Doença bacteriana zoonótica, a campilobacteriose é responsável mundialmente por frequentes casos de gastroenterite humana. Campylobacter spp. apresenta fator de virulência associado à diarreia, denominado toxina citoletal distensiva (CDT), sendo codificado pelos genes do complexo cdt. Os objetivos do presente estudo foram: 1) isolar e identificar estirpes de Campylobacter spp. de 102 suabes de carcaças e 102 suabes retais de ovinos (Ovis aries) e de sete amostras de água dos efluentes, antes e depois do tratamento de desinfecção de abatedouro localizado no estado de São Paulo; e 2) detectar, pela técnica de multiplex-PCR, a presença do complexo de genes cdt. Foram isoladas e identificadas, por métodos fenotípicos e genotípicos, sete estirpes de Campylobacter coli provenientes de 4/102 (3,92%) das amostras de suabes retais, 1/102 (0,98%) de suabes de carcaças e 2/7 (28,5%) das águas dos efluentes. Dos isolados de suabes retais, em 2/7 (28,6%) estirpes foi detectada a presença dos genes cdt. Trata-se do primeiro relato de isolamento de estirpes de Campylobacter coli provenientes de abatedouro de ovinos e das estirpes portadoras do complexo de genes cdt nessa espécie animal no Brasil.

A zoonosis and bacterial disease, campylobacteriosis is responsible for frequent cases of human gastroenteritis worldwide. Campylobacter spp. presents the virulence factor called cytolethal distensive toxine (CDT), responsible for diarrhea and codified by the cdt gene. The aims of this study were: 1) to isolate and identify Campylobacter spp. strains from 102 carcass swabs and 102 rectal swabs of sheep (Ovis aries) and seven samples of wastewater, before and after the disinfection treatment, collected from the abattoir of the state of São Paulo; and 2) to detect the presence of cdt gene complex by Multiplex-PCR in strains of Campylobacter spp. Seven strains of Campylobacter coli were isolated and identified by phenotypic and genotypic methods: 4/102 (3.92%) from rectal swabs, 1/102 (0.98%) from carcass swabs and 2/7 (28.5%) from wastewater. From the rectal swab samples 2/7 (28.6%) strains were detected with the cdt gene. This is the first report on the isolation of Campylobacter coli from sheep abattoir, and of strains carrying the cdt gene complex in this animal species in Brazil.

Devido à crescente seleção de microrganismos resistentes aos antimicrobianos atuais, tem-se valorizado a busca por alternativas naturais. O presente estudo teve por objetivo avaliar a atividade antibacteriana de extratos etanólico e de ciclohexano de flores de camomila, espécie vegetal de uso antigo pela medicina tradicional, frente às bactérias ATCC Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli e Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Typhimurium pelas técnicas de difusão em ágar e diluição em caldo. Foi observada inibição do crescimento de P. aeruginosa frente ao extrato etanólico bruto (1g/mL) na técnica de diluição em caldo, e confirmada pela técnica de difusão em ágar (halo de inibição de 10 mm de diâmetro). Para as demais bactérias testadas, os extratos e suas diluições não apresentaram efeito bacteriostático em nenhuma das técnicas. Pode-se concluir que o extrato etanólico bruto da camomila apresentou atividade antibacteriana frente à P. aeruginosa, porém não foi eficaz frente à S. aureus, E. coli e Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Typhimurium. Portanto, são necessários novos estudos com diferentes linhagens de microrganismos, com o intuito de corroborar e assegurar os resultados apresentados, para definir o potencial antimicrobiano do extrato da camomila.

Due to the growing selection of microorganisms resistant to antimicrobial, the search for natural alternatives has become popular. The objective of the present study was to evaluate the antibacterial activity of ethanolic and cyclohexane extracts of chamomile flowers, a plant species long used by traditional medicine, against ATCC bacteria Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli and Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium by agar diffusion and broth dilution techniques. Growth of P. aeruginosa was inhibited when crude ethanolic extract (1g/mL) was used broth dilution, and was confirmed by agar diffusion, (10 mm diameter inhibition zone). For the other bacteria tested, the extracts and their dilutions did not show any bacteriostatic effect in any of the techniques. It may be concluded that pure ethanolic extract of chamomile presents antibacterial action against P. aeruginosa, and none against S. aureus, E. coli e Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Typhimurium. However, other studies with different strains of microorganisms may be useful in order to corroborate and ensure these results, to define evaluation of the antimicrobial activity of chamomile extract.

Isolaram-se estirpes de Campylobacter spp. em amostras de carcaças (n=65), fezes (n=65) e linfonodos mesentéricos (n=65) de suínos abatidos em frigoríficos do estado de São Paulo e detectaram, pela técnica da Multiplex-PCR, a presença do complexo de genes cdt, responsáveis pela expressão do fator de virulência da toxina CDT. Do total de 195 amostras de origem suína, Campylobacter spp. foi isolado de 31 (15,9%), sendo 29 (93,6%) de amostras de suabe retal, 1/65 (3,2%) de suabe de carcaça e um (3,2%) de linfonodo. Vinte e oito estirpes de C. coli foram positivas para a detecção dos genes cdt, e três estirpes de C. jejuni foram negativas para a detecção desses genes. Foi detectada, pela primeira vez no estado de São Paulo, a presença dos genes cdt em 100% das estirpes de Campylobacter coli provenientes de suínos abatidos em frigoríficos.

The purposes of this study were to isolate and identify Campylobacter spp. strains from the carcasses (n=65), feces (n=65) and mesenteric lymph nodes (n=65) of swine slaughtered in abattoirs in the State of Sao Paulo and to detect the presence of the cdt gene complex - responsible for the expression of the virulence factor cytolethal distensive toxin - in these Campylobacter spp. strains through Multiplex-PCR. From 195 samples analyzed, Campylobacter spp. was isolated in 31 (15.9%): 29 (93,6%) samples of rectal swab, 1 (3.2%) carcass swab and 1 (3.2%) lymph node sample. The 28 strains of isolated C. coli were positive for CDT toxin genes and the three strains of isolated C. jejuni were negative for these genes. It was also the first time that the cdt gene cluster was detected in strains isolated from swine in the state of São Paulo. These findings indicate swine as a potential spreading source of virulent strains of Campylobacter coli, either for slaughterhouse staff or consumers of carcasses and sub products.

O Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) tem discutido a obrigatoriedade da realização de espermocultura em sêmen industrializado não somente para garantia da biossegurança mas também por falhas na fertilização in vitro pela contaminação dos ovócitos com bactérias ubiquitárias e oportunistas da microbiota prepucial. A técnica quantitativa de Pour Plate, preconizada pela Organização Internacional de Epizootias, é operacionalmente difícil e de custo elevado para a rotina em centrais de inseminação artificial (CIAs). Desse modo, avaliou-se a técnica de contagem de bactérias viáveis por superfície (CBVS) em UFC/mL de sêmen industrializado de touros de CIAs, comparando-a à técnica de Pour Plate, com intuito de validação. Foram empregadas palhetas de sêmen de touros do Projeto Hungria do MAPA. A partir da diluição seriada de 10-1 a 10-5 do sêmem, foram empregadas, paralelamente, as técnicas de Pour Plate e CBVS. A média ou mediana de UFC/mL obtida em cada diluição foi comparada entre as técnicas, e não foram observadas diferenças estatísticas entre as duas técnicas quanto à quantificação de bactérias em UFC/mL, sugerindo a possibilidade de substituição da técnica de Pour Plate pela de CBVS, com vantagens de praticidade e menor custo.

The Brazilian Ministry of Agriculture (MAPA) has discussed the mandatory culture of industrialized semen, both to ensure biosefety, and to prevent in vitro fertilization problems caused by oocyte contamination with ubiquitous and opportunistic bacteria from preputial microbiota. Pour plate, a quantitative technique recommended by the World Organization for Animal Health (OIE), is operationally difficult and costly for routine analysis in Artificial Insemination Centers (AICs). The objectives of this study were to evaluate and validate viable superficial bacteria counts (VSBC), in CFU/mL, compared with pour plate counts, in industrialized bull semen samples from AICs. Semen straws from Projeto Hungria - MAPA bulls were used. VSBC and pour plate were carried out in parallel in serial dilutions of the samples, from 10-1 to 10-5. CFU/mL means or medians recorded in each dilution and technique were compared, and no statistical differences were observed between the two techniques regarding the quantification of bacteria in CFU/mL, suggesting that it may be possible to replace pour plate for CBSV, a cheaper and more practical technique.

Foram analisadas 80 amostras de sobrecoxas de frangos de corte resfriados provenientes de feiras livres e hipermercados do município de São Paulo, SP. Treze estirpes de Campylobacter spp. foram isoladas em 10 (12,5%) sobrecoxas, sendo cinco amostras originárias de feiras livres e cinco de hipermercados. Onze estirpes foram identificadas como Campylobacter jejuni e duas como Campylobacter coli. As 11 estirpes foram confirmadas como C. jejuni pela PCR do gene da hipuricase (hip), e destas, quatro (36,4%) apresentaram os três genes (cdtA, cdtB e cdtC) codificantes da toxina citoletal distensiva pela multiplex-PCR, sendo três estirpes provenientes de hipermercados e uma de feira livre. Observou-se a presença de estirpes virulentas de C. jejuni, portadoras do complexo de genes cdt, nas amostras de frango resfriado, não só na linha de abate, mas até o ponto final da cadeia de distribuição, nos dois principais centros de venda a varejo.

Eighty samples of refrigerated broiler thighs purchased in street markets and supermarkets in the city of São Paulo, SP, were analyzed. Thirteen Campylobacter spp. strains were isolated in 10 (12.5%) thighs, five of them from street market samples and other five from supermarkets. Eleven strains were identified as Campylobacter jejuni and two of them as Campylobacter coli. The 11 strains were confirmed to be C. jejuni using PCR for hippuricase (hip) gene. From these, multiplex-PCR showed that four (36.4%) strains presented the three genes (cdtA, cdtB, and cdtC) encoding cytolethal distending toxin: three strains from supermarket and one from street market samples. These results are important, because they demonstrate the presence of virulent C. jejuni strains in refrigerated broiler thigh samples, not only in the slaughterhouse but in the final point of the distribution chain, at the two most important food retail commercer.

The objectives of the present study were the subtyping of Campylobacter jejuni subsp. jejuni strains obtained from humans and different animal species using PCR-RFLP, and the detection, by means of the same technique, of strains related to serotype PEN O19:LIO 7, the main C. jejuni serotype linked to Guillain-Barré Syndrome (GBS). Seventy C. jejuni strains isolated from human feces (n=33), primates (n=15), dogs (n=5), swine (n=2), bovines (n=1), abortion material from goats (n=2) and poultry carcasses (n=12), all collected in the state of São Paulo, were subtyped by means of PCR-RFLP of fla A gene, using restriction endonucleases Hae III, Afa I and Mbo I. Seven subtypes were observed when using the enzyme Hae III; eight when using Mbo I; and seven when using Afa I. The combination of the three endonucleases led to 16 fla-RFLP subtypes, from which ten subtypes shared strains of human and animal origin. From these, seven subtypes were observed in human and broiler strains. In eight subtypes, the other animal species shared patterns with human strains. It was inferred that, besides broilers, swine, goats, dogs and primates may be sources of infection for human in São Paulo. PCR-RFLP is a highly discriminatory technique that may be applied to molecular epidemiology studies of samples from different origins. Besides, the study also enabled the detection of two human strains and two primate strains related to serotype PEN O19: LIO 7.

Samples of 114 bovine fetuses and 10 calves, which dead in perinatal period, were examined for detection of DNA. The most common detected agent was Brucella spp. in 17 samples (13.7%) followed by Leptospira spp. in 4 cases (3.2%),bovine herpesvirus (BHV) and bovine viral diarrhea (BVDV) in 3 animals (2.4%) each, and 1 for the association of BVDV and BHV. In 77.4 % (96/124) of the samples it was not possible to detect any agent.

RESUMO O objetivo desse trabalho foi avaliar in vitro a sensibilidade de zigotos murinos à Brucella abortus, a fim de estabelecer um modelo acessível para o estudo de interações embriões-patógenos. Para a coleta dos zigotos, foram utilizados camundongos fêmeas (Swiss Webster) acasaladas com machos inteiros, após superestimulação ovariana. Para a infecção foi utilizada a bactéria B. abortus 1119.3 e a suspensão foi preparada no momento da inoculação (diluição de 106 bactérias/mL). Os zigotos foram separados em controle e infectados (30 µL da suspensão de bactérias), e após 24 e 96h foram analisados quanto à morfologia e taxa de clivagem. No grupo controle não foram verificadas alterações morfológicas, já no infectado foi possível verificar a presença de blastômeros irregulares, falha de divisão, citoplasma com granulação e aspecto degenerativo. As taxas de clivagem após 24h foram de 77,4% (controle) e 59,2% (infectados) (χ2 de 0,001674; p < 0,05) e após 96h de infecção 14,5% (controle) e 7% (infectados) (χ2 de 0,141616; p < 0,05). Considerando os resultados pode-se concluir que os zigotos murinos são sensíveis à B. abortus após exposição in vitro. Provavelmente os zigotos murinos possam ser utilizados como modelo experimental, de baixo custo e fácil acesso, para estudos da interação embrião-B. abortus.

ABSTRACT The aim of this study was evaluate in-vitro the susceptibility of mouse zygotes to Brucella abortus, with the purpose of establishing an accessible model for embryo-pathogen interaction studies. The female mice (Swiss Webster) were superovulated and mated with fertile males of the same strain, and then the zygote retrieval was performed. The bacterial suspension was prepared at the moment of inoculation, and the dilution was 106 brucellas/mL. The zygotes were divided into control and infected groups (30 µL of the bacterial suspension); after 24 and 96h their morphology and viability were analyzed. Morphological changes were not observed in the control group, but the infected one presented irregular blastomers, defective cleavage, granular cytoplasm with degenerative-like morphology. The cleavage rates were 77.4% (control) and 59.2% (infected) (χ2 de 0.001674; p< 0.05) after 24h, and after 96h 14.5% (control) and 7% (infected) (χ2 de 0.141616; p < 0.05). According to the data, mice zygotes are susceptible to B. abortus in-vitro infection. Probably they could be used as an efficient and accessible experimental model for studies of embryo-pathogen interactions.

ABSTRACT The effect of vaccination on the serological profile of a closed Nelore beef cattle herd, endemically infected by leptospirosis was studied. Serum samples of 100% of the females (= 12 months to 8 years) were collected in Oct/1998 and examined by Microscopic Agglutination test (MAT) using 6 serovars of Leptospira spp.: icterohaemorrhagiae, canicola, pomona, grippotyphosa, hardjo and wolffi. After MAT, the animals were vaccinated and divided in 4 groups: I) hardjo/ wolffi MAT positive and vaccinated; II) hardjo/wolffi MAT positive and non-vaccinated; III) MAT negative and vaccinated and IV) MAT negative and non-vaccinated. The first vaccination was in Dec/1999 with reinforcement in Jan/2000; and revaccination in Out/2000. The 3 mL dose of a commercial vaccine containing the same 6 serovars was given subcutaneously. Serum samples were taken in Mar/2000 and Nov/2000 and examined the same way by MAT. The proportion of reagents in the 3 collections was: 62.5% (120/192), 77.4% (106/137) and 74% (91/123). Geometrical means titers were equal to 2.59, 2.34 and 2.15, respectively. Serological profile considering reagents frequency and pre-vaccination titers showed a bimodal distribution with 39.6% of negative results. After vaccination, there was an increase in the frequency of reactors, probably due to the seroconversion of negative heifers and cows, however, the vaccination did not elicit significant increase in the magnitude of the Hardjo or Wolffi titers. Instead, the geometric means in the whole herd, vaccinated and unvaccinated groups, showed a decreasing tendency. In postvaccination serological monitoring the progressive titer decrease would represent vaccine efficiency. herd studied 100 = ( 1 years Oct1998 Oct 1998 Oct/199 (MAT spp. spp icterohaemorrhagiae canicola pomona grippotyphosa groups I II hardjowolffi nonvaccinated non non-vaccinated III IV nonvaccinated. vaccinated. Dec1999 Dec 1999 Dec/199 Jan/2000 Jan2000 Jan 2000 Out2000 Out Out/2000 subcutaneously Mar2000 Mar Mar/200 Nov2000 Nov Nov/200 625 62 5 62.5 120/192, 120192 120/192 , 120 192 (120/192) 774 77 77.4 106/137 106137 106 137 (106/137 74 91/123. 91123 91/123 . 91 123 (91/123) 259 2 59 2.59 234 34 2.3 215 15 2.15 respectively prevaccination pre 396 39 39.6 results reactors cows however Instead tendency efficiency 10 Oct199 199 Oct/19 Dec199 Dec/19 Jan/200 Jan200 200 Out200 Out/200 Mar200 Mar/20 Nov200 Nov/20 62. 12019 120/19 19 (120/192 7 77. 106/13 10613 13 (106/13 9112 91/12 9 (91/123 25 2.5 23 2. 21 2.1 39. Oct19 Oct/1 Dec19 Dec/1 Jan/20 Jan20 20 Out20 Out/20 Mar20 Mar/2 Nov20 Nov/2 1201 120/1 (120/19 106/1 1061 (106/1 911 91/1 (91/12 Oct1 Oct/ Dec1 Dec/ Jan/2 Jan2 Out2 Out/2 Mar2 Mar/ Nov2 Nov/ 120/ (120/1 106/ (106/ 91/ (91/1 Jan/ Out/ (120/ (106 (91/ (120 (10 (91 (12 (1 (9

RESUMO Estudou-se o efeito da vacinação sobre o perfil sorológico de um rebanho Nelore fechado, que apresentava leptospirose endêmica. Amostras de soro de 100% das fêmeas (=12meses a 8 anos) foram examinadas (out/98) pela à Soroaglutinação Microscópica (SAM) frente aos sorovares Icterohaemorrhagiae, Canicola, Pomona, Grippotyphosa, Hardjo e Wolffi. Baseado nesses resultados os animais foram vacinados e subdivididos em 4 grupos: I) SAM +, vacinados; II) SAM +, não vacinados; III) SAM -, vacinados e IV) SAM -, não vacinados. Tres mL de uma vacina comercial contendo os mesmos 6 sorovares foram aplicados por via SC, em dez./99, com reforço em jan/00 e revacinação em out/00. Os soros foram colhidos em mar/00 e nov/00 e reexaminados pela SAM. A proporção de reagentes nas 3 colheitas foi de 62,5% (120/ 192), 77,4% (106/137) e 74% (91/123) com médias geométricas dos títulos de 2,59, 2,34 e 2,15 respectivamente. O perfil sorológico, considerando-se a freqüência de reagentes e títulos de aglutininas antes da vacinação, mostrou distribuição bimodal, com 39,6% negativos. Após vacinação, houve aumento na freqüência de reagentes, provavelmente, devido a soroconversão de novilhas e vacas negativas, entretanto não promoveu aumento significante na média geométrica de títulos para Hardjo e Wolffi, ao contrário, houve tendência decrescente. O monitoramento sorológico de um rebanho vacinado pode ser utilizado como ferramenta na avaliação do "status" protetor conferido pela vacina, onde o decréscimo progressivo dos títulos pós vacinação significaria eficiência vacinal. Estudouse Estudou se fechado endêmica 100 =12meses 12meses meses anos out/98 out98 out 98 (out/98 (SAM Icterohaemorrhagiae Canicola Pomona Grippotyphosa Wolffi grupos I + II III , - IV SC dez99 dez 99 dez./99 jan00 jan 00 jan/0 out00 out/00 mar00 mar mar/0 nov00 nov nov/0 625 62 5 62,5 120/ 120 (120 192, 192 192) 774 77 77,4 106/137 106137 106 137 (106/137 74 91/123 91123 91 123 (91/123 259 2 59 2,59 234 34 2,3 215 15 2,1 respectivamente considerandose considerando bimodal 396 39 39,6 negativos provavelmente negativas contrário decrescente status "status vacinal 10 out/9 out9 9 (out/9 dez9 dez./9 jan0 0 jan/ out0 out/0 mar0 mar/ nov0 nov/ 62, 12 (12 19 7 77, 106/13 10613 13 (106/13 91/12 9112 (91/12 25 2,5 23 2, 21 1 39, out/ (out/ dez./ (1 106/1 1061 (106/1 91/1 911 (91/1 (out dez. ( 106/ (106/ 91/ (91/ (106 (91 (10 (9

ABSTRACT Enzootic pneumonia is an emergent infectious disease that occurs in young bovine, generally confined in groups. This illness is associated to the modern systems of intensive handling in milk and beef herds. Mycoplasma dispar, M. bovis, Ureaplasma diversum, Pasteurella haemolytica (Mannheimia haemolytica), P. multocida, Haemophilus somnus, bovine respiratory syncytial virus (BRSV), parainfluenza virus 3 and bovine herpesvírus 1 are the main microorganisms found, often in synergism. An outbreak of the illness was observed in four farms in São Paulo State in 2001 and the detailed led to the solution of these cases, clearly demonstrating the value of such diagnosis. groups herds dispar M bovis diversum Mannheimia haemolytica, , haemolytica) P multocida somnus BRSV, BRSV (BRSV) found synergism 200 cases diagnosis (BRSV 20 2

RESUMO A pneumonia enzoótica é uma doença infecciosa emergente que ocorre em bovinos jovens, geralmente, confinados em grupos. Esta enfermidade está associada aos modernos sistemas de manejo intensivo em rebanhos de corte e leite. Mycoplasma dispar, M. bovis, Ureaplasma diversum, Pasteurella haemolytica (Mannheimia haemolytica), P. multocida, Haemophilus somnus, vírus sincicial respiratório, vírus da parainfluenza 3 e herpesvírus bovino 1 são os principais microrganismos encontrados, muitas vezes em sinergismo. Um surto da enfermidade foi observado em quatro propriedades rurais no Estado de São Paulo em 2001 e o diagnóstico diferencial detalhado levou à resolução dos casos, colocando em evidência a sia necessidade. jovens geralmente grupos leite dispar M bovis diversum Mannheimia haemolytica, , haemolytica) P multocida somnus respiratório encontrados sinergismo 200 casos necessidade 20 2

ABSTRACT The isolation of microorganims from the endogenous microbiota, which are generally considered to be little virulent, from sites of serious infections presents a warning that the role of these microorganims as contaminants should not be discarded immediately. On the contrary, it is possible that they have great clinical importance, mainly in highrisk individuals. Any failure in the exclusion of normal microbiota during sample collection procedures may lead to the need of longer time for analysis, or to the production of inaccurate data to be sent to the practicioner. On the other hand, inadequate transportation may lead to the loss of viability of certain microorganims, which are either not going to be isolated, or they will be isolated in small number, and, therefore, considered to be less important. The relative importance of different microorganims in a mixed infection should be judged based on the relative number of each isolated strain, presence in pure culture, presence in the blood stream or persistence in repeated cultures. Another important factor is the evaluation of the impact of antimicrobial compounds on indigenous microbiota, when it is considered that agents which produce a smaller disturbance on normal microbiota are the less susceptible to lead to a superinfection. It may be concluded, thus, that the traditional difference between pathogenic and non-pathogenic or virulent and non-virulent microorganisms is becoming more and more insignificant. immediately contrary individuals analysis practicioner hand therefore strain culture cultures superinfection concluded thus nonpathogenic non nonvirulent insignificant

RESUMO O isolamento de microrganismos da microbiota endógena, geralmente considerados de pouca virulência, de sítios de infecções graves, alerta para o fato de que estes microrganismos não podem ser desprezados automaticamente como contaminantes. Ao contrário, é possível que tenham grande importância clínica, particularmente em indivíduos de alto risco. Falhas ao excluir a microbiota normal durante os procedimentos de colheita da amostra clínica podem levar à necessidade de maior tempo para a análise, ou ao fornecimento de dados inacurados ao clínico. Por outro lado, o transporte impróprio pode levar à perda da viabilidade de certos microrganismos que não serão isolados, ou o serão em pequeno número, podendo ser considerados relativamente pouco importantes. A importância relativa de diferentes microrganismos numa infecção mista deve ser julgada com base no número relativo de cada cepa isolada, presença em cultura pura, presença na corrente sangüínea ou persistência em repetidas culturas. Outro fator importante é avaliar o impacto dos antimicrobianos sobre a microbiota normal, considerando-se que agentes que produzem menor distúrbio sobre a microbiota indígena são menos suscetíveis de levar a uma superinfecção. Conclui-se assim que a tradicional diferença entre microrganismos patogênicos e não patogênicos, ou entre virulentos e avirulentos, está se tornando cada vez menos significante. endógena virulência graves contaminantes contrário risco análise clínico lado isolados importantes isolada pura culturas considerandose considerando superinfecção Concluise Conclui avirulentos significante