Resumo Cyrtopodium paludicolum é uma espécie de orquídea terrícola e nativa do Brasil cuja propagação natural está comprometida por coletas indiscriminadas em seu ambiente natural e sofre riscos de ameaça pela expansão agrícola em áreas de Cerrado. Assim, o presente trabalho teve como objetivo estudar a germinação e o desenvolvimento inicial in vitro de C. paludicolum bem como verificar a possibilidade de micropropagar a espécie a partir de segmentos caulinares estiolados. Um protocolo para a aclimatização também foi desenvolvido. Foi testada a influência dos meios de cultura Murashige & Skoog (MS), Knudson (KC) e Vacin & Went (VW) no processo de germinação e crescimento inicial. Foram testados os efeitos da adição de diferentes concentrações de BA, ANA e de sacarose na multiplicação e crescimento in vitro da espécie. A aclimatização foi realizada em duas fases utilizando-se três diferentes substratos. O meio VW proporcionou a maior germinabilidade das sementes enquanto o meio KC foi o que promoveu a melhor formação de plântulas saudáveis e vigorosas. A concentração de 2% de sacarose foi a mais favorável para o crescimento e desenvolvimento das plântulas. A melhor proliferação e desenvolvimento de brotos e raízes foi obtido na presença de 2.28/2.28 e 0.57/0.57 µM BA/NAA, respectivamente. O uso de segmentos estiolados foi eficaz para a micropropagação. A aclimatização foi realizada com sucesso crescendo inicialmente as plantas em potes comunitários contendo os substratos Bioplant e esfagno seco na proporção de 3:1 (v/v) seguido da transferência para recipientes individuais contendo Bioplant e Ouro negro na proporção de 2:1 (v/v).

Abstract Cyrtopodium paludicolum is a terrestrial orchid species, native to Brazil, whose natural propagation is jeopardized by the intensive collection from the wild and is threatened by agricultural expansion in Cerrado areas. In light of that, this investigation aimed at studying the in vitro germination and early development of C. paludicolum as influenced by culture medium, sucrose and growth regulators as well as its micropropagation by using dark-grown stem segments. A protocol for its acclimatization is also detailed. The effects of Murashige & Skoog (MS), Knudson C (KC) and Vacin & Went (VW) media on the in vitro germination and initial development were tested. The influence of different concentrations of BA, NAA, and of sucrose on plant multiplication and growth were evaluated. The possibility of using etiolated stem segments for micropropagation was also assessed. Acclimatization was accomplished in two phases by using three different substrates. The results showed that VW was the best medium for germination whereas for seedling formation KC was the most advantageous since they were healthy and vigorous. Sucrose at 2% favored the greatest seedling growth and development. Shoot and root proliferation and development were best promoted in the presence of 2.28/2.28 and 0.57/0.57 µM BA/NAA, respectively. The use of etiolated stem segments for micropropagation was effective. Successful acclimatization was accomplished by initially growing plants in community pots containing a 3:1 (v/v) mix of Bioplant and dried Sphagnum moss followed by their transfer to individual pots containing a 2:1 (v/v) mix of Bioplant and Ouro Negro substrates.