BACKGROUND Angiostrongylus cantonensis is the etiological agent of neuroangiostrongyliasis in humans, which is developed in gastropods and vertebrate species, mainly rodents. Human transmission occurs through consumption of molluscs and paratenic hosts infected with L3, and the migration of larvae to the central nervous system causes eosinophilic meningitis. Laboratory diagnosis is based on molecular and immunological tests, using young or adult females as a source of antigens. However, these tests give positive results only after several weeks of symptoms onset and also cross-reactions with others parasite infections may occur. OBJECTIVES The purpose of this work was to study different antigenic preparations of distinct evolutionary phases of A. cantonensis, in order to improve serological techniques for disease immunodiagnosis. METHODS For this purpose, antigenic fractions of different evolutionary forms were evaluated by Dot-enzyme-linked immunosorbent assay (Dot-ELISA) and Western blot using serum samples. FINDINGS All analysed fractions showed reactivity with serum samples from patients with neuroangiostrongyliasis, especially female membrane alkaline (FAM) and female soluble alkaline (FAS) fractions together with female soluble saline (FSS), improving the technique specificity. MAIN CONCLUSIONS The results point to the possibility of use of raw female antigens in association with alkaline membrane antigens extracted from adult worms to aid in diagnosis and helps initiate neuroangiostrongyliasis surveillance and control actions.

RESUMO A esquistossomose é uma doença parasitária, causada por helmintos do gênero Schistosoma e transmitida no Brasil por caramujos do gênero Biomphalaria. O município de Ouro Preto do Oeste, Rondônia, Amazônia brasileira, notificou, de forma não usual, mais de 900 casos de esquistossomose mansônica nos últimos 10 anos. O objetivo deste estudo foi investigar o potencial de transmissão da esquistossomose em Ouro Preto do Oeste. Um total de 1.196 pessoas residindo em áreas de risco para a transmissão da doença foram abordadas para responderem um questionário clínico-epidemiológico e realização de exame parasitológico de fezes. Todas as amostras foram negativas para S. mansoni. Duzentos e sessenta e oito caramujos foram coletados em Ouro Preto do Oeste, de 32 localidades diferentes. Entre estes, 44% foram classificados como pertencendo ao gênero Biomphalaria. Outra amostra de caramujos (146 exemplares), coletada nos mesmos locais, foi submetida in vitro a cepas de Schistosoma mansoni, sendo todos incapazes de transmitirem o parasito. Por fim, discute-se a importância epidemiológica desses achados e a falta de atenção ao paciente portador da parasitose em áreas indenes. O estudo não conseguiu demonstrar a ocorrência de transmissão na localidade e nem a habilidade dos planorbídeos locais transmitirem Shistosoma mansoni. Talvez o pequeno tamanho da amostra e/ou a técnica de exame de fezes (pouco sensível) possam ter contribuído para este resultado. Estudos futuros, em outras localidades e com uma amostra maior podem colocar um pouco de luz nesta questão.

ABSTRACT Schistossomiasis is a parasitic disease, caused by helminths of the genus Schistosoma and transmitted in Brazil by snails of the genus Biomphalaria. The municipality of Ouro Preto do Oeste, Rondônia, in the Brazilian Amazon Region, has unusually registered more than 900 cases of schistosomiasis in the last 10 years. The aim of this study was to investigate de potential of transmission of schsitosomiasis in Ouro Preto do Oeste. A total of 1,196 people in a risk area for the disease transmission were requested to answer a clinical-epidemiological survey and to collect feces samples for examination. All the samples that underwent examination resulted negative for S. mansoni. Two hundred and sixty-eight snails were collected in the locality of Ouro Preto do Oeste in 32 different locations. Among these, 44% were classified as belonging to the genus Biomphalaria. Another sample of snails (146 specimens), collected at the same sites, were submitted to an in vitro challenge with Schistosoma mansoni, and none of them were able to transmit the parasite. Finally, we discuss the epidemiological importance of these findings and the lack of attention to a patient with the disease in a non-endemic area. We failed to detected any association between shistossomiasis and the snails from the genus Biomphalaria, that exists in the local, as the planorbids were unable to transmit Shistosoma mansoni. Perhaps the small sample and/or the stool examination technique can have contributed to the results. Further studies, in other localities of Rondônia and with a greater sample could put some light in this question.

Os termos Anisakiasis e Pseudoterranovosis são utilizados para doença em humanos causada pela ingestão de larvas vivas de parasitas da Família Anisakidae em peixes crus, mal cozidos ou levemente marinados. As larvas foram coletadas de bacalhau salgado vendido para consumo humano num mercado de São Paulo em 2013. Uma parte da larva de cor castanha foi utilizada em análises moleculares. A sequencia parcial do gene COX2 obtida da larva mostrou 99,8% de identidade de nucleotídeos com Pseudoterranova azarasi, que faz parte do complexo de espécies Pseudoterranova decipiens. O risco de reação alérgica envolvido no consumo de larvas mortas em peixe salgado não é bem conhecido e deve ser considerado.

Anisakiasis and Pseudoterranovosis are human diseases caused by the ingestion of live Anisakidae larvae in raw, undercooked or lightly marinated fish. Larvae were collected from one salted cod sold for human consumption in a Sao Paulo market in 2013. One section of one brownish larva was used for molecular analyses. The partial COX2 gene sequence from the larva had a nucleotide identity of 99.8 % with Pseudoterranova azarasi, which belongs to the Pseudoterranova decipiens species complex. The risk of allergy when consuming dead larvae in salted fish is not well known and should be considered.

Introdução:Angiostrongylus cantonensis é um parasito natural das artérias de pulmões de ratos, que pode causar, em humanos, meningite eosinofílica. Objetivo: Relatar o primeiro caso de meningite eosinofílica causado por A. cantonensis na cidade de São Paulo, Brasil. Relato de caso: Paciente do sexo masculino, 11 anos, residente na zona sul de São Paulo, foi admitido no serviço de emergência pediátrica com história de cefaléia há três dias, sem febre ou outras queixas. Relato de presença de moluscos e roedores no peridomicílio. Ao exame físico, criança desperta acianótica, anictérica, hidratada; lúcido, orientado; força muscular preservada, isocórica, pupilas fotorreagentes e rigidez de nuca terminal - Glasgow Coma Scale = 15. Exames laboratoriais indicaram leve leucocitose com 1736 eosinófilos/mm3 e a análise do líquor revelou a presença de 160 leucócitos/mm3 com 36% de eosinófilos. Cultura para bactérias negativa. Tomografia cerebral sem alterações. Pesquisa direta de larvas e de DNA por PCR-RT para Angiostrongylus cantonensis foi negativa. ELISA para anticorpos IgG anti-A. cantonensis negativo no soro e indeterminado no líquor nas amostras coletadas após cinco dias do início dos sintomas. Soroconversão observada na amostra coletada após 135 dias. Conclusão: A história epidemiológica, dados clínicos, alterações liquóricas com presença de eosinofilia e a soroconversão sugerem fortemente o diagnóstico de meningite eosinofílica por A. cantonensis.

Introduction:Angiostrongylus cantonensis is a natural parasite found in lung arteries of rats, which in humans may cause eosinophilic meningitis. Objective: To report the first case of eosinophilic meningitis caused by Angiostrongylus cantonensis in the city of São Paulo, Brazil. Case report: A male patient, 11 years old, living in the southern area of São Paulo, was admitted to the Pediatric Emergency Department with ongoing headaches for three days, but no fever or any other complaint. The presence of snails and rodents was reported in the peridomicile. The child was awake, lucid, oriented; muscular strength preserved, isochoric, photo reagent pupils and terminal nuchal rigidity - Glasgow Coma Scale (GCS) = 15. The laboratory tests showed a mild leukocytosis with 1736 eosinophils/mm3 and the CSF analysis disclosed 160 leukocytes/mm3 with 36% of eosinophils. The bacterial culture was negative. Computed Cerebral Tomography showed no alterations. The RT-PCR assay for detecting Angiostrongylus cantonensis larvae and DNA was negative. ELISA antibodies for IgG anti-A. cantonensis was negative in serum and undetermined in CSF and samples collected five days after the onset of symptoms. Seroconversion was observed in the sample collected 135 days later. Conclusion: the epidemiological and clinical data, the CSF alterations with eosinophilia and the seroconversion strongly suggest Angiostrongylus cantonensis eosinophilic meningitis.

A esquistossomose constitui grande problema de saúde pública, sendo que estimativas apontam para 200 milhões de pessoas infectadas no mundo e 700 milhões de pessoas em áreas de risco. No Brasil, existem áreas de alta, média e baixa endemicidade. Estudos demonstram que nas áreas endêmicas de baixa prevalência da infecção, a reduzida sensibilidade dos métodos parasitológicos torna-se evidente. Isto dificulta o diagnóstico, pela presença de resultados falso-negativos. O objetivo deste estudo foi a padronização de um protocolo de reamplificação da PCR (Re-PCR) para a detecção de Schistosoma mansoni em amostras com menos de 100 ovos por grama (opg) de fezes. Foram utilizados três métodos para ruptura dos envoltórios dos ovos de S. mansoni e duas técnicas de extração de DNA foram aplicadas. O DNA extraído foi quantificado e os resultados sugerem que a técnica de extração de melhor produtividade foi a que associa esferas de vidro a uma solução de isotiocianato de guanidina/fenol/clorofórmio (GT). Aplicou-se a Re-PCR, que demonstrou sensibilidade para a detecção de cinco ovos/500 mg de fezes artificialmente marcadas. Assim, essas novas ferramentas são potencialmente aplicáveis nas infecções por S. mansoni com baixa carga parasitária.

Schistosomiasis constitutes a major public health problem, with an estimated 200 million individuals infected worldwide and 700 million people living in risk areas. In Brazil there are areas of high, medium and low endemicity. Studies have shown that in endemic areas with a low prevalence of Schistosoma infection the sensitivity of parasitological methods is clearly reduced. Consequently diagnosis is often impeded due to the presence of false-negative results. The aim of this study is to present the PCR reamplification (Re-PCR) protocol for the detection of Schistosoma mansoni in samples with low parasite load (with less than 100 eggs per gram (epg) of feces). Three methods were used for the lysis of the envelopes of the S. mansoni eggs and two techniques of DNA extraction were carried out. Extracted DNA was quantified, and the results suggested that the extraction technique, which mixed glass beads with a guanidine isothiocyanate/phenol/chloroform (GT) solution, produced good results. PCR reamplification was conducted and detection sensitivity was found to be five eggs per 500 mg of artificially marked feces. The results achieved using these methods suggest that they are potentially viable for the detection of Schistosoma infection with low parasite load.

A problematização, quando realizada na comunidade, potencializa a interação com a realidade. Um tema que pode ser destacado na prática da atenção primária é o diagnóstico precoce. O objetivo do presente trabalho é relatar uma experiência de problematização com o segundo ano de Medicina da Faculdade de Ciências Médicas de Sorocaba. Foi realizado um estudo transversal no período de agosto a setembro de 2004 nos bairros onde está implantado o Programa Saúde da Família (PSF). Utilizou-se o Self Report Questionnaire-20 (SRQ-20) como instrumento de rastreamento dos Transtornos Mentais Comuns (TMC). Também foram obtidas informações sociodemográficas e de co-morbidade. Os resultados foram apresentados à Prefeitura para a definição da intervenção. Realizadas as entrevistas com 184 indivíduos, a prevalência de TMC foi de 35,3%, havendo diferença significante na prevalência segundo idade, co-morbidade, renda per capita, bairro e escolaridade. A estratégia de intervenção proposta dividiu-se em individual e coletiva, consistindo na referência dos possíveis portadores de TMC para consulta, terapia comunitária e trabalho em promoção à saúde. O trabalho realizado se mostrou uma eficaz metodologia de ensino. Os alunos entraram em contato com uma realidade social díspar da sua, que os conduziu a reflexões úteis na sua formação humana e acadêmica.

Problematization when developed inside the community scenery enhances the interaction with reality. A subject worth being emphasized in the practice of primary care is screening. This study describes a problematization experience carried out with 2nd year students from the Sorocaba University Medical School. A cross-sectional study was conducted from August to September 2004 in neighborhoods where the Family Health Program was implemented. The SRQ-20 was employed for screening Common Mental Disorders and social, demographic and comorbidity data were collected. The results were presented to the municipal authorities in order to define intervention. One hundred and eighty four individuals were interviewed. The prevalence verified was of 35.3%, with significant differences according to age, comorbidity, per capita income, neighborhood and educational level. The intervention strategy proposed was divided into individual and collective actions, including referral of potential carriers to medical care, community therapy and health promotion. This teaching methodology proved efficient. The students' contact with a social reality different from their own motivated them to reflections, which are useful for their human and academic education.

Desde 1958, nós estudamos a doença de Chagas experimental, inoculando 1.000 formas sanguicolas de Trypanosoma cruzi, Chagas-1909, (cepa Y) por via sub-cutânea em camundongos Balb/C, que manteve uma constância na evolução da parasitemia, iniciando no quinto e sexto dia de moléstia, aumentando progressivamente, atingindo o máximo ao redor do vigésimo, diminuindo a seguir até atingir o mínimo no final do trigésimo dia e desaparecimento do sangue circulante (pelo exame direto a fresco entre lâmina e lamínula ou pela contagem na Câmara de Neubauer) depois do terceiro mês, coincidindo com o aparecimento de ninhos de amastigotas nos tecidos, principalmente do cardíaco a partir da primeira semana, acompanhando a curva parasitêmica, porém não evoluindo paralelamente até a fase crônica. Em 1997, começamos a verificar alteração no seu comportamento, pois, os parasitos surgiram no sangue circulante na primeira semana e a partir do sétimo dia desapareceram, coincidindo com a ausência de ninhos de amastigotas nos tecidos. Num estudo minucioso, verificamos que começaram a aparecer formas jovens do ciclo evolutivo do T.cruzi (epi + amastigotas) ao lado de tripomastigotas na corrente sanguínea no quinto e sétimo dia da inoculação, coincidindo com formas arredondadas, ovaladas e fusiformes circulando pelos capilares e sinusóides dos tecidos, principalmente dos órgãos hematopoiéticos. É interessante frisar, que os parasitos circulantes, devido ao seu diâmetro ser maior que o dos vasos sanguíneos, provocam estáse a montante, tornando-os mais visíveis. Examinando a medula óssea esternal, encontramos as formas jovens alongadas, outras truncadas em forma de C ocupando a superfície interna dos glóbulos , com a parte central vazia, dando a impressão de ser eritrócitos parasitados ao lado de formas circulares, ovais, alongadas e fusiformes que assumem vários aspectos, como de peixes, anfíbios (girino), répteis, aves e até de mamíferos. Estará acontecendo uma perda da virulência ou uma mutação da cepa Y do Trypanosoma cruzi?

Since 1958, we have studied experimental Chagas' disease (CD) by subcutaneous inoculation of 1,000 blood forms of Trypanosoma cruzi (Y strain) in Balb/C. mice. Evolution of parasitemia remained constant, beginning on the 5th and 6th day of the disease, increasing progressively, achieving a maximum on about the 30th day. After another month, only a few forms were present, and they disappeared from the circulation after the third month, as determined from direct examination of slides and the use of a Neubauer Counting Chamber. These events coincided with the appearance of amastigote nests in the tissues (especially the cardiac ones), starting the first week, and following the Gauss parasitemia curve, but they were not in parallel until the chronic stage. In 1997, we began to note the following changes: Parasites appeared in the circulation during the first week and disappeared starting on the 7th day, and there was a coincident absence of the amastigote nests in the tissues. A careful study verified that young forms in the evolutionary cycle of T. cruzi (epi + amastigotes) began to appear alongside the trypomastigotes in the circulation on the 5th and 7th post-inoculation day. At the same time, rounded, oval, and spindle shapes were seen circulating through the capillaries and sinusoids of the tissues, principally of the hematopoietic organs. Stasis occurs because the diameter of the circulating parasites is greater than the vessels, and this makes them more visible. Examination of the sternal bone marrow revealed young cells with elongated forms and others truncated in the shape of a "C" occupying the internal surface of the blood cells that had empty central portions (erythrocytes?). We hypothesize that there could be a loss of virulence or mutation of the Y strain of Trypanosoma cruzi.

A esquistosomose humana, causada pelo Schistosoma mansoni, é altamente prevalente no Brasil e é usualmente diagnosticada através de exames de fezes, que são demorados. Os testes sorológicos nesta doença limitam-se aos estudos epidemiológicos, mostrando apenas o contato prévio com o parasita e não a infecção realmente ativa. Neste trabalho, nós padronizamos e comparamos um novo ensaio de Dot-ELISA, para detecção de IgM e IgG específicas contra antígenos de ovo e vermes de S. mansoni, comparando seus resultados com a técnica clássica de imunofluorescência (IFI), tanto para IgG ou IgM, utilizando antígenos similares, no estudo de uma população de 27 pacientes com quantificação de ovos nas fezes. A positividade do teste de Dot-ELISA foi de 96,3% para IgG e 88,9% para IgM, com antígeno de verme, e 92,6% para IgG e 90,9% para IgM com antígeno de ovo, que foi comparado com a IFI que apresentou resultados similares com antígeno de verme, 92,6% (IgG) e 96,3% (IgM) e menores com antígeno de ovo, 77,8% (IgG e IgM). Nosso grupo de pacientes claramente apresentava dois subgrupos, quanto à excreção de ovos nas fezes, com maior positividade dos testes sorológicos para o grupo composto por pacientes com maior excreção fecal de ovos. Quando comparamos a excreção quantitativa de ovos nas fezes com os títulos sorológicos, detectamos apenas correlação entre estes valores e o Dot-ELISA IgM (r=0,552 p=0.0127). Estes dados mostram que o teste de Dot-ELISA pode ser usado para a detecção de anticorpos específicos contra o S. mansoni em soros de pacientes suspeitos, para estudos epidemiológicos de prevalência; e, com maior purificação dos antígenos de ovos e amostragem ampliada, poderá tornar-se um teste útil para uma estimativa grosseira da carga parasitária em estudos epidemiológicos.

Human schistosomiasis, caused by Schistosoma mansoni, is highly prevalent in Brazil and usually diagnosed by time consuming stool analysis. Serological tests are of limited use in this disease, mainly for epidemiological studies, showing no discrimination between previous contact with the parasite and active infections. In the present study, we standardized and compared a Dot-ELISA for IgM and IgG antibodies against S. mansoni antigens from eggs and worms with a routine IgG and IgM immunofluorescence assay using similar antigens, in the study of sera from 27 patients who had quantified egg stool excretion. The positivity obtained for IgG Dot-ELISA was 96.3% and 88.9% for IgM Dot-ELISA with worm antigen and 92.6% and 90.9% with egg antigen. The IFI presented similar positivities using worm antigen, 92.6% (IgG) and 96.3% (IgM),and lower results with egg antigen, 77.8% (IgG and IgM). The patients studied were divided into two groups according to their egg excretion, with greater positivity of serological tests in higher egg excreters. When comparing the quantitative egg excretion and the serological titers of the patients, we detected a correlation only with IgM Dot-ELISA, with r=0.552 (p=0.0127). These data show that Dot-ELISA can be used for the detection of specific antibodies against S. mansoni in sera from suspected patients or in epidemiological studies and, with further purification of egg antigen and larger samples, IgM Dot-ELISA could be a possible tool for rough estimates of parasite burden in epidemiological studies.

Em duas alíquotas de 208 amostras de fezes foram feitos exames pelo método de Kato-Katz, sendo uma após o emprego de 0,2mg de azida sódica para 200mg e em outra sem o referido conservador. Os resultados percentuais com e sem conservador foram, respectivamente, para os Ancilostomídeos 12,5 e 25,9, para Ascaris lumbricoides 71,6 e 72,5, para Schistosoma mansoni 7,6 e 17,7 e para Trichuris trichiura 86 e 85. A contagem dos ovos com e sem o conservador foi, respectivamente, 264 e 539 para os Ancilostomídeos, 13816 e 33751 para A. lumbricoides, 55,5 e 63,5 para S. mansoni e 1345 e 2068 para T. trichiura. Os autores não confirmaram a vantagem do uso de azida sódica para estudo em áreas endêmicas. Sugerem que o ressecamento das fezes e a baixa intensidade das infecções possam explicar os resultados desfavoráveis do presente ensaio clínico.

In two aliquots of 208 samples of stool, tests have been made by the Kato-Katz method, one being made after the use of 0.2mg of sodic azide for 200mg, and the other without the aforesaid conservant. The resulted percentages with or without the conservant were, respectively, for Ancylostomideos: 12.5 and 25.9; for Ascaris lumbrieoides; 71.6 and 72.5; for Schistosoma mansoni: 7.6 and 17.7, and for Trichuris trichiura: 86 and 85. The count of the eggs with and without the conservant was, respectively, 264 and 539 for Ancylostomideos, 13186 and 33751 for A. lumbricoides, 55.5 and 63.5 for S. mansoni, and 1345 and 2068 for T. trichiura. The authors did not confirm the advantage of using sodic azide for study in endemic areas. They suggest that the exsiccation of the stool and the low intensity of infections can explain the unfavourable results of the present clinical trial.

Alguns pesquisadores demonstraram que o intraconzol, "in vitro" e na infecção aguda de animais, possui atividade antiparasitária referente ao Trypanosoma cruzi. Diante dessas observações, decidimos empreender estudo sobre e etapa crônica da parasitose devida a esse protozoário, considerando que ela é mais proeminente sob o ponto de vista médico-assistencial. A propósito, efetuamos apreciações baseadas em modelo composto por camundongos infectados e, também, relacionadas com indivíduos acometidos de doença de Chagas. Usamos 100 mg/kg/dia, por meio de sonda gástrica, durante três meses, e 100 ou 200 mg/dia, pela via oral, respectivamente, no decurso de igual período, sem evidenciarmos efeitos benéficos, pelo menos conforme a metodologia adotada

Other authors have demonstrated that itraconazole has antiparasitic activity against Trypanosoma cruzi both in vitro and in animal acute infection. Because of these observations, we decided to evaluate the chronic phase of this protozoal disease, since it is the most important form under a clinical and assistential point of view. We studied an infected mouse model as well as human cases of Chagas' disease. One hundred mg/ kg/day by gastric tube, and 100 or 200 mg/day orally were given, respectively, during three months, without showing any beneficial effect, at least with the adopted methods

Em virtude da conveniência de tentar aprimorar o tratamento da toxoplasmose, de semelhanças taxonômicas e de informes contidos na literatura científica, foi considerado oportuno verificar se a artemisinina, medicamento eficiente no sentido de poder debelar a malária, é ativa na infecção experimental de camundongos pelo Toxoplasma gondii. Houve, então, administração de diferentes quantidades desse antiparasitário, inclusive após prévio contato in vitro com toxoplasmas e estimulação da produção de macrófagos, para observações diversificadas a propósito da intenção referida. Pelo menos de acordo com a metodologia usada, a artemisinina não se mostrou eficaz e sugestões para prosseguimento de avaliações acerca do assunto ficaram consignadas.

Because of taxonomic similarities to previous data found in the literature, and with the aim of improving treatment of toxoplasmosis, we considered it of interest to assay artemisinin, an effective anti-maiarial agent, for the treatment of experimental infection in mice by Toxoplasma gondii. Different amounts of the anti-parasitic agent were administered, including after previous contact in vitro with toxoplasma and stimulated macrophage production. With the methodology used artemisinin was not effective. Suggestions for further studies are made.

Em Catolé do Rocha (Estado da Paraíba, Brasil) várias pessoas foram concomitantemente acometidas de doença de Chagas, em fase aguda. A propósito desse evento, houve cogitação de que o Trypanosoma cruzi foi veiculado pela via digestiva, através de ingestão de caldo de cana acidentalmente contaminado. Com o presente estudo, verificamos que o parasita permaneceu viável, durante quatro horas, no líquido em questão mantido em temperatura ambiente. Ao mesmo tempo, comprovamos que após uma hora ele pôde promover infecção em camundongo ao ser administrado por meio de sonda gástrica, renovando o interesse já demonstrado quanto a esse mecanismo alternativo de transmissão.

In Catolé do Rocha, State of Paraíba, Brasil several people were concomitantly contaminated by Chagas' disease and had the acute form of the infection. Because of this event, the hypothesis that Trypanosoma cruzi might have been transmitted by the digestive route, through the ingestion of accidentally contaminated sugar cane juice, was made. In the present study, we verified that the parasite has remained viable for four hours in the liquid, at room temperature. We have also demonstrated that, after one hour, it was capable of promoting infection in one mouse, by gastric tube administration. These observations enhance the interest on this alternative mechanism of disease transmission.