Realizou-se o isolamento e cultivo de protolastos de porta-enxertos de citros das variedades limoeiro Cravo e tangerina Cleópatra. Utilizou-se solução enzimática para a digestão da parede celular de células em suspensão (7 a 10 subcultivos em meio de cultura MT) e procedeu-se a purificação criteriosa. O plaqueamento dos protoplastos foi realizado em meio de cultivo KM8p e na molaridade de 0.6 M, sob condições de escuro a 28 ± 1°C, após ajuste para a densidade de 2 x 10s ppts/mL A redução da pressão osmótica do meio de cultivo foi realizada a cada 10 dias na seguinte proporção de meio de cultura KM8p 0.6 M e KM8 (2:1, 1:1, 1:2, 0:3). Com relação aos resultados, obteve-se em média o isolamento de 0.7 x 10(6) ppts / ml de suspensões celulares de tangerina Cleópatra e 0.5 x 1O6 ppts / ml de suspensões de limoeiro Cravo, com uma porcentagem de viabilidade de 86 a 92% para a variedade Cleópatra e de 73 a 80% para o limoeiro Cravo. As divisões celulares começaram a ocorrer por volta do 8° dia após o plaqueamento, sendo obtida uma eficiência inicial de plaqueamento de 9% para a variedade Cleópatra e de 5% para o limoeiro Cravo. Aos 50 dias de cultivo, as colônias foram transferidas para meio semi-sólido MT, onde apresentaram ritmo acelerado de crescimento formando calos.

Protoplast isolation and growth of Citrus rootstock v. Cravo lime and Cleópatra mandarin were carried out Enzyme mixture was used to digest cell suspensions 7-10 times, following criterious purification. Protoplast culture was carried out in doplets of semi-solid (agarose 0.6% p/v) KM8p medium, in the dark, at 28 ± 1°C following density adjustment to 2 x 10(5) ppts/ml. Osmotic pressure reduction was acomplished for each growth every 10 days with a mixture in equal volumes of KM8p and KM8 medium in ratios of 2:1; 1:1; 1:2 e 0:3. Isolation produced 0.7 x 10(6) ppts/ml for Cleópatra mandarin and 0.5 x 10(6) ppts/ml for Cravo lime, with a viability between 86 to 92% and 73 to 80%, respectively. First cell divisions were recorded at the 8th. day of growth, with an inicial platting efficiency of 9% for Cleópatra mandarin and 5% for Cravo lime. Callus development was achived in 50 days upon transfer of microcalus to semi-solid MT medium.

A hibridação somática via fusão de protoplastos vem sendo utilizada no melhoramento de porta-enxertos de citros em diversos países. Nos Estados Unidos, vários estudos demonstram a eficiência de procedimentos no isolamento e cultivo de protoplastos dessa frutífera. O presente trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar o efeito do meio de cultivo de calos embriogênicos do porta-enxerto tangerina Cleópatra (Citrus reshni Hort.) sobre o isolamento de protoplastos, bem como sugerir alterações de procedimento. Os resultados mostram a possibilidade do isolamento de 1.4 x 10(6) a 4.7 x 10(6) protoplastos por grama de calos da espécie estudada. Verificou-se que, o subcultivo dos calos de tangerina Cleópatra em meio de cultura, sem reguladores 1 hora, sob condições de escuro a 120 rpm, proporcionou maior eficiência de isolamento de protoplastos (4.7 x 10(6) protoplastos/g de calo).

Somatic hybridization has been used for citrus rootstock breeding in many countries. In USA, many reports had proved the efficiency of procedures for the isolation and culture of citrus protoplasts. This research was conducted to evaluate the efficiency of procedures of protoplast isolation using embryogenic callus of the Cleópatra mandarin rootstock. Alterations were proposed to increase protoplast isolation and culture method. Results show the possibility of a protoplast yield of 1.4 to 4.7 x 10(6) pps/g.f.w. for Cleópatra tangerine rootstock callus. Protoplast yield can be raised to 4.7 x 10(6) pps/g.f.w. if the embryogenic callus are grown in a medium supplemented only with 4% sucrose and pre-treated with 1% w/v macerozyme for 1 hour, at 120 rpm, in dark, is applied before protoplast isolation.

A utilização de bandejas de isopor na produção de mudas de hortaliças e frutíferas vem aumentando em nosso pais, devido às vantagens que esse método apresenta: economia de substrato e de área de viveiro, menor custo no controle de pragas e doenças, produção de mudas de alta qualidade e alto índice de pegamento após o transplante. No caso do maracujazeiro (Passiflora edulis var. flavicarpa), o transplante de mudas é uma prática bastante utilizada para sua propagação. A ocorrência de traumatismos na raiz durante esta fase é significativa, influindo negativamente no desenvolvimento posterior das mudas. O presente trabalho objetivou avaliar a produção de mudas de maracujá em bandejas de isopor, comparando a eficiência de quatro substratos diferentes e dois tipos de bandejas na germinação e desenvolvimento das mudas. Conclui-se que o método de produção de mudas de maracujazeiro em bandejas é eficiente, resultando em mudas de alta qualidade, com elevada porcentagem de pegamento. Verificou-se também que na bandeja de 72 células e nos substratos Plantmax e substrato III (areia: vermiculita: estéreo; 1:1:1, suplementado com 10 Kg/m³ de superfosfato simples, 6 Kg/m³ de cloreto de potássio, 2 Kg/m³ de uréia e 8 Kg/m³ de calcário houve maior porcentagem de germinação e adequado desenvolvimento das mudas.

This paper describes the use of two types of styrofoam trays and four different substrates. The efficiency of different substrates and tray types in passionflora (Passiflora edulis var.flavicarpa) seed germination and seedling growth were analysed. The results indicated that both tray types tested are adequate for passionflora germination and seedling growth. Nevertheless the 72 cell tray type had a statistically better performance than the 128 ceU tray type. Substrate III (sand; vermiculite; dung; 1:1:1, supplemented with 10 Kg/m³ simple superphosphate, 6 Kg/m³ potassium chloride, 2 Kg/m³ urea and 8 Kg/m³ Ume) and substrate Plantmax were used in the cells. Both substrates had a superior performance in relation to substrates number I and II.