RESUMO O objetivo do trabalho foi pesquisar Mycobacterium bovis em lesões sugestivas de tuberculose nas carcaças de bovinos no estado do Ceará, por meio dos testes de diagnóstico bacteriológico e molecular. Entre agosto de 2017 e janeiro de 2019, o Serviço de Inspeção Estadual (SIE) inspecionou 59.512 bovinos; destes, 7,4% (44/59.512) apesentaram lesões sugestivas. Desses animais foram enviadas 68 amostras, das quais 4,5% (31/68) estavam localizadas no pulmão, 2,9% (20/68) nos linfonodos, 2,0% (14/68) no fígado e 0,4% (3/68) na carcaça. Ao realizar o isolamento bacteriológico, 15,9% (7/44) dos bovinos evidenciaram crescimento de colônias nas amostras. Os esfregaços dos isolados foram submetidos à coloração de Zielh-Neelsen e todos eles confirmaram bacilo álcool-ácido resistente. A reação em cadeia da polimerase identificou todos os isolados, 100% (7/7), como M. bovis. A associação das técnicas de diagnóstico permitiu identificar a presença do agente no estado, e a análise molecular demonstrou ser uma técnica benéfica no monitoramento da tuberculose bovina, podendo ser utilizada como um método auxiliar no programa de controle e erradicação da tuberculose bovina no estado do Ceará.

ABSTRACT The objective of this research was to identify Mycobacterium bovis in lesions suggestive of tuberculosis in bovine carcasses in the State of Ceará, by means of bacteriological and molecular diagnostic tests. Between August 2017 and January 2019, the State inspection service (SIE) inspected 59,512 cattle, of which 7.4% (44 / 59,512) presented suggestive lesions. Of these animals, 68 samples were sent, of which 4.5% (31/68) located in the lung, 2.9% (20/68) in lymph nodes, 2.0% (14/68) in the liver, and 0.4% in the carcass (3/68). When performing bacteriological isolation, 15.9% (7/44) of bovines showed colony growth in the samples. The smears of the isolates were submitted to Zielh-Neelsen staining and all confirmed acid-fast bacilli. The polymerase chain reaction identified all isolates 100% (7/7) as M. bovis. The association of diagnostic techniques allowed to identify the presence of the agent in the State and the molecular analysis proved to be a beneficial technique in the monitoring of bovine tuberculosis and can be used as an auxiliary method in the bovine tuberculosis control and eradication program in the State of Ceará.

RESUMO: A tuberculose bovina (TB) é uma zoonose causada pelo Mycobacterium bovis, o qual induz ao desenvolvimento de lesões nodulares e granulomatosas em vários tecidos do animal. O reconhecimento dessas lesões macroscópicas sugestivas durante a inspeção sanitária post mortem em matadouros fornece um diagnóstico presuntivo, sendo necessário a utilização de testes complementares para confirmação da doença. O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência da TB em animais abatidos em matadouros-frigoríficos no estado do Ceará através da utilização de métodos bacteriológicos e moleculares. Para tanto, foram analisadas lesões sugestivas de TB em carcaças condenadas pelo Serviço de Inspeção Estadual (SIE). As amostras foram submetidas à análise microbiológica, utilizando meios de cultivo e de coloração específicos, seguida pela técnica molecular spoligotyping para identificação e tipificação genética da micobactéria. Verificou-se a ocorrência de lesões sugestivas de TB em carcaças bovinas (0,071%) oriundas de diferentes municípios do estado do Ceará. Essas lesões estavam localizadas principalmente no pulmão (95,12%), linfonodos (58,53%) e fígado (36,58%). O cultivo microbiológico obteve isolamento bacteriano (17,94%), com o crescimento de colônias apresentando características morfológicas e tintoriais pertencentes ao gênero Mycobacterium spp. A análise do polimorfismo genético identificou a presença de M. bovis em todos os isolados, que foram discriminados em seis espoligotipos (SB0121, SB0295, SB1064, SB0120, SB0870 e SB0852), descritos no Brasil e em diversas áreas do mundo, exceto os perfis SB1064 e SB0852 que foram descritos pela primeira vez no país. Os resultados obtidos demonstram que a associação dos métodos diagnósticos utilizados foram a base do primeiro estudo de identificação das micobactérias encontradas no estado do Ceará, o que pode contribuir para a criação de um banco de dados para o estudo epidemiológico da TB no estado.

ABSTRACT: Bovine tuberculosis (BTB) is a zoonosis caused by the bacterium Mycobacterium bovis, which induces the development of nodular and granulomatous lesions in various animal tissues. The recognition of these suggestive gross lesions during postmortem sanitary inspection in slaughterhouses provides a presumptive diagnosis, which requires the use of complementary tests to confirm the disease. This study aimed to verify the occurrence of BTB in cattle slaughtered in slaughterhouses in the state of Ceará, Brazil, using bacteriological and molecular methods. To this end, suggestive lesions were analyzed on carcasses condemned by the “Serviço de Inspeção Estadual” (SIE). The samples were submitted to microbiological analysis using culture media and specific staining followed by spoligotyping molecular technique for identification and genotyping of the mycobacteria. Occurrence of lesions suggestive of BTB was verified in bovine carcasses (0.071%) from different municipalities of the state. These lesions were located mainly in the lung (95.12%), lymph nodes (58.53%), and liver (36.58%). Microbiological culture showed bacterial isolation (17.94%), with the growth of colonies showing morphological and tannic characteristics belonging to genus Mycobacterium spp. Genetic polymorphism analysis identified M. bovis in all isolates, which were discriminated into six spoligotypes (SB0121, SB0295, SB1064, SB0120, SB0870, and SB0852). These profiles have been described in Brazil and several areas of the world, except for profiles SB1064 and SB0852, which were described in the country for the first time. The results show that the association of the diagnostic methods used was the basis for the first study on identification of mycobacteria found in the state, which may provide a database for the epidemiological study of BTB in the state of Ceará.

O objetivo do presente trabalho foi utilizar métodos bacteriológicos e moleculares para a identificação do Mycobacteriumbovis em lesões observadas em carcaças de bovinos durante a inspeção post mortem de rotina em matadouros-frigoríficos com serviço de inspeção oficial. Foram acompanhados o abate e a inspeção de 825.394 bovinos, sadios, ao exame antemortem pelo serviço de inspeção oficial em 10 matadouros-frigoríficos do estado da Bahia, entre abril de 2009 e abril de 2012. Cento e oitenta bovinos apresentaram lesões sugestivas de tuberculose e outras linfadenites, as quais foram avaliadas quanto à presença de Mycobacterium bovis por exame bacteriológico e pela PCR multiplex. A maioria das lesões estava localizada em linfonodos do trato respiratório e 71% eram provenientes de bovinos machos com até 32 meses de idade. No isolamento bacteriano, 13,9% (25/180) das amostras apresentavam colônias pequenas, de superfície granular e de coloração creme-amareladas, em meio de cultura Stonebrink-Leslie, e o crescimento médio foi de 34 dias. Todos os esfregaços dos isolados evidenciaram BAAR, e, pela PCR multiplex, 56% (14/25) dos isolados foram identificados como M. bovis. A associação entre exame post mortem, bacteriológico e PCR multiplex permitiu a identificação do agente de forma rápida e em regiões com status sanitário de baixa prevalência, demonstrando ser importante para a detecção dos focos de tuberculose bovina e o auxílio nos programas de controle e erradicação da tuberculose.

The aim of the present study was to perform bacteriological and molecular methods for identification of Mycobacterium bovis in lesions derived from bovine carcasses detected during routine post-mortem examination in officially inspected slaughterhouses. We checked the slaughter and inspection of 825,394 bovines, health upon ante-mortem examination, by the official service in 10 slaughterhouses of Bahia state from April, 2009 to April 2012. Lesions suggestive of tuberculosis were collected from 180 bovines and further evaluated by bacteriology and multiplex PCR. The majority of lesions were located in the respiratory tract lymph nodes and 71% were from male bovines up to 32 months old. 13.9% of samples presented small, granular and creamy-yellowish colonies after being cultured in Stonebrink-Leslie with an average growth time of 34 days. All smears from the isolated samples were Acid Fast Bacilli (AFB) and among them 56% were identified by mPCR as M. bovis. Thus, the association between post-mortem examination, culture and multiplex PCR allowed the bacillus identification in a reduced time and in regions of low prevalence, pointing out its importance for bovine tuberculosis detection and as a supportive tool for the tuberculosis control and eradication program.

A mastite é uma infecção frequente da glândula mamária, sendo a principal doença que afeta o úbere das fêmeas e responsável pelos maiores prejuízos à produção leiteira em caprinos, reduzindo em quantidade e depreciando a qualidade do leite e seus derivados. Nesse estudo foram colhidas amostras de leite de cabras com reação positiva ao CMT, em propriedades localizadas em Bonfim de Feira, Barra do Pojuca, Feira de Santana, Camaçari, Anguera e Antônio Cardoso, todas próximas à Cidade de Salvador, Bahia. Do material coletado foi realizado cultivo bacteriológico em ágar sangue de ovino a 10%, ágar McConkey e também enriquecido em caldo BHI. O Staphylococcus spp. foi a bactéria de maior prevalência (90,3%), seguida de Streptococcus (4,8%), Micrococcus (1,6%) e Enterobacter (1,6%). Todas as bactérias foram submetidas ao teste de sensibilidade aos antimicrobianos pelo método de difusão em disco, sendo que 54,1% das estirpes estudadas apresentaram sensibilidade a todas as drogas testadas, e 45,9% das estirpes identificadas apresentaram resistência a pelo menos um dos antimicrobianos. O presente estudo confirmou o Staphylococcus spp. como a principal bactéria envolvida na etiologia das mastites subclínicas caprinas.

Mastitis is a common infection of the mammary gland, the main disease affecting the udder of females, and responsible for major losses in milk production in goats, decreasing the quantity and quality of the milk and its derivatives. In this study milk samples were collected from goats with positive reaction to CMT in properties located in Bonfim de Feira, Barra do Pojuca, Feira de Santana, Camaçari, Anguera and Antônio Cardoso, all of which are places surrounding the city of Salvador, Bahia, Brazil. The samples were submitted to bacteriological culture carried out in agar with 10% sheep blood, McConkey agar, and agar enriched with BHI broth. Staphylococcus spp. bacteria was the most prevalent (90.3%), followed by Streptococcus (4.8%), Micrococcus (1.6%) and Enterobacter (1.6%). All bacteria were subjected to antimicrobial susceptibility testing by the disc diffusion method, revealing that 54.1% of the strains studied were sensitive to all drugs tested, while 45.9% of identified strains showed resistance to at least one of antimicrobials. The present study confirmed Staphylococcus spp. as the main bacteria involved in the etiology of subclinical goat mastitis.

Investigou-se o perfil sorológico de bovinos inoculados com veneno crotálico detoxificado pelo método de iodação e iodação com encapsulação em liposomas. Onze fêmeas com idade média de 18 meses e peso médio de160kg, foram inoculadas com 0,03mg/kg de peso vivo do veneno crotálico do tipo crotamina positivo. Cinco animais receberam o veneno iodado livre, cinco o iodado encapsulado em liposomas e um animal recebeu o mesmo veneno na forma natural, para controle da letalidade da amostra de veneno utilizada. Não houve alterações significativas na concentração de proteínas totais, uréia e creatinina em ambos os tratamentos. Foi observada diferença significativa na concentração de creatinafosfoquinase a partir de duas horas após a inoculação do veneno. A iodação do veneno crotálico, com ou sem incorporação em liposomas, suprimiu seus efeitos deletérios sobre o perfil bioquímico de bovinos.

It was studied the activity of the Crotalus venom detoxified encapsulated in lipossomes or non-encapsulated by the method of controlled iodination on the biochemical profile of bovines. Eleven 18-months-old female bovines, weighting 160kg in average were used in this study. Groups of five animals were inoculated intramuscularly with a dose of 0,03mg/kg with either the detoxified non-encapsulated venom or the detoxified encapsulated venom. One control animal received the same dose of non detoxified venom by the same route. No significant differences were observed between the study groups for the parameters of total protein, urea and creatinine. Differences were observed for creatine phosfokinase at times T O and T12 for the group treated with the iodinated venom encapsulated in liposomes. The detoxification process abolished the activity of the venom in the encapsulated or nonencapsulated form on the biochemical parameters and renal activity of bovine.

Com o objetivo de investigar a toxicidade da Tetrapterys multiglandulosa A. Juss. foram utilizadas 15 cabras gestantes, divididas aleatoriamente em três grupos (GI, GII e GIII) com cinco animais cada. Após estabelecer o diagnóstico de gestação no tempo médio de 35 dias, eram oferecidas diariamente doses de 10 e 20g/kg PV das folhas (jovens e maduras) de Tetrapterys multiglandulosa para os grupos I e II, respectivamente, junto ao capim picado, feno e concentrado. Para o grupo III, usado como controle, foram fornecidos somente capim picado, feno e concentrado. Todos os animais foram submetidos a exames clínicos diários e a ultra-sonografia a cada três dias. Foi detectada por ultra-sonografia morte fetal e, ao exame clínico, presença de secreção vaginal com subseqüente aborto. Os animais dos grupos I e II (tradados) abortaram no terceiro e no final do segundo mês de gestação, respectivamente, e juntos com os do grupo III (controle) foram sacrificados e submetidos a exames anátomo-histopatológicos. Pela histopatologia observou-se placentite focal com grande quantidade de células trofoblásticas binucleadas em apoptose, além de endometrite focal aguda e petéquias vulvo-vaginais. Todos os fetos abortados estavam subdesenvolvidos quando comparados com os fetos do grupo III (controle) devido à malnutrição, pois nenhum defeito congênito pôde ser notado. Vários fetos abortados mostravam alguma autólise, pois sua morte precedia em cinco e três dias o aborto, nos tratamentos I e II, respectivamente. As lesões fetais observadas foram hemorragias difusas ou focais na pele, meninges e serosa visceral.

Green leaves of Tetrapterys multiglandulosa A. Juss were fed to pregnant goats from day 35 of pregnancy. Five goats received 10g/kgBW (group I), five received 20g/kgBW (group II) and five were used as control (group III), and received only hay, fresh grass and commercial ration. All animals were clinically examined daily and submitted to ultrasonography every three days. Fetal death and vulvar catarrhal discharge with subsequent abortion were observed at the end of the second month of pregnancy in group II and at the third month of pregnancy in group I. Animals from groups I and II were slaughtered after abortion and necropsied. Goats from the control group were necropsied at the same time. The main lesions in the aborted goats were focal placentitis with early involution (apoptosis) and placentary coagulation necrosis, acute focal endometritis and vulvo-vaginal petechiae. All aborted fetuses were underdeveloped when compared to control fetuses, probably due to fetal malnutrition, since no congenital malformations could be noted. The majority of aborted fetuses showed some degree of autolysis, as fetal death occurred five and three days before abortion, in groups I and II, respectively. The most remarkable fetal lesions were focal or diffuse hemorrhages in the skin, meninges and visceral serosae.