Several molecular methods, such as Southern blotting hybridization, Multilocus Sequence Typing, and DNA microsatellite analysis, have been employed to genotype Candida albicans. The genotype analysis allows to group strains in clades, that is, a group composed of one ancestor and its descendants. These genotype studies demonstrate that clades distribution is influenced by geographic area as well as that antifungal resistance is associated with particular clades. These findings suggested that C. albicans reproduces mainly in a clonal manner, with certain degree of DNA microevolution. Additionally, virulence factors and site of isolation have also been associated with clade specificity. The present article is a brief review about the methods used for Candida genotyping and the correlated clade systems established. Special emphasis is given to Ca3 hybridization, MLST, and Microsatellites. The present work is also focused on the phenotypic and physiological traits associated with Candida clades.

The aim of the present study was to evaluate the antifungal susceptibility profile of Trichosporon species isolated from different sources employing the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) method and E-test method. Thirty-four isolates of Trichosporon spp. and six CBS reference samples were tested for their susceptibility to Amphotericin B, 5-flucytosine, Fluconazole, Itraconazole, Voriconazole and Terbinafine. All species showed high Minimun Inhibitory Concentrations (MIC) for Itraconazole and susceptibility to Fluconazole, The comparison among the results obtained by the CLSI method and E-test revealed larger discrepancies among 5-flucytosine and Itraconazole. The present work provides epidemiological data that could influence therapeutic choices. Furthermore, the comparison between different methodologies could help to analyze results obtained by different laboratories.

Trinta Candida albicans isoladas de pacientes portadores de candidose oral e 30 Candida albicans isoladas de indivíduos controle foram estudadas. Testes de susceptibilidade in vitro foram realizados com anfotericina B, fluconazol, 5-flucitosina e itraconazol pelo método do Clinical and Laboratorial Standars Institute (CLSI) e por E-test. Os resultados obtidos foram analisados e comparados. Os valores de CIM foram semelhantes para amostras isoladas de pacientes portadores de candidose oral e indivíduos controle. A concordância entre os dois métodos foi de 66,7% para a anfotericina B, 53,33% para o fluconazol, 65% para a flucitosina e 45% para o itraconazol. De acordo com estes resultados, o método do E-test poderia ser uma alternativa para a triagem de casos de rotina pela sua simplicidade. Entretanto, este método não pode ser considerado como um substituto para o método de referência do CLSI.

Thirty Candida albicans isolated from oral candidosis patients and 30 C. albicans isolated from control individuals were studied. In vitro susceptibility tests were performed for amphotericin B, fluconazole, 5-flucytosine and itraconazole through the Clinical and Laboratorial Standards Institute (CLSI) reference method and E test system. The results obtained were analyzed and compared. MIC values were similar for the strains isolated from oral candidosis patients and control individuals. The agreement rate for the two methods was 66.67% for amphotericin B, 53.33% for fluconazole, 65% for flucytosine and 45% for itraconazole. According to our data, E test method could be an alternative to trial routine susceptibility testing due to its simplicity. However, it can not be considered a substitute for the CLSI reference method.

A propriedade antifúngica de extratos de oito plantas utilizadas na medicina tradicional brasileira foi testada contra cinco espécies de Candida, com relevância clínica, Cryptococcus neoformans e Sporothrix schenckii. Os resultados mostraram que todos os extratos exibiram atividade antifúngica contra pelo menos um dos microrganismos testados. O extrato etanólico das folhas de Schinus terebinthifolius apresentou potencial atividade antifúngica contra C. glabrata e S. schenckii. Na análise fitoquímica preliminar dos extratos de S. terebinthifolius observou-se a presença de compostos biologicamente ativos como, flavonóides, triterpenos, esteróides e taninos.

Antifungal properties of extracts from eight Brazilian plants traditionally used in popular Brazilian medicine were tested against five clinically relevant Candida species, Cryptococcus neoformans, and Sporothrix schenckii. Results demonstrate that almost all extracts exhibited antifungal activity, at least against one of the microorganisms tested. The ethanolic extract from the leaves of Schinus terebinthifolius exhibited potential antifungal activity against C. glabrata and S. schenckii. Preliminary phytochemical analysis of extract from S. terebinthifolius showed the presence of biologically active compounds, namely saponins, flavonoids, triterpenes, steroids and tannins.

Treze amostras de leveduras do gênero Candida foram isoladas de catéter, urina e feridas cirúrgicas de pacientes da Santa Casa de Misericórida de Belo Horizonte, MG, Brasil. Dez amostras foram identificadas como Candida albicans, duas como Candida glabrata e uma como Candida parapsilosis. Os isolados foram avaliados quanto ao perfil molecular pela técnica de amplificação aleatória de DNA polimórfico utilizando 15 iniciadores. A análise do DNA genômico obtido revelou um baixo polimorfismo intraespecífico e não permitiu a diferenciação entre amostras da mesma espécie obtidas a partir de diferentes espécimes clínicos (catéter, urina e feridas cirúrgicas). Os perfis de RAPD obtidos foram capazes de diferenciar entre as espécies Candida albicans, Candida parapsilosis e Candida glabrata isoladas neste estudo.

Thirteen strains of the genus Candida were isolated from catheter, urine and surgical wounds from individual patients of the Santa Casa de Misericórdia, Belo Horizonte, MG, Brazil. Ten strains were characterized as Candida albicans, two as Candida glabrata, and one as Candida parapsilosis. Isolates were evaluated for molecular relatedness by random amplified polymorphic DNA technique using 15 primers. The analysis of the genomic DNA obtained revealed a low intraspecific polymorphism and did not allow for the differentiation between strains of the same species obtained from distinct clinical sources (catheter, urine and surgical wounds). The RAPD profiles generated were able to differentiate among the species of Candida albicans, Candida parapsilosis and Candida glabrata strains isolated in this study.

Feo-hifomicose causada por Veronaea bothryosa é muito rara. Os autores relatam dois casos, que acreditam ser o primeiro e o segundo no continente americano, mas quarto e quinto da literatura mundial, até o momento. Trata-se de dois pacientes, um transplantado renal e outro imunossuprimido não transplantado. Ambos apresentavam lesões no dorso do pé após trauma. O primeiro respondeu moderadamente ao tratamento com itraconazol, e o segundo respondeu muito bem à excisão cirúrgica.

Phaeohyphomycosis caused by Veronaea bothryosa is very rare. We report two cases. To our knowledge, these are the first and second cases to be reported on the American continent, and fourth and fifth cases in the world literature. We report one case in a kidney transplant recipient, and another case in an immunosuppressed non-transplant patient. Both patients presented with a lesion on the dorsal aspect of the foot, following trauma. One patient responded moderately well to treatment with itraconazole. The other responded well to a surgical excision.

Preparações antigênicas (antígenos salinos, metílicos, metabólicos e exoantígenos) de quatro agentes da cromoblastomicose, Fonsecaea pedrosoi, Phialophora verrucosa, Cladophialophora (Cladosporium) carrionii e Rhinocladiella aquaspersa foram obtidos e foi determinada a caracterização química parcial dos mesmos. Os antígenos metílicos apresentaram os maiores teores de lípides enquanto os metabólicos os maiores teores em carboidratos. Lípides totais, proteína e carboidratos totais ocorreram na faixa de 2,33 a 2,00mg/ml, 0,04 a 0,02 mg/ml e 0,10 a 0,02 mg/ml respectivamente, nos antígenos metílicos e de 0,53 a 0,18mg/ml, 0,44 a 0,26mg/ml e 1,82 a 1,02mg/ml respectivamente, nos antígenos salinos. Lípides, proteínas e carboidratos totais ocorreram na faixa de 0,55 a 0,20mg/ml, 0,69 a 0,57mg/ml e 10,73 a 5,93mg/ml respectivamente, nos antígenos metabólicos, e na faixa de 0,55 a 0,15mg/ml, 0,62 a 0,20mg/ml e 3,55 a 0,42mg/ml respectivamente, nos exoantígenos. Fosfolípides não foram detectados em nenhum dos antígenos. Os antígenos salinos, metabólicos e os exoantígenos apresentam hexoses enquanto os antígenos metílicos apresentam adicionalmente unidades de pentose em sua composição. O espectro de absorção na luz UV dos esteróis revelou esqualeno e ergosterol em todos os antígenos. A obtenção e caracterização química parcial desses antígenos poderá vir a ser de utilidade em estudos de sorologia de pacientes da cromoblastomicose.

Antigenic preparations (saline, methylic, metabolic and exoantigens) of four agents of chromoblastomycosis, Fonsecaea pedrosoi, Phialophora verrucosa, Cladophialophora (Cladosporium) carrionii and Rhinocladiella aquaspersa were obtained. Partial chemical characterization of these antigenic preparations was obtained by determination of the levels of total lipids, protein, and carbohydrates, and identification of the main sterols and carbohydrates. Methylic antigens presented the highest lipid contents, whereas metabolic antigens showed the highest carbohydrate content. Total lipid, protein, and carbohydrate levels were in the range of 2.33 to 2.00mg/ml, 0.04 to 0.02 mg/ml and 0.10 to 0.02 mg/ml, respectively, in the methylic antigens and in the range of 0.53 to 0.18mg/ml, 0.44 to 0.26mg/ml, and 1.82 to 1.02 mg/ml, respectively, in saline antigens. Total lipid, protein, and carbohydrate contents were in the range of 0.55 to 0.20mg/ml, 0.69 to 0.57mg/ml and 10.73 to 5.93mg/ml, respectively, in the metabolic antigens, and in the range of 0.55 to 0.15mg/ml, 0.62 to 0.20mg/ml and 3.55 to 0.42mg/ml, respectively, in the exoantigens. Phospholipids were not detected in the preparations. Saline and metabolic antigens and exoantigens presented hexose and the methylic antigen revealed additional pentose units in their composition. The UV light absorption spectra of the sterols revealed squalene and an ergosterol fraction in the antigens. The characterization of these antigenic preparations may be useful for serological evaluation of patients of chromoblastomycosis.

O uso alternativo de cacau (Theobroma cacao) para produção de vinho foi testado. A polpa de cacau foi obtida da Fazenda Formosa, Itacaré, Brasil. As amostras de polpa foram diluídas, homogeneizadas e inoculadas em meio de Sabouraud dextrose e incubadas a 28°C por 5-8 dias. Colônias selecionadas foram testadas quanto à habilidade de fermentar a polpa de cacau e divididas em fermentadoras, não-fermentadoras e fermentadoras lentas. As amostras fermentadoras foram identificadas e testadas para produção de vinho de cacau em escala piloto. A maioria das amostras fermentadoras pertencem ao gênero Brettanomyces, com exceção de duas amostras de Kloeckera apis. O vinho obtido apresentou coloração fraca e clara, tornando a clarificação desnecessária, além de sabor doce e agradável. A predominância de espécies de Brettanomyces na polpa de cacau poderia indicar sua importância ecológica neste ambiente e sugere uma participação ativa dessas leveduras nos processos de deterioração da polpa processada do cacau.

The alternative use of cocoa (Theobroma cacao) for wine production was tested. The pulp samples, obtained from Formosa farm, Itacaré, Brazil, were diluted, homogenized and inoculated on Sabouraud dextrose agar medium (SDA) and incubated at 28º C for 5-8 days. Selected colonies were tested for the ability to ferment cocoa pulp and divided into fermentative, non-fermentative and weak/late fermentative species. Isolates characterized as fermentative were further tested in a small-scale wine production plant and identified. Species from the genus Brettanomyces constituted the main fermentative yeasts, with the exception of two Kloeckera apis samples. The final wine product was normally pale or clear, making clarification unnecessary, and with a sweet or dry pleasant flavor. The predominance of Brettanomyces species in cocoa pulp indicated its ecological importance in this environment and pointed to an active role of Brettanomyces in the deterioration process of the processed cocoa pulp.

O caso estudado refere-se a paciente do sexo masculino, 36 anos, feoderma, sem história de doença sistêmica ou trauma ocular, apresentando úlcera corneana no olho esquerdo. Antes do estabelecimento do diagnóstico específico, o paciente foi tratado com antibiótico associado a corticosteróides durante um mês. O exame direto realizado a partir de raspado de córnea tratado com KOH revelou a presença de hifas fúngicas e clamidosporos, e o cultivo do material em ágar Sabouraud dextrose mostrou-se positivo para Fusarium solani. É enfatizada a necessidade do uso cauteloso de antibióticos e corticosteróides no tratamento de infecções da córnea, bem como de se considerar a possibilidade de etiologia fúngica destes quadros.

A 36-year-old black man, without history of systemic disease or ocular trauma developed a corneal infection in his left eye. He was treated with antibacterial antibiotic and corticosteroids for one month prior to diagnosis. Fungal hyphae and chlamydospores were found in a KOH preparation of the corneal scrapings, and positive cultures for Fusarium solani were obtained in Sabouraud dextrose agar. It is emphasized the cautious use of antibiotics and steroids in corneal diseases, and the need of considering the involvement of opportunistic fungi in the etiology of these infections.

Cinco amostras de Paracoccidioides brasiliensis (SN, 2, 18, 192 e JT-1) em fase leveduriforme foram cultivadas em meio sintético para obtenção de antígenos metílicos. Os antígenos provenientes de cada amostra foram liofilizados e analisados quanto à sua composição bioquímica parcial, através da determinação do conteúdo total de lipídios, proteínas e carboidratos. Os lipídios dos antígenos metílicos foram purificados e analisados quanto ao teor de esterois, fosfolipídios, glicolipídios e lipoproteínas. Esterois foram parcialmente caracterizados. Em relação às medidas quantitativas, foram encontradas diferenças significantes entre as preparações antigênicas provenientes de amostras distintas de P. brasiliensis. Por outro lado, a análise dos esterois revelou a presença de ergosterol, lanosterol e esqualeno em todas as preparações. As diferenças verificadas nas características bioquímicas de antígenos derivados de amostras diferentes de P. brasiliensis confirmam a necessidade do uso de um pool de cepas para obtenção de preparações antigênicas a serem empregadas em procedimentos sorológicos, sem o que tais reações poderão ter sua sensibilidade comprometida.

Yeast forms of five strains of Paracoccidioides brasiliensis (SN, 2, 18, 192 and JT- 1) were cultured in a synthetic medium for obtaining methylic antigens. These antigens were lyophilized and studied for each strain, to determine their partial biochemical composition, through measurements of total lipid, protein and carbohydrate contents. Lipids of methylic antigens were purified and analysed for sterols, phospholipids, glycolipids, li-poproteins, and partial characterization of sterols. Significant differences were found among antigenic preparations derived from distinct P. brasiliensis strains, in relation to the quantitative determinations. On the other hand, sterol analysis revealed the presence of ergosterol, lanosterol and squalene in all samples. The diversity verified in the biochemical characteristics of antigens derived from different P. brasiliensis strains, confirm the need of using a pool of fungal samples in order to produce antigen preparations for serological procedures without hampering their sensitivity.

Foram realizados testes de susceptibilidade "in vitro" com várias amostras de agentes, isoladas de pacientes com cromomicose frente à 5-fluorocitosina e ao butil-simpatol (Vasculat), nas concentrações de 0,1, 1,0, 5,0 10,0 mcg/ml. Em alguns casos, em que se verificou resistência à 5-fluorocitosina, a concentração desta chegou a 100,0 mcg/ml.

The sensitivity of strains isolated from patients with chromomycosis was tested in relation to 5-fluorocitosine and butyl-simpatol (Vasculat); some strains were resistant to fluorocitosine, even in the concentration of 100 mcg/ml and all of them showed complete resistance to butyl-simpatol.