Human respiratory syncytial virus (HRSV) is an important respiratory pathogens among children between zero-five years old. Host immunity and viral genetic variability are important factors that can make vaccine production difficult. In this work, differences between biological clones of HRSV were detected in clinical samples in the absence and presence of serum collected from children in the convalescent phase of the illness and from their biological mothers. Viral clones were selected by plaque assay in the absence and presence of serum and nucleotide sequences of the G2 and F2 genes of HRSV biological clones were compared. One non-synonymous mutation was found in the F gene (Ile5Asn) in one clone of an HRSV-B sample and one non-synonymous mutation was found in the G gene (Ser291Pro) in four clones of the same HRSV-B sample. Only one of these clones was obtained after treatment with the child's serum. In addition, some synonymous mutations were determined in two clones of the HRSV-A samples. In conclusion, it is possible that minor sequences could be selected by host antibodies contributing to the HRSV evolutionary process, hampering the development of an effective vaccine, since we verify the same codon alteration in absence and presence of human sera in individual clones of BR-85 sample.

O vírus respiratório sincicial humano (HRSV), isolado em 1955, é a principal causa da hospitalização de bebês e crianças pequenas com sintomas de doença respiratória. No mundo inteiro, vários estudos para o desenvolvimento de uma vacina segura e eficiente contra o HRSV têm tido alta prioridade. A região G2 da glicoproteína G é usada como padrão para genotipagem do HRSV. Neste estudo, foi realizada a análise filogenética da glicoproteína G e o estudo comparativo entre a região G2 e o ectodomínio dessa glicoproteína. Cinquenta e três amostras de swab nasal de crianças com menos de cinco anos de idade, apresentando doença respiratória aguda, atendidas no Hospital Universitário (HU) da Universidade de São Paulo durante o ano de 2004, foram submetidas a sequenciamento por PCR e comparadas com seqüências do GenBank. A região G2 mostrou ser adequada para a genotipagem do HRSV.

The Human Respiratory Syncytial Virus (HRSV), isolated in 1955, is the main cause of hospitalization of babies and infants with respiratory illness. Several studies have been conducted worldwide aiming the development of a safe and effective vaccine against HRSV. The G2 region of glycoprotein G is used as genotyping default. In the present study, we performed a phylogenetic analysis of G protein and a comparative study between G2 region and ectodomain of attachment glycoprotein. Fifty-three nasal swab samples from children less than 5 years old and presenting symptoms of acute respiratory illness, assisted at the University Hospital (UH) of University of Sao Paulo (USP) in 2004, were submitted to sequencing by PCR and compared with GenBank sequences. We concluded that the G2 region is adequate for HRSV genotyping.

Apresenta-se um estudo sobre a avaliação clínica e laboratorial de crianças e adultos jovens com exantema semelhante ao sarampo, durante a ocorrência do surto epidêmico de sarampo na região metropolitana da Grande São Paulo no final de 1996 que se alastrou por todo o país durante o ano de 1997. O diagnóstico laboratorial de sarampo foi firmado em 7 dos 11 pacientes examinados, por detecção direta de IgM específico em amostras de soro da fase aguda da doença, por soroconversão de IgG em um par de amostras da fase aguda e convalescente, pelo isolamento do vírus em culturas de linhagem B95a e pela detecção do RNA viral por PCR em linfócitos do sangue periférico e na urina. O quadro clínico apresentado pelos pacientes nem sempre correspondeu à forma clássica do sarampo. Um jovem adulto, que havia sido vacinado contra o sarampo, apresentou um quadro clínico modificado. Os 4 casos restantes foram negativos em todas as provas laboratoriais para o sarampo, tendo diagnóstico final de exantema súbito (2 casos), escarlatina e Doença de Kawasaki. O presente estudo reforça o ponto de vista de que os sinais e sintomas clínicos são geralmente insuficientes para estabelecer um diagnóstico preciso de sarampo na era pós-vacinal, sendo indispensável um sistema de vigilância baseado em resultados laboratoriais que confirmam todos os casos suspeitos, inclusive os casos de sarampo com sorologia IgM-negativa

A clinical and laboratory evaluation of 11 children and young adults with measleslike rash was done during the measles outbreak in the Greater São Paulo Metropolitan area at the end of 1996 and spread over the country during 1997. Measles was laboratory confirmed in 07 patients by specific IgM detection in acute serum specimens using an IgM-capture EIA, by specific IgG seroconversion in serum pairs, and by reverse transcription PCR and virus isolation in peripheral blood lymphocytes. Clinical presentations were not always classic; one of the 07 cases had received measles vaccine and corresponded to modified clinical case of measles. The 4 remaining cases were negative for measles and were diagnosed as exanthem subitum (2 cases), scarlet fever and Kawasaki disease. The present study reinforces the view that clinical features alone are not sufficient for establishing an accurate diagnosis in the post-vaccine era, and a surveillance system based on sensitive laboratory results is needed so that it can confirm IgM-negative measles cases.

Um total de 479 casos de diarréia aguda e de 337 crianças sem diarréia (controles) foi investigado em um estudo longitudinal de 2 anos na cidade de São Luís (MA) em crianças menores de 5 anos de idade, a fim de estabelecer a incidência e a distribuição etária e sazonal de rotavírus, bem como determinar a severidade da doença nesta região do Brasil. A incidência de Rotavírus apresentou os maiores índices durante o primeiro ano de vida das crianças, com média anual de 25% entre os pacientes atendidos nos principais hospitais pediátricos da cidade e em Unidades de Saúde da periferia. O estudo mostrou que a relevância dos rotavírus como agentes etiológicos da diarréia aguda na infância já acaba aos 18 meses de idade das crianças desta região, quando os valores de positividade caem a apenas 4%, como no grupo controle. A distribuição bimensal de rotavírus não apresentou perfil tipicamente sazonal, ocorrendo 1 pico de incidência no ano de 1986, durante a estação chuvosa, e 2 picos no ano de 1987, dos quais um na estação chuvosa e outro, durante a época seca do ano. O estudo também mostrou que a doença diarreica é mais severa entre os casos positivos para rotavírus do que entre negativos, apresentando maior freqüência de evacuações diárias, de vômitos e febre, levando ao índice acima de 2 vezes maior de casos de desidratação moderada ou severa. Finalmente, é feita uma análise em relação ao efeito que a imunoprofilaxia poderá ter sobre os elevados índices de mortalidade infantil registrados nesta região do país.

A total of 479 diarrhoeic children and 337 children without diarrhoea (controls) less than 5 years old were investigated in a two-year study in the city of S. Luís (MA), with the purpose to determine the incidence, the age distribution and the seasonality of rotaviruses, as well as to establish the severity of the disease in this region between the North and the Northeast of Brazil. rotavirus incidence was highest in children of the 1st. year of life, showing an average of 25% per year among the diarrhoeic patients attending the two main hospitals and three health units at the periphery of the city. It was shown that rotaviruses are significant enteropathogens in children less than 18 months old. Frequency of rotaviruses droped in diarrhoeic patients 18 to 23 months old to only 4%, the same percentage observed in children of the control group. A typical seasonal distribution of rotaviruses was not seen during the two years of study. There was a peak in the incidence of rotaviruses in 1986, during the rainy season, and two peaks in 1987, one in the rainy season and one in the dry season. It was also shown that severity of diarrhoea in rotavirus positive cases was higher than in the negative cases. Rotavirus diarrhoeic patients had more loose stools per day, and higher frequencies of vomiting and fever, resulting more often (> 2 times) in moderate or severe dehydration. Finally, it is concluded that the introduction of immunoprophylaxis may reduce significantly the high mortality rates in early childhood observed in S. Luís.

Foram detectados astrovírus humanos durante estudo longitudinal de 13 meses sobre a incidência de vírus diarréicos em 146 crianças menores de 2 anos de idade, hospitalizadas em clínica pediátrica de um hospital universitário, na cidade de São Paulo, SP, Brasil. Das 67 crianças internadas com diarréia aguda, 3% foram positivas para astrovírus, por ocasião de sua admissão, pelo Ensaio Imunoenzimático Monoclonal Amplificado (ASTROVIRUS BIOTIN-AVIDIN ELISA, CDC, USA). As 79 crianças sem diarréia, admitidas durante o mesmo período por outra causa (controles), foram negativas para astrovírus, por ocasião de seu internamento. Entretanto, 4,8% do total de crianças hospitalizadas sofreram infecções por astrovírus durante sua permanência no hospital. Este é o primeiro estudo sobre a ocorrência de astrovírus humanos no Brasil, que assim participam significativamente na etiologia da gastroenterite infantil em nosso meio.

Human astrovirus was detected during a 13-month longitudinal study of the incidence of diarrhoea viruses among hospitalized children (<2 years of age) in a pediatric clinic of the city of S. Paulo (University Hospital). Serial fecal samples (intervals of 4 days) were collected from 146 children with and without acute diarrhoea at admission and during their stay in the hospital. Two (3%) of the 67 children with diarrhoea were positive at admission to the clinic by the highly sensitive ASTROVIRUS BIOTIN-AVIDIN ELISA, using CDC monoclonal antibodies (MAb SE7). All 79 children without diarrhoea (controls) were negative for astrovirus at admission. However, astrovirus was detected in 7 (4.8%) of the 146 hospitalized children during their stay in the clinic. Three of the positives shed astroviruses in 2 successive stool samples. All children positive for astrovirus were negative for rotavirus, adenovirus and bacterial and parasitic enteric agents. This is the first study of the detection of human astrovirus in Brazil. Astrovirus appears to be a significant cause of infantil gastroenteritis among young children in this country.

Foram detectados astrovírus humanos durante estudo longitudinal de 13 meses sobre a incidência de vírus diarréicos em 146 crianças menores de 2 anos de idade, hospitalizadas em clínica pediátrica de um hospital universitário, na cidade de São Paulo, SP, Brasil. Das 67 crianças internadas com diarréia aguda, 3% foram positivas para astrovírus, por ocasião de sua admissão, pelo Ensaio Imunoenzimático Monoclonal Amplificado (ASTROVIRUS BIOTIN-AVIDIN ELISA, CDC, USA). As 79 crianças sem diarréia, admitidas durante o mesmo período por outra causa (controles), foram negativas para astrovírus, por ocasião de seu internamento. Entretanto, 4,8% do total de crianças hospitalizadas sofreram infecções por astrovírus durante sua permanência no hospital. Este é o primeiro estudo sobre a ocorrência de astrovírus humanos no Brasil, que assim participam significativamente na etiologia da gastroenterite infantil em nosso meio.

Human astrovirus was detected during a 13-month longitudinal study of the incidence of diarrhoea viruses among hospitalized children (<2 years of age) in a pediatric clinic of the city of S. Paulo (University Hospital). Serial fecal samples (intervals of 4 days) were collected from 146 children with and without acute diarrhoea at admission and during their stay in the hospital. Two (3%) of the 67 children with diarrhoea were positive at admission to the clinic by the highly sensitive ASTROVIRUS BIOTIN-AVIDIN ELISA, using CDC monoclonal antibodies (MAb SE7). All 79 children without diarrhoea (controls) were negative for astrovirus at admission. However, astrovirus was detected in 7 (4.8%) of the 146 hospitalized children during their stay in the clinic. Three of the positives shed astroviruses in 2 successive stool samples. All children positive for astrovirus were negative for rotavirus, adenovirus and bacterial and parasitic enteric agents. This is the first study of the detection of human astrovirus in Brazil. Astrovirus appears to be a significant cause of infantil gastroenteritis among young children in this country.

O método da comparação dos índices de neutralização (SMIT & WILTERDINK, 1966) foi utilizado na identificação sorológica intratípica de 49 poliovírus, pertencentes aos três tipos imunológicos e isolados de casos clínicos com e sem contato conhecido com a vacina oral de Sabin. O método foi também comparado com o método de Wecker e com o marcador RCT40 no estudo da identificação intratípica das estirpes do tipo 3. Os soros imunes necessários às reações de neutralização foram preparados em cobaias com as estirpes vacinais LSc2ab, P712Ch2ab e Leon 12a1b. As estirpes - dos tipos 1 e 3 - isoladas dos indivíduos sem contato conhecido com a vacina oral, foram todas identificadas como heterólogas às respectivas estirpes vacinais e as provenientes dos indivíduos com contato (recém-vacinados e contatos) foram identificadas como isólogas às respectivas estirpes vacinais, exceto duas, das quais uma (do tipo 1) foi identificada como intermediária e a outra (do tipo 3) como heteróloga. Não foi possível interpretar convenientemente os resultados das provas de identificação das estirpes do tipo 2, porque o índice de neutralização do protótipo Lansing, ao contrário dos índices das estirpes de referência dos tipos 1 e 3, não deu resultados constantes em provas consecutivas na presença do sôro anti-P712Ch2ab. No estudo da identificação intratípica dos poliovírus do tipo 3, o método da comparação dos índices de neutralização forneceu resultados plenamente concordantes com os obtidos pelo método de Wecker, com isto evidenciando ser um método igualmente satisfatório e, devido à relativa simplicidade de sua técnica, melhor indicado para inquéritos epidemiológicos, quando se examina a procedência de numerosas estirpes. Os resultados obtidos com o marcador RCT40 mostraram a importância de utilizar provas de diferenciação sorológica intratípica na identificação dos vírus da poliomielite em áreas de vacinação, devido à instabilidade do caráter RCT40 das estirpes do tipo 3.

The comparison of neutralization indices (SMIT & WILTERDINK, 1966) was used for the intratypic serodifferentiation of 49 strains of poliovirus of types 1, 2 and 3, isolated from clinical cases with and without known contact with Sabin oral vaccine. This method was, as well, compared with the Wecker test and the RCT40 marker, in relation to the strains of poliovirus of type 3. The immune sera used in the neutralization tests were obtained from guinea pigs inoculated with vaccine strains LSc2ab, P712Ch2ab and Leon 12a1b. The types 1 and 3 strains isolated from cases without contact with oral vaccine were identified as heterologous to the respective vaccinal strains. All the strains isolated from cases with known contact (vaccinated and contacts) were identified as isologous to the vaccinal strains, but two, one of which (type 1) was considered as intermediate and the other (type 3) was heterologous. It was not possible to explain conveniently the results obtained in relation to type 2 strains because the neutralization indices of Lansing prototype strain by serum P712Ch2ab varied from one test to the other. The intratypic serodifferentiation of type 3 polioviruses by comparison of neutralization indices gave results comparable to the method of Wecker, showing to be a satisfactory method in view of the simplicity of its technique and particulary useful in epidemiologic surveys. The RCT40 marker gave results that show the necessity of using the intratypic serodifferentiation technique when dealing with type 3 strains.

O método da comparação dos índices de neutralização (SMIT & WILTERDINK, 1966) foi utilizado na identificação sorológica intratípica de 49 poliovírus, pertencentes aos três tipos imunológicos e isolados de casos clínicos com e sem contato conhecido com a vacina oral de Sabin. O método foi também comparado com o método de Wecker e com o marcador RCT40 no estudo da identificação intratípica das estirpes do tipo 3. Os soros imunes necessários às reações de neutralização foram preparados em cobaias com as estirpes vacinais LSc2ab, P712Ch2ab e Leon 12a1b. As estirpes - dos tipos 1 e 3 - isoladas dos indivíduos sem contato conhecido com a vacina oral, foram todas identificadas como heterólogas às respectivas estirpes vacinais e as provenientes dos indivíduos com contato (recém-vacinados e contatos) foram identificadas como isólogas às respectivas estirpes vacinais, exceto duas, das quais uma (do tipo 1) foi identificada como intermediária e a outra (do tipo 3) como heteróloga. Não foi possível interpretar convenientemente os resultados das provas de identificação das estirpes do tipo 2, porque o índice de neutralização do protótipo Lansing, ao contrário dos índices das estirpes de referência dos tipos 1 e 3, não deu resultados constantes em provas consecutivas na presença do sôro anti-P712Ch2ab. No estudo da identificação intratípica dos poliovírus do tipo 3, o método da comparação dos índices de neutralização forneceu resultados plenamente concordantes com os obtidos pelo método de Wecker, com isto evidenciando ser um método igualmente satisfatório e, devido à relativa simplicidade de sua técnica, melhor indicado para inquéritos epidemiológicos, quando se examina a procedência de numerosas estirpes. Os resultados obtidos com o marcador RCT40 mostraram a importância de utilizar provas de diferenciação sorológica intratípica na identificação dos vírus da poliomielite em áreas de vacinação, devido à instabilidade do caráter RCT40 das estirpes do tipo 3.

The comparison of neutralization indices (SMIT & WILTERDINK, 1966) was used for the intratypic serodifferentiation of 49 strains of poliovirus of types 1, 2 and 3, isolated from clinical cases with and without known contact with Sabin oral vaccine. This method was, as well, compared with the Wecker test and the RCT40 marker, in relation to the strains of poliovirus of type 3. The immune sera used in the neutralization tests were obtained from guinea pigs inoculated with vaccine strains LSc2ab, P712Ch2ab and Leon 12a1b. The types 1 and 3 strains isolated from cases without contact with oral vaccine were identified as heterologous to the respective vaccinal strains. All the strains isolated from cases with known contact (vaccinated and contacts) were identified as isologous to the vaccinal strains, but two, one of which (type 1) was considered as intermediate and the other (type 3) was heterologous. It was not possible to explain conveniently the results obtained in relation to type 2 strains because the neutralization indices of Lansing prototype strain by serum P712Ch2ab varied from one test to the other. The intratypic serodifferentiation of type 3 polioviruses by comparison of neutralization indices gave results comparable to the method of Wecker, showing to be a satisfactory method in view of the simplicity of its technique and particulary useful in epidemiologic surveys. The RCT40 marker gave results that show the necessity of using the intratypic serodifferentiation technique when dealing with type 3 strains.

São apresentados os resultados de um estudo comparativo da susceptibilidade de diversas linhagens de células diplóides humanas (FH1, FH3, FH4, FH11 , FH13, FH14, FH16) ao vírus da citomegalia (VCM). Das linhagens referidas, tôdas se mostraram sensíveis aos vírus estudados, com exceção das linhagens FH3 e FH16; estas vieram mostrar o mesmo grau de susceptibilidade depois de várias sub-culturas, no momento em que o aspecto morfológico da camada celular passou de heterogêneo - células fibroblásticas e epiteliais - a homogêneo - células fibroblásticas.

A comparative study of the susceptibility of different strains of human diploid cells (FH1, FH3, FH4, FH11, FH13, FH14, FH15) to cytomegalovirus disclosed a relation between the capacity of growing and producing a consistent cytophatic effect of human cytomegalovirus strains and the homogeneous characteristics of the tissue cultures. The cell strains FH3 and FH16 were insusceptible when fibroblasts and epithelial cells were present in the same culture. After a certain number of passages, when the fibroblastic characteristics of cells in the cultures was established, the cytophatic effect could be consistently observed.

São apresentados os resultados de um estudo comparativo da susceptibilidade de diversas linhagens de células diplóides humanas (FH1, FH3, FH4, FH11 , FH13, FH14, FH16) ao vírus da citomegalia (VCM). Das linhagens referidas, tôdas se mostraram sensíveis aos vírus estudados, com exceção das linhagens FH3 e FH16; estas vieram mostrar o mesmo grau de susceptibilidade depois de várias sub-culturas, no momento em que o aspecto morfológico da camada celular passou de heterogêneo - células fibroblásticas e epiteliais - a homogêneo - células fibroblásticas.

A comparative study of the susceptibility of different strains of human diploid cells (FH1, FH3, FH4, FH11, FH13, FH14, FH15) to cytomegalovirus disclosed a relation between the capacity of growing and producing a consistent cytophatic effect of human cytomegalovirus strains and the homogeneous characteristics of the tissue cultures. The cell strains FH3 and FH16 were insusceptible when fibroblasts and epithelial cells were present in the same culture. After a certain number of passages, when the fibroblastic characteristics of cells in the cultures was established, the cytophatic effect could be consistently observed.