrução do ligamento cruzado cranial melhorou a função do membro e, quando associada ao sulfato de condroitina, houve melhor resposta. Não houve diferença entre os subgrupos quanto aos exames macro e microscópico.

The effect of cranial cruciate ligament reconstruction, associated or not to chondroitin sulfate, on the evolution of experimentally induced osteoarthritis in dogs was studied. Twenty healthy mixed dogs, weighing between 19 and 25kg were submitted to cranial cruciate desmotomy. Thirty days later, the animals were divided into two groups with ten dogs each. One was submitted to cranial cruciate ligament reconstruction using frozen patellar tendon allograft and the other received no surgical treatment. Thirty one days after desmotomy, each group was divided into two subgroups with five animals each. One subgroup for each group received chondroitin sulfate and the other received no medical treatment. The dogs were evaluated clinically and radiographically before desmotomy, 30, 60 and 90 days after desmotomy, and at this moment, accomplished gross and microscopical exams. In dogs submitted to only desmotomy, chondroitin sulfate reduced radiographically the progression of osteoarthritic bone changes. Cranial cruciate ligament reconstruction improved dog's gait, however, when associated with chondroitin sulfate, the limb function improved even quicker. There were no statistical differences between subgroups at gross and histological evaluation.

Avaliaram-se as alterações do líquido sinovial do joelho de 19 cães submetidos à desmotomia unilateral do cruzado cranial, baseado no modelo experimental de Pond & Nuki, colhido e analisado aos 30 dias de pós-operatório. Cinco animais foram analisados novamente aos 90 dias de pós-operatório. As características analisadas foram volume, cor, aspecto, densidade, pH, proteínas, fibrinogênio, coágulo de mucina, contagem de hemácias e contagem total e diferencial de células nucleadas. O líquido sinovial apresentou padrão inflamatório que persistiu durante todo o período de observação, com efusão articular. Houve aumento na contagem de células nucleadas e na concentração de fibrinogênio aos 90 dias. A qualidade da precipitação da mucina apresentou melhora aos 90 dias quando comparada à de 30 dias, porém ainda marcadamente anormal. Foi possível concluir que até 90 dias de pós-operatório no modelo utilizado o fluído sinovial apresenta características inflamatórias e não degenerativas.

The purpose of this study was to evaluate the changes in knee synovial fluid of 19 dogs with experimentally-induced cranial cruciate ligament rupture, based on Pond & Nuki model. Synovial fluid was achieved and analyzed at 30 days postoperative time. Five animals had further synovial fluid evaluation at 90 days postoperatively. The characteristics observed were color, turbidity, density, pH, protein, fibrinogen, mucin clot, cell count and citology. The synovial fluid exhibited an inflammatory pattern during the postoperative observation time and joint effusion was observed. An increased number of nucleated cells and increased fibrinogen concentration were observed at 90 days when compared to 30 days after desmotomy. Although severely abnormal, an improvement of the mucin clot was observed at 90 days. It can be concluded that synovial fluid in this experimental model, showed inflammatory and no degenerative changes until 90 days postoperative.

Estudou-se a indução de organogênese em segmentos internodais de maracujá amarelo (Passiflora edulis f. flavicarpa) cultivados em meio contendo 1,0 a 4,0 mg L-1 de benzilaminopurina (BAP). A formação de calo e o desenvolvimento de gemas adventícias foram acompanhados através de microscopia ótica e eletrônica de varredura, que mostrou sua ocorrência simultânea e contínua, com observação de gemas em diversos estádios de desenvolvimento em um mesmo explante. Houve proliferação de calos nas extremidades dos explantes em todos os tratamentos, inclusive no controle. A avaliação dos efeitos do BAP na indução de gemas adventícias mostrou que as concentrações de 1 ou 2 mg L-1 foram mais adequadas. Doses superiores a 2 mg L-1, apesar de eficientes para indução, foram prejudiciais ao crescimento das gemas. Crescimento e enraizamento das gemas adventícias foram obtidos em meio de cultura MS sem reguladores de crescimento e com a concentração de sais reduzida pela metade.

Organogenesis induction from internodal segments of yellow passionfruit (Passiflora edulis f. flavicarpa) was obtained in a medium supplemented with 1.0-4.0 mg L-1 benzylaminopurine (BAP). Callus proliferation and adventitious shoot development were analyzed by light and scanning electron microscopy. Callus proliferation and adventitious shoots were observed simultaneously and continuously, with asynchronous development of shoots in the explants. Proliferation of callus was observed in the explant cut ends in all treatments, including the control. The results show that concentrations of 1.0 or 2.0 mg L-1 BAP gave better rate of organogenesis. Higher concentrations were efficient for the induction of adventitious buds and, were, however, detrimental for subsequent shoot development. Growth and rooting of shoots were obtained in half strength medium without growth regulators.