RESUMO O mamoeiro Carica papaya (L.) é acometido por diversos problemas fitossanitários, sendo o ácaro Tetranychus urticae (Koch, 1836) (Acari: Tetranychidae) uma das pragas-chave. A utilização de fungos entomopatogênicos é uma alternativa ao controle por agrotóxicos, reduzindo os riscos de resistência e também a carga de substâncias tóxicas ao ambiente. Este trabalho foi realizado para verificar se as diferentes cultivares de mamoeiro interferem na patogenicidade de Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae e Lecanicillium longisporum. No bioensaio foram utilizadas fêmeas adultas de T. urticae mantidas por pelo menos uma geração sobre folhas de quatro cultivares de mamão, Calimosa, Golden, Sunrise e Tainung 01, e também de uma testemunha de feijão-de-porco. Foram então transferidas dez fêmeas para placas de Petri com discos de folhas das respectivas cultivares de origem e de feijão-de-porco. Em seguida, os ácaros foram pulverizados com suspensões 5 x 107 conídios.mL-1 em Torre de Potter. As suspensões de conídios foram preparadas a partir das formulações comerciais: Boveril® B. bassiana; Metarril® M. anisopliae; Vertirril® L. longisporum. Foi avaliada a mortalidade corrigida e confirmada. Foram observadas diferenças (Tukey, P < 0,05) entre as cultivares na resposta patogênica de T. urticae. Para o 3° DAP, uma melhor eficiência em porcentagem de mortalidade foi observada para o formulado Vertirril® aplicado nas cultivares Calimosa, Golden e Sunrise, e para Metarril® na cultivar Tainung 01. Para o 5° DAP, as eficiências entre as cultivares foram muito próximas.

ABSTRACT Papaya Carica papaya (L.) is affected by various phytosanitary problems, and the mite Tetranychus urticae (Koch, 1836) (Acari: Tetranychidae) is a key pest. The use of entomopathogenic fungi is an alternative to the use of pesticides, lowering the risk of resistance while reducing the the load of toxic substances in the environment. This study was conducted to determine whether the different cultivars of papaya interfere with the pathogenicity of Beauveria bassiana. Metarhizium anisopliae and Lecanicillium longisporum. The bioas say was carried out using adult T. urticae females maintained for at least one generation on leaves of four papaya cultivars (Calimosa, Golden, Sunrise, Tainung 01) or on jack bean leaves (control). Ten females were transferred to Petri dishes with leaf disks of the origin cultivars and jack beans. The mites were then sprayed with a 5 x 107 conidia.mL-1 suspension in a Potter Tower. Conidial suspensions were prepared from the commercial formulations Boveril® B. bassiana, Metarril® M. anisopliae, and Vertirril® L. longisporum. The corrected and confirmed mortalities were evaluated. Differences were observed (Tukey, P < 0.05) among the papaya cultivars in terms of the T. urticae pathogenic response. On the 3rd day after spraying (DAS), a better efficiency in mortality percentage was observed for the Vertirril® formulation applied to the Calimosa, Golden and Sunrise cultivars, and for Metarril® applied to the Tainung 01cultivar. On the 5th DAS, the efficiencies among the cultivars were very close.

RESUMO O ácaro rajado é uma das pragas mais importantes em culturas no Brasil. O uso do controle químico de forma descontrolada leva a sérias consequências, como a presença de resíduos em frutos e surgimento de populações resistentes. Faz-se necessário o uso de alternativas de manejo do ácaro, como o controle biológico, que vem sendo utilizado como ferramenta no manejo de di versas pragas de importância agrícola no mundo. Para a realização dos bioensaios, foram avaliadas 120 cepas de Bacillus thuringiensis Berliner quanto à patogenicidade para Tetranychus urticae Koch. Foram preparadas suspensões das diferentes cepas contendo 3 × 108 esporos viáveis/mL de água destilada, aplicadas em discos de folhas de feijão de porco (Canavalia ensiformes DC). Cada cepa constituiu-se em um tratamento, com 8 repetições, cada uma contendo 10 fêmeas adultas do ácaro. Os testes em condições de laboratório mostraram que a mortalidade foi significativa, variando de 6,7% (cepa LMJ7A) a 54,9% (cepas 1077B e 886F).

ABSTRACT The two-spotted spider mite is the most important pest to Brazilian crops. The incorrect use of chemical control leads to serious consequences, such as the presence of residues in fruits and the emergence of resistant populations. There is a need for alternative methods for managing the mite, such as biological control, which has been used as a tool in the management of various pests of agricultural importance in the world. Bioassays were carried out to analyze 120 strains of Bacillus thuringiensis Berliner in regard to their pathogenicity to Tetranychus urticae Koch. Suspensions were prepared of the different strains, containing 3 × 108 spores/mL of distilled water, and applied on Jack-bean (Canavalia ensiformes DC) leaf disks. Each strain constituted a treatment, with 8 repetitions, each containing 10 adult Tetranychus urticae females. The tests in laboratory conditions showed that mortality was significantly, ranging from 6.7% (strains LMJ7A) to 54.9% (strains 1077B and 886f).

RESUMO Trichoplusia ni é uma praga polífaga importante em plantios de crucíferas, soja e algodão. O presente estudo objetivou selecionar e caracterizar por método molecular isolados de Bacillus thuringiensis (Bt) com potencial para atuar com agentes de controle biológico de T. ni. Para os bioensaios de patogenicidade, uma alíquota com 3 x 108 esporos/mL de suspensão de Bt de cada isolado foi aplicada na superfície do disco de dieta artificial, previamente distribuída em placas de acrílico com 50 lagartas, distribuídas em 5 repetições. Nos bioensaios para a obtenção da CL50, apenas os isolados com 100% de mortalidade foram pré-selecionados, sendo testadas as seguintes concentrações: 102, 5 x 102, 103, 2 x 103, 4 x 103, 6 x 103, 8 x 103 esporos/mL, sendo os tratamentos compostos por 120 lagartas, distribuídas em 3 repetições. Foi feita caracterização molecular para detectar os genes cry1, cry2 e Vip para os isolados que obtiveram mortalidade acima de 95%. Os isolados HD-1 (Padrão), Bt-1043N-V, Bt-1034F, Bt-1009K, Bt-1000, Bt-969A causaram 100% de mortalidade nos testes de patogenicidade e CL50 de 1,17 x 103, 1,45 x 103, 1,46 x 103, 1,01 x 103, 9,43 x 102, 1,22 x 103, respectivamente. Não foram encontrados genes cry1, cry2 e Vip nos isolados testados, podendo outras toxinas Cry estar causando a mortalidade de T. ni, visto que os isolados testados são específicos para a ordem Lepidoptera. Estes isolados mostraram potencial para o controle de T. ni, sendo virulentos a este inseto, com potencial para serem utilizados em programa de manejo desta praga.

ABSTRACT Trichoplusia ni is a polyphagous pest that is becoming a major pest in plantations of cruciferous crops, soybeans and cotton. This study was aimed to select and molecularly characterize efficient isolates of Bacillus thuringiensis (Bt) for the control of T. ni. For the bioassays of pathogenicity, an aliquot with a 3 x 108 spores/mL suspension of Bt of each isolate was applied on the surface of the artificial diet disk, previously distributed on acrylic plates with 50 larvae, distributed in 5 repetitions. In bioassays to obtain the LC50, only isolates with 100% mortality were preselected, and tests were carried out at the concentrations 102, 5 x 102, 103, 2 x 103, 4 x 103, 6 x 103, and 8 x 103 spores/mL, and the treatments consisting of 120 larvae, distributed in 3 repetitions. A molecular characterization was performed to detect the genes cry1, cry2 and Vip for the isolates which obtained mortality over 95%. Isolates HD-1 (Standard), Bt-1043N-V, Bt-1034F, Bt-1009K, Bt-1000 and Bt-969A caused 100% mortality in the test for pathogenicity and presented an LC50 of 1.17 x 103, 1.45 x 103, 1, 46 x 103, 1.01 x 103, 9.43 x 102, 1.22 x 103, respectively. Genes cry1, cry2 and Vip were not found in the isolates tested, and other Cry toxins may have been causing the mortality of T. ni, since the isolates tested are specific for the Lepidoptera order. These isolates showed potential for the control of T. ni, being aggressive to this insect, with a potential to be used in a pest management program for this species.

RESUMO O parasitoide Lixophaga sp. (Diptera: Tachinidae) ocorreu em lagartas de Diaphania nitidalis (Cramer, 1782) (Lepidoptera: Crambidae) em plantio comercial de abóbora no Estado do Espírito Santo, Brasil. Não há registro de Lixophaga sp. parasitando Diaphania sp. na América do Sul e mesmo os registros para hospedeiros deste gênero são poucos. A caracterização morfológica dos adultos foi feita no Departamento e Zoologia, Instituto de Biociências da Universidade de São Paulo, Brasil. Das lagartas coletadas em campo, 26,2% estavam parasitadas, obtendo-se uma média de 2,2 pupas por lagarta e viabilidade de 14,3%. Esse parasitoide mostrou ter potencial para o controle de D. nitidalis.

ABSTRACT The parasitoid Lixophaga sp. (Diptera: Tachinidae) occurred in larvae of Diaphania nitidalis (Cramer, 1782) (Lepidoptera: Crambidae) in a commercial pumpkin plantation in the State of Espírito Santo, Brazil. This is the first report of Lixophaga sp. parasitizing Diaphania sp. in the South America, and there are few reports concerning hosts of this genus. The morphologic characterization of the adults was made at the Department of Zoology, Institute of Bioscience, of the University of São Paulo, Brazil. Of the larvae collected in the field, 26.2% were parasitized, with an average of 2.2 pupae per larva and a viability of 14.3%. This parasitoid presented potential for the control of D. nitidalis.

RESUMO A utilização de agentes de controle biológico é uma alternativa para reduzir o impacto ocasionado pela adoção do uso intensivo de produtos químicos sintéticos, além de possibilitar a produção de alimentos mais saudáveis e que possam gerar mais renda ao produtor. A bactéria entomopatogênica Bacillus thuringiensis Berliner é uma excelente opção, uma vez que é específica e não é prejudicial ao homem. Este trabalho teve como objetivo avaliar 27 isolados de B. thuringiensis obtidos a partir de amostras de solos e duas formulações comerciais (Dipel® PM e Xentari® WG) visando sua utilização em programas de manejo de Helicoverpa zea (Boddie), analisando suscetibilidade, efeito subletal e a toxicidade por meio de estimativas da CL50 em lagartas de primeiro instar. Os isolados B.t 11, B.t 21, B.t 23, B.t 25, B.t 26, B.t 27, B.t 28 e os formulados proporcionaram mortalidades superiores a 94%, e os demais isolados ocasionaram mortalidades inferiores a 33,33%. A CL50 variou entre 3 x 104 a 1,2 x 107 esporos/mL de B. thuringiensis. Os isolados B.t 6, B.t 12, B.t 15, B.t 16 e B.t 18 afetaram o desenvolvimento deH. zea, reduzindo o peso de lagartas e pupas. Entre os isolados, B.t 23 pode ser promissor para o controle de lagartas de H. zea. PALAVRAS-CHAVE: Controle microbiano, bactéria entomopatogênica, lagarta-da-espiga.

ABSTRACT The use of biological control agents is an alternative that can reduce the impact of intensive use of synthetic chemicals, therefore allowing for production of healthier food while generating more revenue for the growers. The entomopathogenic Bacillus thuringiensis Berliner (Bt) is an excellent option due to its specificity and harmlessness to humans. The present study investigated the susceptibility, toxicity and sublethal effects of 27 B. thuringiensis isolates obtained from soil samples and 2 commercial formulations (Dipel® PM and Xentari® WG) to first-instar larvae of Helicoverpa zea (Boddie) (Lep.: Noctuidae). The Bt isolates B.t 11, B.t 21, B.t 23, B.t 25, B.t 26, B.t 27, B.t 28 and the commercial Bt formulations caused larval mortalities of over 94%. The other isolates caused mortalities under 33.33%. The LC50 ranged from 3 x 104 to 1.2 x 107 spores mL1. In addition, the isolates B.t 6, B.t 12, B.t 15, B.t 16 and B.t 18 caused reduction in the weight of H. zea larvae and pupae. Among the isolates, B.t 23 has the potential to be used for the control of H. zea larvae.

RESUMO Diaphania hyalinata (L., 1758) é uma das principais pragas de Cucurbitacea e ênfase tem sido dada ao controle biológico desta praga em substituição ao controle químico. A compatibilidade de agentes de controle biológico foi avaliada pelo desempenho de fêmeas de Trichogramma atopovirilia Oatman & Platner, 1983 e Trichogramma pretiosum Riley, 1879 em ovos de D. hyalinata pulverizados com os fungos entomopatogênicos Metarhizium anisopliae (Metsh.) Sorok, 1883 e Beauveria bassiana (Balls.) Vuill. Vinte ovos de D. hyalinata foram imersos em suspensão de Metarril®, Boveril® e água destilada (testemunha) e oferecidos diariamente para o parasitismo por 24h até a morte dos parasitoides. Foram avaliados o parasitismo diário, acumulado e total, número de ovos parasitados, viabilidade, razão sexual e longevidade. Os fungos entomopatogênicos M. anisopliae e B. bassiana não afetaram as características reprodutivas e de sobrevivência das duas espécies do gênero Trichogramma, sendo que T. pretiosum apresentou maior parasitismo que T. atopovirilia em ovos de D. hyalinata. Os resultados obtidos neste trabalho mostram que é possível a integração de T. atopovirilia e os fungos entomopatogênicos M. anisopliae e B. bassiana em programas de manejo integrado de pragas de cucurbitáceas.

ABSTRACT Diaphania hyalinata (L., 1758) is one of the most important pests of the Cucurbitacae, and biological control is an alternative method to replace chemicals. Compatibility between biological control agents was evaluated measuring the performance of females of Trichogramma atopovirilia and Trichogramma pretiosum in eggs of Diaphania hyalinata treated with the entomopathogenic fungi Metarhizim anisopliae and Beauveria bassiana. Twenty eggs of D. hyalinata were immersed in a suspension of Metarri®, Boveril® and distilled water (control) and offered daily for the parasitism for 24 hours until the death of the parasitoids. Evaluation was made of the daily, accumulated and total parasitism, number of parasitized eggs, viability, sex ratio and longevity. The formulations of M. anisopliae and B. bassiana did not affect the reproductive characteristics and survival of the two species of Trichogramma, and T. pretiosumshowed higher parasitism thanT. atopovirilia in eggs of D. hyalinata. The results obtained in this work showed that it is possible to integrate the use ofT. atopoviriliaand theentomopathogenic fungi M. anisopliae and B. bassiana in cucurbit IPM systems.

RESUMO O presente trabalho teve como objetivo caracterizar geneticamente 1.073 isolados de Bacillus thuringiensis, de três coleções brasileiras, provenientes da UNESP, Jaboticabal, da ESALQ/ Piracicaba e da EMBRAPA. Sete Lagoas, analisando os tipos de genes cry1 apresentados pelos isolados. Para isso, foram elaborados oligonucleotídeos iniciadores a partir de 16 regiões conservadas e 4 regiões não conservadas das seqüências de cada uma das 16 subclasses do gene cry1. Essas seqüências foram amplificadas por PCR e a presença de amplicons para cada subclasse foi calculada em porcentagem por gene e por coleção. Nessa análise, 55,7% dos isolados apresentaram amplificação para o gene cry1, e as subclassescry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1Ad, cry1Ae, cry1Af, cry1Ag, e cry1Bf, cry1Ca e cry1Fa estão presentes em alta proporção de isolados, variando de 43,4% a 54,9%. Verificou-se que existe uma distribuição das subclasses dentro do banco de isolados de B. thuringiensis em estudo, com maior porcentagem de isolados portadores dos genes cry1Ab (42,12%) e com menor porcentagem de representantes da subclasse cry1Db (0,6%). A variabilidade gênica, nas coleções analisadas, destaca as coleções de Jaboticabal e Piracicaba como fontes de isolados promissores para uso em programas de Controle Biológico de pragas da ordem Lepidoptera. A coleção de Sete Lagoas, na qual as freqüências das subclasses estudadas foram relativamente baixas (abaixo de 20%), destaca somente o gene cry1Ab, presente em 38,5% dos isolados desta coleção.

ABSTRACT The aim of this work was to genetically characterize 1,073 isolates of B. thuringiensis, from three Brazilian collections – UNESP/Jaboticabal, ESALQ/Piracicaba and EMBRAPA/Sete Lagoas– with the main emphasis on the analysis of the cry1 gene types presented by these isolates. To achieve this purpose, oligonucleotide primers were designed based on 16 conserved and 4 unconserved regions of the corresponding sequences from each one of the 16 subclasses of the cry1 set of genes and used in PCR amplification assays. These sequences were amplified and the presence of amplicons for each subclass was evaluated in terms of percentage of gene type per bacterial collection. As a result, 55.7% of the isolates reacted to the primer Gral cry1, and the subclasses cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1Ad, cry1Ae, cry1Af, cry1Ag, cry1Bf, cry1Ca and cry1Fa were detected in high percentages among the isolates ranging from 43.4 to 54.9%. A subclass distribution was observed among the set of isolates from these collections, with the greater percentage of isolates harboring the cry1Ab (42.12%) and the lowest percentage for thecry1Db subclass (0.6%). The genetic variability of the analyzed bacterial collections seems to indicate the ESALQ/Piracicaba and the UNESP/Jaboticabal subsets as sources of promising isolates for the control of Lepidoptera pest insects. For the EMBRAPA/Sete Lagoas subset of isolates, in which the evaluated subclasses frequencies were considered low (below 20%), the cry1B was the most frequently observed gene type present in 38.5% of the isolates.

ABSTRACT To verify the susceptibility of Spodoptera fugiperda, the most important pest of maize, to Bacillus thuringiensis (Bt), this study was carried out with 58 isolates belonging to W. H. O. Collaborating Centres for Entomopathogenic Bacillus of Institut Pasteur, Paris. For each isolate, 20 larvae of second instar were used, being individualized in well-contained artificial diet and where 3 x 107 cells of this entomopathogenic bacterium were applied in each well. The selected isolate was evaluated concerning its LC50, with 6 concentrations and control, in three replications, totaling 1,050 insects. The mortality, in both cases, was followed during seven days after treatment. Bt morrisoni isolate was the most pathogenic with 80% of mortality. Other 7 isolates caused mortality between 40 and 15%, 3 isolates below 15%, and all remainders were not active to this pest. In the virulence assay Bt morrisoni showed an LC50 of 8.6 x 106 cells/mL. fugiperda maize Bt, , (Bt) 5 W H O Pasteur Paris 2 used wellcontained well contained 10 LC control replications 1050 1 050 1,05 insects cases treatment 80 4 15 15% LC5 86 8 8. cellsmL mL cells/mL (Bt 105 05 1,0 0 1,

RESUMO Para verificar a suscetibilidade de Spodoptera frugiperda, a mais importante praga do milho, a Bacillus thuringiensis (Bt), foi conduzido este estudo com 58 isolados pertencentes ao Centro de Pesquisas sobre Bacillus Entomopatogênicos do Instituto Pasteur, França. Para cada isolado, foram testadas 20 lagartas de segundo ínstar, individualizadas em placas contendo dieta artificial e 3 x 107 celulas, deste entomopatógeno. Para o isolado mais patogênico foi determinada a CL50. Para tanto, foram utilizadas 6 concentrações e a testemunha, em três repetições, totalizando 1.050 insetos. A mortalidade, em ambos os casos, foi avaliada até 7 dias após a inoculação dos isolados. Bt morrisoni foi o mais patogênico com 80% de mortalidade, sendo que sete isolados causaram mortalidades entre 40 e 15% e três isolados abaixo de 15%. Os demais isolados não se mostraram ativos para este inseto praga. Nos ensaios de virulência, o isolado Bt morrisoni mostrou uma CL50 de 8,6 x 106 celulas/mL. frugiperda milho Bt, , (Bt) 5 Pasteur França 2 ínstar 10 celulas entomopatógeno CL tanto testemunha repetições 1050 1 050 1.05 insetos mortalidade casos 80 4 15 virulência CL5 86 8 8, celulasmL mL celulas/mL (Bt 105 05 1.0 0 1.